CN115851553B - 一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 - Google Patents
一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115851553B CN115851553B CN202211727260.XA CN202211727260A CN115851553B CN 115851553 B CN115851553 B CN 115851553B CN 202211727260 A CN202211727260 A CN 202211727260A CN 115851553 B CN115851553 B CN 115851553B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- streptomyces
- xds3
- clubroot
- streptomyces virginiae
- virginiae
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000187122 Streptomyces virginiae Species 0.000 title claims abstract description 34
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 36
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims abstract description 9
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 6
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 6
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 claims description 5
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 claims description 5
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 5
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 18
- 235000010149 Brassica rapa subsp chinensis Nutrition 0.000 abstract description 13
- 235000000536 Brassica rapa subsp pekinensis Nutrition 0.000 abstract description 13
- 241000499436 Brassica rapa subsp. pekinensis Species 0.000 abstract description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 11
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 abstract description 9
- 230000035784 germination Effects 0.000 abstract description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 abstract description 5
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 abstract description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 241001503464 Plasmodiophora Species 0.000 abstract description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 abstract description 4
- 244000000005 bacterial plant pathogen Species 0.000 abstract description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 8
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 6
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 3
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 3
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 3
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 3
- 241000224016 Plasmodium Species 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 3
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 2
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 2
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 2
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 230000004763 spore germination Effects 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186046 Actinomyces Species 0.000 description 1
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 1
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- 241000219193 Brassicaceae Species 0.000 description 1
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 1
- 108010084185 Cellulases Proteins 0.000 description 1
- 102000005575 Cellulases Human genes 0.000 description 1
- 102000012286 Chitinases Human genes 0.000 description 1
- 108010022172 Chitinases Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- 241000223221 Fusarium oxysporum Species 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 1
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 1
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 1
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 244000066511 Solanum xanthocarpum Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 1
- 230000000443 biocontrol Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LTINZAODLRIQIX-FBXRGJNPSA-N cefpodoxime proxetil Chemical compound N([C@H]1[C@@H]2N(C1=O)C(=C(CS2)COC)C(=O)OC(C)OC(=O)OC(C)C)C(=O)C(=N/OC)\C1=CSC(N)=N1 LTINZAODLRIQIX-FBXRGJNPSA-N 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000004382 potting Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000004383 yellowing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌XDS3‑6,于2022年10月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.25980,还涉及所述弗吉尼亚链霉菌XDS3‑6在根肿病中的应用。本发明的弗吉尼亚链霉菌XDS3‑6,在平板上对多种植物病原菌有很强的抑制作用,其发酵液代谢产物对根肿病有很好的防控效果。根肿菌休眠孢子的萌发抑制率为46.18%,白菜根部根毛侵染抑制率为12.25%,经XDS3‑6发酵液处理的白菜盆栽防治效果为53.53%,提前7d处理时,白菜盆栽防治效果为64.80%。此外,该菌株与自然生态具有天然的和谐相融性,与化学农药相比对土壤生态无毒副作用、无残留。因此,在病害的生物防治实践中具有潜在的商业开发和应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及作物病害防治领域,更特别地,涉及一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌及其应用。
背景技术
根肿病是一种土传病害,主要侵染十字花科中的一些经济作物,比如油菜、萝卜、榨菜和白菜等。根肿病在世界上的五十多个国家和地区均有着广泛分布,包括非洲、南美洲、北美洲、欧洲、亚洲和大洋洲,世界各地每年因根肿病造成的作物产量损失高达10-15%,因此根肿病被当做重要的十字花科作物病害之一。据统计,危害较轻的年份根肿病在我国发生的面积可达4800-6000万亩,而在爆发年份,危害面积更是高达1.35亿亩。
根肿病在植株的根部发生并产生危害,在植株整个生育期内都可受到根肿菌侵染,但是苗期是最主要的感病时期。地下根部受到根肿菌侵染之后,引起植物体内激素变化,加速植物细胞分裂,主根和侧根膨大形成肿瘤。肿根形成初期根部表面光滑,后期根部腐烂,颜色变成深褐色,且散发着臭气,肿瘤膨大,根毛减少甚至没有,导致植物对水分和养分的吸收、传导被抑制,因此地上部位会呈现缺水萎蔫叶片变黄等症状,严重时会整颗植株枯死。
目前对根肿病的防治仍然以化学药剂为主,其操作较为简便快捷并且成本较低、见效较快,但化学杀菌剂的使用容易导致病原菌产生抗药性、对环境产生污染和残留毒性等严重后果,最终出现防治效果不好、危害生态安全和人类健康等问题。
随着科学研究的进一步深入开展,发现在克服植物病害的抗药性、减少化学杀菌剂对环境的污染、生态的破坏及农副产品中化学农药的残留方面,生防微生物具有独特的优势,利用生防菌的次生代谢产物制备的生物农药,具有无污染、无残留、不易使有害生物产生抗药性、与环境相容性高、对人畜安全等特点;且利用微生物产生的代谢产物处理植物病原菌,达到生物防治病害的研究是目前的热点。放线菌产生的次生代谢产物的生防潜力主要体现在对病原菌菌丝生长、孢子萌发和对侵染的抑制作用,越来越多源于各种植物内生或不同极端环境的放线菌被发现,放线菌产生的代谢物质的种类也会变得越来越丰富。因此,大力开展生物防治研究是农业可持续发展的重要途径,具有重要的生产实际意义。
发明内容
为解决以上问题,本发明提供了一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌,于2022年10月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCCNo.25980。
本发明还提供了上述弗吉尼亚链霉菌在防治根肿病中的应用。
本发明还提供了一种防治根肿病的方法,包括将上述的弗吉尼亚链霉菌培养产物施用于作物种植的土中的步骤。
在一个具体实施方案中,所述方法包括以下步骤:
S1:培养所述弗吉尼亚链霉菌,制备弗吉尼亚链霉菌发酵液;
S2:将所述弗吉尼亚链霉菌发酵液施用于所述作物种植的土中。
在一个具体实施方案中,S1中,所述弗吉尼亚链霉菌在高氏一号培养基中培养。
在一个具体实施方案中,S1包括以下步骤:
S11:将所述弗吉尼亚链霉菌接种于高氏一号液体培养基中培养;
S12:于28℃、180rpm的条件下培养7天,得到所述弗吉尼亚链霉菌发酵液。
在一个具体实施方案中,S2中,将所述弗吉尼亚链霉菌发酵液对所述作物进行定期灌根处理。
在一个具体实施方案中,每两次灌根处理之间的时间间隔为7天。
本发明的弗吉尼亚链霉菌XDS3-6菌株,在平板上对多种植物病原菌有很强的抑制作用,其发酵液代谢产物对根肿病有很好的防控效果。根肿菌休眠孢子的萌发抑制率为46.18%,水培育苗试验表明,经XDS3-6发酵液处理9d后,白菜根部根毛侵染抑制率为12.25%,活体接种试验表明,根肿菌与放线菌发酵液同时接种50d后,经XDS3-6发酵液处理的白菜盆栽防治效果为53.53%,提前7d处理时,白菜盆栽防治效果为64.80%。此外,该菌株是从土壤分离获得,与自然生态具有天然的和谐相融性,与化学农药相比对土壤生态无毒副作用、无残留。因此,在病害的生物防治实践中具有潜在的商业开发和应用价值。
生物材料保藏
本发明纯化的弗吉尼亚链霉菌XDS3-6于2022年10月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.25980。
附图说明
图1为弗吉尼亚链霉菌XDS3-6的平板形态照片;
图2为弗吉尼亚链霉菌XDS3-6的单菌落形态照片;
图3为弗吉尼亚链霉菌XDS3-6的孢子链及气生菌丝显微照片;
图4示出了弗吉尼亚链霉菌XDS3-6发酵液代谢产物中的成分;
图5示出了弗吉尼亚链霉菌XDS3-6产生多种水解酶鉴定;
图6示出了弗吉尼亚链霉菌XDS3-6对棉花枯萎病菌病原菌的抑制作用;
图7示出了弗吉尼亚链霉菌XDS3-6根肿病的控病作用。
具体实施方式
以下结合附图对本发明的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。
1、弗吉尼亚链霉菌XDS3-6的鉴定与保藏
本团队从重庆市北碚、沙坪坝、巴南、南岸4个地区,采集的主要是草坪、竹林、行道树等非农田生态系统的根际土壤,分离获得的多个菌株经初筛和复筛,分离出一株菌株XDS3-6,经过活体植株室内盆栽接种测试确定该菌株对根肿病有较好防治作用。
将菌株XDS3-6在高氏一号培养平板上于28℃下培养5-7d,得到平板形态照片如图1所示,单菌落照片如图2所示。
提前灭过菌的玻片30℃斜插入平板中,在28℃培养箱中倒置培养7d后,取出盖玻片,滴入少许蒸馏水放在载玻片上,使用光学显微镜观察菌株的气生菌丝、孢子链的形态特征的形态,如图3所示。
提取菌株的基因组DNA,以细菌通用引物27F(5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’,SEQI D NO:1,)和1492R(5’-TACGGCTACC TTGACGAC-3’,SEQ ID NO:2)。以菌株XDS3-6的基因组DNA为模板,PCR扩增后经电泳检测,测序,得到16S rDNA序列如SEQ I D NO:3所示。将所得的序列结果在NCBI中进行Bl ast比对,选取相关菌株的16S rDNA序列,使用MEGA 7.0软件的邻近法(Neighbor-Joi n i ng)进行进化树构建,结合形态学特征鉴定该菌株属于弗吉尼亚链霉菌(Streptomyces virginiae)。
将上述菌株于2022年10月28日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏号:CGMCC No.25980。
2.XDS3-6菌株发酵液制备及代谢产物分析
将拮抗放线菌XDS3-6打取菌饼置于无菌的高氏合成一号液体培养基中,在28℃、180rpm条件下振荡发酵培养7d。取发酵液7500rpm,离心10mi n,弃沉淀取上清液。置于-80℃冷冻,再置于冷冻干燥机冻干12h。
所得冻干样本送于美吉生物公司进行LC-MS非靶向代谢组学检测,称取一定量样本,进行代谢物萃取,再离心取代谢产物溶剂上清液进行液相质谱检测,用代谢组学软件进行数据处理。确定菌株XDS3-6的发酵液物质成分。
结果如表1和2及图4所示,菌株XDS3-6的发酵液中正离子模式下检测到67种代谢物质成分,负离子模式下检测到47种代谢物质成分,其中氨基酸、多肽及内酯类占比最高,为21.05%,其次是碳水化合物和碳水化合物结合物、其他、脂肪酸及其衍生物,分别占比14.47%、14.47%、5.26%。
表1正离子模式下菌株XDS3-6发酵液产生的代谢物质成分分析
表2负离子模式下菌株XDS3-6发酵液产生的代谢物质成分分析
3.弗吉尼亚链霉菌XDS3-6防治病原菌
2.1弗吉尼亚链霉菌XDS3-6对病原菌的抑菌性
将拮抗放线菌点接于ABP培养基(葡聚糖酶筛选培养基)、蛋白酶筛选培养基、CMC-Na培养基(纤维素酶筛选培养基)、几丁质酶筛选培养基。将平板倒置于28℃培养箱培养,7d后观察菌株的生长情况并记录透明圈半径。经检测,弗吉尼亚链霉菌XDS3-6可产生多种水解酶,包括蛋白酶、葡聚糖和纤维素酶(图5)。推测其对一些病原菌具有较好的抑菌效果。
进一步地,采用平板对峙划线法测定拮抗菌对病原真菌(棉花枯萎病菌)菌丝生长的影响。在平板中央接种病原真菌8mm菌饼,距菌饼25mm两侧处接种拮抗放线菌,画两条30mm的直线,放线菌比病原真菌提前3d接种,对照组在平板中心接种病原真菌,不接种放线菌,每个处理3个重复,28℃恒温培养箱中培养。待对照组病原真菌长满平板时观察处理组是否产生抑菌带,测量病原真菌菌落直径并计算抑菌率。确定XDS3-6菌株对病原真菌的抑制效果。结果如图6所示,XDS3-6菌株对具有显著的抑菌效果。
2.2弗吉尼亚链霉菌XDS3-6对根肿病的防治
以白菜的根系分泌物作为培养基,在灭菌的三角瓶中加入5mL根系分泌物、0.5mL根肿菌休眠孢子悬液和0.5mL菌株XDS3-6的发酵液,放在黑暗、24℃条件下培养,以灭菌的液体培养基作为对照,每个处理3组重复。第5d显微镜观察休眠孢子萌发情况,用1%地衣红(溶于45%醋酸中)染色10-15s,计算孢子萌发率及萌发抑制率。结果显示,根肿菌休眠孢子的萌发抑制率为46.18%。
将白菜种子放在垫有湿润滤纸的培养皿里,置于24℃光照湿润条件下催芽,3d后幼苗移植到装有Hoagl and营养液的10mL离心管中水培,5d后接种根肿菌休眠孢子以及XDS3-6菌株发酵液,根肿菌休眠孢子终浓度为107个/mL,处理组以1:30的比例加入发酵液,对照组加Hoag l and营养液。水培9d后取幼苗根部用清水冲洗,放在荧光桃红染液中染色30mi n,放在显微镜下移动观察幼苗根毛侵染情况。结果显示,经XDS3-6发酵液处理9d后,白菜根部根毛侵染抑制率为12.25%。
采用灌根法接种白菜。从冰箱中拿出肿根放于25℃、黑暗环境下腐烂5d,以1:5的比例混合肿根和水,榨汁机间歇性搅拌过滤,制备并调整根肿菌休眠孢子悬浮液浓度为2.5×108个/mL。将拮抗菌菌饼接种到高氏一号液体培养基中,28℃、180r·mi n-1条件下培养7d,得到浓度为107CFU/mL的放线菌发酵液。每株白菜用30mL根肿菌休眠孢子悬浮液灌根处理,使每克土壤最终含菌量为3×107个。处理A:拮抗菌与根肿菌同时接种,每隔7d浇灌放线菌发酵液20mL,共浇灌五次,处理B:拮抗菌提前7d接种,每隔7d浇灌放线菌发酵液20mL,共浇灌五次。以接种根肿菌休眠孢子悬浮液并浇灌高氏一号液体培养基为发病对照,每个处理重复20株白菜,在接种50d后调查发病,统计记录。结果显示,根肿菌与XDS3-6发酵液同时接种50d后,经XDS3-6发酵液处理的白菜盆栽防治效果为53.53%,XDS3-6发酵液提前7d处理时,白菜盆栽防治效果为64.80%(图7)。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌(Streptomyces virginiae),其特征在于,2022年10月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCCNo.25980。
2.权利要求1所述的弗吉尼亚链霉菌在防治根肿病中的应用。
3.一种防治根肿病的方法,其特征在于,包括将权利要求1所述的弗吉尼亚链霉菌发酵液施用于作物种植的土中的步骤。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:培养所述弗吉尼亚链霉菌,制备弗吉尼亚链霉菌发酵液;
S2:将所述弗吉尼亚链霉菌发酵液施用于所述作物种植的土中。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,S1中,所述弗吉尼亚链霉菌在高氏一号培养基中培养。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,S1包括以下步骤:
S11:将所述弗吉尼亚链霉菌接种于高氏一号液体培养基中培养;
S12:于28℃、180rpm的条件下培养7天,得到所述弗吉尼亚链霉菌发酵液。
7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,S2中,将所述弗吉尼亚链霉菌发酵液对所述作物进行定期灌根处理。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,每两次灌根处理之间的时间间隔为7天。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211727260.XA CN115851553B (zh) | 2022-12-30 | 2022-12-30 | 一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211727260.XA CN115851553B (zh) | 2022-12-30 | 2022-12-30 | 一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN115851553A CN115851553A (zh) | 2023-03-28 |
CN115851553B true CN115851553B (zh) | 2024-04-26 |
Family
ID=85656455
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202211727260.XA Active CN115851553B (zh) | 2022-12-30 | 2022-12-30 | 一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN115851553B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN116694505A (zh) * | 2023-04-13 | 2023-09-05 | 西南大学 | 一种可防治根肿病的绛红褐链霉菌及其应用 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1860194A1 (en) * | 2006-05-22 | 2007-11-28 | KRKA, tovarna zdravil, d.d., Novo mesto | Fermentative production of lipstatin |
JP2009142255A (ja) * | 2007-03-19 | 2009-07-02 | Sumitomo Chemical Co Ltd | ピルビン酸の製造方法 |
CN104862243A (zh) * | 2015-03-26 | 2015-08-26 | 湖南农业大学 | 一种对黄瓜疫霉菌有抑制作用的放线菌及其筛选方法 |
KR101638859B1 (ko) * | 2016-03-10 | 2016-07-13 | 고려대학교 산학협력단 | 스트렙토마이세스 버지나에 균주(kacc 92113p) 및 이를 포함하는 조성물 |
CN105820974A (zh) * | 2016-03-30 | 2016-08-03 | 原巍俊 | 一种生防放线菌的发酵方法及应用 |
WO2020023808A1 (en) * | 2018-07-25 | 2020-01-30 | Regents Of The University Of Minnesota | Platform for developing soil-borne plant pathogen inhibiting microbial consortia |
CN112725228A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-30 | 西南大学 | 一种可防治桃褐腐病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 |
CN112760248A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-05-07 | 西南大学 | 一种可防治桃褐腐病的林肯链霉菌及其应用 |
-
2022
- 2022-12-30 CN CN202211727260.XA patent/CN115851553B/zh active Active
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1860194A1 (en) * | 2006-05-22 | 2007-11-28 | KRKA, tovarna zdravil, d.d., Novo mesto | Fermentative production of lipstatin |
JP2009142255A (ja) * | 2007-03-19 | 2009-07-02 | Sumitomo Chemical Co Ltd | ピルビン酸の製造方法 |
CN104862243A (zh) * | 2015-03-26 | 2015-08-26 | 湖南农业大学 | 一种对黄瓜疫霉菌有抑制作用的放线菌及其筛选方法 |
KR101638859B1 (ko) * | 2016-03-10 | 2016-07-13 | 고려대학교 산학협력단 | 스트렙토마이세스 버지나에 균주(kacc 92113p) 및 이를 포함하는 조성물 |
CN105820974A (zh) * | 2016-03-30 | 2016-08-03 | 原巍俊 | 一种生防放线菌的发酵方法及应用 |
WO2020023808A1 (en) * | 2018-07-25 | 2020-01-30 | Regents Of The University Of Minnesota | Platform for developing soil-borne plant pathogen inhibiting microbial consortia |
CN113194728A (zh) * | 2018-07-25 | 2021-07-30 | 明尼苏达大学董事会 | 用于开发土传植物病原体抑制微生物菌群的平台 |
CN112725228A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-30 | 西南大学 | 一种可防治桃褐腐病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 |
CN112760248A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-05-07 | 西南大学 | 一种可防治桃褐腐病的林肯链霉菌及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
番茄青枯病防治研究进展;王杰等;中国蔬菜;20200121;全文 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN115851553A (zh) | 2023-03-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107083349B (zh) | 一株防病促生的白黑链霉菌及其代谢产物的制备与应用 | |
CN104726383A (zh) | 解淀粉芽孢杆菌jk6及生物肥和应用 | |
CN104560827B (zh) | 一种防治烟草青枯病的生防放线菌菌株及其应用 | |
CN111073825B (zh) | 具有抗植物土传病害作用的细菌及其用途 | |
CN105062920A (zh) | 一种多产色链霉菌菌株及其应用 | |
CN110964654A (zh) | 一种拮抗枯萎病的芽孢杆菌及其应用 | |
CN115851553B (zh) | 一种可防治根肿病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 | |
CN110982725A (zh) | 一种拮抗枯萎病和促生长的芽孢杆菌及其应用 | |
CN109628341B (zh) | 深红紫链霉菌及其生物防治菌剂和制备方法 | |
CN108913621B (zh) | 一株有效防治樱花根癌病的甲基营养型芽孢杆菌yh-18及其应用 | |
CN110317747A (zh) | 一种解淀粉芽孢杆菌jt68及其在防治茶炭疽病的应用 | |
CN116694505A (zh) | 一种可防治根肿病的绛红褐链霉菌及其应用 | |
CN112094770B (zh) | 一株高地芽孢杆菌及其活性物质复配液与菌剂在防治根结线虫病中的应用 | |
CN109852564A (zh) | 解淀粉芽孢杆菌327及其应用 | |
CN103382447A (zh) | 一种绿蓝链霉菌Sv-29及其应用 | |
CN110791459B (zh) | 一株用于防控连作百合土传枯萎病的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
CN111778174A (zh) | 一种对柑橘砂皮病有抑制作用的枯草芽孢杆菌及其筛选方法 | |
CN114456973B (zh) | 一株烟草内生娄彻链霉菌及在烟草病害防控中的应用 | |
CN111378595A (zh) | 一种伯克氏农业生防菌株Ba1及其用途 | |
CN109456900B (zh) | 一种复合生物制剂及其用途 | |
CN109055265A (zh) | 一种生防菌及其在农作物蔓枯病防治方面的应用 | |
CN109355232A (zh) | 一种白蚁菌is7及其在植物促生中的应用 | |
CN116144538B (zh) | 一种可防治根肿病的黄暗色链霉菌及其应用 | |
CN110066755B (zh) | 一株牛蒡内生链霉菌、含有该内生菌的微生物菌剂及应用 | |
CN110205262A (zh) | 类球红细菌a2菌株、生防菌剂及其制备方法和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |