CN109355232A - 一种白蚁菌is7及其在植物促生中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明具体提供一种白蚁菌（Isoptericola sp.）IS7 CGMCC No.15759。通过从新疆阿克苏地区核桃园根际土壤中筛选、分离出一株编号为IS7的白蚁菌（Isoptericola sp.），将白蚁菌IS7通过现在常见的菌种鉴定手段获悉是一株新菌种，分离出的菌种具有拮抗、解磷、分泌吲哚乙酸、产ACC脱氨酶、耐盐等能力，并通过制备的IS7菌剂应用到作物促进生长和抗病害中，具有显著和稳定的技术效果，对于微生物菌种应用技术领域具有广泛的应用价值。

Description

一种白蚁菌IS7及其在植物促生中的应用
技术领域
本发明涉及微生物菌种及其应用的技术领域，具体的涉及一种新的白蚁菌及其在促进植物生长中应用的技术领域。
背景技术
植物病害的发生严重威胁着土壤生态环境和植株的健康生长。化肥和农药可以缓解植物的病害问题、提高作物产量和抗病性，但大量化肥、农药的使用也不可避免地对环境、农业生产和食品安全带来不同程度的污染和破坏，这也促使全世界的科学工作者积极探索应用生物防治技术来代替或部分代替化肥和农药的可能性。
生物防治技术是利用各种有益生物和生物产生的活性物质及分泌物，对农作物病害进行有效防治的技术与方法，它能确保生态平衡，同时也加快了植物健康的发展速度，具有高效、无污染、无害、无毒等基本特征。这既符合人们对绿色食品的需求，还可保障农业可持续发展速度。
微生物防治是生物防治的重要方法之一。在此背景下，以植物促生菌为代表的一类绿色、高效、和谐的微生物防控措施日渐为人们所重视。一方面，植物促生菌可合成某些对作物生长发育有直接作用的生长素类物质等或改变土壤中某些无效元素的形态，使之有效化而利于作物吸收、固氮和解磷等。另一方面，某些植物促生菌可抑制或减轻某些植物病害对作物生长发育和产量的不良影响。因此，植物促生菌对抑制土传病害的发生，改善和维护土壤生态质量具有重要作用以及广阔的发展前景。利用植物促生菌开发抗病型的生物肥料和生物农药，能够有效抑制病原菌侵染，缓解植物抵御逆境胁迫的影响，从而间接起到促生增产的效果。
虽然我国促生微生物具有较为丰富的资源，但在微生物防治产业中，多年来使用的菌种均为芽孢杆菌、假单胞菌等，存在着菌种单一、应用效果不稳定等问题，制约着微生物防治行业的健康发展。亟需筛选新的、活性高、功能稳定的菌种，以促进微生物行业的蓬勃发展。因此筛选并开发适宜于新疆地理气候条件并对植物有良好促生、防病功能，且效果好、周期短、环境兼容性好等的微生物新菌种，在作物健康生长和农业可持续发展方面具有广阔的产业化前景。
白蚁菌属隶属于放线菌，是Stackebrandt等2004年才提议成立的一个新属，关于白蚁菌具有拮抗和促生能力的研究较少，也没有提供一种能够促进植物生长的白蚁菌菌株，因此需要进一步探究白蚁菌的特性，提供能够用于促进植物生长的方法，对于微生物利用开发技术领域具有现实意义。
发明内容
针对现未见通过新疆阿克苏地区核桃园根际土壤中分离筛选获得新的白蚁菌的现状，本发明提供一种新菌种白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7CGMCC No.15759及其应用。本发明通过在新疆阿克苏地区核桃园根际土壤中分离筛选出一株白蚁菌(Isoptericolasp.)IS7CGMCC No.15759，利用分离出的菌种具有拮抗、解磷、分泌吲哚乙酸、产ACC脱氨酶等能力，应用到作物促进生长和抗病害中，具有显著和稳定的技术效果，对于微生物菌种应用技术领域具有广泛的应用价值。
本发明采用的主要技术方案：
本发明具体提供一种白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7 CGMCC No.15759。通过从新疆阿克苏地区核桃园根际土壤中筛选、分离出一株编号为IS7的白蚁菌(Isoptericolasp.)，将白蚁菌IS7通过现在常见的菌种鉴定手段获悉是一株新菌种，分离出的菌种具有拮抗、解磷、分泌吲哚乙酸、产ACC脱氨酶等能力，并通过制备的IS7菌剂应用到作物促进生长和抗病害中，具有显著和稳定的技术效果，体现了筛选该菌种具有鲜明的应用价值导向。
具体的，本发明根据南疆地理环境的特殊性，通过对新疆阿克苏地区核桃园根际土壤进行微生物菌种的培养、分离，筛选一批优良菌种，并从中分离筛选出一株编号为IS7的白蚁菌(Isoptericola sp.)，经微生物学分类与鉴定属于白蚁菌属，该菌株最适生长条件为：10-45℃，最适温度生长是28℃；pH生长范围5.0-10，最佳pH值为7.0；可耐受1-10％的NaCl，培养基为2％NaCl TSA培养基。参照《伯杰氏系统细菌学鉴定手册》(第九版)等常见的菌种鉴定手册对编号为IS7菌株进行形态学、生理生化试验，确定IS7菌株为白蚁菌属中成员，但是具有与常见的白蚁菌属成员菌种不同的特点，具有一些新菌种的特性。
进一步，本发明通过对上述编号为IS7菌种进行基因测序，序列参见附后提供的SEQ ID NO:1所示，所得序列经常见网站进行比对分析，并构建系统发育树，经比对分析发现，菌株IS7的16S rDNA序列与标准模式菌Isoptericola halotolerans YIM 70177T和Isoptericola dokdonensis DS-3T同源性为98.7％和98.4％，具有新菌种的鲜明技术特征，菌株IS7与Isoptericola halotolerans YIM 70177T和Isoptericola dokdonensisDS-3T的亲缘关系最近，利用本领域常见采用的MEGA 5.0软件通过Neighbor-Joining方法建立系统进化树，结果经比对分析发现，菌株IS7与Isoptericola halotolerans YIM70177T和Isoptericola dokdonensis DS-3T的可信度分别为86％和93％，标明该菌种作为新菌种的支持率较高，在进化树中体现极好的稳定性，经过系列菌种分子水平鉴定可知该菌株IS7确定为白蚁菌(Isoptericola sp.)新种，具有新菌种典型性的特点，从分类学角度暂命名为白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7
具体的，该菌株IS7已保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。保藏日期2018年05月14日，菌种保藏号为CGMCCNo.15759。经微生物学鉴定暂命名为白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7。
新菌种白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7在含2％NaCl TSA培养基上生长良好，菌落特征为浅黄色，圆形、表面光滑、边缘整齐、略微凸起，菌体特征为短杆状，无孢子，革兰氏染色阳性，该菌在含1-10％NaCl，pH5-10及15-37℃条件下均能良好生长。
同时，本发明进一步提供一种白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7CGMCC No.15759菌剂制备的方法，具体步骤如下：
将白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7CGMCC No.15759接种在含2％NaCl的TSA固体培养基上进行活化后，转接于100mL 2％NaCl的TSA液体培养基30℃下180rpm培养24h，获得种子液；按重量百分比，将种子液以1:100比例接种于发酵培养基中，200rpm 30℃摇床培养48h后，用灭菌水稀释制成活菌总浓度为1×108-1×1010cfu/mL的菌剂。
进一步，本发明提供白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7CGMCC No.15759菌剂，具有促进作物生长和抗病害的作用，具有显著和稳定的技术效果，具有广泛的应用价值。
通过实施本发明提供上述具体技术方案，实施本发明内容，可以达到以下有益效果：
(1)本发明提供的白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7CGMCC No.15759是一种典型的新菌种可在2％NaCl的TSA固体培养基上良好生长，生长温度范围在10-45℃，最适温度生长是28℃，pH生长范围5.0-10，最佳pH值为7.0，可耐受1-10％的NaCl，具有具有拮抗、解磷、产IAA和ACC、耐盐的特性，同时具有培养条件简单，繁殖快的特点，初步确定其为白蚁菌(Isoptericola sp.)新种，具有新菌种典型性的特点，从分类学角度暂命名为白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7。
(2)将本发明分离筛选的白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7CGMCC No.15759制备的菌剂，菌剂活菌总浓度为1×108-1×1010cfu/mL，使用稀释后的菌悬液浸泡棉花种子，生长15天后，根长和株重分别显著增加了7.69％和15.38％；菌悬液浸泡后的小麦种子，生长15天后，根长和鲜重的促进作用明显，分别显著增加了74.36％和101.67％，说明白蚁菌IS7菌剂稀释液浸泡植物种子后栽培，有明显促进生长的作用。
(3)将本发明分离筛选的白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7CGMCC No.15759制备的菌剂，用40L菌剂和4kg腐植酸钾联用，施于腐烂病病害程度＞80％的核桃树，SOD、PAL和PPO酶活分别提高40.56％、12.45％和43.23％，丙二醛含量降低53.13％。说明高剂量菌剂与腐植酸钾配施能显著提高腐烂病病害程度＞80％的植株的抗病性。
附图说明
图1所示为白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7的16S rDNA序列建立的N-J系统进化树图。
图2所示为白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7的菌落形态图。
图3所示为白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7对棉花幼苗的促生作用图。
图4所示为白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7对小麦幼苗的促生作用图。
具体实施方式
下面举实施例说明本发明，但是，本发明并不限于下述的实施例。本发明中选用的所有原辅材料，以及选用的菌种培养方法都为本领域熟知选用的，本发明中涉及到的％都为重量百分比，除非特别指出除外。
本发明实施例中采用如下基础培养基：
含2％NaCl TSA培养基：胰酪蛋白胨15g、大豆蛋白胨5g、NaCl 20g、琼脂15g，蒸馏水1.0L，pH 7.3；
发酵培养基组分：豆粕粉10g、玉米粉10g、NaCl 20g，牛肉膏2g、蛋白胨3g、葡萄糖3g，加蒸馏水至1.0L，pH 7.0-7.2。
PDA培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15～2g，加蒸馏水至1.0L。
解磷细菌培养基：葡萄糖10g、酵母粉0.5g、(NH4)2SO4 0.5g、NaCl 20g、MgSO4·7H2O0.3g、MnSO4 0.03g、K2SO4 0.3g、卵磷脂0.5g、FeSO4·7H2O 0.03g、琼脂15g，加蒸馏水至1.0L，pH7.0-7.5。
DF培养基：KH2PO4 4g、Na2HPO4 6g、MgSO4·7H2O 0.2g、葡萄糖2g、葡萄糖酸钠2g、柠檬酸2g、(NH4)2SO4 2.0g，组分一、组分二微量元素溶液各0.1mL、FeSO4·7H2O 0.1mL、H2O1.0L，样品逐个加入，充分溶解，121℃高压灭菌20min。微量元素溶液：组分一：H3BO3 10mg、MnSO4·H2O 11.19mg、ZnSO4·7H2O 124.6mg、CuSO4·5H2O 78.22mg、MoO3 10mg、H2O 100mL，溶于100mL无菌蒸馏水中。组分二：将100mg FeSO4·7H2O溶于100mL无菌蒸馏水中。
本发明采用的样品：新疆阿克苏地区核桃根际土壤。
实施例一：白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7的分离、筛选及鉴定
(一)分离、筛选：
采集新疆阿克苏地区核桃根际土壤样品，通过梯度稀释法进行微生物的分离和纯化。称取土样10g，放入100ml无菌水中，加入灭菌的玻璃珠，150rpm，30℃，震荡20min，使样品充分分散。无菌操作吸取上清液100μl加入900μl无菌水中，用无菌水稀释制成10-2-10-5浓度的稀释液。取100μl的各浓度稀释液，采用常规涂布法在含2％NaCl的TSA固体培养基平板上涂布，放置于30℃恒温培养箱内培养48小时后，待平板上长出菌落后，挑取平板上的单菌落进行纯化培养，直至无杂菌落。从中优选出一株编号为IS7的菌株，转接到含2％NaClTSA培养基斜面上保存备用。
(二)分类、鉴定：
1、白蚁菌(Isoptericola sp.)IS716S rDNA的序列测定与分析：
(1)PCR模板DNA的提取：
将纯化后的菌种IS7接种到2％NaCl TSA培养基中，30℃摇床培养2天，收集菌体，采用DNA抽提试剂盒提取基因组总DNA。
(2)PCR扩增
采用特异性引物:
F:5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'，
R:5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'；
PCR反应体系总体积25μL，PCR扩增条件为，92℃5min；92℃45s，56℃45s，70℃45s，30个循环；72℃10min。
(3)序列测定
PCR扩增产物经电泳检测和纯化后测序，获取长度为1429bp的16S r DNA序列，序列参见附后提供的SEQ ID NO:1所示，所得序列经常见的NCBI网站进行比对分析，并构建系统发育树，该菌的系统发育树见图1，经比对分析发现，菌株IS7的16S rDNA序列与标准模式菌Isoptericola halotolerans YIM 70177T和Isoptericola dokdonensis DS-3T同源性为98.7％和98.4％，具有新菌种的鲜明技术特征，菌株IS7与Isoptericola halotoleransYIM 70177T和Isoptericola dokdonensis DS-3T的亲缘关系最近，利用本领域常见采用的MEGA 5.0软件通过Neighbor-Joining方法建立系统进化树，结果经比对分析发现，菌株IS7与Isoptericola halotolerans YIM 70177T和Isoptericola dokdonensis DS-3T的可信度分别为86％和93％，表明该菌种作为新菌种的支持率极高，在进化树中体现极好的稳定性，经过系列菌种分子水平鉴定可将该菌株IS7确定为白蚁菌(Isoptericola sp.)新种，具有新菌种典型性的特点，从分类学角度暂命名为白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7。
2、生理生化测定
(1)通过生长条件研究结果显示白蚁菌IS7，革兰氏染色阳性，严格需氧，不规则棒状，0.8-1.5×1.4-2.5μm，无运动性。生长在含有2％NaCl TSA培养基上培养3-5d菌落为圆形、边缘整齐、略微凸起的淡黄色菌落，菌落形态见附图2所示。菌体生长温度范围在10-45℃，最适温度生长是28℃；pH生长范围5.0-10，最佳pH值为7.0，可耐受10％的NaCl。
(2)过氧化氢酶试验氧化酶活性为阴性。可水解酪蛋白、明胶和次黄嘌呤，不水解尿素和黄嘌呤。
(3)使用Biolog菌种鉴定仪GNIII测试板鉴定，确定白蚁菌IS7能利用环糊精、糊精、D-阿拉伯糖、N-乙酰-D-氨基葡萄糖、D-果糖、D-纤维二糖、D-半乳糖、D-葡萄糖酸盐、D-葡萄糖、麦芽糖、D-甘露糖、L-鼠李糖、蔗糖、蜜二糖、熊果苷、N-乙酰-D-氨基半乳糖、D-阿托醇、D-阿拉伯糖醇、肌醇、D-甘露糖醇、乳糖、棉子糖、海藻糖和D-木糖、核糖、阿拉伯糖、葡萄糖、纤维二糖、海藻糖、maltose、山梨醇、乳糖、木糖和dextrin；反映出该菌种IS7与常见的白蚁菌(Isoptericola sp.)具有鲜明的区别，具有新菌种特点。
综合16SrDNA序列分析、系统发育分析、微生物学特性分析结果，表明本发明提供的白蚁菌IS7确为白蚁菌属的一株细菌新种，将其暂命名为白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7。该菌于2018年05月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC No.15759。
实施例二：白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7的拮抗、促生功能测定
(1)拮抗实验采用平板对峙法测定其拮抗功能，将棉花黄萎病和核桃腐烂病病原菌接种于PDA培养基中心，在距平板中心3cm的地方接种白蚁菌IS7，30℃培养3-5天后，发现白蚁菌IS7对棉花黄萎病和核桃腐烂病病原菌有抑制生长的作用，抑菌圈直径分别为1.0和1.6cm。
(2)解磷试验将白蚁菌IS7接种于解磷细菌培养基上，30℃培养一周后观察，解磷细菌培养基上形成较大且非常明显的透明圈。
(3)产ACC脱氨酶试验将白蚁菌IS7接种于含3mM ACC的DF固体培养基，传代3次后，白蚁菌IS7在ACC为唯一氮源培养基上的生长良好，生长的菌株为产脱氨酶阳性菌株。
(4)分泌吲哚乙酸(IAA)能力将白蚁菌IS7接种于含100mg/L L-色氨酸的2％NaCl的TSA液体培养基中，180r/min摇床30℃培养1d后，取50μL菌悬液滴于白色陶瓷板上，同时加入等体积的Salkowski比色液，Salkowski比色液为50mL 35％HClO4和1mL0.5mol/L FeCl3混合，并以加入50μL未接菌的2％的TSA液体培养基与等体积比色液的混合溶液为对照。将白色陶瓷板于室温避光放置30min后，加入50μL白蚁菌IS7菌悬液的白色陶瓷板内颜色变红。
(5)耐盐试验
在TSA培养基中加入10％NaCl后，倒平板，接种白蚁菌IS7。在30℃培养，2-5d观察该菌的生长情况。研究表明：白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7具有拮抗、解磷、产ACC脱氨酶、分泌吲哚乙酸、耐盐的能力，白蚁菌IS7功能特性如表1所示。
表1：白蚁菌IS7功能特性
实施例三：白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7菌剂制备
将白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7接种在含2％NaCl的TSA固体培养基上进行活化后，转接于100mL 2％NaCl的TSA液体培养基180rpm 30℃培养24h，获得种子液。将种子液以1:100比例接种于发酵培养基中，200rpm 30℃培养48h。用灭菌水稀释制成活菌总浓度为1×108-1×1010cfu/mL的菌剂。
实施例四：白蚁菌IS7对棉花幼苗的促生作用
设计棉种接菌和不接菌两个实验处理，每个处理10盆。选择颗粒饱满且无明显破损的棉种，使用0.1％的升汞消毒5min，无菌水洗净后，浸于1/100浓度菌剂4h；不接菌的对照处理种子浸于灭菌蒸馏水中。将棉种点植入穴栽盆，每穴为4粒，深度约1.5cm，置于人工气候室中培养。培养条件20℃、无光照8h；22℃、30％光照2h；25℃、100％光照12h；30％光照2h。每天浇一次水，浇水量控制一致。待发芽后，每隔5天浇灌一次，每穴约10mL。待发芽15d后测量试验组和对照组棉花植株的根长和株重。
如附图3所示，实验结果表明，与对照处理相比，经白蚁菌IS71/100浓度菌剂浸泡后的棉花种子后，生长15天根长和株重分别显著增加了7.69％和15.38％，说明白蚁菌菌剂稀释液浸泡对棉种有明显的促进作用。
实施例五：白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7对小麦的促生作用选择颗粒饱满且无明显破损的小麦种子，使用0.1％的升汞消毒5min，无菌水洗净后，浸于1/100浓度菌液4h。设计麦种接菌和不接菌两个盆栽实验处理，不接菌的对照处理种子浸于灭菌蒸馏水中。将菌株处理的种子每20粒播入装有无菌土的10cm×10cm的盆钵中，播种深度3cm，置于人工气候室中培养。培养条件20℃、无光照8h；22℃、30％光照2h；25℃、100％光照12h；30％光照2h。每天用过夜放置自来水喷洒2次，待发芽后，每隔5天浇灌一次(每穴约10mL)。待发芽15d后测量试验组和对照组小麦植株的各种形态学参数，包括株高、根长和鲜重。
如附图4所示，实验结果表明，与对照处理相比，经白蚁菌IS71/100浓度菌剂浸泡后的小麦种子后，生长15天，株高的促进作用相对较弱，仅增加了3.06％，但对根长和鲜重的促进作用明显，分别显著增加了74.36％和101.67％，说明白蚁菌菌剂稀释液浸泡对小麦有明显的促进生长的作用。
实施例六：白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7配施腐殖酸钾对提高腐烂病胁迫下核桃叶片防御性物质和保护酶活性方面的应用
选取健康核桃树和腐烂病病害程度大于80％的核桃树，在施用2kg腐植酸钾用量和4kg腐植酸钾用量的基础上，分别配施白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7菌剂20L和40L，于核桃成熟期测定叶片防御性物质和保护酶的活性。
表2不同处理核桃叶片保护酶活性和防御性物质含量提高的百分比
注：JA为每棵健康植株在施用2kg腐植酸钾的基础上配施20L菌剂；JB为每棵健康植株在施用4kg腐植酸钾的基础上配施40L菌剂；BA为病害程度＞80％的植株在每棵施用2kg腐植酸钾基础上配施20L菌剂；BB为病害程度＞80％的植株在每棵施用4kg腐植酸钾基础上配施40L菌剂。
从表2结果可以看出，健康植株在施用腐植酸钾的基础上配施菌剂能提高植株SOD和PAL酶活，但提高效果不显著，没有提高多酚氧化酶活性。SOD酶活分别提高了8.51％和3.61％；PAL酶活分别提高了22.53％和3.66％。但防御性物质PRO和MDA含量则升高，说明腐植酸钾配施菌剂对健康植株抗病性的效果不明显。
对腐烂病病害程度＞80％的植株而言，2kg腐植酸钾配施20L菌剂没有提高植株SOD、PAL和PPO酶活，PRO含量降低不显著，MDA含量则升高；但增施4kg腐植酸钾和40L菌剂这三种酶活的提高效果显著，同时MDA含量显著降低，但PRO含量则升高。4kg腐植酸钾配施40L菌剂SOD、PAL和PPO酶活分别提高40.56％、12.45％和43.23％，丙二醛含量降低53.13％。说明高剂量腐植酸钾配施菌剂能显著提高腐烂病病害程度＞80％的植株的抗病性。
通过上述系列实施例提供的白蚁菌(Isoptericola sp.)IS7 CGMCC No.15759是一种典型的新菌种，该菌株最适生长条件为：生长温度范围在10-45℃，最适温度生长是28℃，pH生长范围5.0-10，最佳pH值为7.0，可耐受1-10％的NaCl，具有拮抗、耐盐、解磷、产IAA和ACC的特性，同时具有培养条件简单，繁殖快的特点，且通过制备的菌剂具有明显促进植株生长和抗病害的作用，对于微生物菌种应用技术领域具有广泛的应用价值。
上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所延伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。
序列表
<110> 乌鲁木齐永丰天农农业科技发展有限公司
新疆农业科学院微生物应用研究所（中国新疆-亚美尼亚生物工程研究开发中心）
<120> 一种白蚁菌IS7及其在植物促生中的应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1429
<212> DNA
<213> 白蚁菌(Isoptericola sp.)
<400> 1
gcattgcggc gtctaccatg cagtcgaacg gtgaagctca gcttgctggg tggatcagtg 60
gcgaacgggt gagtaacacg tgagcaacct gccctccact tcgggataag ccttggaaac 120
ggggtctaat accggatatg agtgtctgcc gcatggtggg tgctggaaag tttttcggtg 180
ggggatgggc tcgcggccta tcagcttgtt ggtggggtga tggcctacca aggcgtcgac 240
gggtagccgg cctgagaggg cgaccggcca cactgggact gagacacggc ccagactcct 300
acgggaggca gcagtgggga atattgcaca atgggcgaaa gcctgatgca gcgacgccgc 360
gtgagggatg acggccttcg ggttgtaaac ctctttcagc agggaagaag cgcaagtgac 420
ggtacctgca gaagaagcgc cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtagggc 480
gcaagcgttg tccggaatta ttgggcgtaa agagctcgta ggcggtttgt cgcgtctggt 540
gtgaaatccc gaggctcaac ctcgggcttg catcgggtac gggcagacta gagtgcggta 600
ggggagactg gaattcctgg tgtagcggtg gaatgcgcag atatcaggag gaacaccgat 660
ggcgaaggca ggtctctggg ccgcaactga cgctgaggag cgaaagcatg gggagcgaac 720
aggattagat accctggtag tccatgccgt aaacgttggg cactaggtgt ggggctcatt 780
ccacgagttc cgtgccgcag ctaacgcatt aagtgccccg cctggggagt acggccgcaa 840
ggctaaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg gcggagcatg cggattaatt 900
cgatgcaacg cgaagaacct taccaaggct tgacatgcac cggaactgcc agagatggtg 960
gccccgcaag gtcggtgcac aggtggtgca tggttgtcgt cagctcgtgt cgtgagatgt 1020
tgggttaagt cccgcaacga gcgcaaccct tgtcccatgt tgccagcggg ttatgccggg 1080
gactcatagg agactgccgg ggtcaactcg gaggaaggcg gggatgacgt caaatcatca 1140
tgccccttat gtcttgggct tcacgcatgc tacaatggcc ggtacagagg gctgcgatac 1200
cgcaaggtgg agcgaatccc aaaaagccgg tctcagttcg gattggggtc tgcaactcga 1260
ccccatgaag tcggagtcgc tagtaatcgc agatcagcaa cgctgcggtg aatacgttcc 1320
cgggccttgt acacaccgcc cgtcaagtca cgaaagttgg taacacccga agcccatggc 1380
ccaacccttg tggggggagt ggtcgaaggt gggaccggcg attgggact 1429

Claims (5)

1.一种白蚁菌（Isoptericola sp.）IS7，其特征在于，所述的白蚁菌（Isoptericola sp.）IS7的菌种保藏号为CGMCC No.15759。
2.如权利要求1所述的白蚁菌（Isoptericola sp.）IS7的基因序列如SEQ ID NO:1所示。
3.如权利要求1所述的白蚁菌（Isoptericola sp.）IS7制备的菌剂。
4.如权利要求3所述的白蚁菌（Isoptericola sp.）IS7制备的菌剂，其特征在于，将白蚁菌（Isoptericola sp.）IS7 CGMCC No.15759接种在含2%NaCl的TSA固体培养基上进行活化后，转接于100 mL 2%NaCl的TSA液体培养基30℃下180 rpm培养24h，获得种子液；按重量百分比，将种子液以1:100比例接种于发酵培养基中，200rpm 30℃摇床培养48h后，用灭菌水稀释制成活菌总浓度为1×108-1×1010 cfu/mL的菌剂。
5.如权利要求3或4所述的白蚁菌（Isoptericola sp.）IS7制备的菌剂在促进作物生长和抗病害中的应用。
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