CN115960167A - 一种玉米抗粘附肽及其制备方法和应用 - Google Patents
一种玉米抗粘附肽及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115960167A CN115960167A CN202210989907.XA CN202210989907A CN115960167A CN 115960167 A CN115960167 A CN 115960167A CN 202210989907 A CN202210989907 A CN 202210989907A CN 115960167 A CN115960167 A CN 115960167A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- corn
- adhesion
- adhesion peptide
- peptide
- helicobacter pylori
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 title claims abstract description 93
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 title claims abstract description 93
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 title claims abstract description 88
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 title claims abstract description 88
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 76
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 claims abstract description 49
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 claims abstract description 48
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 37
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 33
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 33
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 13
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 10
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 16
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 claims description 13
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 claims description 13
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 claims description 9
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 claims description 9
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims description 9
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 claims description 9
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 9
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 claims description 8
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 claims description 8
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 claims description 8
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 claims description 6
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 claims description 4
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 claims description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 claims description 3
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 28
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 8
- 206010019375 Helicobacter infections Diseases 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 8
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 8
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 7
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 6
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 6
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 4
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- -1 pH7.5 Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000002305 strong-anion-exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 241001473949 Helicobacter pylori NCTC 11637 = CCUG 17874 = ATCC 43504 Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108010064983 Ovomucin Proteins 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 208000008469 Peptic Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 240000001717 Vaccinium macrocarpon Species 0.000 description 1
- 235000012545 Vaccinium macrocarpon Nutrition 0.000 description 1
- 235000002118 Vaccinium oxycoccus Nutrition 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000000181 anti-adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003911 antiadherent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002626 clarithromycin Drugs 0.000 description 1
- AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N clarithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@](C)([C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)OC)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AGOYDEPGAOXOCK-KCBOHYOISA-N 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000004634 cranberry Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000011587 gastric lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 230000001589 lymphoproliferative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 208000011906 peptic ulcer disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229940126409 proton pump inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000000612 proton pump inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
- Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明属于活性肽制备技术领域，具体涉及一种玉米抗粘附肽及其制备方法和应用。本发明提供了一种玉米抗粘附肽，所述玉米抗粘附肽的氨基酸序列包括TIFPQ、LGQCVEF和TIIPQ中的任意一种或多种。本发明所述玉米抗粘附肽从玉米蛋白粉中分离得到，为一种新的玉米抗粘附肽，其具有抑制幽门螺旋杆菌粘附的作用，可以用于制备具备抑制幽门螺旋杆菌功能的药品或食品，为幽门螺旋杆菌感染的防治提供技术支持。
Description
技术领域
本发明属于活性肽制备技术领域，具体涉及一种玉米抗粘附肽及其制备方法和应用。
背景技术
幽门螺杆菌是一种革兰氏阴性杆菌，螺旋形、微需氧、对生长条件要求十分苛刻，1983年首次从慢性活动性胃炎的胃粘膜活检组织中分离成功，是所知能够在猕猴、大鼠等动物胃中生存的微生物种类。幽门螺杆菌感染引起的疾病有胃炎、消化道溃疡、淋巴增生性胃淋巴瘤等，严重者可能会导致胃癌。
目前，幽门螺旋杆菌感染的治疗方案包括两大类，1.是以抗生素为主，辅加抑酸剂(铋剂)的方案：2.是以质子泵抑制剂为主的方案，常用抗生素为青霉素、庆大霉素、克拉霉素和阿莫西林等。但随着幽门螺旋杆菌对抗生素的耐药性逐年上升，其根除率也在下降，并且服用抗生素具有很多副作用，如肠道不适、过敏等。因此，开发抗生素的替代疗法对于防治幽门螺旋杆菌感染和治疗具有重要的意义。
近年来，已经报道了一些能够抑制幽门螺旋杆菌粘附的天然来源的食源性组分被相继报道，如卵黏蛋白肽、小麦胚芽蛋白肽、蔓越莓中的黄酮类物质和多糖等，但总体种类较少。因此研发天然、安全、价格低廉且更高效的具有抑制幽门螺旋杆菌粘附作用的食源性组分具有重要意义。
玉米蛋白粉(corn gluten meal，CGM)是玉米湿法生产淀粉中产量最大、蛋白质含量最高的副产物(约占60％)，但是因其溶解性差和疏水性强的特性限制了其在食品行业中的应用，导致大多玉米蛋白粉均直接作为饲料使用，造成了其粮食资源的极大浪费。因此，倘若能够对玉米蛋白进行改性，开发具有抑制幽门螺旋杆菌粘附活性的功能食品，提高其附加值，对玉米蛋白的精深加工具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种玉米抗粘附肽及其制备方法和应用，所述玉米抗粘附肽为一种新的活性肽，具备抑制幽门螺旋杆菌粘附的作用。
本发明提供了一种玉米抗粘附肽，所述玉米抗粘附肽的氨基酸序列包括TIFPQ、LGQCVEF和TIIPQ中的任意一种或多种。
优选的，所述玉米抗粘附肽的氨基酸序列为TIFPQ、LGQCVEF和TIIPQ中的任意一种或多种。
本发明提供了上述技术方案所述的玉米抗粘附肽的制备方法，包括如下步骤：
以中性蛋白酶酶解玉米蛋白粉，得到酶解液，所述酶解液中包括所述玉米抗粘附肽。
优选的，所述酶解前，将玉米蛋白粉制备成悬浊液，所述悬浊液中玉米蛋白粉的质量浓度为15％(w/v)。
优选的，所述中性蛋白酶的用量为400U/g蛋白；所述酶解的温度为45℃，时间为150min，pH为7.0。
优选的，所述酶解后，还包括对所述酶解液进行分离纯化，收集分子量小于1000Da的组分，得到所述玉米抗粘附肽。
优选的，所述分离纯化包括凝胶色谱分离和离子交换色谱分离。
优选的，用于所述凝胶色谱分离的色谱预装柱为Superdex Peptide 10/300GL；所述离子交换色谱分离包括两步离子交换色谱分离，第一步离子交换色谱分离使用的离子交换剂为Q-Sepharose High Performance，第二步离子交换色谱分离使用的离子交换剂为Mone Q。
本发明还提供了所述的玉米抗粘附肽或所述的制备方法得到的一种玉米抗粘附肽在制备具备抑制幽门螺旋杆菌粘附功能的产品中应用。
本发明还提供了一种具备抑制幽门螺旋杆菌粘附功能的产品，所述产品中包括上述技术方案所述的玉米抗粘附肽或所述的制备方法得到的玉米抗粘附肽。
有益效果：
本发明提供了一种玉米抗粘附肽，所述玉米抗粘附肽的氨基酸序列包括TIFPQ、LGQCVEF和TIIPQ中的任意一种或多种。本发明所述玉米抗粘附肽从玉米蛋白粉中分离得到，为一种新的玉米抗粘附肽，其具有抑制幽门螺旋杆菌粘附的作用，可以用于制备具备抑制幽门螺旋杆菌粘附功能的药品或食品，为幽门螺旋杆菌感染的防治提供技术支持。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为实施例1中玉米抗粘附肽制备的技术路线图；
图2为玉米抗粘附肽(TIFPQ)的质谱检测图；
图3为玉米抗粘附肽(LGQCVEF)的质谱检测图；
图4为玉米抗粘附肽(TIIPQ)的质谱检测图；
图5为菌落浓度与OD600的标准曲线；
图6为FITC荧光强度值和OD600的标准曲线。
具体实施方式
本发明提供了一种玉米抗粘附肽，所述玉米抗粘附肽的氨基酸序列包括TIFPQ、LGQCVEF和TIIPQ中的任意一种或多种。
本发明所述玉米抗粘附肽的氨基酸序列优选为TIFPQ(SEQ ID NO.1)、LGQCVEF(SEQ ID NO.2)和TIIPQ(SEQ ID NO.3)中的任意一种或多种，更优选为TIFPQ、LGQCVEF或TIIPQ。本发明所述玉米抗粘附肽从玉米蛋白粉中分离得到，具有抑制幽门螺旋杆菌粘附的作用。
本发明还提供了上述技术方案所述的玉米抗粘附肽的制备方法，包括如下步骤：
以中性蛋白酶酶解玉米蛋白粉，得到酶解液，所述酶解液中包括所述玉米抗粘附肽。
本发明在所述酶解前，优选还包括将玉米蛋白粉与水混合，得到悬浊液。本发明所述悬浊液中玉米蛋白粉的质量浓度优选为15％(w/v)。本发明所述玉米蛋白粉优选为经挤压膨化并去除淀粉的玉米蛋白粉，所述玉米蛋白粉可以充分的去掉与蛋白质紧密结合的淀粉物质，有利于蛋白质的酶解。本发明对所述玉米蛋白粉的来源没有特殊限定，从本领域中常规购买的经挤压膨化后去淀粉的玉米蛋白粉均可。
得到所述悬浊液后，本发明优选以中性蛋白酶酶解所述悬浊液，得到酶解混合物。本发明所述中性蛋白酶的用量优选为400U/g蛋白，所述蛋白优选以玉米蛋白粉中蛋白含量计。本发明所述酶解的温度优选为45℃；所述酶解的时间优选为150min；所述酶解的pH优选为7.0。
得到所述酶解混合物后，本发明优选还包括对所述酶解混合物进行灭酶反应，所述灭酶反应的温度优选为100℃，时间优选为10min。完成所述灭酶反应后，本发明优选还包括对所述灭酶反应后的混合物进行离心，取上清液，即为酶解液。本发明所述离心的转速优选为4000r/min，时间优选为10min。本发明所述酶解液中包括所述玉米抗粘附肽。
得到所述酶解液后，本发明优选对所述酶解液进行分离纯化，收集分子量小于1000Da的组分，得到所述玉米抗粘附肽。
本发明优选采用凝胶色谱对所述酶解液进行分离，收集抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对更强且分子量小于1000Da的组分。本发明所述所述凝胶色谱分离的预装柱为Superdex Peptide 10/300GL。本发明所述凝胶色谱分离的条件优选包括：上样浓度为50mg/mL，上样量为1mL；洗脱液为pH 7.0的含0.15mol/LNaCl的20mM PBS缓冲液；洗脱液的流速为0.25mL/min；检测波长为214nm。本发明优选还包括测定收集得到的各组分的抑制幽门螺旋杆菌粘附活性，得到抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对更强且分子量小于1000Da的组分。本发明优选采用实施例1中所述的方法测定所述抑制幽门螺旋杆菌粘附活性，下同，不再赘述。本发明所述抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对更强且分子量小于1000Da的组分中的蛋白浓度优选为4mg/mL。
得到所述抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对更强且分子量小于1000Da的组分后，本发明优选对所述抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对更强且分子量小于1000Da的组分进行第一步交换色谱分离，得到组分A。本发明在进行第一步离子交换色谱分离时，使用的离子交换剂优选为Q-Sepharose High Performance。本发明进行所述第一步离子交换色谱分离的条件优选包括：上样量为50mL；洗脱液A优选为Tris-HCl缓冲液，所述Tris-HCl缓冲液的浓度优选为20mM，pH值优选为7.5；洗脱液B为pH 7.5的含1mol/LNaCl的20mM Tris-HCl缓冲液；洗脱液的流速为2mL/min，检测波长为214nm，梯洗体积60mL，峰组分收集的体积为6mL/管。本发明优选还包括测定收集得到的峰组分的抑制幽门螺旋杆菌粘附活性，得到抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对更强的组分，即为组分A。本发明所述组分A中的蛋白浓度优选为2mg/mL。
得到所述组分A后，本发明优选对所述组分A进行第二步离子交换色谱分离，得到组分B。本发明所述第二步离子交换色谱分离使用的离子交换剂优选为Mone Q。本发明进行所述第二步离子交换色谱分离的条件优选包括：上样量为10mL；洗脱液A优选为Tris-HCl缓冲液，所述Tris-HCl缓冲液的浓度优选为20mM，pH值优选为7.0；洗脱液B优选为pH 7.0含1mol/LNaCl的20mM Tris-HCl缓冲液；洗脱液的流速优选为1mL/min，检测波长优选为214nm，梯洗体积优选为20mL，峰组分收集的体积优选为1mL/管。本发明优选还包括测定收集得到的峰组分的抑制幽门螺旋杆菌粘附活性，得到抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对更强的组分，即为组分B。
得到所述组分B后，本发明优选对所述组分B进行质谱测序，得到所述玉米活性肽。本发明所述玉米活性肽的氨基酸序列包括TIFPQ、LGQCVEF和TIIPQ。本发明优选采用LC-MS/MS进行所述质谱测序。本发明对所述质谱测序的过程和步骤没有特殊限定，采用本领域中常规质谱测序步骤即可。进行所述质谱测序前，本发明还包括对所述第二组分进行脱盐冻干。本发明对所述脱盐冻干的过程、步骤以及脱盐后的状态均没有特殊限定，采用本领域中常规脱盐冻干的过程和步骤即可。
本发明还提供了所述的玉米抗粘附肽或所述的制备方法得到的玉米抗粘附肽在制备具备抑制幽门螺旋杆菌粘附功能的产品中应用。本发明所述产品优选包括食品和药品。本发明对所述食品和药品的类型没有特殊限定，本领域中常规类型的食品和药品均可。
本发明还提供了一种具备抑制幽门螺旋杆菌粘附功能的产品，所述产品中包括上述技术方案所述的玉米抗粘附肽或所述的制备方法得到的玉米抗粘附肽。本发明所述玉米抗粘附肽优选为所述产品中的活性成分。本发明对所述产品中所述玉米抗粘附肽的用量没有特殊限定，根据制备的产品常规添加即可。本发明所述产品优选包括药品和/或食品。本发明所述产品优选还包括辅料和/或其他活性成分。当所述产品中还包括其他活性成分时，本发明对所述其他活性成分的类型、功效和用量均没有特殊限定，依据制备的产品合理添加即可。
为了进一步说明本发明，下面结合附图和实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
在下述实施例中所使用的方法，如无特殊说明，采用的均为本领域中的常规试验方法；所使用的生物材料和试验材料，如无特殊说明，均可通过本领域中常规购买渠道获得。
实施例1
一种玉米抗粘附肽，由以下步骤组成(技术路线图见图1)：
1、玉米蛋白酶解液的制备
取一定量经挤压膨化并去除淀粉的玉米蛋白粉(购自齐齐哈尔龙江阜丰生物科技有限公司)，加水配制成底物浓度为15％(w/v)的悬浊液，然后用中性蛋白酶进行酶解，酶解条件为：加酶量400U/g蛋白，酶解温度45℃，酶解时间150min，酶解pH 7.0，酶解结束后100℃加热灭酶10min，酶解物在4000r/min离心10min并弃去沉淀，所得上清液为玉米蛋白酶解液，通过测定其抑制幽门螺旋杆菌粘附活性，确认其为具有高抑制幽门螺旋杆菌粘附活性多肽混合物。抑制幽门螺旋杆菌粘附活性测定的方法均参照步骤5中进行，下同，不再赘述。
2、玉米蛋白酶解液的凝胶色谱分离
所使用的凝胶色谱柱为Superdex Peptide 10/300GL预装柱，将步骤1中具有高抑制幽门螺旋杆菌粘附活性的多肽混合物采用凝胶色谱分离得到不同分子量组分的多肽混合物，上样浓度50mg/mL，上样量1mL，洗脱液为pH 7.0含0.15mol/LNaCl的20mM PBS缓冲溶液，流速为0.25mL/min，检测波长为214nm；测定各分子量组分的抑制幽门螺旋杆菌粘附活性，收集小于1000Da组分且抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对较高的组分用于离子交换色谱分离。
3、离子交换色谱分离
3.1Q-Sepharose High Performance强阴离子交换色谱分离
将凝胶色谱所得分子量小于1000Da且抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对较高的组分过0.22μm的微孔滤膜，所得样品蛋白浓度为4mg/mL，使用强阴离子交换剂为Q-SepharoseHigh Performance分离。上样量为50mL，所述强阴离子交换色谱的洗脱液A：pH 7.5的20mM的Tris-HCl缓冲液，洗脱液B：pH7.5含1mol/L NaCl的的20mMTris-HCl缓冲液，流速为2mL/min，检测波长214nm，梯洗体积为60mL，峰组分每管收集6mL；测定各管收集液的抑制幽门螺旋杆菌粘附活性，收集抑制幽门螺旋杆菌粘附活性相对较高的组分(第6管)用于Mono Q离子交换色谱分离。
3.2Mono Q离子交换色谱
步骤3.1中分离得到的高活性组分使用Mono Q离子交换色谱进一步分离。将上一步离子交换色谱所得高活性组分过0.22μm的微孔滤膜，所得样品蛋白浓度为2mg/mL，上样量10mL，所述Mono Q离子交换色谱的洗脱液A：pH 7.0的20mM的Tris-HCl缓冲液，洗脱液B：pH 7.0含1mol/L NaCl的的20mM Tris-HCl缓冲液，流速为1mL/min，检测波长214nm，梯洗体积为20mL，峰组分每管收集1mL；测定各管收集液的抑制幽门螺旋杆菌粘附活性，收集抑制幽门螺旋杆菌粘附活性较高的组分(第10管)备用。
4、LC-MS/MS质谱测序
将步骤3.2中得到的组分脱盐冻干后进行质谱测序得到氨基酸序列分别为TIFPQ、LGQCVEF和TIIPQ的玉米抗粘附肽，结果如图2～4所示。
5、玉米抗粘附肽抑制幽门螺旋杆菌粘附活性的测定
将步骤4中得到的玉米抗粘附肽化学合成后(委托上海强耀生物科技有限公司合成)，测定其抑制幽门螺旋杆菌粘附活性。
5.1玉米抗粘附肽抑制幽门螺旋杆菌粘附活性的测定：
1)利用H.pylori ATCC43504菌株作为抗粘附活性试验测定菌株。在37℃条件下将经过冻存的H.pylori ATCC43504菌株解冻，先与液体培养基(3g大豆蛋白胨、2.5g K2HPO4、17g胰蛋白胨和5g NaCl，加入1L去离子水，混合摇匀溶解后调节pH值至7.2，121℃、0.1Mpa灭菌1h)混合，随后将其接种于斜面培养基(15g胰蛋白胨、5g大豆蛋白胨、15g琼脂、5g NaCl和950mL去离子水，搅拌溶解调节pH值至7.2，121℃、0.1Mpa灭菌1h，在培养基冷却至45℃左右，加入50mL无菌的脱纤维羊血，混匀后，倒入试管制作斜面培养基)上，在37℃微需氧(5％O2，85％N2，10％CO2)条件下，培养48～72h，得到的菌液可进行菌种传代和抗粘附活性检测。
将传代的H.pylori ATCC43504的菌液，进行四次10倍梯度稀释获得五种不同浓度的菌液，在600nm条件下测定幽门螺旋杆菌菌液的OD值，同时通过平板涂布法计算菌落浓度，建立菌落浓度与OD600的标准曲线，如图5所示。
2)冻存人胃粘膜上皮细胞(GES-1)解冻后移入细胞培养瓶中，细胞培养基组成为1％青链霉素混合液、10％胎牛血清和89％DMEM培养基。在37℃，5％CO2条件下孵育至单层细胞形成，胰蛋白酶-EDTA消化传代，离心，用不含抗生素的细胞培养基重悬，调整细胞浓度为3×105cells/mL。将细胞悬液接种到96孔板中，每孔100μL，在37℃，5％CO2培养箱中培养孵育24h，用于抑制H.pylori粘附活性的测定实验。
3)异硫氰酸荧光素(FITC)标记幽门螺旋杆菌
制备FITC浓度为2mg/mL的DMSO溶液，无菌滤膜过滤处理。按照1：1的体积比将步骤1)中制备得到的传代的H.pylori ATCC43504的菌液与其混匀，在避免光照的条件下，生化摇摆台上混合30min后，在4500r/min的转速下离心处理3min，除去上清液，经过1×PBS缓冲液洗涤3次，除去多余的FITC，最后将菌液在液体培养基(3g大豆蛋白胨、2.5g K2HPO4、17g胰蛋白胨和5g NaCl，加入1L去离子水，混合摇匀溶解后调节pH值至7.2，121℃、0.1Mpa灭菌1h)上稀释至OD600值在0.1左右(108cfu/mL)，备用。
4)FITC荧光强度值与OD600标准曲线的构建
将上步中经过FITC标记处理的幽门螺旋杆菌菌液，按照四次10倍梯度稀释，在激发波长485nm和发射波长530nm条件下，测量其荧光强度值，与此同时在600nm条件下测OD值，建立FITC荧光强度值和OD600的标准曲线，如图6所示。
5)玉抗粘附肽抑制幽门螺旋杆菌粘附活性试验
将实施例1中制备得到的玉米抗粘附肽TIFPQ使用100％DMEM培养基，配制一定蛋白浓度的玉米抗粘附肽溶液，按照1：1(v/v)的比例与步骤3)中经过FITC标记过的菌液在室温避光条件下进行混合30min，使实施例1所得玉米抗粘附肽的终浓度为4mg/mL，得到混合后的菌液。
向有胃粘膜上皮细胞(GES-1)的96孔板中分别加入100μL混合后的菌液，以加入100μL100％DMEM培养基为阴性对照组，在培养箱中放置90min。然后将溶液去除，用PBS缓冲液清洗3次，随即，将PBS缓冲液按照每孔100μL量加入，在发射波长530nm、激发波长485nm条件下进行荧光强度值的测定，根据实施例1中5.1的步骤3)和4)，计算出阴性对照组和试验组的菌落浓度，采用以下公式计算粘附抑制率：
结果为：当玉米抗粘附肽(TIFPQ)的浓度为4mg/mL时，其抑制幽门螺旋杆菌粘附活性为20.32％。
采用相同的方法测定玉米抗粘附肽LGQCVEF和TIIPQ抑制幽门螺旋杆菌粘附活性，结果为：当玉米抗粘附肽(LGQCVEF)的浓度为4mg/mL时，其抑制幽门螺旋杆菌粘附活性为26.06％；当玉米抗粘附肽(TIIPQ)的浓度为4mg/mL时，其抑制幽门螺旋杆菌粘附活性为23.56％。
由以上实施例可以得出，本发明提供的玉米抗粘附肽具备抑制幽门螺旋杆菌粘附的作用。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。
Claims (10)
1.一种玉米抗粘附肽，其特征在于，所述玉米抗粘附肽的氨基酸序列包括TIFPQ、LGQCVEF和TIIPQ中的任意一种或多种。
2.如权利要求1所述的玉米抗粘附肽，其特征在于，所述玉米抗粘附肽的氨基酸序列为TIFPQ、LGQCVEF和TIIPQ中的任意一种或多种。
3.权利要求1或2所述的玉米抗粘附肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
以中性蛋白酶酶解玉米蛋白粉，得到酶解液，所述酶解液中包括所述玉米抗粘附肽。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述酶解前，将玉米蛋白粉制备成悬浊液，所述悬浊液中玉米蛋白粉的质量浓度为15％w/v。
5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述中性蛋白酶的用量为400U/g蛋白；所述酶解的温度为45℃，时间为150min，pH为7.0。
6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述酶解后，还包括对所述酶解液进行分离纯化，收集分子量小于1000Da的组分，得到所述玉米抗粘附肽。
7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述分离纯化包括凝胶色谱分离和离子交换色谱分离。
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，用于所述凝胶色谱分离的色谱预装柱为Superdex Peptide 10/300GL；所述离子交换色谱分离包括两步离子交换色谱分离，第一步离子交换色谱分离使用的离子交换剂为Q-Sepharose High Performance，第二步离子交换色谱分离使用的离子交换剂为Mone Q。
9.权利要求1或2所述的玉米抗粘附肽或权利要求3～8任一项所述的制备方法得到的玉米抗粘附肽在制备抑制幽门螺旋杆菌粘附的产品中应用。
10.一种具备抑制幽门螺旋杆菌粘附功能的产品，其特征在于，所述产品中包括权利要求1或2所述的玉米抗粘附肽或权利要求3～8任一项所述的制备方法得到的玉米抗粘附肽。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210989907.XA CN115960167B (zh) | 2022-08-18 | 2022-08-18 | 一种玉米抗粘附肽及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210989907.XA CN115960167B (zh) | 2022-08-18 | 2022-08-18 | 一种玉米抗粘附肽及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115960167A true CN115960167A (zh) | 2023-04-14 |
| CN115960167B CN115960167B (zh) | 2023-11-07 |
Family
ID=87359050
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210989907.XA Active CN115960167B (zh) | 2022-08-18 | 2022-08-18 | 一种玉米抗粘附肽及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115960167B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115521963A (zh) * | 2022-10-28 | 2022-12-27 | 华南理工大学 | 一种谷氨酰胺肽及其制备方法与应用 |
| CN117587090A (zh) * | 2024-01-19 | 2024-02-23 | 齐齐哈尔大学 | 一种玉米蛋白水解物及其制备方法与应用 |
| CN117603308A (zh) * | 2024-01-19 | 2024-02-27 | 齐齐哈尔大学 | 一种抗幽门螺旋杆菌粘附的玉米肽及其制备方法与应用 |
Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001014413A2 (en) * | 1999-08-25 | 2001-03-01 | Imperial Cancer Research Technology Limited | Polypeptides capable of interacting with the smad peptide and comprising the sequence pp (t/n)k |
| CA2474620A1 (en) * | 2002-01-28 | 2003-08-07 | Nisshin Pharma Inc. | Helicobacter pylori adhesion inhibitor |
| CN1800206A (zh) * | 2005-12-30 | 2006-07-12 | 深圳职业技术学院 | 玉米蛋白粉多肽与分离方法及其应用 |
| US20080096246A1 (en) * | 2006-10-19 | 2008-04-24 | Linda Jane Decarolis | Zein-based peptide tags for the expression and purification of bioactive peptides |
| CN103261426A (zh) * | 2010-12-23 | 2013-08-21 | 菲利普莫里斯生产公司 | 用于在植物中表达脱氧核糖核酸酶的方法 |
| CN103270161A (zh) * | 2010-12-23 | 2013-08-28 | 菲利普莫里斯生产公司 | 用于在植物中产生载脂蛋白的方法 |
| US20150118709A1 (en) * | 2013-10-31 | 2015-04-30 | China National Research Institute Of Food And Fermentation Industries | Corn active peptide additive for cell culture medium |
| CN104593318A (zh) * | 2013-10-31 | 2015-05-06 | 中国食品发酵工业研究院 | 一种用于细胞培养基的玉米活性肽添加剂 |
| CN105237622A (zh) * | 2015-09-09 | 2016-01-13 | 齐齐哈尔大学 | 玉米抗氧化活性肽及其制备方法 |
| CN109971811A (zh) * | 2019-05-05 | 2019-07-05 | 新疆正生营养研究院（有限公司） | 一种酶解法制备玉米活性肽的方法及制备的玉米活性肽 |
| AU2021100067A4 (en) * | 2020-12-22 | 2021-03-25 | Zhongshiduqing (Shandong) Biotech Co., Ltd. | Active peptide capable of inhibiting helicobacter pylori (h. pylori), and preparation method and use thereof |
| CN113943768A (zh) * | 2021-09-27 | 2022-01-18 | 齐齐哈尔易翔食品有限公司 | 一种玉米抗氧化肽的分离纯化方法 |
| CN114478742A (zh) * | 2022-03-10 | 2022-05-13 | 安徽科技学院 | 一种抗幽门螺杆菌活性多肽及其应用 |
-
2022
- 2022-08-18 CN CN202210989907.XA patent/CN115960167B/zh active Active
Patent Citations (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001014413A2 (en) * | 1999-08-25 | 2001-03-01 | Imperial Cancer Research Technology Limited | Polypeptides capable of interacting with the smad peptide and comprising the sequence pp (t/n)k |
| CA2474620A1 (en) * | 2002-01-28 | 2003-08-07 | Nisshin Pharma Inc. | Helicobacter pylori adhesion inhibitor |
| CN1638787A (zh) * | 2002-01-28 | 2005-07-13 | 日清药业股份有限公司 | 幽门螺旋杆菌粘附抑制剂 |
| CN1800206A (zh) * | 2005-12-30 | 2006-07-12 | 深圳职业技术学院 | 玉米蛋白粉多肽与分离方法及其应用 |
| US20080096246A1 (en) * | 2006-10-19 | 2008-04-24 | Linda Jane Decarolis | Zein-based peptide tags for the expression and purification of bioactive peptides |
| CN103261426A (zh) * | 2010-12-23 | 2013-08-21 | 菲利普莫里斯生产公司 | 用于在植物中表达脱氧核糖核酸酶的方法 |
| CN103270161A (zh) * | 2010-12-23 | 2013-08-28 | 菲利普莫里斯生产公司 | 用于在植物中产生载脂蛋白的方法 |
| US20150118709A1 (en) * | 2013-10-31 | 2015-04-30 | China National Research Institute Of Food And Fermentation Industries | Corn active peptide additive for cell culture medium |
| CN104593318A (zh) * | 2013-10-31 | 2015-05-06 | 中国食品发酵工业研究院 | 一种用于细胞培养基的玉米活性肽添加剂 |
| CN105237622A (zh) * | 2015-09-09 | 2016-01-13 | 齐齐哈尔大学 | 玉米抗氧化活性肽及其制备方法 |
| CN108456243A (zh) * | 2015-09-09 | 2018-08-28 | 齐齐哈尔大学 | 玉米抗氧化活性肽及其制备方法 |
| CN109971811A (zh) * | 2019-05-05 | 2019-07-05 | 新疆正生营养研究院（有限公司） | 一种酶解法制备玉米活性肽的方法及制备的玉米活性肽 |
| AU2021100067A4 (en) * | 2020-12-22 | 2021-03-25 | Zhongshiduqing (Shandong) Biotech Co., Ltd. | Active peptide capable of inhibiting helicobacter pylori (h. pylori), and preparation method and use thereof |
| CN113943768A (zh) * | 2021-09-27 | 2022-01-18 | 齐齐哈尔易翔食品有限公司 | 一种玉米抗氧化肽的分离纯化方法 |
| CN114478742A (zh) * | 2022-03-10 | 2022-05-13 | 安徽科技学院 | 一种抗幽门螺杆菌活性多肽及其应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| "中性蛋白酶酶解玉米粉工艺研究", 《食品科技》, vol. 46, no. 07, pages 180 - 184 * |
| CHI WANG ET AL.: "High performance liquid chromatography (HPLC) fingerprints and primary structure identification of corn peptides by HPLC-diode array detection and HPLC-electrospray ionization tandem mass spectrometry", 《J O U R N A L OF FOOD AND DRUG A N A L Y S I S》, vol. 24, pages 95 - 104 * |
| QIUFANG LIANG ET AL.: "Identification of New Anti-inflammatory Peptides from Zein Hydrolysate after Simulated Gastrointestinal Digestion and Transport in Caco-2 Cells", 《JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY》, vol. 66, pages 1114 - 1120 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115521963A (zh) * | 2022-10-28 | 2022-12-27 | 华南理工大学 | 一种谷氨酰胺肽及其制备方法与应用 |
| CN117587090A (zh) * | 2024-01-19 | 2024-02-23 | 齐齐哈尔大学 | 一种玉米蛋白水解物及其制备方法与应用 |
| CN117603308A (zh) * | 2024-01-19 | 2024-02-27 | 齐齐哈尔大学 | 一种抗幽门螺旋杆菌粘附的玉米肽及其制备方法与应用 |
| CN117587090B (zh) * | 2024-01-19 | 2024-03-29 | 齐齐哈尔大学 | 一种玉米蛋白水解物及其制备方法与应用 |
| CN117603308B (zh) * | 2024-01-19 | 2024-04-12 | 齐齐哈尔大学 | 一种抗幽门螺旋杆菌粘附的玉米肽及其制备方法与应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115960167B (zh) | 2023-11-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN115960167A (zh) | 一种玉米抗粘附肽及其制备方法和应用 | |
| JP5221656B2 (ja) | グルカンとマンナンを調製する方法、それによって得られたグルカン調製物とマンナン調製物、およびその用途 | |
| CN116023433B (zh) | 一种玉米活性肽及其制备方法和应用 | |
| AU666531B2 (en) | Processes for the preparation of amylase inhibitor | |
| CN107602688B (zh) | 牛乳αs2-酪蛋白来源生物活性肽的制备和应用 | |
| CN111961617B (zh) | 一株高产免疫多糖和细菌素的多效枯草芽孢杆菌及应用 | |
| CN116063378A (zh) | 具有拮抗幽门螺旋杆菌粘附活性和抗氧化活性的双功能玉米肽及其制备方法和应用 | |
| CN116041425A (zh) | 双功能玉米蛋白源活性肽及其制备方法和应用 | |
| CN110628859A (zh) | 一种糖基化牡蛎肽及其制备方法 | |
| CN116041426B (zh) | 玉米蛋白源抗粘附肽及其制备方法和应用 | |
| CN111269290A (zh) | 一种鲟鱼抗炎肽的制备方法 | |
| JP2010241945A (ja) | リポ多糖、イネ発酵エキス及びイネ発酵エキス配合物 | |
| EP1024147B1 (en) | Process for preparing (1-3)-beta-d-glucan from fungi | |
| US20220248737A1 (en) | Oyster peptide with effect of improving sexual function and preparation method thereof | |
| JPH068322B2 (ja) | ペクチンの製造法 | |
| CN113861303B (zh) | 一种从德氏乳杆菌和嗜热链球菌发酵酸奶中分离出的胞外多糖及其应用 | |
| CN115477708B (zh) | 一种抑菌酵母活性多糖及制备方法、鉴定方法和应用 | |
| CN117603308B (zh) | 一种抗幽门螺旋杆菌粘附的玉米肽及其制备方法与应用 | |
| CN114438044B (zh) | 一种高效降解麸质蛋白的多酶复合体及其应用 | |
| CN117903248A (zh) | 一种双功能玉米肽及其应用 | |
| CN118108798A (zh) | 一种米糠蛋白肽及其筛选方法与应用 | |
| RU2412997C2 (ru) | Способ получения ферментативного комплексного препарата, обладающего коллагеназной активностью | |
| JP3711474B2 (ja) | 小麦グルテン由来アミラーゼインヒビターの製造方法 | |
| JP3108767B1 (ja) | ｃｈｉｂ２型キチナーゼの製造法 | |
| JPH08133985A (ja) | 乳蛋白質カゼインの加水分解物からなる免疫賦活剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |