CN115768760A - 作为抗癌药物的喹喔啉衍生物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及具有式(I)的氮杂喹诺酮化合物，及其在药物中的用途。

Description

作为抗癌药物的喹喔啉衍生物

本披露涉及抑制酶的聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)家族的经取代的氮杂喹诺酮化合物及其药学上可接受的盐。本披露还涉及这些化合物及其药学上可接受的盐，在医学，例如在治疗其中PARP1或PARP1功能的抑制具有治疗意义的疾病中的用途。本披露还涉及使用根据本披露的化合物的治疗方法和制造药物的方法。

酶的PARP家族在许多细胞过程(如复制、重组、染色质重塑和DNA损伤修复)中发挥重要作用(O’Connor MJ，Mol Cell[分子细胞](2015)60(4)：547-60)。

在例如WO 2004/080976中教导了PARP抑制剂的实例及其作用机理。

PARP1和PARP2因其在DNA损伤修复中的作用而是被广泛研究的PARP。PARP1被DNA损伤断裂激活，并起着催化聚(ADP-核糖)(PAR)链添加至靶蛋白的作用。这种翻译后修饰(称为PAR基化(PARylation))介导了另外的DNA修复因子募集到DNA损伤中。

完成该募集任务后，PARP自动PAR基化触发结合的PARP从DNA释放，从而允许使用其他DNA修复蛋白以完成修复。因此，PARP与受损位点的结合、其催化活性以及最终从DNA释放都是癌细胞应对化学治疗剂和放射疗法引起的DNA损伤的重要步骤(BaiP.Biology ofpoly(ADP-ribose)polymerases：the factotums of cell maintenance[聚(ADP-核糖)聚合酶的生物学：细胞维持的总管].Mol Cell[分子细胞学]2015；58：947-58.)。

PARP家族酶的抑制已被用作通过使互补DNA修复途径失活而选择性杀伤癌细胞的策略。许多临床前和临床研究已经表明，荷BRCA1或BRCA2(参与通过同源重组(HR)而修复双链DNA断裂(DSB)的关键肿瘤抑制蛋白)的有害改变的肿瘤细胞对DNA修复酶的PARP家族的小分子抑制剂选择性敏感。此类肿瘤的同源重组修复(HRR)途径有缺陷，并且其存活取决于PARP酶的功能。尽管PARP抑制剂疗法主要靶向BRCA突变的癌症，但是PARP抑制剂已在非BRCA突变型肿瘤中进行了临床测试，这些肿瘤表现出同源重组缺陷(HRD)(Turner N，TuttA，Ashworth A.Hallmarks of′BRCAness′in sporadic cancers[散发性癌症中′BRCAness′的标志].Nat Rev Cancer[癌症自然评论]2004；4：814-9)。

据信，与其他临床PARP1/2抑制剂相比，对PARP1选择性提高的PARP抑制剂可导致功效提高和毒性降低。还据信对PARP1的选择性强抑制将导致PARP1捕获在DNA上，这通过使S期中的复制叉坍塌而导致DNA双链断裂(DSB)。还据信PARP1-DNA捕获是选择性杀伤具有HRD的肿瘤细胞的有效机制。

因此，对于有效且安全的PARP抑制剂存在未满足的医学需求。特别是对PARP1具有选择性的PARP抑制剂。

申请人发现，本文所述的氮杂喹诺酮令人惊讶地具有PARP抑制活性，因此可用于治疗其中PARP功能具有药理学意义的疾病和病症。此外，本文所述的氮杂喹诺酮对PARP1的选择性比其他PARP家族成员(如PARP2、PARP3、PARP5a和PARP6)出人意料地高。

申请人还发现本文所述的氮杂喹诺酮化合物令人惊讶地能够穿透血脑屏障(BBB)。因此，本文所述的氮杂喹诺酮可用于治疗发生在中枢神经系统组织(例如脑和脊髓)中的疾病和病症。

在一方面，申请人提供了一类具有式(I)的化合物：

其中：

R¹独立地选自H、C_1-4烷基、C_3-6环烷基、C_1-4氟烷基和C_1-4烷基氧基；

R²独立地选自H、卤素、C_1-4烷基和C_1-4氟烷基；并且

R³是H或C_1-4烷基；

R⁴是卤素或C_1-4烷基，

或其药学上可接受的盐。

在另一方面，申请人提供了一类具有式(I)的化合物：

其中：

R¹独立地选自H、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基和C_1-4烷基氧基；

R²独立地选自H、卤素、C_1-4烷基和C_1-4氟烷基；并且

R³是H或C_1-4烷基；

R⁴是卤素或C_1-4烷基，

或其药学上可接受的盐。

在一方面，R¹选自甲基、乙基、异丙基、环丙基、1，1-二氟乙基、1-氟乙基、三氟甲基、二氟甲基和甲氧基中的任一个。在一个特定方面，R¹是甲基或乙基。

在一方面，R²选自H、氯、氟、甲基和二氟甲基中的任一个。在一方面，R²是氟或甲基。

在一方面，R³是甲基或乙基。

在一方面，R⁴选自氯、氟和甲基中的任一个。在一个特定方面，R⁴是氟。

在一方面，提供具有式I的化合物，其中R¹是C_1-4烷基，R²是卤素，R³是C_1-4烷基，R⁴是卤素或C_1-4烷基，或其药学上可接受的盐。

在另外的方面，提供了药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的稀释剂、赋形剂或惰性载体。

在另外的方面，提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，用于治疗或预防其中PARP1的抑制是有益的疾病和病症。在一方面，本说明书提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗癌症中使用。在一方面，癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌如胃癌和结肠直肠癌，或肺癌如小细胞或非小细胞肺癌。在一方面，癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌或前列腺癌。在一方面，癌症是脑癌，例如神经胶质瘤或胶质母细胞瘤。在一方面，脑癌是由身体其他部位的肿瘤(例如乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌如胃癌和结肠直肠癌，或肺癌如小细胞或非小细胞肺癌)引起的转移性癌症。

在另外的方面，提供了治疗其中抑制PARP1是有益的疾病或病症的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的具有式I的化合物或其药学上可接受的盐。在一方面，所述疾病或病症是癌症。在一方面，癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌如胃癌和结肠直肠癌，或肺癌如小细胞或非小细胞肺癌。在一方面，癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌或前列腺癌。在一方面，癌症是脑癌，例如神经胶质瘤或胶质母细胞瘤。在一方面，脑癌是由身体其他部位的肿瘤(例如乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌如胃癌和结肠直肠癌，或肺癌如小细胞或非小细胞肺癌)引起的转移性癌症。

在另外的方面，提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，用于制备用于治疗其中PARP1的抑制是有益的疾病或病症的药物。在一方面，癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌如胃癌和结肠直肠癌，或肺癌如小细胞或非小细胞肺癌。在一方面，癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌或前列腺癌。在一方面，癌症是脑癌，例如神经胶质瘤或胶质母细胞瘤。在一方面，脑癌是由身体其他部位的肿瘤(例如乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌如胃癌和结肠直肠癌，或肺癌如小细胞或非小细胞肺癌)引起的转移性癌症。

在另外的方面，提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗其中PARP1的抑制是有益的疾病或病症的药物中的用途。在一方面，癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌如胃癌和结肠直肠癌，或肺癌如小细胞或非小细胞肺癌。在一方面，癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌或前列腺癌。在一方面，癌症是脑癌，例如神经胶质瘤或胶质母细胞瘤。在一方面，脑癌是由身体其他部位的肿瘤(例如乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌如胃癌和结肠直肠癌，或肺癌如小细胞或非小细胞肺癌)引起的转移性癌症。

在另外的方面，提供了能够穿透血脑屏障(BBB)的具有式I的化合物。在一个方面，穿透BBB的化合物的比率＞0.1，其中1是完全的BBB穿透，0是没有穿透。在一方面，穿透BBB的化合物的比率＞0.2。在一方面，穿透BBB的化合物的比率＞0.3。在一方面，使用大鼠kpuu测定测量渗透BBB的化合物的比率。在一方面，如在大鼠kpuu测定中确定的，具有式I的化合物具有＞0.3(即从0.3到1)的比率。

在另外的方面，提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，用于在药物中使用。

在另外的方面，具有式I的化合物呈游离碱形式。

在另外的方面，提供了具有式I的化合物或其药学上可接受的盐，用作药物。

在另外的方面，提供了本文披露的实例。

在一方面，提供了具有式I的化合物，其为5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺或其药学上可接受的盐。

在一方面，提供了具有式I的化合物，其为6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺或其药学上可接受的盐。

在一方面，提供了具有式I的化合物，其为6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺结晶形式B或其药学上可接受的盐。

在一方面，提供了具有式I的化合物，其为6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺结晶形式D或其药学上可接受的盐。

在一方面，提供了具有式I的化合物，其为6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺甲磺酸酯，任选地呈结晶形式C。

通过阅读本说明书，本领域技术人员将清楚其他方面。

众所周知，由人类ether-à-gogo相关基因(hERG)编码的心脏离子通道的阻塞是药物发现和开发的风险因素。hERG的阻塞会引起安全性问题，例如心律失常。有利地，具有式I的化合物具有低的hERG活性。在一方面，提供了IC50＞10μM的具有式I的化合物。在一方面，提供了IC50>20μM的具有式I的化合物。

为了使脱靶效应的风险最小化，期望药物分子具有对特定靶的选择性。具有式I的化合物有利地具有对PARP1的选择性超过对于PARP家族的其他成员(包括PARP2、PARP3、PARP5a和PARP6)。有利地，具有式I的化合物对PARP1具有的选择性超过PARP2。在一方面，提供了具有式I的化合物对PARP1的选择性是PARP2的10倍。在一方面，提供了具有式I的化合物对PARP1的选择性是PARP2的100倍。

另一个方面提供了具有式I的化合物在制备药物中的用途，该药物用作癌症疗法的辅助剂或用于增强肿瘤细胞的用电离辐射或化学治疗剂或基于抗体的疗法(例如免疫肿瘤学或抗体-药物偶联物)的治疗。

其他另外的方面提供了通过抑制PARP1而改善的疾病的治疗(包括向需要治疗的受试者施用治疗有效量的具有式I的化合物，优选以药物组合物的形式)、以及癌症的治疗(包括向需要治疗的受试者施用治疗有效量的具有式I的化合物，优选以药物组合物的形式，与电离辐射或化学治疗剂同时或依次施用)。

在另外的方面，具有式I的化合物可用于制备用于治疗同源重组(HR)依赖性DNADSB修复活性有缺陷的癌症的药物、或用于治疗HR依赖性DNA DSB修复活性有缺陷的癌症的患者(包括向所述患者施用治疗有效量的该化合物)。

HR依赖性DNA DSB修复途径经由同源机制修复DNA中的双链断裂(DSB)，以重建连续的DNA螺旋(K.K.Khanna和S.P.Jackson，Nat.Genet.[自然遗传学]27(3)：247-254(2001))。HR依赖性DNA DSB修复途径的组分包括但不限于ATM(NM_000051)、RAD51(NM_002875)、RAD51L1(NM_002877)、RAD51C(NM_002876)、RAD51L3(NM_002878)、DMC1(NM_007068)、XRCC2(NM_005431)、XRCC3(NM_005432)、RAD52(NM_002879)、RAD54L(NM_003579)、RAD54B(NM_012415)、BRCA1(NM_007295)、BRCA2(NM_000059)、RAD50(NM_005732)、MRE11A(NM_005590)和NBS1(NM_002485)。HR依赖性DNA_DSB修复途径中涉及的其他蛋白质包括调节因子例如EMSY(Hughes-Davies等人，Cell[细胞]，115，第523-535页)。HR组分也描述于Wood等人，Science[科学]，291，1284-1289(2001)中。

HR依赖性DNA DSB修复方面有缺陷的癌症可以包含一种或多种癌细胞、或由其组成，这些癌细胞相对于正常细胞具有降低的或消除的通过该途径修复DNA DSB的能力，即HR依赖性DNA DSB修复途径的活性可在一种或多种癌细胞中降低或消除。

HR依赖性DNADSB修复途径的一种或多种组分的活性可以在患有HR依赖性DNA DSB修复方面有缺陷的癌症的个体的一种或多种癌细胞中消除。HR依赖性DNA DSB修复途径的组分在本领域中是充分表征的(参见例如，Wood等人，Science[科学]，291，1284-1289(2001))并且包括以上列出的组分。

在一方面，癌细胞可具有BRCA1和/或BRCA2缺陷表型，即在癌细胞中BRCA1和/或BRCA2活性被降低或消除。具有这种表型的癌细胞的BRCA1和/或BRCA2有缺陷，即BRCA1和/或BRCA2的表达和/或活性可以在癌细胞中降低或消除，例如通过编码核酸中的突变或多态性的方式，或通过编码调节因子的基因(例如编码BRCA2调节因子的EMSY基因)中的扩增、突变或多态性的方式(Hughes-Davies等人，Cell[细胞]，115，523-535)。

BRCA1和BRCA2是已知的肿瘤抑制因子，其野生型等位基因在杂合子携带者的肿瘤中经常丢失(Jasin M.，Oncogene[癌基因]，21(58)，8981-93(2002)；Tutt等人，TrendsMolMed.[分子医学趋势]，8(12)，571-6，(2002))。BRCA1和/或BRCA2突变与乳腺癌的关联在本领域中是充分表征的(Radice，P.J.，Exp Clin Cancer Res.[实验与临床癌症研究]，21(3增刊)，9-12(2002))。还已知编码BRCA2结合因子的EMSY基因的扩增与乳腺癌和卵巢癌有关。BRCA1和/或BRCA2中突变的携带者罹患某些癌症(包括乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌和肺癌)的风险也较高。

在一方面，个体对于BRCA1和/或BRCA2或其调节剂中的一个或多个变异(例如突变和多态性)是杂合的。对BRCA1和BRCA2的变异的检测是本领域众所周知的，并且例如描述于EP 699 754，EP 705 903，Neuhausen，S.L.和Ostrander，E.A.，Genet.Test[基因检测]，1，75-83(1992)；Chappnis，P.O.和Foulkes，W.O.，Cancer Treat Res[癌症治疗研究]，107，29-59(2002)；Janatova M.等人，Neoplasma[赘生物]，50(4)，246-505(2003)；Jancarkova，N.，Ceska Gynekol.，68{1)，11-6(2003)中。BRCA2结合因子EMSY的扩增的确定描述于Hughes-Davies等人，Cell[细胞]，115，523-535中。

与癌症相关的突变和多态性可以通过检测变体核酸序列的存在而在核酸水平上检测，或者通过检测变体(即突变体或等位基因变体)多肽的存在而在蛋白质水平上检测。

定义

烷基基团和部分是直链的或支链的，例如C_1-8烷基、C_1-6烷基、C_1-4烷基或C_5-6烷基。烷基基团的实例是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、正己基、正庚基以及正辛基，如甲基或正己基。

环烷基是饱和的环状烷基。C_3-6环烷基是具有3至6个碳原子的饱和环状烷基。C_3-6环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。C_3-6环烷基包括C_3-5环烷基和C_3-4环烷基。

氟烷基基团是其中一个或多个H原子被一个或多个氟原子替换的烷基基团，例如C_1-8氟烷基、C_1-6氟烷基、C_1-4氟烷基或C_5-6氟烷基。实例包括氟甲基(CH₂F-)、二氟甲基(CHF₂-)、三氟甲基(CF₃-)、2，2，2-三氟乙基(CF₃CH₂-)、1，1-二氟乙基(CH₃CHF₂-)、2，2-二氟乙基(CHF₂CH₂-)、1-氟乙基(CH₃CHF-)和2-氟乙基(CH₂FCH₂-)。

卤代意指氟、氯、溴、和碘。在一方面，卤素是氟或氯。

烷基氧基是通过氧原子与分子的其余部分连接的烷基。合适的C_1-4烷基氧基基团的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。

在本说明书中，除非另外说明，否则如在此使用的术语“药学上可接受的”是指在合理医学判断范围内，适合用于与人类和动物组织接触使用而没有过多的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症(与合理的益处/风险比相称)的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。

在本说明书中，除非另外说明，否则短语“有效量”意指化合物或组合物的足以显著和积极地改变待治疗的症状和/或病症(例如，提供积极的临床反应)的量。用于药物组合物中的活性成分的有效量将随所治疗的具体病症、病症的严重程度、治疗的持续时间、同步治疗的性质、所利用的一种或多种具体活性成分、所利用的一种或多种具体药学上可接受的赋形剂/载体、以及处于主治医生的知识和专业知识范围内的类似因素而变化。

除非另有指示，否则如本文使用的术语“治疗”是指逆转、缓解或预防此术语所适用的障碍或病症或者此障碍或病症的一个或多个症状，抑制其进展，延迟其进展，延迟其发作。除非另有指示，如本文使用的术语“治疗”是指按照如上所定义的“治疗”进行治疗的行为。术语“治疗”还包括受试者的辅助治疗和新辅助治疗。为免存疑，本文提及的“治疗”包括提及治愈性、姑息性和预防性治疗以及用于这种治疗的药物的施用。

具有式I的化合物可以形成稳定的药学上可接受的酸或碱的盐，并且在此类情况下施用作为盐的化合物可能是适当的。酸加成盐的实例包括乙酸盐、己二酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、胆碱、柠檬酸盐、环己基氨基磺酸盐、二亚乙基二胺、乙磺酸盐、延胡索酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、半硫酸盐、2-羟乙基磺酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、羟基马来酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、甲烷磺酸盐(甲磺酸盐)、葡甲胺、2-萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、过硫酸盐、苯乙酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、奎尼酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、氨基磺酸盐、氨基苯磺酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐(对甲苯磺酸盐)、三氟乙酸盐、以及十一烷酸盐。尽管其他的盐可以用于如分离或纯化产物中，但是无毒的生理学上可接受的盐是优选的。

这些盐可以通过常规手段来形成，例如通过在溶剂或介质中(这种盐在该溶剂或介质中不溶)或在一种溶剂(例如在真空中除去水的溶剂)中使该产物的游离碱形式与一种或多种适当的酸的等效物反应，或通过冷冻干燥，或在适合的离子交换树脂上通过将一种现存的盐的阴离子交换为另一种阴离子。

具有式I的化合物可以具有超过一个手性中心，并且应理解该申请涵盖所有个体立体异构体、对映异构体和非对映异构体及其混合物。因而，应当理解的是，在具有式I的化合物可凭借一个或多个不对称碳原子而以光学活性形式或外消旋形式存在的情况下，本申请包括了在其定义中任何这类具有上述活性的光学活性形式或外消旋形式。本申请涵盖了所有这类具有此处定义的活性的立体异构体。

因此，贯穿本说明书，提及具有式I的化合物时，应理解该术语化合物包括作为PARP1抑制剂的非对映异构体、非对映异构体的混合物以及对映异构体。

还应理解的是某些具有式I的化合物及其药用盐能以溶剂化连同非溶剂化形式(例如像，水合形式和无水形式)存在。应当理解的是，在此的化合物涵盖了所有这类溶剂化的形式。为了清楚起见，这包括化合物游离形式的溶剂化(例如，含水的)的形式以及化合物的盐的溶剂化(例如，含水的)的形式二者。

如本文所述的式I旨在涵盖其组成原子的所有同位素。例如，H(或氢)包括氢的任何同位素形式，包括¹H、²H(D)、以及³H(T)；C包括碳的任何同位素形式，包括¹²C、¹³C、以及¹⁴C；O包括氧的任何同位素形式，包括¹⁶O、¹⁷O、以及¹⁸O；N包括氮的任何同位素形式，包括¹³N、¹⁴N、以及¹⁵N；F包括氟的任何同位素形式，包括¹⁹F以及¹⁸F；等等。在一个方面，具有式I的化合物包括此处涵盖的原子的同位素，其量对应于它们天然存在的丰度。然而，在某些情况下，可能希望的是富集处于一种正常情况下会以较低丰度存在的具体同位素中的一种或多种原子。例如，正常情况下¹H以大于99.98％的丰度存在；然而，在一个方面，具有在此提出的任何化学式的化合物可以在H存在的一个或多个位置处富集²H或³H。在另一个方面中，当具有在此提出的任何化学式的化合物富集一种放射性同位素(例如，³H以及¹⁴C)时，该化合物可以用于药物和/或底物组织分布测定。应当理解的是，本申请涵盖了所有这类同位素形式。

具有式I的化合物或其药学上可接受的盐通常会经由口服途径以如下药物制剂形式施用，这些药物制剂包含活性成分或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或这样的盐的溶剂化物，呈药学上可接受的剂型。取决于待治疗的障碍和患者，组合物可以按不同剂量施用。

以上所述的具有式I的化合物的药物配制品可被制备用于口服施用，具体地呈片剂或胶囊形式，并且尤其涉及目的在于提供靶向结肠的药物释放的技术(Patel，M.M.Expert Opin.Drug Deliv.[关于药物递送的专家意见]2011，8(10)，1247-1258)。

上以上所述的具有式I的化合物的药物配制品可以方便地以单位剂型施用，并且可以通过制药领域中熟知的任何方法，例如如Remington′s Pharmaceutical Sciences[雷明顿药物科学]，第17版，MackPublishing Company，Easton，PA.[马克出版公司，伊斯顿，宾夕法尼亚州]，(1985)中所述的制备。

适于口服施用的药物配制品可以包含一种或多种生理上可相容的载体和/或赋形剂，并且可以是呈固体或液体的形式。片剂和胶囊可以用粘合剂、填充剂、润滑剂和/或表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)制备。液体组合物可以含有常规添加剂，如悬浮剂、乳化剂和/或防腐剂。液体组合物可以包封在例如明胶中以提供单位剂型。固体口服剂型包括片剂、两件式硬壳胶囊和软弹性明胶(SEG)胶囊。这种两件式硬壳胶囊可以例如通过将具有式(I)的化合物填充到明胶或羟丙基甲基纤维素(HPMC)壳中来制备。

干壳配制品典型地包含约40％至60％w/w浓度的明胶、约20％至30％浓度的增塑剂(如甘油、山梨糖醇或丙二醇)和约30％至40％浓度的水。也可以存在其他材料，如防腐剂、染料、遮光剂和调味剂。液体填充材料包括已经溶解、增溶或分散(使用悬浮剂进行，如蜂蜡、氢化蓖麻油或聚乙二醇4000)的固体药物或在媒介物或多种媒介物(如矿物油、植物油、甘油三酯、二醇、多元醇和表面活性试剂)的组合中的液体药物。

在治疗性治疗人类时，具有式I的化合物或其药学上可接受的盐的合适的每日剂量是约0.0001-100mg/kg体重。

口服配制品是优选的，特别是片剂或胶囊，其可以通过本领域技术人员已知的方法配制，以提供0.1mg至1000mg范围内的活性化合物的剂量。

附图说明

图1显示6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺形式B的X射线粉末衍射图

图2显示6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺形式B的DSC迹线

图3显示6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺形式D的X射线粉末衍射图

图4显示6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺形式D(ORTEP50)的单晶结构

图5显示6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺MSA盐形式C的X-射线粉末衍射图

图6显示6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺MSA盐形式C的DSC迹线

实例

现在将通过参考以下非限制性实例来进一步解释本申请的化合物。

一般实验条件

除非另有说明，否则使用Bruker 300MHz、400MHz或500MHz光谱仪，在27℃下获得¹H NMR光谱；化学位移以百万分率(ppm，δ单位)表示，并参考溶剂的残留单¹H同位素体(CHCl₃：7.24ppm；CHDCl₂：5.32ppm；CD₃S(＝O)CD₂H：2.49ppm)。耦合常数是以赫兹(Hz)为单位给出。分裂模式描述了明显的多重性，并被指定为s(单峰)、d(双峰)、t(三重峰)、q(四重奏)、m(多峰)和brs(宽峰)。LC-MS使用装有Waters SQD质谱仪的Waters UPLC或装有Shimadzu 2020质谱仪的Shimadzu LC-20AD LC-20XR LC-30AD进行。除非另有说明，否则报告的分子离子对应于[M+H]+；对于具有多个同位素模式的分子(Br、Cl等)，除非另有说明，否则报告的值是对于最低同位素质量获得的值。

使用以下进行快速色谱法：在来自Biotage^TM的SP1^TM纯化系统上、来自ISCO的

Rf或在来自赛默飞世尔公司(Thermo Fisher)的Gilson上，使用正相二氧化硅FLASH+^TM(40M、25M或12M)或SNAP^IM KP-Sil筒(340、100、50或10)、来自Agela的快速柱硅胶-CS柱，使用C18-快速柱的直相快速色谱法，或使用标准快速色谱法。通常，所有使用的溶剂都是可商购的并且是分析级的。无水溶剂常规用于反应。在这些实例中使用的相分离器是

相分离柱。使用来自先进化学发展股份有限公司(Advanced ChemistryDevelopment，Inc.)(ACD/实验室)的ACD/名称12.01来命名以下命名的中间体和实例。起始材料是从商业来源获得的或通过文献路线制备的。

X射线粉末衍射(XRPD)分析

XRPD分析使用Bruker D8衍射仪进行，该衍射仪可商购自布鲁克AXS公司(BrukerAXS Inc^TM)(麦迪逊，威斯康星州)。该XRPD光谱通过将用于分析的材料样品(约10mg)安装在单硅晶体晶片支架上(例如，布鲁克硅零背景X射线衍射样品架)并且借助于显微镜载片将该样品铺展成薄层获得。将该样品以30转/分钟旋转(以改善计数统计)并且用由在40kV和40mA下操作的铜制长细聚焦管产生的具有1.5406埃(即，约1.54埃)的波长的X射线来照射。以θ-θ模式中在从5°至40°的2-θ的范围内，使样品每0.02°的2-θ增量(连续扫描模式)暴露1秒。D8的运行时间为15min。

XRPD 2θ值可在合理的范围内变化，例如在±0.2°的范围内变化，并且当由于各种各样的原因(包括例如优选的方向)对基本上相同的结晶形式进行测量时XRPD强度可能变化。XRPD的原理被描述于出版物中，例如Giacovazzo，C.等人(1995)，Fundamentals ofCrystallography[晶体的基本原理]，Oxford University Press[牛津大学出版社]；Jenkins，R.和Snyder，R.L.(1996)，Introduction to X-RayPowder Diffractometry[对X射线粉末衍射的介绍]，John Wiley&Sons[约翰威利父子出版公司]，纽约；和Klug，H.P.&Alexander，L.E.(1974)，X-ray Diffraction Procedures[X-射线衍射程序]，John Wileyand Sons[约翰威利父子出版公司]，纽约。

DSC分析

对于根据标准方法制备的样品，使用可获得自TA

(纽卡斯尔，特拉华州)的Q SERIEST^M Q1000 DSC热量计进行DSC分析。将样品(大约2mg)称量到铝样品盘中并且转移到该DSC中。将该仪器用氮气以50mL/min吹扫并且使用10℃/分钟的动态加热速率收集在22℃与300℃之间的数据。将热数据使用标准软件(例如，来自TA

的通用v.4.5A)进行分析。

使用了以下缩写：AcOH＝乙酸；aq＝水性；BAST＝双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫；Boc₂O＝二碳酸二叔丁酯；Boc＝叔丁氧基羰基；CDCl₃＝氘代氯仿；CD₃OD＝氘代甲醇；CH₃NO₂＝硝基甲烷；DAST＝二乙基氨基三氟化硫；DCE＝1，2-二氯乙烷；DCM＝二氯甲烷；DDQ＝2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌；DEA＝二乙胺；DEAD＝偶氮二甲酸二乙酯；戴斯-马丁高碘烷＝1，1，1-三(乙酰基氧基)-1，1-二氢-1，2-苯碘酰-3-(1H)-酮；DIPEA＝N，N-二异丙基乙胺；DMAP＝2，6-二甲基氨基吡啶；DMF＝N，N-二甲基甲酰胺；DMSO＝二甲基亚砜；DMSO-d₆＝氘代二甲亚砜；DPPA＝叠氮磷酸二苯酯；dppf＝1，1′-双(联苯基膦基)二茂铁；DIAD＝二-异丙基(E)-二氮烯-1，2-二甲酸酯；DSC＝差示扫描量热法；DTAD＝二-叔丁基(E)-二氮烯-1，2-二甲酸酯；ee＝对映异构体过量；eq.＝当量；ESI或ES＝电喷射离子化；Et₂O＝二乙醚；EtOAc或EA＝乙酸乙酯；EtOH＝乙醇；FA＝甲酸；格拉布斯(Grubbs)催化剂(1，3-二三甲苯基咪唑啉-2-亚基)(三环己基膦)二氯化钌；h＝小时；HATU＝(二甲基氨基)-N，N-二甲基(3-氧化-1H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶基)甲亚胺离子六氟磷酸盐；HCl＝盐酸；H₂O₂＝过氧化氢；HP＝高压；IPA＝异丙醇；KF＝氟化钾；LC＝液相色谱；LiClO₄＝高氯酸锂；mmol＝毫摩尔；mCPBA＝间氯过氧苯甲酸；MeOH＝甲醇；min＝分钟；MeCN或CH3CN或ACN＝乙腈；MeNO₂＝硝基甲烷；MS＝质谱；NBS＝N-溴代琥珀酰亚胺；NH4Cl＝氯化铵；NMP＝N-甲基-2-吡咯烷酮；NMR＝核磁共振；Pd/C＝钯碳；Pd₂dba₃＝三(二苯亚甲基丙酮)二钯(0)；PdCl₂(dppf)＝1，1′-双(二-叔丁基膦基)二茂铁二氯化钯；PE＝石油醚；PPh₃＝三苯基膦；rt＝室温；Rt或RT＝保留时间；Ruphos Pd G3＝(2-二环己基膦基-2′，6′-二异丙氧基-1，1′-联苯基)[2-(2′-氨基-1，1′联苯基)]钯(II)甲磺酸酯；Pd-PEPPSI^TM-IPent＝二氯[1，3-双(2，6-二-3-戊基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)钯(II)，[1，3-双(2，6-二-3-戊基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)二氯钯(II)，[1，3-双(2，6-二-3-戊基苯基)咪唑-2-亚基](3-氯吡啶基)二氯化钯(II)；Xphos Pd G2＝氯(2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基-1，1′-联苯)[2-(2′-氨基-1，1′-联苯基)]钯(II)、X-Phos氨基联苯氯化钯；CataCXiumA-Pd-G2＝氯[(二(1-金刚烷基)-N-丁基膦)-2-(2-氨基联苯基)]钯(II)；sat＝饱和的；SFC＝超临界流体色谱法；T3P＝2，4，6-三丙基-1，3，5，2，4，6-三氧杂三磷杂环己烷2，4，6-三氧化物；PPh3O＝三苯基氧化膦；TBTU＝2-(1H-苯并[d][1，2，3]三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基异脲鎓四氟硼酸盐；TFA＝三氟乙酸；THF＝四氢呋喃；TLC＝薄层色谱法；TMS＝三甲基甲硅烷基；Xantphos＝4，5-双(联苯基膦基)-9，9-二甲基呫吨；CBr4＝四溴化碳；HBr＝氢溴酸；Cs2CO3＝碳酸铯；MgSO4＝硫酸镁；NaHCO3＝碳酸氢钠；DDQ＝2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌；SOCl2＝亚硫酰氯；DIBAL-H＝氢化二异丁基铝；NH4HCO3＝碳酸氢铵；BINAP＝2，2′-双(联苯基膦基)-1，1′-联萘基；SM＝起始材料；CH2Cl2＝二氯甲烷；Et3N＝三乙胺；HCO2H＝甲酸；LCMS＝液相色谱-质谱；N2＝二氮；Na2SO4＝硫酸钠；NH4CO3＝碳酸铵；UV＝紫外线；XPhos Pd G2＝氯(2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基-1，1′-联苯)[2-(2′-氨基-1，1′-联苯基)]钯(II)；Pd(OAc)2＝醋酸钯(II)，ppt＝沉淀。

实例的制备

中间体2：1-溴-4-氟-2-甲基-3-硝基-苯

在0℃下向1-氟-3-甲基-2-硝基-苯(10.7g，68.98mmol)(中间体1)在TFA(50mL)中的溶液中缓慢添加浓H₂SO₄(20mL)，然后分批添加NBS(13.50g，75.87mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌4小时。将所得混合物倒在冰上，通过过滤收集形成的沉淀，用水洗涤并真空干燥，得到呈白色固体的1-溴-4-氟-2-甲基-3-硝基苯(中间体2)(14.80g，92％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)2.43(3H，s)，7.03(1H，t)，7.68(1H，dd)。

中间体3：2-(4-溴-3-甲基-2-硝基-苯胺基)丙酸

将1-溴-4-氟-2-甲基-3-硝基-苯(13.8g，58.97mmol)(中间体2)、丙氨酸(6.30g，70.76mmol)和碳酸钾(24.45g，176.90mmol)在DMF(15mL)中的混合物在100℃下搅拌5小时，然后将温度升至110℃并搅拌5小时。将混合物倒在冰上，在0℃下用1M HCl水溶液(约300ml)缓慢淬灭得到黄色悬浮液。通过将固体通过过滤收集，用水洗涤并在真空烘箱中在50℃干燥2天，得到呈黄色固体的2-(4-溴-3-甲基-2-硝基-苯胺基)丙酸(14.03g，78％)(中间体3)(存在一些杂质)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.39(3H，d)，2.28(3H，s)，4.20(1H，quin)，6.12(1H，br d)，6.68(1H，d)，7.58(1H，d)，12.98(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝303。

中间体4：2-[4-溴-3-甲基-2-硝基-苯胺基)丙酸甲酯

在0℃下向2-(4-溴-3-甲基-2-硝基-苯胺基)丙酸(14.9g，49.16mmol)(中间体3)在MeOH(150mL)中的溶液中滴加亚硫酰氯(10.76mL，147.47mmol)，并将混合物在室温下搅拌过夜。LCMS指示完全转化。在0℃用饱和NaHCO₃水溶液(约300ml)缓慢淬灭反应混合物以得到橙色悬浮液。将固体通过过滤收集，用水洗涤并干燥，得到粗产物(14.6g)。将固体在硅胶柱上纯化(用0至25％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈亮橙色固体的2-(4-溴-3-甲基-2-硝基-苯胺基)丙酸甲酯(中间体4)(12.74g，82％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.52(3H，d)，2.43(3H，s)，3.76(3H，s)，4.14(1H，quin)，5.83(1H，br d)，6.45(1H，d)，7.48(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝317。

中间体5：7-溴-3，8-二甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃向2-(4-溴-3-甲基-2-硝基-苯胺基)丙酸甲酯(11.6g，36.58mmol)(中间体4)、锌(23.91g，365.77mmol)、氯化铵(19.56g，365.77mmol)在MeOH(100mL)中的搅拌混合物中添加小冰块(放热)。然后将反应混合物在0℃(冰浴)下搅拌15分钟。添加水(2mL)并将所得混合物在室温搅拌15分钟。亮橙色消失。将混合物通过滤纸过滤，用甲醇洗涤并将滤液真空浓缩。将残余物用乙酸乙酯稀释并依次用水和盐水洗涤。将有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩，得到2-(2-氨基-4-溴-3-甲基-苯胺基)丙酸甲酯和7-溴-3，8-二甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮的混合物(9.8g)。

在室温下向上述固体在MeOH(100mL)中的溶液中添加2ml 4MHCl的二噁烷溶液，并将混合物在室温下搅拌10分钟。再添加100ml甲醇(形成游离悬浮液)，所得悬浮液在室温下搅拌1小时。将混合物用醚(约200ml)稀释，将固体通过过滤收集并用醚洗涤。将滤液浓缩直至固体沉淀，将固体通过过滤收集。该程序重复数次以产生产物的第一部分7.2g。将滤液浓缩并在硅胶柱上纯化(用0至100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，浓缩产物级分，所得材料与上述材料合并，得到呈灰白色固体的7-溴-3，8-二甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(9.10g，98％)(中间体5)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.23(3H，d)，2.24(3H，s)，3.68(1H，q)，3.75(br，1H)，(6.54(1H，d)，7.00(1H，d)，9.77(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝255。

中间体6：7-溴-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮

在室温下将DDQ(8.91g，39.24mmol)添加至7-溴-3，8-二甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(9.1g，35.67mmol)(中间体5)在CH₂Cl₂(400mL)中的悬浮液中并且将混合物搅拌过夜。LCMS指示完全转化。减压除去溶剂，添加饱和NaHCO₃溶液(约300ml)溶液并将黄色悬浮液在室温搅拌4小时。将固体通过过滤收集并用水洗涤。将固体在饱和NaHCO₃(100ml)中浆化并在室温下搅拌1小时。将固体过滤，依次用水和醚洗涤并干燥，得到呈灰白色固体的7-溴-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮(7.29g，81％)(中间体6)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.40(3H，s)，2.50(3H，s)(与DMSO-d6峰重叠)，7.32-7.65(2H，m)，11.76(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝253。

中间体7：7-(羟基甲基)-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮

在80℃将(三丁基甲锡烷基)甲醇(1142mg，3.56mmol)、7-溴-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮(600mg，2.37mmol)(中间体6)和Xphos Pd G2(280mg，0.36mmol)在1，4-二噁烷(40mL)中的混合物搅拌18小时。减压除去溶剂，将残余物在硅胶柱上纯化(用0-15％甲醇的DCM溶液洗脱)得到呈灰白色固体的7-(羟基甲基)-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮(225mg，46％)(中间体7)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.31(3H，s)，2.40(3H，s)，4.58(2H，d)，5.22(1H，t)，7.33(1H，d)，7.52(1H，d)，11.53(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝205。

中间体8：7-(溴甲基)-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮

将在HBr(15ml，132.59mmol)(在水中48w％)中的7-(羟基甲基)-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮(223mg，1.09mmol)(中间体7)在80℃下搅拌3.5小时。减压除去溶剂，向残余物中添加二乙醚，超声处理混合物并收集固体以产生呈黄色固体的7-(溴甲基)-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮(408mg，107％)(中间体8)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.36-2.45(6H，m)，4.83(2H，s)，7.34(1H，d)，7.53(1H，d)，11.63(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝267，269。

实例1：5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N- 甲基-吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮，HBr(37mg，0.10mmol)(中间体8)的悬浮液中添加ACN(5ml)、6-氟-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(31.5mg，0.10mmol)(中间体32)和DIPEA(79μl，0.45mmol)并且将反应混合物在70℃搅拌1小时，得到浅黄色悬浮液。将悬浮液冷却至室温，添加1滴水，将固体通过过滤收集，用乙腈洗涤三次并干燥，得到呈黄色固体的5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.016g，33％)(实例1)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.07(3H，br s)，2.42(3H，br d)，2.56(4H，br s)，2.76(3H，br s)，3.14(4H，br s)，3.61(2H，br s)，7.23(1H，br d)，7.42-7.67(2H，m)，7.83(1H，br d)，8.38(1H，br s)，11.13-11.97(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝425。

实例2：5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基- 吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-3，8-二甲基喹喔啉-2(1H)-酮，HBr(240mg，0.69mmol)(中间体8)、N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(202mg，0.69mmol)(中间体31)在乙腈(13mL)中的悬浮液中添加DIPEA(0.723mL，4.14mmol)并将所得混合物在70℃搅拌3小时。将混合物浓缩并在反相上纯化(C18柱，用0至100％ACN/水(0.2％氢氧化铵)洗脱)，得到呈棕色固体的产物。将固体悬浮在DCM和MeOH(2∶1)的混合物中，浓缩以除去DCM，过滤固体并用甲醇洗涤。将固体悬浮在ACN(3ml)中，添加0.8ml 1M HCl的水溶液，用水(约3ml)稀释并冻干，得到产物5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.033g，11％)的HCl盐(实例2)。1HNMR(500 MHz，DMSO-d6)2.45(3H，s)，2.54(3H，s)，2.81(3H，br d)，3.24-3.56(6H，m)，3.88-4.02(2H，m)，4.54(2H，br s)，7.48-7.71(3H，m)，7.97(1H，br d)，8.33(1H，br d)，8.59(1H，br s)，11.28(1H，br s)，11.48-11.95(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝407。

实例3：6-氯-5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-l-基]-N- 甲基-吡啶-2-甲酰胺

将在AcOH中的HBr(2mL，0.18mmol)(33wt％)添加至7-(羟基甲基)-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮(36mg，0.18mmol)(中间体7)在NMP(2mL)中的溶液中。将所得混合物在100℃搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将DIPEA(0.25mL，1.43mmol)添加至6-氯-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(48mg，0.19mmol)(中间体30)在NMP(2mL)中的溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌18小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：YMC-Actus Triart C18，30*250，5μm；流动相A：水(0.05％NH₃H₂O)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：7min内从41B到61B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到6-氯-5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(33.0mg，42％)(实例3)，呈白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.41(3H，s)，2.43(3H，s)，2.54-2.62(4H，m)，2.78(3H，d)，3.05-3.11(4H，m)，3.62(2H，s)，7.24(1H，d)，7.51(1H，d)，7.65(1H，d)，7.92(1H，d)，8.41-8.45(1H，m)，11.56(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝441。

实例4：5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-44H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-l-基]-N，6-二 甲基-吡啶-2-甲酰胺

将HBr的AcOH(2mL，12.15mmol)(33wt％)溶液添加7-(羟基甲基)-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮(43mg，0.21mmol)(中间体7)在NMP(2mL)中的溶液中。将所得混合物在80℃搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。向所得固体在NMP(3mL)中的溶液中添加DIPEA(0.25mL，1.43mmol)和N，6-二甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(42mg，0.18mmol)(中间体33)。将所得混合物在100℃下搅拌18小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：YMC-Actus Triart C18，30*250，5μm；使用乙腈中的水(0.05％NH₄OH。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例4)(18.40mg，24％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.40(3H，s)，2.43(3H，s)，2.48(3H，s)，2.55-2.63(4H，m)，2.79(3H，d)，2.87-2.94(4H，m)，3.62(2H，s)，7.24(1H，d)，7.46(1H，d)，7.51(1H，d)，7.78(1H，d)，8.39-8.44(1H，m)，11.56(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝421。

中间体10：5-溴-6-氟-吡啶-2-甲酸甲酯

将在乙腈(300ml)中的5-溴吡啶甲酸甲酯(中间体9)(24g，111.09mmol)装入干燥的烧瓶，添加氟化银(II)(50g，342.78mmol)，将混合物在室温下在N₂下搅拌1天。LCMS指示转化率约为70％。添加另一批AgF2(16g)并将所得混合物在室温下继续搅拌过夜。将混合物通过硅藻土过滤，先后用乙腈和DCM洗涤，浓缩滤液，得到浅棕色固体。将残余物在DCM和饱和NH₄Cl溶液之间分配，得到白色悬浮液。滤出固体并丢弃。将滤液转移至分液漏斗，分离有机层，将水层用乙酸乙酯(150ml x 3)萃取。将有机物合并，干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩直至固体沉淀出来。将固体通过过滤收集，用醚洗涤，干燥得到片状灰白色固体。再次浓缩合并的滤液，将固体通过过滤收集，得到合并的19.96g产物。将剩余的滤液浓缩并在硅胶柱上纯化(用0至25％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)以产生呈白色片状固体的所需产物的第二部分3.5g。合并所有材料以产生5-溴-6-氟-吡啶-2-甲酸甲酯(23.46g，90％)(中间体10)。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)3.89(3H，s)，7.93(1H，d)，8.51(1H，t)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝234。

中间体11；4-(2-氟-6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-]-甲酸叔丁酯

将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(28.0g，150.37mmol)、5-溴-6-氟-吡啶-2-甲酸甲酯(中间体10)(23.46g，100.25mmol)、RuPhos Pd G3(5.45g，6.52mmol)和Cs₂CO₃(82g，250.61mmol)在1，4-二噁烷(400mL)中的混合物在80℃在N₂下搅拌过夜。将反应混合物用水(250ml)稀释并用乙酸乙酯(250ml)萃取。将有机层用盐水洗涤，将水层用乙酸乙酯(100ml x 1)萃取，将有机物干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)得到呈黄色固体的产物，将固体从乙酸乙酯/己烷中重结晶，过滤，用己烷洗涤，干燥得到呈结晶白色固体的产物(24.8g)；将滤液浓缩并在硅胶柱上再纯化以产生更多的产物1.9g。总共得到4-(2-氟-6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体11)(26.7g，78％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.51(9H，s)，3.12-3.28(4H，m)，3.48-3.67(4H，m)，3.98(3H，s)，7.27(1H，d)，7.99(1H，dd)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝340。

中间体12：6-氟-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酸甲酯

向4-(2-氟-6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.9g，5.60mmol)(中间体11)在MeOH(10ml)中的混合物在室温下添加在二噁烷(10mL，40.00mmol)中的HCl 4M并将所得混合物在室温下搅拌1小时。将混合物用醚稀释，将固体通过过滤收集，用醚洗涤并真空干燥，得到呈白色固体的6-氟-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酸甲酯(1.360g，78％)(中间体12)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)3.24(4H，br s)，3.46(4H，br s)，3.84(3H，s)，7.65(1H，brt)，7.94(1H，br d)，9.43(2H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝240。

中间体13：5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6- 氟-吡啶-2-甲酸甲酯

将在HBr(15ml，132.59mmol)(在水中48w％)中的7-(羟基甲基)-3，8-二甲基喹喔啉-2(1H)-酮(223mg，1.09mmol)(中间体7)在80℃下搅拌3.5小时。减压除去溶剂，向残余物中添加DCM并浓缩，得到呈黄色固体的7-(溴甲基)-3，8-二甲基喹喔啉-2(1H)-酮。

在室温下向上述固体在乙腈(20ml)中的溶液中添加6-氟-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酸甲酯、2HCl(260mg，0.83mmol)(中间体12)和DIPEA(1.907ml，10.92mmol)，并将反应混合物在70℃下搅拌2小时。将混合物冷却至室温，添加0.5ml水，将固体通过过滤收集并用乙腈洗涤。干燥固体得到灰白色固体，为5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-吡啶-2-甲酸甲酯(0.371g，80％)(中间体13)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.42(6H，m)，2.52-2.59(4H，m)，3.20(4H，br d)，3.61(2H，s)，3.82(3H，s)，7.23(1H，d)，7.41-7.59(2H，m)，7.91(1H，d)，11.55(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝426。

实例5：5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-吡 啶-2-甲酰胺

在密封的40ml小瓶中装入5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-吡啶-2-甲酸甲酯(360mg，0.85mmol)(中间体13)和氨(15ml，105.00mmol，在甲醇中7N)并将混合物在50℃下搅拌过夜。LCMS指示仍有一些起始材料剩余。将混合物浓缩，向固体中添加10ml 7N氨的甲醇溶液，并将混合物在50℃下搅拌4小时，得到白色悬浮液。将固体通过过滤收集，用己烷洗涤并干燥，得到呈白色固体的5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-吡啶-2-甲酰胺(实例5)(340mg，98％)。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)2.40(3H，s)，2.43(3H，s)，2.56(4H，br s)，3.14(4H，brs)，3.61(2H，s)，7.23(1H，d)，7.46(1H，br s)，7.48-7.58(2H，m)，7.76(1H，br s)，7.84(1H，br d)，11.11-11.70(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411。

中间体15：4-(6-甲氧基羰基-2-甲基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

在装有隔垫盖的40mL小瓶中装入5-溴-6-甲基吡啶甲酸甲酯(中间体14)(2g，8.69mmol)、哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.24g，17.39mmol)，Cs₂CO₃(5.66g，17.39mmol)和RuphosPd G3(0.727g，0.87mmol)。在真空下将反应小瓶抽真空并填充氮气。添加1，4-二噁烷(20mL)，并将反应小瓶置于预热至80℃的加热块中并搅拌16小时。将反应混合物冷却，用水稀释并用乙酸乙酯萃取，将有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物在硅胶柱上纯化(用0至50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈淡黄色固体的4-(6-甲氧羰基-2-甲基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体15)(2.090g，72％)。1H NMR(500MHz，二氯甲烷-d2)1.49(9H，s)，2.59(3H，s)，2.88-3.00(4H，m)，3.55-3.65(4H，m)，3.92(3H，s)，7.32(1H，d)，7.92(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝336。

中间体16：6-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酸甲酯

将在1，4-二噁烷中的4M氯化氢(31.2ml，124.63mmol)添加到4-(6-(甲氧基羰基)-2-甲基吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体15)(4.18g，12.46mmol)在DCM(30mL)中的搅拌溶液中，并且将所得溶液在室温下搅拌18小时。真空除去溶剂，将所得固体在二乙醚中浆化，将固体通过过滤收集，得到呈淡黄色固体的6-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酸甲酯(中间体16)(3.80g，99％)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝236。

中间体18：5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6- 甲基-吡啶-2-甲酸甲酯

在室温将三苯基膦(1.584g，6.04mmol)(添加4.4g，基于1.6mmol/g的PPh3负载量计算)添加到8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(419mg，2.01mmol)(中间体17)和全溴甲烷(1.335g，4.03mmol)在DCM(40mL)中的搅拌浆液中。将所得混合物搅拌1h。过滤反应混合物，用DCM和THF洗涤，真空浓缩滤液，得到呈淡黄色固体的7-(溴甲基)-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮。

向上述新鲜制备的7-(溴甲基)-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮在乙腈(25mL)中的浆液中添加6-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酸甲酯，2HCl(590mg，1.91mmol)(中间体16)和N-乙基-N-异丙基丙烷-2-胺(1754μl，10.07mmol)并将反应加热至70℃保持1小时。将反应混合物冷却至室温，浓缩，并用饱和NaHCO₃水溶液淬灭并搅拌1小时。通过过滤分离固体并用水洗涤。将粗固体在二氧化硅胶柱色谱上纯化(使用在DCM中的0-10％MeOH)，得到5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酸甲酯(中间体18)(0.263g，31％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.40-2.49(6H，m)，2.62(4H，br s)，2.97(4H，br s)，3.72(2H，s)，3.83(3H，s)，7.30(1H，t)，7.44(1H，d)，7.52(1H，d)，7.85(1H，d)，12.45(1H，br s)；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.54(1F，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝426。

实例6：5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲 基-吡啶-2-甲酰胺

将在甲醇中的7N氨(16.47ml，115.26mmol)添加到在40mL闪烁小瓶中的5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酸甲酯(中间体18)(0.2452g，0.58mmol)，密封并在室温搅拌18小时。将另外的7N NH₃溶液(15mL)添加到反应混合物中并在50℃下搅拌过夜。将反应真空浓缩，在5mL MeOH中浆化。滤出固体，用甲醇洗涤并干燥，得到呈灰白色固体的5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例6)(0.151g，64％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.42(3H，s)，2.45-2.49(3H，m)，2.52-2.69(4H，m)，2.94(4H，br s)，3.71(2H，s)，7.29(1H，t)，7.40-7.54(3H，m)，7.77-7.84(2H，m)，12.43(1H，br s)；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.53(1F，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411。

中间体19：5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲 基-吡啶-2-甲酸甲酯

将在HBr(15ml，132.59mmol)(在水中48w％)中的7-(羟基甲基)-3，8-二甲基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体7)(223mg，1.09mmol)在80℃下搅拌4小时。减压除去溶剂，向残余物中添加DCM，将混合物超声处理并浓缩，得到呈黄色固体的7-(溴甲基)-3，8-二甲基喹喔啉-2(1H)-酮。

向上述在乙腈(20ml)中的浆液中添加6-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酸甲酯，2HCl(中间体16)(337mg，1.09mmol)和DIPEA(1.907ml，10.92mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时，得到澄清溶液。将所得混合物冷却至室温，除去一半溶剂，添加0.5ml水。将固体通过过滤收集，用乙腈洗涤并干燥，得到黄色固体。将该固体在硅胶柱上纯化(用0-20％甲醇的DCM溶液洗脱)以得到呈灰白色固体的5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酸甲酯(中间体19)(213mg，46％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.41(3H，s)，2.43(3H，s)，2.47(3H，s)，2.58(4H，br s)，2.95(4H，br s)，3.63(2H，s)，3.82(3H，s)，7.24(1H，d)，7.43(1H，d)，7.51(1H，d)，7.84(1H，d)，11.55(1H，s)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝422。

实例7：5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基- 吡啶-2-甲酰胺

在密封的40ml小瓶中装入5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酸甲酯(中间体19)(210mg，0.50mmol)和氨(15ml，105.00mmol，在甲醇中的7N)并将反应在50℃下搅拌过夜。反应不完全。浓缩混合物，向该固体中添加10ml在甲醇中的7N氨。将小瓶加盖并在50℃下搅拌4小时，得到白色悬浮液。将混合物冷却至室温，将固体通过过滤收集，用己烷洗涤并干燥，得到呈白色固体的5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例7)(191mg，94％)。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)2.41(3H，s)，2.44(3H，s)，2.49(3H，s)，2.58(4H，brs)，2.92(4H，br s)，3.63(2H，br s)，7.24(1H，br d)，7.42(1H，br s)，7.46(1H，br d)，7.51(1H，br d)，7.79(2H，br d)，10.53-11.23(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝407。

中间体21：2-氨基丁酸甲酯

在冰浴中冷却2-氨基丁酸(中间体20)(5g，48.49mmol)在甲醇(35mL)中的浆液。在0℃下将亚硫酰氯(11mL，150.72mmol)滴加到上述混合物中。使反应加温至室温并搅拌过夜。将澄清溶液浓缩至干以获得残余物。将所得固体悬浮在醚中，过滤，用醚洗涤并干燥，得到呈白色固体呈HCl盐形式的2-氨基丁酸甲酯.HCl(中间体21)(7.35g，99％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)0.92(3H，t)，1.76-1.93(2H，m)，3.75(3H，s)，3.95-4.05(1H，m)，8.53(3H，br s)。

中间体23：2-(4-溴-3-氯-2-硝基-苯胺基)丁酸甲酯

在烧瓶中装入在1，4-二噁烷(30mL)中的2-氨基丁酸甲酯，HCl(中间体21)(1.811g，11.79mmol)、1-溴-2-氯-4-氟-3-硝基苯(中间体22)(2.0g，7.86mmol)，添加DIPEA(8.24mL，47.16mmol)并将混合物在105℃下搅拌24小时。将混合物浓缩，并将残余物在硅胶柱上纯化(用0至50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈亮黄色油状物的2-(4-溴-3-氯-2-硝基-苯胺基)丁酸甲酯(中间体23)(2.100g，76％)，静置后变成黄色固体。1H NMR(500MHz，氯仿-d)0.99(3H，t)，1.78-1.89(1H，m)，1.91-2.02(1H，m)，3.77(3H，s)，4.04(1H，q)，5.63(1H，br d)，6.55(1H，d)，7.52(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝351。

中间体24：7-溴-8-氯-3-乙基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮

将连二亚硫酸钠(3.05g，17.49mmol)添加到2-(4-溴-3-氯-2-硝基-苯胺基)丁酸甲酯(中间体23)(2.05g，5.83mmol)在DMSO(50mL)中的搅拌混合物中，并将混合物在120℃搅拌3小时。用水淬灭混合物并用乙酸乙酯(50ml x 2)萃取。将有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤，浓缩，将残余物在硅胶柱上纯化(在己烷中的0至55％乙酸乙酯)，得到峰1，即呈浅黄色固体的7-溴-8-氯-3-乙基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体25)(0.319g，19％)。1H NMR(500 MHz，甲醇-d4)1.31(3H，t)，2.89(2H，q)，7.56-7.67(2H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝287，289

和峰2，即呈黄色油状物的7-溴-8-氯-3-乙基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体24)(0.895g，53％)，放置后变成黄色固体。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.04(3H，t)，1.75-1.84(1H，m)，1.85-1.93(1H，m)，3.89(1H，dd)，6.51(1H，d)，7.12(1H，d)，7.82(1H，br s)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝289，291。

中间体25：7-溴-8-氯-3-乙基-1H-喹喔啉-2-酮

在室温将DDQ(772mg，3.40mmol)添加至7-溴-8-氯-3-乙基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体24)(895mg，3.09mmol)在1，4-二噁烷(20mL)中的混合物中，所得悬浮液在室温下搅拌3小时。LCMS指示完全转化。减压除去溶剂，将残余物用饱和NaHCO₃溶液处理，在室温下搅拌2小时。将固体通过过滤收集，用饱和NaHCO₃溶液、水洗涤并干燥，得到呈灰白色固体的7-溴-8-氯-3-乙基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体25)(780mg，88％)。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)1.31(3H，t)，2.89(2H，q)，7.56-7.67(2H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝287，289。

中间体26：8-氯-3-乙基-7-乙烯基-1H-喹喔啉-2-酮

将7-溴-8-氯-3-乙基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体25)(1.05g，3.65mmol)、三丁基(乙烯基)锡烷(1.737g，5.48mmol)和Pd(PPh₃)₄(0.422g，0.37mmol)在甲苯(50mL)中的混合物在110℃下在N2下搅拌2小时。LCMS指示剩余约44％的起始材料。将混合物在该温度下继续搅拌4.5小时，然后在80℃下搅拌过夜。将混合物浓缩，在硅胶柱上纯化(用0至100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)以产生低溶解性的呈浅黄色固体的所需产物8-氯-3-乙基-7-乙烯基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体26)(0.850g，99％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝235(产物被PPh₃O污染)。

中间体27：5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛

将在H₂O中的四氧化锇(0.568mL，0.07mmol)添加到8-氯-3-乙基-7-乙烯基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体26)(850mg，3.62mmol)、2，6-二甲基吡啶(0.844mL，7.24mmol)和高碘酸钠(3099mg，14.49mmol)在THF(50mL)/水(10mL)/叔丁醇(3.46mL，36.22mmol)中的溶液中并在室温下搅拌过夜，得到黄色悬浮液。将反应浓缩，在水、饱和NH₄Cl溶液和DCM之间分配，并分离各层。用DCM萃取水层，干燥合并的有机层(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将残余物在硅胶柱上纯化(用0至50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈淡黄色固体的5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(中间体27)(808mg，94％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.34-1.42(3H，m)，3.03(2H，q)，7.88(2H，d)，8.99-9.38(1H，m)，10.54(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝237。

中间体28：8-氯-3-乙基-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮

将在MeOH(30mL)中的5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(中间体27)(808mg，3.41mmol)冷却至0℃，然后将硼氢化钠(1292mg，3.41mmol)(在碱性氧化铝上10wt％)以一份添加。将反应混合物在0℃继续搅拌40min。LCMS指示剩余一些起始材料。将另外213mg的NaBH₄(10wt％)添加到该混合物中，并在0℃下继续搅拌10分钟。向混合物中添加1ml水，浓缩，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至25％甲醇的DCM溶液洗脱)，得到8-氯-3-乙基-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体28)(625mg，77％)(被26％的过度还原副产物污染)。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)1.27-1.34(3H，m)，2.91(2H，q)，4.79-4.82(2H，m)，7.54(1H，d)，7.75(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝239。

中间体29：7-(溴甲基)-8-氯-3-乙基-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃将四溴化碳(1612mg，4.86mmol)以一份添加至8-氯-3-乙基-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体28)(580mg，2.43mmol)和三苯基膦(1275mg，4.86mmol)在CH₂Cl₂(40mL)中的溶液中并且将混合物在0℃下搅拌1小时。LCMS指示完全转化。减压除去溶剂，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈白色固体的纯的7-(溴甲基)-8-氯-3-乙基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体29)(200mg，27％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.83(2H，q)，4.85(2H，s)，7.51(1H，d)，7.71(1H，d)，11.89(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝301，303。

实例8：6-氯-5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]- N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.058mL，0.33mmol)添加到7-(溴甲基)-8-氯-3-乙基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体29)(25mg，0.08mmol)和6-氯-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(中间体30)(27.2mg，0.08mmol)在乙腈(4mL)中的搅拌悬浮液中并且将所得混合物在70℃搅拌1.5小时，得到悬浮液。LCMS指示完全转化。减压除去溶剂并进行分析纯化组，纯化后得到呈黄色固体的6-氯-5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例8)(24.00mg，61％)。纯化条件(非手性)：柱(Xbridge C18 19mm x100mm 5μm，流动相A：H₂O，含0.2％NH₄OH pH 10，流动相B：乙腈；梯度B％：经8分钟13％-95％B；流速：20ml/min；浓度：在DMSO中35mg/ml；加载(mg/注射)：15；柱温：室温。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.23(3H，t)，2.66(4H，br s)，2.76-2.92(5H，m)，3.13(4H，br s)，3.77(2H，s)，7.44(1H，d)，7.69(2H，dd)，7.94(1H，d)，8.43(1H，q)，10.75-11.45(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝475。

实例9：5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-l-基]-6-氟- N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.116mL，0.66mmol)添加到6-氟-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(中间体32)(51.6mg，0.17mmol)和7-(溴甲基)-8-氯-3-乙基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体29)(50mg，0.17mmol)在乙腈(4mL)中的搅拌悬浮液中并且将所得混合物在70℃搅拌1.5小时。LCMS指示完全转化。在减压下除去溶剂并在硅胶柱上纯化残余物(用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)以得到产物和PPh3O的混合物。材料提交用于分析组进行纯化，纯化后得到呈黄色固体的5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例9)(47.0mg，62％)。纯化条件(非手性)：柱(Xbridge C1819mm x 100mm5μm，流动相A：H₂O，含0.2％NH₄OH pH 10，流动相B：乙腈；梯度B％：经8分钟13％-95％B；流速：20ml/min；浓度：在DMSO中35mg/ml；加载(mg/注射)：15；柱温：室温。

1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.63(4H，br s)，2.76(3H，d)，2.82(2H，q)，3.19(4H，br s)，3.75(2H，s)，7.43(1H，d)，7.52-7.64(1H，m)，7.70(1H，d)，7.84(1H，d)，8.39(1H，q)，11.17-11.55(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝459。

实例10：5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲 基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.081mL，0.46mmol)添加至N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(中间体31)(34.0mg，0.12mmol)和7-(溴甲基)-8-氯-3-乙基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体29)(35mg，0.12mmol)在乙腈(4mL)中的搅拌悬浮液中并且将所得混合物在70℃搅拌1.5小时。LCMS指示完全转化。减压除去溶剂，将所得残余物送至分析组进行纯化，纯化后得到呈白色固体的5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例10)(13.00mg，20％)。纯化条件(非手性)柱(Xbridge C1819mm x 100mm 5μm，流动相A：H₂O，含0.2％NH₄OH pH 10，流动相B：乙腈；梯度B％经8分钟13％-95％B；流速：20ml/min；浓度：在DMSO中35mg/ml；加载(mg/注射)：15；柱温：室温。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.24(3H，t)，2.79(3H，d)，2.86(2H，q)，3.22-3.37(8H，m，合并入水峰中)，4.39-4.65(2H，m)，7.46(1H，dd)，7.57(1H，br d)，7.79-7.90(2H，m)，8.32(1H，d)，8.43(1H，br d)，11.87-12.21(1H，m)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝441。

实例11：5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N6-二 甲基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.111mL，0.64mmol)添加至N，6-二甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(中间体33)(48.9mg，0.16mmol)和7-(溴甲基)-8-氯-3-乙基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体29)(48mg，0.16mmol)在乙腈(10mL)中的搅拌悬浮液中并且将所得混合物在70℃下搅拌2小时，得到悬浮液。LCMS指示完全转化。将混合物冷却至室温，将固体通过过滤收集、用水洗涤并干燥，得到呈白色固体的5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例11)(42.0mg，58％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.65(4H，br s)，2.78-2.88(5H，m)，2.95(4H，br s)，3.38(3H，s，与水峰重叠)，3.76(2H，s)，7.47(2H，dd)，7.71(1H，d)，7.79(1H，d)，8.42(1H，br d)，11.59-11.99(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝455。

中间体35：1-溴-2，4-二氟-3-硝基-苯

将1，3-二氟-2-硝基苯(中间体34)(19.5g，122.57mmol)和NBS(26.2g，147.08mmol)在硫酸(150mL)中的混合物在80℃搅拌过夜。LCMS指示完全转化。将混合物冷却至室温并缓慢倒在冰上。将该混合物用乙酸乙酯(200ml)萃取，将有机层用水(50ml x2)、饱和NaHCO₃溶液(50ml x 2)、盐水洗涤，干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将残余物在硅胶柱上纯化(用0至20％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈淡黄色油状物的1-溴-2，4-二氟-3-硝基-苯(中间体35)(26.8g，92％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)7.42-7.73(1H，m)，8.06-8.26(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝238。

中间体36：2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-3-羟基-丁酸甲酯

在室温下将DIPEA(8.56mL，48.99mmol)缓慢添加到1-溴-2，4-二氟-3-硝基-苯(中间体35)(5.3g，22.27mmol)和2-氨基-3-羟基丁酸甲酯HCl(4.53g，26.72mmol)在1，4-二噁烷(50mL)中的搅拌溶液中，并将所得混合物在40℃下搅拌3小时。LCMS指示剩余一些起始材料。向混合物中添加800mg DL-苏氨酸甲酯HCl盐，然后将混合物在40℃下继续搅拌过夜。减压除去溶剂，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈亮橙色固体的2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-3-羟基-丁酸甲酯(中间体36)(4.69g，60％)。(HNMR指示它是非对映异构体的混合物)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.30-1.44(3H，m)，3.81(3H，s)，4.00-4.22(1H，m)，4.22-4.48(1H，m)，6.32-6.68(1H，m)，7.40-7.66(2H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝351，353。

中间体37：2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-3-氟-丁酸甲酯

在0℃将DAST(0.919mL，6.95mmol)在10分钟内缓慢添加到2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-3-羟基-丁酸甲酯(中间体36)(2.22g，6.32mmol)在CH₂Cl₂(40mL)中的混合物中，将混合物在0℃搅拌20分钟。LCMS和TLC显示起始材料剩余。向混合物中添加0.4mlDAST并将反应再搅拌10分钟。将混合物用饱和NaHCO₃溶液淬灭并用DCM萃取。将有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩，得到黄色油状物。将所得残余物在硅胶柱上纯化(用0至30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到峰2，为呈黄色油状物的2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-3-氟-丁酸甲酯(1.110g，50％)(中间体37)，和峰4，为起始材料2-((4-溴-3-氟-2-硝基苯基)氨基)-3-羟基丁酸甲酯(0.300g，13％)以及其他副产物。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.37-1.51(3H，m)，2.80-2.93(0.5H，m)，3.00(0.5H，br d)，3.75(1.5H，s)，3.85(1.5H，s)，4.40-4.56(0.5H，m)，5.01-5.23(0.5H，m)，6.43-6.58(0.5H，m)，6.71-6.74(0.5H，m)，7.38-7.69(2H，m)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝353。

中间体38：7-溴-8-氟-3-(1-氟乙基)-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮

向2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-3-氟-丁酸甲酯(中间体37)(1.11g，3.14mmol)、锌(2.466g，37.72mmol)和氯化铵(3.36g，62.87mmol)在MeOH(20mL)中的混合物中添加水(2mL)并将混合物在室温搅拌10分钟。橙色消失(放热)，LCMS显示完全转化。过滤混合物，用甲醇洗涤固体并浓缩滤液。将所得残余物溶解在DCM中，将有机层用水洗涤，干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩，得到粗产物。将残余物在硅胶柱上纯化(0至30％乙酸乙酯的己烷溶液)，得到呈淡黄色固体的2-((2-氨基-4-溴-3-氟苯基)氨基)-3-氟丁酸甲酯(0.533g，52％)。

将上述黄色固体溶解在15ml甲醇中，添加0.51M HCl的甲醇溶液并将反应在室温下搅拌4小时。LCMS指示完全转化。除去溶剂，并且将残余物用DCM/甲醇(5∶1)稀释。将有机层用50％NaHCO₃溶液洗涤一次，干燥(无水Na₂SO₄)并浓缩。将残余物在硅胶柱上纯化(用0至31％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈白色固体的7-溴-8-氟-3-(1-氟乙基)-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体38)(0.337g，37％)。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)1.27-1.46(3H，m)，4.26(1H，dd)，4.90-5.12(1H，m)，6.50(1H，dd)，6.97(1H，dd)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝291,293。

中间体39：7-溴-8-氟-3-(1-氟乙基)-1H-喹喔啉-2-酮

将DDQ(289mg，1.27mmol)添加7-溴-8-氟-3-(1-氟乙基)-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体38)(337mg，1.16mmol)在CH₂Cl₂(10mL)中的浆液中并且将混合物在室温下搅拌2小时。减压除去溶剂，将残余物用饱和NaHCO₃溶液(约20ml)稀释并将悬浮液在室温下搅拌3小时。将固体通过过滤收集，用水洗涤并干燥以得到呈白色固体7-溴-8-氟-3-(1-氟乙基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体39)(333mg，100％)。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)1.65-1.84(3H，m)，5.87-6.18(1H，m)，7.50-7.60(1H，m)，7.61-7.78(1H，m)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝289，291。

中间体40：8-氟-3-(1-氟乙基)-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮

将Pd-PEPPSI^TM-IPent催化剂(26mg，0.03mmol)、(三丁基甲锡烷基)甲醇(1638mg，5.10mmol)和7-溴-8-氟-3-(1-氟乙基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体39)(590mg，2.04mmol)在1，4-二噁烷(25mL)中的混合物脱气，用N₂回填，并将混合物在80℃搅拌17小时。将混合物浓缩，并将残余物在硅胶柱上纯化(用0至50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱(以回收剩余的SM)然后用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)，得到8-氟-3-(1-氟乙基)-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体40)(282mg，57％)。1H NMR(500 MHz，DMSO-d6)1.58-1.81(3H，m)，4.67(2H，brd)，5.46(1H，br t)，5.87-6.24(1H，m)，7.33-7.48(1H，m)，7.65(1H，br d)，12.65-12.83(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝241。

中间体41：7-(溴甲基)-8-氟-3-(1-氟乙基)-1H-喹喔啉-2-酮

将三苯基膦(1223mg，4.66mmol)和8-氟-3-(1-氟乙基)-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(280mg，1.17mmol)(中间体40)在CH₂Cl₂(15mL)中的悬浮液冷却至0℃，添加四溴化碳(1546mg，4.66mmol)，混合物立即变为澄清紫色，将混合物在该温度下继续搅拌10分钟，混合物变成黄色溶液，通过LCMS检查指示完全转化(不是很干净)，将混合物浓缩，在硅胶柱上纯化(用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)得到主峰，为7-(溴甲基)-8-氟-3-(1-氟乙基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体41)，其被一些杂质污染。浓缩得到2.5g固体(理论质量为353mg，假设100％产率可用于下一步)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝303，305。

实例12和实例13：6-氟-5-[4-[[5-氟-2-[(1S和1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔 啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.265mL，1.52mmol)添加至7-(溴甲基)-8-氟-3-(1-氟乙基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体41)(115mg，0.38mmol)和6-氟-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(94mg，0.30mmol)(中间体32)在乙腈(20mL)中的混合物中并将所得混合物在70℃下搅拌1小时。LCMS指示完全转化。浓缩混合物，将残余物溶于DMSO(约4ml)中并在C18反相柱上纯化(用0至100％ACN/水/0.1％TFA洗脱)。合并含有产物的级分并冻干。在吉尔森(Gils○n)上对材料进行再纯化(用0至80％ACN/水/0.1％TFA洗脱)得到产物6-氟-5-[4-[[5-氟-2-[(1S和1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺。对映异构体通过手性柱分离。手性纯化条件：柱信息：chiralpak OD 4.6mm x 100mm 5μm，流动相A：CO₂(100％)，流动相B：含0.2％NH₄OH的甲醇，在6分钟内等度25％B，流速：4.0ml/min，稀释剂：甲醇，柱温：室温，出口压力(SFC)：N/A。

峰1：用水和ACN稀释白色固体。添加0.1mL 0.5M HCl水溶液并将混合物冻干得到呈HCl盐的异构体1，6-氟-5-[4-[[5-氟-2-[(1S或1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例12，未确定绝对立体化学)(5.42mg，10.90μmol，3％)，呈HCl盐呈黄色固体。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.54-1.73(3H，m)，2.70-2.87(3H，m)，3.53-3.90(8H，m)，4.57(2H，br s)，5.79-6.21(1H，m)，7.59-7.81(3H，m)，7.87(1H，d)，8.43(1H，br d)，11.40-11.85(1H，m)，12.78-13.14(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝461，＞95％ee。

峰2：用水和ACN稀释白色固体。添加0.1mL 0.5M HCl水溶液并将混合物冻干得到呈HCl盐的异构体2，6-氟-5-[4-[[5-氟-2-[(1S或1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例13，未确定绝对立体化学)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.49-1.83(3H，m)，2.77(3H，br d)，3.46-3.91(8H，m)，4.56(2H，br s)，5.80-6.26(1H，m)，7.52-7.80(3H，m)，7.87(1H，br d)，8.43(1H，br d)，11.44-11.82(1H，m)，12.77-13.24(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝461，＞95％ee。

实例14和实例15：5-[4-[[5-氟-2-[(1S和1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔啉-6- 基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-8-氟-3-(1-氟乙基)喹喔啉-2(1H)-酮(中间体41)(138mg，0.41mmol)和N，6-二甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(126mg，0.41mmol)(中间体33)在乙腈(13mL)中的悬浮液中添加DIPEA(429μl，2.46mmol)并且将所得混合物在70℃搅拌3小时。LCMS指示完全转化。将反应浓缩并将残余物在硅胶柱上纯化(用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)得到呈淡黄色固体的外消旋产物5-[4-[[5-氟-2-[(1S/1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(169mg)。通过手性分离来分离对映异构体。手性纯化条件：柱信息：chiralpak OD 21.2mm x 250mm 5μm，流动相A：CO₂(100％)，流动相B：含0.2％NH₄OH的甲醇，等度：在12分钟内25％B，流速：70.0ml/min，浓度：8.45mg/ml甲醇溶液，加载：4.23mg/注射，柱温：室温，出口压力(SFC)：N/A。

手性分离后，每种异构体在反相柱上再纯化(用0-60％ACN/水/0.2％氢氧化铵洗脱)得到；

峰1：呈白色固体的5-[4-[[5-氟-2-[(1S或1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，异构体1(实例14，未确定绝对立体化学)(30.7mg，0.067mmol，16％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.40-1.70(3H，m)，2.48(3H，s)，2.54-2.69(4H，m)，2.79(3H，d)，2.94(4H，br s)，3.74(2H，s)，5.83-6.22(1H，m)，7.17-7.41(1H，m)，7.47(1H，d)，7.65(1H，d)，7.78(1H，d)，8.40(1H，br d)，11.65-12.88(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝457；＞98％ee。

峰2：呈白色固体的5-[4-[[5-氟-2-[(1S或1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，异构体2(实例15，未确定绝对立体化学)(37mg，0.081mmol，20％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.68-1.88(3H，m)，2.51(3H，s)，2.71(4H，br s)，2.86-3.12(7H，m)，3.81(2H，s)，5.92-6.29(1H，m)，7.34(1H，d)，7.44(1H，t)，7.76(1H，d)，7.95(1H，br d)，7.99(1H，d)，10.24(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝457；94.5％ee。

中间体43：2-(4-溴-3-氯-2-硝基-苯胺基)丙酸甲酯

在烧瓶中装入在1，4-二噁烷(70mL)中的丙氨酸甲酯，HCl(中间体42)(1.851g，13.26mmol)和1-溴-2-氯-4-氟-3-硝基苯(中间体22)(2.25g，8.84mmol)。添加DIPEA(9.27mL，53.06mmol)，并将混合物在105℃搅拌24小时，得到棕色溶液。LCMS显示反应完成。将混合物浓缩，并将残余物在硅胶柱上纯化(用0至30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈亮黄色油状物的2-(4-溴-3-氯-2-硝基-苯胺基)丙酸甲酯(中间体43)(2.120g，71％)，静置后变成黄色固体。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.52(3H，d)，3.77(3H，s)，6.53(1H，d)，7.15(1H，t)，7.53(1H，d)，7.78(1H，dd)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝337。

中间体44：7-溴-8-氯-3-甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮

将连二亚硫酸钠(3.28g，18.84mmol)添加到2-(4-溴-3-氯-2-硝基-苯胺基)丙酸甲酯(中间体43)(2.12g，6.28mmol)在DMSO(50mL)中的搅拌溶液中，并将混合物在120℃搅拌5小时。LCMS和TLC指示完全转化。用水淬灭混合物并用乙酸乙酯(50ml x 2)萃取。将有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤，浓缩，将残余物在硅胶柱上纯化(0至55％乙酸乙酯的己烷溶液)，得到7-溴-8-氯-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体45)(0.055g，3％)。m/z(ES+)[M+H]+273，275和7-溴-8-氯-3-甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体44)(0.190g，11％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝275，277。

中间体45：7-溴-8-氯-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

将DDQ(157mg，0.69mmol)添加至7-溴-8-氯-3-甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体44)(190mg，0.69mmol)在1，4-二噁烷(10mL)中的混合物中，并且将所得混合物在室温下搅拌过夜，LCMS指示完全转化。浓缩混合物并用饱和NaHCO₃溶液处理残余物。在室温下搅拌混合物4，将固体通过过滤分离，用饱和NaHCO₃溶液和水洗涤。然后将固体在硅胶柱上纯化(用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)得到呈黄色固体的7-溴-8-氯-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体45)(122mg，65％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝273，275。

中间体46：8-氯-3-甲基-7-乙烯基-1H-喹喔啉-2-酮

将7-溴-8-氯-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体45)(122mg，0.45mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(51.5mgs，0.04mmol)和三丁基(乙烯基)锡烷(212mg，0.67mmol)在甲苯(15ml)中的混合物中在110℃下在N₂下搅拌16小时。LCMS指示反应完成。将混合物浓缩，并将残余物在硅胶柱上纯化(用0至16％甲醇的DCM溶液洗脱)得到呈棕色固体的8-氯-3-甲基-7-乙烯基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体46)(98mg，100％)。(被PPh₃O污染)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝221。

中间体47：5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛

将H₂O中的四氧化锇(0.1mL，0.01mmol)添加到8-氯-3-甲基-7-乙烯基-1H-喹喔啉-2-酮(140mg，0.63mmol)(中间体46)、2，6-二甲基吡啶(0.148ml，1.27mmol)和高碘酸钠(543mg，2.54mmol)在THF(10mL)/水(2mL)/叔丁醇中(0.607mL，6.34mmol)中的溶液中并在室温下搅拌过夜，得到黄色悬浮液。LCMS和TLC指示仍有剩余起始材料。向混合物中添加THF(10ml)/水(2.000ml)、200mg高碘酸钠、0.3ml四氧化锇并将混合物在室温下继续搅拌5小时。LCMS指示完全转化。将反应用水稀释，添加饱和NH₄Cl溶液并用DCM萃取。将合并的有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将残余物在硅胶柱上纯化(用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)，得到呈黄色固体的5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(中间体47)(141mg，100％)。(不是很纯，转入下一步)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝223。

中间体48：8-氯-7-(羟基甲基)-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

将硼氢化钠(23.96mg，0.63mmol)添加到5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(中间体47)(141mg，0.63mmol)在MeOH(16mL)和DCM(8.00mL)的混合物中的冷却至0℃的冷却溶液中，并将混合物在0℃下继续搅拌1小时。LCMS指示完全转化。向混合物中添加1ml水，浓缩，将残余物在硅胶柱上纯化(用40至100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱；然后0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)，得到呈黄色固体的8-氯-7-(羟基甲基)-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体48)(142mg，100％)；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.42(3H，s)，4.65(2H，br d)，5.53(1H，brt)，7.46(1H，br d)，7.69(1H，br d)，11.77(1H，brs)；m/z(ES+)[M+H]⁺＝225。

中间体49：7-(溴甲基)-8-氯-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

将CH₂Cl₂(20ml)中的8-氯-7-(羟基甲基)-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体48)(142mg，0.63mmol)和三苯基膦(332mg，1.26mmol)冷却至0℃。以一份添加全溴甲烷(419mg，1.26mmol)并将混合物在0℃下搅拌1小时并在室温下搅拌2小时。LCMS指示没有进展。在室温下向混合物中添加第二部分三苯基膦(332mg，1.26mmol)和全溴甲烷(419mg，1.26mmol)并将混合物搅拌1小时。LCMS指示完全转化。减压除去溶剂，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈黄色固体的产物7-(溴甲基)-8-氯-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体49)(32mg，18％)。进一步用20％甲醇的DCM溶液洗脱得到第二部分100mg(55％)呈棕色固体的产物(47％纯度)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝287，289。

实例16：5-[4-[(5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲 基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.053mL，0.31mmol)添加至N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(22.43mg，0.08mmol)(中间体31)和7-(溴甲基)-8-氯-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体49)(22mg，0.08mmol)在乙腈(4mL)中的混合物中并且将所得悬浮液在70℃搅拌1小时。LCMS指示完全转化。浓缩混合物，将残余物溶于DMSO并在反相C18柱上纯化(用0至100％ACN/水/0.1％TFA洗脱)。将含有纯产物的级分冻干，得到5-[4-[(5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(20mg，56％)。添加1mL 2M HCl的醚溶液，真空除去溶剂，得到相应的HCl盐，呈黄色固体(实例16)。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)2.96-3.03(3H，m)，3.48-3.86(6H，m)，4.04-4.41(2H，m)，4.78(2H，s)，4.86(3H，d，合并入水峰中)，7.74(1H，d)，7.84(1H，d)，8.14(1H，dd)，8.31(1H，d)，8.47(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝427。

实例17：5-[4-[(5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟- N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.061mL，0.35mmol)添加至6-氟-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(中间体32)(27.1mg，0.09mmol)和7-(溴甲基)-8-氯-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体49)(50mg，0.09mmol)(纯度约50％)在乙腈(5mL)中的混合物中并且将所得溶液在70℃下搅拌1小时。LCMS指示完全转化。将混合物浓缩，将残余物溶于DMSO并在反相C18柱上纯化(用0至100％ACN/水/0.1％TFA洗脱)，然后在反相C18柱上第二次纯化(用0到100％ACN/水/0.1％TFA洗脱)。材料最终在反相柱上第三次纯化(用0到100％ACN/水/氢氧化铵洗脱，PH约10)得到呈白色固体的5-[4-[(5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例17)(16.50mg，43％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.37-2.47(3H，m)，2.63(4H，br s)，2.76(3H，d)，3.13-3.23(4H，m)，3.74(2H，s)，7.45(1H，d)，7.57(1H，dd)，7.68(1H，d)，7.84(1H，d)，8.39(1H，br d)，10.71-12.11(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝445。

实例18：5-[4-[(5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N6-二 甲基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.061mL，0.35mmol)添加到N，6-二甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(中间体33)(26.7mg，0.09mmol)和7-(溴甲基)-8-氯-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(50mg，0.09mmol)(中间体49，约50％纯度)在乙腈(5mL)中的混合物中并且将所得溶液在70℃搅拌1小时。LCMS指示完全转化。将混合物浓缩，将残余物溶解在DMSO中并将残余物在反相C18柱上纯化(用0至100％ACN/水/0.1％TFA洗脱)。浓缩级分后，将残余物在反相C18柱上再纯化(用0至100％ACN/水/氢氧化铵洗脱，PH约10)。将纯级分冻干至干燥，得到呈游离碱的5-[4-[(5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例18)(18.4mg，48％)。1H NMR(500MHz，甲醇-d4)2.53(6H，d)，2.76(4H，br s)，2.94(3H，s)，3.04(4H，br t)，3.86(2H，s)，7.48(1H，d)，7.51-7.60(1H，m)，7.69(1H，d)，7.86(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝441。

中间体50：7-溴-8-氟-3-(1-羟基乙基)-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃将氯化铵(6.70g，125.31mmol)添加到2-((4-溴-3-氟-2-硝基苯基)氨基)-3-羟基丁酸甲酯(中间体36)(4.4g，12.53mmol)和锌(8.19g，125.31mmol)在MeOH(65mL)中的悬浮液中。向其中添加水(2mL)并将混合物在0℃搅拌60分钟。橙色消失指示完全转化，LCMS指示反应完成。将混合物过滤，用甲醇洗涤并浓缩滤液。将残余物用乙酸乙酯/甲醇(10/1)稀释，将有机层用水(约20ml)、盐水洗涤，干燥(无水Na₂SO₄)，浓缩得到中间体2-((2-氨基-4-溴-3-氟苯基)氨基)-3-羟基丁酸甲酯。

将上述固体在甲醇(约30ml)中浆化，添加在4M HCl的二噁烷溶液(约1ml)并将混合物在室温下搅拌2小时。LCMS指示完全转化。将混合物浓缩，并将残余物在硅胶柱上纯化(用0至100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈黄色固体的7-溴-8-氟-3-(1-羟基乙基)-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体50)(3.20g，88％)。(非对映异构体的混合物)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝289，291。

中间体51：7-溴-8-氟-3-(1-羟基乙基)-1H-喹喔啉-2-酮

将DDQ(432mg，1.90mmol)添加至7-溴-8-氟-3-(1-羟基乙基)-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体50)(500mg，1.73mmol)在CH₂Cl₂(30mL)中的悬浮液中并且将混合物在室温下搅拌过夜。LCMS指示完全转化。减压除去溶剂，添加饱和NaHCO₃(约100ml)溶液并将混合物在室温搅拌3小时。将固体通过过滤收集，用水洗涤并干燥得到7-溴-8-氟-3-(1-羟基乙基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体51)(439mg，88％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.39(3H，d)，4.78-5.31(2H，m)，7.39-7.71(2H，m)，12.72(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝287，289。

中间体52：3-乙酰基-7-溴-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮

在-78℃将DMSO(0.651mL，9.17mmol)在DCM中的溶液滴加到草酰氯(3.06mL，6.12mmol)(在DCM中2M)在二氯甲烷(20ml)中的搅拌溶液中。将7-溴-8-氟-3-(1-羟基乙基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体51)(439mg，1.53mmol)的溶液缓慢添加至上述反应混合物中并将所得浆液在-78℃下搅拌15分钟。滴加三乙胺(1.279mL，9.17mmol)并将所得浆液在0℃下再搅拌30分钟。LCMS指示形成了所需产物。添加水(30ml)，将混合物用二氯甲烷/MeOH(5∶1)(2x50ml)萃取。将有机相合并并用硫酸镁干燥。真空除去溶剂，将残余物通过反相C18柱纯化(用0至100％ACN/水/0.1％TFA洗脱)，得到呈黄色固体的3-乙酰基-7-溴-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体52)(85mg，19％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.52-2.66(3H，m)，7.42-7.76(2H，m)，13.03(1H，br s)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝285，287。

中间体53：7-溴-3-(1，1-二氟乙基)-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮

在室温下将DAST(0.148mL，1.12mmol)添加至3-乙酰基-7-溴-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体52)(80mg，0.28mmol)在CH₂Cl₂(20mL)中的悬浮液中，并将所得悬浮液在室温下搅拌24小时。LCMS显示42％的产物形成。继续搅拌混合物过周末。向混合物中添加水并用DCM萃取。将有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将残余物在硅胶柱上纯化(用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)，得到呈淡黄色固体的7-溴-3-(1，1-二氟乙基)-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体53)(65.0mg，75％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝307，309。(材料不是很纯，进行下一步)。

中间体54：3-(1，1-二氟乙基)-8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮

将(三丁基甲锡烷基)甲醇(102mg，0.32mmol)、Xphos Pd G2(24.98mg，0.03mmol)和7-溴-3-(1，1-二氟乙基)-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体53)(65mg，0.21mmol)在1，4-二噁烷(10mL)中的混合物在N₂气氛下在80℃下搅拌6小时。LCMS指示完全转化。真空除去溶剂，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)，得到呈棕色固体的3-(1，1-二氟乙基)-8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体54)(55.0mg，100％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝259。

中间体55：7-(溴甲基)-3-(1，1-二氟乙基)-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃将CBr₄(129mg，0.39mmol)添加至3-(1，1-二氟乙基)-8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体54)(67mg，0.26mmol)和三苯基膦(102mg，0.39mmol)在CH₂Cl₂(6mL)中的混合物并且将所得混合物在室温搅拌过夜。LCMS指示完全转化。真空除去溶剂，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)，得到呈白色固体的7-(溴甲基)-3-(1，1-二氟乙基)-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体55)(56.0mg，67％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝321，323。

实例19：5-[4-[[2-(1，1-二氟乙基)-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪- 1-基]-N，6-三甲基-吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-3-(1，1-二氟乙基)-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体55)(56mg，0.16mmol)和N，6-二甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(中间体33)(48.2mg，0.16mmol)在乙腈(4mL)中的悬浮液中添加DIPEA(0.164mL，0.94mmol)并将所得混合物在70℃下搅拌1.5小时。LCMS指示完全转化。将混合物浓缩，并将残余物在反相吉尔森柱上纯化(用0至70％ACN/水/0.1％TFA洗脱)。合并纯级分，将0.5ml 1M HCl水溶液添加至合并的级分中并冻干至干燥，得到呈黄色固体的5-[4-[[2-(1，1-二氟乙基)-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，呈HCl盐(实例19)(35.0mg，44％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.08(3H，br t)，2.52(3H，s)，2.80(3H，br d)，3.02-3.54(8H，m)，4.61(2H，br s)，7.57(1H，br d)，7.67-8.04(3H，m)，8.52(1H，br d)，11.74(1H，br s)，12.77-13.55(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝475。

中间体56：2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)丙酸甲酯

将DIPEA(151ml，867.27mmol)缓慢添加到1-溴-2，4-二氟-3-硝基苯(中间体35)(68.8g，289.09mmol)和丙氨酸甲酯，HCl(40.4g，289.09mmol)在DMF(300mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在室温搅拌18小时(根据LCMS完全转化为所需产物)。使用火箭蒸发系统浓缩反应混合物，用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将有机层用水彻底洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。向上述橙色固体中添加100mL DCM，将悬浮液在室温下搅拌30分钟，过滤固体，得到呈亮橙色固体的2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)丙酸甲酯(24.00g，26％)(中间体56)。1H NMR(500MHz，二氯甲烷-d2)1.52-1.62(3H，m)，3.80(3H，s)，4.28(1H，quin)，6.49(1H，dd)，7.19-7.39(1H，m)，7.54(1H，dd)；19F NMR(471MHz，二氯甲烷-d2)-109.49(1F，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝321，323。

中间体57：7-溴-8-氟-3-甲基-3，4-二直-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃将锌(78g，1195.88mmol)分批添加至2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)丙酸甲酯(中间体56)(48g，149.49mmol)和氯化铵(64.0g，1195.88mmol)在MeOH(720ml)和水(16ml)中的混合物中(放热反应)并将混合物在室温下搅拌2小时(橙色完全消失表明反应完成)。滤出固体并用20％MeOH的DCM溶液洗涤固体滤饼。浓缩滤液，向粗产物中添加水，将产物用乙酸乙酯萃取。将有机层干燥并真空浓缩以提供油状物。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝291，293。

将该材料在乙酸乙酯(50mL)和甲醇(50mL)中浆化，添加2mL 4N HCl的二噁烷溶液并将混合物搅拌1小时。将反应混合物浓缩得到呈灰色固体的粗产物7-溴-8-氟-3-甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体57)(38.7g)。假设该反应的产率为100％，粗产物(38.7g)无需任何进一步纯化即可用于下一步骤。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝259。

中间体58：7-溴-8-氟-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

将DDQ(21.55g，94.95mmol)以一份添加至7-溴-8-氟-3-甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体57)(20.5g，79.13mmol)在DCM(200mL)中的搅拌溶液中，产生非常粘稠的灰白色浆液，添加额外的二氯甲烷(800mL)。将所得浆液在室温搅拌2小时(根据LCMS完全转化为所需产物)。真空浓缩反应混合物并用饱和碳酸氢钠水溶液(约500mL，骤冷会导致剧烈起泡)淬灭。将上述浆液在室温搅拌过夜并滤出固体，用水彻底洗涤并将固体在过滤器上干燥过夜。将该固体用二乙醚洗涤并干燥30分钟，得到呈灰白色固体的7-溴-8-氟-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体58)(16.28g，80％)。19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-124.18(1F，s)；1HNMR(500MHz，DMSO-d6)2.41(3H，s)，7.45-7.54(2H，m)，12.60(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝257。

中间体17：8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

将(三丁基甲锡烷基)甲醇(15.39g，47.93mmol)、7-溴-8-氟-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体58)(11.2g，43.57mmol)和Xphos Pd G2(1.714g，2.18mmol)在1，4-二噁烷(200mL)中的混合物在80℃下搅拌7小时。LCMS指示完全转化。在减压下除去溶剂并将残余物在硅胶柱上纯化(用的0至15％甲醇的DCM溶液洗脱)。将级分浓缩成浆液，用醚稀释，将固体通过过滤收集并干燥，得到呈白色固体的8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体17)(8.10g，89％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.41(3H，s)，4.63(2H，br d)，5.39(1H，t)，7.31(1H，br t)，7.51(1H，d)，12.41(1H，br s)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝209。

实例20：6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]- N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

在0℃在氮气下用加料漏斗将三乙基膦(20.90ml，145.06mmol)滴加至8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体17)(15.1g，72.53mmol)和1，2-二溴-1，1，2，2-四氯乙烷(52.0g，159.56mmol)在DCM(400mL)中的搅拌悬浮液中。将混合物在室温下搅拌3小时，得到浅黄色悬浮液。粗LCMS指示完全转化。真空除去DCM；将残余物在室温下在300mL二乙醚中浆化，过滤淡黄色ppt并用200ml醚洗涤。将固体吸收在300ml水中，在室温下搅拌10分钟，将固体通过过滤收集，用水彻底洗涤(200ml)以除去盐。将固体真空干燥过夜(不加热)。将固体用己烷洗涤并在蒲式耳漏斗中真空干燥，得到呈灰白色固体的7-(溴甲基)-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体59)(22.76g，116％，可能含有一些无机盐)。原样用于下一步反应。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.42(3H，s)，4.65-4.93(2H，m)，7.28-7.42(1H，m)，7.51(1H，d)，12.53(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝271，273。

向装有在乙腈(350ml)中的7-(溴甲基)-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体59)(22.76g)和6-氟-N-甲基-5-的烧瓶中(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(中间体32)(24.24g，77.9mmol)的烧瓶中在室温下添加DIPEA(38.0ml，217.59mmol)并得到所得混合物在70℃搅拌4小时。反应不完全。向混合物中添加5g KI和2g NaI并将混合物在50℃下搅拌20小时。将更多540mg(约0.03当量)的6-氟-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺2HCl(中间体32)添加到混合物中，并在50℃下继续搅拌2小时。通过过滤收集来自反应悬浮液的固体，用乙腈洗涤并干燥。然后将所得材料悬浮在水(约400ml)中，在室温下浆化20分钟，过滤并干燥(LCMS纯度为97％)。然后在回流下将固体溶解到DCM/MeOH(3/1)(约1.5L)的混合物中，通过硅胶垫过滤，除去大部分DCM直到固体沉淀出来，并将混合物在室温下保持20分钟。将固体通过过滤收集，对滤液重复上述程序，合并固体，得到呈淡黄色固体的产物6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例20)(26g，84％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.41(3H，s)，2.57-2.69(4H，m)，2.76(3H，d)，3.16(4H，brs)，3.70(2H，s)，7.29(1H，br t)，7.40-7.60(2H，m)，7.83(1H，d)，8.38(1H，br d)，12.44(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝429。

实例21：6-(二氟甲基)-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌 嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.052mL，0.30mmol)添加到7-(溴甲基)-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体59)(40mg，0.15mmol)和6-(二氟甲基)-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(中间体60)(50.6mg，0.15mmol)在乙腈(mL)中的搅拌混合物中并且将所得混合物在70℃下搅拌2小时。反应浓缩后送分析组纯化(纯化条件：将残余物通过反相C18柱纯化(用0至100％ACN/水/0.1％NH4OH洗脱)，这得到呈白色固体的6-(二氟甲基)-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例21)(15mg，22％)。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)2.37(3H，s)，2.64(4H，br s)，2.84(3H，d)，3.01(4H，br d)，3.70(2H，s)，7.00-7.28(2H，m)，7.42(1H，br d)，7.86(1H，d)，8.09(1H，d)，8.39(1H，q)，12.24-12.63(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝461。

中间体61：6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1- 基]吡啶-2-甲酸甲酯

在室温将聚合物负载的三苯基膦(1.512g，5.76mmol)(添加3.4g，基于1.6mmol/g的PPh₃负载量计算)添加到8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体17)(400mg，1.92mmol)和全溴甲烷(1.274g，3.84mmol)在DCM(40mL)中的搅拌浆液中。将所得混合物在23℃搅拌1小时。反应不完全。添加另外的聚合物结合的-PPh₃(1g)以使反应完成。过滤反应混合物，用DCM、THF洗涤，真空浓缩滤液，得到呈淡黄色固体的7-(溴甲基)-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮。

向上述新鲜制备的7-(溴甲基)-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮中添加6-氟-5-(哌嗪-1-基)吡啶甲酸甲酯，2HCl(中间体12)(600mg，1.92mmol)、乙腈(25mL)和N-乙基-N-异丙基-2-胺(1674μl，9.61mmol)并将反应混合物加热至70℃1小时。将反应混合物冷却至室温，浓缩，将粗固体通过正相色谱纯化(使用0-10％MeOH的DCM溶液)得到呈灰白色固体的6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯(中间体61)(0.484g，59％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.34-2.49(3H，m)，2.52-2.62(4H，m)，3.08-3.28(4H，m)，3.70(2H，s)，3.83(3H，s)，7.29(1H，t)，7.44-7.54(2H，m)，7.91(1H，dd)，12.45(1H，s)；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.50(1F，s)，-70.49(1F，s)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝430。

实例22：6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基] 吡啶-2-甲酰胺

将氨(MeOH中的7N氨)(31.3ml，218.90mmol)添加到在40mL闪烁瓶中的6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯(中间体61)(0.470g，1.09mmol)，密封并在室温下搅拌18小时。根据LCMS完全转化为所需的产物。过滤白色固体得到103mg纯产物。真空浓缩滤液，将所得灰白色固体在约5mL甲醇浆化并过滤以获得另外的纯产物298mg。将两批合并以获得6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酰胺(实例22)(0.401g，88％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.42(3H，s)，2.59(4H，br s)，3.09-3.27(4H，m)，3.70(2H，s)，7.29(1H，br t)，7.46(1H，br s)，7.49-7.58(2H，m)，7.76(1H，br s)，7.85(1H，br d)，12.35(1H，br s)；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.49(1F，s)，-72.40(1F，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝415。

中间体62：2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)丁酸甲酯

将DIPEA(165ml，942.91mmol)缓慢添加到1-溴-2，4-二氟-3-硝基苯(中间体35)(74.8g，314.30mmol)和2-氨基丁酸甲酯，HCl(48.3g，314.30mmol)在DMF(733mL)中的搅拌溶液中并且将所得溶液在室温下搅拌18小时。在火箭式蒸发器上除去DMF，用水稀释并用乙酸乙酯萃取。浓缩后，将粗材料通过快速二氧化硅色谱法纯化，洗脱梯度为0至70％EtOAc/己烷。在减压下浓缩产物级分以提供呈红色固体的2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)丁酸甲酯(中间体62)(49.4g，47％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)0.82-0.98(3H，m)，1.77-1.93(2H，m)，3.70(3H，d)，4.38-4.54(1H，m)，6.77(1H，br d)，7.28(1H，br d)，7.64-7.80(1H，t)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝335。

中间体63：7-溴-3-乙基-8-氟-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮

将锌(44.1g，674.07mmol)分批添加(放热反应)至2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)丁酸甲酯(中间体62)(50.2g，149.79mmol)和氯化铵(64.1g，1198.34mmol)在MeOH(468mL)中的混合物中。将混合物在室温搅拌1小时。滤出固体并用20％MeOH的DCM溶液洗涤。将该材料溶解在甲醇(120mL)中并添加的4N HCl的二噁烷溶液(10mL)并将反应搅拌30分钟。在真空下除去溶剂，用乙酸乙酯稀释并用饱和NaHCO₃溶液碱化。将有机层分离，用水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩，得到粗产物。将固体与100mL甲醇研磨，搅拌10分钟，滤出浅棕色固体，得到7-溴-3-乙基-8-氟-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体63)(39.8g，97％)产物。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)0.92(3H，t)，1.49-1.77(2H，m)，3.57-3.87(1H，m)，6.24-6.62(2H，m)，6.99(1H，dd)，10.44(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝273。

中间体64：7-溴-3-乙基-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮

将DDQ(29.7g，130.94mmol)以一份添加至7-溴-3-乙基-8-氟-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体63)(29.8g，109.12mmol)在DCM(546mL)中的搅拌溶液红，并且将所得溶液在室温下搅拌2小时。真空除去溶剂，将固体用150mL甲醇浆化并搅拌30分钟。滤出固体并用30mL甲醇洗涤。将固体转移到2升圆底烧瓶中；添加200mL水，然后缓慢添加300mL碳酸氢钠。添加完成后，将混合物在室温下搅拌过夜，得到淡黄色浆液。停止搅拌并去除水层。将固体通过过滤收集并用水彻底洗涤以得到呈黄色固体的7-溴-3-乙基-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体64)(24.45g，83％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.81(2H，q)，7.27-7.69(2H，m)，12.59(1H，brs)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝271。

中间体65：3-乙基-8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮

将Xphos Pd G2(1.121g，1.43mmol)添加至7-溴-3-乙基-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体64)(7.727g，28.50mmol)和(三丁基甲锡烷基)甲醇(10.98g，34.20mmol)在1，4-二噁烷(143mL)中的搅拌脱气溶液中。将所得溶液在80℃下搅拌6小时。真空除去溶剂，添加100mL二乙醚，搅拌浆液30分钟。滤出固体并用50mL二乙醚洗涤，得到呈灰白色固体的3-乙基-8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(5.88g，93％)(中间体65)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.82(2H，q)，4.64(2H，br d)，5.40(1H，t)，7.32(1H，br t)，7.55(1H，d)，12.40(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝223。

中间体66：7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃下在氮气下经5分钟的时间将三乙基膦(19.94ml，135.00mmol)滴加到3-乙基-8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体65)(10g，45.00mmol)和CBr₄(49.2g，148.50mmol)在DCM(355mL)中的搅拌溶液中。将反应在室温下搅拌1小时。在真空下除去DCM且将残余物在150mL二乙醚浆化。滤出白色ppt并用50mL二乙醚洗涤。将该固体用水(200mL)浆化并搅拌30分钟。滤出固体并用水彻底洗涤。将固体真空干燥过夜，得到呈浅棕色固体的7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(中间体66)(11.38g，89％)。1H NMR(500MH z，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.83(2H，q)，4.81(2H，s)，7.37(1H，br t)，7.55(1H，d)，12.53(1H，brs)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝285。

实例23：5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6- 二甲基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(20.90ml，119.64mmol)添加至7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(中间体66)(11.37g，39.88mmol)和N，6-二甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(中间体33)(14.09g，45.86mmol)在乙腈(178mL)中的搅拌浆液中。将所得溶液在50℃搅拌2小时。反应完成。通过蒸发除去一半溶剂，添加10mL饱和碳酸氢钠并将混合物搅拌15分钟。滤出固体，用水洗涤，然后用50mL乙腈洗涤。将固体溶解在DCM/甲醇(约9/1)中并通过硅胶床过滤。浓缩滤液得到淡黄色固体。将该材料与约120mL甲醇一起研磨，滤出固体并干燥。LCMS仍显示约2.1％的杂质(可能来自试剂)。再次用乙腈、然后用乙腈中的3％甲醇研磨材料，得到约14g白色固体。添加甲醇(40mL)并搅拌3小时。滤出固体，得到纯产物5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例23)(12.26g，70％)。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)1.23(3H，t)，2.48(3H，s)，2.62(4H，br s)，2.76-2.88(5H，m)，2.95(4H，br s)，3.73(2H，s)，7.31(1H，t)，7.47(1H，d)，7.56(1H，d)，7.79(1H，d)，8.41(1H，q)，12.44(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝439。

实例24：6-(二氟甲基)-5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌 嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将DIPEA(0.049mL，0.28mmol)添加到7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(中间体66)(40mg，0.14mmol)和6-(二氟甲基)-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(中间体60)(48.1mg，0.14mmol)在乙腈(2mL)中的搅拌混合物红并且将所得混合物在70℃下搅拌2小时。反应浓缩后送分析组纯化(纯化条件：将残余物通过反相C18柱纯化(用0至100％ACN/水/0.1％NH4OH洗脱)，这得到6-(二氟甲基)-5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例24)(56.0mg，84％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.23(3H，t)，2.65(4H，br d)，2.77-2.86(5H，m)，2.97-3.06(4H，m)，3.73(2H，s)，7.00-7.26(1H，t)，7.30(1H，br d)，7.55(1H，br d)，7.86(1H，d)，8.09(1H，d)，8.39(1H，q)，12.45(1H，br d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝475。

中间体67：5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡 啶-2-甲酸甲酯

将DIPEA(246μl，1.41mmol)添加至7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体66)(134mg，0.47mmol)和5-(哌嗪-1-基)吡啶甲酸甲酯，2HCl(中间体119)(138mg，0.47mmol)在乙腈(2mL)中的搅拌浆液中。将所得溶液在50℃搅拌2小时。在真空下除去溶剂并将所得残余物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为DCM中的0％至20％MeOH)进行纯化。在减压下浓缩产物级分以提供呈白色固体的5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯(中间体67)(0.142g，71.0％)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝426。

实例25：5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶- 2-甲酰胺

将氨(7N)的甲醇溶液(3mL，6.00mmol)添加到5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酸甲酯甲酯(中间体67)(130mg，0.31mmol)。将所得悬浮液在50℃搅拌24小时(密封管)。除去溶剂，并且将所得残余物通过快速二氧化硅色谱纯化，洗脱梯度为DCM中的0至35％MeOH。减压浓缩产物级分，得到呈淡黄色固体的5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酰胺(实例25)(0.079g，63％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.23(3H，t)，2.54-2.61(4H，m)，2.83(2H，q)，3.32-3.40(4H，m)，3.70(2H，s)，7.24-7.34(2H，m)，7.38(1H，dd)，7.56(1H，d)，7.76(1H，brd)，7.84(1H，d)，8.27(1H，d)，12.44(1H，br s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411。

中间体68：5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-l-基]-6- 甲基-吡啶-2-甲酸甲酯

在0℃下在氮气下经5分钟的时间将三乙基膦(0.399ml，2.70mmol)滴加到3-乙基-8-氟-7-(羟基甲基)喹喔啉-2(1H)-酮(中间体65)(0.2g，0.90mmol)和CBr₄(0.985g，2.97mmol)在DCM(7.10mL)中的搅拌溶液中。将反应在室温下搅拌1小时。真空除去DCM，将所得固体在二乙醚中浆化。真空过滤白色ppt，用水和然后用醚洗涤。将固体真空干燥过夜(不加热)，得到呈浅棕色固体的7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮。

向上述粗产物中添加6-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶甲酸甲酯，2HCl(中间体16)(278mg，0.90mmol)、乙腈(10mL)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(785μl，4.51mmol)并加热至70℃保持1小时。冷却反应混合物，浓缩，用NaHCO3水溶液(1mL)淬灭并在室温下搅拌1小时。将水(3mL)添加上述混合物中并搅拌10分钟。过滤沉淀物并用水(50mL)洗涤。使用0-10％MeOH的DCM溶液通过正相色谱纯化固体。分离的产物根据LCMS为89％纯度。使用质量导向制备型HPLC进一步纯化上述固体(使用20％-40％乙腈水溶液和NH4OH改性剂)，得到呈白色固体的5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酸甲酯(中间体68)(115mg，0.262mmol，29％)，LCMS纯度为93％。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.23(3H，t)，2.45-2.49(3H，m)，2.53-2.69(4H，m)，2.83(2H，q)，2.98(4H，br s)，3.73(2H，s)，3.83(3H，s)，7.31(1H，t)，7.45(1H，d)，7.56(1H，d)，7.86(1H，d)，12.44(1H，br s)；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.54(1F，s)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝440。

实例26：5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲 基-吡啶-2-甲酰胺

将7N氨的甲醇溶液(6.40ml，44.78mmol)添加到在40mL闪烁小瓶中的5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酸甲酯(中间体68)(0.0984g，0.22mmol)，密封并在室温搅拌18小时。在真空下浓缩反应，添加另外的氨(6.40ml，44.78mmol)溶液并在50℃下搅拌16小时。将反应真空浓缩并添加另外的NH3甲醇溶液并在室温下搅拌周末。根据LCMS反应完成。真空浓缩反应混合物，将所得固体在二乙醚中浆化。过滤固体并用另外的醚和甲醇洗涤，得到呈白色固体的5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例26)(0.095g，100％)；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(3H，br t)，2.45-2.49(3H，m)，2.52-2.68(4H，m)，2.82(2H，q)，2.94(4H，br s)，3.72(2H，br s)，7.30(1H，br t)，7.38-7.51(2H，m)，7.55(1H，br d)，7.80(2H，br d)，12.41(1H，br s)；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.53(1F，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝425。

中间体69：2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛

将戴斯-马丁高碘烷(458mg，1.08mmol)添加到在DCM(5mL)中的3-乙基-8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体65)(被其区域异构体3-乙基-8-氟-5-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(160mg，0.72mmol)。所得混合物在室温下搅拌4小时。蒸发溶剂以提供粗产物，将其通过快速C18-快速色谱纯化，洗脱梯度为在水(0.4％FA)中的5％至30％MeCN。将纯级分蒸发至干，得到呈黄色固体的2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(被其区域异构体3-乙基-8-氟-2-氧代-1H-喹喔啉-5-甲醛污染)(中间体69)(110mg，69％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝221。

实例27：5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟- N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将异丙醇钛(64.5mg，0.23mmol)添加到在THF(3mL)中的2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(中间体69)(被其区域异构体3-乙基-8-氟-2-氧代-1H-喹喔啉-5-甲醛污染)(50mg，0.23mmol)和6-氟-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(54.1mg，0.23mmol)。所得混合物在室温下搅拌2分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(中间体32)(192mg，0.91mmol)。将所得混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物用MeOH(0.1mL)淬灭。蒸发溶剂以提供粗产物。将粗残余物通过制备型HPLC纯化(柱：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5um；流动相A：水(0.05％TFA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：10分钟内10％B到20％B；254；220nm)和(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，19*250mm，10um；流动相A：水(10MMOL/LNH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在7分钟内21B到95B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例27)(6mg，6％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.56-2.64(4H，m)，2.76(3H，d)，2.82(2H，q)，3.14-3.20(4H，m)，3.71(2H，s)，7.27-7.33(1H，m)，7.53-7.59(2H，m)，7.82-7.86(1H，m)，8.38-8.45(1H，m)，12.46(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-72.58，-135.51；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝443。

实例28：6-氯-5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]- N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将异丙醇钛(51.6mg，0.18mmol)添加到在THF(3mL)中的2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(中间体69)(被其区域异构体3-乙基-8-氟-2-氧代-1H-喹喔啉-5-甲醛污染)(40mg，0.18mmol)和6-氯-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(中间体30)(50mg，0.20mmol)。所得混合物在室温下搅拌2分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(154mg，0.73mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用MeOH(0.1mL)淬灭并蒸发以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5um；流动相A：水(0.05％NH₃H₂O)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7分钟内21B到41B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的6-氯-5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例28)(37.5mg，45％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.57-2.65(4H，m)，2.76-2.86(5H，m)，3.05-3.15(4H，m)，3.72(2H，s)，7.29(1H，t)，7.55(1H，d)，7.65(1H，d)，7.93(1H，d)，8.40-8.45(1H，m)，12.45(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-135.46；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝459。

实例29：5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲 基-吡啶-2-甲酰胺

将异丙醇钛(51.6mg，0.18mmol)添加到在THF(3mL)中的2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(中间体69)(被其区域异构体3-乙基-8-氟-2-氧代-1H-喹喔啉-5-甲醛污染)(40mg，0.18mmol)和N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(中间体31)(50mg，0.23mmol)。所得混合物在室温下搅拌2分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(154mg，0.73mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用MeOH(0.1mL)淬灭并浓缩以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：Xselect CSH OBD柱30*150mm 5um，n；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7分钟内6B到17B；254；220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例29)(17.29mg，22％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.53-2.63(4H，m)，2.74-2.87(5H，m)，3.05-3.15(4H，m，合并入水峰中)，3.69(2H，s)，7.29(1H，t)，7.37(1H，dd)，7.54(1H，d)，7.81(1H，d)，8.25(1H，d)，8.35-8.42(1H，m)，12.44(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-135.49；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝425。

中间体70：5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛

将戴斯-马丁高碘烷(1.34g，3.16mmol)添加到在DCM(20ml)中的8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体17)(被8-氟-5-(羟基甲基)-3-甲基-1H-喹喔啉-2-酮污染)(0.33g，0.79mmol)。将所得混合物在室温下搅拌6小时。将反应混合物蒸发，以得到粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(在水中的5至30％MeCN(0.4％FA)的洗脱梯度)纯化。将纯级分蒸发至干，以得到呈灰白色固体的5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(被8-氟-3-甲基-2-氧代-1H-喹喔啉-5-甲醛污染)(中间体70)(0.300g，92％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝207。

实例30：6-氯-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]- N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将异丙醇钛(89mg，0.31mmol)添加到在THF(3mL)中的5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(被8-氟-3-甲基-2-氧代-1H-喹喔啉-5-甲醛污染)(中间体70)(150mg，0.36mmol)和6-氯-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体30)(80mg，0.31mmol)。将所得混合物在室温下搅拌20分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(266mg，1.26mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用MeOH(0.1mL)淬灭并浓缩以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，19*250mm，10um；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：MeOH-制备型；流速：20mL/min；梯度：在7分钟内57B到80B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的6-氯-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例30)(35.6mg，25％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.42(3H，s)，2.58-2.66(4H，m)，2.79(3H，d)，3.06-3.16(4H，m)，3.72(2H，s)，7.30(1H，t)，7.53(1H，d)，7.65(1H，d)，7.93(1H，d)，8.41-8.48(1H，m)，12.47(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-135.45；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝445。

实例31：5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺

将异丙醇钛(105mg，0.37mmol)添加到在THF(3mL)中的5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(被8-氟-3-甲基-2-氧代-1H-喹喔啉-5-甲醛污染)(中间体70)(150mg，0.36mmol)和N，6-二甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，HCl(中间体33)(100mg，0.37mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(313mg，1.48mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用MeOH(0.1mL)淬灭并蒸发以提供粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，30*150mm，5um；流动相A：水(0.05％NH₃H₂O)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7分钟内19B到39B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈灰白色固体的5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例31)(12.39mg，8％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.42(3H，s)，2.48(3H，s)，2.57-2.67(4H，m)，2.80(3H，d)，2.90-2.98(4H，m)，3.72(2H，s)，7.30(1H，t)，7.47(1H，d)，7.52(1H，d)，7.79(1H，d)，8.39-8.46(1H，m)，12.46(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-135.52；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝425。

实例32：5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲 基-吡啶-2-甲酰胺

将异丙醇钛(103mg，0.36mmol)添加至在THF(3mL)中的5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-甲醛(被8-氟-3-甲基-2-氧代-1H-喹喔啉-5-甲醛污染)(150mg，0.36mmol)和N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(中间体31)(80mg，0.36mmol)。所得混合物在室温下搅拌2分钟。添加三乙酰氧基硼氢化钠(308mg，1.45mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用MeOH(0.1mL)淬灭。将反应混合物蒸发，以得到粗产物。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：Xbridge Phenyl OBD柱，5um，19*150mm；流动相A：水(0.05％TFA)，流动相B：MeOH-制备型；流速：20mL/min；梯度：在12分钟内24B到32B；254/220nm和(柱：XBridgeShield RP18 OBD柱，19*250mm，10um；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10分钟内15B到30B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(12.4mg，8％)。1H NMIR(400MHz，DMSO-d6)2.42(3H，s)，2.55-2.60(4H，m)，2.78(3H，d)，2.90-2.98(4H，m，合并入水峰中)，3.70(2H，s)，7.30(1H，t)，7.38(1H，dd)，7.52(1H，d)，7.82(1H，d)，8.26(1H，d)，8.38-8.43(1H，m)，12.47(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-135.48；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411。

中间体72：4-溴-3-氟-苯-1，2-二胺

将铁粉(5.2g，93.11mmol)添加至在MeOH(30mL)中的4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺(中间体71)(7.3g，31.06mmol)和HCl(10mL，100.00mmol)(10M)。将所得混合物在室温下搅拌18小时。将溶剂在减压下去除。将反应混合物用饱和Na₂CO₃溶液(100mL)碱化。用EtOAc(2x100mL)萃取水层。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发，得到呈黑色固体的4-溴-3-氟-苯-1，2-二胺(中间体72)(6.05g，95％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)4.66(2H，s)，4.94(2H，s)，6.30(1H，dd)，6.56(1H，dd)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝205，207。

中间体73：7-溴-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮

将甲苯中的2-氧代乙酸乙酯(6.41g，31.39mmol)添加到甲苯(30mL)中的4-溴-3-氟-苯-1，2-二胺(中间体72)(4.46g，21.75mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌30分钟。将溶剂在减压下去除。将反应混合物用(PE：10mL和EA：2mL)稀释。过滤收集沉淀，用EtOAc(5mL)洗涤并真空干燥，得到呈灰白色固体的7-溴-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体73)(被6-溴-5-氟-1H-喹喔啉-2-酮污染)(2.75g，52％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝243。

中间体74：8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮

将CataCXium A-Pd-G2(0.12g，0.18mmol)添加到在1，4-二噁烷(30mL)中的(三丁基甲锡烷基)甲醇(1.25g，3.89mmol)和7-溴-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(中间体73)(1g，2.06mmol)(被6-溴-5-氟-1H-喹喔啉-2-酮污染)。将所得混合物在100℃下在氮下搅拌18小时。用饱和KF(10mL)淬灭反应混合物，过滤并蒸发以提供粗产物。将粗产物通过快速C18快速色谱法(在水中的3至30％MeCN(0.1％甲酸)的洗脱梯度)纯化。将纯级分蒸发至干，得到呈灰白色固体的8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体74)(260mg，69％)(被5-氟-6-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝195。

实例33：5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶- 2-甲酰胺

将SOCl₂(0.3mL，4.11mmol)添加至在DCM(3mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体74)(158mg，0.41mmol)(被5-氟-6-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)。将所得混合物在室温搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将DIPEA(0.25mL，1.43mmol)和N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体31)(141mg，0.64mmol)添加到NMP(3.00mL)中的混合物。将所得混合物在80℃搅拌1小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge PrepOBD C18柱，19*250mm，5um；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：9分钟内从18B到24B；254；220nm)。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例33)(13.00mg，8％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.55-2.60(4H，m)，2.77(3H，d)，3.28-3.33(4H，m)，3.71(2H，s)，7.30-7.42(2H，m)，7.61(1H，d)，7.82(1H，d)，8.20(1H，s)，8.25(1H，d)，8.37-8.42(1H，m)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-129.26；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝397。

实例34：6-氯-5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基- 吡啶-2-甲酰胺

将SOCl₂(0.3mL，4.11mmol)添加至在DCM(3mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体74)(被5-氟-6-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(143mg，0.37mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将DIPEA(0.25mL，1.43mmol)和6-氯-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体30)(101mg，0.40mmol)添加至NMP(3.00mL)中的混合物。将所得混合物在80℃搅拌1小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridgePrep OBD C18柱，19*250mm，5um；流动相A：水(10MMOL/L NH4HCO3+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在9分钟内从25B到28B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的6-氯-5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例34)(23.0mg，14％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.58-2.65(4H，m)，2.78(3H，d)，3.07-3.14(4H，m)，3.73(2H，s)，7.35(1H，dd)，7.61(1H，d)，7.65(1H，d)，7.93(1H，d)，8.20(1H，s)，8.41-8.45(1H，m)，12.58(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-135.18；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝431。

实例35：5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基- 吡啶-2-甲酰胺

将SOCl₂(0.3mL，4.11mmol)添加至在DCM(3mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体74)(被5-氟-6-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(143mg，0.37mmol)(153mg，0.39mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将在NMP(3mL)中的DIPEA(0.25mL，1.43mmol)和N，6-二甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体33)(137mg，0.58mmol)添加到混合物中。将所得混合物在80℃搅拌1小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，19*250mm，5um；流动相A：水(10 MMOL/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在9分钟内从24B到28B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例35)(13.0mg，8％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.48(3H，s)，2.56-2.65(4H，s)，2.79(3H，d)，2.92-2.97(4H，m)，3.73(2H，s)，7.31-7.39(1H，m)，7.47(1H，d)，7.61(1H，d)，7.78(1H，d)，8.19(1H，s)，8.39-8.44(1H，m)，12.55(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-135.25；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝411。

实例36：6-氟-5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基- 吡啶-2-甲酰胺

将SOCl₂(0.3mL，4.11mmol)添加至在DCM(3mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(被5-氟-6-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(144mg，0.37mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将DIPEA(0.25mL，1.43mmol)和6-氟-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体32)(94mg，0.39mmol)添加至NMP(3.00mL)中的混合物。将所得混合物在80℃搅拌1小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Prep OBD C18柱，19*250mm，5um；流动相A：水(10MMOL/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在9分钟内从23B到25B；254/220nm；RT1：6.9，8.46。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的6-氟-5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例36)(16.0mg，10％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.56-2.62(4H，m)，2.76(3H，d)，3.13-3.20(4H，m)，3.71(2H，d)，7.33(1H，dd)，7.55(1H，t)，7.61(1H，d)，7.83(1H，dd)，8.19(1H，s)，8.37-8.43(1H，m)，12.56(1H，brs)；19FNMR(376MHz，DMSO-d6)-72.57，-135.21；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝415。

实例37：5-[4-[[2-(二氟甲基)-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1- 基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺

在室温将氯化铁(II)(6.18mg，0.05mmol)和二氟甲亚磺酸锌(II)(86mg，0.29mmol)在水(0.5mL)中的溶液分批添加到5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例35)(40.0mg，0.10mmol)和TFA(7.51μl，0.10mmol)在DMSO(3mL)中的搅拌溶液中。随后添加叔丁基过氧化氢(9.44μl，0.10mmol)并将所得混合物在室温下搅拌2小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱，柱：XBridge PrepOBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(0.05％NH₃H₂O)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7分钟内从12％B到32％B；254/220nm；Rt：6.07min。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈淡黄色固体的5-[4-[[2-(二氟甲基)-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例37)(2.2mg，5％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.49(3H，s)，2.60-2.65(4H，m)，2.80(3H，d)，2.92-2.99(4H，m)，3.76(2H，s)，7.08(1H，t)，7.39(1H，t)，7.48(1H，d)，7.70(1H，d)，7.79(1H，d)，8.42(1H，q)，13.01(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-124.324，-134.183；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝461。

中间体72：4-溴-3-氟-苯-1，2-二胺

在室温下将铁粉(3.56g，63.83mmol)添加至在MeOH(30mL)中的4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺(中间体71)(3.00g，12.77mmol)、浓氯化氢(10.64ml，127.65mmol)。将所得混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发，得到4-溴-3-氟-苯-1，2-二胺(中间体72)(2.5g，96％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)4.66(2H，s)，4.94(2H，s)，6.30(dd，1H)，6.56(dd，1H)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝205。

中间体75：7-溴-8-氟-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮

在室温下将2，2，2-三甲氧基乙酸甲酯(2.402g，14.63mmol)添加到在甲苯(20mL)中的4-溴-3-氟苯-1，2-二胺(中间体72)(1.500g，7.32mmol)、三(((三氟甲基)磺酰基)氧基)镱(0.454g，0.73mmol)。将所得混合物在100℃搅拌5小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过反相色谱在C18柱上纯化，洗脱梯度为5％至70％MeCN的水溶液。将纯级分蒸发至干，得到呈白色固体的7-溴-8-氟-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体75)(0.650g，32％)。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)3.97(3H，s)，7.31(1H，dd)，7.45(1H，dd)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝273。

中间体76：8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮

在室温和氮气下将(三丁基甲锡烷基)甲醇(882mg，2.75mmol)添加到在1，4-二噁烷(20mL)中的7-溴-8-氟-3-甲氧基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体75)(300.0mg，1.1mmol)，cataCXium A-Pd-G2(73mg，0.11mmol)。将所得混合物在100℃搅拌16小时。用饱和KF(10mL)淬灭反应混合物，然后过滤。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过反相色谱在C18柱上纯化，洗脱梯度为5％至100％MeOH的水溶液。将纯级分蒸发至干，得到呈白色固体的8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体76)(130mg，53％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)3.97(3H，s)，4.88(2H，d)，5.36(1H，s)，7.27-7.32(1H，m)，7.36(1H，d)，12.45(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝225。

中间体77：7-(氯甲基)-8-氟-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮

在室温将SOCl₂(8ml，109.62mmol)添加到在二乙醚(50mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体76)(50.0mg，0.22mmol)。将所得混合物在室温搅拌16小时。减压除去溶剂，得到呈黄色油状物的7-(氯甲基)-8-氟-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体77)(66.7mg，122％，粗品)。将该产物不经进一步纯化直接用于下一步骤。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)3.97(3H，s)，4.88(2H，s)，7.27-7.42(2H，m)，12.60(1H，s)m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝243。

实例38：5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N- 甲基-吡啶-2-甲酰胺

在室温将N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体31)(150mg，0.68mmol)添加至在MeCN(10mL)中的7-(氯甲基)-8-氟-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体77)(198mg，0.82mmol)、DIPEA(0.595mL，3.40mmol)。将所得混合物在60℃搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过快速C18-快速色谱法(洗脱梯度为水中的5％至70％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干，得到呈黄色固体的产物(103.0mg)(UV纯度为80％)。通过快速C18-快速色谱法重新纯化，洗脱梯度为5％至70％的MeCN水溶液。将纯级分蒸发至干，得到呈黄色固体的5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例38)(36.0mg，12％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)2.51-2.60(4H，m)，2.77(3H，d)，3.18-3.45(4H，m)，3.66(2H，s)，3.95(3H，s)，7.10-7.27(1H，m)，7.27-7.42(2H，m)，7.81(1H，d)，8.25(1H，d)，8.39(1H，q)，12.30(1H，s)；19F NMR(282MHz，DMSO-d6)-134.783；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝427。

实例39：6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1- 基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

在室温将SOCl₂(0.065mL，0.89mmol)添加到在二乙醚(10mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体76)(0.040g，0.18mmol)。将所得混合物在室温搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。在室温下将在MeCN(10.00mL)中的6-氟-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体32)(0.043g，0.18mmol)和DIPEA(0.156mL，0.89mmol)添加至上述固体中。将所得混合物在60℃搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过制备型HPLC柱纯化，柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，19*250mm，10um；流动相A：水(10mmol/LNH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在7分钟内从34B到48B；254/220nm；RT1：5.9。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例39)(0.020g，25％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)2.55-2.61(4H，m)，2.75(3H，d)，3.11-3.19(4H，m)，3.67(2H，s)，3.96(3H，s)，7.18-7.29(1H，m)，7.35(1H，d)，7.55(1H，dd)，7.79-7.88(1H，m)，8.41(1H，d)，12.50(1H，s)；19F NMR(282MHz，DMSO-d6)-72.581，-134.799；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝445。

实例40：5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N， 6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺

在室温将N，6-二甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体33)(0.097g，0.41mmol)添加至在MeCN(10mL)中的7-(氯甲基)-8-氟-3-甲氧基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体77)(0.100g，0.41mmol)、DIPEA(0.360mL，2.06mmol)。将所得混合物在60℃搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过制备型HPLC纯化，柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm 5um；流动相A：水(0.05％NH₃H2_O)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7分钟内从10B到30B；254/220nm。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例40)(0.063g，35％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.48(3H，s)，2.58-2.63(4H，m)，2.80(3H，d)，2.92-2.96(4H，m)，3.69(2H，s)，3.97(3H，s)，7.25(1H，t)，7.36(1H，d)，7.47(1H，d)，7.79(1H，d)，8.43(1H，q)，12.51(1H，s)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-134.815；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝441。

实例41：6-氯-5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1- 基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

在室温将SOCl₂(0.065mL，0.89mmol)添加到在二乙醚(10mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体76)(0.040g，0.18mmol)。将所得混合物在室温搅拌16小时。减压除去溶剂，得到粗7-(氯甲基)-8-氟-3-甲氧基-1H-喹喔啉-2-酮(0.045g，0.18mmol)。向上述固体中添加MeCN(10.00mL)，然后添加6-氯-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体30)(0.045g，0.18mmol)和DIPEA(0.156mL，0.89mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过制备型HPLC柱纯化，柱：YMC-ActusTriart C18，30*250,5um；流动相A：水(0.05％NH₃H₂O)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7分钟内21B到41B；254，220nm；RT1：6.18。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的6-氯-5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例41)(0.041g，50％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)2.56-2.66(4H，m)，2.79(3H，d)，3.063.16(4H，m)，3.70(2H，s)，3.97(3H，s)，7.19-7.30(m，1H)，7.36(d，1H)，7.66(d，1H)，7.93(d，1H)，8.44(d，1H)，12.47(s，1H)；19F NMR(282MHz，DMSO-d6)-134.746；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝461。

中间体78：2-(4-溴-3-甲基-2-硝基-苯胺基)丁酸

在室温将2-氨基丁酸(0.793g，7.69mmol)添加到在DMF(20mL)中的1-溴-4-氟-2-甲基-3-硝基苯(中间体2)(1.500g，6.41mmol)、K₂CO₃(2.66g，19.23mmol)。将所得混合物在100℃搅拌6小时。将反应混合物倒入冰水中，在0℃下用1M HCl(20mL)缓慢淬灭，得到黄色悬浮液。通过过滤收集固体，用水洗涤并干燥以提供呈黄色固体的2-(4-溴-3-甲基-2-硝基-苯胺基)丁酸(中间体78)(1.4g，74％)(不是很纯，未经进一步纯化直接用于下一步)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝317。

中间体79：7-溴-3-乙基-8-甲基-3，4-三氢-1H-喹喔啉-2-酮

在室温将铁粉(1.585g，28.38mmol)缓慢添加至在MeOH(100mL)中的2-(4-溴-3-甲基-2-硝基-苯胺基)丁酸(中间体78)(1.800g，5.68mmol)、浓氯化氢(4.73ml，56.76mmol)。将所得混合物在室温搅拌7小时。将反应混合物过滤。将溶剂在减压下去除。将反应混合物用饱和Na₂CO₃(40mL)淬灭并用EtOAc(3x50mL)萃取。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发，得到棕色固体。将粗产物通过快速C18-快速色谱法(洗脱梯度为5％至50％MeCN的水溶液)进行纯化。将纯级分蒸发至干，得到呈白色固体的7-溴-3-乙基-8-甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体79)(650mg，43％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)0.90(3H，t)，1.43-1.72(2H，m)，2.22(3H，s)，3.56(1H，ddd)，6.16(1H，d)，6.56(1H，d)，6.97(1H，d)，9.76(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝269。

中间体80：7-溴-3-乙基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

在室温将DDQ(1.316g，5.80mmol)添加至在1，4-二噁烷(150mL)中的7-溴-3-乙基-8-甲基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体79)(1.300g，4.83mmol)。将所得混合物在室温搅拌3小时。将溶剂在减压下去除。将反应混合物用饱和NaHCO₃(150mL)淬灭。过滤收集沉淀物。将固体用水(10mL x 3)洗涤并真空干燥，得到呈黄色固体的所需产物7-溴-3-乙基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体80)(1.2g，93％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)1.20(3H，t)，2.44-2.53(3H，m)，2.78(2H，q)，7.48(2H，s)，11.74(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝267。

中间体81：3-乙基-7-(羟基甲基)-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

在室温和氮气下将(三丁基甲锡烷基)甲醇(1202mg，3.74mmol)添加到在1，4-二噁烷(40mL)中的7-溴-3-乙基-8-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体80)(400mg，1.50mmol)、Pd(PPh₃)₄(173mg，0.15mmol)。将所得混合物在60℃搅拌16小时。将反应混合物用KF(10mL)淬灭并滤出固体。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过快速C18-快速色谱纯化，洗脱梯度为5％至100％MeOH的水溶液。将纯级分蒸发至干，得到呈白色固体的3-乙基-7-(羟基甲基)-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体81)(100mg，31％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.22(3H，t)，2.32(3H，s)，2.81(2H，q)，4.59(2H，d)，5.25(1H，s)，7.33(1H，d)，7.55(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝219。

实例42：5-[4-[(2-乙基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N6- 二甲基-吡啶-2-甲酰胺

在室温将HBr的AcOH溶液(1ml，6.08mmol)(33w％)添加到3-乙基-7-(羟基甲基)-8-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体81)(65.0mg，0.30mmol)。将所得混合物在60℃搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。在室温将在NMP(3mL)中的N，6-二甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体33)(69.8mg，0.30mmol)和DIPEA(0.156ml，0.89mmol)添加至上述固体中。将所得混合物在60℃搅拌2小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱，柱：Sunfire prep C18柱，30*150，5um；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7分钟内从9B到20B；254/220 nm；RT1：5.15；将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈淡黄色固体的5-[4-[(2-乙基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例42)(0.049g，38％)。1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)1.20(3H，t)，2.42(3H，s)，2.50(3H，s)，2.53-2.59(4H，m)，2.73-2.86(5H，m)，2.87-2.93(4H，m)，3.61(2H，s)，7.23(1H，d)，7.45(1H，d)，7.52(1H，d)，7.76(1H，d)，8.39(1H，d)，11.52(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝435。

实例43：5-[4-[(2-乙基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6- 氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

在室温将HBr的AcOH溶液(1ml，6.08mmol)(33w％)添加到3-乙基-7-(羟基甲基)-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体81)(65.0mg，0.30mmol)。将所得混合物在60℃搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。在室温将6-氟-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(中间体32)(71.0mg，0.30mmol)添加至上述固体中，然后添加NMP(3mL)中的DIPEA(0.156ml，0.89mmol)。将所得混合物在60℃搅拌2小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱，柱：XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5um；流动相A：水(0.05％NH3H2O)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7分钟内从31B到51B；254/220nm；RT1：6.27；将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈淡黄色固体的5-[4-[(2-乙基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例43)(0.043g，33％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)1.20(3H，t)，2.41(3H，s)，2.49-2.59(4H，m)，2.70-2.81(5H，m)，3.08-3.16(4H，m)，3.59(2H，s)，7.22(1H，d)，7.47-7.60(2H，m)，7.82(1H，dd)，8.37(1H，d)，11.52(1H，s)；19F NMR(282 MHz，DMSO-d6)-72.539；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝439。

实例44：5-[4-[(2-乙基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N- 甲基-吡啶-2-甲酰胺

在室温将HBr的AcOH溶液(1ml，18.42mmol)(33wt％)添加到3-乙基-7-(羟基甲基)-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(中间体81)(65.0mg，0.30mmol)。将所得混合物在60℃搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。在室温将N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(中间体31)(65.6mg，0.30mmol)和DIPEA(0.156ml，0.89mmol)添加至在NMP(3mL)中的上述固体中。将所得混合物在60℃搅拌2小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：Sunfire prep C18柱，30*150，5um；流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7分钟内从9B到20B；254/220nm；RT1：5.15；将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈淡黄色固体的5-[4-[(2-乙基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例44)(0.014g，10％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.16-1.26(3H，m)，2.41(3H，s)，2.49-2.59(4H，m)，2.70-2.81(5H，m)，3.30-3.35(4H，m，合并入水峰中)，3.61(2H，s)，7.25(1H，d)，7.38(1H，d)，7.55(1H，d)，7.82(1H，d)，8.26(1H，s)，8.38(1H，s)，11.53(1H，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝421。

中间体82：4-[6-(乙基氨基甲酰基)-2-氟-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将4-(2-氟-6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体11)(500mg，1.47mmol)添加至乙胺的水溶液(10mL，1.47mmol)(65wt％)。所得混合物在室温下搅拌2小时。反应完成。通过过滤收集沉淀物，用水(2mL x 3)洗涤并在真空下干燥以提供呈灰白色固体的4-[6-(乙基氨基甲酰基)-2-氟-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体82)(0.515g，99％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.09(3H，t)，1.42(9H，s)，3.11(4H，t)，3.23-3.30(2H，m)，3.49(4H，t)，7.59(1H，dd)，7.85(1H，d)，8.45(1H，t)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝353。

中间体83：N-乙基-6-氟-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺

将4-[6-(乙基氨基甲酰基)-2-氟-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体82)(536mg，1.52mmol)添加至HCl的1，4-二噁烷溶液中(5mL，20.00mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时。添加DIPEA(5mL)并将所得混合物在室温搅拌15分钟。将反应混合物蒸发，以得到粗产物。将粗产物通过快速C18-快速色谱法纯化(以在水(0.1％NH₄HCO₃)中的5％至50％MeCN的洗脱梯度)。将纯级分蒸发至干，得到呈黄色固体的N-乙基-6-氟-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体83)(0.368g，96％)。样品不纯，未经进一步纯化直接用于下一步；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝253。

实例45：N-乙基-6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌 嗪-1-基]吡啶-2-甲酰胺

将Ph₃P(94mg，0.36mmol)添加至在CH₂Cl₂(3mL)中的CBr₄(119mg，0.36mmol)、8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(中间体17)(50mg，0.24mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将在NMP(3mL)中的N-乙基-6-氟-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体83)(60mg，0.24mmol)和DIPEA(1.5mL，8.59mmol)添加到混合物中。将所得混合物在80℃搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过快速C18快速色谱法纯化(以在水(NH₄HCO₃)中的0至25％MeCN洗脱梯度)。将纯级分蒸发至干，得到呈白色固体的N-乙基-6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酰胺(实例45)(2.60mg，3％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)1.09(3H，t)，2.40(3H，s)，2.52-2.62(4H，m)，3.17-3.27(4H，m)，3.25(2H，q)，3.68(2H，s)，7.28(1H，t)，7.48-7.59(2H，m)，7.82(1H，d)，8.41(1H，t)，12.48(1H，s)；19F NMR(282MHz，DMSO-d6)-72.58，-135.52；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝443。

中间体84：5-溴-N-乙基-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将乙胺的H₂O溶液(3mL，2.20mmol)(65wt％)添加到5-溴-6-甲基-吡啶-2-甲酸甲酯(中间体14)(505mg，2.20mmol)。所得混合物在室温下搅拌18小时。减压除去溶剂，得到呈黄色固体的5-溴-N-乙基-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺(中间体84)(0.500g，94％)。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)1.13(3H，t)，2.66(3H，s)，3.26-3.39(2H，m)，7.76(1H，d)，8.18(1H，d)，8.67-8.72(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝243。

中间体85：4-[6-(乙基氨基甲酰基)-2-甲基-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将Cs₂CO₃(1.340g，4.11mmol)添加至在1，4-二噁烷(5mL)中的5-溴-N-乙基-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺(中间体84)(0.5g，2.06mmol)、哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.575g，3.09mmol)、BINAP(0.128g，0.21mmol)和Pd(OAc)₂(0.046g，0.21mmol)。将所得混合物在氮气下在100℃搅拌18小时。将反应混合物用EtOAc(10mL)稀释，依次用水(10mL x 2)和盐水(10mL x 1)洗涤。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发，获得粗产物。将粗产物通过快速二氧化硅色谱法(洗脱梯度为石油醚中的0至40％EtOAc)进行纯化。将纯级分蒸发至干，得到呈黄色固体的4-[6-(乙基氨基甲酰基)-2-甲基-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体85)(0.481g，67％)。1H NMR(300MHz，氯仿-d)1.26(3H，t)，1.49(9H，s)，2.54(3H，s)，2.85-2.98(4H，m)，3.49(2H，qd)，3.56-3.65(4H，m)，7.32(1H，d)，7.91-8.01(2H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝349。

中间体86：N-乙基-6-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺

将HCl的1，4-二噁烷溶液(4ml，16.00mmol，4M)添加到在MeOH(10mL)中的4-[6-(乙基氨基甲酰基)-2-甲基-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体85)(0.481g，1.38mmol)。将所得混合物在室温搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。将反应混合物用DIPEA(1mL)的MeOH(3mL)溶液碱化。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过快速C18快速色谱法纯化(以在水(NH₄HCO₃)中的0至20％MeCN洗脱梯度)。将纯级分蒸发至干，得到呈黄色油状物的N-乙基-6-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体86)(0.189g，55％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.12(3H，t)，2.81-2.92(8H，m)，3.27-3.36(5H，m)，7.46(1H，d)，7.81(1H，d)，8.43(1H，t)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝249。

实例46：N-乙基-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1- 基]-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将Ph₃P(299mg，1.14mmol)添加至在CH₂Cl₂(3.00mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(158mg，0.76mmol)(中间体17)、CBr₄(378mg，1.14mmol)。将所得混合物在室温搅拌1小时。将溶剂在减压下去除。将N-乙基-6-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体86)(188mg，0.76mmol)和DIPEA(1.5mL，8.59mmol)添加到在NMP(3mL)中的混合物。将所得混合物在80℃搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过快速C18快速色谱法纯化(以在水(NH₄HCO₃)中的0至25％MeCN洗脱梯度)。将纯级分蒸发至干，得到呈白色固体的N-乙基-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例46)(7.40mg，2％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)1.10(3H，t)，2.40(3H，s)，2.50(3H，s)，2.54-2.64(4H，m)，2.87-2.97(4H，m)，3.30(2H，q)，3.70(2H，s)，7.28(1H，t)，7.47(1H，d)，7.52(1H，d)，7.77(1H，d)，8.42(1H，t)，12.44(1H，s)；19F NMR(282MHz，DMSO-d6)-135.54；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝439。

中间体87：7-溴-8-氟-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮

将3，3，3-三氟-2-氧代丙酸乙酯(2.30g，13.52mmol)添加到在甲苯(10mL)中的4-溴-3-氟-苯-1，2-二胺(中间体72)(2.20g，10.73mmol)。将所得混合物在100℃搅拌18小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过快速C18-快速色谱法纯化(以在水(0.1％NH₄HCO₃)中的3％至70％MeCN的洗脱梯度)。将纯级分蒸发至干，得到呈灰白色固体的7-溴-8-氟-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体87)(被6-溴-5-氟-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(3.40g，501％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝311。

中间体88：8-氟-7-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮

将CataCxium APd G2(53mg，0.08mmol)添加到在1，4-二噁烷(15mL)中的7-溴-8-氟-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体87)(被6-溴-5-氟-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(0.5g，0.80mmol)和(三丁基甲锡烷基)甲醇(0.5mL，0.80mmol)。将所得混合物在氮气下在80℃搅拌18小时。将反应混合物用饱和KF(1.25mL)淬灭。通过过滤收集反应溶液，用二噁烷(2.5mL)洗涤。在减压下除去合并的有机层的溶剂。将粗产物通过快速C18快速色谱法(在水中的3至40％MeCN(0.1％TFA)的洗脱梯度)纯化。将纯级分蒸发至干，得到呈灰白色固体的8-氟-7-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体88)(被5-氟-6-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(0.217g，51％)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝263。

实例47：5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1- 基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺

将SOCl₂(0.5mL，6.85mmol)添加到在Et₂O(5mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体88)(被5-氟-6-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(160mg，0.31mmol)。所得混合物在室温下搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。将DIPEA(4mL，22.90mmol)和N，6-二甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体33)(134mg，0.57mmol)添加到在MeCN(10mL)中的混合物中。将所得混合物在室温搅拌24小时。将粗产物通过制备型HPLC进行纯化(柱：XBridge BEH C18 OBD Prep柱，5μm，19mm250mm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10分钟内从24B到33B；254/220nm；RT1：8.2/9.5)将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例47)(8.8mg，6％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.50(3H，s)，2.58-2.66(4H，m)，2.79(3H，d)，2.90-2.99(4H，m)，3.77(2H，s)，7.41(1H，t)，7.47(1H，d)，7.72(1H，d)，7.78(1H，d)，8.39-8.44(1H，m)，13.21(1H，brs)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-68.50，-133.81；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝479。

实例48：6-氟-5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪- 1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将SOCl₂(0.4mL，5.48mmol)添加到在Et₂O(5mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体88)(被5-氟-6-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(120mg，0.23mmol)。所得混合物在室温下搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。将DIPEA(2mL，11.45mmol)和6-氟-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体32)(156mg，0.65mmol)添加至MeCN(10mL)中的混合物。将所得混合物在室温搅拌24小时。将粗产物通过制备型HPLC进行纯化(柱：XBridge BEH C18 OBD Prep柱，5μm，19mm 250mm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10分钟内从25B到37B；254/220nm；RT1：7.58/8.97)。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的6-氟-5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例48)(8.9mg，8％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)2.58-2.65(4H，m)，2.76(3H，d)，3.14-3.21(4H，m)，3.75(2H，s)，7.39(1H，t)，7.56(1H，dd)，7.71(1H，d)，7.84(1H，dd)，8.37-8.43(1H，m)，13.39(1H，brs)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-68.48，-72.59，-133.78；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝483。

实例49：6-氯-5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪- 1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将SOCl₂(0.4mL，5.48mm_ol)添加到在Et₂O(5mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体88)(被5-氟-6-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(120mg，0.23mmol)。所得混合物在室温下搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。将DIPEA(2mL，11.45mmol)和6-氯-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体30)(157mg，0.62mmol)添加至MeCN(10mL)中的混合物。将所得混合物在室温搅拌24小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，19*250mm，10um；流动相A：水(10MHMOL/L NH4HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10分钟内从45B到57B；254/220nm)。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的6-氯-5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例49)(18mg，16％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.60-2.68(4H，m)，2.78(3H，d)，3.07-3.16(4H，m)，3.77(2H，s)，7.40(1H，t)，7.66(1H，d)，7.72(1H，d)，7.93(1H，d)，8.40-8.43(1H，m)，13.25(1H，brs)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-68.51，-133.73；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝499。

实例50：5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1- 基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将SOCl₂(0.4mL，5.48mmol)添加到在Et₂O(5mL)中的8-氟-7-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(中间体88)(被5-氟-6-(羟基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-喹喔啉-2-酮污染)(120mg，0.23mmol)。将所得混合物在室温搅拌2小时。将溶剂在减压下去除。将DIPEA(2mL，11.45mmol)和N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺(中间体31)(259mg，1.18mmol)添加至MeCN(10mL)中的混合物。将所得混合物在室温搅拌24小时。将粗产物通过制备型HPLC纯化(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，19*250mm，10um；流动相A：水(10mmol/LNH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在10分钟内从15B到35B；254/220nm；RT1：10.18/11.2)。将含有所需化合物的级分蒸发至干，得到呈白色固体的5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例50)(6mg，6％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)2.51-2.57(4H，m)，2.76(3H，d)，3.25-3.34(4H，m)，3.72(2H，s)，7.30(1H，t)，7.39(1H，dd)，7.65(1H，d)，7.83(1H，d)，8.27(1H，d)，8..36-8.41(1H，m)；19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-68.34，-133.80；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝465。

中间体90：2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-3-甲基-丁酸甲酯

将DIPEA(2.202mL，12.61mmol)缓慢添加到1-溴-2，4-二氟-3-硝基苯(中间体35)(1g，4.20mmol)和缬氨酸甲酯，HCl(中间体89)(0.704g，4.20mmol)在DMF(6mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在室温搅拌18小时(根据LCMS完全转化为所需产物)。浓缩反应混合物，用水稀释并用乙酸乙酯萃取，将有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。通过正相色谱用纯化粗产物(用己烷：乙酸乙酯)得到呈亮橙色固体的2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-3-甲基-丁酸甲酯(0.763g，52.0％)(中间体90)。1H NMR(500MHz，二氯甲烷-d2)1.00-1.14(6H，m)，2.20-2.35(1H，m)，3.78(3H，s)，4.06(1H，dd)，6.52(1H，br d)，7.39(1H，br d)，7.52(1H，dd)；19F NMR(471MHz，二氯甲烷-d2)-109.33(1F，s)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝349。

中间体91：7-溴-8-氟-3-异丙基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃分批将锌粉(1.143g，17.48mmol)添加到2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-3-甲基-丁酸甲酯(0.763g，2.19mmol)(中间体90)和氯化铵(0.935g，17.48mmol)在MeOH(12mL)和水(0.3mL)中的混合物中(放热反应)，将混合物在室温下搅拌2小时(无SM剩余，橙色完全消失表明反应完成)。滤出Zn，用20％MeOH的DCM溶液洗涤固体滤饼，真空浓缩滤液。向上述粗产物中添加水，并将产物萃取到乙酸乙酯层中。将有机层干燥并真空浓缩以提供无色油状物。将粗产物在1∶1乙酸乙酯：甲醇中浆化，添加0.5mL 4N HCl的二噁烷溶液并将反应搅拌1小时(无未环化产物剩余)。将反应混合物浓缩得到7-溴-8-氟-3-异丙基-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体91)。假设该反应的产率为100％，将粗产物无需任何进一步纯化即可经受试剂用于下一步骤。m/z(ES⁺)[M+H]+＝287。

中间体92：7-溴-8-氟-3-异丙基-1H-喹喔啉-2-酮

将4，5-二氯-3，6-二氧代环己-1，4-二烯-1，2-二甲腈(595mg，2.62mmol)一次性添加至7-溴-8-氟-3-异丙基-3，4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(627mg，2.18mmol)(中间体91)在DCM(20mL)中的搅拌溶液中。将所得浆液在室温搅拌2小时(根据LCMS完全转化为所需产物)。真空浓缩反应混合物并用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭。将上述浆液在室温搅拌过夜并滤出固体。用水接着用二乙醚彻底洗涤过滤的固体并干燥，得到呈灰白色固体的7-溴-8-氟-3-异丙基-1H-喹喔啉-2-酮(0.425g，68.3％)(中间体92)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(6H，d)，3.36-3.52(1H，m)，7.45-7.58(2H，m)，12.62(1H，br s)；19FNMR(471MHz，DMSO-d6)-124.16(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝285。

中间体93：8-氟-7-(羟基甲基)-3-异丙基-1H-喹喔啉-2-酮

将Xphos Pd G2(103mg，0.13mmol)添加到7-溴-8-氟-3-异丙基喹喔啉-2(1H)-酮(375mg，1.32mmol)溶液中(中间体92)和(三丁基甲锡烷基)甲醇(507mg，1.58mmol)在1，4-二噁烷(6.58mL)中的搅拌脱气溶液中。将所得溶液在80℃下搅拌16小时。在真空下浓缩反应混合物，并通过正相色谱法纯化(使用0-10％MeOH的DCM溶液)得到呈白色固体的8-氟-7-(羟基甲基)-3-异丙基-1H-喹喔啉-2-酮(0.255g，82％)(中间体93)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(6H，d)，3.39-3.52(1H，m)，4.64(2H，d)，5.41(1H，t)，7.33(1H，s)，7.55(1H，d)，12.42(1H，br s).；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-137.71(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝237。

中间体94：7-(溴甲基)-8-氟-3-异丙基-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃下在氮气下经5分钟的时间将三乙基膦(0.477ml，3.23mmol)滴加到8-氟-7-(羟基甲基)-3-异丙基喹喔啉-2(1H)-酮(0.2541g，1.08mmol)(中间体93)和CBr4(1.177g，3.55mmol)在DCM(8.49mL)中的搅拌溶液中。将反应混合物在室温搅拌1小时，在真空下除去DCM并将所得固体在二乙醚中浆化。真空过滤白色ppt，用水和然后用醚洗涤。将固体真空干燥过夜(不加热)，得到呈浅棕色固体的7-(溴甲基)-8-氟-3-异丙基-1H-喹喔啉-2-酮(0.313g，97％)(中间体94)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝299。

实例51：6-氟-5-[4-[(5-氟-2-异丙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1- 基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-8-氟-3-异丙基喹喔啉-2(1H)-酮(100mg，0.33mmol)(中间体94)添加6-氟-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(104mg，0.33mmol)(中间体32)、乙腈(5mL)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(291μL，1.67mmol)并加热至70℃。LCMS指示1小时后SM完全消失并形成所需产物。冷却反应混合物，浓缩，用NaHCO3水溶液(1mL)淬灭并在室温下搅拌1小时。将水(3mL)添加上述混合物中并搅拌10分钟。过滤沉淀并用大量水(50mL)洗涤。将固体通过正相色谱纯化(使用0-10％MeOH的DCM溶液)，得到呈白色固体的6-氟-5-[4-[(5-氟-2-异丙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.050g，32.8％)(实例51)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(6H，d)，2.53-2.65(4H，m)，2.77(3H，d)，3.12-3.24(4H，m)，3.36-3.52(1H，m)，3.71(2H，s)，7.30(1H，t)，7.52-7.59(2H，m)，7.84(1H，d)，8.36-8.41(1H，m)，12.46(1H，br s).；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.53(1F，s)，-72.59(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝457。

实例52：5-[4-[(5-氟-2-异丙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-8-氟-3-异丙基喹喔啉-2(1H)-酮(109mg，0.36mmol)(中间体94)添加N，6-二甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(112mg，0.36mmol)(中间体33)、乙腈(5mL)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(317ul，1.82mmol)并加热至70℃。LCMS指示1小时后SM完全消失并形成所需产物。冷却反应混合物，浓缩，用NaHCO3水溶液(1mL)淬灭并在室温下搅拌1小时。将水(3mL)添加上述混合物中并搅拌10分钟。过滤沉淀并用大量水(50mL)洗涤。将固体通过正相色谱纯化(使用0-10％MeOH的DCM溶液)，得到呈白色固体的5-[4-[(5-氟-2-异丙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.057g，34.6％)(实例52)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(6H，d)，2.46-2.49(3H，m)，2.52-2.68(4H，m)，2.80(3H，d)，2.94(4H，br s)，3.36-3.52(1H，m)，3.73(2H，s)，7.30(1H，t)，7.47(1H，d)，7.56(1H，d)，7.79(1H，d)，8.37-8.44(1H，m)，12.46(1H，s).；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.55(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝453。

实例53：5-[4-[(5-氟-2-异丙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-l-基]-N- 甲基-吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-8-氟-3-异丙基喹喔啉-2(1H)-酮(100mg，0.33mmol)(中间体94)添加N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(98mg，0.33mmol)(中间体31)、乙腈(5mL)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(291μl，1.67mmol)并加热至70℃。LCMS指示1小时后SM完全消失并形成所需产物。冷却反应混合物，浓缩，用NaHCO3水溶液(1mL)淬灭并在室温下搅拌1小时。将水(3mL)添加上述混合物中并搅拌10分钟。过滤沉淀并用大量水(50mL)洗涤。将固体通过正相色谱纯化(使用0-10％MeOH的DCM溶液)，得到呈白色固体的5-[4-[(5-氟-2-异丙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.052g，35.5％)(实例53)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.22(6H，d)，2.52-2.61(4H，m)，2.78(3H，d)，3.26-3.30(4H，m)，3.36-3.52(1H，m)，3.70(2H，s)，7.31(1H，t)，7.38(1H，dd)，7.56(1H，d)，7.82(1H，d)，8.26(1H，d)，8.38(1H，br d)，12.45(1H，br s).；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.54(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝439。

中间体96：2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-2-环丙基-乙酸甲酯

将DIPEA(2.202mL，12.61mmol)缓慢添加到1-溴-2，4-二氟-3-硝基苯(中间体35)(1g，4.20mmol)和2-氨基-2-环丙基乙酸甲酯，HCl(中间体95)(0.696g，4.20mmol)在DMF(6mL)中的搅拌溶液中。将所得溶液在室温搅拌18小时(根据LCMS完全转化为所需产物)。浓缩反应混合物，用水稀释并用乙酸乙酯萃取，将有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。通过正相色谱纯化粗产物(使用己烷和乙酸乙酯)得到呈亮橙色固体的2-(4-溴-3-氟-2-硝基-苯胺基)-2-环丙基-乙酸甲酯(0.635g，43.5％)(中间体96)。1H NMR(500MHz，二氯甲烷-d2)0.39-0.49(1H，m)，0.54(1H，td)，0.64-0.75(2H，m)，1.25-1.39(1H，m)，3.74-3.83(4H，m)，6.45(1H，dd)，7.34(1H，br d)，7.52(1H，dd)。19F NMR(471MHz，二氯甲烷-d2)-109.53(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝347。

中间体97：7-溴-3-环丙基-8-氟-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃分批将锌粉(957mg，14.63mmol)添加到2-((4-溴-3-氟-2-硝基苯基)氨基)-2-环丙基乙酸甲酯(635mg，1.83mmol)(中间体96)和氯化铵(783mg，14.63mmol)在MeOH(12mL)和水(0.3mL)中的混合物中(放热反应)，将混合物在室温下搅拌2小时(无SM剩余，橙色完全消失表示反应完成)。滤出Zn并用20％MeOH的DCM溶液洗涤固体滤饼。浓缩滤液，粗材料显示很大程度未环化的产物。向上述粗产物中添加水，并将产物萃取到乙酸乙酯层中。将有机层干燥并真空浓缩以提供油状物。将该材料在1∶1乙酸乙酯∶甲醇中浆化，添加0.5mL4N HCl的二噁烷溶液并将反应混合物搅拌1小时(无未环化产物剩余)。将反应混合物浓缩以产生呈灰色固体的7-溴-3-环丙基-8-氟-3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮(中间体97)。假设该反应的产率为100％，将粗产物无需任何进一步纯化即可经受试剂用于下一步骤。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝285。

中间体98：7-溴-3-环丙基-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮

将4，5-二氯-3，6-二氧代环己-1，4-二烯-1，2-二甲腈(499mg，2.20mmol)一次性添加至7-溴-3-环丙基-8-氟-3，4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(522mg，1.83mmol)(中间体97)在DCM(20mL)中的搅拌溶液中。将所得浆液在室温搅拌2小时(根据LCMS完全转化为所需产物)。真空浓缩反应混合物并用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭。将上述浆液在室温搅拌过夜并滤出固体。用水接着用二乙醚彻底洗涤固体并干燥，得到呈灰白色固体的7-溴-3-环丙基-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(0.382g，73.7％)(中间体98)。m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝283。

中间体99：3-环丙基-8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮

将Xphos Pd G2(92mg，0.12mmol)添加至7-溴-3-环丙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(332mg，1.17mmol)(中间体98)和(三丁基甲锡烷基)甲醇(452mg，1.41mmol)在1，4-二噁烷(5.86mL)中的搅拌脱气溶液中并且将所得混合物在80℃搅拌16小时。在真空下浓缩反应混合物，并通过正相色谱法纯化(使用0-10％MeOH的DCM溶液)得到呈白色固体的3-环丙基-8-氟-7-(羟基甲基)-1H-喹喔啉-2-酮(0.224克，82％)(中间体99)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.02-1.14(4H，m)，2.52-2.73(1H，m)，4.62(2H，d)，5.38(1H，t)，7.29(1H，t)，7.43(1H，d)，12.43(1H，br s).；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-137.67(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝235。

中间体100：7-(溴甲基)-3-环丙基-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃下在氮气下经5分钟的时间将三乙基膦(0.422ml，2.86mmol)滴加到3-环丙基-8-氟-7-(羟基甲基)喹喔啉-2(1H)-酮(0.223g，0.95mmol)(中间体99)和CBr4(1.043g，3.14mmol)在DCM(7.52mL)中的混合物中。将反应在室温下搅拌1小时。真空除去DCM，将所得固体在二乙醚中浆化。真空过滤浅绿白色ppt，用水和然后用醚洗涤。将固体真空干燥过夜(不加热)，得到呈浅绿色固体的7-(溴甲基)-3-环丙基-8-氟-1H-喹喔啉-2-酮(0.193g，68.2％)(中间体100)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.03-1.17(4H，m)，2.63-2.76(1H，m)，4.79(2H，s)，7.33(1H，t)，7.43(1H，d)，12.55(1H，br s).；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-133.65(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝297。

实例54：5-[4-[(2-环丙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6- 氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-3-环丙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(75mg，0.25mmol)(中间体100)添加6-氟-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(79mg，0.25mmol)(中间体32)、乙腈(5mL)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(220μl，1.26mmol)并加热至70℃。LCMS指示1小时后SM完全消失并形成所需产物。冷却反应混合物，浓缩，用NaHCO3水溶液(1mL)淬灭并在室温下搅拌1小时。将水(3mL)添加上述混合物中并搅拌10分钟。过滤沉淀并用大量水(50mL)洗涤。将固体通过正相色谱纯化(使用0-10％MeOH的DCM溶液)，得到呈白色固体的5-[4-[(2-环丙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.048g，41.8％)(实例54)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.04-1.13(4H，m)，2.52-2.63(4H，m)，2.71(1H，s)，2.77(3H，d)，3.12-3.21(4H，m)，3.69(2H，s)，7.26(1H，t)，7.43(1H，d)，7.55(1H，dd)，7.84(1H，d)，8.39(1H，br d)，12.46(1H，br s).；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.52(1F，s)，-72.58(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝455。

实例55：5-[4-[(2-环丙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-l-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-3-环丙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(75mg，0.25mmol)(中间体100)添加N，6-二甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(78mg，0.25mmol)(中间体33)、乙腈(5mL)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(220μL，1.26mmol)并加热至70℃。LCMS指示1小时后完全转化为所需产物。冷却反应混合物，浓缩，用NaHCO3水溶液(1mL)淬灭并在室温下搅拌1小时。将水(3mL)添加上述混合物中并搅拌10分钟。过滤沉淀并用大量水(50mL)洗涤。将固体通过正相色谱纯化(使用0-10％MeOH的DCM溶液)，得到呈白色固体的5-[4-[(2-环丙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.049g，43.1％)(实例55)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.03-1.15(4H，m)，2.46-2.49(3H，m)，2.52-2.65(4H，m)，2.65-2.75(1H，m)，2.80(3H，d)，2.94(4H，br s)，3.71(2H，s)，7.26(1H，t)，7.40-7.50(2H，m)，7.79(1H，d)，8.37-8.44(1H，m)，12.46(1H，s).；19FNMR(471MHz，DMSO-d6)-135.54(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝451。

实例56：5-[4-[(2-环丙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N- 甲基-吡啶-2-甲酰胺

向7-(溴甲基)-3-环丙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(43mg，0.14mmol)(中间体100)添加N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(42.4mg，0.14mmol)(中间体31)、乙腈(5mL)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(126μl，0.72mmol)并加热至70℃。LCMS指示1小时后SM完全消失并形成所需产物。冷却反应混合物，浓缩，用NaHCO3水溶液(1mL)淬灭并在室温下搅拌1小时。将水(3mL)添加上述混合物中并搅拌10分钟。过滤沉淀并用大量水(25mL)洗涤。将固体通过正相色谱纯化(使用0-10％MeOH的DCM溶液)，得到呈白色固体的5-[4-[(2-环丙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.020g，31.7％)(实例56)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.03-1.16(4H，m)，2.53-2.60(4H，m)，2.65-2.80(5H，m)，3.68(2H，s)，7.25(1H，br t)，7.38(1H，dd)，7.42(1H，d)，7.82(1H，d)，8.25(1H，d)，8.35-8.40(1H，m)，12.38-12.51(1H，m)(缺失的3H可能与DMSO峰重叠)；19F NMR(471MHz，DMSO-d6)-135.52(1F，s).；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝437

中间体102：7-溴-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

将4-溴-3-甲基苯-1，2-二胺(1.75g，8.70mmol)(中间体101)、2，2，2-三甲氧基乙酸甲酯(2.86g，17.41mmol)和三氟甲磺酸镱(III)(0.540g，0.87mmol)在甲苯(10mL)中在密封管中的混合物脱气，用N₂回填，在100℃下搅拌过夜，得到棕色悬浮液，LCMS指示形成了所需产物，将混合物冷却至室温，将固体通过过滤收集，用甲醇洗涤，干燥得到呈黄色固体的7-溴-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(1.2g，51.2％)(中间体102)(被约8％的其区域异构体6-溴-3-甲氧基-5-甲基喹喔啉-2(1H)-酮污染)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.50(3H，brs)，3.97(3H，s)，7.32(1H，d)，7.45(1H，d)，11.79(1H，br s)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝269。

中间体103：7-(羟基甲基)-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

将(三丁基甲锡烷基)甲醇(1.844g，5.74mmol)、7-溴-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(1.03g，3.83mmol)(中间体102)和XphosPd G2(0.452g，0.57mmol)在1，4-二噁烷(40mL)中的混合物在80℃下在N₂下搅拌过夜，得到深色混合物，LCMS显示接近完全转化。减压除去溶剂，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)，将级分浓缩成黄色固体，通过LCMS检查固体，指示它不是很纯，然后将产物在20mL甲醇中浆化，将固体通过过滤收集，干燥以产生呈黄色固体的具有55％纯度的产物(被30％起始材料和9.5％脱溴副产物污染)。

将上述得到的固体装入具有1，4-二噁烷(40mL)的干燥烧瓶中，向烧瓶中添加900mg(三丁基锡)甲醇和300mg xphos Pd G2，将混合物脱气，然后在80℃在N₂下搅拌过夜。减压除去溶剂，将混合物在硅胶柱上纯化(用0至20％甲醇的DCM溶液洗脱)，得到呈黄色固体的7-(羟基甲基)-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(800mg，95％)(中间体103)，根据LCMS纯度为80％。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.32(3H，s)，3.91-4.01(3H，m)，4.56(2H，d)，5.15(1H，t)，7.27(1H，d)，7.37(1H，d)，11.57(1H，br s)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝221。

中间体104：7-(溴甲基)-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮

在0℃在N₂下将三乙基膦(294μl，2.04mmol)滴加到7-(羟基甲基)-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(300mg，1.36mmol)(中间体103)和1，1，2，2-四溴-1，2-二氯乙烷(875mg，2.11mmol)在CH₂Cl₂(20mL)中的悬浮液中，然后将所得混合物在室温下搅拌3.5小时，减压除去溶剂，将残余物悬浮在醚(10mL)中，过滤，将固体用醚(10mL x 2)洗涤，然后将固体悬浮在水(20mL)中，过滤，用水(5mL x 3)洗涤，干燥，得到呈淡黄色固体的7-(溴甲基)-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(0.250g，64.8％)(中间体104)。(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝285。

实例57：5-[4-[(2-甲氧基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]- N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺

向N，6-二甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(83mg，0.27mmol)(中间体33)和7-(溴甲基)-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(85mg，0.27mmol)(中间体104)在乙腈(6mL)中的悬浮液中添加DIPEA(236μL，1.35mmol)，将所得混合物在70℃搅拌2小时，得到澄清溶液，将混合物冷却至室温，得到悬浮液，将固体通过过滤收集，用水、乙腈洗涤，干燥，得到呈白色固体的5-[4-[(2-甲氧基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.064g，54.3％)(实例57)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.43(3H，s)，2.49(3H，s)，2.57(4H，br s)，2.80(3H，d)，2.91(4H，br s)，3.60(2H，s)，3.95(3H，s)，7.18(1H，d)，7.35(1H，d)，7.46(1H，d)，7.78(1H，d)，8.40(1H，q)，11.58(1H，br s)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝437

实例58：6-氟-5-[4-[(2-甲氧基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1- 基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

向6-氟-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺，2HCl(84mg，0.27mmol)(中间体32)和7-(溴甲基)-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(85mg，0.27mmol)(中间体104)在乙腈(6mL)中的悬浮液中添加DIPEA(236μL，1.35mmol)，将所得混合物在70℃下搅拌2小时得到悬浮液，将混合物冷却至室温，将固体通过过滤收集，用水、乙腈洗涤，干燥，将固体悬浮在乙腈中，过滤并干燥得到呈米色固体的6-氟-5-[4-[(2-甲氧基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.073g，61.3％)(实例58)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.42(3H，s)，2.55(4H，br s)，2.76(3H，d)，3.14(4H，br s)，3.58(2H，s)，3.95(3H，s)，7.17(1H，br d)，7.35(1H，br d)，7.50-7.63(1H，m)，7.83(1H，br d)，8.38(1H，br d)，11.58(1H，s)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝442。

中间体106：6-溴-5-氟-吡啶-2-甲酸甲酯

将硫酸(1.5mL，28.14mmol)缓慢添加到6-溴-5-氟吡啶甲酸(500mg，2.27mmol)(中间体105)在MeOH(8mL)中的混合物中。在室温下继续搅拌混合物3小时，得到白色悬浮液。LCMS指示完全转化，将混合物倒入饱和NaHCO₃水溶液中，用DCM(40mL x 2)萃取，将有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩至得到呈白色固体的6-溴-5-氟-吡啶-2-甲酸甲酯(532mg，100％)(中间体106)，其无需进一步纯化即可用于下一步。1H NMR(500MHz，氯仿-d)4.01(3H，s)，7.55(1H，t)，8.15(1H，dd)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝236。

中间体107；4-(2-溴-6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(8.21g，44.06mmol)、6-溴-5-氟-吡啶-2-甲酸甲酯(6.065g，25.92mmol)(中间体106)和碳酸钾(4.66g，33.69mmol)在DMF(60mL)中的混合物在的110℃下搅拌5小时，LCMS指示完全转化。将混合物冷却至室温，用DCM和水稀释，分离各层，用DCM萃取水层两次，将有机层合并，干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，UV波长为221nm，310nm)，得到呈白色固体的所需产物4-(2-溴-6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(7.68g，74.1％)(中间体107)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.51(9H，s)，3.14(4H，br t)，3.60-3.71(4H，m)，3.99(3H，s)，7.32(1H，d)，8.08(1H，d)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝402。

中间体108：4-[2-溴-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将密封容器中的在甲胺中(100mL，19.16mmol)(在乙醇中33％)中的4-(2-溴-6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(7.67g，19.16mmol)(中间体107)在60℃下搅拌4.5小时，LCMS指示完全转化，将混合物冷却至室温，浓缩，将残余物溶解在DCM中，用饱和NH₄Cl溶液洗涤，干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩得到呈白色固体的4-[2-溴-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(7.48g，98％)(中间体108)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.50(9H，s)，3.02(3H，d)，3.08(4H，br t)，3.60-3.71(4H，m)，7.36(1H，d)，7.68(1H，br d)，8.11(1H，d)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝401。

中间体109：4-[6-(甲基氨基甲酰基)-2-乙烯基-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将4-[2-溴-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.344g，3.37mmol)(中间体108)、三丁基(乙烯基)锡烷(1.174g，3.70mmol)和Xphos Pd G2(0.132g，0.17mmol)在1，4-二噁烷(25ml)中的混合物在100℃下在N₂下搅拌2.5小时，LCMS显示完全转化。将混合物用DCM稀释，用饱和NH₄Cl洗涤，将有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并且浓缩，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至80％乙酸乙酯的己烷溶液，UV波长为226nm，293nm)得到呈白色固体的4-[6-(甲基氨基甲酰基)-2-乙烯基-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.961g，82％)(中间体109)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.50(9H，s)，2.90-3.01(4H，m)，3.05(3H，d)，3.55-3.68(4H，m)，5.54(1H，dd)，6.42(1H，dd)，7.10(1H，dd)，7.39(1H，d)，7.98(1H，br d)，8.07(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝346.6，348.5。

中间体110：4-[2-甲酰基-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将四氧化锇的H₂O溶液(0.0435mL，6.00μmol)添加到4-[6-(甲基氨基甲酰基)-2-乙烯基-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(960mg，2.77mmol)(中间体109)、2，6-二甲基吡啶(646μl，5.54mmol)和高碘酸钠(2371mg，11.08mmol)在THF(25mL)/水(5mL)/叔丁醇(2650μL，27.71mmol)中的溶液中并在室温下搅拌过夜，得到黄色悬浮液。LCMS和TLC指示完全转化。将反应用水稀释并用乙酸乙酯萃取。浓缩后，将粗材料通过二氧化硅柱纯化(用0至100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，UV在226nm，310nm)得到呈黄色固体的4-[2-甲酰基-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.732g，76％)(中间体110)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.50(9H，s)，3.07(3H，d)，3.15-3.30(4H，m)，3.63-3.79(4H，m)，7.48(1H，d)，7.85(1H，br d)，8.28(1H，d)，10.10(1H，s)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝349。

中间体111：4-[2-(二氟甲基)-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁 酯

将在CH₂Cl₂(10mL)中的4-[2-甲酰基-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(730mg，2.10mmol)(中间体110)冷却至0℃，将在DCM(5mL)中的DAST(692μL，5.24mmol)添加至混合物中，然后将所得混合物在室温搅拌4小时，TLC和LCMS指示完全转化。滴加饱和NaHCO₃水溶液淬灭反应混合物，用DCM萃取，将有机物干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩，将残余物在硅胶柱上纯化(用0至100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，UV波长为254nm，293nm)得到呈白色固体的4-[2-(二氟甲基)-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.666g，86％)(中间体111)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.50(9H，s)，2.93-3.02(4H，m)，3.05(3H，d)，3.57-3.72(4H，m)，6.99(1H，t)，7.62(1H，d)，7.92(1H，br d)，8.27(1H，d)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝371。

中间体60：6-(二氟甲基)-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl

将HCl 4M的二噁烷溶液(7mL，28.00mmol)添加到装有4-[2-(二氟甲基)-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(665mg，1.80mmol)(中间体111)和搅拌棒的烧瓶中，将混合物在室温搅拌1小时，得到黄色悬浮液。除去溶剂，将残余物用醚稀释，将固体通过过滤收集，干燥得到呈橙色固体的6-(二氟甲基)-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(0.617g，100％)(中间体60)。(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝272。

实例59：6-(二氟甲基)-5-[4-[(2-甲氧基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲 基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

向6-(二氟甲基)-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(87mg，0.25mmol)(中间体60)和7-(溴甲基)-3-甲氧基-8-甲基-1H-喹喔啉-2-酮(80mg，0.25mmol)(中间体104)在乙腈(6mL)中的悬浮液中添加DIPEA(222μL，1.27mmol)，将所得混合物在70℃搅拌2小时，得到澄清溶液，将混合物冷却至室温，得到悬浮液，将固体通过过滤收集，用乙腈、水洗涤，干燥得到呈白色固体的6-(二氟甲基)-5-[4-[(2-甲氧基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.070g，58.3％)(实例59)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.43(3H，s)，2.59(4H，br s)，2.83(3H，br d)，2.98(4H，br s)，3.60(2H，s)，3.95(3H，s)，6.92-7.29(2H，m)，7.35(1H，d)，7.85(1H，br d)，8.08(1H，d)，8.38(1H，brd)，11.58(1H，br s)；((m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝473。

实例60：6-(二氟甲基)-5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌 嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺

将7-(溴甲基)-3，8-二甲基-1H-喹喔啉-2-酮(196mg，0.73mmol)(中间体8)、6-(二氟甲基)-N-甲基-的混合物5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(252mg，0.73mmol)(中间体60)和Et₃N(0.614mL，4.41mmol)在乙腈(25mL)中混合物在70℃搅拌2小时，得到澄清溶液，LCMS指示完全转化。将混合物冷却至室温过夜。从混合物中结晶出固体，将固体通过过滤收集，用乙腈、水洗涤，干燥得到产物的第1部分141mg，浓缩滤液，在反相吉尔森上纯化(用5％至80％ACN/水/0.1％TFA洗脱)得到作为TFA盐的产物的第二部分92mg。总共：呈灰白色固体的6-(二氟甲基)-5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(0.233g，64.0％)(实例60)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.40(3H，s)，2.43(3H，s)，2.60(4H，br s)，2.83(3H，d)，2.98(4H，br d)，3.63(2H，s)，6.95-7.22(1H，m)，7.23-7.29(1H，m)，7.51(1H，d)，7.85(1H，d)，8.08(1H，d)，8.38(1H，br d)，11.54(1H，brs)；(m/z)(ES⁺)[M+H]⁺＝457。

中间体113：6-氯-5-(哌嗪-1-基)吡啶甲酸甲酯

将哌嗪(1.0g，11.61mmol)添加到在MeCN(30mL)中的6-氯-5-氟吡啶甲酸甲酯(中间体112，1.0g，5.28mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌18小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过反相色谱法(洗脱梯度为水(0.1％NH₄HCO₃)中的5％至60％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以得到呈红色油状物的6-氯-5-(哌嗪-1-基)吡啶甲酸甲酯(中间体113，1.28g，95％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ2.81-2.91(4H，m)，3.04-3.08(4H，m)，3.85(3H，s)，7.61(1H，d)，8.00(1H，d)(未显示NH质子)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝256。

中间体30：6-氯-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺

将甲胺在THF(40mL，80.00mmol)中的2M溶液添加至6-氯-5-(哌嗪-1-基)吡啶甲酸甲酯(中间体113，1.26g，4.93mmol)中。将所得混合物在80℃下搅拌18小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过反相色谱法(洗脱梯度为水(0.1％NH₄HCO₃)中的5％至60％MeCN)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以得到呈浅黄色油状物的6-氯-N-甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(中间体30，1.12g，89％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ2.79(3H，d)，2.85-2.89(4H，m)，2.97-3.02(4H，m)，7.63(1H，d)，7.94(1H，d)，8.45(1H，q)(哌嗪-未显示NH质子)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝255。

中间体114：4-[2-氟-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将在甲胺(120mL，36.80mmol，33wt％，在乙醇中)中的4-(2-氟-6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体11，12.49g，36.80mmol)在室温下搅拌24小时(密封管)。将溶剂在减压下去除。将残余物溶解于DCM中并通过硅胶床过滤并用乙酸乙酯洗涤。将滤液浓缩并在真空下干燥以得到呈黄色固体的4-[2-氟-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体114，12.45g，100％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)1.42(9H，s)，2.77(3H，d)，3.04-3.16(4H，m)，3.43-3.56(4H，m)，7.59(1H，dd)，7.80-7.93(1H，m)，8.41(1H，q)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝340。

中间体32：6-氟-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺

在0℃下，将HCl(4M，在二噁烷中，100ml，400.00mmol)添加至4-[2-氟-6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体114，12.5g，36.94mmol)在1，4-二噁烷(50mL)中的溶液中。将反应搅拌5h，在这期间将温度加温至室温以给出黄色悬浮液。将悬浮液用乙醚稀释，过滤出固体并用乙醚洗涤。将此固体在真空下干燥以得到呈淡黄色固体的6-氟-N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺，2HCl(中间体32，11.42g，99％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 2.8(d，J＝4.6Hz，3H)3.3(br s，4H)3.4(br d，J＝4.4Hz，4H)7.6-7.7(m，1H)7.9(d，J＝8.1Hz，1H)8.4(br d，J＝4.4Hz，1H)9.0-9.3(m，2H)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝239

中间体115：5-溴-N，6-二甲基吡啶酰胺

将甲胺在THF(20mL，40.00mmol)中的2M溶液添加至5-溴-6-甲基吡啶甲酸甲酯(中间体14，2.0g，8.69mmol)中，并将所得混合物在80℃下搅拌18小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过反相色谱法(洗脱梯度为水(0.1％NH₄HCO₃)中的5％至80％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以得到呈浅黄色固体的5-溴-N，6-二甲基吡啶酰胺(中间体115，1.5g，75％)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ2.65(3H，s)，2.82(3H，d)，7.75(1H，d)，8.17(1H，d)，8.57-8.76(1H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝229

中间体116：4-(2-甲基-6-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

在氮下，将5-溴-N，6-二甲基吡啶酰胺(中间体115，1.0g，4.37mmol)添加至在甲苯(20mL)中的哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.894g，4.80mmol)、BINAP(0.272g，0.44mmol)、Pd(OAc)₂(0.098g，0.44mmol)和Cs₂CO₃(3.56g，10.91mmol)中。将所得混合物在80℃下搅拌16小时。将溶剂在减压下去除。将粗产物通过反相色谱法(洗脱梯度为水(0.4％HCO₂H)中的5％至30％MeOH)进行纯化。将纯级分蒸发至干燥以得到呈棕色固体的4-(2-甲基-6-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体116，1.2g，82％)。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ1.50(9H，s)，2.58(3H，s)，2.92-3.00(7H，m)，3.62(4H，m)，7.50(1H，d)，7.88(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝335。

中间体33：N，6-二甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺

将4-(2-甲基-6-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体115，1.18g，3.53mmol)添加至在1，4-二噁烷(10mL，329.15mmol)中的4M HCl溶液中。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将沉淀物通过过滤收集，用石油醚(5mL x 2)、Et₂O(5mL x 2)洗涤，并在真空下干燥以得到呈黄色固体的N，6-二甲基-5-(哌嗪-1-基)吡啶酰胺(中间体33，0.77g，81％)。¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ2.86(3H，s)，3.02(3H，s)，3.42-3.54(8H，m)，8.29(2H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝235。

中间体117：4-(6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将Ruphos Pd G3(4.07g，4.86mmol)添加至5-溴吡啶-2-甲酸甲酯(中间体9，30g，138.87mmol)、哌嗪-1-甲酸叔丁酯(27.2g，145.81mmol)、Cs2CO3(90g，277.73mmol)在1，4-二噁烷(200mL)中的脱气的混合物中，并将混合物在110℃下在N2气氛下搅拌6小时。然后将混合物冷却至室温，用水稀释，用乙酸乙酯萃取(150ml x 3)。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥并过滤。向此滤液中添加3-(二亚乙基三氨基)丙基官能化的硅胶(12g，1.3mmol/g加载)并将混合物在室温下搅拌1小时。将混合物过滤，并将滤液浓缩至约100mL。将结晶的黄色固体过滤出，用乙醚洗涤并在真空下干燥以得到呈黄色固体的4-(6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体117，26.36g，82mmol，59.1％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.50(9H，s)，3.31-3.42(4H，m)，3.56-3.68(4H，m)，3.98(3H，s)，8.04(1H，d)，8.37(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝322。

中间体118：4-[6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯

将甲胺(100mL，1155.26mmol，40％，在水中)添加至4-(6-甲氧基羰基-3-吡啶基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体117，36g，112.02mmol)在MeOH(100mL)中的溶液中，并将反应在室温下搅拌4小时以给出白色悬浮液。将混合物浓缩，将残余物在饱和NH₄Cl溶液与DCM之间分配，将各层分离。将水层用DCM萃取，将有机层合并，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩以给出呈黄色固体的4-[6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体118，35.9g，100％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)1.49(9H，s)，3.02(3H，d)，3.26-3.35(4H，m)，3.58-3.67(4H，m)，7.23(1H，dd)，7.81(1H，br d)，8.07(1H，d)，8.16(1H，d)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝321。

中间体119：5-(哌嗪-1-基)吡啶甲酸甲酯

在0℃将在二噁烷中的HCl 4M(20ml，576.01mmol)添加到4-(6-(甲氧基羰基)吡啶-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(中间体117，1.55g，4.82mmol)在MeOH(2mL)中的混合物中，将反应在室温下搅拌2小时，得到悬浮液，LCMS指示完全转化，将混合物用醚(约80ml)稀释，将固体通过过滤收集，用醚洗涤，干燥，得到呈黄色固体的5-(哌嗪-1-基)吡啶甲酸甲酯(中间体119)(1.384g，98％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)3.21(4H，br s)，3.66(4H，br d)，3.83(3H，s)，7.43-7.55(1H，m)，7.95(1H，br d)，8.43(1H，br s)，9.49(2H，br s)；(m/z)(ES+)[M+H]+＝223.0。

中间体31：甲酸酯N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺

将HCl(4M，在二噁烷中，150mL，600.00mmol)添加至叔丁基4-[6-(甲基氨基甲酰基)-3-吡啶基]哌嗪-1-甲酸酯(中间体118，35.9g，112.05mmol)在MeOH(50mL)中的悬浮液中，并将所得橙色悬浮液在室温下搅拌4小时。在减压下除去约80mL的溶剂，并将混合物用乙醚和己烷(200ml，1/1)稀释。将固体通过过滤收集，用己烷洗涤，干燥，并在真空下干燥以得到呈黄色固体的N-甲基-5-哌嗪-1-基-吡啶-2-甲酰胺2HCl盐(中间体31，37.0g，100％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)2.79(3H，d)，3.22(4H，br s)，3.53-3.67(4H，m)，7.51(1H，dd)，7.91(1H，d)，8.33(1H，d)，8.50(1H，br s)，9.19-9.49(2H，m)；m/z(ES⁺)[M+H]⁺＝221。

实例61：6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺结晶形式B(无水形式)的制备

方法1

将43mg(0.10mmol)6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(来自例如实例20)悬浮在1.0ml MeOH中并添加0.11ml1M甲磺酸(MSA)水溶液以获得澄清溶液。向该溶液中添加0.11ml 1N NaOH水溶液。NaOH溶液添加完后，白色固体开始沉淀。在室温下搅拌浆液1天。过滤36mg白色固体并在空气中干燥。XRPD显示固体是纯的6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺形式B。

方法2

将吡啶(93.5g)添加到纯6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺甲磺酸酯(4.67kg，通过实例63的方法2制备)在75±5℃的水(47.9kg)和乙醇(38.0kg)中的溶液中，然后添加根据方法1制备的6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺形式B种子(4.7g)。将浆液在75±5℃搅拌40分钟，然后经3小时40分钟逐渐添加吡啶(651g)在50∶50v∶v水∶乙醇(4.2kg)中的溶液。将浆液在75±5℃搅拌50分钟，然后经3小时50分钟逐渐添加4-甲基吗啉(900g)在50∶50v∶v水：乙醇(4.1kg)中的溶液。将浆液在75±5℃下搅拌1小时10分钟，经4小时50分钟冷却至25±5℃，在25±5℃下搅拌15小时，然后过滤。将所得固体用50∶50v∶v水∶乙醇(12.5kg x 2)洗涤两次，然后在25℃和50℃之间真空干燥1天得到纯6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺形式B(3.54kg)，产率为93％。

将来自方法1的形式B通过XRPD进行分析并且将结果如下列表(表1)并且在图1中示出。

表1.形式B的XRPD峰

形式B的特征在于提供使用CuKα辐射测量的以下2θ值中的至少一者：6.2°、14.3°和15.6°。

将形式B(方法1)通过热技术进行分析。DSC分析指示，形式B具有在275℃开始并且在276℃达到峰的熔点。TGA指示形式B展现出从约25℃加热至约100℃后约0.2％的质量损失。形式B的代表性DSC/TGA热谱图示于图2中。

实例62：6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺结晶形式D(无水形式)的制备。

将5-6mg的6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例20)溶解于MeOH/DCM/H₂O(0.50ml/0.50ml/0.20ml)的混合溶剂中，缓慢蒸发澄清溶液在环境条件下得到白色固体。XRPD显示所得白色固体为6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺形式D。

将形式D通过XRPD进行分析并且将结果如下列表(表2)并且在图3中示出。

表2.形式D的XRPD峰

角度(2θ±0.2°)	强度(％)
		9.6	100.0
18.4	43.0
		13.1	32.0
19.9	17.9
		27.1	17.3
9.2	15.9
		21.7	14.0
23.4	11.2
		24.5	9.6
19.3	8.8
		16.8	8.7
22.2	8.3
		16.3	8.0
18.8	7.6
		25.4	6.9
10.2	6.6
		33.0	6.3
22.5	5.8
		12.6	5.7
7.9	4.5

形式D的特征在于提供使用CuKα辐射测量的以下2θ值中的至少一者：7.9°、13.1°和16.3°。

形式D的单晶从6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺的DMF溶液(或DMF/H₂O)的蒸发获得。单晶结构分析证实形式D是无水形式。6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺形式D的分子结构显示在图4中。晶体学数据：空间群单斜晶系P2₁/c，晶胞尺寸：

β＝92.609(1)°，

实例63：6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺MSA结晶盐形式C(无水形式)的制备。

方法1

将427mg的6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(实例20)悬浮在8.0ml的MeOH中。向悬浮液中添加1.1ml 1.0MMSA水溶液(1.1mmol)，得到澄清溶液。过滤所得溶液，除去澄清溶液的溶剂。将所得固体悬浮在1.0ml EtOH和2.0ml THF中，以获得浆液。在室温下搅拌浆液1天。将固体通过过滤收集并风干。获得452mg灰白色固体。XRD显示获得6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺MSA盐形式C。

方法2

在25℃下，将甲磺酸(16.8g)添加到6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺(80.8g，92.8％w/w)在4∶1v∶v THF：乙醇(750mL)中的搅拌悬浮液中。将所得悬浮液在25℃下搅拌16小时，然后过滤。将固体用4∶1v∶vTHF∶乙醇(300mL)洗涤，然后在35℃下真空干燥得到6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺甲磺酸酯形式C(90.3g)，产率为98％。

将来自方法1的MSA-形式C通过XRPD进行分析并且将结果如下列表(表3)并且在图5中示出。

表3.针对MSA-形式C的XRPD峰

通过热技术分析从方法1获得的MSA-形式C。DSC分析指示，MSA-形式C在该温度下开始熔化和分解，起始温度为254℃，峰值在258℃。TGA指示MSA-形式C展现出从约25℃加热至约100℃后约0.3％的质量损失。MSA-形式℃的代表性DSC/TGA热谱图示于图6中。

生物学测定

可以采用以下测试程序来确定本文所述化合物的抑制性质。

PARP荧光各向异性结合测定

将重组全长6HIS标记的PARP1蛋白用50mM Tris pH 8、0.001％Triton X100、10mMMgCl₂、150mM NaCl稀释至6nM，并用等体积的2nM荧光探针(用50mM Tris pH 8、0.001％Triton X100、10mM MgCl₂、150mM NaCl稀释)孵育四小时。探针的最终DMSO浓度保持在1％(v/v)以下。

将重组全长PARP2蛋白用50mM Tris pH 8、0.001％Triton X100、10mM MgCl₂、150mM NaCl稀释至6nM，并用等体积的2nM荧光探针(用50mM Tris pH 8、0.001％TritonX100、10mM MgCl₂、150mM NaCl稀释)孵育四小时。探针的最终DMSO浓度保持在1％(v/v)以下。

将重组全长PARP3蛋白用50mM Tris pH 8、0.001％Triton X100、10mM MgCl₂、150mM NaCl稀释至100nM，并用等体积的6nM荧光探针(用50mM Tris pH 8、0.001％TritonX100、10mM MgCl₂、150mM NaCl稀释)孵育四小时。探针的最终DMSO浓度保持在1％(v/v)以下。

将重组PARP5a结合结构域用50mM Tris pH 8、0.001％Triton X100、10mM MgCl₂、150mM NaCl稀释至160nM，并用等体积的6nM荧光探针(用50mM Tris pH 8、0.001％TritonX100、10mM MgCl₂、150mM NaCl稀释)孵育四小时。探针的最终DMSO浓度保持在1％(v/v)以下。

将重组全长GST标记的PARP6蛋白用50mM Tris pH 8、0.001％Triton X100、10mMMgCl₂、150mM NaCl稀释至160nM，并用等体积的6nM荧光探针(用50mM Tris pH 8、0.001％Triton X100、10mM MgCl₂、150mM NaCl稀释)孵育四小时。探针的最终DMSO浓度保持在1％(v/v)以下。

在存在测试化合物或溶剂对照的情况下，使用BMG Pherastar

测量了与蛋白质结合时探针的荧光各向异性，并确定了对各向异性的影响。计算不同测试化合物浓度的％抑制值，并将其拟合到四参数对数图以确定IC₅₀值。必要时，化合物K_i可以使用AnalBiochem.[分析生物化学]1980年9月1日；107(1)：220-39定义的Munson Rodbard方程、根据IC₅₀值确定，并且其基于与相关PARP蛋白结合的探针的已知K_D。

PARP增殖测定(7天的化合物给药)

在完全培养基中收获密度分别为5000个细胞/ml和2.5E4个细胞/ml的DLD1细胞和BRCA2-/-)DLD1细胞，使用Multidrop Combi将它们以40μL/孔接种到384孔板(格瑞纳公司(Greiner)，克雷姆斯明斯特(Kremsmunster)，奥地利；781090)中，然后在37℃、5％CO₂下孵育过夜。第二天(第1天)，使用Multidrop Combi将sytox绿(sytox green)(5ul，2uM)和皂苷(10ul，0.25％储备液)添加至第0天的板中，使用黑色胶盖密封板，并在室温下孵育＞3小时。使用装有4x物镜的Cell Insight(赛默飞世尔公司(Thermo Fisher))对细胞成像。使用Echo 555添加测试化合物，并将其置于保持在37℃、5％CO₂下的培养箱中，并孵育7天。在第8天，向板中添加sytox绿(5ul，2uM)，然后添加皂苷(10ul，0.25％储备液)，使用黑色胶盖密封板并在室温下孵育＞3小时。使用4x物镜读取Cell Insight上的所有细胞。通过评估针对第0天和第8天的板的、Cell Insight输出的总细胞数，确定Genedata中的增殖速率。

体外人类转运蛋白外排

将表达MDR1和BCRP的MDCKII细胞以形成融合细胞单层的密度接种到96孔Transwell插入系统中的聚乙烯膜上。测试和参考化合物用转运缓冲液(HBSS HEPES pH7.4)稀释至1或0.1μM的浓度。有机溶剂的最终体积百分比小于1％。测试化合物从A到B方向和从B到A方向的渗透是在37℃和5％CO2和95％相对湿度下孵育90分钟后确定的。在孵育结束时，从顶端侧和基底外侧取样，然后用含有内标的冷乙腈沉淀。4000rpm离心后，上清液用0.1％甲酸水溶液稀释，用LC-MS/MS定量。细胞单层的完整性通过使用标记荧光黄来确认。

渗透系数(1×10-6cm/s)使用以下等式计算

Papp＝(dCr/dt)×Vr/(A×C0)

(1)外排比使用以下等式计算

外排比率＝Papp(B比A)/Papp(A比B)

(2)其中dCr/dt是接收室中化合物的累积浓度作为时间的函数(单位为μM/s)；Vr是接收室中的溶液体积(顶端侧0.1ml和基底外侧0.3ml)；A为转运表面积，即单层面积为0.11cm2；并且C0是供体室中的初始浓度(单位为μM)。

血浆中未结合的分数的测定

未结合的分数是使用RED设备确定的。

将化合物制备为在DMSO中的10mM溶液。通过混合多达9种测试化合物(每种4uL)和1种对照(uL)制备1mM工作储备液。如果包含的测试化合物少于9种，则添加空白DMSO的体积以补足40uL的体积。

冷冻血浆在37℃水浴中解冻。然后将血浆以4,000rpm离心2分钟以去除凝块并将上清液收集到新管中。检查血浆的pH值，仅在pH7至pH 8范围内时使用。将每个盒的3μL工作溶液添加到597μL空白血浆中，并以1000rpm涡旋5分钟。有机溶剂的最终体积百分比为0.5％，测试化合物的最终浓度为5μM。立即将50μL的加标血浆悬浮液转移到96孔板中，作为T＝0对照样品。样品与孵育后的样品相同地处理。剩余的血浆在开始透析前保持在37℃。

将插入物开口放入底板的孔中。将300μL的加标血浆样品添加到样品室中，由红色环表示。在缓冲室中添加500μL的磷酸盐缓冲液(pH 7.4)。用透气盖盖住装置，并在CO2培养箱中的定轨振荡器上以300rpm和5％CO2在37℃下孵育18小时。在孵育结束时，取下盖子，分别从缓冲液和血浆室中取出50μL的透析后样品，放入分开的96孔板中进行分析。

通过向缓冲液样品中添加50μL空白大鼠血浆和向收集的血浆样品中添加等体积的PBS并涡旋混合，对样品进行基质匹配。添加400μL含有适当内标(IS)的乙腈以沉淀蛋白质并释放化合物，并通过涡旋板10分钟然后以4,000rpm离心30分钟来混合。将250μL上清液转移到新的96孔板中并再次离心(4,000rpm，30分钟)。然后将100μL上清液转移到新的96孔板中，并与100μL蒸馏水通过以1,000rpm的转速涡旋5分钟混合到每个样品中。样品通过LC-MS/MS进行分析，药物浓度相对于由加标空白血浆产生的校准曲线进行测定，典型范围为1-7500nM。

未结合％确定为未结合％＝(缓冲室浓度/血浆室浓度)×100％。未结合的分数＝未结合％/100。

脑切片中未结合的分数的确定

确定脑切片中未结合的体积的方法的原理先前已发表(Development of a High-Throughput Brain Slice Method for Studying Drug Distribution in the CentralNervous System[开发用于研究中枢神经系统药物分布的高通量脑切片方法]；Fridén等人；Drug Metabolism and Disposition[药物代谢和处置]，2009，37(6)1226-1233)。简要地说：

在DMSO中制备浓度为10mM的化合物储备溶液。通过混合多达9种测试化合物(每种4uL)和1种对照(4uL)制备1mM工作储备液。如果包含的测试化合物少于9种，则添加空白DMSO以补足体积至40uL。在实验当天，将4ul在40mL ECF缓冲液中稀释以得到每种测试化合物的100nM溶液，然后在孵育开始前将其预热至37℃。

为了制备脑切片，通过吸入异氟醚对重约300g的大鼠进行终末麻醉，小心地取出脑并浸入冰冷的含氧ECF缓冲液中。将大鼠脑转移到含有冰冷、供应O2的ECF缓冲液的盘中，并在粘在微型切片机的托盘上之前用剃刀修剪，脑放置在托盘中央，背部剖切表面朝下。添加冰冷的ECF缓冲液以硬化胶粘剂并润湿脑。将托盘置于显微切片机中，并使用合适的切割速度，切割100-400μm的切片，直至出现纹状体区域。每个脑四到六个，300μm厚，纹状体区域的冠状切片被切割并放置在冰冷的供应O2的缓冲液中直到孵育。将六个切片转移到含有40mL预热(37℃)盒式混合物的孵育托盘中。从取出脑到切片进入鸡尾酒混合物的时间最长为20分钟。孵育盘盖上透气盖，放入37℃水浴中，泵入O2，以45rpm的振荡频率孵育5小时。

孵育前，将200μL未孵育的盒溶液保存为T＝0样品。然后将200μL与200μL空白脑匀浆在ECF缓冲液(4体积(w/v)中混合。孵育后测量并记录盒溶液中的pH值，pH值必须高于7.3。将盒溶液表面的200μL转移到含有在ECF缓冲液中的200μL空白脑匀浆(4体积(w/v))的管中。每个脑切片在滤纸上干燥并在2mL eppendoff管中称重。添加9体积(w/v)的ECF缓冲液后，将切片用超声波仪均质化。如下沉淀和稀释样品。

将来自每个样品的50μL等分试样和来自每个盒溶液(与空白匀浆混合)的3x50μL转移到0.6mL离心管中。将样品用200μL含有内标的冰冷乙腈沉淀，并以2,000rpm涡旋3分钟，然后以14000rpm在4℃下离心15分钟。将100μL上清液转移到新的96孔板中进行分析，将100μL蒸馏水转移到每个样品中，将板以1000rpm振荡2分钟以进行LC-MS/MS分析。

然后将混合切片样品分两步进一步稀释，10倍和100倍，双空白样品用150μL空白脑匀浆在ECF缓冲液(4体积(w/v))中制备，转移到含有150μL ECF缓冲液的1.5mL离心管中，以2,000rpm涡旋2分钟。将样品用1200μL冰冷的乙腈沉淀，并以2,000rpm涡旋3分钟，然后以14000rpm在4℃下离心15分钟。然后将100μL的上清液转移到新的96孔板中进行分析。向每个样品中添加100μL蒸馏水以获得双空白样品。

未结合的脑体积(V_u，脑)计算为V_u＝(C_切片-V₀*C_ECF)/(1-V₀)*C_ECF

其中C_切片、C_ECF和V₀分别是切片中的药物量，ECF中的药物浓度(代表脑ECF中的药物浓度)，即游离浓度)和脑切片的水附着(0.0931)。

脑中的未结合的分数f_u，脑＝1/V_u，脑

大鼠中Kpuu的确定

血浆中总/未结合药物与脑中总/未结合药物的比率(Kp/Kpuu)如下确定。

将化合物在1∶1∶1四甘醇∶二甲基乙酰胺∶水中以各0.5mM的浓度配制为混合物，并且经由以2μmol/kg/h以4mL/kg的体积静脉输注施用给Han Wistar大鼠。4小时后处死动物，收集脑和血液样品。血浆由血液制备，并且所有样品均在-20℃下冷冻保存直至分析。收集后将脑样品在纯净水中以1∶3(w/v)的比率匀浆，并在-20℃下冷冻储存直至分析。

血浆和脑样品通过蛋白质沉淀进行分析，然后是LC-MS/MS，并根据通过用适当浓度范围内的药物加标空白大鼠血浆或脑匀浆产生的校准曲线确定浓度。通过从总脑浓度中减去0.8％的血浆浓度来校正残留血液的脑浓度。

Kp计算如下：Kp＝((4*[脑匀浆])-(0.008*[血浆]))/[血浆]

Kpuu计算如下：Kpuu＝Kp*(脑切片中未结合的分数/血浆中未结合的分数)

生物数据

表4

Claims (35)

1.一种具有式I的化合物

其中：

R¹独立地选自H、C_1-4烷基、C_3-6环烷基、C_1-4氟烷基和C_1-4烷基氧基；

R²独立地选自H、卤素、C_1-4烷基和C_1-4氟烷基；并且

R³是H或C_1-4烷基；

R⁴是卤素或C_1-4烷基，

或其药学上可接受的盐。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹选自甲基、乙基、异丙基、环丙基、1，1-二氟乙基、1-氟乙基、三氟甲基、二氟甲基和甲氧基中的任一个。

3.根据权利要求2所述的化合物，其中R¹是甲基或乙基。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中R²选自H、氯、氟、甲基和二氟甲基中的任一个。

5.根据权利要求4所述的化合物，其中R²是氟或甲基。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R³是甲基或乙基。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R⁴选自氯、氟和甲基中的任一个。

8.根据权利要求7所述的化合物，其中R⁴是氟。

9.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹是C_1-4烷基，R²是卤素，R³是C_1-4烷基，R⁴是卤素或C_1-4烷基，或其药学上可接受的盐。

10.根据权利要求1所述的化合物，该化合物选自：

5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氯-5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氯-5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氯-2-乙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氟-5-[4-[[5-氟-2-[(1S和1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[[5-氟-2-[(1S和1R)-1-氟乙基]-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氯-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[[2-(1，1-二氟乙基)-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-(二氟甲基)-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-(二氟甲基)-5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氯-5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-乙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氯-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氯-5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氟-5-[4-[(5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[[2-(二氟甲基)-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氯-5-[4-[(5-氟-2-甲氧基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-乙基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-乙基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-乙基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

N-乙基-6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]吡啶-2-甲酰胺，

N-乙基-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氟-5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氯-5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[[5-氟-3-氧代-2-(三氟甲基)-4H-喹喔啉-6-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氟-5-[4-[(5-氟-2-异丙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氟-2-异丙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(5-氟-2-异丙基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-环丙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-6-氟-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-环丙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-环丙基-5-氟-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

5-[4-[(2-甲氧基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N，6-二甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-氟-5-[4-[(2-甲氧基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

6-(二氟甲基)-5-[4-[(2-甲氧基-5-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺和

6-(二氟甲基)-5-[4-[(2，5-二甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺，

或其药学上可接受的盐。

11.根据权利要求1所述的化合物，该化合物是：

6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺、或其药学上可接受的盐。

12.根据权利要求1所述的化合物，该化合物是：

6-氟-5-[4-[(5-氟-2-甲基-3-氧代-4H-喹喔啉-6-基)甲基]哌嗪-1-基]-N-甲基-吡啶-2-甲酰胺。

13.一种药物组合物，该药物组合物包含根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的稀释剂、赋形剂或惰性载体。

14.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于用作药物。

15.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于在癌症的治疗中使用。

16.根据权利要求15所述的化合物，其中所述癌症的HR依赖性DNA DSB修复途径有缺陷。

17.根据权利要求15所述的化合物，其中所述癌症包含一种或多种癌细胞，这些癌细胞相对于正常细胞具有降低的或消除的通过HR修复DNA DSB的能力。

18.根据权利要求15或16所述的化合物，其中所述癌细胞具有BRCA1或BRCA2缺陷表型。

19.根据权利要求18所述的化合物，其中所述癌细胞的BRCA1或BRCA2有缺陷。

20.根据权利要求16至19中任一项所述的化合物，其中所述个体对于编码HR依赖性DNADSB修复途径的组分的基因中的突变是杂合的。

21.根据权利要求20所述的化合物，其中所述个体对于BRCA1和/或BRCA2中的突变是杂合的。

22.根据权利要求15至21中任一项所述的化合物，其中该癌症选自乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌、肺癌和脑癌中的任一个。

23.一种治疗方法，该治疗方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。

24.根据权利要求23所述的治疗方法，其中该有需要的患者患有癌症。

25.根据权利要求24所述的方法，其中所述癌症的HR依赖性DNA DSB修复途径有缺陷。

26.根据权利要求24所述的方法，其中所述癌症包含一种或多种癌细胞，这些癌细胞相对于正常细胞具有降低的或消除的通过HR修复DNA DSB的能力。

27.根据权利要求25或26所述的方法，其中所述癌细胞具有BRCA1或BRCA2缺陷表型。

28.根据权利要求27所述的方法，其中所述癌细胞的BRCA1或BRCA2有缺陷。

29.根据权利要求25至28中任一项所述的方法，其中所述个体对于编码HR依赖性DNADSB修复途径的组分的基因中的突变是杂合的。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述个体对于BRCA1和/或BRCA2中的突变是杂合的。

31.根据权利要求24至30中任一项所述的方法，其中该癌症选自乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌、肺癌和脑癌中的任一个。

32.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗或预防其中PARP1的抑制是有益的疾病和病症中使用。

33.根据权利要求32所述的化合物，其中该疾病或病症是癌症。

34.根据权利要求33所述的化合物，其中该癌症选自乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液癌、胃肠癌、肺癌和脑癌中的任一个。

35.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹独立地选自H、C_1-4烷基、C_1-4氟烷基和C_1-4烷基氧基。

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