CN115667523A - 可活化细胞因子构建体和相关组合物以及方法 - Google Patents

可活化细胞因子构建体和相关组合物以及方法 Download PDF

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W·A·博格丹诺夫
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Abstract

本文提供了可活化细胞因子构建体，其包括：(a)第一单体构建体，其包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、第一可裂解部分(CM1)和第一二聚化结构域(DD1)，其中所述CM1位于所述CP1与所述DD1之间；和(b)第二单体构建体，其包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)、第二可裂解部分(CM2)和第二二聚化结构域(DD2)，其中所述CM2位于所述CP2与所述DD2之间，其中：所述CM1和所述CM2充当蛋白酶的底物；所述DD1与所述DD2彼此结合；并且其中所述ACC的特征在于与所述CP1和/或所述CP2的至少一种活性的对照水平相比，所述CP1和/或所述CP2的所述至少一种活性降低。

Description

可活化细胞因子构建体和相关组合物以及方法
相关申请的交叉引用
本申请要求2020年4月10日提交的美国临时申请号63/008,542、2021年3月16日提交的美国临时申请号63/161,889和2021年3月23日提交的美国临时申请号63/164,849的优先权益，所述申请的全部内容以引用的方式并入本文。
本申请包括以电子格式提交的序列表。序列表命名为“CYTX-071-PCT_ST25.txt”，创建于2021年4月7日，并且大小为379,000字节。电子格式的序列表中的信息是本申请的一部分并以引用的方式整体并入本文。
技术领域
本公开涉及生物技术领域，并且更具体地，涉及可活化细胞因子构建体。
背景技术
细胞因子是由大多数有核细胞响应于病毒感染和/或其他抗原刺激而产生和分泌的天然存在的小蛋白和糖蛋白家族。干扰素是细胞因子的一个亚类。干扰素目前分为三大类：I型干扰素、II型干扰素和III型干扰素。干扰素通过与细胞表面的特定膜受体结合发挥其细胞活性。
干扰素疗法具有许多临床益处。例如，已知干扰素上调免疫系统并且还具有抗病毒和抗增殖特性。这些生物学特性导致干扰素在临床上用作治疗病毒感染和恶性肿瘤的治疗剂。此外，干扰素适用于募集患者的先天免疫系统来鉴别和攻击癌细胞。因此，干扰素疗法已被广泛用于癌症和抗病毒疗法中，包括用于治疗肝炎、卡波西肉瘤(Kaposi sarcoma)、毛细胞白血病、慢性骨髓性白血病(CML)、滤泡性淋巴瘤、肾细胞癌(RCC)、黑色素瘤和其他疾病状态。然而，干扰素的全身施用伴随着剂量依赖性毒性，包括强烈的流感样症状、神经系统症状、肝毒性、骨髓抑制和心律失常等。在黑色素瘤患者研究中，帕博利珠单抗(Pembrolizumab)和聚乙二醇化IFNa的组合导致ORR为60.5％。组合治疗还与49％的G3/G4不良事件有关，所述不良事件需要减少聚乙二醇化IFNa剂量(Davar等人,J.Clin.Oncol.,2018)。这些不希望的副作用限制了干扰素疗法的剂量，并且有时会导致干扰素治疗的中断或延迟。
白介素是细胞因子的另一个亚类。白介素调节细胞生长、分化和运动。它们在刺激免疫反应(诸如炎症)方面特别重要。白介素已被用于治疗癌症、自身免疫性病症和其他病症。例如，白介素2(IL2)被指出用于治疗黑色素瘤、移植物抗宿主病(GVHD)、神经母细胞瘤、肾细胞癌(RCC)，并且也被认为适用于治疗包括以下的病状：急性冠脉综合征、急性骨髓性综合征、特应性皮炎、自身免疫性肝病、基底细胞癌、膀胱癌、乳腺癌、念珠菌病(candidiasis)、结直肠癌、皮肤T细胞淋巴瘤、子宫内膜异位瘤、HIV发明、缺血性心脏病、类风湿性关节炎、鼻咽腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、卵巢癌、胰腺癌、系统性红斑狼疮、结核病和其他病症。其他白介素，诸如IL-6、IL-7、IL-12和IL-21等，是癌症和其他病症的潜在治疗剂。白介素疗法通常伴有不希望的副作用，包括流感样症状、恶心、呕吐、腹泻、低血压和心律失常等。
因此，对于细胞因子疗法对所需靶标的改善的特异性和选择性的需要和期望是非常令人感兴趣的。细胞因子治疗剂对疾病位点的靶向增加可降低基于全身机制的毒性并导致更广泛的治疗效用。
发明内容
本公开提供了可活化细胞因子构建体(ACC)，其包括：(a)第一单体，其包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、第一可裂解部分(CM1)和第一二聚化结构域(DD1)，其中CM1位于CP1与DD1之间；和(b)第二单体，其包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)、第二可裂解部分(CM2)和第二二聚化结构域(DD2)，其中CM2位于CP2与DD2之间，其中：CM1和CM2充当蛋白酶的底物；DD1和DD2彼此结合；并且其中ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低。相对于健康组织，裂解CM1和CM2的蛋白酶可能在患病组织(例如肿瘤组织)中过表达。ACC可在CM1和/或CM2裂解后活化，使得细胞因子可在患病组织中(例如在肿瘤微环境中)中发挥其活性，而在健康组织的情况下细胞因子活性减弱。因此，本文提供的ACC可提供相对于传统细胞因子治疗剂降低的毒性，使细胞因子的有效剂量更高，并且/或者增加细胞因子的治疗窗口。
本文提供了可活化细胞因子构建体(ACC)，其包括第一单体构建体和第二单体构建体，其中：(a)第一单体构建体包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、第一可裂解部分(CM1)和第一二聚化结构域(DD1)，其中CM1位于CP1与DD1之间；并且(b)第二单体构建体包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)、第二可裂解部分(CM2)和第二二聚化结构域(DD2)，其中CM2位于CP2与DD2之间；其中DD1和DD2彼此结合，从而形成第一单体构建体和第二单体构建体的二聚体；并且其中ACC的特征在于具有与至少一种CP1和/或CP2活性的对照水平相比降低的至少一种CP1和/或CP2活性水平。
本公开提供了可活化细胞因子构建体(ACC)，其包括：(a)第一单体，其包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、第一二聚化结构域(DD1)；和(b)第二单体，其包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)、可裂解部分(CM)和第二二聚化结构域(DD2)，其中CM位于CP2与DD2之间，其中：CM充当蛋白酶的底物；DD1和DD2彼此结合；并且其中ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低。
本公开提供了可活化细胞因子构建体(ACC)，其包括：(a)第一单体，其包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、可裂解部分(CM)和第一二聚化结构域(DD1)，其中CM位于CP1与DD1之间；和(b)第二单体，其包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)和第二二聚化结构域(DD2)，其中：CM充当蛋白酶的底物；DD1和DD2彼此结合；并且其中ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低。
本公开提供了可活化细胞因子构建体(ACC)，其包括：(a)第一单体，其包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)和第一二聚化结构域(DD1)；和(b)第二单体，其包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)和第二二聚化结构域(DD2)，其中CP1、CP2或CP1和CP2两者包括充当蛋白酶的底物的氨基酸序列；DD1和DD2彼此结合；并且其中ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低。
本公开的ACC的特征在于CP1和CP2不连接到肽掩蔽物，例如亲和掩蔽部分。
在一些实施方案中，第一单体构建体包含有包含CP1、CM1和DD1的第一多肽。在一些实施方案中，第二单体构建体包含有包含CP2、CM2和DD2的第二多肽。在一些实施方案中，DD1和DD2是选自由以下组成的组的对：一对Fc结构域，来自人类IL-15受体α链(IL15Rα)的寿司结构域(sushi domain)和可溶性IL-15；barnase和barnstar；蛋白激酶A(PKA)和A激酶锚定蛋白(AKAP)；基于突变的RNA酶I片段的衔接子/对接标签模块；表位和单结构域抗体(sdAb)；表位和单链可变片段(scFv)；以及基于蛋白质突触蛋白(synaptin)、突触结合蛋白(synaptotagmin)、小突触小泡蛋白(synaptobrevin)和SNAP25的相互作用的可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白(SNARE)模块，抗原结合结构域和表位。
在一些实施方案中，DD1和DD2是一对Fc结构域。在一些实施方案中，所述一对Fc结构域是一对人类Fc结构域。在一些实施方案中，人类Fc结构域是人类IgG1 Fc结构域、人类IgG2 Fc结构域、人类IgG3 Fc结构域或人类IgG4 Fc结构域。在一些实施方案中，人类Fc结构域是人类IgG4 Fc结构域。在一些实施方案中，人类Fc结构域包含与SEQ ID NO:3具有至少80％同一性的序列。在一些实施方案中，人类Fc结构域各自包含与SEQ ID NO:3具有至少90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。在一些实施方案中，人类Fc结构域各自包含SEQ ID NO:3。在一些实施方案中，DD1和DD2相同。例如，DD1和DD2可以是一对相同的人类IgG4 Fc结构域。在一些实施方案中，二聚化结构域分别具有SEQ ID NO:315和316的氨基酸序列。在一些实施方案中，人类Fc结构域包括消除糖基化和/或减少Fc-γ受体结合的突变。在一些实施方案中，人类Fc结构域包含突变N297Q、N297A或N297G；在一些实施方案中，人类Fc结构域包含位置234和/或235处的突变，例如L235E、或L234A和L235A(在IgG1中)，或F234A和L235A(在IgG4中)；在一些实施方案中，人类Fc结构域是包含突变V234A、G237A、P238S、H268Q/A、V309L、A330S或P331S或其组合(全部根据EU编号)的IgG2 Fc结构域。
本领域技术人员已知工程化人类Fc结构域的其他实例。其中至少一个氨基酸中的突变导致Fc功能降低的Ig重链恒定区氨基酸的实例包括但不限于重链恒定区的氨基酸228、233、234、235、236、237、239、252、254、256、265、270、297、318、320、322、327、329、330和331中的突变(均根据EU编号)。突变氨基酸组合的实例也是本领域已知的，诸如但不限于氨基酸234、235和331中的突变组合，诸如L234F、L235E和P331S，或氨基酸318、320和322的组合，诸如E318A、K320A和K322A。
工程化Fc结构域的其他实例包括F243L/R292P/Y300L/V305I/P396 IgG1；S239D/I332E IgG1；S239D/I332E/A330L IgG1；S298A/E333A/K334A；在一个重链中，L234Y/L235Q/G236W/S239M/H268D/D270E/S298A IgG1，并且在相反重链中，D270E/K326D,A330M/K334EIgG；G236A/S239D/I332E IgG1；K326W/E333S IgG1；S267E/H268F/S324T IgG1；E345R/E430G/S440Y IgG1；N297A或N297Q或N297G IgG1；L235E IgG1；L234A/L235A IgG1；F234A/L235A IgG4；H268Q/V309L/A330S/P331S IgG2；V234A/G237A/P238S/H268A/V309L/A330S/P331S IgG2；M252Y/S254T/T256E IgG1；M428L/N434S IgG1；S267E/L328F IgG1；N325S/L328F IgG1等。在一些实施方案中，工程化Fc结构域包含一个或多个选自由N297A IgG1、N297Q IgG1和S228P IgG4组成的组的取代。
在一些实施方案中，DD1包含抗原结合结构域并且DD2包含相应表位。在一些实施方案中，抗原结合结构域是抗His标签抗原结合结构域并且其中DD2包含His标签。在一些实施方案中，抗原结合结构域是单链可变片段(scFv)。在一些实施方案中，抗原结合结构域是单结构域抗体(sdAb)。在一些实施方案中，DD1和DD2中的至少一个包含选自由非多肽聚合物和小分子组成的组的二聚化结构域取代基。在一些实施方案中，DD1和DD2包含彼此共价结合的非多肽聚合物。在一些实施方案中，非多肽聚合物是含硫聚乙二醇，并且其中DD1和DD2通过一个或多个二硫键彼此共价结合。在一些实施方案中，DD1和DD2中的至少一个包含小分子。在一些实施方案中，小分子是生物素。在一些实施方案中，DD1包含生物素并且DD2包含抗生物素蛋白。
在一些实施方案中，CP1和CP2是成熟细胞因子。在一些实施方案中，CP1和CP2中的每一个包含成熟细胞因子序列并且还包含信号肽(在本文中也称为“信号序列”)。在一些实施方案中，CP1和/或CP2各自单独地选自由以下组成的组：干扰素、白介素、GM-CSF、G-CSF、LIF、OSM、CD154、LT-β、TNF-α、TNF-β、4-1BBL、APRIL、CD70、CD153、CD178、GITRL、LIGHT、OX40L、TALL-1、TRAIL、TWEAK、TRANCE、TGF-β1、TGF-β1、TGF-β3、Epo、Tpo、Flt-3L、SCF、M-CSF和MSP。CP1和/或CP2可以是野生型人类或非人类动物序列、突变序列、截短序列、杂合序列或包含插入的序列。在一些实施方案中，CP1和CP2相同。在一些实施方案中，CP1和CP2不同，并且本公开包括本文列出的细胞因子蛋白中的任两种的选择和组合。在一些实施方案中，CP1和/或CP2是干扰素。在一些实施方案中，CP1和CP2都是干扰素。在一些实施方案中，CP1和CP2是不同的干扰素。在一些实施方案中，CP1和CP2是相同的干扰素。在一些实施方案中，CP1或CP2是干扰素。在一些实施方案中，CP1和CP2中的一个是干扰素，而CP1或CP2中的另一个是除干扰素之外的细胞因子。在一些方面，一种或两种细胞因子是单体细胞因子。在一些方面，一种或两种干扰素是单体干扰素。在一些方面，CP1或CP2是单体干扰素，而另一个CP1或CP2是不同的细胞因子。在一些方面，CP1和/或CP2包括突变细胞因子序列。在一些方面，CP1和/或CP2包括通用细胞因子序列。在一些方面，CP1和/或CP2包括保留细胞因子活性的截短序列。
在一些实施方案中，干扰素是人类野生型成熟干扰素。在一些实施方案中，干扰素可以是I型和II型干扰素，例如包括但不限于干扰素-α、干扰素-β、干扰素-ω、干扰素-γ和干扰素-τ。在一些实施方案中，干扰素是干扰素-α。在一些实施方案中，干扰素选自由以下组成的组：干扰素α-2a、干扰素α-2b和干扰素α-n3。在一些实施方案中，干扰素是干扰素α-2b。在一些实施方案中，干扰素是突变干扰素。在一些实施方案中，干扰素是突变干扰素，其中内源性蛋白酶裂解位点已通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入而失去功能。在一些实施方案中，干扰素是通用细胞因子分子，例如具有不同细胞因子亚型的杂合序列或嵌合细胞因子序列或人源化细胞因子序列。在一些实施方案中，干扰素是通用干扰素分子。在一些实施方案中，干扰素是通用干扰素α，例如干扰素α1和干扰素α2b的杂合物。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包含与SEQ ID NO:1具有至少80％同一性的序列。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包含与SEQ ID NO:1具有至少90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包含SEQ ID NO:1的序列。在一些实施方案中，干扰素是干扰素β。在一些实施方案中，干扰素β选自由干扰素β-1a和干扰素β-1b组成的组。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包含IFab结构域。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包含白介素。在一些实施方案中，白介素选自由以下组成的组：IL-1α、IL-1β、IL-1RA、IL-18、IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-13、IL-15、IL-3、IL-5、IL-6、IL-11、IL-12、IL-10、IL-20、IL-14、IL-16和IL-17。
在一些实施方案中，CM1和/或CM2包含总计约3个氨基酸至约15个氨基酸。在一些实施方案中，CM1和CM2包含不同蛋白酶的底物。在一些实施方案中，CM1和CM2具有相同的长度并且包含相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，其中CM1和CM2包含相同蛋白酶的底物。在一些实施方案中，蛋白酶选自由以下组成的组：ADAM8、ADAM9、ADAM10、ADAM12、ADAM15、ADAM17/TACE、ADAMDEC1、ADAMTS1、ADAMTS4、ADAMTS5、BACE、肾素、组织蛋白酶D、组织蛋白酶E、胱天蛋白酶1、胱天蛋白酶2、胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶5、胱天蛋白酶6、胱天蛋白酶7、胱天蛋白酶8、胱天蛋白酶9、胱天蛋白酶10、胱天蛋白酶14、组织蛋白酶B、组织蛋白酶C、组织蛋白酶K、组织蛋白酶L、组织蛋白酶S、组织蛋白酶V/L2、组织蛋白酶X/Z/P、Cruzipain、天冬酰胺内肽酶(Legumain)、Otubain-2、KLK4、KLK5、KLK6、KLK7、KLK8、KLK10、KLK11、KLK13、KLK14、穿膜肽酶(Meprin)、脑啡肽酶(Neprilysin)、PSMA、BMP-1、基质金属蛋白酶(例如MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-19、MMP-20、MMP-23、MMP-24、MMP-26、MMP-27)、活化蛋白C、组织蛋白酶A、组织蛋白酶G、糜酶(Chymase)、FVIIa、FIXa、FXa、FXIa、FXIIa、弹性蛋白酶、颗粒酶B、胍基苯甲酸酯酶(Guanidinobenzoatase)、HtrA1、人类中性粒细胞裂解酶、乳铁蛋白、marapsin、NS3/4A、PACE4、纤溶酶、PSA、tPA、凝血酶、类胰蛋白酶(tryptase)、uPA、DESC1、DPP-4、FAP、肝素、Matriptase-2、MT-SP1/Matriptase、TMPRSS2、TMPRSS3和TMPRSS4。在一些实施方案中，蛋白酶选自由以下组成的组：uPA、天冬酰胺内肽酶、MT-SP1、ADAM17、BMP-1、TMPRSS3、TMPRSS4、MMP-2、MMP-9、MMP-12、MMP-13和MMP-14。
合适的可裂解部分已在WO 2010/081173、WO 2015/048329、WO 2015/116933、WO2016/118629和WO 2020/118109中公开，所述文献的公开内容以引用的方式整体并入本文。
在一些实施方案中，CM1和/或CM2包含选自由以下组成的组的序列：LSGRSDNH(SEQID NO:5)、TGRGPSWV(SEQ ID NO:6)、PLTGRSGG(SEQ ID NO:7)、TARGPSFK(SEQ ID NO:8)、NTLSGRSENHSG(SEQ ID NO:9)、NTLSGRSGNHGS(SEQ ID NO:10)、TSTSGRSANPRG(SEQ ID NO:11)、TSGRSANP(SEQ ID NO:12)、VHMPLGFLGP(SEQ ID NO:13)、AVGLLAPP(SEQ ID NO:14)、AQNLLGMV(SEQ ID NO:15)、QNQALRMA(SEQ ID NO:16)、LAAPLGLL(SEQ ID NO:17)、STFPFGMF(SEQ ID NO:18)、ISSGLLSS(SEQ ID NO:19)、PAGLWLDP(SEQ ID NO:20)、VAGRSMRP(SEQ IDNO:21)、VVPEGRRS(SEQ ID NO:22)、ILPRSPAF(SEQ ID NO:23)、MVLGRSLL(SEQ ID NO:24)、QGRAITFI(SEQ ID NO:25)、SPRSIMLA(SEQ ID NO:26)、SMLRSMPL(SEQ ID NO:27)、ISSGLLSGRSDNH(SEQ ID NO:28)、AVGLLAPPGGLSGRSDNH(SEQ ID NO:29)、ISSGLLSSGGSGGSLSGRSDNH(SEQ ID NO:30)、LSGRSGNH(SEQ ID NO:31)、SGRSANPRG(SEQ IDNO:32)、LSGRSDDH(SEQ ID NO:33)、LSGRSDIH(SEQ ID NO:34)、LSGRSDQH(SEQ ID NO:35)、LSGRSDTH(SEQ ID NO:36)、LSGRSDYH(SEQ ID NO:37)、LSGRSDNP(SEQ ID NO:38)、LSGRSANP(SEQ ID NO:39)、LSGRSANI(SEQ ID NO:40)、LSGRSDNI(SEQ ID NO:41)、MIAPVAYR(SEQ IDNO:42)、RPSPMWAY(SEQ ID NO:43)、WATPRPMR(SEQ ID NO:44)、FRLLDWQW(SEQ ID NO:45)、ISSGL(SEQ ID NO:46)、ISSGLLS(SEQ ID NO:47)、ISSGLL(SEQ ID NO:48)、ISSGLLSGRSANPRG(SEQ ID NO:49)、AVGLLAPPTSGRSANPRG(SEQ ID NO:50)、AVGLLAPPSGRSANPRG(SEQ ID NO:51)、ISSGLLSGRSDDH(SEQ ID NO:52)、ISSGLLSGRSDIH(SEQID NO:53)、ISSGLLSGRSDQH(SEQ ID NO:54)、ISSGLLSGRSDTH(SEQ ID NO:55)、ISSGLLSGRSDYH(SEQ ID NO:56)、ISSGLLSGRSDNP(SEQ ID NO:57)、ISSGLLSGRSANP(SEQ IDNO:58)、ISSGLLSGRSANI(SEQ ID NO:59)、AVGLLAPPGGLSGRSDDH(SEQ ID NO:60)、AVGLLAPPGGLSGRSDIH(SEQ ID NO:61)、AVGLLAPPGGLSGRSDQH(SEQ ID NO:62)、AVGLLAPPGGLSGRSDTH(SEQ ID NO:63)、AVGLLAPPGGLSGRSDYH(SEQ ID NO:64)、AVGLLAPPGGLSGRSDNP(SEQ ID NO:65)、AVGLLAPPGGLSGRSANP(SEQ ID NO:66)、AVGLLAPPGGLSGRSANI(SEQ ID NO:67)、ISSGLLSGRSDNI(SEQ ID NO:68)、AVGLLAPPGGLSGRSDNI(SEQ ID NO:69)、GLSGRSDNHGGAVGLLAPP(SEQ ID NO:70)、GLSGRSDNHGGVHMPLGFLGP(SEQ ID NO:71)、LSGRSDNHGGVHMPLGFLGP(SEQ ID NO:72)、ISSGLSS(SEQ ID NO:73)、PVGYTSSL(SEQ ID NO:74)、DWLYWPGI(SEQ ID NO:75)、LKAAPRWA(SEQ ID NO:76)、GPSHLVLT(SEQ ID NO:77)、LPGGLSPW(SEQ ID NO:78)、MGLFSEAG(SEQ IDNO:79)、SPLPLRVP(SEQ ID NO:80)、RMHLRSLG(SEQ ID NO:81)、LLAPSHRA(SEQ ID NO:82)、GPRSFGL(SEQ ID NO:83)、GPRSFG(SEQ ID NO:84)、SARGPSRW(SEQ ID NO:85)、GGWHTGRN(SEQ ID NO:86)、HTGRSGAL(SEQ ID NO:87)、AARGPAIH(SEQ ID NO:88)、RGPAFNPM(SEQ IDNO:89)、SSRGPAYL(SEQ ID NO:90)、RGPATPIM(SEQ ID NO:91)、RGPA(SEQ ID NO:92)、GGQPSGMWGW(SEQ ID NO:93)、FPRPLGITGL(SEQ ID NO:94)、SPLTGRSG(SEQ ID NO:95)、SAGFSLPA(SEQ ID NO:96)、LAPLGLQRR(SEQ ID NO:97)、SGGPLGVR(SEQ ID NO:98)、PLGL(SEQ ID NO:99)和SGRSDNI(SEQ ID NO:100)。在一些实施方案中，CM包含选自由以下组成的组的序列：ISSGLLSGRSDNH(SEQ ID NO:28)、LSGRSDDH(SEQ ID NO:33)、ISSGLLSGRSDQH(SEQ ID NO:54)、SGRSDNI(SEQ ID NO:100)和ISSGLLSGRSDNI(SEQ ID NO:68)。在一些实施方案中，蛋白酶由受试者的肿瘤产生，例如蛋白酶在肿瘤中产生的量比在受试者的健康组织中产生的量更大。在一些实施方案中，受试者已诊断或鉴别为患有癌症。
在一些实施方案中，CP1和CM1在第一单体构建体中彼此直接邻接。在一些实施方案中，CM1和DD1在第一单体构建体中彼此直接邻接。在一些实施方案中，CP2和CM2在第二单体构建体中彼此直接邻接。在一些实施方案中，CM2和DD2在第二单体构建体中彼此直接邻接。在一些实施方案中，第一单体构建体包含直接邻接CM1的CP1和直接邻接DD1的CM1，其中CM1包含选自由SEQ ID No 5-100组成的组的序列。在一些实施方案中，第二单体构建体包含直接邻接CM2的CP2和直接邻接DD2的CM2，其中CM2包含选自由SEQ ID No 5-100组成的组的序列。在一些实施方案中，第一单体构建体包含直接邻接CM1的CP1和直接邻接DD1的CM1，其中CM1包含长度不超过13、12、11、10、9、8、7、6、5或4个氨基酸的序列。在一些实施方案中，第二单体构建体包含直接邻接CM2的CP2和直接邻接DD2的CM2，其中CM2包含长度不超过13、12、11、10、9、8、7、6、5或4个氨基酸的序列。在一些实施方案中，第一单体构建体和第二单体构建体各自被配置成使得细胞因子(分别为CM1和CM2)直接邻接长度不超过10、9、8、7、6、5或4个氨基酸的可裂解部分(分别为CM1和CM2)，并且可裂解部分直接邻接作为人类IgG的Fc区的二聚化结构域(分别为DD1和DD2)，其中Fc区的N端是铰链区中在N方向至C方向上读取的第一个半胱氨酸残基(例如人类IgG1的半胱氨酸226，使用EU编号)。在一些方面，二聚化结构域是其中已缺失上游铰链残基的IgG Fc区。例如，Fc是其中已缺失N端序列EPKSCDKTHT(SEQ ID NO:516)、ERK、ELKTPLGDTTHT(SEQ ID NO:517)或ESKYGPP(SEQ ID NO:518)的变体。
在一些实施方案中，第一单体构建体包含至少一个接头。在一些实施方案中，至少一个接头是设置在CP1与CM1之间的接头L1和/或设置在CM1与DD1之间的接头L2。在一些实施方案中，第二单体构建体包含至少一个接头。在一些实施方案中，至少一个接头是设置在CP2与CM2之间的接头L3和/或设置在CM2与DD2之间的接头L4。在一些实施方案中，第一单体构建体包含接头L1并且第二单体构建体包含接头L3。在一些实施方案中，L1和L3相同。在一些实施方案中，第一单体构建体包含接头L2并且第二单体构建体包含接头L4。在一些实施方案中，L2和L4相同。在一些实施方案中，每个接头具有1个氨基酸至约15个氨基酸的总长度。在一些实施方案中，每个接头具有至少5个氨基酸的总长度。如本文所用，术语“接头”是指肽，所述肽的氨基酸序列不是蛋白酶的底物。
在一些实施方案中，第一单体构建体包含至少一个接头，其中每个接头独立地选自由以下组成的组：GSSGGSGGSGG(SEQ ID NO:210)；GGGS(SEQ ID NO:2)；GGGSGGGS(SEQ IDNO:211)；GGGSGGGSGGGS(SEQ ID NO:212)；GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:213)；GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:214)；GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:215)；GGGGS(SEQID NO:216)；GS；GGGGSGS(SEQ ID NO:217)；GGGGSGGGGSGGGGSGS(SEQ ID NO:218)；GGSLDPKGGGGS(SEQ ID NO:219)；PKSCDKTHTCPPCPAPELLG(SEQ ID NO:220)；SKYGPPCPPCPAPEFLG(SEQ ID NO:221)；GKSSGSGSESKS(SEQ ID NO:222)；GSTSGSGKSSEGKG(SEQ ID NO:223)；GSTSGSGKSSEGSGSTKG(SEQ ID NO:224)；GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQ IDNO:225)；GSTSGSGKPGSSEGST(SEQ ID NO:226)；(GS)n、(GGS)n、(GSGGS)n(SEQ ID NO:227)、(GGGS)n(SEQ ID NO:228)、(GGGGS)n(SEQ ID NO:216)，其中每个n是至少一的整数；GGSG(SEQ ID NO:229)；GGSGG(SEQ ID NO:230)；GSGSG(SEQ ID NO:231)；GSGGG(SEQ ID NO:232)；GGGSG(SEQ ID NO:233)；GSSSG(SEQ ID NO:234)；GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:213)；GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:214)；和GSTSGSGKPGSSEGST(SEQ ID NO:226)。在一些实施方案中，接头包含序列GGGS(SEQ ID NO:2)。
如本文所用，术语“间隔子”在本文中是指在成熟ACC的游离末端(例如信号肽与成熟ACC的N端之间)掺入的氨基酸残基或肽。在一些方面，间隔子(或“头部”)可含有谷氨酰胺(Q)残基。在一些方面，间隔子中的残基使氨肽酶和/或外肽酶作用降至最低以防止N端氨基酸的裂解。说明性和非限制性间隔子氨基酸序列可包含以下示例性氨基酸序列中的任一种或由其组成：QGQSGS(SEQ ID NO:504)；GQSGS(SEQ ID NO:505)；QSGS(SEQ ID NO:506)；SGS；GS；S；QGQSGQG(SEQ ID NO:507)；GQSGQG(SEQ ID NO:508)；QSGQG(SEQ ID NO:509)；SGQG(SEQ ID NO:510)；GQG；QG；G；QGQSGQ(SEQ ID NO:511)；GQSGQ(SEQ ID NO:512)；QSGQ(SEQ ID NO:513)；QGQSG(SEQ ID NO:514)；QGQS(SEQ ID NO:515)；SGQ；GQ；和Q。在一些实施方案中，间隔子序列可忽略。
在一些实施方案中，第一单体构建体在N端至C端方向上包含CP1、CM1和直接或间接连接至CM1的C端的DD1。在一些实施方案中，第一多肽在C端至N端方向上包含CP1、CM1和直接或间接连接至CM1的N端的DD1。在一些实施方案中，第二多肽在N端至C端方向上包含CP2、CM2和直接或间接连接至CM2的C端的DD2。在一些实施方案中，第二多肽在C端至N端方向上包含CP2、CM2和直接或间接连接至CM2的DD2。
在一些实施方案中，第一单体构建体在N端至C端方向上包含CP1、任选的接头、CM1、任选的接头和DD1，其中DD1是IgG的Fc区，其中Fc区的N端是铰链区中在N方向至C方向上读取的第一个半胱氨酸残基(例如人类IgG1或IgG4的半胱氨酸226，使用EU编号)，并且其中CM1和插在CP1与DD1的N端半胱氨酸之间的任何接头具有不超过15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5或4个氨基酸，优选不超过10个氨基酸，尤其优选不超过7个氨基酸的组合总长度。在一些实施方案中，第二单体构建体在N端至C端方向上包含CP2、任选的接头、CM2、任选的接头和DD2，其中DD2是IgG的Fc区，其中Fc区的N端是铰链区中在N方向至C方向上读取的第一个半胱氨酸残基(例如人类IgG1或IgG4的半胱氨酸226，使用EU编号)，并且其中CM2和插在CP2与DD2的N端半胱氨酸之间的任何接头具有不超过15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5或4个氨基酸，优选不超过10个氨基酸，尤其优选不超过7个氨基酸的组合总长度。
在一些实施方案中，ACC是同二聚体，其中第一单体构建体和第二单体构建体相同并且包含SEQ ID NO:313的氨基酸序列。在一些实施方案中，第一单体构建体和第二单体构建体各自包含与SEQ ID NO:313具有至少90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，第一单体构建体和第二单体构建体各自在N端至C端方向上包含SEQ ID NO:1；包含选自由SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:68和SEQ ID NO:100组成的组的氨基酸序列的CM；和二聚化结构域。
在一些实施方案中，至少一种CP1和/或CP2活性是如使用表面等离子体共振所确定的CP1和/或CP2对其同源受体的结合亲和力(KD)。例如，当CP1或CP2是干扰素时，同源受体可能是干扰素-α/β受体(IFNAR)。在一些实施方案中，至少一种CP1和/或CP2活性是淋巴瘤细胞的增殖水平。在一些实施方案中，至少一种CP1和/或CP2活性是淋巴瘤细胞中JAK/STAT/ISGF3通路活化的水平。在一些实施方案中，至少一种活性是淋巴瘤细胞中分泌的碱性磷酸酶(SEAP)产生的水平。在一些实施方案中，ACC(在暴露于蛋白酶之前)的特征在于与对照水平相比，至少一种CP1和/或CP2活性降低至少2倍。在一些实施方案中，ACC的特征在于与对照水平相比，至少一种CP1和/或CP2活性降低至少5倍。在一些实施方案中，ACC的特征在于与对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低至少10倍。在一些实施方案中，ACC的特征在于与对照水平相比，至少一种CP1和/或CP2活性降低至少20倍、50倍、100倍、200倍、300倍、400倍、500倍、600倍、700倍、800倍、900倍、1000倍、1100倍、1200倍、1300倍、1400倍、1500倍、1600倍、1700倍、1800倍、1900倍、2000倍。在一些实施方案中，CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平是在将ACC暴露于蛋白酶之后CP1和/或CP2在ACC中的活性。在一些实施方案中，至少一种CP1和/或CP2的对照水平是相应野生型成熟细胞因子的相应CP1和/或CP2活性。
在一些实施方案中，ACC的特征在于在暴露于蛋白酶之后产生裂解产物，其中裂解产物包含CP1和/或CP2的至少一种活性。在一些实施方案中，CP1和/或CP2的至少一种活性是抗增殖活性。在一些实施方案中，对照水平是野生型成熟细胞因子的EC50值，并且其中EC50(裂解产物)与EC50(野生型对照水平)的比率小于约10、或小于约9、或小于约8、或小于约7、或小于约6、或小于约5、或小于约4、或小于约3、或小于约2、或小于约1.5、或等于约1。在一些实施方案中，裂解产物的EC50与野生型成熟细胞因子的EC50大致相同，证明在裂解后，CP1和/或CP2的活性完全恢复，或几乎完全恢复。
本文提供了包含本文所描述的ACC中的任一种的组合物。在一些实施方案中，组合物是药物组合物。本文还提供了包括至少一剂本文所描述的组合物中的任一种的药盒。
本文提供了治疗有需要的受试者的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的本文所描述的ACC中的任一种或本文所描述的组合物中的任一种。在一些实施方案中，受试者已被鉴别或诊断为患有癌症。在一些非限制性实施方案中，癌症是卡波西肉瘤、毛细胞白血病、慢性骨髓性白血病(CML)、滤泡性淋巴瘤、肾细胞癌(RCC)、黑色素瘤、神经母细胞瘤、基底细胞癌、膀胱癌、乳腺癌、结直肠癌、皮肤T细胞淋巴瘤、鼻咽腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、卵巢癌、胰腺癌。在一些非限制性实施方案中，癌症是淋巴瘤。在一些非限制性实施方案中，淋巴瘤是伯基特淋巴瘤。
本文提供了编码多肽的核酸，所述多肽包含本文所描述的ACC中的任一种的CP1和CM1。在一些实施方案中，多肽还包含本文所描述的DD1中的任一种。本文还提供了编码多肽的核酸，所述多肽包含本文所描述的ACC中的任一种的CP2和CM2。当单体相同时，本公开提供了编码单体的单一核酸，所述单体二聚化以形成ACC。在一些实施方案中，多肽还包含本文所描述的DD2中的任一种。本文还提供了包含本文所描述的核酸中的任一种的载体。在一些实施方案中，载体是表达载体。本文还提供了包含本文所描述的核酸中的任一种或本文所描述的载体中的任一种的细胞。
本文提供了核酸对，所述核酸一起编码包含本文所描述的ACC中的任一种的第一单体构建体的CP1和CM1的多肽和包含第二单体构建体的CP2和CM2的多肽。本文还提供了载体对，所述载体一起包含本文所描述的核酸对中的任一个。在一些实施方案中，所述载体对是一对表达载体。本文还提供了包含本文所描述的核酸对中的任一个或本文所描述的载体对中的任一个的细胞。在其他实施方案中，本发明提供了包含载体对的载体。
本文提供了产生ACC的方法，其包括：在液体培养基中在足以产生ACC的条件下培养本文所描述的细胞中的任一种；以及从细胞或液体培养基回收ACC。在一些实施方案中，所述方法还包括：分离从细胞或液体培养基回收的ACC。在一些实施方案中，所述方法还包括：将分离的ACC配制成药物组合物。
本文提供了通过本文所描述的方法中的任一种产生的ACC。本文还提供了包含本文所描述的ACC中的任一种的组合物。本文还提供了本文所描述的组合物中的任一种的组合物，其中所述组合物是药物组合物。本文还提供了包括至少一剂本文所描述的组合物中的任一种的药盒。
除非另有限定，否则本文所使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属的领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。本文描述了用于本发明的方法和材料；也可以使用本领域已知的其他合适的方法和材料。材料、方法和实例仅是说明性的而不旨在限制。本文所提及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目以及其他参考文献以引用的方式整体并入本文。如有冲突，以本说明书(包括定义)为准。
本发明的其他特征和优势将根据以下详细描述和附图以及根据权利要求而显而易知。
术语“一(a/an)”是指冠词的一个或多个(即至少一个)语法对象。借助于实例，“一细胞”涵盖一个或多个细胞。
如本文所用，术语“约”和“大约”当用于修饰数值或范围内指定的量时，表示数值以及与本领域技术人员已知的值的合理偏差。例如在适当的情况下，±20％、±10％或±5％在所述值的预期含义内。
浓度、量和其他数值数据可在本文中以范围格式表示或呈现。应理解，使用这种范围格式仅仅是为了方便和简洁，因此应灵活解释为不仅包括明确列举为范围限制的数值，还包括涵盖在所述范围内的所有个别数值或子范围，就好像每个数值和子范围都被明确列举一样。作为说明，“约0.01至2.0”的数值范围应解释为不仅包括明确列举的约0.01至约2.0的值，而且还包括指定范围内的个别值和子范围。因此，包括在所述数值范围内的是诸如0.5、0.7和1.5的个别值，以及诸如0.5至1.7、0.7至1.5和1.0至1.5等的子范围。此外，这种解释应适用于任何情况范围的广度或所描述的特征。另外，应注意所有百分比均以重量计，除非另有说明。
在理解本公开的范围时，如本文所用，术语“包括”或“包含”和它们的派生词旨在为指定所陈述的特征、元件、组分、群组、整数和/或步骤的存在，但不排除存在其他未陈述的特征、元件、组分、群组、整数和/或步骤的开放式术语。上述内容还适用于具有类似含义的词语，诸如术语“包括”、“具有”和它们的派生词。如本文所用，术语“组成”和它的派生词旨在为指定所陈述的特征、元件、组分、群组、整数和/或步骤的存在，但排除其他未陈述的特征、元件、组分、群组、整数和/或步骤的存在的封闭式术语。如本文所用，术语“基本上由……组成”旨在指定所陈述的特征、元件、组分、群组、整数和/或步骤以及不会对特征、元件、组分、群组、整数和/或步骤的一个或多个基本和新颖特征产生实质性影响的那些特征、元件、组分、群组、整数和/或步骤的存在。应理解，对这些过渡术语中的任一个(即“包括”、“组成”或“基本上组成”)的引用提供了对替换未具体使用的其他过渡术语中的任一个的直接支持。例如，将术语从“包含”修改为“基本上由……组成”或“由……组成”将得到直接支持，因为所述定义适用于在本公开中通篇所公开的任何元件。基于所述定义，本文所公开的或以引用的方式并入的任何元件可包括在要求保护的发明中或从所述发明排除。
如本文所用，为方便起见，多个化合物、元件或步骤可呈现在共同列表中。然而，这些列表应解释为好像列表的每个成员都被个别地鉴别为单独的和唯一的成员。因此，在没有相反的指示的情况下，所述列表的任何个别成员均不应仅基于其在一个共同组中的呈现而被解释为事实上等同于同一列表中的任何其他成员。
此外，某些分子、构建体、组合物、元件、部分、赋形剂、病症、病状、特性、步骤等可在一个具体实施方案或方面的上下文中或在本公开的单独段落或章节中讨论。应理解，这仅仅是为了方便和简洁，并且任何这样的公开同样适用于并且旨在与在本公开和权利要求中的任何地方发现的任何其他实施方案或方面相结合，所有这些在提交日都形成了申请和要求保护的发明。例如，关于构建体、组合物或方法所描述的构建体、分子、方法步骤、药盒或组合物的列表旨在并且确实找到了对与本公开的任何其他部分所描述的构建体、组合物、制剂和方法相关的实施方案的直接支持，即使那些方法步骤、活性剂、药盒或组合物未在所述实施方案或方面的上下文或章节中重新列出。
除非另有说明，否则“编码蛋白质的核酸序列”包括彼此为简并形式并因此编码相同氨基酸序列的所有核苷酸序列。
当提及多肽初级氨基酸序列中第一结构域或序列相对于第二结构域或序列的位置时，术语“N端定位”意指第一结构域或序列比第二个结构域或序列更靠近多肽初级氨基酸序列的N端。在一些实施方案中，在第一结构域或序列与第二结构域或序列之间可能存在额外的序列和/或结构域。
当提及多肽初级氨基酸序列中第一结构域或序列相对于第二结构域或序列的位置时，术语“C端定位”意指第一结构域或序列比第二个结构域或序列更靠近多肽初级氨基酸序列的C端。在一些实施方案中，在第一结构域或序列与第二结构域或序列之间可能存在额外的序列和/或结构域。
术语“外源”是指从细胞、组织或生物体外部引入或来源于外部的任何材料，所述材料不由引入其的相同细胞、组织或生物体产生或不源自它们。
术语“转导的”、“转染的”或“转化的”是指将外源核酸引入或转移到细胞中的过程。“转导的”、“转染的”或“转化的”细胞(例如哺乳动物细胞)是已用外源核酸(例如载体)转导、转染或转化的细胞，所述外源核酸包括编码本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种的外源核酸。
术语“核酸”是指呈单链或双链形式的脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)或其组合。除非特别限定，否则所述术语涵盖含有已知的具有与参考核苷酸相似的结合特性的天然核苷酸类似物的核酸。除非另有说明，否则特定核酸序列还隐含地涵盖互补序列以及明确指定的序列。在本文所描述的核酸中的任一种的一些实施方案中，核酸是DNA。在本文所描述的核酸中的任一种的一些实施方案中，核酸是RNA。
可通过本领域已知的标准技术将修饰引入核苷酸序列，所述技术诸如定点诱变和聚合酶链反应(PCR)介导的诱变。保守氨基酸取代是氨基酸残基被具有相似侧链的氨基酸残基替代的氨基酸取代。在本领域中已定义了具有相似侧链的氨基酸残基家族。这些家族包括：具有酸性侧链的氨基酸(例如天冬氨酸和谷氨酸)、具有碱性侧链的氨基酸(例如赖氨酸、精氨酸和组氨酸)、非极性氨基酸(例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸和色氨酸)、不带电荷的极性氨基酸(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸)、亲水性氨基酸(例如精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、组氨酸、赖氨酸、丝氨酸和苏氨酸)、疏水性氨基酸(例如丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸)。其他氨基酸家族包括：脂肪族-羟基氨基酸(例如丝氨酸和苏氨酸)、酰胺家族(例如天冬酰胺和谷氨酰胺)、脂肪族家族(例如丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸)、芳香族家族(例如苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)。
如本文所用，短语“特异性结合”或“与……免疫反应”意指可活化的抗原结合蛋白复合物与所需靶抗原的一种或多种抗原决定簇反应并且不与其他多肽反应，或以低得多的亲和力(例如约或大于10-6M)结合。
术语“治疗”是指改善病症的至少一种症状。在一些实施方案中，所治疗的病症是癌症并且改善癌症的至少一种症状。
附图说明
图1A是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 140和DD2 190彼此以共价或非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从N端至C端包含第一成熟细胞因子蛋白CP1 100、第一任选接头110、第一可裂解部分CM1 120、第二任选接头130和第一二聚化结构域DD1 140。第二单体构建体从N端至C端包含第二成熟细胞因子蛋白CP2 150、第三任选接头160、第二可裂解部分CM2 170、第四任选接头180和第二二聚化结构域DD2 190。
图1B是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 200和DD2 250彼此以共价或非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从N端至C端包含第一二聚化结构域DD1200、第二任选接头210、第一可裂解部分CM1 220、第一任选接头230和第一成熟细胞因子蛋白CP1 240。第二单体构建体从N端至C端包含第二二聚化结构域DD2 250、第四任选接头260、第二可裂解部分CM2 270、第三任选接头280和第二成熟细胞因子蛋白CP2 290。
图2A是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 340和DD2 390彼此以非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从N端至C端包含第一成熟细胞因子蛋白CP1300、第一任选接头310、第一可裂解部分CM1 320、第二任选接头330和第一二聚化结构域DD1 340。第二单体构建体从N端至C端包含第二成熟细胞因子蛋白CP2 350、第三任选接头360、第二可裂解部分CM2 370、第四任选接头380和第二二聚化结构域DD2 390。
图2B是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 400和DD2 450彼此以非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从N端至C端包含第一二聚化结构域DD1 400、第二任选接头410、第一可裂解部分CM1 420、第一任选接头430和第一成熟细胞因子蛋白CP1440。第二单体构建体从N端至C端包含第二二聚化结构域DD2 450、第四任选接头460、第二可裂解部分CM2 470、第三任选接头480和第二成熟细胞因子蛋白CP2 490。
图3提供了说明性可活化细胞因子构建体IFN-α2b-1204dL-hIgG4(SEQ ID NO:309)的氨基酸序列，其中第一单体构建体和第二单体构建体具有相同的氨基酸序列。从N端至C端，第一单体构建体和第二单体构建体的氨基酸序列编码：小鼠信号肽(斜体文本，非粗体)；成熟人类干扰素-α2b(下划线文本)；可裂解部分1204dL(粗体文本)；接头(斜体和粗体文本)；和人类IgG4 Fc结构域(非斜体、粗体或下划线文本)。
图4提供了说明性可活化细胞因子构建体IFN-α2b-1490DNI-hIgG4(SEQ ID NO:311)的氨基酸序列，其中第一单体构建体和第二单体构建体具有相同的氨基酸序列。从N端至C端，氨基酸序列编码：小鼠信号肽(斜体文本，非粗体)；成熟人类干扰素-α2b(下划线文本)；可裂解部分1490DNI(粗体文本，非斜体)；接头(斜体和粗体文本)；和人类IgG4 Fc结构域(非斜体、粗体或下划线文本)。
图5描绘了可活化细胞因子构建体IFNα-2b-hIgG4 Fc(具有可裂解部分1204dL或可裂解部分1490)和蛋白酶(uPA或MT-SP1)的裂解反应，所述裂解反应产生单体成熟IFNα-2b。
图6是装载有以下的凝胶的图像：(1)具有可裂解部分1204的ACC(1204)；(2)蛋白酶膜型丝氨酸蛋白酶1(MT-SP1)和具有可裂解部分1204的ACC IFNα-2b-hIgG4 Fc的产物(1204MT-SP1)；(3)具有可裂解部分1204的ACC IFNα-2b-hIgG4 Fc和蛋白酶uPA的产物(1204uPA)；(4)具有与5个氨基酸的接头融合的可裂解部分1204的ACC IFNα-2b-hIgG4 Fc(1204+1)；(5)IFNα-2b-hIgG4 Fc 1204+1和MT-SP1的产物(1204+1MT-SP1)；(6)具有可裂解部分1490的ACC IFNα-2b-hIgG4 Fc；(7)MT-SP1和具有可裂解部分1490的ACC IFNα-2b-hIgG4 Fc的产物；uPA和具有可裂解部分1490的ACC IFNα-2b-hIgG4 Fc的产物(1490uPA)。
图7提供了基于HEK293细胞的报道基因测定的结果，所述测定评估了
Figure GDA0004000354850000211
(聚乙二醇干扰素α-2b)和各种干扰素α-2b(IFNa2b)融合物的干扰素-α2b活性：N端融合至IFNa2b的人类IgG4(IFNa2b NhG4)；通过五个氨基酸的接头N端融合至IFNa2b的人类IgG4(IFNa2b 5AA NhG4)；可活化细胞因子构建体IFN-α2b-1204dL-hIgG4(IFNa2b 1204DNIdLNhG4)；包括与IFN-α2b-1204dL-hIgG4相同的组分，但还具有位于成熟细胞因子蛋白组分与可切裂解部分之间的5个氨基酸的接头的可活化细胞因子构建体(IFNa2b 5AA 1204DNIdLNhG4)；和可活化细胞因子构建体IFN-α2b-1490DNI-hIgG4(IFNa2b 1490DNI NhG4)。
图8A描绘了干扰素-α2b-Fc融合物中柔性接头的长度对EC50的影响，如通过基于HEK293细胞的报道基因测定所确定的。图8B描绘了干扰素-α2b-Fc融合物中连接区(LR)的长度对EC50的影响，如通过基于HEK293细胞的报道基因测定所确定的。
图9提供了Daudi细胞凋亡测定的结果，所述测定确定了
Figure GDA0004000354850000212
和各种IFNa2b融合物的抗增殖活性：N端融合至IFNa2b的人类IgG4(IFNa2b NhG4)；通过五个氨基酸的接头N端融合至IFNa2b的人类IgG4(IFNa2b 5AA NhG4)；可活化细胞因子构建体IFN-α2b-1204dL-hIgG4(IFNa2b 1204DNIdL NhG4)；包括与IFN-α2b-1204dL-hIgG4相同的组分，但还具有位于成熟细胞因子蛋白组分与可切裂解部分之间的5个氨基酸的接头的可活化细胞因子构建体(IFNa2b 5AA 1204DNIdL NhG4)；和可活化细胞因子构建体IFN-α2b-1490DNI-hIgG4(IFNa2b 1490DNI NhG4)。
图10A描绘了干扰素-α2b-Fc融合蛋白中接头的长度对EC50的影响，如根据Daudi凋亡测定所确定的。图10B描绘了干扰素-α2b-Fc融合物中连接区(LR)的长度对EC50的影响，如根据Daudi凋亡测定所确定的。
图11提供了基于Daudi淋巴瘤细胞的测定结果，所述测定用于测量ACC(IFNa2b1204DNIdL NhG4)；蛋白酶处理的ACC(IFNa2b 1204DNIdL NhG4+uPA)；和重组亲本细胞因子(IFNa2b)的抗增殖活性。结果表明，在用蛋白酶处理ACC后，ACC中细胞因子的活性可恢复到与重组亲本细胞因子相当的水平。
图12描绘了基于HEK293细胞的报道基因测定的结果，所述测定评估了ACC(IFNa2b1204DNIdL NhG4)；蛋白酶处理的(活化的)ACC(IFNα-2b 1204DNIdL NhG4+uPA)；
Figure GDA0004000354850000221
和重组亲本细胞因子(IFNa2b)的活性。结果表明，在用蛋白酶处理ACC后，ACC中细胞因子的活性可恢复到与重组亲本细胞因子相当的水平。
图13描绘了用于测量ACC(ProC440)、蛋白酶处理的ACC(ProC440+uPA)和干细胞IFNa2b的抗增殖活性的基于Daudi淋巴瘤细胞的测定结果(上图)和用于测量它们的活性的基于HEK293细胞的报道基因测定的结果(下图)。结果表明，通过制备本公开的ACC结构，活性降低了1000倍，并且在用蛋白酶处理ACC后，ACC中细胞因子的活性恢复到与重组亲本细胞因子相当的水平。
图14A描绘了ProC440的结构，并示出了在CM中的预期位点用uPa进行的裂解通过质谱分析得到证实。除了对uPa活化敏感之外，ProC440还被MMP4裂解。图14B示出了通过质谱的分析，鉴别了在可裂解部分附近的IFNa的C末端处(L161处)的MMP14裂解位点。用MMP14进行蛋白酶活化使活性恢复到与重组细胞因子相当的水平。
图15描绘了ProC440和ProC657(N IFNa2b 0AA 1204DNIdL 0AA IgG4 KiHSS)的结构。ACC ProC440和ProC657、蛋白酶处理的ACC(ProC440+uPA)和干细胞IFNa2b的活性使用IFN反应性HEK293细胞进行测试。结果表明，与干细胞IFNα-2b或uPa活化的ProC440相比，ProC657的活性降低，但与ProC440相比，活性增加。
图16(上图)描绘了使用Daudi异种移植肿瘤模型，ACC ProC440在体内的抗增殖作用。ACC ProC440以低至0.1mg/kg的剂量诱导肿瘤完全消退并以0.02mg/kg的剂量减缓肿瘤生长.图16(下图)描绘了使用Daudi异种移植肿瘤模型，
Figure GDA0004000354850000231
在体内的抗增殖作用。
图17A描绘了ProC286的结构和在Daudi细胞凋亡测定中ProC286的活性与
Figure GDA0004000354850000232
的活性的比较。ProC286和
Figure GDA0004000354850000233
显示出相似的活性水平，表明ProC286可用作
Figure GDA0004000354850000234
对照的替代物，以评价仓鼠研究中IFNα-2b的耐受性。图17B描绘了ProC291的结构和在Daudi细胞凋亡测定中ProC291的活性与
Figure GDA0004000354850000235
的活性的比较。与
Figure GDA0004000354850000236
和ProC286相比，ProC291的活性明显降低。
图18描绘了在体内剂量递增研究(例如以0.08、0.4、2、10、15mg/kg(“mpk”)的递增剂量)中IFNa-con(重组干扰素α，一种非天然存在的I型干扰素)、ProC440+uPA、PEG-IFNa2b(Sylatron)和ProC440的比活性和预期毒性剂量。
图19描绘了ACC ProC859通用干扰素的结构(上图)、ACC ProC859在B16小鼠黑色素瘤细测定中的抗增殖作用和ACC ProC859在IFN反应性HEK293测定中的活性。
图20A是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 540和DD2彼此以非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从N端至C端包含第一成熟细胞因子蛋白CP1 500、第一任选接头510、第一可裂解部分CM1 520、第二任选接头530和第一二聚化结构域DD1540。第二单体构建体从N端至C端包含第二成熟细胞因子蛋白CP2 550、第三任选接头560和第二二聚化结构域DD2 590。
图20B是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 600和DD2彼此以非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从N端至C端包含第一二聚化结构域DD1 600、第一任选接头630和第一成熟细胞因子蛋白CP1 640。第二单体构建体从N端至C端包含第二二聚化结构域DD2 650、第二任选接头660、可裂解部分CM 670、第三任选接头680和第二成熟细胞因子蛋白CP2 690。
图21A是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 740和DD2彼此以非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从N端至C端包含第一成熟细胞因子蛋白CP 700、第一任选接头710、第一可裂解部分CM1 720、第二任选接头730和第一二聚化结构域DD1740。第二单体构建体从N端至C端包含缺乏细胞因子活性的多肽或蛋白质780和第二二聚化结构域DD2 790。缺乏细胞因子活性的多肽或蛋白质780可以是例如缺乏细胞因子活性的截短的细胞因子蛋白、缺乏细胞因子活性的突变的细胞因子蛋白、残端序列(stub sequence)或以高亲和力与CP 700结合并且与第二部分的对照水平相比降低了第二部分的细胞因子活性的多肽序列。DD1 740和DD2 790可相同或不同。
图21B是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 800和DD2彼此以非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从N端至C端包含第一二聚化结构域DD1 800和缺乏细胞因子活性的多肽或蛋白质830。第二单体构建体从N端至C端包含第二二聚化结构域DD2 850、第一任选接头860、可裂解部分CM 870、第二任选接头880和成熟细胞因子蛋白CP。缺乏细胞因子活性的多肽或蛋白质830可以是例如缺乏细胞因子活性的截短的细胞因子蛋白、缺乏细胞因子活性的突变的细胞因子蛋白、残端序列或以高亲和力与CP 700结合并且与第二部分的对照水平相比降低了第二部分的细胞因子活性的多肽序列。DD1 800和DD2850可相同或不同。
图22显示了当在叙利亚金仓鼠(Syrian Gold Hamster)中的治疗期内给药2mpk、10mpk和15mpk的对照hIgG4、ProC286或ProC440时，动物体重减轻。
图23显示了在给药2mpk、10mpk和15mpk的对照hIgG4、ProC286或ProC440的叙利亚金仓鼠中的临床化学结果(碱性磷酸酶、丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶)。
图24显示了在给药2mpk、10mpk和15mpk的对照hIgG4、ProC286或ProC440的叙利亚金仓鼠中的血液学分析结果(网织红细胞、中性粒细胞和白细胞(WBC)计数)。
图25示意性地示出了表示ACC的连接区(LR)的ACC的实施方案。
具体实施方式
本文提供了可活化细胞因子构建体(ACC)，其展现出相应细胞因子的至少一种活性的水平降低，但在暴露于活化条件后，产生具有大致上恢复的活性的细胞因子产物。本发明的可活化细胞因子构建体可设计成在暴露于患病组织时选择性活化，而在正常组织中不活化。因此，这些化合物具有赋予基于细胞因子的疗法的益处的潜力，与某些基于细胞因子的疗法相关的毒性可能更小。
本文还提供了相关的中间物、组合物、药盒、核酸和重组细胞，以及相关方法，包括使用本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种的方法和生产它们的方法。
本发明人惊奇地发现，具有本文所描述的特定元件和结构取向的ACC在提高细胞因子在疗法(特别是对于治疗癌症)中的安全性和治疗指数方面可能有效。虽然细胞因子是先天性和适应性免疫系统的调节物，并且在临床前模型中具有广泛的抗肿瘤活性，但它们的临床成功受到全身性毒性和对靶组织的全身暴露不足的限制。本发明人惊奇地发现，具有本文所描述的特定元件和结构取向的ACC似乎降低了与细胞因子治疗剂相关的全身性毒性并提高了对靶组织的靶向和暴露。因此，本公开提供了一种通过向受试者施用具有本文所描述的特定元件和结构取向的ACC来减少细胞因子治疗剂的靶标介导的药物处置(target-mediated drug dispos i t ion，TMDD)的方法。因此，本发明解决了所施用的细胞因子剂量中相当大一部分被正常组织隔离的问题，所述问题是在常规细胞因子治疗剂方面限制体循环中可用的剂量部分到达靶组织(例如癌组织)的问题。本发明细胞因子构建体使靶标与肿瘤组织的结合局部化，从而保持效力，减少副作用，提供新的靶标机会，改进已验证靶标的治疗窗口，为不可成药的靶标创建治疗窗口，并提供多种结合方式。本公开能够实现安全和有效的全身递送，从而避免常规全身细胞因子疗法的剂量依赖性毒性，并且还避免了对肿瘤内注射的要求。本公开提供了一种用于赋予局部抗病毒活性、免疫调节活性、抗增殖活性和促细胞凋亡活性的方式。本发明人惊奇地发现，第一单体构建体和第二单体构建体的二聚化实现了细胞因子活性的高度降低，特别是与单个细胞因子连接至二聚化结构域时相比更高的降低。参见图15。
另外，本发明人发现细胞因子活性降低的程度可通过改变柔性接头长度或连接区长度来调节。本发明人惊奇地发现，通过将细胞因子经由短的蛋白酶可裂解序列连接至空间受限的二聚化结构域(诸如在铰链区的第一个半胱氨酸(例如按EU编号来编号的Cys226)处被截短的人类IgG的Fc结构域)，可实现细胞因子活性降低约1,000倍或更多。令人惊讶的是，尽管存在空间限制，但仍发生蛋白酶裂解，并且在从二聚化结构域裂解细胞因子后恢复完全的细胞因子活性。
2020年4月10日提交的申请人的美国临时申请号63/008,542描述了某些可活化细胞因子构建体，所述申请以引用的方式整体并入本文。
可活化细胞因子构建体
本发明的可活化细胞因子构建体是包含第一单体构建体和第二单体构建体的二聚体复合物。通过一对二聚化结构域促进了单体组分的二聚化。一方面，每个单体构建体包括细胞因子蛋白、可裂解部分和二聚化结构域(DD)。一方面，一个单体构建体包括细胞因子蛋白、可裂解部分和DD，而另一个单体构建体包括细胞因子蛋白和DD，但不包括可裂解部分。一方面，一个单体构建体包括细胞因子蛋白、可裂解部分和DD，而另一个单体构建体包括缺乏细胞因子活性的蛋白质或肽和DD，但不包括可裂解部分。在一个具体实施方案中，本发明提供了一种可活化细胞因子构建体(ACC)，其包括第一单体构建体和第二单体构建体，其中：
(a)第一单体构建体包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、第一可裂解部分(CM1)和第一二聚化结构域(DD1)，
其中CM1位于CP1与DD1之间；并且
(b)第二单体构建体包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)、第二可裂解部分(CM2)和第二二聚化结构域(DD2)，
其中CM2位于CP2与DD2之间；
其中DD1和DD2彼此结合，从而形成第一单体构建体和第二单体构建体的二聚体；并且
其中ACC的特征在于具有与至少一种CP1和/或CP2活性的对照水平相比降低的至少一种CP1和/或CP2活性的水平。
当用于指细胞因子构建体时，术语“可活化”是指展现出一种或多种活性的第一水平的细胞因子构建体，随之暴露于导致一个或两个可裂解部分裂解的条件，导致产生展现出一种或多种活性的第二水平的细胞因子构建体，其中活性的第二水平大于活性的第一水平。活性的非限制性实例包括本文所描述或本领域已知的细胞因子的示例性活性中的任一种。
术语“成熟细胞因子蛋白”在本文中是指缺乏信号序列的细胞因子蛋白。细胞因子蛋白(CP)可以是成熟细胞因子蛋白或具有信号肽的细胞因子蛋白。因此，本公开的ACC在一些方面可以包括成熟细胞因子蛋白序列。在一些方面，本公开的ACC可以包括成熟细胞因子蛋白序列和另外的信号序列。在一些方面，本公开的ACC可以包括本文所公开的序列，其包括或缺乏本文所叙述的信号序列。
术语“可裂解部分”和“CM”在本文中可互换地用于指代肽，所述肽的氨基酸序列包含序列特异性蛋白酶的底物。适用作CM1和/或CM2的可裂解部分包括本领域已知的蛋白酶底物中的任一种。下文更详细地描述了示例性可裂解部分。
术语“二聚化结构域”和“DD”在本文中可互换地用于指代一对二聚化结构域中的一个成员，其中所述对中的每个成员能够通过一种或多种共价或非共价相互作用与另一个成员结合。第一DD和第二DD可相同或不同。在下文更详细地描述了适用作DD1和/或DD2的示例性DD。
如本文所用，多肽(诸如细胞因子或Fc结构域)可以是野生型多肽(例如天然存在的多肽)或野生型多肽的变体。变体可以是通过取代、插入、缺失和/或添加野生型多肽的一个或多个氨基酸而修饰的多肽，前提是变体保留野生型多肽的基本功能或活性。在一些实例中，变体与野生型多肽相比可能具有改变(例如增加或减少)的功能或活性。在一些方面，变体可以是野生型多肽的功能片段。术语“功能片段”意指多肽(例如细胞因子)的序列可包括比全长多肽序列少的氨基酸，但具有足够的多肽链长度以赋予活性(例如细胞因子活性)。
第一单体构建体和第二单体构建体可以还包含额外元件，诸如一个或多个接头等。下文更详细地描述了额外元件。第一单体构建体和第二单体构建体中的每一个中的CP、CM和DD组分的组织可以在每个单体构建体中以相同的顺序排列。与相应CP2、CM2和DD2相比，CP1、CM1和DD1组分在例如CP和CM组分(以及在DD组分是多肽的实施方案中的DD组分)的分子量、大小、氨基酸序列等方面可相同或不同。因此，所得二聚体可具有对称或不对称的单体结构组分。
在一些实施方案中，第一单体构建体从CP和CM组分的N端至C端包含CP1、CM1和直接或间接(通过接头)连接至CM1的C端的DD1。在其他实施方案中，第一单体构建体从CP和CM组分的C端至N端包含CP1、CM1和直接或间接(通过接头)连接至CM1的N端的DD1。在一些实施方案中，第二单体构建体从CP和CM组分的N端至C端包含CP2、CM2和直接或间接(通过接头)连接至CM2的C端的DD2。在其他实施方案中，第二单体构建体从CP和CM组分的C端至N端包含CP2、CM2和直接或间接(通过接头)连接至CM2的N端的DD2。
在某些实施方案中，第一单体构建体和第二单体构建体被取向使得二聚体的每个成员中的组分以相同的顺序从CP和CM组分的N端至C端组织。图1A中提供了说明性ACC的示意图。参考图1A，ACC从CP和CM组分的N端至C端包含：(1)第一单体构建体，其具有CP1 100；CM1 120，其相对于CP1 100C端定位；任选接头110，其(如果存在的话)定位于CP1 100的C端与CM1 120的N端之间；DD1 140；和任选接头130，其(如果存在的话)定位于CM1 120的C端与DD1 140之间；(2)第二单体构建体，其具有CP2 150；CM2 170，其相对于CP2 150C端定位；任选接头160，其(如果存在的话)定位于CP2 150的C端与CM2 170的N端之间；DD2 190；和任选接头180，其(如果存在的话)定位于CM2 170的C端与DD2 190之间；以及(3)一个或多个共价或非共价键(←→)。
图1B中提供了另一说明性ACC的示意图，其组分以ACC的相反取向组织。参考图1B，ACC从CP和CM组分的N端至C端包含：(1)第一单体构建体，其具有DD1 200；CM1 220；任选接头210，其(如果存在的话)定位于DD1 200与CM1 220的N端之间；CP1 240，其相对于CM1220C端定位；和任选接头230，其(如果存在的话)定位于CM1 220的C端与CP1 240的N端之间；(2)第二单体构建体，其具有DD2 250；CM2 270；任选接头260，其(如果存在的话)定位于DD2 250与CM2 270的N端之间；CP2 290，其相对于CM2 270C端定位；和任选接头280，其(如果存在的话)定位于CM2 290的C端与CP2 290的N端之间；以及(3)一个或多个共价或非共价键(←→)。
图2A是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 340和DD2 390彼此以非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从CP和CM组分的N端至C端包含第一成熟细胞因子蛋白CP1 300、第一任选接头310、第一可裂解部分CM1 320、第二任选接头330和第一二聚化结构域DD1 340。第二单体构建体从N端至C端包含第二成熟细胞因子蛋白CP2 350、第三任选接头360、第二可裂解部分CM2 370、第四任选接头380和第二二聚化结构域DD2 390。
图2B是说明性可活化细胞因子构建体的示意图，所述可活化细胞因子构建体包含分别通过第一和第二二聚化结构域DD1 400和DD2 450彼此以非共价方式结合的第一单体构建体和第二单体构建体。第一单体构建体从CP和CM组分的N端至C端包含第一二聚化结构域DD1 400、第二任选接头410、第一可裂解部分CM1 420、第一任选接头430和第一成熟细胞因子蛋白CP1 440。第二单体构建体从CP和CM组分的N端至C端包含第二二聚化结构域DD2450、第四任选接头460、第二可裂解部分CM2 470、第三任选接头480和第二成熟细胞因子蛋白CP2 490。在替代方面，描绘为CP1 440和CP2 490的两个部分中的一个是缺乏细胞因子活性的截短的细胞因子蛋白。例如，CP1或CP2可以是具有野生型干扰素α2b的前151个氨基酸的截短的干扰素α2b。在替代方面，描绘为CP1 440和CP2 490的两个部分中的一个是缺乏细胞因子活性的突变的细胞因子蛋白。例如，CP1或CP2可以是具有L130P突变的截短的干扰素α2b。在替代方面，描绘为CP1 440和CP2 490的两个部分中的一个是缺乏细胞因子活性的多肽序列，例如信号部分和/或残端序列。在替代方面，描绘为CP1 440和CP2 490的两个部分中的第一个是多肽序列，其以高亲和力与描绘为CP1 440和CP2 490的两个部分中的第二个结合并且与第二部分的对照水平相比降低第二部分的细胞因子活性。
发现ACC结构非常有效地降低成熟细胞因子蛋白组分的活性，其方式不会导致活化后细胞因子活性明显受损。本文所描述的ACC的活化条件是暴露于可裂解ACC中的可裂解部分(CM)中的至少一个的蛋白酶。如实例中所证明的，ACC的活化导致细胞因子活性的明显恢复。结果表明，在ACC的情况下，细胞因子组分的构象未发生不可逆转的改变。重要的是，ACC不依赖于必须鉴别和利用对细胞因子蛋白组分具有结合亲和力的肽掩蔽物来实现掩蔽效果。因此，ACC不包含对细胞因子蛋白组分具有结合亲和力的肽掩蔽物。本发明人出乎意料地发现，ACC结构足以避免细胞因子的脱靶和不希望的活性和/或毒副作用，无需使用任何对细胞因子蛋白组分具有结合亲和力的掩蔽部分。因此，本文所描述的ACC的特征在于它们缺乏亲和力掩蔽部分或肽掩蔽部分。
ACC可使用多种成熟细胞因子蛋白、可裂解部分和DD中的任一种分别作为CP1、CP2、CM1、CM2、DD1和DD2。例如，本领域已知的多种成熟细胞因子蛋白或其序列和/或截短变体中的任一种可能适合用作ACC的CP1和CP2组分中的一种或两种。成熟细胞因子蛋白CP1和CP2可相同或不同。在某些具体实施方案中，CP1和CP2相同。在其他实施方案中，CP1和CP2不同。ACC可以在CP1和/或CP2的N端和/或C端中的一个或两个处包含额外的氨基酸残基。
在一些实施方案中，CP1和/或CP2可各自独立地包含选自下组的成熟细胞因子蛋白：干扰素(诸如干扰素α、干扰素β、干扰素γ、干扰素τ和干扰素ω)、白介素(诸如IL-1α、IL-1β、IL-1RA、IL-18、IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-13、IL-15、IL-3、IL-5、GM-CSF、IL-6、IL-11、IL-21)、G-CSF、IL-12、LIF、OSM、IL-10、IL-20、IL-14、IL-16、IL-17、CD154、LT-β、TNF-α、TNF-β、4-1BBL、APRIL、CD70、CD153、CD178、GITRL、LIGHT、OX40L、TALL-1、TRAIL、TWEAK、TRANCE、TGF-β1、TGF-β1、TGF-β3、EPOo、TPO、Fl t-3L、SCF、M-CSF和MSP等，以及其序列和截短变体。例如，所述蛋白质的序列包括本文示例的那些序列，并且可以从ncbi.nlm.nih.gov/protein获得额外序列。适用于本发明的ACC的截短变体包括保留细胞因子活性的任何N端或C端截短的细胞因子。用于本发明的示例性截短变体包括本领域(参见例如Slutzki等人,J.Mol.Biol.360:1019-1030,2006和US 2009/0025106)已知的任何截短的细胞因子多肽，以及保留细胞因子活性的N端和/或C端截短1至约40个氨基酸、1至约35个氨基酸、1至约30个氨基酸、1至约25个氨基酸、1至约20个氨基酸、1至约15个氨基酸、1至约10个氨基酸、1至约8个氨基酸、1至约6个氨基酸、1至约4个氨基酸的细胞因子多肽。在一些前述实施方案中，截短的CP是N端截短的CP。在其他实施方案中，截短的CP是C端截短的CP。在某些实施方案中，截短的CP是C端和N端截短的CP。
在一些实施方案中，CP1和/或CP2各自独立地包含与选自由以下组成的组的细胞因子参考序列具有至少80％同一性(例如至少82％、至少84％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的氨基酸序列：SEQ ID NO:101、SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104、SEQID NO:105、SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:107、SEQ ID NO:108、SEQ ID NO:109、SEQ ID NO:110、SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:115、SEQID NO:116、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:118、SEQ ID NO:119、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:122、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:124、SEQ ID NO:125、SEQ ID NO:126、SEQID NO:127、SEQ ID NO:128、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:134、SEQ ID NO:135、SEQ ID NO:136、SEQ ID NO:137、SEQID NO:138、SEQ ID NO:139、SEQ ID NO:140、SEQ ID NO:141、SEQ ID NO:142、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:147、SEQ ID NO:148、SEQID NO:149、SEQ ID NO:150、SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:152、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:154、SEQ ID NO:155、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:157、SEQ ID NO:158、SEQ ID NO:159、SEQID NO:160、SEQ ID NO:161、SEQ ID NO:162、SEQ ID NO:163、SEQ ID NO:164、SEQ ID NO:165、SEQ ID NO:166、SEQ ID NO:167、SEQ ID NO:168、SEQ ID NO:169、SEQ ID NO:170、SEQID NO:171、SEQ ID NO:172、SEQ ID NO:173、SEQ ID NO:174、SEQ ID NO:175、SEQ ID NO:176、SEQ ID NO:177、SEQ ID NO:178、SEQ ID NO:179、SEQ ID NO:180、SEQ ID NO:181、SEQID NO:182、SEQ ID NO:183、SEQ ID NO:184、SEQ ID NO:185、SEQ ID NO:186、SEQ ID NO:187、SEQ ID NO:188、SEQ ID NO:189、SEQ ID NO:190、SEQ ID NO:191、SEQ ID NO:192、SEQID NO:193、SEQ ID NO:194、SEQ ID NO:195、SEQ ID NO:196、SEQ ID NO:197、SEQ ID NO:198、SEQ ID NO:199、SEQ ID NO:200、SEQ ID NO:201、SEQ ID NO:202、SEQ ID NO:203、SEQID NO:204、SEQ ID NO:205、SEQ ID NO:206、SEQ ID NO:207、SEQ ID NO:208和SEQ ID NO:209。序列同一性百分比是指当使用序列比对程序(例如可在互联网上的NCBI网站上公开获得的BLAST程序组)进行比对时，两个或更多个肽序列之间的氨基酸序列同一性水平。还参见Al tschul等人,J.Mol.Biol.215:403-10,1990。在一些方面，ACC包括干扰素α2b突变体，例如，在位置L130处具有突变的干扰素α2b分子，例如L130P突变，如CP1或CP2。在一些方面，ACC包括在位置I24、F64、I60、I63、F64、W76、I116、L117、F123或L128或其组合处具有突变的干扰素α2b突变体。例如，干扰素α2b突变体可包括突变I116至T、N或R；L128至N、H或R；I24至P或Q；L117H；或L128T；或其组合。在一些方面，干扰素α2b突变体可包括突变I24Q、I60T、F64A、W76H、I 116R和L128N，或其子集。在一些方面，ACC包括缺乏细胞因子活性的截短的干扰素α2b分子作为CP1和CP2中的一个。例如，截短的干扰素α2b可由以下组成：干扰素α2b的151个或更少的氨基酸，例如野生型干扰素α2b序列中从N端至C端的1至151、1至150、1至149、1至148……1至10、1至9、1至8、1至7、1至6或2至151、3至151、4至151、5至150、6至149、7至148、8至147个氨基酸中的任一个；或所述干扰素的氨基酸或突变体的任何间插序列。
在某些具体实施方案中，CP1和/或CP2包含干扰素。适合在本发明的构建体中用作CP1和/或CP2的干扰素包括例如干扰素-α、干扰素-β、干扰素-ω和干扰素-τ。在一些实施方案中，当干扰素是干扰素α时，其可以是干扰素α-2a、干扰素α-2b或干扰素α-n3。干扰素α的其他实例包括干扰素α-1、干扰素α-4、干扰素α-5、干扰素α-6、干扰素α-7、干扰素α-8、干扰素α-10、干扰素α-13、干扰素α-14、干扰素α-16、干扰素α-17和干扰素α-21。在一些实施方案中，干扰素是重组的或纯化的干扰素α。在某些实施方案中，当干扰素是干扰素-β时，其选自由干扰素β-1a和干扰素β-1b组成的组。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包含干扰素α或干扰素β的IFab结构域。IFab结构域负责干扰素的细胞因子释放和抗病毒功能。示例性IFab序列在SEQ ID No:325-334中提供。
在一些实施方案中，CP1和/或CP2展现出干扰素活性并包括与选自由以下组成的组的干扰素α参考序列具有至少80％同一性、至少82％同一性、至少84％同一性、至少86％同一性、至少88％同一性、至少90％同一性、至少92％同一性、至少94％同一性、至少96％同一性、至少98％同一性、或至少99％同一性或100％同一性的氨基酸序列：SEQ ID NO:1、SEQID NO:101、SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104和SEQ ID NO:105。在某些具体实施方案中，干扰素α参考序列是SEQ ID NO:1(人类干扰素α-2b)。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包含具有选自由以下组成的组的氨基酸序列的成熟α干扰素：SEQ ID NO:1、SEQID NO:101、SEQ ID NO:102、SEQ ID NO:103、SEQ ID NO:104和SEQ ID NO:105。在某些实施方案中，CP1和/或CP2包含具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的成熟人类α干扰素。在一些上述实施方案中，CP1和CP2包含相同的氨基酸序列。
在其他实施方案中，CP1和/或CP2展现出干扰素活性并包括与选自由以下组成的组的干扰素β参考序列具有至少80％同一性、至少82％同一性、至少84％同一性、至少86％同一性、至少88％同一性、至少90％同一性、至少92％同一性、至少94％同一性、至少96％同一性、至少98％同一性、或至少99％同一性或100％同一性的氨基酸序列：SEQ ID NO:106、SEQ ID NO:107、SEQ ID NO:108和SEQ ID NO:109。在某些实施方案中，干扰素β参考序列是选自由SEQ ID NO:106和SEQ ID NO:107组成的组的人类干扰素β参考序列。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包含具有选自由以下组成的组的氨基酸序列的成熟β干扰素：SEQ IDNO:106、SEQ ID NO:107、SEQ ID NO:108和SEQ ID NO:109。在一些上述实施方案中，CP1和CP2包含相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，CP1和/或CP2展现出干扰素活性并包括与对应于SEQ ID NO:110(人类干扰素ω)的干扰素ω参考序列具有至少80％同一性、至少82％同一性、至少84％同一性、至少86％同一性、至少88％同一性、至少90％同一性、至少92％同一性、至少94％同一性、至少96％同一性、至少98％同一性、或至少99％同一性或100％同一性的氨基酸序列。在某些具体实施方案中，CP1和/或CP2包含具有SEQ ID NO:110的氨基酸序列的成熟人类ω干扰素。在一些上述实施方案中，CP1和CP2包含相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，CP1和/或CP2展现出白介素活性并包括与选自由以下组成的组的白介素参考序列具有至少80％同一性、至少82％、至少84％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％同一性或100％同一性的氨基酸序列：SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:113、SEQ ID NO:114、SEQ ID NO:115、SEQ ID NO:116、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:118、SEQ ID NO:119、SEQID NO:12、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:122、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:124、SEQ ID NO:125、SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:127、SEQ ID NO:128、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:130、SEQID NO:131、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:134、SEQ ID NO:135、SEQ ID NO:136、SEQ ID NO:137、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:139、SEQ ID NO:140、SEQ ID NO:143、SEQID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:152、SEQ ID NO:153、SEQ ID NO:154、SEQ ID NO:155、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:157、SEQ ID NO:158、SEQID NO:159和SEQ ID NO:160。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包含具有选自由以下组成的组的氨基酸序列的成熟白介素：SEQ ID NO:111、SEQ ID NO:112、SEQ ID NO:113、SEQ IDNO:114、SEQ ID NO:115、SEQ ID NO:116、SEQ ID NO:117、SEQ ID NO:118、SEQ ID NO:119、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:122、SEQ ID NO:123、SEQ ID NO:124、SEQ IDNO:125、SEQ ID NO:126、SEQ ID NO:127、SEQ ID NO:128、SEQ ID NO:129、SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:132、SEQ ID NO:133、SEQ ID NO:134、SEQ ID NO:135、SEQ IDNO:136、SEQ ID NO:137、SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:139、SEQ ID NO:140、SEQ ID NO:143、SEQ ID NO:144、SEQ ID NO:145、SEQ ID NO:146、SEQ ID NO:151、SEQ ID NO:152、SEQ IDNO:153、SEQ ID NO:154、SEQ ID NO:155、SEQ ID NO:156、SEQ ID NO:157、SEQ ID NO:158、SEQ ID NO:159和SEQ ID NO:160。在一些上述实施方案中，CP1和CP2包含相同的氨基酸序列。
在一些实施方案中，CP1和/或CP2展现出白介素活性并包括与选自由以下组成的组的白介素参考序列具有至少80％同一性、至少82％、至少84％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％同一性的氨基酸序列：SEQ ID NO:111(人类IL-1α)、SEQ ID NO:113(人类IL-1β)、SEQ ID NO:115(人类IL-1RA)、SEQ ID NO:117(人类IL-18)、SEQ ID NO:119(人类IL-2)、SEQ ID NO:121(人类IL-4)、SEQ ID NO:123(人类IL-7)、SEQ ID NO:125(人类IL-9)、SEQ ID NO:127(人类IL-13)、SEQ ID NO:129(人类IL-15)、SEQ ID NO:131(人类IL-3)、SEQ ID NO:133(人类IL-5)、SEQ ID NO:137(人类IL-6)、SEQ ID NO:139(人类IL-11)、SEQ ID NO:143(人类IL-12α)、SEQ ID NO:144(人类IL-12β)、SEQ ID NO:151(人类IL-10)、SEQ ID NO:153(人类IL-20)、SEQ ID NO:155(人类IL-14)、SEQ ID NO:157(人类IL-16)和SEQ ID NO:159(人类IL-17)。在这些实施方案中的某些中，CP1和/或CP2包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ IDNO:111(人类IL-1α)、SEQ ID NO:113(人类IL-1β)、SEQ ID NO:115(人类IL-1RA)、SEQ IDNO:117(人类IL-18)、SEQ ID NO:119(人类IL-2)、SEQ ID NO:121、SEQ ID NO:123(人类IL-7)、SEQ ID NO:125(人类IL-9)、SEQ ID NO:127(人类IL-13)、SEQ ID NO:129(人类IL-15)、SEQ ID NO:131(人类IL-3)、SEQ ID NO:133(人类IL-5)、SEQ ID NO:137(人类IL-6)、SEQID NO:139(人类IL-11)、SEQ ID NO:143(人类IL-12α)、SEQ ID NO:144(人类IL-12β)、SEQID NO:151(人类IL-10)、SEQ ID NO:153(人类IL-20)、SEQ ID NO:155(人类IL-14)、SEQ IDNO:157(人类IL-16)和SEQ ID NO:159(人类IL-17)。在一些上述实施方案中，CP1和CP2包含相同的氨基酸序列。
所使用的细胞因子蛋白的序列中的氨基酸数量可能有所不同，这取决于所使用的具体细胞因子蛋白。在一些实施方案中，CP1和/或CP2包括总计约10个氨基酸至约700个氨基酸、约10个氨基酸至约650个氨基酸、约10个氨基酸至约600个氨基酸、约10个氨基酸至约550个氨基酸、约10个氨基酸至约500个氨基酸、约10个氨基酸至约450个氨基酸、约10个氨基酸至约400个氨基酸、约10个氨基酸至约350个氨基酸、约10个氨基酸至约300个氨基酸、约10个氨基酸至约250个氨基酸、约10个氨基酸至约200个氨基酸、约10个氨基酸至约150个氨基酸、约10个氨基酸至约100个氨基酸、约10个氨基酸至约80个氨基酸、约10个氨基酸至约60个氨基酸、约10个氨基酸至约40个氨基酸、约10个氨基酸至约20个氨基酸、约20个氨基酸至约700个氨基酸、约20个氨基酸至约650个氨基酸、约20个氨基酸至约600个氨基酸、约20个氨基酸至约550个氨基酸、约20个氨基酸至约500个氨基酸、约20个氨基酸至约450个氨基酸、约20个氨基酸至约400个氨基酸、约20个氨基酸至约350个氨基酸、约20个氨基酸至约300个氨基酸、约20个氨基酸至约250个氨基酸、约20个氨基酸至约200个氨基酸、约20个氨基酸至约150个氨基酸、约20个氨基酸至约100个氨基酸、约20个氨基酸至约80个氨基酸、约20个氨基酸至约60个氨基酸、约20个氨基酸至约40个氨基酸、约40个氨基酸至约700个氨基酸、约40个氨基酸至约650个氨基酸、约40个氨基酸至约600个氨基酸、约40个氨基酸至约550个氨基酸、约40个氨基酸至约500个氨基酸、约40个氨基酸至约450个氨基酸、约40个氨基酸至约400个氨基酸、约40个氨基酸至约350个氨基酸、约40个氨基酸至约300个氨基酸、约40个氨基酸至约250个氨基酸、约40个氨基酸至约200个氨基酸、约40个氨基酸至约150个氨基酸、约40个氨基酸至约100个氨基酸、约40个氨基酸至约80个氨基酸、约40个氨基酸至约60个氨基酸、约60个氨基酸至约700个氨基酸、约60个氨基酸至约650个氨基酸、约60个氨基酸至约600个氨基酸、约60个氨基酸至约550个氨基酸、约60个氨基酸至约500个氨基酸、约60个氨基酸至约450个氨基酸、约60个氨基酸至约400个氨基酸、约60个氨基酸至约350个氨基酸、约60个氨基酸至约300个氨基酸、约60个氨基酸至约250个氨基酸、约60个氨基酸至约200个氨基酸、约60个氨基酸至约150个氨基酸、约60个氨基酸至约100个氨基酸、约60个氨基酸至约80个氨基酸、约80个氨基酸至约700个氨基酸、约80个氨基酸至约650个氨基酸、约80个氨基酸至约600个氨基酸、约80个氨基酸至约550个氨基酸、约80个氨基酸至约500个氨基酸、约80个氨基酸至约450个氨基酸、约80个氨基酸至约400个氨基酸、约80个氨基酸至约350个氨基酸、约80个氨基酸至约300个氨基酸、约80个氨基酸至约250个氨基酸、约80个氨基酸至约200个氨基酸、约80个氨基酸至约150个氨基酸、约80个氨基酸至约100个氨基酸、约100个氨基酸至约700个氨基酸、约100个氨基酸至约650个氨基酸、约100个氨基酸至约600个氨基酸、约100个氨基酸至约550个氨基酸、约100个氨基酸至约500个氨基酸、约100个氨基酸至约450个氨基酸、约100个氨基酸至约400个氨基酸、约100个氨基酸至约350个氨基酸、约100个氨基酸至约300个氨基酸、约100个氨基酸至约250个氨基酸、约100个氨基酸至约200个氨基酸、约100个氨基酸至约150个氨基酸、约150个氨基酸至约700个氨基酸、约150个氨基酸至约650个氨基酸、约150个氨基酸至约600个氨基酸、约150个氨基酸至约550个氨基酸、约150个氨基酸至约500个氨基酸、约150个氨基酸至约450个氨基酸、约150个氨基酸至约400个氨基酸、约150个氨基酸至约350个氨基酸、约150个氨基酸至约300个氨基酸、约150个氨基酸至约250个氨基酸、约150个氨基酸至约200个氨基酸、约200个氨基酸至约700个氨基酸、约200个氨基酸至约650个氨基酸、约200个氨基酸至约600个氨基酸、约200个氨基酸至约550个氨基酸、约200个氨基酸至约500个氨基酸、约200个氨基酸至约450个氨基酸、约200个氨基酸至约400个氨基酸、约200个氨基酸至约350个氨基酸、约200个氨基酸至约300个氨基酸、约200个氨基酸至约250个氨基酸、约250个氨基酸至约700个氨基酸、约250个氨基酸至约650个氨基酸、约250个氨基酸至约600个氨基酸、约250个氨基酸至约550个氨基酸、约250个氨基酸至约500个氨基酸、约250个氨基酸至约450个氨基酸、约250个氨基酸至约400个氨基酸、约250个氨基酸至约350个氨基酸、约250个氨基酸至约300个氨基酸、约300个氨基酸至约700个氨基酸、约300个氨基酸至约650个氨基酸、约300个氨基酸至约600个氨基酸、约300个氨基酸至约550个氨基酸、约300个氨基酸至约500个氨基酸、约300个氨基酸至约450个氨基酸、约300个氨基酸至约400个氨基酸、约300个氨基酸至约350个氨基酸、约350个氨基酸至约700个氨基酸、约350个氨基酸至约650个氨基酸、约350个氨基酸至约600个氨基酸、约350个氨基酸至约550个氨基酸、约350个氨基酸至约500个氨基酸、约350个氨基酸至约450个氨基酸、约350个氨基酸至约400个氨基酸、约400个氨基酸至约700个氨基酸、约400个氨基酸至约650个氨基酸、约400个氨基酸至约600个氨基酸、约400个氨基酸至约550个氨基酸、约400个氨基酸至约500个氨基酸、约400个氨基酸至约450个氨基酸、约450个氨基酸至约700个氨基酸、约450个氨基酸至约650个氨基酸、约450个氨基酸至约600个氨基酸、约450个氨基酸至约550个氨基酸、约450个氨基酸至约500个氨基酸、约500个氨基酸至约700个氨基酸、约500个氨基酸至约650个氨基酸、约500个氨基酸至约600个氨基酸、约500个氨基酸至约550个氨基酸、约550个氨基酸至约700个氨基酸、约550个氨基酸至约650个氨基酸、约550个氨基酸至约600个氨基酸、约600个氨基酸至约700个氨基酸、约600个氨基酸至约650个氨基酸或约650个氨基酸至约700个氨基酸。在一些实施方案中，CP1和/或CP2是成熟野生型人类细胞因子蛋白。
ACC的每个单体构建体可使用多种二聚化结构域中的任一个。合适的DD包括聚合物(例如合成聚合物、多肽、多核苷酸等)和小分子(分子量小于约1千道尔顿，并且有时小于约800道尔顿的非聚合部分)型部分。DD对可以是本领域已知彼此结合的任何一对部分。
例如，在一些实施方案中，DD1和DD2是选自下组的一对成员：来自人类IL-15受体α链(IL15Rα)的寿司结构域和可溶性IL-15；barnase和barns tar；PKA和AKAP；基于突变的RNA酶I片段的衔接子/对接标签分子；一对抗原结合结构域(例如一对单结构域抗体)；基于蛋白质突触蛋白、突触结合蛋白、小突触小泡蛋白和SNAP25的相互作用的可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(SNARE)模块；单结构域抗体(sdAb)和相应表位；抗原结合结构域(例如单链抗体(诸如单链可变片段(scFv))、单结构域抗体等)和相应表位；卷曲螺旋多肽结构(例如Fos-Jun卷曲螺旋结构、酸/碱卷曲螺旋线、Glu-Lys卷曲螺旋线、亮氨酸拉链结构)、小分子结合对，诸如生物素和抗生物素蛋白或链霉抗生物素蛋白、胺/醛、凝集素/碳水化合物；可彼此结合的一对聚合物，诸如一对含硫聚合物或含硫醇聚合物(例如一对Fc结构域、一对硫醇化人类血清白蛋白多肽等)；等等。
在一些实施方案中，DD1和DD2是非多肽聚合物。非多肽聚合物可彼此共价结合。在一些实例中，非多肽聚合物可以是含硫聚合物，例如含硫聚乙二醇。在此类情况下，DD1和DD2可通过一个或多个二硫键彼此共价结合。
当DD1和DD2对是一对表位和抗原结合结构域的成员时，表位可以是天然存在或非天然存在的表位。示例性非天然存在的表位包括例如非天然存在的肽，诸如poly-His肽(例如His标签等)。
在某些具体实施方案中，DD1和DD2是一对Fc结构域。如本文所用，“Fc结构域”是指免疫球蛋白的单个重链的连续氨基酸序列。一对Fc结构域缔合在一起形成免疫球蛋白的Fc区。
在一些实施方案中，所述Fc结构域对是一对人类Fc结构域(例如一对野生型人类Fc结构域)。在一些实施方案中，人类Fc结构域是人类IgG1 Fc结构域(例如野生型人类IgG1Fc结构域)、人类IgG2Fc结构域(例如野生型人类IgG2 Fc结构域)、人类IgG3 Fc结构域(例如野生型人类IgG3 Fc结构域)或人类IgG4 Fc结构域(例如野生型人类IgG4 Fc结构域)。在一些实施方案中，人类Fc结构域包含与SEQ ID NO:3具有至少80％同一性(例如至少82％、至少84％、至少85％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的序列。
在一些实施方案中，所述Fc结构域对包含Fc结构域的杵状(knob)突变体和臼状(hole)突变体。杵状和臼状突变体可彼此相互作用以促进二聚化。在一些实施方案中，杵状和臼状突变体可在两个Fc结构域之间的界面内(例如在CH3结构域中)包含一个或多个氨基酸修饰。在一个实例中，修饰包含一条抗体重链中的氨基酸取代T366W和任选氨基酸取代S354C，以及另一条抗体重链中的氨基酸取代T366S、L368A、Y407V和任选Y349C(根据Kabat编号系统的EU索引进行编号)。杵状和臼状突变体的实例包括SEQ ID NO:315和316的Fc突变体，以及美国专利号5,731,168；7,695,936；和10,683,368中所描述的那些突变体，所述专利以引用的方式整体并入本文。在一个实施方案中，二聚化结构域包含分别与SEQ IDNO:315和316具有至少80％同一性(例如至少82％、至少84％、至少85％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的序列。
在一些实施方案中，DD1和/或DD2还可以包括血清半衰期延长部分(例如结合血清蛋白的多肽，诸如免疫球蛋白(例如IgG)或血清白蛋白(例如人类血清白蛋白(HSA))。半衰期延长部分的实例包括六帽GST(谷胱甘肽S-转移酶)谷胱甘肽亲和力、钙调蛋白结合肽(CBP)、Strep-tag、纤维素结合结构域、麦芽糖结合蛋白、S-肽标签、几丁质结合标签、免疫反应性表位、表位标签、E2Tag、HA表位标签、Myc表位、FLAG表位、AU1和AU5表位、Glu-Glu表位、KT3表位、IRS表位、Btag表位、蛋白激酶-C表位和VSV表位。
在一些实施方案中，DD1和/或DD2各自包括总计约5个氨基酸至约250个氨基酸、约5个氨基酸至约200个氨基酸、约5个氨基酸至约180个氨基酸、约5个氨基酸至约160个氨基酸、约5个氨基酸至约140个氨基酸、约5个氨基酸至约120个氨基酸、约5个氨基酸至约100个氨基酸、约5个氨基酸至约80个氨基酸、约5个氨基酸至约60个氨基酸、约5个氨基酸至约40个氨基酸、约5个氨基酸至约20个氨基酸、约5个氨基酸至约10个氨基酸、约10个氨基酸至约250个氨基酸、约10个氨基酸至约200个氨基酸、约10个氨基酸至约180个氨基酸、约10个氨基酸至约160个氨基酸、约10个氨基酸至约140个氨基酸、约10个氨基酸至约120个氨基酸、约10个氨基酸至约100个氨基酸、约10个氨基酸至约80个氨基酸、约10个氨基酸至约60个氨基酸、约10个氨基酸至约40个氨基酸、约10个氨基酸至约20个氨基酸、约20个氨基酸至约250个氨基酸、约20个氨基酸至约200个氨基酸、约20个氨基酸至约180个氨基酸、约20个氨基酸至约160个氨基酸、约20个氨基酸至约140个氨基酸、约20个氨基酸至约120个氨基酸、约20个氨基酸至约100个氨基酸、约20个氨基酸至约80个氨基酸、约20个氨基酸至约60个氨基酸、约20个氨基酸至约40个氨基酸、约40个氨基酸至约250个氨基酸、约40个氨基酸至约200个氨基酸、约40个氨基酸至约180个氨基酸、约40个氨基酸至约160个氨基酸、约40个氨基酸至约140个氨基酸、约40个氨基酸至约120个氨基酸、约40个氨基酸至约100个氨基酸、约40个氨基酸至约80个氨基酸、约40个氨基酸至约60个氨基酸、约60个氨基酸至约250个氨基酸、约60个氨基酸至约200个氨基酸、约60个氨基酸至约180个氨基酸、约60个氨基酸至约160个氨基酸、约60个氨基酸至约140个氨基酸、约60个氨基酸至约120个氨基酸、约60个氨基酸至约100个氨基酸、约60个氨基酸至约80个氨基酸、约80个氨基酸至约250个氨基酸、约80个氨基酸至约200个氨基酸、约80个氨基酸至约180个氨基酸、约80个氨基酸至约160个氨基酸、约80个氨基酸至约140个氨基酸、约80个氨基酸至约120个氨基酸、约80个氨基酸至约100个氨基酸、约100个氨基酸至约250个氨基酸、约100个氨基酸至约200个氨基酸、约100个氨基酸至约180个氨基酸、约100个氨基酸至约160个氨基酸、约100个氨基酸至约140个氨基酸、约100个氨基酸至约120个氨基酸、约120个氨基酸至约250个氨基酸、约120个氨基酸至约200个氨基酸、约120个氨基酸至约180个氨基酸、约120个氨基酸至约160个氨基酸、约120个氨基酸至约140个氨基酸、约140个氨基酸至约250个氨基酸、约140个氨基酸至约200个氨基酸、约140个氨基酸至约180个氨基酸、约140个氨基酸至约160个氨基酸、约160个氨基酸至约250个氨基酸、约160个氨基酸至约200个氨基酸、约160个氨基酸至约180个氨基酸、约180个氨基酸至约250个氨基酸、约180个氨基酸至约200个氨基酸或约200个氨基酸至约250个氨基酸。在一些实施方案中，DD1和DD2各自是包含铰链区的一部分的Fc结构域，所述铰链区包括两个半胱氨酸残基、CH2结构域和CH3结构域。在一些实施方案中，DD1和DD2各自是其N端是铰链区中在N方向至C方向上读取的第一个半胱氨酸残基(例如人类IgG1或IgG4的半胱氨酸226，使用EU编号)的Fc结构域。
在一些方面，直接或间接(例如通过接头)位于CP与DD组分之间的是包含蛋白酶底物的可裂解部分。在一些实施方案中，CM1和CM2可各自独立地包含选自由以下组成的组的蛋白酶的底物：ADAM8、ADAM9、ADAM10、ADAM12、ADAM15、ADAM17/TACE、ADEMDEC1、ADAMTS1、ADAMTS4、ADAMTS5、BACE、肾素、组织蛋白酶D、组织蛋白酶E、胱天蛋白酶1、胱天蛋白酶2、胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶5、胱天蛋白酶6、胱天蛋白酶7、胱天蛋白酶8、胱天蛋白酶9、胱天蛋白酶10、胱天蛋白酶14、组织蛋白酶A、组织蛋白酶B、组织蛋白酶C、组织蛋白酶G、组织蛋白酶K、组织蛋白酶L、组织蛋白酶S、组织蛋白酶V/L2、组织蛋白酶X/Z/P、糜酶、Cruzipain、DESC1、DPP-4、FAP、天冬酰胺内肽酶、Otuba in-2、弹性蛋白酶、FVI Ia、FiXA、FXa、FXIa、FXI Ia、颗粒酶B、胍基苯甲酸酯酶、肝素、HtrA1、人类中性粒细胞弹性蛋白酶、KLK4、KLK5、KLK6、KLK7、KLK8、KLK10、KLK11、KLK13、KLK14、乳铁蛋白、maraps in、matriptase-2、穿膜肽酶、MT-SP1/matriptase、脑啡肽酶、NS3/4A、PACE4、纤溶酶、PSMA、PSA、BMP-1、MMP1、MMP2、MMP3、MMP7、MMP8、MMP9、MMP10、MMP11、MMP12、MMP13、MMP14、MMP15、MMP16、MMP17、MMP19、MMP20、MMP23、MMP24、MMP26、MMP27、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4、tPA、凝血酶、类胰蛋白酶和uPA。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，裂解本文所描述的CM中的任一种的蛋白酶可以是ADAM8、ADAM9、ADAM10、ADAM12、ADAM15、ADAM17/TACE、ADAMDEC1、ADAMTS1、ADAMTS4、ADAMTS5、BACE、肾素、组织蛋白酶D、组织蛋白酶E、胱天蛋白酶1、胱天蛋白酶2、胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶5、胱天蛋白酶6、胱天蛋白酶7、胱天蛋白酶8、胱天蛋白酶9、胱天蛋白酶10、胱天蛋白酶14、组织蛋白酶B、组织蛋白酶C、组织蛋白酶K、组织蛋白酶L、组织蛋白酶S、组织蛋白酶V/L2、组织蛋白酶X/Z/P、Cruzipain、天冬酰胺内肽酶、Otubain-2、KLK4、KLK5、KLK6、KLK7、KLK8、KLK10、KLK11、KLK13、KLK14、穿膜肽酶、脑啡肽酶、PSMA、BMP-1、MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-19、MMP-20、MMP-23、MMP-24、MMP-26、MMP-27、活化蛋白C、组织蛋白酶A、组织蛋白酶G、糜酶、FVI Ia、FIXa、FXa、FXIa、FXI Ia、弹性蛋白酶、颗粒酶B、胍基苯甲酸酯酶、HtrA1、人类中性粒细胞裂解酶、乳铁蛋白、maraps in、NS3/4A、PACE4、纤溶酶、PSA、tPA、凝血酶、类胰蛋白酶、uPA、DESC1、DPP-4、FAP、肝素、Matriptase-2、MT-SP1/Matriptase、TMPRSS2、TMPRSS3和TMPRSS4。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，蛋白酶选自由下组：uPA、天冬酰胺内肽酶、MT-SP1、ADAM17、BMP-1、TMPRSS3、TMPRSS4、MMP-2、MMP-9、MMP-12、MMP-13和MMP-14。
已报道在许多癌症中，具有已知底物的蛋白酶水平升高。参见例如La Roca等人,British J.Cancer 90(7):1414-1421,2004。适用于本文所用的CM1和/或CM2组分中的底物包括在癌细胞和组织中更普遍存在的那些。因此，在某些实施方案中，CM1和/或CM2各自独立地包含在与癌症相关的患病组织中更普遍存在的蛋白酶的底物。在一些实施方案中，癌症选自由下组：胃癌、乳腺癌、骨肉瘤和食管癌。在一些实施方案中，癌症是乳腺癌。在一些实施方案中，癌症是HER2阳性癌症。在一些实施方案中，癌症是卡波西肉瘤、毛细胞白血病、慢性骨髓性白血病(CML)、滤泡性淋巴瘤、肾细胞癌(RCC)、黑色素瘤、神经母细胞瘤、基底细胞癌、皮肤T细胞淋巴瘤、鼻咽腺癌、乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、BCG耐药非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)、子宫内膜癌、胰腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、结直肠癌、食管癌、胆囊癌、胶质瘤、头颈癌、子宫癌、宫颈癌或睾丸癌等。在一些上述实施方案中，CM组分包含在肿瘤组织中更普遍的蛋白酶的底物。
在一些实施方案中，CM1和/或CM2各自独立地包括选自由SEQ ID NO:5至SEQ IDNO:100组成的组的序列，以及其C端和N端截短变体。
在一些实施方案中，CM包括选自由下组的序列：ISSGLLSGRSDNH(SEQ ID NO:28)、LSGRSDDH(SEQ ID NO:33)、ISSGLLSGRSDQH(SEQ ID NO:54)和ISSGLLSGRSDNI(SEQ ID NO:68)。
在某些实施方案中，CM1和/或CM2包括选自由下组的序列：APRSALAHGLF(SEQ IDNO:263)、AQNLLGMY(SEQ ID NO:264)、LSGRSDNHGGAVGLLAPP(SEQ ID NO:265)、VHMPLGFLGPGGLSGRSDNH(SEQ ID NO:266)、LSGRSDNHGGVHMPLGFLGP(SEQ ID NO:267)、LSGRSDNHGGSGGSISSGLLSS(SEQ ID NO:268)、ISSGLLSSGGSGGSLSGRSGNH(SEQ ID NO:269)、LSGRSDNHGGSGGSQNQALRMA(SEQ ID NO:270)、QNQALRMAGGSGGSLSGRSDNH(SEQ ID NO:271)、LSGRSGNHGGSGGSQNQALRMA(SEQ ID NO:272)、QNQALRMAGGSGGSLSGRSGNH(SEQ ID NO:273)、ISSGLLSGRSGNH(SEQ ID NO:274)，以及其C端和N端截短变体。CM的实例还包括在美国专利申请公开号2016/0289324、2019/0284283和公开号WO 2010/081173、WO 2015/048329、WO2015/116933、WO 2016/118629和WO 2020/118109中描述的那些，所述公开以引用的方式整体并入本文。
适用于CM1和/或CM2中的上述氨基酸序列的截短变体是保留相应蛋白酶识别位点的任何变体。这些变体包括C端和/或N端截短变体，所述C端和/或N端截短变体包含保留蛋白酶识别位点的上述氨基酸序列的至少3个连续氨基酸，或上述氨基酸序列的至少4个、或至少5个、或至少6个、或至少7个氨基酸。在某些实施方案中，上述氨基酸序列的截短变体是这样的氨基酸序列，其对应于任何上述氨基酸序列中的任一种，但C端和/或N端截短1至约10个氨基酸、1至约9个氨基酸、1至约8个氨基酸、1至约7个氨基酸、1至约6个氨基酸、1至约5个氨基酸、1至约4个氨基酸或1至约3个氨基酸，并且：(1)具有至少三个氨基酸残基；并且(2)保留蛋白酶识别位点。在一些前述实施方案中，截短的CM是N端截短的CM。在一些实施方案中，截短的CM是C端截短的CM。在一些实施方案中，截短的C是C端和N端截短的CM。
在本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种的一些实施方案中，CM1和/或CM2包含总计约3个氨基酸至约25个氨基酸。在一些实施方案中，CM1和/或CM2包含总计约3个氨基酸至约25个氨基酸、约3个氨基酸至约20个氨基酸、约3个氨基酸至约15个氨基酸、约3个氨基酸至约10个氨基酸、约3个氨基酸至约5个氨基酸、约5个氨基酸至约25个氨基酸、约5个氨基酸至约20个氨基酸、约5个氨基酸至约15个氨基酸、约5个氨基酸至约10个氨基酸、约10个氨基酸至约25个氨基酸、约10个氨基酸至约20个氨基酸、约10个氨基酸至约15个氨基酸、约15个氨基酸至约25个氨基酸、约15个氨基酸至约20个氨基酸或约20个氨基酸至约25个氨基酸。
在一些实施方案中，ACC可包含多个包含不同蛋白酶的底物的CM。在一些实施方案中，CM1和CM2包含不同蛋白酶的底物。在一些实施方案中，CM1和CM2包含相同蛋白酶的底物。
第一单体构建体和第二单体构建体可包含一种或多种包括一个或多个接头等的额外组分。在一些实施方案中，第一单体可包括设置在CP1与CM1之间的接头。在一些实施方案中，CP1和CM1在第一单体中彼此直接邻接。在一些实施方案中，第一单体包含设置在CM1与DD1之间的接头。在一些实施方案中，接头具有1个氨基酸至约15个氨基酸的总长度。在一些实施方案中，CM1和DD1在第一单体中彼此直接邻接。在一些实施方案中，CM和设置在CP1与DD1之间的任何接头具有3至15个氨基酸、或3至10个氨基酸、或3至7个氨基酸的组合总长度。
在一些实施方案中，第二单体包含设置在CP2与CM2之间的接头。在一些实施方案中，CP2和CM2在第二单体中彼此直接邻接。在一些实施方案中，第二单体包含设置在CM2与DD2之间的接头。在一些实施方案中，接头具有1个氨基酸至约15个氨基酸的总长度。在一些实施方案中，接头包含序列GGGS(SEQ ID NO:2)。在一些实施方案中，CM2(例如本文所描述的可裂解部分中的任一个)和DD2(例如本文所描述的DD中的任一个)在第二单体中彼此直接邻接。在一些实施方案中，CM和设置在CP2与DD2之间的任何接头具有3至15个氨基酸、或3至10个氨基酸、或3至7个氨基酸的组合总长度。
在一些实施方案中，第一单体和/或第二单体可包括总计约50个氨基酸至约800个氨基酸、约50个氨基酸至约750个氨基酸、约50个氨基酸至约700个氨基酸、约50个氨基酸至约650个氨基酸、约50个氨基酸至约600个氨基酸、约50个氨基酸至约550个氨基酸、约50个氨基酸至约500个氨基酸、约50个氨基酸至约450个氨基酸、约50个氨基酸至约400个氨基酸、约50个氨基酸至约350个氨基酸、约50个氨基酸至约300个氨基酸、约50个氨基酸至约250个氨基酸、约50个氨基酸至约200个氨基酸、约50个氨基酸至约150个氨基酸、约50个氨基酸至约100个氨基酸、约100个氨基酸至约800个氨基酸、约100个氨基酸至约750个氨基酸、约100个氨基酸至约700个氨基酸、约100个氨基酸至约650个氨基酸、约100个氨基酸至约600个氨基酸、约100个氨基酸至约550个氨基酸、约100个氨基酸至约500个氨基酸、约100个氨基酸至约450个氨基酸、约100个氨基酸至约400个氨基酸、约100个氨基酸至约350个氨基酸、约100个氨基酸至约300个氨基酸、约100个氨基酸至约250个氨基酸、约100个氨基酸至约200个氨基酸、约100个氨基酸至约150个氨基酸、约150个氨基酸至约800个氨基酸、约150个氨基酸至约750个氨基酸、约150个氨基酸至约700个氨基酸、约150个氨基酸至约650个氨基酸、约150个氨基酸至约600个氨基酸、约150个氨基酸至约550个氨基酸、约150个氨基酸至约500个氨基酸、约150个氨基酸至约450个氨基酸、约150个氨基酸至约400个氨基酸、约150个氨基酸至约350个氨基酸、约150个氨基酸至约300个氨基酸、约150个氨基酸至约250个氨基酸、约150个氨基酸至约200个氨基酸、约200个氨基酸至约800个氨基酸、约200个氨基酸至约750个氨基酸、约200个氨基酸至约700个氨基酸、约200个氨基酸至约650个氨基酸、约200个氨基酸至约600个氨基酸、约200个氨基酸至约550个氨基酸、约200个氨基酸至约500个氨基酸、约200个氨基酸至约450个氨基酸、约200个氨基酸至约400个氨基酸、约200个氨基酸至约350个氨基酸、约200个氨基酸至约300个氨基酸、约200个氨基酸至约250个氨基酸、约250个氨基酸至约800个氨基酸、约250个氨基酸至约750个氨基酸、约250个氨基酸至约700个氨基酸、约250个氨基酸至约650个氨基酸、约250个氨基酸至约600个氨基酸、约250个氨基酸至约550个氨基酸、约250个氨基酸至约500个氨基酸、约250个氨基酸至约450个氨基酸、约250个氨基酸至约400个氨基酸、约250个氨基酸至约350个氨基酸、约250个氨基酸至约300个氨基酸、约300个氨基酸至约800个氨基酸、约300个氨基酸至约750个氨基酸、约300个氨基酸至约700个氨基酸、约300个氨基酸至约650个氨基酸、约300个氨基酸至约600个氨基酸、约300个氨基酸至约550个氨基酸、约300个氨基酸至约500个氨基酸、约300个氨基酸至约450个氨基酸、约300个氨基酸至约400个氨基酸、约300个氨基酸至约350个氨基酸、约350个氨基酸至约800个氨基酸、约350个氨基酸至约750个氨基酸、约350个氨基酸至约700个氨基酸、约350个氨基酸至约650个氨基酸、约350个氨基酸至约600个氨基酸、约350个氨基酸至约550个氨基酸、约350个氨基酸至约500个氨基酸、约350个氨基酸至约450个氨基酸、约350个氨基酸至约400个氨基酸、约400个氨基酸至约800个氨基酸、约400个氨基酸至约750个氨基酸、约400个氨基酸至约700个氨基酸、约400个氨基酸至约650个氨基酸、约400个氨基酸至约600个氨基酸、约400个氨基酸至约550个氨基酸、约400个氨基酸至约500个氨基酸、约400个氨基酸至约450个氨基酸、约450个氨基酸至约800个氨基酸、约450个氨基酸至约750个氨基酸、约450个氨基酸至约700个氨基酸、约450个氨基酸至约650个氨基酸、约450个氨基酸至约600个氨基酸、约450个氨基酸至约550个氨基酸、约450个氨基酸至约500个氨基酸、约500个氨基酸至约800个氨基酸、约500个氨基酸至约750个氨基酸、约500个氨基酸至约700个氨基酸、约500个氨基酸至约650个氨基酸、约500个氨基酸至约600个氨基酸、约500个氨基酸至约550个氨基酸、约550个氨基酸至约800个氨基酸、约550个氨基酸至约750个氨基酸、约550个氨基酸至约700个氨基酸、约550个氨基酸至约650个氨基酸、约550个氨基酸至约600个氨基酸、约600个氨基酸至约800个氨基酸、约600个氨基酸至约750个氨基酸、约600个氨基酸至约700个氨基酸、约600个氨基酸至约650个氨基酸、约650个氨基酸至约800个氨基酸、约650个氨基酸至约750个氨基酸、约650个氨基酸至约700个氨基酸、约700个氨基酸至约800个氨基酸、约700个氨基酸至约750个氨基酸或约750个氨基酸至约800个氨基酸。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，可将一个或多个接头(例如柔性接头)引入可活化细胞因子构建体中，以在结构域之间、部分之间、部分与结构域之间的一或多个接合处，或在接头有益的任何其他接合处提供柔性。在一些实施方案中，在ACC作为构象受限的构建体提供的情况下，可插入柔性接头以促进未裂解的可活化细胞因子构建体中结构的形成和维持。本文所描述的接头中的任一个可提供所需的柔性以促进对靶标(例如细胞因子的受体)的结合的抑制，或促进CM被蛋白酶裂解。在一些实施方案中，接头包括在全部或部分柔性的ACC中，使得接头可包括柔性接头以及赋予较少柔性结构的一个或多个部分以提供所需ACC。一些接头可包括半胱氨酸残基，其可能形成二硫键并降低构建体的柔性。在一些实施方案中，减少接头或连接区的长度会降低ACC中成熟细胞因子蛋白的活性(参见例如图8A至图8B和图10A至图10B)。在大多数情况下，接头长度是通过在N方向至C方向上计数从与前一个组分的C端氨基酸相邻的接头的N端至与下一个组分的N端氨基酸邻接的接头的C端的氨基酸的数量来确定(即接头长度不包括前一个组分的C端氨基酸或后一个组分的N端氨基酸)。在其中在包含Fc结构域的DD的N端使用接头的实施方案中，接头长度是通过计数从与前一个组分的C端氨基酸邻接的接头的N端至与Fc铰链区的第一个半胱氨酸邻接的接头的C端的氨基酸的数量来确定(即接头长度不包括前一个组分的C端氨基酸或Fc铰链区的第一个半胱氨酸)。
从本公开和图25可以明显看出，本公开的ACC包括在CP与二聚结构域之间相互作用的近点之间的一段氨基酸。所述段氨基酸可称为连接区(LR)。如本文所用，术语“连接区”或“LR”是指在细胞因子的C端与N端邻接二聚化结构域之间相互作用的近点的氨基酸残基之间的一段氨基酸残基(即连接区不包括细胞因子的C端氨基酸或DD的N端氨基酸，所述DD与相应第二单体的DD形成相互作用的近点)。例如，当DD是一对Fc结构域时，连接区是细胞因子的C端与参与Fc的二硫键联的第一个N端半胱氨酸残基之间的一段氨基酸残基(例如IgG1或IgG4 Fc结构域的半胱氨酸226，根据EU编号)。当二聚化结构域不是肽时，则连接区是从细胞因子的C端至最后一个氨基酸的一段氨基酸残基。例如，当DD是生物素-链霉抗生物素蛋白对时，含生物素单体的连接区是细胞因子的C端与生物素分子之间的一段氨基酸残基，而含链霉抗生物素蛋白单体的连接区是细胞因子的C端与链霉抗生物素蛋白分子之间的一段氨基酸残基。在一些方面，连接区可包含不超过24、18、14、12、11、10、9、8、7、6、5或4个氨基酸，例如5至14、7至12或8至11个氨基酸。
在一些实施方案中，额外氨基酸序列可位于ACC中的任一者的任何结构域的N端或C端。实例包括但不限于靶向部分(例如靶组织中存在的细胞受体的配体)和延长血清半衰期部分(例如结合血清蛋白的多肽，诸如免疫球蛋白(例如IgG)或血清白蛋白(例如人类血清白蛋白(HSA))。
在本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种的一些实施方案中，接头可包括总计约1个氨基酸至约25个氨基酸(例如约1个氨基酸至约24个氨基酸、约1个氨基酸至约22个氨基酸、约1个氨基酸至约20个氨基酸、约1个氨基酸至约18个氨基酸、约1个氨基酸至约16个氨基酸、约1个氨基酸至约15个氨基酸、约1个氨基酸至约14个氨基酸、约1个氨基酸至约12个氨基酸、约1个氨基酸至约10个氨基酸、约1个氨基酸至约8个氨基酸、约1个氨基酸至约6个氨基酸、约1个氨基酸至约5个氨基酸、约1个氨基酸至约4个氨基酸、约1个氨基酸至约3个氨基酸、约1个氨基酸至约2个氨基酸、约2个氨基酸至约25个氨基酸、约2个氨基酸至约24个氨基酸、约2个氨基酸至约22个氨基酸、约2个氨基酸至约20个氨基酸、约2个氨基酸至约18个氨基酸、约2个氨基酸至约16个氨基酸、约2个氨基酸至约15个氨基酸、约2个氨基酸至约14个氨基酸、约2个氨基酸至约12个氨基酸、约2个氨基酸至约10个氨基酸、约2个氨基酸至约8个氨基酸、约2个氨基酸至约6个氨基酸、约2个氨基酸至约5个氨基酸、约2个氨基酸至约4个氨基酸、约2个氨基酸至约3个氨基酸、约4个氨基酸至约25个氨基酸、约4个氨基酸至约24个氨基酸、约4个氨基酸至约22个氨基酸、约4个氨基酸至约20个氨基酸、约4个氨基酸至约18个氨基酸、约4个氨基酸至约16个氨基酸、约4个氨基酸至约15个氨基酸、约4个氨基酸至约14个氨基酸、约4个氨基酸至约12个氨基酸、约4个氨基酸至约10个氨基酸、约4个氨基酸至约8个氨基酸、约4个氨基酸至约6个氨基酸、约4个氨基酸至约5个氨基酸、约5个氨基酸至约25个氨基酸、约5个氨基酸至约24个氨基酸、约5个氨基酸至约22个氨基酸、约5个氨基酸至约20个氨基酸、约5个氨基酸至约18个氨基酸、约5个氨基酸至约16个氨基酸、约5个氨基酸至约15个氨基酸、约5个氨基酸至约14个氨基酸、约5个氨基酸至约12个氨基酸、约5个氨基酸至约10个氨基酸、约5个氨基酸至约8个氨基酸、约5个氨基酸至约6个氨基酸、约6个氨基酸至约25个氨基酸、约6个氨基酸至约24个氨基酸、约6个氨基酸至约22个氨基酸、约6个氨基酸至约20个氨基酸、约6个氨基酸至约18个氨基酸、约6个氨基酸至约16个氨基酸、约6个氨基酸至约15个氨基酸、约6个氨基酸至约14个氨基酸、约6个氨基酸至约12个氨基酸、约6个氨基酸至约10个氨基酸、约6个氨基酸至约8个氨基酸、约8个氨基酸至约25个氨基酸、约8个氨基酸至约24个氨基酸、约8个氨基酸至约22个氨基酸、约8个氨基酸至约20个氨基酸、约8个氨基酸至约18个氨基酸、约8个氨基酸至约16个氨基酸、约8个氨基酸至约15个氨基酸、约8个氨基酸至约14个氨基酸、约8个氨基酸至约12个氨基酸、约8个氨基酸至约10个氨基酸、约10个氨基酸至约25个氨基酸、约10个氨基酸至约24个氨基酸、约10个氨基酸至约22个氨基酸、约10个氨基酸至约20个氨基酸、约10个氨基酸至约18个氨基酸、约10个氨基酸至约16个氨基酸、约10个氨基酸至约15个氨基酸、约10个氨基酸至约14个氨基酸、约10个氨基酸至约12个氨基酸、约12个氨基酸至约25个氨基酸、约12个氨基酸至约24个氨基酸、约12个氨基酸至约22个氨基酸、约12个氨基酸至约20个氨基酸、约12个氨基酸至约18个氨基酸、约12个氨基酸至约16个氨基酸、约12个氨基酸至约15个氨基酸、约12个氨基酸至约14个氨基酸、约14个氨基酸至约25个氨基酸、约14个氨基酸至约24个氨基酸、约14个氨基酸至约22个氨基酸、约14个氨基酸至约20个氨基酸、约14个氨基酸至约18个氨基酸、约14个氨基酸至约16个氨基酸、约14个氨基酸至约15个氨基酸、约15个氨基酸至约25个氨基酸、约15个氨基酸至约24个氨基酸、约15个氨基酸至约22个氨基酸、约15个氨基酸至约20个氨基酸、约15个氨基酸至约18个氨基酸、约15个氨基酸至约16个氨基酸、约16个氨基酸至约25个氨基酸、约16个氨基酸至约24个氨基酸、约16个氨基酸至约22个氨基酸、约16个氨基酸至约20个氨基酸、约16个氨基酸至约18个氨基酸、约18个氨基酸至约25个氨基酸、约18个氨基酸至约24个氨基酸、约18个氨基酸至约22个氨基酸、约18个氨基酸至约20个氨基酸、约20个氨基酸至约25个氨基酸、约20个氨基酸至约24个氨基酸、约20个氨基酸至约22个氨基酸、约22个氨基酸至约25个氨基酸、约22个氨基酸至约24个氨基酸或约24个氨基酸至约25个氨基酸)。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，接头包括总计约1个氨基酸、约2个氨基酸、约3个氨基酸、约4个氨基酸、约5个氨基酸、约6个氨基酸、约7个氨基酸、约8个氨基酸、约9个氨基酸、约10个氨基酸、约11个氨基酸、约12个氨基酸、约13个氨基酸、约14个氨基酸、约15个氨基酸、约16个氨基酸、约17个氨基酸、约18个氨基酸、约19个氨基酸、约20个氨基酸、约21个氨基酸、约22个氨基酸、约23个氨基酸、约24个氨基酸或约25个氨基酸。
出人意料地，本发明人发现在CP与DD之间不包含任何接头的ACC展现出相对于野生型成熟细胞因子，最明显的细胞因子活性降低。参见图8A和图10A。此外，CP与DD之间不存在接头的构型仍然允许有效裂解位于CP与DD之间的CM。参见图12至图14。因此，在一些实施方案中，ACC在CP与DD之间不包含任何接头，并且CP与DD之间的CM包含不超过10、9、8、7、6、5、4或3个氨基酸。在一些实施方案中，LR中的氨基酸总数包含不超过25个氨基酸，例如不超过25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4或3个氨基酸，或3至10个氨基酸或5至15个氨基酸，或7至12个氨基酸，或从由3至25个氨基酸涵盖的范围内选择的任何范围或指定数目个氨基酸。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，接头可富含甘氨酸(Gly或G)残基。在一些实施方案中，接头可富含丝氨酸(Ser或S)残基。在一些实施方案中，接头可富含甘氨酸和丝氨酸残基。在一些实施方案中，接头具有一个或多个甘氨酸-丝氨酸残基对(GS)(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个或更多个GS对)。在一些实施方案中，接头具有一个或多个Gly-Gly-Gly-Ser(GGGS)序列(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个或更多个GGGS序列)。在一些实施方案中，接头具有一个或多个Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(GGGGS)序列(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个或更多个GGGGS序列)。在一些实施方案中，接头具有一个或多个Gly-Gly-Ser-Gly(GGSG)序列(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个或更多个GGSG序列)。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，接头包括以下中的任一种或一种或多种的组合：GSSGGSGGSGG(SEQ ID NO:210)、GGGS(SEQ ID NO:2)、GGGSGGGS(SEQ IDNO:211)、GGGSGGGSGGGS(SEQ ID NO:212)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:213)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:214)、GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:215)、GGGGS(SEQID NO:216)、GS、GGGGSGS(SEQ ID NO:217)、GGGGSGGGGSGGGGSGS(SEQ ID NO:218)、GGSLDPKGGGGS(SEQ ID NO:219)、PKSCDKTHTCPPCPAPELLG(SEQ ID NO:220)、SKYGPPCPPCPAPEFLG(SEQ ID NO:221)、GKSSGSGSESKS(SEQ ID NO:222)、GSTSGSGKSSEGKG(SEQ ID NO:223)、GSTSGSGKSSEGSGSTKG(SEQ ID NO:224)和GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQ IDNO:225)。
接头的非限制性实例可包括与GGGS(SEQ ID NO:2)、GSSGGSGGSGG(SEQ ID NO:210)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:213)、GGGGSGS(SEQ ID NO:217)、GGGGSGGGGSGGGGSGS(SEQ ID NO:218)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:214)、GGSLDPKGGGGS(SEQ ID NO:215)和GSTSGSGKPGSSEGST(SEQ ID NO:226)具有至少70％同一性(例如至少72％、至少74％、至少75％、至少76％、至少78％、至少80％、至少82％、至少84％、至少85％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的序列。
在一些实施方案中，接头包括选自下组的序列：GGSLDPKGGGGS(SEQ ID NO:219)、GGGGSGGGGSGGGGSGS(SEQ ID NO:218)、GGGGSGS(SEQ ID NO:217)、GS、(GS)n、(GGS)n、(GSGGS)n(SEQ ID NO:227)and(GGGS)n(SEQ ID NO:228)、GGSG(SEQ ID NO:229)、GGSGG(SEQ ID NO:230)、GSGSG(SEQ ID NO:231)、GSGGG(SEQ ID NO:232)、GGGSG(SEQ ID NO:233)、GSSSG(SEQ ID NO:234)、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:213)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:214)、GSTSGSGKPGSSEGST(SEQ ID NO:226)、(GGGGS)n(SEQ ID NO:216)，其中n是至少一的整数。在一些实施方案中，接头包括选自由以下组成的组的序列：GGSLDPKGGGGS(SEQ ID NO:219)、GGGGSGGGGSGGGGSGS(SEQ ID NO:218)、GGGGSGS(SEQ ID NO:217)和GS。在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，接头包括选自下组的序列：GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:213)、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:214)和GSTSGSGKPGSSEGST(SEQ ID NO:226)。在本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种的一些实施方案中，接头包括选自下组的序列：GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:213)或GGGGS(SEQ ID NO:216)。在一些实施方案中，接头包含序列GGGS(SEQ ID NO:2)。
在一些实施方案中，ACC可包括一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个接头序列(例如，与本文所描述的或本领域已知的示例性接头序列中的任一种相同或不同的接头序列)。在一些实施方案中，接头包含磺基-SIAB、SMPB和磺基-SMPB，其中接头与伯胺巯基反应。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方式中，ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低。在一些实施方案中，对照水平可以是重组CP1和/或CP2(例如可商购获得的重组CP1和/或CP2、重组野生型CP1和/或CP2等)的活性水平。在一些实施方案中，对照水平可以是裂解(活化)形式的ACC的活性水平。在某些实施方案中，对照水平可以是聚乙二醇化CP1和/或CP2的活性水平。
在一些实施方案中，至少一种活性是CP1和/或CP2对其同源受体的结合亲和力(KD)，如使用(例如在25℃的磷酸盐缓冲盐水中进行的)表面等离子体共振所测定的。在某些实施方案中，至少一种活性是淋巴瘤细胞的增殖水平。在其他实施方案中，至少一种活性是淋巴瘤细胞中JAK/STAT/ISGF3通路活化的水平。在一些实施方案中，至少一种活性是淋巴瘤细胞中SEAP产生的水平。在其他实施方案中，CP1和/或CP2的至少一种活性是使用例如RNAseq方法的细胞因子刺激的基因诱导的水平(参见例如Zimmerer等人,Clin.CancerRes.14(18):5900-5906,2008；Hi lkens等人,J.Immunol.171:5255-5263,2003)。
在一些实施方案中，ACC的特征在于与至少一种CP1和/或CP2活性的对照水平相比，至少一种CP1和/或CP2活性降低至少2倍。在一些实施方案中，ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低至少5倍。在一些实施方案中，ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低至少10倍。在一些实施方案中，ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低至少20倍。在一些实施方案中，ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低至少30倍、40倍、50倍、60倍、70倍、80倍、90倍、100倍、500倍或1000倍。在一些实施方案中，ACC的特征在于与CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平相比，CP1和/或CP2的至少一种活性降低至少1倍至20倍、降低200倍至500倍、降低300倍至500倍、降低400倍至500倍、降低500倍至600倍、降低600倍至700倍、降低150倍至1000倍、降低100倍至1500倍、降低200倍至1500倍、降低300倍至1500倍、降低400倍至1500倍、降低500倍至1500倍、降低1000倍至1500倍、降低100倍至1000倍、降低200倍至1000倍、降低300倍至1000倍、降低400倍至1000倍、降低500倍至1000倍、降低100倍至500倍、降低20倍至50倍、降低30倍至50倍、降低40倍至50倍、降低100倍至400倍、降低200倍至400倍或降低300倍至400倍、降低100倍至300倍、降低200倍至300倍或降低100倍至200倍。
在一些实施方案中，CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平是在蛋白酶裂解CM1和CM2(“裂解产物”)之后从ACC中释放的CP1和/或CP2的活性。在一些实施方案中，CP1和/或CP2的至少一种活性的对照水平是相应野生型成熟细胞因子(例如重组野生型成熟细胞因子)的活性。
在一些实施方案中，ACC与蛋白酶一起孵育产生活化的细胞因子产物，其中活化的细胞因子产物的CP1和/或CP2的一种或多种活性大于完整ACC的CP1和/或CP2的一种或多种活性。在一些实施方案中，活化的细胞因子产物的CP1和/或CP2的一种或多种活性是ACC的CP1和/或CP2的一种或多种活性的至少1倍。在一些实施方案中，活化的细胞因子产物的CP1和/或CP2的一种或多种活性是ACC的CP1和/或CP2的一种或多种活性的至少2倍。在一些实施方案中，活化的细胞因子产物的CP1和/或CP2的一种或多种活性是ACC的CP1和/或CP2的一种或多种活性的至少5倍。在一些实施方案中，活化的细胞因子产物的CP1和/或CP2的一种或多种活性是ACC的CP1和/或CP2的一种或多种活性的至少10倍。在一些实施方案中，活化的细胞因子产物的CP1和/或CP2的一种或多种活性是ACC的CP1和/或CP2的一种或多种活性的至少20倍。在一些实施方案中，活化的细胞因子产物的CP1和/或CP2的一种或多种活性是ACC的CP1和/或CP2的一种或多种活性的至少1倍至20倍、2倍至20倍、3倍至20倍、4倍至20倍、5倍至20倍、10倍至20倍、15倍至20倍、1倍至15倍、2倍至15倍、3倍至15倍、4倍至15倍、5倍至15倍、10倍至15倍、1倍至10倍、2倍至10倍、3倍至10倍、4倍至10倍、5倍至10倍、1倍至5倍、2倍至5倍、3倍至5倍、4倍至5倍、1倍至4倍、2倍至4倍、3倍至4倍、1倍至3倍、2倍至3倍或1倍至2倍。
在一些实施方案中，ACC可包括与SEQ ID NO:309或311具有至少80％(例如至少82％、至少84％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少96％、至少98％、至少99％或100％)同一性的序列。在一些实施方案中，ACC可由包括与SEQ ID NO:310或312具有至少80％(例如至少82％、至少84％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少96％、至少98％、至少99％或100％)同一性的序列的核酸编码。在一些方面，ACC可包括这样的序列，但不包括那些序列的信号序列。没有特别限制信号序列。信号序列的一些非限制性实例包括例如SEQ ID NO:309的残基1-20和其他序列中的相应残基和核苷酸，或被来自其他物种或细胞系的信号序列取代。信号序列的其他实例包括MRAWIFFLLCLAGRALA(SEQ ID NO:343)和MALTFALLVALLVLSCKSSCSVG(SEQ ID NO:344)。
这些可活化细胞因子构建体的各种示例性方面在下文描述并且可以在本文提供的方法中以任何组合使用而不受限制。下文描述了可活化细胞因子构建体和制备可活化细胞因子构建体的方法的示例性方面。
在一些实施方案中，选择CM以用于与特定蛋白酶一起使用。蛋白酶可以是由肿瘤细胞产生的蛋白酶(例如肿瘤细胞可以比健康组织表达更多量的蛋白酶)。在一些实施方案中，CM是至少一种选自下组的蛋白酶的底物：ADAM 17、BMP-1、半胱氨酸蛋白酶(诸如组织蛋白酶)、HtrA1、天冬酰胺内肽酶、matriptase(MT-SP1)、基质金属蛋白酶(MMP)、中性粒细胞弹性蛋白酶、TMPRSS(诸如TMPRSS3或TMPRSS4)、凝血酶和u型纤溶酶原活化因子(uPA，也称为尿激酶)。
在一些实施方案中，CM为至少一种基质金属蛋白酶(MMP)的底物。MMP的实例包括MMP1、MMP2、MMP3、MMP7、MMP8、MMP9、MMP10、MMP11、MMP12、MMP13、MMP14、MMP15、MMP16、MMP17、MMP19、MMP20、MMP23、MMP24、MMP26和MMP27。在一些实施方案中，CM为MMP9、MMP14、MMP1、MMP3、MMP13、MMP17、MMP11和MMP19的底物。在一些实施方案中，CM是MMP7的底物。在一些实施方案中，CM是MMP9的底物。在一些实施方案中，CM是MMP14的底物。在一些实施方案中，CM是两种或更多种MMP的底物。在一些实施方案中，CM是至少MMP9和MMP14的底物。在一些实施方案中，CM包括同一种MMP的两种或更多种底物。在一些实施方案中，CM包括至少两种或更多种MMP9底物。在一些实施方案中，CM包括至少两种或更多种MMP14底物。
在一些实施方案中，CM是MMP的底物并且包括序列ISSGLLSS(SEQ ID NO:19)；QNQALRMA(SEQ ID NO:16)；AQNLLGMV(SEQ ID NO:15)；STFPFGMF(SEQ ID NO:18)；PVGYTSSL(SEQ ID NO:74)；DWLYWPGI(SEQ ID NO:75)；MIAPVAYR(SEQ ID NO:42)；RPSPMWAY(SEQ IDNO:43)；WATPRPMR(SEQ ID NO:44)；FRLLDWQW(SEQ ID NO:45)；LKAAPRWA(SEQ ID NO:76)；GPSHLVLT(SEQ ID NO:77)；LPGGLSPW(SEQ ID NO:78)；MGLFSEAG(SEQ ID NO:79)；SPLPLRVP(SEQ ID NO:80)；RMHLRSLG(SEQ ID NO:81)；LAAPLGLL(SEQ ID NO:17)；AVGLLAPP(SEQ IDNO:14)；LLAPSHRA(SEQ ID NO:82)；PAGLWLDP(SEQ ID NO:20)；和/或ISSGLSS(SEQ ID NO:73)。
在一些实施方案中，CM是凝血酶的底物。在一些实施方案中，CM是凝血酶的底物并且包括序列GPRSFGL(SEQ ID NO:83)或GPRSFG(SEQ ID NO:84)。
在一些实施方案中，CM包括选自下组的氨基酸序列：NTLSGRSENHSG(SEQ ID NO:9)；NTLSGRSGNHGS(SEQ ID NO:10)；TSTSGRSANPRG(SEQ ID NO:11)；TSGRSANP(SEQ ID NO:12)；VAGRSMRP(SEQ ID NO:21)；VVPEGRRS(SEQ ID NO:22)；ILPRSPAF(SEQ ID NO:23)；MVLGRSLL(SEQ ID NO:24)；QGRAITFI(SEQ ID NO:25)；SPRSIMLA(SEQ ID NO:26)；和SMLRSMPL(SEQ ID NO:27)。
在一些实施方案中，CM是嗜中性粒细胞弹性蛋白酶的底物。在一些实施方案中，CM是丝氨酸蛋白酶的底物。在一些实施方案中，CM是uPA的底物。在一些实施方案中，CM是天冬酰胺内肽酶的底物。在一些实施方案中，CM是matr iptase的底物。在一些实施方案中，CM是半胱氨酸蛋白酶的底物。在一些实施方案中，CM是半胱氨酸蛋白酶(诸如组织蛋白酶)的底物。
在一些实施方案中，CM包括序列ISSGLLSGRSDNH(SEQ ID NO:28)；ISSGLLSSGGSGGSLSGRSDNH(SEQ ID NO:30)；AVGLLAPPGGTSTSGRSANPRG(SEQ ID NO:275)；TSTSGRSANPRGGGAVGLLAPP(SEQ ID NO:276)；VHMPLGFLGPGGTSTSGRSANPRG(SEQ ID NO:277)；TSTSGRSANPRGGGVHMPLGFLGP(SEQ ID NO:278)；AVGLLAPPGGLSGRSDNH(SEQ ID NO:29)；LSGRSDNHGGAVGLLAPP(SEQ ID NO:70)；VHMPLGFLGPGGLSGRSDNH(SEQ ID NO:266)；LSGRSDNHGGVHMPLGFLGP(SEQ ID NO:267)；LSGRSDNHGGSGGSISSGLLSS(SEQ ID NO:268)；LSGRSGNHGGSGGSISSGLLSS(SEQ ID NO:279)；ISSGLLSSGGSGGSLSGRSGNH(SEQ ID NO:269)；LSGRSDNHGGSGGSQNQALRMA(SEQ ID NO:270)；QNQALRMAGGSGGSLSGRSDNH(SEQ ID NO:271)；LSGRSGNHGGSGGSQNQALRMA(SEQ ID NO:272)；QNQALRMAGGSGGSLSGRSGNH(SEQ ID NO:273)和/或ISSGLLSGRSGNH(SEQ ID NO:274)。
在一些实施方案中，CM1和/或CM2包含选自由以下组成的组的序列：SEQ ID NO:5至SEQ ID NO:100。在一些实施方案中，CM包含选自下组的序列：ISSGLLSGRSDNH(SEQ IDNO:28)、LSGRSDDH(SEQ ID NO:33)、ISSGLLSGRSDQH(SEQ ID NO:54)、SGRSDNI(SEQ ID NO:100)和ISSGLLSGRSDNI(SEQ ID NO:68)。
在一些方面，ACC包括选自SEQ ID No:1和101-209的CP1、选自SEQ ID No:5-100和263-308的CM1和DD1，它们与选自SEQ ID No:1和101-209的CP2、选自SEQ ID No:5-100和263-308的CM2和DD2二聚化。在一些方面，ACC可包括在CP1与CM1之间和/或在CM1与DD1之间的选自SEQ ID No:2和210-234、245或250的接头，和在CP2与CM2之间和/或在CM2与DD2之间的选自SEQ ID No:2和210-234、245或250的接头。在一些实施方案中，ACC包括具有与SEQID NO:3或SEQ ID NO:4具有至少80％同一性(例如至少82％、至少84％、至少85％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的氨基酸序列的DD1和/或DD2。在一些实施方案中，ACC包括具有与SEQ ID NO:315或SEQ ID NO:316具有至少80％同一性(例如至少82％、至少84％、至少85％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的氨基酸序列的DD1。在一些实施方案中，ACC包括具有与SEQ ID NO:315或SEQ ID NO:316具有至少80％同一性(例如至少82％、至少84％、至少85％、至少86％、至少88％、至少90％、至少92％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性)的氨基酸序列的DD2。
与剂缀合
本公开还提供了用于在本文所描述的ACC中的任一种中包括额外元件的方法和材料，包括例如促进向感兴趣的细胞或组织递送的靶向部分、剂(例如治疗剂、抗肿瘤剂)、毒素或其片段。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，ACC可以与细胞毒性剂(包括但不限于毒素(例如细菌、真菌、植物或动物来源的酶活性毒素或其片段))或放射性同位素缀合。在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，可活化细胞因子构建体可以与细胞毒性剂(包括但不限于毒素(例如细菌、真菌、植物或动物来源的酶活性毒素或其片段))或放射性同位素缀合。
可与本文所描述的ACC中的任一种缀合的非限制性示例性细胞毒性剂包括：尾海兔素(dolastatin)和其衍生物(例如澳瑞他汀(auristatin)E、AFP、单甲基澳瑞他汀D(MMAD)、单甲基澳瑞他汀F(MMAF)、单甲基澳瑞他汀E(MMAE)、去甲基澳瑞他汀E(DMAE)、澳瑞他汀F、去甲基澳瑞他汀F(DMAF)、尾海兔素16(DmJ)、尾海兔素16(Dpv)、澳瑞他汀衍生物(例如澳瑞他汀酪胺、澳瑞他汀喹诺酮)、美登素(maytansinoid)(例如DM-1、DM-4)、美登素衍生物、倍癌霉素(duocarmycin)、α-鹅膏蕈碱、涡轮他汀(turbostatin)、非那他汀(phenstatin)、羟非那他汀、海绵抑制素(spongistatin)5、海绵抑制素7、哈司他汀(halistatin)1、哈司他汀2、哈司他汀3、卤代康司他汀(halocomstatin)、吡咯苯并咪唑(PBI)、西布罗他汀(cibrostatin)6、多沙利式(doxaliform)、西马多丁(cemadotin)类似物(CemCH2-SH)、假单胞菌毒素A(PES8)变体、假单胞菌毒素A(ZZ-PE38)变体、ZJ-101、蒽环素、多柔比星(doxorubicin)、柔红霉素(daunorubicin)、苔藓虫素(bryostatin)、喜树碱(camptothecin)、7-取代的喜树碱、10,11-二氟亚甲基二氧喜树碱、考布他汀(combretastatin)、脱溴海兔毒素(debromoaplysiatoxin)、KahaMide-F、圆皮海绵内酯(discodermolide)和海鞘素(Ecteinascidin)。
可与本文所描述的ACC中的任一种缀合的非限制性示例性酶活性毒素包括：白喉毒素(diphtheria toxin)、来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的外毒素A链、蓖麻毒(ricin)A链、相思豆毒素(abrin)A链、蒴莲根毒素(modeccin)A链、α-八叠球菌素(alpha-sarcin)、油桐(Aleuriies fordii)蛋白、香石竹毒(dianthin)蛋白、美洲商陆(Phytoiaca Americana)蛋白(例如PAPI、PAPII和PAP-8)、苦瓜(momordica charantia)抑制剂、麻风树毒蛋白(curcin)、巴豆毒素(crotin)、肥皂草(sapaonaria officinalis)抑制剂、白树毒素(gelonin)、米托菌素(mitogellin)、局限曲霉素(restrictocin)、酚霉素(phenomycin)、伊诺霉素(enomycin)和单端孢霉烯族毒素(tricothecene)。
可与本文所描述的ACC中的任一种缀合的非限制性示例性抗肿瘤剂包括：阿霉素(adriamycin)、盐酸正定霉素(cerubidine)、博来霉素(bleomycin)、爱克兰(alkeran)、长春花碱(velban)、硫酸长春新碱(oncovin)、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、噻替派(thiotepa)、比生群(bisantrene)、米托蒽醌(novantrone)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、丙卡比嗪(procarabizine)和阿糖胞苷。
可与本文所描述的ACC中的任一种缀合的非限制性示例性抗病毒剂包括：阿昔洛韦、阿糖腺苷(vira A)和金刚烷胺(symmetrel)。
可与本文所描述的ACC中的任一种缀合的非限制性示例性抗真菌剂包括：制霉菌素(nystatin)。
可与本文所描述的ACC中的任一种缀合的非限制性示例性可缀合检测试剂包括：荧光素和其衍生物，异硫氰酸荧光素(FITC)。
可与本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种缀合的非限制性示例性抗细菌剂包括：氨基糖苷、链霉素、新霉素、卡那霉素、阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素。
可与本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种缀合的非限制性示例性3β,16β,17α-三羟基胆甾-5-烯-22-酮16-O-(2-O-4-甲氧基苯甲酰-β-D-木吡喃糖)-(1-->3)-(2-O-乙酰基-α-L-阿拉伯吡喃糖苷)(OSW-1)包括：O6-苄基鸟嘌呤的s-硝基苄氧羰基衍生物、拓扑异构酶抑制剂、哈米特林(hemiasterlin)、三尖杉碱(cephalotaxine)、高三尖杉酯碱(homoharringionine)、吡咯并苯二氮
Figure GDA0004000354850000621
二聚体(PBD)、官能化吡咯并苯二氮
Figure GDA0004000354850000622
卡奇霉素(calcicheamicin)、鬼臼毒素(podophyiitoxin)、紫杉烷和长春碱。
可与本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种缀合的非限制性示例性放射性药物包括：123I、89Zr、125I、131I、99mTc、201T1、62Cu、18F、68Ga、13N、15O、38K、82Rb、111In、133Xe、11C和99mTc(锝)。
可与本文所描述的ACC中的任一种缀合的非限制性示例性重金属包括：钡、金和铂。
可与本文所描述的ACC中的任一种缀合的非限制性示例性抗支原体包括：泰乐菌素(tylosine)、大观霉素(spectinomycin)、链霉素B、氨苄青霉素、磺胺、多粘菌素(polymyxin)和氯霉素(chloramphenicol)。
本领域普通技术人员将认识到，多种可能的部分可与本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种缀合。缀合可包括将结合两个分子的任何化学反应，只要ACC和其他部分保持它们各自的活性即可。缀合可包括许多化学机制，例如共价结合、亲和力结合、嵌插、配位结合和络合。在一些实施方案中，优选的结合是共价结合。可通过现有侧链的直接缩合或通过掺入外部桥接分子来实现共价结合。许多二价或多价连接剂可用于缀合本文所描述的可活化细胞因子构建体中的任一种。例如，缀合物可包括有机化合物，诸如硫酯、碳二亚胺、琥珀酰亚胺酯、戊二醛、重氮苯和六亚甲基二胺。在一些实施方案中，可活化细胞因子构建体可包括或以其他方式引入一个或多个非天然氨基酸残基以提供合适的缀合位点。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，剂和/或缀合物通过二硫键(例如，半胱氨酸分子上的二硫键)连接到抗原结合结构域。由于许多癌症会自然释放高水平的还原剂谷胱甘肽，因此存在于癌组织微环境中的谷胱甘肽可以还原二硫键，且随后释放递送位点处的剂和/或缀合物。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，当缀合物在靶部位(例如患病组织(例如癌组织))内存在补体的情况下与其靶标结合时，将缀合物和/或剂连接到接头的酰胺键或酯键被裂解，导致活性形式的缀合物和/或剂释放。当施用至受试者时，这些缀合物和/或剂将完成缀合物和/或剂在靶部位(例如患病组织(例如癌组织))处的递送和释放。这些缀合物和/或剂对于本文所描述的缀合物和/或剂中的任一种的体内递送特别有效。
在一些实施方案中，接头不可被补体系统的酶裂解。例如，由于补体活化最终会裂解靶细胞，因此缀合物和/或剂在不存在补体活化的情况下释放。在此类实施方案中，缀合物和/或剂将被递送至靶细胞(例如激素、酶、皮质类固醇、神经递质或基因)。此外，接头对血清蛋白酶的裂解有轻微的敏感性，并且缀合物和/或剂在靶部位处缓慢释放。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，设计缀合物和/或剂，使得缀合物和/或剂被递送至靶部位(例如患病组织(例如癌组织))，但不释放缀合物和/或剂。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，将缀合物和/或剂直接或通过不可裂解的接头连接至抗原结合结构域。示例性不可裂解的接头包括氨基酸(例如D-氨基酸)、肽或可被修饰以包含随后可通过本文所描述的方法用于连接至抗原结合结构域的官能团的其他有机化合物。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，ACC包括剂的至少一个缀合点。在一些实施方案中，所有可能的缀合点都可用于与剂缀合。在一些实施方案中，一个或多个缀合点包括但不限于涉及二硫键的硫原子、涉及链间二硫键的硫原子、涉及链间硫键但不涉及链内二硫键的硫原子和/或半胱氨酸或其他含有硫原子的氨基酸残基的硫原子。在此类情况下，残基可天然存在于蛋白质构建体结构中，或使用包括但不限于定点诱变、化学转化或错误掺入非天然氨基酸的方法而掺入蛋白质构建体中。
本公开还提供了用于制备用于缀合的ACC的方法和材料。在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，ACC被修饰以包括一个或多个链间二硫键。例如，ACC中的二硫键可以在暴露于还原剂(诸如但不限于TCEP、DTT或β-巯基乙醇)后经历还原。在一些情况下，二硫键的还原只是部分的。如本文所用，术语部分还原是指ACC与还原剂接触并且所有可能的缀合位点的一部分经历还原(例如不是所有二硫键都被还原)的情况。在一些实施方案中，如果少于99％(例如少于98％、97％、96％、95％、90％、85％、80％、75％、70％、65％、60％、55％、50％、45％、40％、35％、30％、25％、20％、15％、10％或少于5％)的所有可能的缀合位点被还原，那么与还原剂接触后，可活化细胞因子构建体被部分还原。在一些实施方案中，将具有一个或多个链间二硫键还原的ACC缀合至与游离硫醇具有反应性的药物。
本公开还提供用于将治疗剂缀合至ACC上的特定位置的方法和材料。在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，修饰ACC使得治疗剂可在ACC上的特定位置处缀合至ACC。例如，可以以促进与ACC缀合的方式部分还原ACC。在此类情况下，ACC的部分还原以ACC中的缀合位点不被还原的方式发生。在一些实施方案中，选择ACC上的缀合位点以促进剂在蛋白质构建体上的特定位置处的缀合。在用还原剂处理后，各种因素可影响ACC的“还原水平”。例如但不限于，可能需要优化还原剂与ACC的比率、孵育时间、孵育温度和/或还原反应溶液的pH，以便用本文所描述的方法和材料实现ACC的部分还原。可使用任何适当的因素组合(例如还原剂与ACC的比率、用还原剂孵育的时间和温度和/或还原剂的pH)以实现ACC的部分还原(例如可能的缀合位点的普遍还原或特定缀合位点的还原)。
还原剂与ACC的有效比率可以是以允许与剂缀合的方式至少部分地还原ACC(例如可能的缀合位点的普遍还原或特定缀合位点的还原)的任何比率。在一些实施方案中，还原剂与ACC的比率在约20:1至1:1、约10:1至1:1、约9:1至1:1、约8:1至1:1、约7:1至1:1、约6:1至1:1、约5:1至1:1、约4:1至1:1、约3:1至1:1、约2:1至1:1、约20:1至1:1.5、约10:1至1:1.5、约9:1至1:1.5、约8:1至1:1.5、约7:1至1:1.5、约6:1至1:1.5、约5:1至1:1.5、约4:1至1:1.5、约3:1至1:1.5、约2:1至1:1.5、约1.5:1至1:1.5或约1:1至1:1.5范围内。在一些实施方案中，比率在约5:1至1:1范围内。在一些实施方案中，比率在约5:1至1.5:1范围内。在一些实施方案中，比率在约4:1至1:1范围内。在一些实施方案中，比率在约4:1至1.5:1范围内。在一些实施方案中，比率在约8:1至约1:1范围内。在一些实施方案中，比率在约2.5:1至1:1范围内。
用于用还原剂处理ACC的有效孵育时间和温度可以是以允许剂与ACC缀合的方式至少部分地还原ACC(例如可能的缀合位点的普遍还原或特定缀合位点的还原)的任何时间和温度。在一些实施方案中，用于处理ACC的温育时间和温度将在37℃下约1小时至37℃约12小时的范围内(或其中的任何子范围)。
用于用还原剂处理ACC的还原反应的有效pH可以是以允许ACC与剂缀合的方式至少部分地还原ACC(例如可能的缀合位点的普遍还原或特定缀合位点的还原)的任何pH。
当部分还原的ACC与含有硫醇的剂接触时，剂可以与ACC中的链间硫醇缀合。可以使用含硫醇试剂(例如半胱氨酸或N-乙酰半胱氨酸)以包括硫醇的方式修饰剂。例如，在与还原剂(例如TEPC)一起以所需的还原剂与ACC的比率在约37℃下孵育约1小时后，ACC可以被部分还原。还原剂与ACC的有效比率可以是以允许缀合含硫醇剂的方式部分还原至少两个位于ACC中的链间二硫键(例如可能的缀合位点的普遍还原或特定缀合位点的还原)的任何比率。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，ACC被还原剂以避免还原任何链内二硫键的方式还原。在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，ACC被还原剂以避免还原任何链内二硫键并且还原至少一个链间二硫键的方式还原。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，ACC还可以包括与ACC缀合的剂。在一些实施方案中，缀合的剂是治疗剂。
在一些实施方案中，剂(例如与可活化细胞因子构建体缀合的剂)是可检测的部分，诸如标记或其他标志物。例如，剂是或包括放射性标记的氨基酸、可通过标志抗生物素蛋白(例如，含有可通过光学或量热法检测的荧光标志物或酶活性的链霉抗生物素蛋白)检测的一个或多个生物素部分、一种或多种放射性同位素或放射性核素、一种或多种荧光标记、一种或多种酶标记和/或一种或多种化学发光剂。在一些实施方案中，可检测的部分通过间隔分子连接。
在一些实施方案中，剂(例如与可活化细胞因子构建体缀合的细胞毒性剂)使用碳水化合物部分、巯基、氨基或羧酸酯基团连接至ACC。
在本文所描述的与剂缀合的ACC中的任一种的一些实施方案中，剂(例如与可活化的细胞因子构建体缀合的细胞毒性剂)通过接头和/或CM(也称为可裂解序列)与ACC缀合。在一些实施方案中，剂(例如与可活化细胞因子构建体缀合的细胞毒性剂)与ACC中的半胱氨酸或赖氨酸缀合。在一些实施方案中，剂(例如与可活化细胞因子构建体缀合的细胞毒性剂)与ACC的另一个残基缀合，诸如本文公开的那些残基。在一些实施方案中，接头是含硫醇接头。在一些实施方案中，接头为不可裂解的接头。表1提供了可裂解部分和接头的一些非限制性实例。
表1.
Figure GDA0004000354850000661
Figure GDA0004000354850000671
本领域普通技术人员将认识到，可将多种可能的部分与本公开的ACC偶合。(参见例如“Conjugate Vaccines”,Contributions to Microbiology and Immunology,J.M.Cruse和R.E.Lewis,Jr(编),Carger Press,New York,(1989)，其全部内容以引用的方式并入本文)。一般而言，剂(例如细胞毒性剂)与ACC的有效缀合可通过将剂与ACC结合同时还允许剂和ACC保留官能度的任何化学反应来实现。
在与剂缀合的ACC中的任一种的一些实施方案中，可以使用多种双官能蛋白偶合剂将剂与ACC缀合，所述双官能蛋白偶合剂包括但不限于3-(2-吡啶基二巯基)丙酸N-琥珀酰亚胺酯(SPDP)、亚氨基硫烷(iminothiolane，IT)、亚氨酸酯的双官能衍生物(例如己二酸二甲酯HCL)、活性酯(例如辛二酸二琥珀酰亚胺酯)、醛(例如戊二醛)、双叠氮基化合物(例如双(对叠氮基苯甲酰基)己二胺)、双重氮衍生物(例如双(对重氮苯甲酰基)-乙二胺)、二异氰酸酯(例如甲苯2,6-二异氰酸酯)和双活性氟化合物(例如1,5-二氟-2,4-二硝基苯)。例如，蓖麻毒免疫毒素可如Vitetta等人,Science 238:1098(1987)中所描述来制备。在一些实施方案中，碳-14标记的1-异硫氰酰苄基-3-甲基二亚乙基三胺五乙酸(MX-DTPA)螯合剂可用于将放射性核苷酸缀合至ACC。(参见例如WO94/11026)。
在文献中描述了合适的接头和CM。参见例如Ramakrishnan,S.等人,CancerRes.44:201-208(1984)，其描述MBS(M-马来酰亚胺基苯甲酰基-N-羟基琥珀酰亚胺酯)的使用。还参见美国专利号5,030,719，其描述借助于寡肽接头与ACC偶合的卤代乙酰肼衍生物的使用。在一些实施方案中，合适的接头包括：(i)EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基-丙基)碳二亚胺盐酸盐；(ii)SMPT(4-琥珀酰亚胺基氧基羰基-α-甲基-α-(2-吡啶基-二硫代)-甲苯(Pierce Chem.Co.,目录(21558G)；(iii)SPDP(琥珀酰亚胺-6[3-(2-吡啶基二硫代)丙酰胺基]己酸酯(Pierce Chem.Co.,目录号21651G)；(iv)磺基-LC-SPDP(磺基琥珀酰亚胺基6[3-(2-吡啶基二硫代)-丙酰胺基]己酸酯(Pierce Chem.Co.目录号2165-G)；和(v)缀合至EDC的磺基-NHS(N-羟基磺基-琥珀酰亚胺：Pierce Chem.Co.,目录号24510)。额外接头包括但不限于SMCC、磺基-SMCC、SPDB或磺基-SPDB。
上文所描述的CM和接头含有具有不同属性的组分，因此导致具有不同物理化学性质的缀合物。例如，羧酸烷基酯的磺基-NHS酯比羧酸芳基酯的磺基-NHS酯稳定。含有NHS酯的接头比磺基NHS酯的溶解度低。此外，接头SMPT含有空间位阻二硫键，并且可形成具有增加的稳定性的缀合物。一般来说，二硫键联的稳定性低于其他键联，因为二硫键联在体外被裂解，从而导致可用的缀合物较少。磺基-NHS尤其可以提高碳二亚胺偶合的稳定性。与单独的碳二亚胺偶合反应相比，当与磺基-NHS结合使用时，碳二亚胺偶合(诸如EDC)形成对水解的抵抗力更大的酯。
在ACC中的任一种的一些实施方案中，可以使用包括在ACC的氨基酸序列中的修饰的氨基酸序列将剂缀合至ACC。通过在ACC的氨基酸序列内的特定位置处插入可缀合的氨基酸，可以设计蛋白质构建体以实现缀合剂(例如细胞毒性剂)的受控放置和/或剂量。例如，ACC可以被修饰以在第一单体、第二单体、第三单体和/或第四单体上的提供反应性硫醇基团并且不会对蛋白质折叠和/或组装产生负面影响并且不改变抗原结合特性的位置处包括半胱氨酸残基。在一些实施方案中，ACC可以被修饰以在ACC的氨基酸序列内包括一个或多个非天然氨基酸残基以提供合适的缀合位点。在一些实施方案中，ACC可以被修饰以在ACC的氨基酸序列中包括可酶促活化的肽序列。
核酸
本文提供了包括编码本文所描述的ACC中的任一种的第一单体构建体(或第一单体构建体的蛋白质部分)(例如本文所描述的第一单体构建体中的任一种)和第二单体构建体(或第二单体构建体的蛋白质部分)(例如本文所描述的第二单体构建体中的任一种)的序列的核酸。在一些实施方案中，一对核酸一起编码第一单体构建体(或第一单体构建体的蛋白质部分)和第二单体构建体(或第二单体构建体的蛋白质部分)。在一些实施方案中，编码第一单体构建体(或第一单体构建体的蛋白质部分)的核酸序列与编码第二单体构建体(或第二单体构建体的蛋白质部分)的核酸序列具有至少70％同一性(例如至少72％同一性、至少74％同一性、至少76％同一性、至少78％同一性、至少80％同一性、至少82％同一性、至少84％同一性、至少86％同一性、至少88％同一性、至少90％同一性、至少92％同一性、至少94％同一性、至少96％同一性、至少98％同一性、至少99％同一性或100％同一性)。
在一些实施方案中，编码第一单体构建体的蛋白质部分的核酸编码包含CP1和CM1部分的多肽。在一些实施方案中，编码第二单体的蛋白质部分的核酸编码包含CP2和CM2部分的多肽。在一些实施方案中，一对核酸一起编码第一单体构建体的蛋白质部分和第二单体构建体的蛋白质部分，其中蛋白质部分然后分别与DD1和DD2部分缀合(在随后的缀合步骤中)。
在一些实施方案中，编码第一单体构建体的核酸编码包含DD1部分的多肽。在一些实施方案中，编码第二单体构建体的核酸编码包含DD2部分的多肽。
载体
本文提供了包括本文所描述的核酸中的任一种的载体和载体组。本领域技术人员将能够选择合适的载体或载体组(例如表达载体)以制备本文所描述的ACC中的任一种，并使用载体或载体组来表达本文所描述的ACC中的任一种。例如，在选择载体或载体组时，必须考虑细胞，因为载体可能需要能够整合到细胞的染色体中和/或在其中复制。下文还描述了可用于产生ACC的示例性载体。
如本文所用，术语“载体”是指能够在细胞(例如本文所描述的细胞中的任一种)中诱导重组蛋白(例如第一或第二单体)表达的多核苷酸。“载体”能够将核酸和其片段递送到宿主细胞中，并且包括调节序列(例如启动子、增强子、poly(A)信号)。可以将外源多核苷酸插入到表达载体中以进行表达。术语“载体”还包括人工染色体、质粒、逆转录病毒和杆状病毒载体。
用于构建包括本文所描述的核酸中的任一种并且适合于转化细胞(例如哺乳动物细胞)的合适的载体的方法在本领域中是众所周知的。例如参见Sambrook等人编,“Molecular Cloning:A Laboratory Manual”,第2版,Cold Spring Harbor Press,1989和Ausubel等人编,“Current Protocols in Molecular Biology”,Current Protocols,1993。
载体的非限制性实例包括质粒、转座子、粘粒和病毒载体(例如任何腺病毒载体(例如pSV或pCMV载体)、腺相关病毒(AAV)载体、慢病毒载体和逆转录病毒载体)，以及任何
Figure GDA0004000354850000701
载体。例如，载体可以包括足够的顺式作用表达元件；其他表达元件可以由宿主哺乳动物细胞或在体外表达系统中提供。熟练的从业者将能够选择合适的载体和哺乳动物细胞来制备本文所描述的ACC中的任一种。
在本文所描述的ACC中的任一种的一些实施方案中，可以使用重组DNA技术以及在真核或原核物种中的表达来以生物合成方式制备ACC。
在一些实施方案中，载体包括编码本文所描述的ACC中的任一种的第一单体和第二单体的核酸。在一些实施方案中，载体是表达载体。
在一些实施方案中，一对载体一起包括一对核酸，所述核酸一起编码本文所描述的ACC中的任一种的第一单体和第二单体。在一些实施方案中，所述载体对是一对表达载体。
细胞
本文还提供了包括本文所描述的载体或载体组中的任一种的宿主细胞，所述载体或载体组包括本文所描述的核酸中的任一种。
本文所描述的ACC中的任一种可由任何细胞(例如哺乳动物细胞)产生。在一些实施方案中，宿主细胞是哺乳动物细胞(例如人类细胞)、啮齿动物细胞(例如小鼠细胞、大鼠细胞、仓鼠细胞或豚鼠细胞)或非人类灵长类动物细胞。
将核酸和载体(例如本文所描述的载体中的任一种或载体组中的任一种)引入细胞的方法是本领域已知的。可用于将核酸引入细胞的方法的非限制性实例包括：脂质转染、转染、磷酸钙转染、阳离子聚合物转染、病毒转导(例如腺病毒转导、慢病毒转导)、纳米颗粒转染和电穿孔。
在一些实施方案中，引入步骤包括将载体(例如本文所描述的载体或载体组中的任一种)引入细胞，所述载体包括编码构成本文所描述的ACC中的任一种的单体的核酸。
在本文所描述的方法中的任一种的一些实施方案中，细胞可以是真核细胞。如本文所用，术语“真核细胞”是指具有独特的膜结合核的细胞。此类细胞可包括例如哺乳动物(例如啮齿动物、非类人灵长类动物或人类)、昆虫、真菌或植物细胞。在一些实施方案中，真核细胞是酵母细胞，诸如酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。在一些实施方案中，真核细胞是高等真核细胞，诸如哺乳动物、禽类、植物或昆虫细胞。哺乳动物细胞的非限制性实例包括中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和人类胚肾细胞(例如HEK293细胞)。
在一些实施方案中，细胞含有编码本文所描述的ACC中的任一种的第一单体和第二单体的核酸。在一些实施方案中，细胞含有一起编码本文所描述的ACC中的任一种的第一单体和第二单体的核酸对。
产生可活化细胞因子构建体的方法
本文提供了产生本文所描述的ACC中的任一种的方法，所述方法包括：(a)在液体培养基中在足以产生ACC的条件下培养本文所描述的重组宿主细胞中的任一种；以及(b)从宿主细胞和/或液体培养基回收ACC。
培养细胞的方法是本领域众所周知的。细胞可以在有利于细胞增殖、细胞分化和细胞生长的条件下体外维持。例如，细胞可以通过使细胞(例如本文所描述的细胞中的任一种)与细胞培养基接触来培养，所述细胞培养基包含足以支持细胞活力和生长的必需生长因子和补充剂。
在本文所描述的方法中的任一种的一些实施方案中，所述方法还包括分离回收的ACC。分离方法的非限制性实例包括：硫酸铵沉淀、聚乙二醇沉淀、尺寸排阻色谱、配体亲和色谱、离子交换色谱(例如阴离子或阳离子)和疏水相互作用色谱。
在一些实施方案中，细胞可以产生包含CP1和CM1的第一单体构建体的蛋白质部分，以及包含CP2和CM2的第二单体构建体的蛋白质部分，然后蛋白质部分随后分别与DD1和DD2部分缀合。
本文所描述的组合物和方法可涉及使用允许二硫键在二聚化结构域之间形成的非还原或部分还原条件以形成和维持ACC的二聚化。
在本文所描述的方法中的任一种的一些实施方案中，所述方法还包括将分离的ACC配制成药物组合物。各种制剂在本领域中是已知的并且在本文中进行了描述。本文所描述的分离的ACC中的任一种可以被配制用于任何施用途径(例如静脉内、瘤内、皮下、皮内、口服(例如吸入)、经皮(例如局部)、经粘膜或肌肉内)。
本文还提供了通过本文所描述的方法中的任一种产生的ACC。还提供了包含通过本文所描述的方法中的任一种产生的ACC中的任一种的组合物(例如药物组合物)。本文还提供了包括至少一剂本文所描述的组合物(例如药物组合物)中的任一种的药盒。
治疗方法
本文提供了治疗受试者的疾病(例如癌症(例如本文所描述的癌症中的任一种))的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的本文所描述的ACC中的任一种。
如本文所用，术语“受试者”是指任何哺乳动物。在一些实施方案中，受试者是猫科动物(例如猫)、犬科动物(例如狗)、马科动物(例如马)、兔子、猪、啮齿动物(例如小鼠、大鼠、仓鼠或豚鼠)、非人类灵长类动物(例如猿猴(例如猴子(例如狒狒、狨猴)或猿(例如黑猩猩、大猩猩、猩猩或长臂猿))或人类。在一些实施方案中，受试者是人类。
在一些实施方案中，受试者先前已被鉴别或诊断为患有疾病(例如癌症(例如本文所描述的癌症中的任一种))。
如本文所用，术语“治疗”包括降低受试者(例如本文所描述的受试者中的任一个)的疾病(例如癌症(例如本文所描述的癌症中的任一种))的一种或多种(例如，1、2、3、4或5种)症状或病征的严重性、频率或数量。在疾病是癌症的一些实施方案中，治疗导致减少患有癌症的受试者的癌症生长、抑制其癌症进展、抑制其癌症转移或降低其癌症复发的风险。
在本文所描述的方法中的任一种的一些实施方案中，疾病是癌症。本文还提供了治疗有需要的受试者(例如本文所描述或本领域已知的示例性受试者中的任一个)的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的本文所描述的ACC中的任一种或本文所描述的组合物(例如药物组合物)中的任一种。
在这些方法的一些实施方案中，受试者已被鉴别或诊断为患有癌症。癌症的非限制性实例包括：实体瘤、血液肿瘤、肉瘤、骨肉瘤、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、黑色素瘤、横纹肌肉瘤、尤因肉瘤(Ewing sarcoma)、骨肉瘤、B细胞肿瘤、多发性骨髓瘤、淋巴瘤(例如B细胞淋巴瘤、B细胞非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma)、霍奇金淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤)、白血病(例如毛细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性淋巴细胞白血病(ALL))、骨髓增生异常综合征(MDS)、卡波西肉瘤、视网膜母细胞瘤、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、肾细胞癌、胃和食管癌、胰腺癌、前列腺癌、脑癌、结肠癌、骨癌、肺癌、乳腺癌、结直肠癌、卵巢癌、鼻咽腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、鳞状细胞头颈癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、肝癌和肝细胞癌。在一些实施方案中，癌症是淋巴瘤。在一些实施方案中，淋巴瘤是伯基特淋巴瘤。在一些方面，受试者已被鉴别或诊断为患有家族性癌症综合征，诸如利-弗劳梅尼综合征(Li Fraumeni Syndrome)、家族性乳腺癌-卵巢癌(BRCA1或BRAC2突变)综合征等。所公开的方法还可用于治疗非实体癌。示例性实体瘤包括各种器官系统的恶性肿瘤(例如肉瘤、腺癌和癌)，诸如肺、乳腺、淋巴、胃肠(例如结肠)和泌尿生殖(例如肾、尿路上皮或睾丸肿瘤)道、咽、前列腺和卵巢的那些。示例性腺癌包括结肠直肠癌、肾细胞癌、肝癌、肺的非小细胞癌和小肠癌。
美国国家癌症研究所(National Cancer Institute)描述的示例性癌症包括：成人急性淋巴母细胞白血病；儿童急性淋巴母细胞白血病；成人急性骨髓性白血病；肾上腺皮质癌；儿童肾上腺皮质癌；AIDS相关淋巴瘤；AIDS相关恶性肿瘤；肛门癌；儿童小脑星形细胞瘤；儿童大脑星形细胞瘤；肝外胆管癌；膀胱癌；儿童膀胱癌；骨癌、骨肉瘤/恶性纤维组织细胞瘤；儿童脑干胶质瘤；成人脑瘤；儿童脑瘤脑干胶质瘤；儿童脑瘤小脑星形细胞瘤；儿童脑瘤大脑星形细胞瘤/恶性胶质瘤；儿童脑瘤室管膜瘤；儿童脑瘤髓母细胞瘤；儿童脑瘤幕上原始神经外胚叶肿瘤；儿童脑瘤、视路和下丘脑胶质瘤；儿童脑瘤(其他)；乳腺癌；乳腺癌与妊娠；儿童乳腺癌；男性乳腺癌；儿童支气管腺瘤/类癌瘤；儿童类癌瘤；胃肠道类癌瘤；肾上腺皮质癌；小岛细胞癌；原发灶不明的转移癌(Carcinoma of Unknown Primary)；原发性中枢神经系统淋巴瘤；儿童小脑星形细胞瘤；儿童大脑星形细胞瘤/恶性胶质瘤；宫颈癌；儿童癌症；慢性淋巴细胞白血病；慢性髓细胞性白血病；慢性骨髓增殖性疾病；腱鞘透明细胞肉瘤；结肠癌；儿童结直肠癌；皮肤T细胞淋巴瘤；子宫内膜癌；儿童室管膜瘤；卵巢上皮癌；食管癌；儿童食管癌；尤因氏家族肿瘤；儿童颅外生殖细胞肿瘤；性腺外生殖细胞肿瘤；肝外胆管癌；眼癌、眼内黑色素瘤；眼癌、视网膜母细胞瘤；胆癌；胃(Gastric/Stomach)癌；儿童胃癌；胃肠道类癌；儿童颅外生殖细胞肿瘤；性腺外生殖细胞肿瘤；卵巢生殖细胞肿瘤；滋养细胞肿瘤；儿童脑干胶质瘤；视路和下丘脑胶质瘤；毛细胞白血病；头颈癌；成人(原发性)肝细胞(肝)癌；儿童(原发性)肝细胞(肝)癌；成人霍奇金淋巴瘤；儿童霍奇金淋巴瘤；妊娠期霍奇金淋巴瘤；下咽癌；儿童下丘脑和视路胶质瘤；眼内黑色素瘤；小岛细胞癌(内分泌胰腺)；卡波西肉瘤；肾癌；喉癌；儿童喉癌；成人急性淋巴母细胞白血病；儿童急性淋巴母细胞白血病；成人急性骨髓性白血病；儿童急性骨髓性白血病；慢性淋巴细胞性白血病；慢性髓细胞性白血病；毛细胞白血病；唇癌和口腔癌；成人(原发性)肝癌；儿童(原发性)肝癌；非小细胞肺癌；小细胞肺癌；成人急性淋巴母细胞白血病；儿童急性淋巴母细胞白血病；慢性淋巴细胞白血病；AIDS相关的淋巴瘤；中枢神经系统(原发性)淋巴瘤；皮肤T细胞淋巴瘤；成人霍奇金淋巴瘤；儿童霍奇金淋巴瘤；妊娠期霍奇金淋巴瘤；成人非霍奇金淋巴瘤；儿童非霍奇金淋巴瘤；妊娠期非霍奇金淋巴瘤；原发性中枢神经系统淋巴瘤；华氏巨球蛋白血症；男性乳腺癌；成人恶性间皮瘤；儿童恶性间皮瘤；恶性胸腺瘤；儿童髓母细胞瘤；黑色素瘤；眼内黑色素瘤；梅克尔细胞癌(Merkel Cell Carcinoma)；恶性间皮瘤；隐匿性原发性转移性鳞状颈癌；儿童多发性内分泌瘤综合征；多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤；蕈样肉芽肿病；骨髓增生异常综合征；慢性髓细胞性白血病；儿童急性骨髓性白血病；多发性骨髓瘤；慢性骨髓增生性综合征；鼻腔和鼻窦癌；鼻咽癌；儿童鼻咽癌；神经母细胞瘤；成人非霍奇金淋巴瘤；儿童非霍奇金淋巴瘤；妊娠期非霍奇金淋巴瘤；非小细胞肺癌；儿童口癌；口腔和唇癌；口咽癌；骨肉瘤/恶性骨纤维组织细胞瘤；儿童卵巢癌；卵巢上皮癌；卵巢生殖细胞肿瘤；卵巢低恶性潜能肿瘤；胰腺癌；儿童胰腺癌；小岛细胞胰腺癌；鼻窦和鼻腔癌；甲状旁腺癌；阴茎癌；嗜铬细胞瘤；儿童松果体和幕上原始神经外胚叶肿瘤；垂体瘤；浆细胞肿瘤/多发性骨髓瘤；胸膜肺母细胞瘤；妊娠和乳腺癌；妊娠和霍奇金淋巴瘤；妊娠和非霍奇金淋巴瘤；原发性中枢神经系统淋巴瘤；成人原发性肝癌；儿童原发性肝癌；前列腺癌；直肠癌；肾细胞(肾)癌；儿童肾细胞癌；肾盂和输尿管移行细胞癌；视网膜母细胞瘤；儿童横纹肌肉瘤；唾液腺癌；儿童唾液腺癌；尤因家族肿瘤肉瘤；卡波西肉瘤；肉瘤(骨肉瘤)/骨恶性纤维组织细胞瘤；儿童横纹肌肉瘤肉瘤；成人软组织肉瘤；儿童软组织肉瘤；塞扎里综合征(Sezary Syndrome)；皮肤癌；儿童皮肤癌；皮肤癌(黑色素瘤)；梅克尔细胞皮肤癌；小细胞肺癌；小肠癌；成人软组织肉瘤；儿童软组织肉瘤；转移性隐匿性原发性鳞状颈癌；胃(Stomach/Gastric)癌；儿童胃癌；儿童幕上原始神经外胚叶肿瘤；皮肤T细胞淋巴瘤；睾丸癌；儿童胸腺瘤；恶性胸腺瘤；甲状腺癌；儿童甲状腺癌；肾盂和输尿管移行细胞癌；妊娠滋养细胞肿瘤；儿童未知原发部位癌症；不寻常的儿童癌症；输尿管和肾盂移行细胞癌；尿道癌；子宫肉瘤；阴道癌；儿童视路和下丘脑胶质瘤；外阴癌；华氏巨球蛋白血症；和维尔姆斯瘤(Wilms'Tumor)。
其他示例性癌症包括弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)和套细胞淋巴瘤(MCL)。
上述癌症的转移也可以根据本文所描述的方法进行治疗或预防。
在一些实施方案中，这些方法可以导致受试者的癌症的一种或多种症状的数量、严重性或频率降低(例如与治疗前受试者的癌症的一种或多种症状的数量、严重性或频率相比)。
在本文所描述的方法中的任一种的一些实施方案中，所述方法还包括向受试者施用额外的治疗剂(例如，表2中列出的一种或多种治疗剂)。
表2.额外的治疗剂
Figure GDA0004000354850000761
Figure GDA0004000354850000771
Figure GDA0004000354850000781
Figure GDA0004000354850000791
组合物/药盒
本文还提供了包含本文所描述的ACC中的任一种和一种或多种(例如1、2、3、4或5种)药学上可接受的载剂(例如本文所描述的药学上可接受的载剂中的任一种)、稀释剂或赋形剂的组合物(例如药物组合物)。
在一些实施方案中，包含本文所描述的ACC中的任一种的组合物(例如药物组合物)可置于无菌小瓶或预填装注射器中。
在一些实施方案中，包含本文所描述的ACC中的任一种的组合物(例如药物组合物)可以配制用于不同的施用途径(例如静脉内、皮下、肌内、腹膜内或肿瘤内)。
在一些实施方案中，本文所描述的药物组合物中的任一种可包含一种或多种缓冲液(例如中性缓冲盐水、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、氨基酸(例如甘氨酸)、一种或多种碳水化合物(例如葡萄糖、甘露糖、蔗糖、葡聚糖或甘露醇)、一种或多种抗氧化剂、一种或多种螯合剂(例如EDTA或谷胱甘肽)、一种或多种防腐剂和/或药学上可接受的载剂(例如抑菌水、PBS或盐水)。
如本文所用，短语“药学上可接受的载剂”是指与医药施用相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂、抗微生物剂、等张剂和吸收延迟剂等。合适的载剂包括但不限于：水、盐水、林格氏溶液、右旋糖溶液和约5％人类血清白蛋白。
在本文所描述的药物组合物中的任一种的一些实施方案中，本文所描述的ACC中的任一种是用防止从身体快速消除的载剂制备，例如缓释和控制释放制剂，包括植入物和微囊化递送系统。可使用生物可降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酯和聚乳酸。制备此类药物组合物和制剂的方法对本领域技术人员来说是显而易知的。
本文还提供了包括本文所描述的ACC中的任一种、包含本文所描述的ACC中的任一种的组合物中的任一种或包含本文所描述的ACC中的任一种的药物组合物中的任一种的药盒。除了本文所描述的ACC之外，还提供了包括一种或多种选自表2的第二治疗剂的药盒。第二治疗剂可以与ACC分开的剂量施用形式提供。替代地，第二治疗剂可以与ACC一起配制。
本文所描述的药盒中的任一种可包括使用本文所描述的组合物(例如药物组合物)中的任一种和/或ACC中的任一种的说明书。在一些实施方案中，药盒可包括执行本文所描述的方法中的任一种的说明书。在一些实施方案中，药盒可包括至少一剂本文所描述的组合物(例如药物组合物)中的任一种。在一些实施方案中，药盒可提供用于施用本文所描述的任何药物组合物的注射器。
实施例
本发明将在以下实施例中进行进一步描述，这些实施例不限制权利要求中所描述的本发明的范围。
实施例1：可活化细胞因子构建体的产生
通过重组方法制备可活化细胞因子构建体IFN-α2b-1204DNIdl-hIgG4。所述ACC的第1单体构建体和第2单体构建体是相同的，每个都是具有图3中所示氨基酸序列(SEQ IDNO:309)的多肽。第1单体构建体和第2单体构建体中的每一个从N端至C端包含来自小鼠IgGκ信号序列的信号序列(SEQ ID NO:309的残基1-20)、对应于人类干扰素α-2b(SEQ ID NO:1)的成熟细胞因子蛋白、具有氨基酸序列SEQ ID NO:99的可裂解部分、具有氨基酸序列GGGS(SEQ ID NO:2)的接头和对应于人类IgG Fc(SEQ ID NO:4)的DD。通过用具有序列SEQID NO:310的多核苷酸转化宿主细胞，接着培养所得重组宿主细胞来制备多肽。所得表达多肽的二聚化产生可活化细胞因子构建体IFN-α2b 1204DNIdl hIgG4。
还通过重组方法制备了可活化细胞因子构建体IFN-α-2b1490DNI-hIgG4。所述ACC的第1单体构建体和第2单体构建体也是相同的，每个都是具有图4中所示氨基酸序列(SEQID NO:311)的多肽。所述ACC的第1单体构建体和第2单体构建体中的每一个从N端至C端包含来自小鼠IgGκ信号序列的信号序列(SEQ ID NO:309的残基1-20)、对应于人类干扰素α-2b(SEQ ID NO:1)的成熟细胞因子蛋白、具有氨基酸序列SEQ ID NO:68的可裂解部分、具有氨基酸序列GGGS(SEQ ID NO:2)的接头和对应于人类IgG Fc(SEQ ID NO:4)的DD。通过用具有序列SEQ ID NO:312的多核苷酸转化宿主细胞，接着培养所得重组宿主细胞来制备多肽。所得表达多肽的二聚化产生可活化细胞因子构建体IFN-α2b 1204dl hIgG4。
制备了额外的可活化细胞因子构建体，其在接头中包含额外的五个氨基酸残基。
对可活化细胞因子构建体和蛋白酶处理的可活化细胞因子构建体进行电泳。图6描绘了凝胶，其展示了以下的结果(从左到右)：(1)ACC IFN-α2b-1204DNIdl-hIgG4(“1204”)；(2)MT-SP1处理的IFN-α2b-1204DNIdl-hIgG4(“1204MT-SP1”)；(3)uPA处理的IFN-α2b-1204DNIdl-hIgG4(“1204uPA”)；(4)具有添加到接头的五个氨基酸残基的IFN-α2b-1204DNIdl-hIgG4(“1204+1”)；(5)MT-SP1处理的IFN-α2b-1204DNIdl-hIgG4(“1204+1MT-SP1”)；(6)uPA处理的IFN-α2b-1204DNIdl-hIgG4(“1204+1uPA”)；(7)IFN-α-2b1490DNI-hIgG4(“1490”)；(8)MT-SP1处理的IFN-α-2b1490DNI-hIgG4(“1490MT-SP1”)；和(9)uPA处理的IFN-α-2b1490DNI-hIgG4(“1490uPA”)。结果表明蛋白酶有效地裂解可活化细胞因子构建体中的可裂解部分。
实施例2.可活化细胞因子构建体的IFN-α-2b活性
人类I型干扰素的基于细胞的报道基因测定用于测试实施例1中所描述的ACC的活性。
通过用人类STAT2和IRF9基因稳定转染以获得完全活跃的I型IFN信号传导通路来产生IFN反应性HEK293细胞。这些细胞还具有受IFNα/β诱导型ISG54启动子控制的诱导型SEAP(分泌胚胎碱性磷酸酶)报道基因。为了维持转基因表达，将细胞在补充有10％ FBS、Pen/Strep、30μg/mL杀稻瘟菌素、100μg/ml zeocin和100μg/mL normocin的DMEM GlutaMax培养基中培养。向这些细胞中添加I型IFN活化JAK/STAT/ISGF3通路并随后诱导SEAP的产生，SEAP可以使用碱性磷酸酶活性的比色检测Quant i-Blue溶液在上清液中容易地评估。使用所述报道基因测定，将含有IFNα-2b的ACC的活性与
Figure GDA0004000354850000821
(聚乙二醇干扰素α-2b)的活性进行比较。图7中的数据表明，与
Figure GDA0004000354850000822
(聚乙二醇干扰素α-2b)的IFNα-2b活性相比，ACC的IFNα-2b活性明显降低。
此外，图8A和图8B中的数据表明，(未裂解的)ACC的活性可以通过改变接头或连接区的长度来调节。图8A至图8B中的数据展示了如在HEK293报道基因测定中测试的具有不同的接头长度或在IFNa-2b与hIgG4 Fc之间不具有接头的IFNa-2b-hIgG4 Fc融合构建体的结果。本实验中测试的融合蛋白在N端至C端方向上包含成熟IFNα-2b细胞因子序列、任选接头和/或可裂解部分，以及SEQ ID NO:4的人类IgG4的Fc结构域(包括完整的铰链区，使得Fc序列的N端以氨基酸序列ESKYGPPCPPC……开始)。第一个构建体(连接区＝7)不具有接头或可裂解部分；其在N端至C端方向上的序列由SEQ ID NO:4-SEQ ID NO:1融合物组成。第二构建体(连接区＝12)具有5个氨基酸的接头SGGGG(SEQ ID NO:335)；其在N端至C端方向上的序列由SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:335-SEQ ID NO:4融合物组成。第三构建体(连接区＝18)包括7个氨基酸的CM(SGRSDNI)和4个氨基酸的接头GGGS；其在N端至C端方向上的序列由SEQID NO:1-SEQ ID NO:100-SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:4融合物组成。第四构建体(连接区＝23)包括5个氨基酸的接头、7个氨基酸的CM和4个氨基酸的接头；其在N端至C端方向上的序列由SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:335-SEQ ID NO:100-SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:4融合物组成。第五构建体(连接区＝24)包括13个氨基酸的CM(ISSGLLSGRSDNI)和4个氨基酸的接头；其在N端至C端方向上的序列由SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:68-SEQ ID NO:2-SEQ ID NO:4融合物组成。
实施例3：ACC对癌细胞的体外抗增殖作用
使用人类B细胞淋巴母细胞来源的细胞系Daudi细胞在体外测试了IFNα-2b和含有IFNα-2b的ACC的抗增殖作用。在补充有10％FBS的RPMI-1640培养基中以2×105个细胞/mL的浓度制备Daudi细胞并且将50μL等分试样移液到白色平底96孔板的孔中(10K/孔)。将测试的ACC或对照在补充有10％FBS的RPMI 1640培养基中稀释。产生重复的五倍连续稀释液，从中将50μL添加到每个孔中。在37℃下孵育3天后，使用生存力试剂盒测量细胞内ATP的水平，以间接估计剩余活细胞的数量。将100μL cell-titer go直接添加到板中，然后将其置于轨道振荡器上10分钟。所述孵育后，使用Envision读板器直接测量发光信号。生成剂量反应曲线，并使用Graph Pad Prism软件通过S形拟合非线性回归获得EC50值。通过比较EC50值与重组IFNα2b或药物级
Figure GDA0004000354850000831
(聚乙二醇干扰素α-2b)确定比活性。
含有IFNα-2b的ACC在Daudi淋巴瘤细胞中的抗增殖活性表明，与
Figure GDA0004000354850000841
(聚乙二醇干扰素α-2b)相比，未裂解的ACC的IFNα-2b活性降低(图9)。
图10A至图10B中的数据也表明(未裂解的)ACC的活性可以通过改变接头的长度来调节。使用Daudi细胞体外测试了具有不同接头长度或在IFNa-2b与hIgG4 Fc之间不具有接头的IFNa-2b-hIgG4 Fc融合蛋白构建体的抗增殖作用。数据表明，柔性接头的长度和细胞因子与Fc结构域之间的连接区(LR)的长度对(未裂解的)ACC的活性有影响。具有零接头或短接头和相应短LR的构建体显示细胞因子活性降低，而具有较长接头和因此较长LR的构建体具有更高水平的细胞因子活性。结果在图10A至图10B中示出。融合蛋白构建体与上文实施例2中关于图8A和图8B所描述的那些相同。
实施例4：蛋白酶处理的ACC的活性
在Daudi淋巴细胞和基于细胞的报道基因测定中测试了蛋白酶处理的含有IFNα-2b的ACC的抗增殖反应，以确定是否可以恢复活性。
为了裂解二聚化结构域，将含有IFNα-2b的ACC在37℃下用重组人类蛋白酶，诸如尿激酶型纤溶酶原活化剂(uPA)或matriptase(MT-SP1)处理过夜。如实施例2和3中所描述，在测试活性之前添加蛋白酶抑制剂混合液以中和蛋白酶。来自这些测定的结果表明用蛋白酶处理含有IFNα-2b的ACC可以将活性恢复到与重组细胞因子相当的水平。ACC IFNα-2b-1204DNIdl-hIgG4、ACC IFNα-2b-1204DNIdl-hIgG4+uPA和干细胞IFNα-2b(人类重组IFN-α2b，从StemCell Technologies获得，目录号78077.1)的EC50值是根据Daudi细胞凋亡测定结果计算的，并且在下表3中提供。
表3.EC50：Daudi细胞凋亡测定
Figure GDA0004000354850000842
ACC IFNα-2b-1204DNIdl-hIgG4、ACC IFNα-2b-1204DNIdl-hIgG4+uPA和干细胞IFNα-2b的EC50值是根据IFNα/β测定结果计算的，并且在下表4中提供。
表4.EC50：IFNα/β报道基因测定
Figure GDA0004000354850000851
这些结果表明，在不存在活化蛋白酶的情况下，IFNα-2b-1204DNIdl-hIgG4的活性相对于IFNα-2b对照明显降低。
实施例5：通用ProIFN
根据本公开的ACC是通过重组方法制备的，所述ACC具有对人类和小鼠细胞均具有活性的通用干扰素序列(ProC859)(IFNaAD 0AA 1204DNIdL 0AA IgG4)。所述ACC的第1单体构建体和第2单体构建体是相同的，每个都是具有氨基酸序列(SEQ ID NO:323和其N端处的信号序列)的多肽。第1单体构建体和第2单体构建体中的每一个从N端至C端均包含信号序列、对应于作为IFNα1和IFNα2a的杂合体(SEQ ID NO:324)的通用干扰素分子的成熟细胞因子蛋白、具有氨基酸序列SEQ ID NO:100的可裂解部分和对应于人类IgG Fc(SEQ ID NO:3)的二聚化结构域。使用IFN反应性HEK293细胞和B16小鼠黑色素瘤细胞体外测试了通用ProIFN的活性。
与小鼠IFNa4相比，ProC859的活性降低了至少150倍。用uPa进行的蛋白酶活化将活性恢复到与小鼠IFNa4相当的水平，如图19中所示。ACC ProC859、ACC ProC859+uPA和小鼠IFNα4的EC50值是根据测定结果计算的，并在图19中提供。
EC50：B16 IFNα/β报道基因测定
Figure GDA0004000354850000852
实施例6：先导ACC ProC440的体外表征：
通过重组方法制备可活化细胞因子构建体ProC 440(N IFNa2b 0 1204DNIdL 0AAFc)。所述ACC的第1单体构建体和第2单体构建体是相同的，每个都是具有氨基酸序列SEQID NO:313和其N端处的信号序列的多肽。第1单体构建体和第2单体构建体中的每一个从N端至C端均包含信号序列、对应于人类干扰素α-2b(SEQ ID NO:1)的成熟细胞因子蛋白、具有氨基酸序列SEQ ID NO:100的可裂解部分和对应于人类IgG Fc(SEQ ID NO:3)的二聚化结构域。
如先前所描述，ProC440的活性是体外使用IFN反应性HEK293细胞和Daudi细胞测试的。在这两种测定中，与干细胞IFNα-2b相比，ProC440的活性降低了至少1,000倍(图13)。用uPa进行的蛋白酶活化将活性恢复到与重组细胞因子(如图13中所示的IFNa2b)相当的水平。ACC ProC440、ACC ProC440+uPA和干细胞IFNα-2b的EC50值是根据IFNα/β测定结果计算的，并且在下表5中提供。
表5.EC50：IFNα/β报道基因测定
ProC440(ACC) ProC440(ACC)+uPA 干细胞IFNα-2b
EC50 7643 4.333 10.88
ACC ProC440、ACC ProC440+uPA和干细胞IFNα-2b的EC50值是根据Daudi凋亡细胞测定结果计算的，并且在下表6中提供。
表6.EC50：Daudi细胞凋亡测定
ProC440(ACC) ProC440(ACC)+uPA 干细胞IFNα-2b
EC50 264.2 0.1842 0.3530
通过质谱分析证实在CM中的预期位点用uPa的裂解(图14A至图14B)。除了对uPa活化敏感之外，ProC440还被MMP4裂解(图14A至图14B)。质谱分析鉴别了在IFNa的C末端，靠近可裂解部分的MMP14裂解位点(图14B)。用MMP14进行蛋白酶活化使活性恢复到与重组细胞因子相当的水平。总之，这表明ACC ProC440可以在至少uPa和MMP14裂解内在和工程化可裂解部分后恢复全部活性。
还通过重组方法制备了ACC ProC657(N IFNa2b 0AA 1204DNIdL0AA IgG4KiHSS)。所述ACC的第1单体构建体是具有氨基酸序列SEQ ID NO:314和在其N端的信号序列的多肽。所述ACC的第1单体构建体从N端至C端包含信号序列、对应于人类干扰素α-2b(SEQID NO:1)的成熟细胞因子蛋白、具有氨基酸序列SEQ ID NO:68的可裂解部分和对应于具有杵状突变的人类IgG Fc(SEQ ID NO:315)的二聚化结构域。所述ACC的第2单体构建体是具有氨基酸序列SEQ ID NO:322和其N端处的信号序列的多肽。第2单体构建体从N端至C端具有信号序列、残端部分(SEQ ID NO:317)和对应于具有臼状突变的人类IgG Fc(SEQ ID NO:316)的二聚化结构域。
如先前所描述，ProC657的活性是体外使用IFN反应性HEK293细胞测试的。与干细胞IFNα-2b或uPa活化的ProC440相比，ProC657的活性降低，但与ProC440相比，活性增加(图15)。因此，本公开提供了不同结构的ACC，其使得调节ACC中活性降低的水平成为可能。
实施例7：ACC的体内抗增殖活性：
使用Daudi异种移植肿瘤模型在体内测试了含IFNα-2b的ACC ProC440的抗增殖作用。在无血清培养基(1:1Matrigel)中将10x106个Daudi细胞皮下植入Beige/SCID小鼠中。当平均肿瘤体积达到约60-120mm3时，小鼠被随机分组并每周一次给药ProC440，持续5周。在研究期间每周两次记录体重和肿瘤测量值。图16中的数据表明，含有IFNα-2b的ACCProC440在低至0.1mg/kg的剂量下诱导肿瘤完全消退并在0.02mg/kg的剂量下减缓肿瘤生长(上图)，并且展示了
Figure GDA0004000354850000871
的抗增殖作用以用于比较(下图)。
实施例8：ACC的体内耐受性活性
人类IFNα-2b与仓鼠IFNα受体发生交叉反应，并且之前已显示在仓鼠中具有活性(Altrock等人,Journal of Interferon Research,1986)。为了评估含有IFNα-2b的ACCProC440的耐受性，叙利亚金仓鼠以起始剂量0.4mg/kg给药。除非鉴别出非耐受毒性(DLT意指剂量限制性毒性)，否则动物接受一剂试验制品并在给药后继续研究7天。起始剂量(0.4mg/kg(“mpk”))表示INFα-con(重组干扰素α，一种由Amgen以名称
Figure GDA0004000354850000872
制造的非天然存在的I型干扰素)的预计诱导仓鼠(125克)的体重减轻、食物消耗减少和骨髓抑制的等效剂量。在食蟹猴(cyno)中，0.1mg/kg/天的INFα-con与体重减轻、食物消耗减少和骨髓抑制有关(对于125克仓鼠，等于1.25-2.5x10^7U)。如果起始剂量是耐受的，那么将动物移至2mg/kg的“中等剂量”并接受三剂测试制品，除非不耐受。如果耐受，那么将动物移至10mg/kg的“高剂量”并接受三剂测试制品，除非不耐受。如果耐受，那么将动物移至15mg/kg的“高剂量”.在每个阶段，如果测试剂量不耐受，那么将动物移至下一个较低剂量。如果起始剂量不耐受，那么将动物移至0.08mg/kg的“较低剂量”。向动物给药具有DD-CM-CP二聚体的N端至C端结构的ACC(ProC286)。作为阴性对照，向动物给药人类IgG4。正如预期的那样，阴性对照不在动物中诱导任何毒性。
还通过重组方法制备了ProC286(ChIgG4 5AA 1204DNIdL IFNa2b)。第1单体构建体和第2单体构建体是相同的，每个都是具有氨基酸序列SEQ ID NO:320和其N端处的信号序列的多肽。第1单体构建体和第2单体构建体中的每一个从N端至C端均包含信号序列、对应于人类IgG Fc(SEQ ID NO:3)的二聚化结构域、接头(SEQ ID NO:321)、具有氨基酸序列SEQ ID NO:100的可裂解部分、接头(SEQ ID NO:2)和对应于人类干扰素α-2b(SEQ ID NO:1)的成熟细胞因子蛋白。
还通过重组方法制备了ProC291(NhIgG4 5AA 1204DNIdL IFNa2b)。第1单体构建体和第2单体构建体是相同的。第1单体构建体和第2单体构建体中的每一个从N端至C端均包含对应于人类干扰素α-2b(SEQ ID NO:1)的成熟细胞因子蛋白、接头(SEQ ID NO:321)、CM(SEQ ID NO:100)、接头(GGGS)和包括全铰链序列(SEQ ID NO:4)的人类IgG4 Fc区。
在Daudi细胞凋亡测定中，将ProC286和ProC291的活性与
Figure GDA0004000354850000881
(PEG-IFN-α2b)的活性进行比较(图17A至图17B)。在所述测定中，ProC286和
Figure GDA0004000354850000882
展示出相似的活性水平，如图17A中所示。这表明ProC286与可商购获得的聚乙二醇化IFN-α2b具有相似的活性，并可用作
Figure GDA0004000354850000883
对照以评价IFNα-2b在仓鼠研究中的耐受性。与ProC286和
Figure GDA0004000354850000884
相比，ProC291展示出降低的活性，这表明IFN N端与Fc的结构取向对于降低活性很重要。也就是说，当DD是一对Fc结构域时，将细胞因子定位在DD的N端(如在ProC291中)与当将细胞因子定位在DD的C端(如在ProC286中)时相比，可提供更大的细胞因子活性降低。
在第1天以0.4mg/kg起始剂量向动物给药。除非达到非耐受剂量(DLT)，否则将动物继续研究一周。临床观察，在给药前以及给药后6小时、24小时、72小时和7天测量每只动物的体重和体温。在给药后72小时和7天收集每只动物的血样以用于血液学和化学分析。取样后立即进行血液学和化学分析。对于血液学分析，对血涂片、白细胞分类计数、红细胞比容、血红蛋白、平均红细胞血红蛋白、平均红细胞体积、血小板计数、红细胞(red bloodcell/erythrocyte)计数、红细胞分布宽度、网织红细胞计数和白细胞(white blood cell/leukocyte)计数进行评价。临床化学小组包括测量丙氨酸氨基转移酶、白蛋白、白蛋白/球蛋白比率、碱性磷酸酶、天冬氨酸氨基转移酶、钙、氯化物、胆固醇、肌酸激酶、肌酸、γ谷氨酰胺转移酶、球蛋白、葡萄糖、无机磷、钾、钠、总胆红素、总蛋白、甘油三酯、脲、氮和C反应蛋白。耐受性研究中的毒性证据总结在图22至图24中。
总体而言，给药未掩蔽的ProC286构建体的动物表现出当以2mpk给药时，平均5％的体重减轻，并且当以10mpk和15mpk给药时，15％的体重减轻(图22)。以15mpk给药ProC286的一只动物在给药后7天(研究结束)表现出20％的体重减轻。这被认为是非耐受剂量。相比之下，以2mpk和10mpk给药ProC440的动物没有表现出体重减轻。
以15mpk给药ProC440的动物表现出平均5％的体重减轻(图22)。这表明具有从N端开始的CP-CM-DD的二聚化结构的本公开的ACC出乎意料地限制了IFNα-2b介导的体重减轻。不希望受理论束缚，据信将干扰素定位在DD的N端并使用相对短的LR在ProC440的情况下抑制细胞因子活性，与聚乙二醇化的IFNα-2b
Figure GDA0004000354850000891
或ProC286相比降低了干扰素的毒性。
在临床化学方面，给药ProC286的动物在给药后7天(研究结束)展示在所有剂量(0.4mpk、2mpk、10mpk和15mpk)下的碱性磷酸酶(ALP)的明显升高(图23)。当向动物给药10mpk或15mpk的ProC440时，没有测量到ALP的明显增加(图23)。ALT升高是肝毒性的标志物。已展示IFNα-2b诱导肝毒性。这表明具有从N端开始的CP-CM-DD的二聚化结构的本公开的ACC出乎意料地限制了IFNa-2b介导的肝毒性。
在血液学方面，给药后3天和给药后7天(研究结束)，以2mpk、10mpk和15mpk给药ProC286的动物展示网织红细胞计数、中性粒细胞计数和白细胞(WBC)计数明显降低(图24)。这些降低使人联想到IFNa-2b介导的骨髓毒性。给药后三天，给药ProC440的动物展示网织红细胞计数、嗜中性粒细胞计数和白细胞(WBC)计数水平降低(图24)。总体而言，在给药ProC440的动物中观察到的造血细胞水平的减少不如在给药ProC286的动物中观察到的水平减少明显。在给药后7天(研究结束)，在给药ProC440的动物中，网织红细胞计数、中性粒细胞计数和白细胞(WBC)计数的总体水平恢复到正常水平，或恢复到在给药阴性对照IgG4的动物中观察到的相似的水平(图24)。在给药ProC286的动物中，网织红细胞计数、中性粒细胞计数和白细胞(WBC)计数水平仍然很低。这表明具有从N端开始的CP-CM-DD的二聚化结构的本公开的ACC出乎意料地限制了IFNa-2b介导的骨髓毒性。
实施例4.额外的细胞因子构建体的体外表征
还通过重组方法制备了额外的可活化细胞因子构建体。这些ACC的第1单体构建体和第2单体构建体是相同的。第1单体构建体和第2单体构建体中的每一个从N端至C端均包含来自小鼠IgGκ信号序列的信号序列(SEQ ID NO:309的残基1-20)、对应于对人类干扰素α-2b(SEQ ID NO:1)的成熟细胞因子蛋白、具有氨基酸序列SEQ ID NO:100的可裂解部分(CM)和对应于人类IgG4 S228P Fc(包含SEQ ID NO:3)的二聚化结构域。此外，这些ACC包括或不包括在CP和CM之间的具有氨基酸序列SGGGG的接头。这些ACC包括或不包括在CM与DD之间的具有氨基酸序列GGGS的接头。这些ACC还含有或不含有位于半胱氨酸226的N端的DD铰链部分。这些额外的可活化细胞因子构建体描述于表6中(参见SEQ ID No:336至342和SEQID NO:313)。
表6：人类IgG的CP与半胱氨酸226之间的具有不同氨基酸序列长度的可活化细胞因子
Figure GDA0004000354850000901
Figure GDA0004000354850000911
ProC440(一种不具有柔性接头和截短至Cys226的Fc区的ACC)的活性以及含有各种接头和Fc区序列的额外ACC的活性是在体外使用如先前所描述的IFN反应性HEK293细胞和Daudi细胞测试的。在这两种测定中，与在细胞因子与将DD结合至相应第二单体的第一氨基酸(即Cys226)之间含有各种额外序列的所有其他ACC相比，ProC440的活性(例如抗增殖作用)降低。ACC的EC50值是根据IFNα/β测定结果计算的，并在下表7中提供。
表7.EC50：IFNα/β报道基因测定
Figure GDA0004000354850000912
ACC的EC50值是根据Daudi细胞凋亡测定结果计算的，并在下表8中提供。
表8.EC50：Daudi细胞凋亡测定
Figure GDA0004000354850000913
表7至表8中的数据还表明，(未裂解的)ACC的活性可以通过改变细胞因子与DD的Cys226之间的氨基酸序列的长度来调节。
不希望受理论的束缚，基于本文呈现的结果，本发明人设想将细胞因子定位在DD的N端并使用相对短的LR抑制细胞因子的细胞因子活性，除了在前文具体实施例中例举的干扰素-α细胞因子之外。如上文所描述，本文描述的发明涵盖包括本文所讨论的各种细胞因子蛋白的可活化细胞因子构建体。作为非限制性实例，本发明的ACC中使用的CP可以是SEQ ID NO:101至209中所示的那些和其变体中的任一个。特别地，单体细胞因子适用于本文所描述的ACC。基于本文所提供的结果，据信本发明的ACC相对于相应野生型细胞因子将表现出降低的细胞因子活性，并且在相关蛋白酶裂解ACC时，裂解产物将恢复与相应野生型细胞因子相似的细胞因子活性。
实例序列
Figure GDA0004000354850000921
Figure GDA0004000354850000931
Figure GDA0004000354850000941
Figure GDA0004000354850000951
Figure GDA0004000354850000961
Figure GDA0004000354850000971
Figure GDA0004000354850000981
Figure GDA0004000354850000991
Figure GDA0004000354850001001
Figure GDA0004000354850001011
Figure GDA0004000354850001021
Figure GDA0004000354850001031
Figure GDA0004000354850001041
Figure GDA0004000354850001051
Figure GDA0004000354850001061
Figure GDA0004000354850001071
Figure GDA0004000354850001081
Figure GDA0004000354850001091
Figure GDA0004000354850001101
Figure GDA0004000354850001111
Figure GDA0004000354850001121
Figure GDA0004000354850001131
Figure GDA0004000354850001141
Figure GDA0004000354850001151
Figure GDA0004000354850001161
Figure GDA0004000354850001171
Figure GDA0004000354850001181
Figure GDA0004000354850001191
Figure GDA0004000354850001201
Figure GDA0004000354850001211
其他实施方案
应理解，虽然已经结合本发明的详细描述来描述本发明，但前述描述旨在说明而不是限制本发明的范围，本发明的范围由所附权利要求的范围限定。其他方面、优点和修改在以下权利要求的范围内。
序列表
<110> 西托姆克斯治疗公司(CYTOMX THERAPEUTICS, INC.)
<120> 可活化细胞因子构建体和相关组合物以及方法
<130> CYTX-071-PCT
<150> 63/008,542
<151> 2020-04-10
<150> 63/161,889
<151> 2021-03-16
<150> 63/164,849
<151> 2021-03-23
<160> 518
<170> PatentIn version 3.5
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<211> 165
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Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
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Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
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Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
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Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
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Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
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Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
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Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
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Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
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Leu Arg Ser Lys Glu
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Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
20 25 30
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val
35 40 45
Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
50 55 60
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
65 70 75 80
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
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Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser
100 105 110
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
115 120 125
Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
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Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
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Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
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Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
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Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
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Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
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Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
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Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu
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Leu Ser
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<220>
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
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Pro Ala Gly Leu Trp Leu Asp Pro
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<212> PRT
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Val Ala Gly Arg Ser Met Arg Pro
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<212> PRT
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Val Val Pro Glu Gly Arg Arg Ser
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Ser Pro Arg Ser Ile Met Leu Ala
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<223> 合成
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Ser Met Leu Arg Ser Met Pro Leu
1 5
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<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 28
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1 5 10
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<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 29
Ala Val Gly Leu Leu Ala Pro Pro Gly Gly Leu Ser Gly Arg Ser Asp
1 5 10 15
Asn His
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 30
Ile Ser Ser Gly Leu Leu Ser Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Leu Ser
1 5 10 15
Gly Arg Ser Asp Asn His
20
<210> 31
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Leu Ser Gly Arg Ser Gly Asn His
1 5
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<223> 合成
<400> 32
Ser Gly Arg Ser Ala Asn Pro Arg Gly
1 5
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<223> 合成
<400> 33
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<223> 合成
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1 5
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Leu Ser Gly Arg Ser Asp Gln His
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<211> 8
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Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Pro
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Leu Ser Gly Arg Ser Ala Asn Pro
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<223> 合成
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Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile
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Met Ile Ala Pro Val Ala Tyr Arg
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<223> 合成
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Trp Ala Thr Pro Arg Pro Met Arg
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<223> 合成
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1 5 10 15
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1 5 10 15
Gly
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<223> 合成
<400> 57
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1 5 10
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<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<223> 合成
<400> 58
Ile Ser Ser Gly Leu Leu Ser Gly Arg Ser Ala Asn Pro
1 5 10
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<211> 13
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 59
Ile Ser Ser Gly Leu Leu Ser Gly Arg Ser Ala Asn Ile
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<220>
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<400> 61
Ala Val Gly Leu Leu Ala Pro Pro Gly Gly Leu Ser Gly Arg Ser Asp
1 5 10 15
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<223> 合成
<400> 62
Ala Val Gly Leu Leu Ala Pro Pro Gly Gly Leu Ser Gly Arg Ser Asp
1 5 10 15
Gln His
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<220>
<223> 合成
<400> 63
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1 5 10 15
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<223> 合成
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1 5 10 15
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 65
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1 5 10 15
Asn Pro
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
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<400> 66
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1 5 10 15
Asn Pro
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 67
Ala Val Gly Leu Leu Ala Pro Pro Gly Gly Leu Ser Gly Arg Ser Ala
1 5 10 15
Asn Ile
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<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 68
Ile Ser Ser Gly Leu Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile
1 5 10
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<211> 18
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 69
Ala Val Gly Leu Leu Ala Pro Pro Gly Gly Leu Ser Gly Arg Ser Asp
1 5 10 15
Asn Ile
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 70
Gly Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn His Gly Gly Ala Val Gly Leu Leu
1 5 10 15
Ala Pro Pro
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 71
Gly Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn His Gly Gly Val His Met Pro Leu
1 5 10 15
Gly Phe Leu Gly Pro
20
<210> 72
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 72
Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn His Gly Gly Val His Met Pro Leu Gly
1 5 10 15
Phe Leu Gly Pro
20
<210> 73
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 73
Ile Ser Ser Gly Leu Ser Ser
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 74
Pro Val Gly Tyr Thr Ser Ser Leu
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 75
Asp Trp Leu Tyr Trp Pro Gly Ile
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 76
Leu Lys Ala Ala Pro Arg Trp Ala
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 77
Gly Pro Ser His Leu Val Leu Thr
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 78
Leu Pro Gly Gly Leu Ser Pro Trp
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 79
Met Gly Leu Phe Ser Glu Ala Gly
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 80
Ser Pro Leu Pro Leu Arg Val Pro
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 81
Arg Met His Leu Arg Ser Leu Gly
1 5
<210> 82
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 82
Leu Leu Ala Pro Ser His Arg Ala
1 5
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 83
Gly Pro Arg Ser Phe Gly Leu
1 5
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<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 84
Gly Pro Arg Ser Phe Gly
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 85
Ser Ala Arg Gly Pro Ser Arg Trp
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 86
Gly Gly Trp His Thr Gly Arg Asn
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 87
His Thr Gly Arg Ser Gly Ala Leu
1 5
<210> 88
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 88
Ala Ala Arg Gly Pro Ala Ile His
1 5
<210> 89
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 89
Arg Gly Pro Ala Phe Asn Pro Met
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 90
Ser Ser Arg Gly Pro Ala Tyr Leu
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 91
Arg Gly Pro Ala Thr Pro Ile Met
1 5
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<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 92
Arg Gly Pro Ala
1
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<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 93
Gly Gly Gln Pro Ser Gly Met Trp Gly Trp
1 5 10
<210> 94
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 94
Phe Pro Arg Pro Leu Gly Ile Thr Gly Leu
1 5 10
<210> 95
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 95
Ser Pro Leu Thr Gly Arg Ser Gly
1 5
<210> 96
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 96
Ser Ala Gly Phe Ser Leu Pro Ala
1 5
<210> 97
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 97
Leu Ala Pro Leu Gly Leu Gln Arg Arg
1 5
<210> 98
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 98
Ser Gly Gly Pro Leu Gly Val Arg
1 5
<210> 99
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 99
Pro Leu Gly Leu
1
<210> 100
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 100
Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile
1 5
<210> 101
<211> 165
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 101
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Lys Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu
165
<210> 102
<211> 169
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 102
Cys Asp Leu Pro His Thr His Asn Leu Arg Asn Lys Arg Ala Phe Thr
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Leu Ser Pro Val Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg Lys Asp Phe Gly Phe Pro Leu Glu Lys Val Asp Gly Gln Gln Ile
35 40 45
Gln Lys Ala Gln Ala Ile Pro Val Leu His Glu Leu Thr Gln Gln Ile
50 55 60
Leu Ser Leu Phe Thr Ser Lys Glu Ser Ser Thr Ala Trp Asp Ala Ser
65 70 75 80
Leu Leu Asp Ser Phe Cys Asn Asp Leu Gln Gln Gln Leu Ser Gly Leu
85 90 95
Gln Ala Cys Leu Met Gln Gln Val Gly Val Gln Glu Ser Pro Leu Thr
100 105 110
Gln Glu Asp Ser Leu Leu Ala Val Arg Glu Tyr Phe His Arg Ile Thr
115 120 125
Val Tyr Leu Arg Glu Lys Lys His Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val
130 135 140
Arg Ala Glu Val Trp Arg Ala Leu Ser Ser Ser Ala Asn Leu Leu Gly
145 150 155 160
Arg Leu Arg Glu Glu Arg Asn Glu Ser
165
<210> 103
<211> 167
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 103
Cys Asp Leu Pro His Thr Tyr Asn Leu Arg Asn Lys Arg Ala Leu Lys
1 5 10 15
Val Leu Ala Gln Met Arg Arg Leu Pro Phe Leu Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg Gln Asp Phe Gly Phe Pro Leu Glu Lys Val Asp Asn Gln Gln Ile
35 40 45
Gln Lys Ala Gln Ala Ile Pro Val Leu Arg Asp Leu Thr Gln Gln Thr
50 55 60
Leu Asn Leu Phe Thr Ser Lys Ala Ser Ser Ala Ala Trp Asn Ala Thr
65 70 75 80
Leu Leu Asp Ser Phe Cys Asn Asp Leu His Gln Gln Leu Asn Asp Leu
85 90 95
Gln Thr Cys Leu Met Gln Gln Val Gly Val Gln Glu Pro Pro Leu Thr
100 105 110
Gln Glu Asp Ala Leu Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe His Arg Ile Thr
115 120 125
Val Tyr Leu Arg Glu Lys Lys His Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val
130 135 140
Arg Ala Glu Val Trp Arg Ala Leu Ser Ser Ser Val Asn Leu Leu Pro
145 150 155 160
Arg Leu Ser Glu Glu Lys Glu
165
<210> 104
<211> 165
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 104
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu
165
<210> 105
<211> 495
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 105
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Lys Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser
165 170 175
Arg Arg Thr Leu Met Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe
180 185 190
Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe
195 200 205
Gly Asn Gln Phe Gln Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met
210 215 220
Ile Gln Gln Ile Phe Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala
225 230 235 240
Trp Asp Glu Thr Leu Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln
245 250 255
Leu Asn Asp Leu Glu Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu
260 265 270
Thr Pro Leu Met Asn Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe
275 280 285
Gln Arg Ile Thr Leu Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala
290 295 300
Trp Glu Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr
305 310 315 320
Asn Leu Gln Glu Ser Leu Arg Ser Lys Glu Cys Asp Leu Pro Gln Thr
325 330 335
His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met Leu Leu Ala Gln Met Arg
340 345 350
Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg Arg Asp Phe Gly Phe
355 360 365
Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln Lys Ala Glu Thr Ile Pro
370 375 380
Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe Asn Leu Phe Ser Thr Lys
385 390 395 400
Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu Leu Asp Lys Phe Tyr Thr
405 410 415
Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu Ala Cys Val Ile Gln Gly
420 425 430
Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Asn Glu Asp Ser Ile Leu Ala
435 440 445
Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu Tyr Leu Lys Glu Lys Lys
450 455 460
Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser
465 470 475 480
Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser Leu Arg Ser Lys Glu
485 490 495
<210> 106
<211> 166
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 106
Met Ser Tyr Asn Leu Leu Gly Phe Leu Gln Arg Ser Ser Asn Phe Gln
1 5 10 15
Cys Gln Lys Leu Leu Trp Gln Leu Asn Gly Arg Leu Glu Tyr Cys Leu
20 25 30
Lys Asp Arg Met Asn Phe Asp Ile Pro Glu Glu Ile Lys Gln Leu Gln
35 40 45
Gln Phe Gln Lys Glu Asp Ala Ala Leu Thr Ile Tyr Glu Met Leu Gln
50 55 60
Asn Ile Phe Ala Ile Phe Arg Gln Asp Ser Ser Ser Thr Gly Trp Asn
65 70 75 80
Glu Thr Ile Val Glu Asn Leu Leu Ala Asn Val Tyr His Gln Ile Asn
85 90 95
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100 105 110
Arg Gly Lys Leu Met Ser Ser Leu His Leu Lys Arg Tyr Tyr Gly Arg
115 120 125
Ile Leu His Tyr Leu Lys Ala Lys Glu Tyr Ser His Cys Ala Trp Thr
130 135 140
Ile Val Arg Val Glu Ile Leu Arg Asn Phe Tyr Phe Ile Asn Arg Leu
145 150 155 160
Thr Gly Tyr Leu Arg Asn
165
<210> 107
<211> 165
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 107
Ser Tyr Asn Leu Leu Gly Phe Leu Gln Arg Ser Ser Asn Phe Gln Ser
1 5 10 15
Gln Lys Leu Leu Trp Gln Leu Asn Gly Arg Leu Glu Tyr Cys Leu Lys
20 25 30
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35 40 45
Phe Gln Lys Glu Asp Ala Ala Leu Thr Ile Tyr Glu Met Leu Gln Asn
50 55 60
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65 70 75 80
Thr Ile Val Glu Asn Leu Leu Ala Asn Val Tyr His Gln Ile Asn His
85 90 95
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100 105 110
Gly Lys Leu Met Ser Ser Leu His Leu Lys Arg Tyr Tyr Gly Arg Ile
115 120 125
Leu His Tyr Leu Lys Ala Lys Glu Tyr Ser His Cys Ala Trp Thr Ile
130 135 140
Val Arg Val Glu Ile Leu Arg Asn Phe Tyr Phe Ile Asn Arg Leu Thr
145 150 155 160
Gly Tyr Leu Arg Asn
165
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 108
Met Asn Asn Arg Trp Ile Leu His Ala Ala Phe Leu Leu Cys Phe Ser
1 5 10 15
Thr Thr Ala Leu Ser Ile Asn Tyr Lys Gln Leu Gln Leu Gln Glu Arg
20 25 30
Thr Asn Ile Arg Lys Cys Gln Glu Leu Leu Glu Gln Leu Asn Gly Lys
35 40 45
Ile Asn Leu Thr Tyr Arg Ala Asp Phe Lys Ile Pro Met Glu Met Thr
50 55 60
Glu Lys Met Gln Lys Ser Tyr Thr Ala Phe Ala Ile Gln Glu Met Leu
65 70 75 80
Gln Asn Val Phe Leu Val Phe Arg Asn Asn Phe Ser Ser Thr Gly Trp
85 90 95
Asn Glu Thr Ile Val Val Arg Leu Leu Asp Glu Leu His Gln Gln Thr
100 105 110
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130 135 140
Val Gln Arg Tyr Leu Lys Leu Met Lys Tyr Asn Ser Tyr Ala Trp Met
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Val Val Arg Ala Glu Ile Phe Arg Asn Phe Leu Ile Ile Arg Arg Leu
165 170 175
Thr Arg Asn Phe Gln Asn
180
<210> 109
<211> 184
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 109
Met Ala Asn Arg Trp Thr Leu His Ile Ala Phe Leu Leu Cys Phe Ser
1 5 10 15
Thr Thr Ala Leu Ser Ile Asp Tyr Lys Gln Leu Gln Phe Arg Gln Ser
20 25 30
Thr Ser Ile Arg Thr Cys Gln Lys Leu Leu Arg Gln Leu Asn Gly Arg
35 40 45
Leu Asn Leu Ser Tyr Arg Thr Asp Phe Lys Ile Pro Met Glu Val Met
50 55 60
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65 70 75 80
Met Leu Gln Asn Val Phe Leu Val Phe Arg Ser Asn Phe Ser Ser Thr
85 90 95
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115 120 125
Leu Thr Trp Val Thr Ser Thr Thr Thr Leu Gly Leu Lys Ser Tyr Tyr
130 135 140
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165 170 175
Arg Leu Asn Arg Asn Phe Gln Asn
180
<210> 110
<211> 173
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 110
Met Cys Asp Leu Pro Gln Asn His Gly Leu Leu Ser Arg Asn Thr Leu
1 5 10 15
Val Leu Leu His Gln Met Arg Arg Ile Ser Pro Phe Leu Cys Leu Lys
20 25 30
Asp Arg Arg Asp Phe Arg Phe Pro Gln Glu Met Val Lys Gly Ser Gln
35 40 45
Leu Gln Lys Ala His Val Met Ser Val Leu His Glu Met Leu Gln Gln
50 55 60
Ile Phe Ser Leu Phe His Thr Glu Arg Ser Ser Ala Ala Trp Asn Met
65 70 75 80
Thr Leu Leu Asp Gln Leu His Thr Gly Leu His Gln Gln Leu Gln His
85 90 95
Leu Glu Thr Cys Leu Leu Gln Val Val Gly Glu Gly Glu Ser Ala Gly
100 105 110
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Arg Val Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Asp Cys Ala Trp Glu Val
130 135 140
Val Arg Met Glu Ile Met Lys Ser Leu Phe Leu Ser Thr Asn Met Gln
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Glu Arg Leu Arg Ser Lys Asp Arg Asp Leu Gly Ser Ser
165 170
<210> 111
<211> 271
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 111
Met Ala Lys Val Pro Asp Met Phe Glu Asp Leu Lys Asn Cys Tyr Ser
1 5 10 15
Glu Asn Glu Glu Asp Ser Ser Ser Ile Asp His Leu Ser Leu Asn Gln
20 25 30
Lys Ser Phe Tyr His Val Ser Tyr Gly Pro Leu His Glu Gly Cys Met
35 40 45
Asp Gln Ser Val Ser Leu Ser Ile Ser Glu Thr Ser Lys Thr Ser Lys
50 55 60
Leu Thr Phe Lys Glu Ser Met Val Val Val Ala Thr Asn Gly Lys Val
65 70 75 80
Leu Lys Lys Arg Arg Leu Ser Leu Ser Gln Ser Ile Thr Asp Asp Asp
85 90 95
Leu Glu Ala Ile Ala Asn Asp Ser Glu Glu Glu Ile Ile Lys Pro Arg
100 105 110
Ser Ala Pro Phe Ser Phe Leu Ser Asn Val Lys Tyr Asn Phe Met Arg
115 120 125
Ile Ile Lys Tyr Glu Phe Ile Leu Asn Asp Ala Leu Asn Gln Ser Ile
130 135 140
Ile Arg Ala Asn Asp Gln Tyr Leu Thr Ala Ala Ala Leu His Asn Leu
145 150 155 160
Asp Glu Ala Val Lys Phe Asp Met Gly Ala Tyr Lys Ser Ser Lys Asp
165 170 175
Asp Ala Lys Ile Thr Val Ile Leu Arg Ile Ser Lys Thr Gln Leu Tyr
180 185 190
Val Thr Ala Gln Asp Glu Asp Gln Pro Val Leu Leu Lys Glu Met Pro
195 200 205
Glu Ile Pro Lys Thr Ile Thr Gly Ser Glu Thr Asn Leu Leu Phe Phe
210 215 220
Trp Glu Thr His Gly Thr Lys Asn Tyr Phe Thr Ser Val Ala His Pro
225 230 235 240
Asn Leu Phe Ile Ala Thr Lys Gln Asp Tyr Trp Val Cys Leu Ala Gly
245 250 255
Gly Pro Pro Ser Ile Thr Asp Phe Gln Ile Leu Glu Asn Gln Ala
260 265 270
<210> 112
<211> 270
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 112
Met Ala Lys Val Pro Asp Leu Phe Glu Asp Leu Lys Asn Cys Tyr Ser
1 5 10 15
Glu Asn Glu Asp Tyr Ser Ser Ala Ile Asp His Leu Ser Leu Asn Gln
20 25 30
Lys Ser Phe Tyr Asp Ala Ser Tyr Gly Ser Leu His Glu Thr Cys Thr
35 40 45
Asp Gln Phe Val Ser Leu Arg Thr Ser Glu Thr Ser Lys Met Ser Asn
50 55 60
Phe Thr Phe Lys Glu Ser Arg Val Thr Val Ser Ala Thr Ser Ser Asn
65 70 75 80
Gly Lys Ile Leu Lys Lys Arg Arg Leu Ser Phe Ser Glu Thr Phe Thr
85 90 95
Glu Asp Asp Leu Gln Ser Ile Thr His Asp Leu Glu Glu Thr Ile Gln
100 105 110
Pro Arg Ser Ala Pro Tyr Thr Tyr Gln Ser Asp Leu Arg Tyr Lys Leu
115 120 125
Met Lys Leu Val Arg Gln Lys Phe Val Met Asn Asp Ser Leu Asn Gln
130 135 140
Thr Ile Tyr Gln Asp Val Asp Lys His Tyr Leu Ser Thr Thr Trp Leu
145 150 155 160
Asn Asp Leu Gln Gln Glu Val Lys Phe Asp Met Tyr Ala Tyr Ser Ser
165 170 175
Gly Gly Asp Asp Ser Lys Tyr Pro Val Thr Leu Lys Ile Ser Asp Ser
180 185 190
Gln Leu Phe Val Ser Ala Gln Gly Glu Asp Gln Pro Val Leu Leu Lys
195 200 205
Glu Leu Pro Glu Thr Pro Lys Leu Ile Thr Gly Ser Glu Thr Asp Leu
210 215 220
Ile Phe Phe Trp Lys Ser Ile Asn Ser Lys Asn Tyr Phe Thr Ser Ala
225 230 235 240
Ala Tyr Pro Glu Leu Phe Ile Ala Thr Lys Glu Gln Ser Arg Val His
245 250 255
Leu Ala Arg Gly Leu Pro Ser Met Thr Asp Phe Gln Ile Ser
260 265 270
<210> 113
<211> 269
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 113
Met Ala Glu Val Pro Glu Leu Ala Ser Glu Met Met Ala Tyr Tyr Ser
1 5 10 15
Gly Asn Glu Asp Asp Leu Phe Phe Glu Ala Asp Gly Pro Lys Gln Met
20 25 30
Lys Cys Ser Phe Gln Asp Leu Asp Leu Cys Pro Leu Asp Gly Gly Ile
35 40 45
Gln Leu Arg Ile Ser Asp His His Tyr Ser Lys Gly Phe Arg Gln Ala
50 55 60
Ala Ser Val Val Val Ala Met Asp Lys Leu Arg Lys Met Leu Val Pro
65 70 75 80
Cys Pro Gln Thr Phe Gln Glu Asn Asp Leu Ser Thr Phe Phe Pro Phe
85 90 95
Ile Phe Glu Glu Glu Pro Ile Phe Phe Asp Thr Trp Asp Asn Glu Ala
100 105 110
Tyr Val His Asp Ala Pro Val Arg Ser Leu Asn Cys Thr Leu Arg Asp
115 120 125
Ser Gln Gln Lys Ser Leu Val Met Ser Gly Pro Tyr Glu Leu Lys Ala
130 135 140
Leu His Leu Gln Gly Gln Asp Met Glu Gln Gln Val Val Phe Ser Met
145 150 155 160
Ser Phe Val Gln Gly Glu Glu Ser Asn Asp Lys Ile Pro Val Ala Leu
165 170 175
Gly Leu Lys Glu Lys Asn Leu Tyr Leu Ser Cys Val Leu Lys Asp Asp
180 185 190
Lys Pro Thr Leu Gln Leu Glu Ser Val Asp Pro Lys Asn Tyr Pro Lys
195 200 205
Lys Lys Met Glu Lys Arg Phe Val Phe Asn Lys Ile Glu Ile Asn Asn
210 215 220
Lys Leu Glu Phe Glu Ser Ala Gln Phe Pro Asn Trp Tyr Ile Ser Thr
225 230 235 240
Ser Gln Ala Glu Asn Met Pro Val Phe Leu Gly Gly Thr Lys Gly Gly
245 250 255
Gln Asp Ile Thr Asp Phe Thr Met Gln Phe Val Ser Ser
260 265
<210> 114
<211> 269
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 114
Met Ala Thr Val Pro Glu Leu Asn Cys Glu Met Pro Pro Phe Asp Ser
1 5 10 15
Asp Glu Asn Asp Leu Phe Phe Glu Val Asp Gly Pro Gln Lys Met Lys
20 25 30
Gly Cys Phe Gln Thr Phe Asp Leu Gly Cys Pro Asp Glu Ser Ile Gln
35 40 45
Leu Gln Ile Ser Gln Gln His Ile Asn Lys Ser Phe Arg Gln Ala Val
50 55 60
Ser Leu Ile Val Ala Val Glu Lys Leu Trp Gln Leu Pro Val Ser Phe
65 70 75 80
Pro Trp Thr Phe Gln Asp Glu Asp Met Ser Thr Phe Phe Ser Phe Ile
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Pro Ile Leu Cys Asp Ser Trp Asp Asp Asp Asp Asn
100 105 110
Leu Leu Val Cys Asp Val Pro Ile Arg Gln Leu His Tyr Arg Leu Arg
115 120 125
Asp Glu Gln Gln Lys Ser Leu Val Leu Ser Asp Pro Tyr Glu Leu Lys
130 135 140
Ala Leu His Leu Asn Gly Gln Asn Ile Asn Gln Gln Val Ile Phe Ser
145 150 155 160
Met Ser Phe Val Gln Gly Glu Pro Ser Asn Asp Lys Ile Pro Val Ala
165 170 175
Leu Gly Leu Lys Gly Lys Asn Leu Tyr Leu Ser Cys Val Met Lys Asp
180 185 190
Gly Thr Pro Thr Leu Gln Leu Glu Ser Val Asp Pro Lys Gln Tyr Pro
195 200 205
Lys Lys Lys Met Glu Lys Arg Phe Val Phe Asn Lys Ile Glu Val Lys
210 215 220
Ser Lys Val Glu Phe Glu Ser Ala Glu Phe Pro Asn Trp Tyr Ile Ser
225 230 235 240
Thr Ser Gln Ala Glu His Lys Pro Val Phe Leu Gly Asn Asn Ser Gly
245 250 255
Gln Asp Ile Ile Asp Phe Thr Met Glu Ser Val Ser Ser
260 265
<210> 115
<211> 177
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 115
Met Glu Ile Cys Arg Gly Leu Arg Ser His Leu Ile Thr Leu Leu Leu
1 5 10 15
Phe Leu Phe His Ser Glu Thr Ile Cys Arg Pro Ser Gly Arg Lys Ser
20 25 30
Ser Lys Met Gln Ala Phe Arg Ile Trp Asp Val Asn Gln Lys Thr Phe
35 40 45
Tyr Leu Arg Asn Asn Gln Leu Val Ala Gly Tyr Leu Gln Gly Pro Asn
50 55 60
Val Asn Leu Glu Glu Lys Ile Asp Val Val Pro Ile Glu Pro His Ala
65 70 75 80
Leu Phe Leu Gly Ile His Gly Gly Lys Met Cys Leu Ser Cys Val Lys
85 90 95
Ser Gly Asp Glu Thr Arg Leu Gln Leu Glu Ala Val Asn Ile Thr Asp
100 105 110
Leu Ser Glu Asn Arg Lys Gln Asp Lys Arg Phe Ala Phe Ile Arg Ser
115 120 125
Asp Ser Gly Pro Thr Thr Ser Phe Glu Ser Ala Ala Cys Pro Gly Trp
130 135 140
Phe Leu Cys Thr Ala Met Glu Ala Asp Gln Pro Val Ser Leu Thr Asn
145 150 155 160
Met Pro Asp Glu Gly Val Met Val Thr Lys Phe Tyr Phe Gln Glu Asp
165 170 175
Glu
<210> 116
<211> 178
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 116
Met Glu Ile Cys Trp Gly Pro Tyr Ser His Leu Ile Ser Leu Leu Leu
1 5 10 15
Ile Leu Leu Phe His Ser Glu Ala Ala Cys Arg Pro Ser Gly Lys Arg
20 25 30
Pro Cys Lys Met Gln Ala Phe Arg Ile Trp Asp Thr Asn Gln Lys Thr
35 40 45
Phe Tyr Leu Arg Asn Asn Gln Leu Ile Ala Gly Tyr Leu Gln Gly Pro
50 55 60
Asn Ile Lys Leu Glu Glu Lys Ile Asp Met Val Pro Ile Asp Leu His
65 70 75 80
Ser Val Phe Leu Gly Ile His Gly Gly Lys Leu Cys Leu Ser Cys Ala
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Lys Ser Gly Asp Asp Ile Lys Leu Gln Leu Glu Glu Val Asn Ile Thr
100 105 110
Asp Leu Ser Lys Asn Lys Glu Glu Asp Lys Arg Phe Thr Phe Ile Arg
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Ser Glu Lys Gly Pro Thr Thr Ser Phe Glu Ser Ala Ala Cys Pro Gly
130 135 140
Trp Phe Leu Cys Thr Thr Leu Glu Ala Asp Arg Pro Val Ser Leu Thr
145 150 155 160
Asn Thr Pro Glu Glu Pro Leu Ile Val Thr Lys Phe Tyr Phe Gln Glu
165 170 175
Asp Gln
<210> 117
<211> 193
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 117
Met Ala Ala Glu Pro Val Glu Asp Asn Cys Ile Asn Phe Val Ala Met
1 5 10 15
Lys Phe Ile Asp Asn Thr Leu Tyr Phe Ile Ala Glu Asp Asp Glu Asn
20 25 30
Leu Glu Ser Asp Tyr Phe Gly Lys Leu Glu Ser Lys Leu Ser Val Ile
35 40 45
Arg Asn Leu Asn Asp Gln Val Leu Phe Ile Asp Gln Gly Asn Arg Pro
50 55 60
Leu Phe Glu Asp Met Thr Asp Ser Asp Cys Arg Asp Asn Ala Pro Arg
65 70 75 80
Thr Ile Phe Ile Ile Ser Met Tyr Lys Asp Ser Gln Pro Arg Gly Met
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
Lys Asp Thr Lys Ser Asp Ile Ile Phe Phe Gln Arg Ser Val Pro Gly
130 135 140
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145 150 155 160
Leu Ala Cys Glu Lys Glu Arg Asp Leu Phe Lys Leu Ile Leu Lys Lys
165 170 175
Glu Asp Glu Leu Gly Asp Arg Ser Ile Met Phe Thr Val Gln Asn Glu
180 185 190
Asp
<210> 118
<211> 192
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 118
Met Ala Ala Met Ser Glu Asp Ser Cys Val Asn Phe Lys Glu Met Met
1 5 10 15
Phe Ile Asp Asn Thr Leu Tyr Phe Ile Pro Glu Glu Asn Gly Asp Leu
20 25 30
Glu Ser Asp Asn Phe Gly Arg Leu His Cys Thr Thr Ala Val Ile Arg
35 40 45
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50 55 60
Glu Asp Met Thr Asp Ile Asp Gln Ser Ala Ser Glu Pro Gln Thr Arg
65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
Lys Ile Ile Ser Phe Glu Glu Met Asp Pro Pro Glu Asn Ile Asp Asp
115 120 125
Ile Gln Ser Asp Leu Ile Phe Phe Gln Lys Arg Val Pro Gly His Asn
130 135 140
Lys Met Glu Phe Glu Ser Ser Leu Tyr Glu Gly His Phe Leu Ala Cys
145 150 155 160
Gln Lys Glu Asp Asp Ala Phe Lys Leu Ile Leu Lys Lys Lys Asp Glu
165 170 175
Asn Gly Asp Lys Ser Val Met Phe Thr Leu Thr Asn Leu His Gln Ser
180 185 190
<210> 119
<211> 150
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 119
Met Tyr Arg Met Gln Leu Leu Ser Cys Ile Ala Leu Ser Leu Ala Leu
1 5 10 15
Val Thr Asn Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu
20 25 30
Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile
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65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe
130 135 140
Cys Gln Ser Ile Ile Ser
145 150
<210> 120
<211> 169
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 120
Met Tyr Ser Met Gln Leu Ala Ser Cys Val Thr Leu Thr Leu Val Leu
1 5 10 15
Leu Val Asn Ser Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Ser Ser Ser Thr Ala
20 25 30
Glu Ala Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln Gln His Leu
35 40 45
Glu Gln Leu Leu Met Asp Leu Gln Glu Leu Leu Ser Arg Met Glu Asn
50 55 60
Tyr Arg Asn Leu Lys Leu Pro Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Leu
65 70 75 80
Pro Lys Gln Ala Thr Glu Leu Lys Asp Leu Gln Cys Leu Glu Asp Glu
85 90 95
Leu Gly Pro Leu Arg His Val Leu Asp Leu Thr Gln Ser Lys Ser Phe
100 105 110
Gln Leu Glu Asp Ala Glu Asn Phe Ile Ser Asn Ile Arg Val Thr Val
115 120 125
Val Lys Leu Lys Gly Ser Asp Asn Thr Phe Glu Cys Gln Phe Asp Asp
130 135 140
Glu Ser Ala Thr Val Val Asp Phe Leu Arg Arg Trp Ile Ala Phe Cys
145 150 155 160
Gln Ser Ile Ile Ser Thr Ser Pro Gln
165
<210> 121
<211> 153
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 121
Met Gly Leu Thr Ser Gln Leu Leu Pro Pro Leu Phe Phe Leu Leu Ala
1 5 10 15
Cys Ala Gly Asn Phe Val His Gly His Lys Cys Asp Ile Thr Leu Gln
20 25 30
Glu Ile Ile Lys Thr Leu Asn Ser Leu Thr Glu Gln Lys Thr Leu Cys
35 40 45
Thr Glu Leu Thr Val Thr Asp Ile Phe Ala Ala Ser Lys Asn Thr Thr
50 55 60
Glu Lys Glu Thr Phe Cys Arg Ala Ala Thr Val Leu Arg Gln Phe Tyr
65 70 75 80
Ser His His Glu Lys Asp Thr Arg Cys Leu Gly Ala Thr Ala Gln Gln
85 90 95
Phe His Arg His Lys Gln Leu Ile Arg Phe Leu Lys Arg Leu Asp Arg
100 105 110
Asn Leu Trp Gly Leu Ala Gly Leu Asn Ser Cys Pro Val Lys Glu Ala
115 120 125
Asn Gln Ser Thr Leu Glu Asn Phe Leu Glu Arg Leu Lys Thr Ile Met
130 135 140
Arg Glu Lys Tyr Ser Lys Cys Ser Ser
145 150
<210> 122
<211> 140
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 122
Met Gly Leu Asn Pro Gln Leu Val Val Ile Leu Leu Phe Phe Leu Glu
1 5 10 15
Cys Thr Arg Ser His Ile His Gly Cys Asp Lys Asn His Leu Arg Glu
20 25 30
Ile Ile Gly Ile Leu Asn Glu Val Thr Gly Glu Gly Thr Pro Cys Thr
35 40 45
Glu Met Asp Val Pro Asn Val Leu Thr Ala Thr Lys Asn Thr Thr Glu
50 55 60
Ser Glu Leu Val Cys Arg Ala Ser Lys Val Leu Arg Ile Phe Tyr Leu
65 70 75 80
Lys His Gly Lys Thr Pro Cys Leu Lys Lys Asn Ser Ser Val Leu Met
85 90 95
Glu Leu Gln Arg Leu Phe Arg Ala Phe Arg Cys Leu Asp Ser Ser Ile
100 105 110
Ser Cys Thr Met Asn Glu Ser Lys Ser Thr Ser Leu Lys Asp Phe Leu
115 120 125
Glu Ser Leu Lys Ser Ile Met Gln Met Asp Tyr Ser
130 135 140
<210> 123
<211> 177
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 123
Met Phe His Val Ser Phe Arg Tyr Ile Phe Gly Leu Pro Pro Leu Ile
1 5 10 15
Leu Val Leu Leu Pro Val Ala Ser Ser Asp Cys Asp Ile Glu Gly Lys
20 25 30
Asp Gly Lys Gln Tyr Glu Ser Val Leu Met Val Ser Ile Asp Gln Leu
35 40 45
Leu Asp Ser Met Lys Glu Ile Gly Ser Asn Cys Leu Asn Asn Glu Phe
50 55 60
Asn Phe Phe Lys Arg His Ile Cys Asp Ala Asn Lys Glu Gly Met Phe
65 70 75 80
Leu Phe Arg Ala Ala Arg Lys Leu Arg Gln Phe Leu Lys Met Asn Ser
85 90 95
Thr Gly Asp Phe Asp Leu His Leu Leu Lys Val Ser Glu Gly Thr Thr
100 105 110
Ile Leu Leu Asn Cys Thr Gly Gln Val Lys Gly Arg Lys Pro Ala Ala
115 120 125
Leu Gly Glu Ala Gln Pro Thr Lys Ser Leu Glu Glu Asn Lys Ser Leu
130 135 140
Lys Glu Gln Lys Lys Leu Asn Asp Leu Cys Phe Leu Lys Arg Leu Leu
145 150 155 160
Gln Glu Ile Lys Thr Cys Trp Asn Lys Ile Leu Met Gly Thr Lys Glu
165 170 175
His
<210> 124
<211> 154
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 124
Met Phe His Val Ser Phe Arg Tyr Ile Phe Gly Ile Pro Pro Leu Ile
1 5 10 15
Leu Val Leu Leu Pro Val Thr Ser Ser Glu Cys His Ile Lys Asp Lys
20 25 30
Glu Gly Lys Ala Tyr Glu Ser Val Leu Met Ile Ser Ile Asp Glu Leu
35 40 45
Asp Lys Met Thr Gly Thr Asp Ser Asn Cys Pro Asn Asn Glu Pro Asn
50 55 60
Phe Phe Arg Lys His Val Cys Asp Asp Thr Lys Glu Ala Ala Phe Leu
65 70 75 80
Asn Arg Ala Ala Arg Lys Leu Lys Gln Phe Leu Lys Met Asn Ile Ser
85 90 95
Glu Glu Phe Asn Val His Leu Leu Thr Val Ser Gln Gly Thr Gln Thr
100 105 110
Leu Val Asn Cys Thr Ser Lys Glu Glu Lys Asn Val Lys Glu Gln Lys
115 120 125
Lys Asn Asp Ala Cys Phe Leu Lys Arg Leu Leu Arg Glu Ile Lys Thr
130 135 140
Cys Trp Asn Lys Ile Leu Lys Gly Ser Ile
145 150
<210> 125
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 125
Met Leu Leu Ala Met Val Leu Thr Ser Ala Leu Leu Leu Cys Ser Val
1 5 10 15
Ala Gly Gln Gly Cys Pro Thr Leu Ala Gly Ile Leu Asp Ile Asn Phe
20 25 30
Leu Ile Asn Lys Met Gln Glu Asp Pro Ala Ser Lys Cys His Cys Ser
35 40 45
Ala Asn Val Thr Ser Cys Leu Cys Leu Gly Ile Pro Ser Asp Asn Cys
50 55 60
Thr Arg Pro Cys Phe Ser Glu Arg Leu Ser Gln Met Thr Asn Thr Thr
65 70 75 80
Met Gln Thr Arg Tyr Pro Leu Ile Phe Ser Arg Val Lys Lys Ser Val
85 90 95
Glu Val Leu Lys Asn Asn Lys Cys Pro Tyr Phe Ser Cys Glu Gln Pro
100 105 110
Cys Asn Gln Thr Thr Ala Gly Asn Ala Leu Thr Phe Leu Lys Ser Leu
115 120 125
Leu Glu Ile Phe Gln Lys Glu Lys Met Arg Gly Met Arg Gly Lys Ile
130 135 140
<210> 126
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 126
Met Leu Val Thr Tyr Ile Leu Ala Ser Val Leu Leu Phe Ser Ser Val
1 5 10 15
Leu Gly Gln Arg Cys Ser Thr Thr Trp Gly Ile Arg Asp Thr Asn Tyr
20 25 30
Leu Ile Glu Asn Leu Lys Asp Asp Pro Pro Ser Lys Cys Ser Cys Ser
35 40 45
Gly Asn Val Thr Ser Cys Leu Cys Leu Ser Val Pro Thr Asp Asp Cys
50 55 60
Thr Thr Pro Cys Tyr Arg Glu Gly Leu Leu Gln Leu Thr Asn Ala Thr
65 70 75 80
Gln Lys Ser Arg Leu Leu Pro Val Phe His Arg Val Lys Arg Ile Val
85 90 95
Glu Val Leu Lys Asn Ile Thr Cys Pro Ser Phe Ser Cys Glu Lys Pro
100 105 110
Cys Asn Gln Thr Met Ala Gly Asn Thr Leu Ser Phe Leu Lys Ser Leu
115 120 125
Leu Gly Thr Phe Gln Lys Thr Glu Met Gln Arg Gln Lys Ser Arg Pro
130 135 140
<210> 127
<211> 146
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 127
Met His Pro Leu Leu Asn Pro Leu Leu Leu Ala Leu Gly Leu Met Ala
1 5 10 15
Leu Leu Leu Thr Thr Val Ile Ala Leu Thr Cys Leu Gly Gly Phe Ala
20 25 30
Ser Pro Gly Pro Val Pro Pro Ser Thr Ala Leu Arg Glu Leu Ile Glu
35 40 45
Glu Leu Val Asn Ile Thr Gln Asn Gln Lys Ala Pro Leu Cys Asn Gly
50 55 60
Ser Met Val Trp Ser Ile Asn Leu Thr Ala Gly Met Tyr Cys Ala Ala
65 70 75 80
Leu Glu Ser Leu Ile Asn Val Ser Gly Cys Ser Ala Ile Glu Lys Thr
85 90 95
Gln Arg Met Leu Ser Gly Phe Cys Pro His Lys Val Ser Ala Gly Gln
100 105 110
Phe Ser Ser Leu His Val Arg Asp Thr Lys Ile Glu Val Ala Gln Phe
115 120 125
Val Lys Asp Leu Leu Leu His Leu Lys Lys Leu Phe Arg Glu Gly Arg
130 135 140
Phe Asn
145
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<211> 131
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 128
Met Ala Leu Trp Val Thr Ala Val Leu Ala Leu Ala Cys Leu Gly Gly
1 5 10 15
Leu Ala Ala Pro Gly Pro Val Pro Arg Ser Val Ser Leu Pro Leu Thr
20 25 30
Leu Lys Glu Leu Ile Glu Glu Leu Ser Asn Ile Thr Gln Asp Gln Thr
35 40 45
Pro Leu Cys Asn Gly Ser Met Val Trp Ser Val Asp Leu Ala Ala Gly
50 55 60
Gly Phe Cys Val Ala Leu Asp Ser Leu Thr Asn Ile Ser Asn Cys Asn
65 70 75 80
Ala Ile Tyr Arg Thr Gln Arg Ile Leu His Gly Leu Cys Asn Arg Lys
85 90 95
Ala Pro Thr Thr Val Ser Ser Leu Pro Asp Thr Lys Ile Glu Val Ala
100 105 110
His Phe Ile Thr Lys Leu Leu Ser Tyr Thr Lys Gln Leu Phe Arg His
115 120 125
Gly Pro Phe
130
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<211> 162
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 129
Met Arg Ile Ser Lys Pro His Leu Arg Ser Ile Ser Ile Gln Cys Tyr
1 5 10 15
Leu Cys Leu Leu Leu Asn Ser His Phe Leu Thr Glu Ala Gly Ile His
20 25 30
Val Phe Ile Leu Gly Cys Phe Ser Ala Gly Leu Pro Lys Thr Glu Ala
35 40 45
Asn Trp Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile
50 55 60
Gln Ser Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His
65 70 75 80
Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln
85 90 95
Val Ile Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu
100 105 110
Asn Leu Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val
115 120 125
Thr Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile
130 135 140
Lys Glu Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn
145 150 155 160
Thr Ser
<210> 130
<211> 162
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 130
Met Lys Ile Leu Lys Pro Tyr Met Arg Asn Thr Ser Ile Ser Cys Tyr
1 5 10 15
Leu Cys Phe Leu Leu Asn Ser His Phe Leu Thr Glu Ala Gly Ile His
20 25 30
Val Phe Ile Leu Gly Cys Val Ser Val Gly Leu Pro Lys Thr Glu Ala
35 40 45
Asn Trp Ile Asp Val Arg Tyr Asp Leu Glu Lys Ile Glu Ser Leu Ile
50 55 60
Gln Ser Ile His Ile Asp Thr Thr Leu Tyr Thr Asp Ser Asp Phe His
65 70 75 80
Pro Ser Cys Lys Val Thr Ala Met Asn Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln
85 90 95
Val Ile Leu His Glu Tyr Ser Asn Met Thr Leu Asn Glu Thr Val Arg
100 105 110
Asn Val Leu Tyr Leu Ala Asn Ser Thr Leu Ser Ser Asn Lys Asn Val
115 120 125
Ala Glu Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Thr Phe
130 135 140
Thr Glu Phe Leu Gln Ser Phe Ile Arg Ile Val Gln Met Phe Ile Asn
145 150 155 160
Thr Ser
<210> 131
<211> 152
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 131
Met Ser Arg Leu Pro Val Leu Leu Leu Leu Gln Leu Leu Val Arg Pro
1 5 10 15
Gly Leu Gln Ala Pro Met Thr Gln Thr Thr Pro Leu Lys Thr Ser Trp
20 25 30
Val Asn Cys Ser Asn Met Ile Asp Glu Ile Ile Thr His Leu Lys Gln
35 40 45
Pro Pro Leu Pro Leu Leu Asp Phe Asn Asn Leu Asn Gly Glu Asp Gln
50 55 60
Asp Ile Leu Met Glu Asn Asn Leu Arg Arg Pro Asn Leu Glu Ala Phe
65 70 75 80
Asn Arg Ala Val Lys Ser Leu Gln Asn Ala Ser Ala Ile Glu Ser Ile
85 90 95
Leu Lys Asn Leu Leu Pro Cys Leu Pro Leu Ala Thr Ala Ala Pro Thr
100 105 110
Arg His Pro Ile His Ile Lys Asp Gly Asp Trp Asn Glu Phe Arg Arg
115 120 125
Lys Leu Thr Phe Tyr Leu Lys Thr Leu Glu Asn Ala Gln Ala Gln Gln
130 135 140
Thr Thr Leu Ser Leu Ala Ile Phe
145 150
<210> 132
<211> 166
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 132
Met Val Leu Ala Ser Ser Thr Thr Ser Ile His Thr Met Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Leu Met Leu Phe His Leu Gly Leu Gln Ala Ser Ile Ser Gly Arg
20 25 30
Asp Thr His Arg Leu Thr Arg Thr Leu Asn Cys Ser Ser Ile Val Lys
35 40 45
Glu Ile Ile Gly Lys Leu Pro Glu Pro Glu Leu Lys Thr Asp Asp Glu
50 55 60
Gly Pro Ser Leu Arg Asn Lys Ser Phe Arg Arg Val Asn Leu Ser Lys
65 70 75 80
Phe Val Glu Ser Gln Gly Glu Val Asp Pro Glu Asp Arg Tyr Val Ile
85 90 95
Lys Ser Asn Leu Gln Lys Leu Asn Cys Cys Leu Pro Thr Ser Ala Asn
100 105 110
Asp Ser Ala Leu Pro Gly Val Phe Ile Arg Asp Leu Asp Asp Phe Arg
115 120 125
Lys Lys Leu Arg Phe Tyr Met Val His Leu Asn Asp Leu Glu Thr Val
130 135 140
Leu Thr Ser Arg Pro Pro Gln Pro Ala Ser Gly Ser Val Ser Pro Asn
145 150 155 160
Arg Gly Thr Val Glu Cys
165
<210> 133
<211> 134
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 133
Met Arg Met Leu Leu His Leu Ser Leu Leu Ala Leu Gly Ala Ala Tyr
1 5 10 15
Val Tyr Ala Ile Pro Thr Glu Ile Pro Thr Ser Ala Leu Val Lys Glu
20 25 30
Thr Leu Ala Leu Leu Ser Thr His Arg Thr Leu Leu Ile Ala Asn Glu
35 40 45
Thr Leu Arg Ile Pro Val Pro Val His Lys Asn His Gln Leu Cys Thr
50 55 60
Glu Glu Ile Phe Gln Gly Ile Gly Thr Leu Glu Ser Gln Thr Val Gln
65 70 75 80
Gly Gly Thr Val Glu Arg Leu Phe Lys Asn Leu Ser Leu Ile Lys Lys
85 90 95
Tyr Ile Asp Gly Gln Lys Lys Lys Cys Gly Glu Glu Arg Arg Arg Val
100 105 110
Asn Gln Phe Leu Asp Tyr Leu Gln Glu Phe Leu Gly Val Met Asn Thr
115 120 125
Glu Trp Ile Ile Glu Ser
130
<210> 134
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 134
Met Arg Arg Met Leu Leu His Leu Ser Val Leu Thr Leu Ser Cys Val
1 5 10 15
Trp Ala Thr Ala Met Glu Ile Pro Met Ser Thr Val Val Lys Glu Thr
20 25 30
Leu Thr Gln Leu Ser Ala His Arg Ala Leu Leu Thr Ser Asn Glu Thr
35 40 45
Met Arg Leu Pro Val Pro Thr His Lys Asn His Gln Leu Cys Ile Gly
50 55 60
Glu Ile Phe Gln Gly Leu Asp Ile Leu Lys Asn Gln Thr Val Arg Gly
65 70 75 80
Gly Thr Val Glu Met Leu Phe Gln Asn Leu Ser Leu Ile Lys Lys Tyr
85 90 95
Ile Asp Arg Gln Lys Glu Lys Cys Gly Glu Glu Arg Arg Arg Thr Arg
100 105 110
Gln Phe Leu Asp Tyr Leu Gln Glu Phe Leu Gly Val Met Ser Thr Glu
115 120 125
Trp Ala Met Glu Gly
130
<210> 135
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 135
Met Trp Leu Gln Ser Leu Leu Leu Leu Gly Thr Val Ala Cys Ser Ile
1 5 10 15
Ser Ala Pro Ala Arg Ser Pro Ser Pro Ser Thr Gln Pro Trp Glu His
20 25 30
Val Asn Ala Ile Gln Glu Ala Arg Arg Leu Leu Asn Leu Ser Arg Asp
35 40 45
Thr Ala Ala Glu Met Asn Glu Thr Val Glu Val Ile Ser Glu Met Phe
50 55 60
Asp Leu Gln Glu Pro Thr Cys Leu Gln Thr Arg Leu Glu Leu Tyr Lys
65 70 75 80
Gln Gly Leu Arg Gly Ser Leu Thr Lys Leu Lys Gly Pro Leu Thr Met
85 90 95
Met Ala Ser His Tyr Lys Gln His Cys Pro Pro Thr Pro Glu Thr Ser
100 105 110
Cys Ala Thr Gln Ile Ile Thr Phe Glu Ser Phe Lys Glu Asn Leu Lys
115 120 125
Asp Phe Leu Leu Val Ile Pro Phe Asp Cys Trp Glu Pro Val Gln Glu
130 135 140
<210> 136
<211> 141
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 136
Met Trp Leu Gln Asn Leu Leu Phe Leu Gly Ile Val Val Tyr Ser Leu
1 5 10 15
Ser Ala Pro Thr Arg Ser Pro Ile Thr Val Thr Arg Pro Trp Lys His
20 25 30
Val Glu Ala Ile Lys Glu Ala Leu Asn Leu Leu Asp Asp Met Pro Val
35 40 45
Thr Leu Asn Glu Glu Val Glu Val Val Ser Asn Glu Phe Ser Phe Lys
50 55 60
Lys Leu Thr Cys Val Gln Thr Arg Leu Lys Ile Phe Glu Gln Gly Leu
65 70 75 80
Arg Gly Asn Phe Thr Lys Leu Lys Gly Ala Leu Asn Met Thr Ala Ser
85 90 95
Tyr Tyr Gln Thr Tyr Cys Pro Pro Thr Pro Glu Thr Asp Cys Glu Thr
100 105 110
Gln Val Thr Thr Tyr Ala Asp Phe Ile Asp Ser Leu Lys Thr Phe Leu
115 120 125
Thr Asp Ile Pro Phe Glu Cys Lys Lys Pro Gly Gln Lys
130 135 140
<210> 137
<211> 212
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 137
Met Asn Ser Phe Ser Thr Ser Ala Phe Gly Pro Val Ala Phe Ser Leu
1 5 10 15
Gly Leu Leu Leu Val Leu Pro Ala Ala Phe Pro Ala Pro Val Pro Pro
20 25 30
Gly Glu Asp Ser Lys Asp Val Ala Ala Pro His Arg Gln Pro Leu Thr
35 40 45
Ser Ser Glu Arg Ile Asp Lys Gln Ile Arg Tyr Ile Leu Asp Gly Ile
50 55 60
Ser Ala Leu Arg Lys Glu Thr Cys Asn Lys Ser Asn Met Cys Glu Ser
65 70 75 80
Ser Lys Glu Ala Leu Ala Glu Asn Asn Leu Asn Leu Pro Lys Met Ala
85 90 95
Glu Lys Asp Gly Cys Phe Gln Ser Gly Phe Asn Glu Glu Thr Cys Leu
100 105 110
Val Lys Ile Ile Thr Gly Leu Leu Glu Phe Glu Val Tyr Leu Glu Tyr
115 120 125
Leu Gln Asn Arg Phe Glu Ser Ser Glu Glu Gln Ala Arg Ala Val Gln
130 135 140
Met Ser Thr Lys Val Leu Ile Gln Phe Leu Gln Lys Lys Ala Lys Asn
145 150 155 160
Leu Asp Ala Ile Thr Thr Pro Asp Pro Thr Thr Asn Ala Ser Leu Leu
165 170 175
Thr Lys Leu Gln Ala Gln Asn Gln Trp Leu Gln Asp Met Thr Thr His
180 185 190
Leu Ile Leu Arg Ser Phe Lys Glu Phe Leu Gln Ser Ser Leu Arg Ala
195 200 205
Leu Arg Gln Met
210
<210> 138
<211> 211
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 138
Met Lys Phe Leu Ser Ala Arg Asp Phe His Pro Val Ala Phe Leu Gly
1 5 10 15
Leu Met Leu Val Thr Thr Thr Ala Phe Pro Thr Ser Gln Val Arg Arg
20 25 30
Gly Asp Phe Thr Glu Asp Thr Thr Pro Asn Arg Pro Val Tyr Thr Thr
35 40 45
Ser Gln Val Gly Gly Leu Ile Thr His Val Leu Trp Glu Ile Val Glu
50 55 60
Met Arg Lys Glu Leu Cys Asn Gly Asn Ser Asp Cys Met Asn Asn Asp
65 70 75 80
Asp Ala Leu Ala Glu Asn Asn Leu Lys Leu Pro Glu Ile Gln Arg Asn
85 90 95
Asp Gly Cys Tyr Gln Thr Gly Tyr Asn Gln Glu Ile Cys Leu Leu Lys
100 105 110
Ile Ser Ser Gly Leu Leu Glu Tyr His Ser Tyr Leu Glu Tyr Met Lys
115 120 125
Asn Asn Leu Lys Asp Asn Lys Lys Asp Lys Ala Arg Val Leu Gln Arg
130 135 140
Asp Thr Glu Thr Leu Ile His Ile Phe Asn Gln Glu Val Lys Asp Leu
145 150 155 160
His Lys Ile Val Leu Pro Thr Pro Ile Ser Asn Ala Leu Leu Thr Asp
165 170 175
Lys Leu Glu Ser Gln Lys Glu Trp Leu Arg Thr Lys Thr Ile Gln Phe
180 185 190
Ile Leu Lys Ser Leu Glu Glu Phe Leu Lys Val Thr Leu Arg Ser Thr
195 200 205
Arg Gln Thr
210
<210> 139
<211> 199
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 139
Met Asn Cys Val Cys Arg Leu Val Leu Val Val Leu Ser Leu Trp Pro
1 5 10 15
Asp Thr Ala Val Ala Pro Gly Pro Pro Pro Gly Pro Pro Arg Val Ser
20 25 30
Pro Asp Pro Arg Ala Glu Leu Asp Ser Thr Val Leu Leu Thr Arg Ser
35 40 45
Leu Leu Ala Asp Thr Arg Gln Leu Ala Ala Gln Leu Arg Asp Lys Phe
50 55 60
Pro Ala Asp Gly Asp His Asn Leu Asp Ser Leu Pro Thr Leu Ala Met
65 70 75 80
Ser Ala Gly Ala Leu Gly Ala Leu Gln Leu Pro Gly Val Leu Thr Arg
85 90 95
Leu Arg Ala Asp Leu Leu Ser Tyr Leu Arg His Val Gln Trp Leu Arg
100 105 110
Arg Ala Gly Gly Ser Ser Leu Lys Thr Leu Glu Pro Glu Leu Gly Thr
115 120 125
Leu Gln Ala Arg Leu Asp Arg Leu Leu Arg Arg Leu Gln Leu Leu Met
130 135 140
Ser Arg Leu Ala Leu Pro Gln Pro Pro Pro Asp Pro Pro Ala Pro Pro
145 150 155 160
Leu Ala Pro Pro Ser Ser Ala Trp Gly Gly Ile Arg Ala Ala His Ala
165 170 175
Ile Leu Gly Gly Leu His Leu Thr Leu Asp Trp Ala Val Arg Gly Leu
180 185 190
Leu Leu Leu Lys Thr Arg Leu
195
<210> 140
<211> 199
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 140
Met Asn Cys Val Cys Arg Leu Val Leu Val Val Leu Ser Leu Trp Pro
1 5 10 15
Asp Arg Val Val Ala Pro Gly Pro Pro Ala Gly Ser Pro Arg Val Ser
20 25 30
Ser Asp Pro Arg Ala Asp Leu Asp Ser Ala Val Leu Leu Thr Arg Ser
35 40 45
Leu Leu Ala Asp Thr Arg Gln Leu Ala Ala Gln Met Arg Asp Lys Phe
50 55 60
Pro Ala Asp Gly Asp His Ser Leu Asp Ser Leu Pro Thr Leu Ala Met
65 70 75 80
Ser Ala Gly Thr Leu Gly Ser Leu Gln Leu Pro Gly Val Leu Thr Arg
85 90 95
Leu Arg Val Asp Leu Met Ser Tyr Leu Arg His Val Gln Trp Leu Arg
100 105 110
Arg Ala Gly Gly Pro Ser Leu Lys Thr Leu Glu Pro Glu Leu Gly Ala
115 120 125
Leu Gln Ala Arg Leu Glu Arg Leu Leu Arg Arg Leu Gln Leu Leu Met
130 135 140
Ser Arg Leu Ala Leu Pro Gln Ala Ala Pro Asp Gln Pro Val Ile Pro
145 150 155 160
Leu Gly Pro Pro Ala Ser Ala Trp Gly Ser Ile Arg Ala Ala His Ala
165 170 175
Ile Leu Gly Gly Leu His Leu Thr Leu Asp Trp Ala Val Arg Gly Leu
180 185 190
Leu Leu Leu Lys Thr Arg Leu
195
<210> 141
<211> 207
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 141
Met Ala Gly Pro Ala Thr Gln Ser Pro Met Lys Leu Met Ala Leu Gln
1 5 10 15
Leu Leu Leu Trp His Ser Ala Leu Trp Thr Val Gln Glu Ala Thr Pro
20 25 30
Leu Gly Pro Ala Ser Ser Leu Pro Gln Ser Phe Leu Leu Lys Cys Leu
35 40 45
Glu Gln Val Arg Lys Ile Gln Gly Asp Gly Ala Ala Leu Gln Glu Lys
50 55 60
Leu Val Ser Glu Cys Ala Thr Tyr Lys Leu Cys His Pro Glu Glu Leu
65 70 75 80
Val Leu Leu Gly His Ser Leu Gly Ile Pro Trp Ala Pro Leu Ser Ser
85 90 95
Cys Pro Ser Gln Ala Leu Gln Leu Ala Gly Cys Leu Ser Gln Leu His
100 105 110
Ser Gly Leu Phe Leu Tyr Gln Gly Leu Leu Gln Ala Leu Glu Gly Ile
115 120 125
Ser Pro Glu Leu Gly Pro Thr Leu Asp Thr Leu Gln Leu Asp Val Ala
130 135 140
Asp Phe Ala Thr Thr Ile Trp Gln Gln Met Glu Glu Leu Gly Met Ala
145 150 155 160
Pro Ala Leu Gln Pro Thr Gln Gly Ala Met Pro Ala Phe Ala Ser Ala
165 170 175
Phe Gln Arg Arg Ala Gly Gly Val Leu Val Ala Ser His Leu Gln Ser
180 185 190
Phe Leu Glu Val Ser Tyr Arg Val Leu Arg His Leu Ala Gln Pro
195 200 205
<210> 142
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 142
Met Ala Gln Leu Ser Ala Gln Arg Arg Met Lys Leu Met Ala Leu Gln
1 5 10 15
Leu Leu Leu Trp Gln Ser Ala Leu Trp Ser Gly Arg Glu Ala Val Pro
20 25 30
Leu Val Thr Val Ser Ala Leu Pro Pro Ser Leu Pro Leu Pro Arg Ser
35 40 45
Phe Leu Leu Lys Ser Leu Glu Gln Val Arg Lys Ile Gln Ala Ser Gly
50 55 60
Ser Val Leu Leu Glu Gln Leu Cys Ala Thr Tyr Lys Leu Cys His Pro
65 70 75 80
Glu Glu Leu Val Leu Leu Gly His Ser Leu Gly Ile Pro Lys Ala Ser
85 90 95
Leu Ser Gly Cys Ser Ser Gln Ala Leu Gln Gln Thr Gln Cys Leu Ser
100 105 110
Gln Leu His Ser Gly Leu Cys Leu Tyr Gln Gly Leu Leu Gln Ala Leu
115 120 125
Ser Gly Ile Ser Pro Ala Leu Ala Pro Thr Leu Asp Leu Leu Gln Leu
130 135 140
Asp Val Ala Asn Phe Ala Thr Thr Ile Trp Gln Gln Met Glu Asn Leu
145 150 155 160
Gly Val Ala Pro Thr Val Gln Pro Thr Gln Ser Ala Met Pro Ala Phe
165 170 175
Thr Ser Ala Phe Gln Arg Arg Ala Gly Gly Val Leu Ala Ile Ser Tyr
180 185 190
Leu Gln Gly Phe Leu Glu Thr Ala Arg Leu Ala Leu His His Leu Ala
195 200 205
<210> 143
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 143
Met Cys Pro Ala Arg Ser Leu Leu Leu Val Ala Thr Leu Val Leu Leu
1 5 10 15
Asp His Leu Ser Leu Ala Arg Asn Leu Pro Val Ala Thr Pro Asp Pro
20 25 30
Gly Met Phe Pro Cys Leu His His Ser Gln Asn Leu Leu Arg Ala Val
35 40 45
Ser Asn Met Leu Gln Lys Ala Arg Gln Thr Leu Glu Phe Tyr Pro Cys
50 55 60
Thr Ser Glu Glu Ile Asp His Glu Asp Ile Thr Lys Asp Lys Thr Ser
65 70 75 80
Thr Val Glu Ala Cys Leu Pro Leu Glu Leu Thr Lys Asn Glu Ser Cys
85 90 95
Leu Asn Ser Arg Glu Thr Ser Phe Ile Thr Asn Gly Ser Cys Leu Ala
100 105 110
Ser Arg Lys Thr Ser Phe Met Met Ala Leu Cys Leu Ser Ser Ile Tyr
115 120 125
Glu Asp Leu Lys Met Tyr Gln Val Glu Phe Lys Thr Met Asn Ala Lys
130 135 140
Leu Leu Met Asp Pro Lys Arg Gln Ile Phe Leu Asp Gln Asn Met Leu
145 150 155 160
Ala Val Ile Asp Glu Leu Met Gln Ala Leu Asn Phe Asn Ser Glu Thr
165 170 175
Val Pro Gln Lys Ser Ser Leu Glu Glu Pro Asp Phe Tyr Lys Thr Lys
180 185 190
Ile Lys Leu Cys Ile Leu Leu His Ala Phe Arg Ile Arg Ala Val Thr
195 200 205
Ile Asp Arg Val Met Ser Tyr Leu Asn Ala Ser
210 215
<210> 144
<211> 328
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 144
Met Cys His Gln Gln Leu Val Ile Ser Trp Phe Ser Leu Val Phe Leu
1 5 10 15
Ala Ser Pro Leu Val Ala Ile Trp Glu Leu Lys Lys Asp Val Tyr Val
20 25 30
Val Glu Leu Asp Trp Tyr Pro Asp Ala Pro Gly Glu Met Val Val Leu
35 40 45
Thr Cys Asp Thr Pro Glu Glu Asp Gly Ile Thr Trp Thr Leu Asp Gln
50 55 60
Ser Ser Glu Val Leu Gly Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Gln Val Lys
65 70 75 80
Glu Phe Gly Asp Ala Gly Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Val
85 90 95
Leu Ser His Ser Leu Leu Leu Leu His Lys Lys Glu Asp Gly Ile Trp
100 105 110
Ser Thr Asp Ile Leu Lys Asp Gln Lys Glu Pro Lys Asn Lys Thr Phe
115 120 125
Leu Arg Cys Glu Ala Lys Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Trp Trp
130 135 140
Leu Thr Thr Ile Ser Thr Asp Leu Thr Phe Ser Val Lys Ser Ser Arg
145 150 155 160
Gly Ser Ser Asp Pro Gln Gly Val Thr Cys Gly Ala Ala Thr Leu Ser
165 170 175
Ala Glu Arg Val Arg Gly Asp Asn Lys Glu Tyr Glu Tyr Ser Val Glu
180 185 190
Cys Gln Glu Asp Ser Ala Cys Pro Ala Ala Glu Glu Ser Leu Pro Ile
195 200 205
Glu Val Met Val Asp Ala Val His Lys Leu Lys Tyr Glu Asn Tyr Thr
210 215 220
Ser Ser Phe Phe Ile Arg Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn
225 230 235 240
Leu Gln Leu Lys Pro Leu Lys Asn Ser Arg Gln Val Glu Val Ser Trp
245 250 255
Glu Tyr Pro Asp Thr Trp Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Thr
260 265 270
Phe Cys Val Gln Val Gln Gly Lys Ser Lys Arg Glu Lys Lys Asp Arg
275 280 285
Val Phe Thr Asp Lys Thr Ser Ala Thr Val Ile Cys Arg Lys Asn Ala
290 295 300
Ser Ile Ser Val Arg Ala Gln Asp Arg Tyr Tyr Ser Ser Ser Trp Ser
305 310 315 320
Glu Trp Ala Ser Val Pro Cys Ser
325
<210> 145
<211> 335
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 145
Met Cys Pro Gln Lys Leu Thr Ile Ser Trp Phe Ala Ile Val Leu Leu
1 5 10 15
Val Ser Pro Leu Met Ala Met Trp Glu Leu Glu Lys Asp Val Tyr Val
20 25 30
Val Glu Val Asp Trp Thr Pro Asp Ala Pro Gly Glu Thr Val Asn Leu
35 40 45
Thr Cys Asp Thr Pro Glu Glu Asp Asp Ile Thr Trp Thr Ser Asp Gln
50 55 60
Arg His Gly Val Ile Gly Ser Gly Lys Thr Leu Thr Ile Thr Val Lys
65 70 75 80
Glu Phe Leu Asp Ala Gly Gln Tyr Thr Cys His Lys Gly Gly Glu Thr
85 90 95
Leu Ser His Ser His Leu Leu Leu His Lys Lys Glu Asn Gly Ile Trp
100 105 110
Ser Thr Glu Ile Leu Lys Asn Phe Lys Asn Lys Thr Phe Leu Lys Cys
115 120 125
Glu Ala Pro Asn Tyr Ser Gly Arg Phe Thr Cys Ser Trp Leu Val Gln
130 135 140
Arg Asn Met Asp Leu Lys Phe Asn Ile Lys Ser Ser Ser Ser Ser Pro
145 150 155 160
Asp Ser Arg Ala Val Thr Cys Gly Met Ala Ser Leu Ser Ala Glu Lys
165 170 175
Val Thr Leu Asp Gln Arg Asp Tyr Glu Lys Tyr Ser Val Ser Cys Gln
180 185 190
Glu Asp Val Thr Cys Pro Thr Ala Glu Glu Thr Leu Pro Ile Glu Leu
195 200 205
Ala Leu Glu Ala Arg Gln Gln Asn Lys Tyr Glu Asn Tyr Ser Thr Ser
210 215 220
Phe Phe Ile Arg Asp Ile Ile Lys Pro Asp Pro Pro Lys Asn Leu Gln
225 230 235 240
Met Lys Pro Leu Lys Asn Ser Gln Val Glu Val Ser Trp Glu Tyr Pro
245 250 255
Asp Ser Trp Ser Thr Pro His Ser Tyr Phe Ser Leu Lys Phe Phe Val
260 265 270
Arg Ile Gln Arg Lys Lys Glu Lys Met Lys Glu Thr Glu Glu Gly Cys
275 280 285
Asn Gln Lys Gly Ala Phe Leu Val Glu Lys Thr Ser Thr Glu Val Gln
290 295 300
Cys Lys Gly Gly Asn Val Cys Val Gln Ala Gln Asp Arg Tyr Tyr Asn
305 310 315 320
Ser Ser Cys Ser Lys Trp Ala Cys Val Pro Cys Arg Val Arg Ser
325 330 335
<210> 146
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 146
Met Cys Gln Ser Arg Tyr Leu Leu Phe Leu Ala Thr Leu Ala Leu Leu
1 5 10 15
Asn His Leu Ser Leu Ala Arg Val Ile Pro Val Ser Gly Pro Ala Arg
20 25 30
Cys Leu Ser Gln Ser Arg Asn Leu Leu Lys Thr Thr Asp Asp Met Val
35 40 45
Lys Thr Ala Arg Glu Lys Leu Lys His Tyr Ser Cys Thr Ala Glu Asp
50 55 60
Ile Asp His Glu Asp Ile Thr Arg Asp Gln Thr Ser Thr Leu Lys Thr
65 70 75 80
Cys Leu Pro Leu Glu Leu His Lys Asn Glu Ser Cys Leu Ala Thr Arg
85 90 95
Glu Thr Ser Ser Thr Thr Arg Gly Ser Cys Leu Pro Pro Gln Lys Thr
100 105 110
Ser Leu Met Met Thr Leu Cys Leu Gly Ser Ile Tyr Glu Asp Leu Lys
115 120 125
Met Tyr Gln Thr Glu Phe Gln Ala Ile Asn Ala Ala Leu Gln Asn His
130 135 140
Asn His Gln Gln Ile Ile Leu Asp Lys Gly Met Leu Val Ala Ile Asp
145 150 155 160
Glu Leu Met Gln Ser Leu Asn His Asn Gly Glu Thr Leu Arg Gln Lys
165 170 175
Pro Pro Val Gly Glu Ala Asp Pro Tyr Arg Val Lys Met Lys Leu Cys
180 185 190
Ile Leu Leu His Ala Phe Ser Thr Arg Val Val Thr Ile Asn Arg Val
195 200 205
Met Gly Tyr Leu Ser Ser Ala
210 215
<210> 147
<211> 202
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 147
Met Lys Val Leu Ala Ala Gly Val Val Pro Leu Leu Leu Val Leu His
1 5 10 15
Trp Lys His Gly Ala Gly Ser Pro Leu Pro Ile Thr Pro Val Asn Ala
20 25 30
Thr Cys Ala Ile Arg His Pro Cys His Asn Asn Leu Met Asn Gln Ile
35 40 45
Arg Ser Gln Leu Ala Gln Leu Asn Gly Ser Ala Asn Ala Leu Phe Ile
50 55 60
Leu Tyr Tyr Thr Ala Gln Gly Glu Pro Phe Pro Asn Asn Leu Asp Lys
65 70 75 80
Leu Cys Gly Pro Asn Val Thr Asp Phe Pro Pro Phe His Ala Asn Gly
85 90 95
Thr Glu Lys Ala Lys Leu Val Glu Leu Tyr Arg Ile Val Val Tyr Leu
100 105 110
Gly Thr Ser Leu Gly Asn Ile Thr Arg Asp Gln Lys Ile Leu Asn Pro
115 120 125
Ser Ala Leu Ser Leu His Ser Lys Leu Asn Ala Thr Ala Asp Ile Leu
130 135 140
Arg Gly Leu Leu Ser Asn Val Leu Cys Arg Leu Cys Ser Lys Tyr His
145 150 155 160
Val Gly His Val Asp Val Thr Tyr Gly Pro Asp Thr Ser Gly Lys Asp
165 170 175
Val Phe Gln Lys Lys Lys Leu Gly Cys Gln Leu Leu Gly Lys Tyr Lys
180 185 190
Gln Ile Ile Ala Val Leu Ala Gln Ala Phe
195 200
<210> 148
<211> 203
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 148
Met Lys Val Leu Ala Ala Gly Ile Val Pro Leu Leu Leu Leu Val Leu
1 5 10 15
His Trp Lys His Gly Ala Gly Ser Pro Leu Pro Ile Thr Pro Val Asn
20 25 30
Ala Thr Cys Ala Ile Arg His Pro Cys His Gly Asn Leu Met Asn Gln
35 40 45
Ile Lys Asn Gln Leu Ala Gln Leu Asn Gly Ser Ala Asn Ala Leu Phe
50 55 60
Ile Ser Tyr Tyr Thr Ala Gln Gly Glu Pro Phe Pro Asn Asn Val Glu
65 70 75 80
Lys Leu Cys Ala Pro Asn Met Thr Asp Phe Pro Ser Phe His Gly Asn
85 90 95
Gly Thr Glu Lys Thr Lys Leu Val Glu Leu Tyr Arg Met Val Ala Tyr
100 105 110
Leu Ser Ala Ser Leu Thr Asn Ile Thr Arg Asp Gln Lys Val Leu Asn
115 120 125
Pro Thr Ala Val Ser Leu Gln Val Lys Leu Asn Ala Thr Ile Asp Val
130 135 140
Met Arg Gly Leu Leu Ser Asn Val Leu Cys Arg Leu Cys Asn Lys Tyr
145 150 155 160
Arg Val Gly His Val Asp Val Pro Pro Val Pro Asp His Ser Asp Lys
165 170 175
Glu Ala Phe Gln Arg Lys Lys Leu Gly Cys Gln Leu Leu Gly Thr Tyr
180 185 190
Lys Gln Val Ile Ser Val Val Val Gln Ala Phe
195 200
<210> 149
<211> 252
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 149
Met Gly Val Leu Leu Thr Gln Arg Thr Leu Leu Ser Leu Val Leu Ala
1 5 10 15
Leu Leu Phe Pro Ser Met Ala Ser Met Ala Ala Ile Gly Ser Cys Ser
20 25 30
Lys Glu Tyr Arg Val Leu Leu Gly Gln Leu Gln Lys Gln Thr Asp Leu
35 40 45
Met Gln Asp Thr Ser Arg Leu Leu Asp Pro Tyr Ile Arg Ile Gln Gly
50 55 60
Leu Asp Val Pro Lys Leu Arg Glu His Cys Arg Glu Arg Pro Gly Ala
65 70 75 80
Phe Pro Ser Glu Glu Thr Leu Arg Gly Leu Gly Arg Arg Gly Phe Leu
85 90 95
Gln Thr Leu Asn Ala Thr Leu Gly Cys Val Leu His Arg Leu Ala Asp
100 105 110
Leu Glu Gln Arg Leu Pro Lys Ala Gln Asp Leu Glu Arg Ser Gly Leu
115 120 125
Asn Ile Glu Asp Leu Glu Lys Leu Gln Met Ala Arg Pro Asn Ile Leu
130 135 140
Gly Leu Arg Asn Asn Ile Tyr Cys Met Ala Gln Leu Leu Asp Asn Ser
145 150 155 160
Asp Thr Ala Glu Pro Thr Lys Ala Gly Arg Gly Ala Ser Gln Pro Pro
165 170 175
Thr Pro Thr Pro Ala Ser Asp Ala Phe Gln Arg Lys Leu Glu Gly Cys
180 185 190
Arg Phe Leu His Gly Tyr His Arg Phe Met His Ser Val Gly Arg Val
195 200 205
Phe Ser Lys Trp Gly Glu Ser Pro Asn Arg Ser Arg Arg His Ser Pro
210 215 220
His Gln Ala Leu Arg Lys Gly Val Arg Arg Thr Arg Pro Ser Arg Lys
225 230 235 240
Gly Lys Arg Leu Met Thr Arg Gly Gln Leu Pro Arg
245 250
<210> 150
<211> 263
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 150
Met Gln Thr Arg Leu Leu Arg Thr Leu Leu Ser Leu Thr Leu Ser Leu
1 5 10 15
Leu Ile Leu Ser Met Ala Leu Ala Asn Arg Gly Cys Ser Asn Ser Ser
20 25 30
Ser Gln Leu Leu Ser Gln Leu Gln Asn Gln Ala Asn Leu Thr Gly Asn
35 40 45
Thr Glu Ser Leu Leu Glu Pro Tyr Ile Arg Leu Gln Asn Leu Asn Thr
50 55 60
Pro Asp Leu Arg Ala Ala Cys Thr Gln His Ser Val Ala Phe Pro Ser
65 70 75 80
Glu Asp Thr Leu Arg Gln Leu Ser Lys Pro His Phe Leu Ser Thr Val
85 90 95
Tyr Thr Thr Leu Asp Arg Val Leu Tyr Gln Leu Asp Ala Leu Arg Gln
100 105 110
Lys Phe Leu Lys Thr Pro Ala Phe Pro Lys Leu Asp Ser Ala Arg His
115 120 125
Asn Ile Leu Gly Ile Arg Asn Asn Val Phe Cys Met Ala Arg Leu Leu
130 135 140
Asn His Ser Leu Glu Ile Pro Glu Pro Thr Gln Thr Asp Ser Gly Ala
145 150 155 160
Ser Arg Ser Thr Thr Thr Pro Asp Val Phe Asn Thr Lys Ile Gly Ser
165 170 175
Cys Gly Phe Leu Trp Gly Tyr His Arg Phe Met Gly Ser Val Gly Arg
180 185 190
Val Phe Arg Glu Trp Asp Asp Gly Ser Thr Arg Ser Arg Arg Gln Ser
195 200 205
Pro Leu Arg Ala Arg Arg Lys Gly Thr Arg Arg Ile Arg Val Arg His
210 215 220
Lys Gly Thr Arg Arg Ile Arg Val Arg Arg Lys Gly Thr Arg Arg Ile
225 230 235 240
Trp Val Arg Arg Lys Gly Ser Arg Lys Ile Arg Pro Ser Arg Ser Thr
245 250 255
Gln Ser Pro Thr Thr Arg Ala
260
<210> 151
<211> 178
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 151
Met His Ser Ser Ala Leu Leu Cys Cys Leu Val Leu Leu Thr Gly Val
1 5 10 15
Arg Ala Ser Pro Gly Gln Gly Thr Gln Ser Glu Asn Ser Cys Thr His
20 25 30
Phe Pro Gly Asn Leu Pro Asn Met Leu Arg Asp Leu Arg Asp Ala Phe
35 40 45
Ser Arg Val Lys Thr Phe Phe Gln Met Lys Asp Gln Leu Asp Asn Leu
50 55 60
Leu Leu Lys Glu Ser Leu Leu Glu Asp Phe Lys Gly Tyr Leu Gly Cys
65 70 75 80
Gln Ala Leu Ser Glu Met Ile Gln Phe Tyr Leu Glu Glu Val Met Pro
85 90 95
Gln Ala Glu Asn Gln Asp Pro Asp Ile Lys Ala His Val Asn Ser Leu
100 105 110
Gly Glu Asn Leu Lys Thr Leu Arg Leu Arg Leu Arg Arg Cys His Arg
115 120 125
Phe Leu Pro Cys Glu Asn Lys Ser Lys Ala Val Glu Gln Val Lys Asn
130 135 140
Ala Phe Asn Lys Leu Gln Glu Lys Gly Ile Tyr Lys Ala Met Ser Glu
145 150 155 160
Phe Asp Ile Phe Ile Asn Tyr Ile Glu Ala Tyr Met Thr Met Lys Ile
165 170 175
Arg Asn
<210> 152
<211> 178
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 152
Met Pro Gly Ser Ala Leu Leu Cys Cys Leu Leu Leu Leu Thr Gly Met
1 5 10 15
Arg Ile Ser Arg Gly Gln Tyr Ser Arg Glu Asp Asn Asn Cys Thr His
20 25 30
Phe Pro Val Gly Gln Ser His Met Leu Leu Glu Leu Arg Thr Ala Phe
35 40 45
Ser Gln Val Lys Thr Phe Phe Gln Thr Lys Asp Gln Leu Asp Asn Ile
50 55 60
Leu Leu Thr Asp Ser Leu Met Gln Asp Phe Lys Gly Tyr Leu Gly Cys
65 70 75 80
Gln Ala Leu Ser Glu Met Ile Gln Phe Tyr Leu Val Glu Val Met Pro
85 90 95
Gln Ala Glu Lys His Gly Pro Glu Ile Lys Glu His Leu Asn Ser Leu
100 105 110
Gly Glu Lys Leu Lys Thr Leu Arg Met Arg Leu Arg Arg Cys His Arg
115 120 125
Phe Leu Pro Cys Glu Asn Lys Ser Lys Ala Val Glu Gln Val Lys Ser
130 135 140
Asp Phe Asn Lys Leu Gln Asp Gln Gly Val Tyr Lys Ala Met Asn Glu
145 150 155 160
Phe Asp Ile Phe Ile Asn Cys Ile Glu Ala Tyr Met Met Ile Lys Met
165 170 175
Lys Ser
<210> 153
<211> 176
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 153
Met Lys Ala Ser Ser Leu Ala Phe Ser Leu Leu Ser Ala Ala Phe Tyr
1 5 10 15
Leu Leu Trp Thr Pro Ser Thr Gly Leu Lys Thr Leu Asn Leu Gly Ser
20 25 30
Cys Val Ile Ala Thr Asn Leu Gln Glu Ile Arg Asn Gly Phe Ser Glu
35 40 45
Ile Arg Gly Ser Val Gln Ala Lys Asp Gly Asn Ile Asp Ile Arg Ile
50 55 60
Leu Arg Arg Thr Glu Ser Leu Gln Asp Thr Lys Pro Ala Asn Arg Cys
65 70 75 80
Cys Leu Leu Arg His Leu Leu Arg Leu Tyr Leu Asp Arg Val Phe Lys
85 90 95
Asn Tyr Gln Thr Pro Asp His Tyr Thr Leu Arg Lys Ile Ser Ser Leu
100 105 110
Ala Asn Ser Phe Leu Thr Ile Lys Lys Asp Leu Arg Leu Cys His Ala
115 120 125
His Met Thr Cys His Cys Gly Glu Glu Ala Met Lys Lys Tyr Ser Gln
130 135 140
Ile Leu Ser His Phe Glu Lys Leu Glu Pro Gln Ala Ala Val Val Lys
145 150 155 160
Ala Leu Gly Glu Leu Asp Ile Leu Leu Gln Trp Met Glu Glu Thr Glu
165 170 175
<210> 154
<211> 176
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 154
Met Lys Gly Phe Gly Leu Ala Phe Gly Leu Phe Ser Ala Val Gly Phe
1 5 10 15
Leu Leu Trp Thr Pro Leu Thr Gly Leu Lys Thr Leu His Leu Gly Ser
20 25 30
Cys Val Ile Thr Ala Asn Leu Gln Ala Ile Gln Lys Glu Phe Ser Glu
35 40 45
Ile Arg Asp Ser Val Gln Ala Glu Asp Thr Asn Ile Asp Ile Arg Ile
50 55 60
Leu Arg Thr Thr Glu Ser Leu Lys Asp Ile Lys Ser Leu Asp Arg Cys
65 70 75 80
Cys Phe Leu Arg His Leu Val Arg Phe Tyr Leu Asp Arg Val Phe Lys
85 90 95
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100 105 110
Ala Asn Ser Phe Leu Ile Ile Lys Lys Asp Leu Ser Val Cys His Ser
115 120 125
His Met Ala Cys His Cys Gly Glu Glu Ala Met Glu Lys Tyr Asn Gln
130 135 140
Ile Leu Ser His Phe Ile Glu Leu Glu Leu Gln Ala Ala Val Val Lys
145 150 155 160
Ala Leu Gly Glu Leu Gly Ile Leu Leu Arg Trp Met Glu Glu Met Leu
165 170 175
<210> 155
<211> 546
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 155
Met Lys Asn Gln Asp Lys Lys Asn Gly Ala Ala Lys Gln Ser Asn Pro
1 5 10 15
Lys Ser Ser Pro Gly Gln Pro Glu Ala Gly Pro Glu Gly Ala Gln Glu
20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
Asp Ile Leu Ser Thr Tyr Cys Val Asp Asn Asn Gln Gly Gly Pro Gly
85 90 95
Glu Asp Gly Ala Gln Gly Glu Pro Ala Glu Pro Glu Asp Ala Glu Lys
100 105 110
Ser Arg Thr Tyr Val Ala Arg Asn Gly Glu Pro Glu Pro Thr Pro Val
115 120 125
Val Asn Gly Glu Lys Glu Pro Ser Lys Gly Asp Pro Asn Thr Glu Glu
130 135 140
Ile Arg Gln Ser Asp Glu Val Gly Asp Arg Asp His Arg Arg Pro Gln
145 150 155 160
Glu Lys Lys Lys Ala Lys Gly Leu Gly Lys Glu Ile Thr Leu Leu Met
165 170 175
Gln Thr Leu Asn Thr Leu Ser Thr Pro Glu Glu Lys Leu Ala Ala Leu
180 185 190
Cys Lys Lys Tyr Ala Glu Leu Leu Glu Glu His Arg Asn Ser Gln Lys
195 200 205
Gln Met Lys Leu Leu Gln Lys Lys Gln Ser Gln Leu Val Gln Glu Lys
210 215 220
Asp His Leu Arg Gly Glu His Ser Lys Ala Val Leu Ala Arg Ser Lys
225 230 235 240
Leu Glu Ser Leu Cys Arg Glu Leu Gln Arg His Asn Arg Ser Leu Lys
245 250 255
Glu Glu Gly Val Gln Arg Ala Arg Glu Glu Glu Glu Lys Arg Lys Glu
260 265 270
Val Thr Ser His Phe Gln Val Thr Leu Asn Asp Ile Gln Leu Gln Met
275 280 285
Glu Gln His Asn Glu Arg Asn Ser Lys Leu Arg Gln Glu Asn Met Glu
290 295 300
Leu Ala Glu Arg Leu Lys Lys Leu Ile Glu Gln Tyr Glu Leu Arg Glu
305 310 315 320
Glu His Ile Asp Lys Val Phe Lys His Lys Asp Leu Gln Gln Gln Leu
325 330 335
Val Asp Ala Lys Leu Gln Gln Ala Gln Glu Met Leu Lys Glu Ala Glu
340 345 350
Glu Arg His Gln Arg Glu Lys Asp Phe Leu Leu Lys Glu Ala Val Glu
355 360 365
Ser Gln Arg Met Cys Glu Leu Met Lys Gln Gln Glu Thr His Leu Lys
370 375 380
Gln Gln Leu Ala Leu Tyr Thr Glu Lys Phe Glu Glu Phe Gln Asn Thr
385 390 395 400
Leu Ser Lys Ser Ser Glu Val Phe Thr Thr Phe Lys Gln Glu Met Glu
405 410 415
Lys Met Thr Lys Lys Ile Lys Lys Leu Glu Lys Glu Thr Thr Met Tyr
420 425 430
Arg Ser Arg Trp Glu Ser Ser Asn Lys Ala Leu Leu Glu Met Ala Glu
435 440 445
Glu Lys Thr Val Arg Asp Lys Glu Leu Glu Gly Leu Gln Val Lys Ile
450 455 460
Gln Arg Leu Glu Lys Leu Cys Arg Ala Leu Gln Thr Glu Arg Asn Asp
465 470 475 480
Leu Asn Lys Arg Val Gln Asp Leu Ser Ala Gly Gly Gln Gly Ser Leu
485 490 495
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Pro Ser Ser Pro Arg Val Thr Glu Ala Pro Cys Tyr Pro Gly Ala Pro
515 520 525
Ser Thr Glu Ala Ser Gly Gln Thr Gly Pro Gln Glu Pro Thr Ser Ala
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Arg Ala
545
<210> 156
<211> 554
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 156
Met Lys Asn Gln Asp Lys Lys Asn Gly Pro Ala Lys His Ser Asn Ser
1 5 10 15
Lys Gly Ser Pro Gly Gln Arg Glu Ala Gly Pro Glu Gly Ala His Gly
20 25 30
Arg Pro Arg Gln Thr Ala Pro Gly Ala Glu Ala Glu Gly Ser Thr Ser
35 40 45
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50 55 60
Gly Ala Leu Cys Asp Val Ser Glu Glu Leu Ser Arg Gln Leu Glu Asp
65 70 75 80
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85 90 95
Glu Gly Ala Gln Gly Glu Pro Thr Glu Pro Glu Asp Thr Glu Lys Ser
100 105 110
Arg Thr Tyr Ala Ala Arg Asn Gly Glu Pro Glu Pro Gly Ile Pro Val
115 120 125
Val Asn Gly Glu Lys Glu Thr Ser Lys Gly Glu Pro Gly Thr Glu Glu
130 135 140
Ile Arg Ala Ser Asp Glu Val Gly Asp Arg Asp His Arg Arg Pro Gln
145 150 155 160
Glu Lys Lys Lys Ala Lys Gly Leu Gly Lys Glu Ile Thr Leu Leu Met
165 170 175
Gln Thr Leu Asn Thr Leu Ser Thr Pro Glu Glu Lys Leu Ala Ala Leu
180 185 190
Cys Lys Lys Tyr Ala Glu Leu Leu Glu Glu His Arg Asn Ser Gln Lys
195 200 205
Gln Met Lys Leu Leu Gln Lys Lys Gln Ser Gln Leu Val Gln Glu Lys
210 215 220
Asp His Leu Arg Gly Glu His Ser Lys Ala Val Leu Ala Arg Ser Lys
225 230 235 240
Leu Glu Ser Leu Cys Arg Glu Leu Gln Arg His Asn Arg Ser Leu Lys
245 250 255
Glu Glu Gly Val Gln Arg Ala Arg Glu Glu Glu Glu Lys Arg Lys Glu
260 265 270
Val Thr Ser His Phe Gln Val Thr Leu Asn Asp Ile Gln Leu Gln Met
275 280 285
Glu Gln His Asn Glu Arg Asn Ser Lys Leu Arg Gln Glu Asn Met Glu
290 295 300
Leu Ala Glu Arg Leu Lys Lys Leu Ile Glu Gln Tyr Glu Leu Arg Glu
305 310 315 320
Glu His Ile Asp Lys Val Phe Lys His Lys Asp Leu Gln Gln Gln Leu
325 330 335
Val Asp Ala Lys Leu Gln Gln Ala Gln Glu Met Leu Lys Glu Ala Glu
340 345 350
Glu Arg His Gln Arg Glu Lys Glu Phe Leu Leu Lys Glu Ala Val Glu
355 360 365
Ser Gln Arg Met Cys Glu Leu Met Lys Gln Gln Glu Thr His Leu Lys
370 375 380
Gln Gln Leu Ala Leu Tyr Thr Glu Lys Phe Glu Glu Phe Gln Asn Thr
385 390 395 400
Leu Ser Lys Ser Ser Glu Val Phe Thr Thr Phe Lys Gln Glu Met Glu
405 410 415
Lys Met Thr Lys Lys Ile Lys Lys Leu Glu Lys Glu Thr Thr Met Tyr
420 425 430
Arg Ser Arg Trp Glu Ser Ser Asn Lys Ala Leu Leu Glu Met Ala Glu
435 440 445
Glu Lys Thr Val Arg Asp Lys Glu Leu Glu Gly Leu Gln Val Lys Ile
450 455 460
Gln Arg Leu Glu Lys Leu Cys Arg Ala Leu Gln Thr Glu Arg Asn Asp
465 470 475 480
Leu Asn Lys Arg Val Gln Asp Leu Thr Ala Gly Gly Ile Thr Asp Ile
485 490 495
Gly Ser Glu Arg Arg Pro Glu Ala Thr Thr Ala Ser Lys Glu Gln Gly
500 505 510
Val Glu Ser Pro Gly Ala Gln Pro Ala Ser Ser Pro Arg Ala Thr Asp
515 520 525
Ala Pro Cys Cys Ser Gly Ala Pro Ser Thr Gly Thr Ala Gly Gln Thr
530 535 540
Gly Pro Gly Glu Pro Thr Pro Ala Thr Ala
545 550
<210> 157
<211> 1331
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 157
Met Glu Ser His Ser Arg Ala Gly Lys Ser Arg Lys Ser Ala Lys Phe
1 5 10 15
Arg Ser Ile Ser Arg Ser Leu Met Leu Cys Asn Ala Lys Thr Ser Asp
20 25 30
Asp Gly Ser Ser Pro Asp Glu Lys Tyr Pro Asp Pro Phe Glu Ile Ser
35 40 45
Leu Ala Gln Gly Lys Glu Gly Ile Phe His Ser Ser Val Gln Leu Ala
50 55 60
Asp Thr Ser Glu Ala Gly Pro Ser Ser Val Pro Asp Leu Ala Leu Ala
65 70 75 80
Ser Glu Ala Ala Gln Leu Gln Ala Ala Gly Asn Asp Arg Gly Lys Thr
85 90 95
Cys Arg Arg Ile Phe Phe Met Lys Glu Ser Ser Thr Ala Ser Ser Arg
100 105 110
Glu Lys Pro Gly Lys Leu Glu Ala Gln Ser Ser Asn Phe Leu Phe Pro
115 120 125
Lys Ala Cys His Gln Arg Ala Arg Ser Asn Ser Thr Ser Val Asn Pro
130 135 140
Tyr Cys Thr Arg Glu Ile Asp Phe Pro Met Thr Lys Lys Ser Ala Ala
145 150 155 160
Pro Thr Asp Arg Gln Pro Tyr Ser Leu Cys Ser Asn Arg Lys Ser Leu
165 170 175
Ser Gln Gln Leu Asp Cys Pro Ala Gly Lys Ala Ala Gly Thr Ser Arg
180 185 190
Pro Thr Arg Ser Leu Ser Thr Ala Gln Leu Val Gln Pro Ser Gly Gly
195 200 205
Leu Gln Ala Ser Val Ile Ser Asn Ile Val Leu Met Lys Gly Gln Ala
210 215 220
Lys Gly Leu Gly Phe Ser Ile Val Gly Gly Lys Asp Ser Ile Tyr Gly
225 230 235 240
Pro Ile Gly Ile Tyr Val Lys Thr Ile Phe Ala Gly Gly Ala Ala Ala
245 250 255
Ala Asp Gly Arg Leu Gln Glu Gly Asp Glu Ile Leu Glu Leu Asn Gly
260 265 270
Glu Ser Met Ala Gly Leu Thr His Gln Asp Ala Leu Gln Lys Phe Lys
275 280 285
Gln Ala Lys Lys Gly Leu Leu Thr Leu Thr Val Arg Thr Arg Leu Thr
290 295 300
Ala Pro Pro Ser Leu Cys Ser His Leu Ser Pro Pro Leu Cys Arg Ser
305 310 315 320
Leu Ser Ser Ser Thr Cys Ile Thr Lys Asp Ser Ser Ser Phe Ala Leu
325 330 335
Glu Ser Pro Ser Ala Pro Ile Ser Thr Ala Lys Pro Asn Tyr Arg Ile
340 345 350
Met Val Glu Val Ser Leu Gln Lys Glu Ala Gly Val Gly Leu Gly Ile
355 360 365
Gly Leu Cys Ser Val Pro Tyr Phe Gln Cys Ile Ser Gly Ile Phe Val
370 375 380
His Thr Leu Ser Pro Gly Ser Val Ala His Leu Asp Gly Arg Leu Arg
385 390 395 400
Cys Gly Asp Glu Ile Val Glu Ile Ser Asp Ser Pro Val His Cys Leu
405 410 415
Thr Leu Asn Glu Val Tyr Thr Ile Leu Ser His Cys Asp Pro Gly Pro
420 425 430
Val Pro Ile Ile Val Ser Arg His Pro Asp Pro Gln Val Ser Glu Gln
435 440 445
Gln Leu Lys Glu Ala Val Ala Gln Ala Val Glu Asn Thr Lys Phe Gly
450 455 460
Lys Glu Arg His Gln Trp Ser Leu Glu Gly Val Lys Arg Leu Glu Ser
465 470 475 480
Ser Trp His Gly Arg Pro Thr Leu Glu Lys Glu Arg Glu Lys Asn Ser
485 490 495
Ala Pro Pro His Arg Arg Ala Gln Lys Val Met Ile Arg Ser Ser Ser
500 505 510
Asp Ser Ser Tyr Met Ser Gly Ser Pro Gly Gly Ser Pro Gly Ser Gly
515 520 525
Ser Ala Glu Lys Pro Ser Ser Asp Val Asp Ile Ser Thr His Ser Pro
530 535 540
Ser Leu Pro Leu Ala Arg Glu Pro Val Val Leu Ser Ile Ala Ser Ser
545 550 555 560
Arg Leu Pro Gln Glu Ser Pro Pro Leu Pro Glu Ser Arg Asp Ser His
565 570 575
Pro Pro Leu Arg Leu Lys Lys Ser Phe Glu Ile Val Arg Lys Pro Met
580 585 590
Ser Ser Lys Pro Lys Pro Pro Pro Arg Lys Tyr Phe Lys Ser Asp Ser
595 600 605
Asp Pro Gln Lys Ser Leu Glu Glu Arg Glu Asn Ser Ser Cys Ser Ser
610 615 620
Gly His Thr Pro Pro Thr Cys Gly Gln Glu Ala Arg Glu Leu Leu Pro
625 630 635 640
Leu Leu Leu Pro Gln Glu Asp Thr Ala Gly Arg Ser Pro Ser Ala Ser
645 650 655
Ala Gly Cys Pro Gly Pro Gly Ile Gly Pro Gln Thr Lys Ser Ser Thr
660 665 670
Glu Gly Glu Pro Gly Trp Arg Arg Ala Ser Pro Val Thr Gln Thr Ser
675 680 685
Pro Ile Lys His Pro Leu Leu Lys Arg Gln Ala Arg Met Asp Tyr Ser
690 695 700
Phe Asp Thr Thr Ala Glu Asp Pro Trp Val Arg Ile Ser Asp Cys Ile
705 710 715 720
Lys Asn Leu Phe Ser Pro Ile Met Ser Glu Asn His Gly His Met Pro
725 730 735
Leu Gln Pro Asn Ala Ser Leu Asn Glu Glu Glu Gly Thr Gln Gly His
740 745 750
Pro Asp Gly Thr Pro Pro Lys Leu Asp Thr Ala Asn Gly Thr Pro Lys
755 760 765
Val Tyr Lys Ser Ala Asp Ser Ser Thr Val Lys Lys Gly Pro Pro Val
770 775 780
Ala Pro Lys Pro Ala Trp Phe Arg Gln Ser Leu Lys Gly Leu Arg Asn
785 790 795 800
Arg Ala Ser Asp Pro Arg Gly Leu Pro Asp Pro Ala Leu Ser Thr Gln
805 810 815
Pro Ala Pro Ala Ser Arg Glu His Leu Gly Ser His Ile Arg Ala Ser
820 825 830
Ser Ser Ser Ser Ser Ile Arg Gln Arg Ile Ser Ser Phe Glu Thr Phe
835 840 845
Gly Ser Ser Gln Leu Pro Asp Lys Gly Ala Gln Arg Leu Ser Leu Gln
850 855 860
Pro Ser Ser Gly Glu Ala Ala Lys Pro Leu Gly Lys His Glu Glu Gly
865 870 875 880
Arg Phe Ser Gly Leu Leu Gly Arg Gly Ala Ala Pro Thr Leu Val Pro
885 890 895
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900 905 910
Ala Arg Asp Pro Gly Val Ser Glu Ser Pro Pro Pro Gly Arg Gln Pro
915 920 925
Asn Gln Lys Thr Leu Pro Pro Gly Pro Asp Pro Leu Leu Arg Leu Leu
930 935 940
Ser Thr Gln Ala Glu Glu Ser Gln Gly Pro Val Leu Lys Met Pro Ser
945 950 955 960
Gln Arg Ala Arg Ser Phe Pro Leu Thr Arg Ser Gln Ser Cys Glu Thr
965 970 975
Lys Leu Leu Asp Glu Lys Thr Ser Lys Leu Tyr Ser Ile Ser Ser Gln
980 985 990
Val Ser Ser Ala Val Met Lys Ser Leu Leu Cys Leu Pro Ser Ser Ile
995 1000 1005
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1010 1015 1020
Thr Ser Ser Ser Asn Glu Asp Ser Ala Ala Asn Gly Ser Ala Glu
1025 1030 1035
Thr Ser Ala Leu Asp Thr Gly Phe Ser Leu Asn Leu Ser Glu Leu
1040 1045 1050
Arg Glu Tyr Thr Glu Gly Leu Thr Glu Ala Lys Glu Asp Asp Asp
1055 1060 1065
Gly Asp His Ser Ser Leu Gln Ser Gly Gln Ser Val Ile Ser Leu
1070 1075 1080
Leu Ser Ser Glu Glu Leu Lys Lys Leu Ile Glu Glu Val Lys Val
1085 1090 1095
Leu Asp Glu Ala Thr Leu Lys Gln Leu Asp Gly Ile His Val Thr
1100 1105 1110
Ile Leu His Lys Glu Glu Gly Ala Gly Leu Gly Phe Ser Leu Ala
1115 1120 1125
Gly Gly Ala Asp Leu Glu Asn Lys Val Ile Thr Val His Arg Val
1130 1135 1140
Phe Pro Asn Gly Leu Ala Ser Gln Glu Gly Thr Ile Gln Lys Gly
1145 1150 1155
Asn Glu Val Leu Ser Ile Asn Gly Lys Ser Leu Lys Gly Thr Thr
1160 1165 1170
His His Asp Ala Leu Ala Ile Leu Arg Gln Ala Arg Glu Pro Arg
1175 1180 1185
Gln Ala Val Ile Val Thr Arg Lys Leu Thr Pro Glu Ala Met Pro
1190 1195 1200
Asp Leu Asn Ser Ser Thr Asp Ser Ala Ala Ser Ala Ser Ala Ala
1205 1210 1215
Ser Asp Val Ser Val Glu Ser Thr Ala Glu Ala Thr Val Cys Thr
1220 1225 1230
Val Thr Leu Glu Lys Met Ser Ala Gly Leu Gly Phe Ser Leu Glu
1235 1240 1245
Gly Gly Lys Gly Ser Leu His Gly Asp Lys Pro Leu Thr Ile Asn
1250 1255 1260
Arg Ile Phe Lys Gly Ala Ala Ser Glu Gln Ser Glu Thr Val Gln
1265 1270 1275
Pro Gly Asp Glu Ile Leu Gln Leu Gly Gly Thr Ala Met Gln Gly
1280 1285 1290
Leu Thr Arg Phe Glu Ala Trp Asn Ile Ile Lys Ala Leu Pro Asp
1295 1300 1305
Gly Pro Val Thr Ile Val Ile Arg Arg Lys Ser Leu Gln Ser Lys
1310 1315 1320
Glu Thr Thr Ala Ala Gly Asp Ser
1325 1330
<210> 158
<211> 1322
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 158
Met Glu Pro His Gly His Ser Gly Lys Ser Arg Lys Ser Thr Lys Phe
1 5 10 15
Arg Ser Ile Ser Arg Ser Leu Ile Leu Cys Asn Ala Lys Thr Ser Asp
20 25 30
Asp Gly Ser Ser Pro Asp Glu Lys Tyr Pro Asp Pro Phe Glu Thr Ser
35 40 45
Leu Cys Gln Gly Lys Glu Gly Phe Phe His Ser Ser Met Gln Leu Ala
50 55 60
Asp Thr Phe Glu Ala Gly Leu Ser Asn Ile Pro Asp Leu Ala Leu Ala
65 70 75 80
Ser Asp Ser Ala Gln Leu Ala Ala Ala Gly Ser Asp Arg Gly Lys His
85 90 95
Cys Arg Lys Met Phe Phe Met Lys Glu Ser Ser Ser Thr Ser Ser Lys
100 105 110
Glu Lys Ser Gly Lys Pro Glu Ala Gln Ser Ser Ser Phe Leu Phe Pro
115 120 125
Lys Ala Cys His Gln Arg Thr Arg Ser Asn Ser Thr Ser Val Asn Pro
130 135 140
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145 150 155 160
Pro Thr Asp Arg Gln Pro Tyr Ser Leu Cys Ser Asn Arg Lys Ser Leu
165 170 175
Ser Gln Gln Leu Asp Tyr Pro Ile Leu Gly Thr Ala Arg Pro Thr Arg
180 185 190
Ser Leu Ser Thr Ala Gln Leu Gly Gln Leu Ser Gly Gly Leu Gln Ala
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Ser Val Ile Ser Asn Ile Val Leu Met Lys Gly Gln Ala Lys Gly Leu
210 215 220
Gly Phe Ser Ile Val Gly Gly Lys Asp Ser Ile Tyr Gly Pro Ile Gly
225 230 235 240
Ile Tyr Val Lys Ser Ile Phe Ala Gly Gly Ala Ala Ala Ala Asp Gly
245 250 255
Arg Leu Gln Glu Gly Asp Glu Ile Leu Glu Leu Asn Gly Glu Ser Met
260 265 270
Ala Gly Leu Thr His Gln Asp Ala Leu Gln Lys Phe Lys Gln Ala Lys
275 280 285
Lys Gly Leu Leu Thr Leu Thr Val Arg Thr Arg Leu Thr Thr Pro Pro
290 295 300
Ser Leu Cys Ser His Leu Ser Pro Pro Leu Cys Arg Ser Leu Ser Ser
305 310 315 320
Ser Thr Cys Gly Ala Gln Asp Ser Ser Pro Phe Ser Leu Glu Ser Pro
325 330 335
Ala Ser Pro Ala Ser Thr Ala Lys Pro Asn Tyr Arg Ile Met Val Glu
340 345 350
Val Ser Leu Lys Lys Glu Ala Gly Val Gly Leu Gly Ile Gly Leu Cys
355 360 365
Ser Ile Pro Tyr Phe Gln Cys Ile Ser Gly Ile Phe Val His Thr Leu
370 375 380
Ser Pro Gly Ser Val Ala His Leu Asp Gly Arg Leu Arg Cys Gly Asp
385 390 395 400
Glu Ile Val Glu Ile Asn Asp Ser Pro Val His Cys Leu Thr Leu Asn
405 410 415
Glu Val Tyr Thr Ile Leu Ser His Cys Asp Pro Gly Pro Val Pro Ile
420 425 430
Ile Val Ser Arg His Pro Asp Pro Gln Val Ser Glu Gln Gln Leu Lys
435 440 445
Glu Ala Val Ala Gln Ala Val Glu Gly Val Lys Phe Gly Lys Asp Arg
450 455 460
His Gln Trp Ser Leu Glu Gly Val Lys Arg Leu Glu Ser Ser Trp His
465 470 475 480
Gly Arg Pro Thr Leu Glu Lys Glu Arg Glu Lys His Ser Ala Pro Pro
485 490 495
His Arg Arg Ala Gln Lys Ile Met Val Arg Ser Ser Ser Asp Ser Ser
500 505 510
Tyr Met Ser Gly Ser Pro Gly Gly Ser Pro Cys Ser Ala Gly Ala Glu
515 520 525
Pro Gln Pro Ser Glu Arg Glu Gly Ser Thr His Ser Pro Ser Leu Ser
530 535 540
Pro Gly Glu Glu Gln Glu Pro Cys Pro Gly Val Pro Ser Arg Pro Gln
545 550 555 560
Gln Glu Ser Pro Pro Leu Pro Glu Ser Leu Glu Arg Glu Ser His Pro
565 570 575
Pro Leu Arg Leu Lys Lys Ser Phe Glu Ile Leu Val Arg Lys Pro Thr
580 585 590
Ser Ser Lys Pro Lys Pro Pro Pro Arg Lys Tyr Phe Lys Asn Asp Ser
595 600 605
Glu Pro Gln Lys Lys Leu Glu Glu Lys Glu Lys Val Thr Asp Pro Ser
610 615 620
Gly His Thr Leu Pro Thr Cys Ser Gln Glu Thr Arg Glu Leu Leu Pro
625 630 635 640
Leu Leu Leu Gln Glu Asp Thr Ala Gly Arg Ala Pro Cys Thr Ala Ala
645 650 655
Cys Cys Pro Gly Pro Ala Ala Ser Thr Gln Thr Ser Ser Ser Thr Glu
660 665 670
Gly Glu Ser Arg Arg Ser Ala Ser Pro Glu Thr Pro Ala Ser Pro Gly
675 680 685
Lys His Pro Leu Leu Lys Arg Gln Ala Arg Met Asp Tyr Ser Phe Asp
690 695 700
Ile Thr Ala Glu Asp Pro Trp Val Arg Ile Ser Asp Cys Ile Lys Asn
705 710 715 720
Leu Phe Ser Pro Ile Met Ser Glu Asn His Ser His Thr Pro Leu Gln
725 730 735
Pro Asn Thr Ser Leu Gly Glu Glu Asp Gly Thr Gln Gly Cys Pro Glu
740 745 750
Gly Gly Leu Ser Lys Met Asp Ala Ala Asn Gly Ala Pro Arg Val Tyr
755 760 765
Lys Ser Ala Asp Gly Ser Thr Val Lys Lys Gly Pro Pro Val Ala Pro
770 775 780
Lys Pro Ala Trp Phe Arg Gln Ser Leu Lys Gly Leu Arg Asn Arg Ala
785 790 795 800
Pro Asp Pro Arg Arg Pro Pro Glu Val Ala Ser Ala Ile Gln Pro Thr
805 810 815
Pro Val Ser Arg Asp Pro Pro Gly Pro Gln Pro Gln Ala Ser Ser Ser
820 825 830
Ile Arg Gln Arg Ile Ser Ser Phe Glu Asn Phe Gly Ser Ser Gln Leu
835 840 845
Pro Asp Arg Gly Val Gln Arg Leu Ser Leu Gln Pro Ser Ser Gly Glu
850 855 860
Thr Thr Lys Phe Pro Gly Lys Gln Asp Gly Gly Arg Phe Ser Gly Leu
865 870 875 880
Leu Gly Gln Gly Ala Thr Val Thr Ala Lys His Arg Gln Thr Glu Val
885 890 895
Glu Ser Met Ser Thr Thr Phe Pro Asn Ser Ser Glu Val Arg Asp Pro
900 905 910
Gly Leu Pro Glu Ser Pro Pro Pro Gly Gln Arg Pro Ser Thr Lys Ala
915 920 925
Leu Ser Pro Asp Pro Leu Leu Arg Leu Leu Thr Thr Gln Ser Glu Asp
930 935 940
Thr Gln Gly Pro Gly Leu Lys Met Pro Ser Gln Arg Ala Arg Ser Phe
945 950 955 960
Pro Leu Thr Arg Thr Gln Ser Cys Glu Thr Lys Leu Leu Asp Glu Lys
965 970 975
Ala Ser Lys Leu Tyr Ser Ile Ser Ser Gln Leu Ser Ser Ala Val Met
980 985 990
Lys Ser Leu Leu Cys Leu Pro Ser Ser Val Ser Cys Gly Gln Ile Thr
995 1000 1005
Cys Ile Pro Lys Glu Arg Val Ser Pro Lys Ser Pro Cys Asn Asn
1010 1015 1020
Ser Ser Ala Ala Glu Gly Phe Gly Glu Ala Met Ala Ser Asp Thr
1025 1030 1035
Gly Phe Ser Leu Asn Leu Ser Glu Leu Arg Glu Tyr Ser Glu Gly
1040 1045 1050
Leu Thr Glu Pro Gly Glu Thr Glu Asp Arg Asn His Cys Ser Ser
1055 1060 1065
Gln Ala Gly Gln Ser Val Ile Ser Leu Leu Ser Ala Glu Glu Leu
1070 1075 1080
Glu Lys Leu Ile Glu Glu Val Arg Val Leu Asp Glu Ala Thr Leu
1085 1090 1095
Lys Gln Leu Asp Ser Ile His Val Thr Ile Leu His Lys Glu Glu
1100 1105 1110
Gly Ala Gly Leu Gly Phe Ser Leu Ala Gly Gly Ala Asp Leu Glu
1115 1120 1125
Asn Lys Val Ile Thr Val His Arg Val Phe Pro Asn Gly Leu Ala
1130 1135 1140
Ser Gln Glu Gly Thr Ile Gln Lys Gly Asn Glu Val Leu Ser Ile
1145 1150 1155
Asn Gly Lys Ser Leu Lys Gly Ala Thr His Asn Asp Ala Leu Ala
1160 1165 1170
Ile Leu Arg Gln Ala Arg Asp Pro Arg Gln Ala Val Ile Val Thr
1175 1180 1185
Arg Arg Thr Thr Val Glu Ala Thr His Asp Leu Asn Ser Ser Thr
1190 1195 1200
Asp Ser Ala Ala Ser Ala Ser Ala Ala Ser Asp Ile Ser Val Glu
1205 1210 1215
Ser Lys Glu Ala Thr Val Cys Thr Val Thr Leu Glu Lys Thr Ser
1220 1225 1230
Ala Gly Leu Gly Phe Ser Leu Glu Gly Gly Lys Gly Ser Leu His
1235 1240 1245
Gly Asp Lys Pro Leu Thr Ile Asn Arg Ile Phe Lys Gly Thr Glu
1250 1255 1260
Gln Gly Glu Met Val Gln Pro Gly Asp Glu Ile Leu Gln Leu Ala
1265 1270 1275
Gly Thr Ala Val Gln Gly Leu Thr Arg Phe Glu Ala Trp Asn Val
1280 1285 1290
Ile Lys Ala Leu Pro Asp Gly Pro Val Thr Ile Val Ile Arg Arg
1295 1300 1305
Thr Ser Leu Gln Cys Lys Gln Thr Thr Ala Ser Ala Asp Ser
1310 1315 1320
<210> 159
<211> 155
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 159
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1 5 10 15
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100 105 110
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115 120 125
Cys Pro Asn Ser Phe Arg Leu Glu Lys Ile Leu Val Ser Val Gly Cys
130 135 140
Thr Cys Val Thr Pro Ile Val His His Val Ala
145 150 155
<210> 160
<211> 158
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 160
Met Ser Pro Gly Arg Ala Ser Ser Val Ser Leu Met Leu Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ser Leu Ala Ala Thr Val Lys Ala Ala Ala Ile Ile Pro Gln Ser
20 25 30
Ser Ala Cys Pro Asn Thr Glu Ala Lys Asp Phe Leu Gln Asn Val Lys
35 40 45
Val Asn Leu Lys Val Phe Asn Ser Leu Gly Ala Lys Val Ser Ser Arg
50 55 60
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65 70 75 80
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100 105 110
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Pro Glu Ser Cys Pro Phe Thr Phe Arg Val Glu Lys Met Leu Val Gly
130 135 140
Val Gly Cys Thr Cys Val Ala Ser Ile Val Arg Gln Ala Ala
145 150 155
<210> 161
<211> 261
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 161
Met Ile Glu Thr Tyr Asn Gln Thr Ser Pro Arg Ser Ala Ala Thr Gly
1 5 10 15
Leu Pro Ile Ser Met Lys Ile Phe Met Tyr Leu Leu Thr Val Phe Leu
20 25 30
Ile Thr Gln Met Ile Gly Ser Ala Leu Phe Ala Val Tyr Leu His Arg
35 40 45
Arg Leu Asp Lys Ile Glu Asp Glu Arg Asn Leu His Glu Asp Phe Val
50 55 60
Phe Met Lys Thr Ile Gln Arg Cys Asn Thr Gly Glu Arg Ser Leu Ser
65 70 75 80
Leu Leu Asn Cys Glu Glu Ile Lys Ser Gln Phe Glu Gly Phe Val Lys
85 90 95
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100 105 110
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130 135 140
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Leu Thr Val Lys Arg Gln Gly Leu Tyr Tyr Ile Tyr Ala Gln Val Thr
165 170 175
Phe Cys Ser Asn Arg Glu Ala Ser Ser Gln Ala Pro Phe Ile Ala Ser
180 185 190
Leu Cys Leu Lys Ser Pro Gly Arg Phe Glu Arg Ile Leu Leu Arg Ala
195 200 205
Ala Asn Thr His Ser Ser Ala Lys Pro Cys Gly Gln Gln Ser Ile His
210 215 220
Leu Gly Gly Val Phe Glu Leu Gln Pro Gly Ala Ser Val Phe Val Asn
225 230 235 240
Val Thr Asp Pro Ser Gln Val Ser His Gly Thr Gly Phe Thr Ser Phe
245 250 255
Gly Leu Leu Lys Leu
260
<210> 162
<211> 260
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 162
Met Ile Glu Thr Tyr Ser Gln Pro Ser Pro Arg Ser Val Ala Thr Gly
1 5 10 15
Leu Pro Ala Ser Met Lys Ile Phe Met Tyr Leu Leu Thr Val Phe Leu
20 25 30
Ile Thr Gln Met Ile Gly Ser Val Leu Phe Ala Val Tyr Leu His Arg
35 40 45
Arg Leu Asp Lys Val Glu Glu Glu Val Asn Leu His Glu Asp Phe Val
50 55 60
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65 70 75 80
Leu Leu Asn Cys Glu Glu Met Arg Arg Gln Phe Glu Asp Leu Val Lys
85 90 95
Asp Ile Thr Leu Asn Lys Glu Glu Lys Lys Glu Asn Ser Phe Glu Met
100 105 110
Gln Arg Gly Asp Glu Asp Pro Gln Ile Ala Ala His Val Val Ser Glu
115 120 125
Ala Asn Ser Asn Ala Ala Ser Val Leu Gln Trp Ala Lys Lys Gly Tyr
130 135 140
Tyr Thr Met Lys Ser Asn Leu Val Met Leu Glu Asn Gly Lys Gln Leu
145 150 155 160
Thr Val Lys Arg Glu Gly Leu Tyr Tyr Val Tyr Thr Gln Val Thr Phe
165 170 175
Cys Ser Asn Arg Glu Pro Ser Ser Gln Arg Pro Phe Ile Val Gly Leu
180 185 190
Trp Leu Lys Pro Ser Ser Gly Ser Glu Arg Ile Leu Leu Lys Ala Ala
195 200 205
Asn Thr His Ser Ser Ser Gln Leu Cys Glu Gln Gln Ser Val His Leu
210 215 220
Gly Gly Val Phe Glu Leu Gln Ala Gly Ala Ser Val Phe Val Asn Val
225 230 235 240
Thr Glu Ala Ser Gln Val Ile His Arg Val Gly Phe Ser Ser Phe Gly
245 250 255
Leu Leu Lys Leu
260
<210> 163
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 163
Met Gly Ala Leu Gly Leu Glu Gly Arg Gly Gly Arg Leu Gln Gly Arg
1 5 10 15
Gly Ser Leu Leu Leu Ala Val Ala Gly Ala Thr Ser Leu Val Thr Leu
20 25 30
Leu Leu Ala Val Pro Ile Thr Val Leu Ala Val Leu Ala Leu Val Pro
35 40 45
Gln Asp Gln Gly Gly Leu Val Thr Glu Thr Ala Asp Pro Gly Ala Gln
50 55 60
Ala Gln Gln Gly Leu Gly Phe Gln Lys Leu Pro Glu Glu Glu Pro Glu
65 70 75 80
Thr Asp Leu Ser Pro Gly Leu Pro Ala Ala His Leu Ile Gly Ala Pro
85 90 95
Leu Lys Gly Gln Gly Leu Gly Trp Glu Thr Thr Lys Glu Gln Ala Phe
100 105 110
Leu Thr Ser Gly Thr Gln Phe Ser Asp Ala Glu Gly Leu Ala Leu Pro
115 120 125
Gln Asp Gly Leu Tyr Tyr Leu Tyr Cys Leu Val Gly Tyr Arg Gly Arg
130 135 140
Ala Pro Pro Gly Gly Gly Asp Pro Gln Gly Arg Ser Val Thr Leu Arg
145 150 155 160
Ser Ser Leu Tyr Arg Ala Gly Gly Ala Tyr Gly Pro Gly Thr Pro Glu
165 170 175
Leu Leu Leu Glu Gly Ala Glu Thr Val Thr Pro Val Leu Asp Pro Ala
180 185 190
Arg Arg Gln Gly Tyr Gly Pro Leu Trp Tyr Thr Ser Val Gly Phe Gly
195 200 205
Gly Leu Val Gln Leu Arg Arg Gly Glu Arg Val Tyr Val Asn Ile Ser
210 215 220
His Pro Asp Met Val Asp Phe Ala Arg Gly Lys Thr Phe Phe Gly Ala
225 230 235 240
Val Met Val Gly
<210> 164
<211> 306
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 164
Met Gly Thr Arg Gly Leu Gln Gly Leu Gly Gly Arg Pro Gln Gly Arg
1 5 10 15
Gly Cys Leu Leu Leu Ala Val Ala Gly Ala Thr Ser Leu Val Thr Leu
20 25 30
Leu Leu Ala Val Pro Ile Thr Val Leu Ala Val Leu Ala Leu Val Pro
35 40 45
Gln Asp Gln Gly Arg Arg Val Glu Lys Ile Ile Gly Ser Gly Ala Gln
50 55 60
Ala Gln Lys Arg Leu Asp Asp Ser Lys Pro Ser Cys Ile Leu Pro Ser
65 70 75 80
Pro Ser Ser Leu Ser Glu Thr Pro Asp Pro Arg Leu His Pro Gln Arg
85 90 95
Ser Asn Ala Ser Arg Asn Leu Ala Ser Thr Ser Gln Gly Pro Val Ala
100 105 110
Gln Ser Ser Arg Glu Ala Ser Ala Trp Met Thr Ile Leu Ser Pro Ala
115 120 125
Ala Asp Ser Thr Pro Asp Pro Gly Val Gln Gln Leu Pro Lys Gly Glu
130 135 140
Pro Glu Thr Asp Leu Asn Pro Glu Leu Pro Ala Ala His Leu Ile Gly
145 150 155 160
Ala Trp Met Ser Gly Gln Gly Leu Ser Trp Glu Ala Ser Gln Glu Glu
165 170 175
Ala Phe Leu Arg Ser Gly Ala Gln Phe Ser Pro Thr His Gly Leu Ala
180 185 190
Leu Pro Gln Asp Gly Val Tyr Tyr Leu Tyr Cys His Val Gly Tyr Arg
195 200 205
Gly Arg Thr Pro Pro Ala Gly Arg Ser Arg Ala Arg Ser Leu Thr Leu
210 215 220
Arg Ser Ala Leu Tyr Arg Ala Gly Gly Ala Tyr Gly Arg Gly Ser Pro
225 230 235 240
Glu Leu Leu Leu Glu Gly Ala Glu Thr Val Thr Pro Val Val Asp Pro
245 250 255
Ile Gly Tyr Gly Ser Leu Trp Tyr Thr Ser Val Gly Phe Gly Gly Leu
260 265 270
Ala Gln Leu Arg Ser Gly Glu Arg Val Tyr Val Asn Ile Ser His Pro
275 280 285
Asp Met Val Asp Tyr Arg Arg Gly Lys Thr Phe Phe Gly Ala Val Met
290 295 300
Val Gly
305
<210> 165
<211> 232
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 165
Ser Thr Glu Ser Met Ile Arg Asp Val Glu Leu Ala Glu Glu Ala Leu
1 5 10 15
Pro Lys Lys Thr Gly Gly Pro Gln Gly Ser Arg Arg Cys Leu Phe Leu
20 25 30
Ser Leu Phe Ser Phe Leu Ile Val Ala Gly Ala Thr Thr Leu Phe Cys
35 40 45
Leu Leu His Phe Gly Val Ile Gly Pro Gln Arg Glu Glu Phe Pro Arg
50 55 60
Asp Leu Ser Leu Ile Ser Pro Leu Ala Gln Ala Val Arg Ser Ser Ser
65 70 75 80
Arg Thr Pro Ser Asp Lys Pro Val Ala His Val Val Ala Asn Pro Gln
85 90 95
Ala Glu Gly Gln Leu Gln Trp Leu Asn Arg Arg Ala Asn Ala Leu Leu
100 105 110
Ala Asn Gly Val Glu Leu Arg Asp Asn Gln Leu Val Val Pro Ser Glu
115 120 125
Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr Ser Gln Val Leu Phe Lys Gly Gln Gly Cys
130 135 140
Pro Ser Thr His Val Leu Leu Thr His Thr Ile Ser Arg Ile Ala Val
145 150 155 160
Ser Tyr Gln Thr Lys Val Asn Leu Leu Ser Ala Ile Lys Ser Pro Cys
165 170 175
Gln Arg Glu Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp Tyr Glu Pro
180 185 190
Ile Tyr Leu Gly Gly Val Phe Gln Leu Glu Lys Gly Asp Arg Leu Ser
195 200 205
Ala Glu Ile Asn Arg Pro Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Gln
210 215 220
Val Tyr Phe Gly Ile Ile Ala Leu
225 230
<210> 166
<211> 138
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 166
Asn His Gln Val Glu Glu Gln Leu Glu Trp Leu Ser Gln Arg Ala Asn
1 5 10 15
Ala Leu Leu Ala Asn Gly Met Asp Leu Lys Asp Asn Gln Leu Val Val
20 25 30
Pro Ala Asp Gly Leu Tyr Leu Val Tyr Ser Gln Val Leu Phe Lys Gly
35 40 45
Gln Gly Cys Pro Asp Tyr Val Leu Leu Thr His Thr Val Ser Arg Phe
50 55 60
Ala Ile Ser Tyr Gln Glu Lys Val Asn Leu Leu Ser Ala Val Lys Ser
65 70 75 80
Pro Cys Pro Lys Asp Thr Pro Glu Gly Ala Glu Leu Lys Pro Trp Tyr
85 90 95
Glu Pro Ile Tyr Leu Gly Gly Val Phe Gln Leu Glu Lys Gly Asp Gln
100 105 110
Leu Ser Ala Glu Val Asn Leu Pro Lys Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser
115 120 125
Gly Gln Val Tyr Phe Gly Val Ile Ala Leu
130 135
<210> 167
<211> 205
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 167
Met Thr Pro Pro Glu Arg Leu Phe Leu Pro Arg Val Cys Gly Thr Thr
1 5 10 15
Leu His Leu Leu Leu Leu Gly Leu Leu Leu Val Leu Leu Pro Gly Ala
20 25 30
Gln Gly Leu Pro Gly Val Gly Leu Thr Pro Ser Ala Ala Gln Thr Ala
35 40 45
Arg Gln His Pro Lys Met His Leu Ala His Ser Thr Leu Lys Pro Ala
50 55 60
Ala His Leu Ile Gly Asp Pro Ser Lys Gln Asn Ser Leu Leu Trp Arg
65 70 75 80
Ala Asn Thr Asp Arg Ala Phe Leu Gln Asp Gly Phe Ser Leu Ser Asn
85 90 95
Asn Ser Leu Leu Val Pro Thr Ser Gly Ile Tyr Phe Val Tyr Ser Gln
100 105 110
Val Val Phe Ser Gly Lys Ala Tyr Ser Pro Lys Ala Thr Ser Ser Pro
115 120 125
Leu Tyr Leu Ala His Glu Val Gln Leu Phe Ser Ser Gln Tyr Pro Phe
130 135 140
His Val Pro Leu Leu Ser Ser Gln Lys Met Val Tyr Pro Gly Leu Gln
145 150 155 160
Glu Pro Trp Leu His Ser Met Tyr His Gly Ala Ala Phe Gln Leu Thr
165 170 175
Gln Gly Asp Gln Leu Ser Thr His Thr Asp Gly Ile Pro His Leu Val
180 185 190
Leu Ser Pro Ser Thr Val Phe Phe Gly Ala Phe Ala Leu
195 200 205
<210> 168
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 168
Met Glu Tyr Ala Ser Asp Ala Ser Leu Asp Pro Glu Ala Pro Trp Pro
1 5 10 15
Pro Ala Pro Arg Ala Arg Ala Cys Arg Val Leu Pro Trp Ala Leu Val
20 25 30
Ala Gly Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ala Ala Ala Cys Ala Val Phe
35 40 45
Leu Ala Cys Pro Trp Ala Val Ser Gly Ala Arg Ala Ser Pro Gly Ser
50 55 60
Ala Ala Ser Pro Arg Leu Arg Glu Gly Pro Glu Leu Ser Pro Asp Asp
65 70 75 80
Pro Ala Gly Leu Leu Asp Leu Arg Gln Gly Met Phe Ala Gln Leu Val
85 90 95
Ala Gln Asn Val Leu Leu Ile Asp Gly Pro Leu Ser Trp Tyr Ser Asp
100 105 110
Pro Gly Leu Ala Gly Val Ser Leu Thr Gly Gly Leu Ser Tyr Lys Glu
115 120 125
Asp Thr Lys Glu Leu Val Val Ala Lys Ala Gly Val Tyr Tyr Val Phe
130 135 140
Phe Gln Leu Glu Leu Arg Arg Val Val Ala Gly Glu Gly Ser Gly Ser
145 150 155 160
Val Ser Leu Ala Leu His Leu Gln Pro Leu Arg Ser Ala Ala Gly Ala
165 170 175
Ala Ala Leu Ala Leu Thr Val Asp Leu Pro Pro Ala Ser Ser Glu Ala
180 185 190
Arg Asn Ser Ala Phe Gly Phe Gln Gly Arg Leu Leu His Leu Ser Ala
195 200 205
Gly Gln Arg Leu Gly Val His Leu His Thr Glu Ala Arg Ala Arg His
210 215 220
Ala Trp Gln Leu Thr Gln Gly Ala Thr Val Leu Gly Leu Phe Arg Val
225 230 235 240
Thr Pro Glu Ile Pro Ala Gly Leu Pro Ser Pro Arg Ser Glu
245 250
<210> 169
<211> 309
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 169
Met Asp Gln His Thr Leu Asp Val Glu Asp Thr Ala Asp Ala Arg His
1 5 10 15
Pro Ala Gly Thr Ser Cys Pro Ser Asp Ala Ala Leu Leu Arg Asp Thr
20 25 30
Gly Leu Leu Ala Asp Ala Ala Leu Leu Ser Asp Thr Val Arg Pro Thr
35 40 45
Asn Ala Ala Leu Pro Thr Asp Ala Ala Tyr Pro Ala Val Asn Val Arg
50 55 60
Asp Arg Glu Ala Ala Trp Pro Pro Ala Leu Asn Phe Cys Ser Arg His
65 70 75 80
Pro Lys Leu Tyr Gly Leu Val Ala Leu Val Leu Leu Leu Leu Ile Ala
85 90 95
Ala Cys Val Pro Ile Phe Thr Arg Thr Glu Pro Arg Pro Ala Leu Thr
100 105 110
Ile Thr Thr Ser Pro Asn Leu Gly Thr Arg Glu Asn Asn Ala Asp Gln
115 120 125
Val Thr Pro Val Ser His Ile Gly Cys Pro Asn Thr Thr Gln Gln Gly
130 135 140
Ser Pro Val Phe Ala Lys Leu Leu Ala Lys Asn Gln Ala Ser Leu Cys
145 150 155 160
Asn Thr Thr Leu Asn Trp His Ser Gln Asp Gly Ala Gly Ser Ser Tyr
165 170 175
Leu Ser Gln Gly Leu Arg Tyr Glu Glu Asp Lys Lys Glu Leu Val Val
180 185 190
Asp Ser Pro Gly Leu Tyr Tyr Val Phe Leu Glu Leu Lys Leu Ser Pro
195 200 205
Thr Phe Thr Asn Thr Gly His Lys Val Gln Gly Trp Val Ser Leu Val
210 215 220
Leu Gln Ala Lys Pro Gln Val Asp Asp Phe Asp Asn Leu Ala Leu Thr
225 230 235 240
Val Glu Leu Phe Pro Cys Ser Met Glu Asn Lys Leu Val Asp Arg Ser
245 250 255
Trp Ser Gln Leu Leu Leu Leu Lys Ala Gly His Arg Leu Ser Val Gly
260 265 270
Leu Arg Ala Tyr Leu His Gly Ala Gln Asp Ala Tyr Arg Asp Trp Glu
275 280 285
Leu Ser Tyr Pro Asn Thr Thr Ser Phe Gly Leu Phe Leu Val Lys Pro
290 295 300
Asp Asn Pro Trp Glu
305
<210> 170
<211> 146
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 170
Ala Val Leu Thr Gln Lys Gln Lys Lys Gln His Ser Val Leu His Leu
1 5 10 15
Val Pro Ile Asn Ala Thr Ser Lys Asp Asp Ser Asp Val Thr Glu Val
20 25 30
Met Trp Gln Pro Ala Leu Arg Arg Gly Arg Gly Leu Gln Ala Gln Gly
35 40 45
Tyr Gly Val Arg Ile Gln Asp Ala Gly Val Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln
50 55 60
Val Leu Phe Gln Asp Val Thr Phe Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg
65 70 75 80
Glu Gly Gln Gly Arg Gln Glu Thr Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met
85 90 95
Pro Ser His Pro Asp Arg Ala Tyr Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val
100 105 110
Phe His Leu His Gln Gly Asp Ile Leu Ser Val Ile Ile Pro Arg Ala
115 120 125
Arg Ala Lys Leu Asn Leu Ser Pro His Gly Thr Phe Leu Gly Phe Val
130 135 140
Lys Leu
145
<210> 171
<211> 241
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 171
Met Pro Ala Ser Ser Pro Gly His Met Gly Gly Ser Val Arg Glu Pro
1 5 10 15
Ala Leu Ser Val Ala Leu Trp Leu Ser Trp Gly Ala Val Leu Gly Ala
20 25 30
Val Thr Cys Ala Val Ala Leu Leu Ile Gln Gln Thr Glu Leu Gln Ser
35 40 45
Leu Arg Arg Glu Val Ser Arg Leu Gln Arg Ser Gly Gly Pro Ser Gln
50 55 60
Lys Gln Gly Glu Arg Pro Trp Gln Ser Leu Trp Glu Gln Ser Pro Asp
65 70 75 80
Val Leu Glu Ala Trp Lys Asp Gly Ala Lys Ser Arg Arg Arg Arg Ala
85 90 95
Val Leu Thr Gln Lys His Lys Lys Lys His Ser Val Leu His Leu Val
100 105 110
Pro Val Asn Ile Thr Ser Lys Ala Asp Ser Asp Val Thr Glu Val Met
115 120 125
Trp Gln Pro Val Leu Arg Arg Gly Arg Gly Leu Glu Ala Gln Gly Asp
130 135 140
Ile Val Arg Val Trp Asp Thr Gly Ile Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln Val
145 150 155 160
Leu Phe His Asp Val Thr Phe Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg Glu
165 170 175
Gly Gln Gly Arg Arg Glu Thr Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met Pro
180 185 190
Ser Asp Pro Asp Arg Ala Tyr Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val Phe
195 200 205
His Leu His Gln Gly Asp Ile Ile Thr Val Lys Ile Pro Arg Ala Asn
210 215 220
Ala Lys Leu Ser Leu Ser Pro His Gly Thr Phe Leu Gly Phe Val Lys
225 230 235 240
Leu
<210> 172
<211> 193
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 172
Met Pro Glu Glu Gly Ser Gly Cys Ser Val Arg Arg Arg Pro Tyr Gly
1 5 10 15
Cys Val Leu Arg Ala Ala Leu Val Pro Leu Val Ala Gly Leu Val Ile
20 25 30
Cys Leu Val Val Cys Ile Gln Arg Phe Ala Gln Ala Gln Gln Gln Leu
35 40 45
Pro Leu Glu Ser Leu Gly Trp Asp Val Ala Glu Leu Gln Leu Asn His
50 55 60
Thr Gly Pro Gln Gln Asp Pro Arg Leu Tyr Trp Gln Gly Gly Pro Ala
65 70 75 80
Leu Gly Arg Ser Phe Leu His Gly Pro Glu Leu Asp Lys Gly Gln Leu
85 90 95
Arg Ile His Arg Asp Gly Ile Tyr Met Val His Ile Gln Val Thr Leu
100 105 110
Ala Ile Cys Ser Ser Thr Thr Ala Ser Arg His His Pro Thr Thr Leu
115 120 125
Ala Val Gly Ile Cys Ser Pro Ala Ser Arg Ser Ile Ser Leu Leu Arg
130 135 140
Leu Ser Phe His Gln Gly Cys Thr Ile Ala Ser Gln Arg Leu Thr Pro
145 150 155 160
Leu Ala Arg Gly Asp Thr Leu Cys Thr Asn Leu Thr Gly Thr Leu Leu
165 170 175
Pro Ser Arg Asn Thr Asp Glu Thr Phe Phe Gly Val Gln Trp Val Arg
180 185 190
Pro
<210> 173
<211> 195
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 173
Met Pro Glu Glu Gly Arg Pro Cys Pro Trp Val Arg Trp Ser Gly Thr
1 5 10 15
Ala Phe Gln Arg Gln Trp Pro Trp Leu Leu Leu Val Val Phe Ile Thr
20 25 30
Val Phe Cys Cys Trp Phe His Cys Ser Gly Leu Leu Ser Lys Gln Gln
35 40 45
Gln Arg Leu Leu Glu His Pro Glu Pro His Thr Ala Glu Leu Gln Leu
50 55 60
Asn Leu Thr Val Pro Arg Lys Asp Pro Thr Leu Arg Trp Gly Ala Gly
65 70 75 80
Pro Ala Leu Gly Arg Ser Phe Thr His Gly Pro Glu Leu Glu Glu Gly
85 90 95
His Leu Arg Ile His Gln Asp Gly Leu Tyr Arg Leu His Ile Gln Val
100 105 110
Thr Leu Ala Asn Cys Ser Ser Pro Gly Ser Thr Leu Gln His Arg Ala
115 120 125
Thr Leu Ala Val Gly Ile Cys Ser Pro Ala Ala His Gly Ile Ser Leu
130 135 140
Leu Arg Gly Arg Phe Gly Gln Asp Cys Thr Val Ala Leu Gln Arg Leu
145 150 155 160
Thr Tyr Leu Val His Gly Asp Val Leu Cys Thr Asn Leu Thr Leu Pro
165 170 175
Leu Leu Pro Ser Arg Asn Ala Asp Glu Thr Phe Phe Gly Val Gln Trp
180 185 190
Ile Cys Pro
195
<210> 174
<211> 234
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 174
Met Asp Pro Gly Leu Gln Gln Ala Leu Asn Gly Met Ala Pro Pro Gly
1 5 10 15
Asp Thr Ala Met His Val Pro Ala Gly Ser Val Ala Ser His Leu Gly
20 25 30
Thr Thr Ser Arg Ser Tyr Phe Tyr Leu Thr Thr Ala Thr Leu Ala Leu
35 40 45
Cys Leu Val Phe Thr Val Ala Thr Ile Met Val Leu Val Val Gln Arg
50 55 60
Thr Asp Ser Ile Pro Asn Ser Pro Asp Asn Val Pro Leu Lys Gly Gly
65 70 75 80
Asn Cys Ser Glu Asp Leu Leu Cys Ile Leu Lys Arg Ala Pro Phe Lys
85 90 95
Lys Ser Trp Ala Tyr Leu Gln Val Ala Lys His Leu Asn Lys Thr Lys
100 105 110
Leu Ser Trp Asn Lys Asp Gly Ile Leu His Gly Val Arg Tyr Gln Asp
115 120 125
Gly Asn Leu Val Ile Gln Phe Pro Gly Leu Tyr Phe Ile Ile Cys Gln
130 135 140
Leu Gln Phe Leu Val Gln Cys Pro Asn Asn Ser Val Asp Leu Lys Leu
145 150 155 160
Glu Leu Leu Ile Asn Lys His Ile Lys Lys Gln Ala Leu Val Thr Val
165 170 175
Cys Glu Ser Gly Met Gln Thr Lys His Val Tyr Gln Asn Leu Ser Gln
180 185 190
Phe Leu Leu Asp Tyr Leu Gln Val Asn Thr Thr Ile Ser Val Asn Val
195 200 205
Asp Thr Phe Gln Tyr Ile Asp Thr Ser Thr Phe Pro Leu Glu Asn Val
210 215 220
Leu Ser Ile Phe Leu Tyr Ser Asn Ser Asp
225 230
<210> 175
<211> 239
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 175
Met Glu Pro Gly Leu Gln Gln Ala Gly Ser Cys Gly Ala Pro Ser Pro
1 5 10 15
Asp Pro Ala Met Gln Val Gln Pro Gly Ser Val Ala Ser Pro Trp Arg
20 25 30
Ser Thr Arg Pro Trp Arg Ser Thr Ser Arg Ser Tyr Phe Tyr Leu Ser
35 40 45
Thr Thr Ala Leu Val Cys Leu Val Val Ala Val Ala Ile Ile Leu Val
50 55 60
Leu Val Val Gln Lys Lys Asp Ser Thr Pro Asn Thr Thr Glu Lys Ala
65 70 75 80
Pro Leu Lys Gly Gly Asn Cys Ser Glu Asp Leu Phe Cys Thr Leu Lys
85 90 95
Ser Thr Pro Ser Lys Lys Ser Trp Ala Tyr Leu Gln Val Ser Lys His
100 105 110
Leu Asn Asn Thr Lys Leu Ser Trp Asn Glu Asp Gly Thr Ile His Gly
115 120 125
Leu Ile Tyr Gln Asp Gly Asn Leu Ile Val Gln Phe Pro Gly Leu Tyr
130 135 140
Phe Ile Val Cys Gln Leu Gln Phe Leu Val Gln Cys Ser Asn His Ser
145 150 155 160
Val Asp Leu Thr Leu Gln Leu Leu Ile Asn Ser Lys Ile Lys Lys Gln
165 170 175
Thr Leu Val Thr Val Cys Glu Ser Gly Val Gln Ser Lys Asn Ile Tyr
180 185 190
Gln Asn Leu Ser Gln Phe Leu Leu His Tyr Leu Gln Val Asn Ser Thr
195 200 205
Ile Ser Val Arg Val Asp Asn Phe Gln Tyr Val Asp Thr Asn Thr Phe
210 215 220
Pro Leu Asp Asn Val Leu Ser Val Phe Leu Tyr Ser Ser Ser Asp
225 230 235
<210> 176
<211> 281
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 176
Met Gln Gln Pro Phe Asn Tyr Pro Tyr Pro Gln Ile Tyr Trp Val Asp
1 5 10 15
Ser Ser Ala Ser Ser Pro Trp Ala Pro Pro Gly Thr Val Leu Pro Cys
20 25 30
Pro Thr Ser Val Pro Arg Arg Pro Gly Gln Arg Arg Pro Pro Pro Pro
35 40 45
Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Pro Leu Pro
50 55 60
Pro Leu Pro Leu Pro Pro Leu Lys Lys Arg Gly Asn His Ser Thr Gly
65 70 75 80
Leu Cys Leu Leu Val Met Phe Phe Met Val Leu Val Ala Leu Val Gly
85 90 95
Leu Gly Leu Gly Met Phe Gln Leu Phe His Leu Gln Lys Glu Leu Ala
100 105 110
Glu Leu Arg Glu Ser Thr Ser Gln Met His Thr Ala Ser Ser Leu Glu
115 120 125
Lys Gln Ile Gly His Pro Ser Pro Pro Pro Glu Lys Lys Glu Leu Arg
130 135 140
Lys Val Ala His Leu Thr Gly Lys Ser Asn Ser Arg Ser Met Pro Leu
145 150 155 160
Glu Trp Glu Asp Thr Tyr Gly Ile Val Leu Leu Ser Gly Val Lys Tyr
165 170 175
Lys Lys Gly Gly Leu Val Ile Asn Glu Thr Gly Leu Tyr Phe Val Tyr
180 185 190
Ser Lys Val Tyr Phe Arg Gly Gln Ser Cys Asn Asn Leu Pro Leu Ser
195 200 205
His Lys Val Tyr Met Arg Asn Ser Lys Tyr Pro Gln Asp Leu Val Met
210 215 220
Met Glu Gly Lys Met Met Ser Tyr Cys Thr Thr Gly Gln Met Trp Ala
225 230 235 240
Arg Ser Ser Tyr Leu Gly Ala Val Phe Asn Leu Thr Ser Ala Asp His
245 250 255
Leu Tyr Val Asn Val Ser Glu Leu Ser Leu Val Asn Phe Glu Glu Ser
260 265 270
Gln Thr Phe Phe Gly Leu Tyr Lys Leu
275 280
<210> 177
<211> 279
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 177
Met Gln Gln Pro Met Asn Tyr Pro Cys Pro Gln Ile Phe Trp Val Asp
1 5 10 15
Ser Ser Ala Thr Ser Ser Trp Ala Pro Pro Gly Ser Val Phe Pro Cys
20 25 30
Pro Ser Cys Gly Pro Arg Gly Pro Asp Gln Arg Arg Pro Pro Pro Pro
35 40 45
Pro Pro Pro Val Ser Pro Leu Pro Pro Pro Ser Gln Pro Leu Pro Leu
50 55 60
Pro Pro Leu Thr Pro Leu Lys Lys Lys Asp His Asn Thr Asn Leu Trp
65 70 75 80
Leu Pro Val Val Phe Phe Met Val Leu Val Ala Leu Val Gly Met Gly
85 90 95
Leu Gly Met Tyr Gln Leu Phe His Leu Gln Lys Glu Leu Ala Glu Leu
100 105 110
Arg Glu Phe Thr Asn Gln Ser Leu Lys Val Ser Ser Phe Glu Lys Gln
115 120 125
Ile Ala Asn Pro Ser Thr Pro Ser Glu Lys Lys Glu Pro Arg Ser Val
130 135 140
Ala His Leu Thr Gly Asn Pro His Ser Arg Ser Ile Pro Leu Glu Trp
145 150 155 160
Glu Asp Thr Tyr Gly Thr Ala Leu Ile Ser Gly Val Lys Tyr Lys Lys
165 170 175
Gly Gly Leu Val Ile Asn Glu Thr Gly Leu Tyr Phe Val Tyr Ser Lys
180 185 190
Val Tyr Phe Arg Gly Gln Ser Cys Asn Asn Gln Pro Leu Asn His Lys
195 200 205
Val Tyr Met Arg Asn Ser Lys Tyr Pro Glu Asp Leu Val Leu Met Glu
210 215 220
Glu Lys Arg Leu Asn Tyr Cys Thr Thr Gly Gln Ile Trp Ala His Ser
225 230 235 240
Ser Tyr Leu Gly Ala Val Phe Asn Leu Thr Ser Ala Asp His Leu Tyr
245 250 255
Val Asn Ile Ser Gln Leu Ser Leu Ile Asn Phe Glu Glu Ser Lys Thr
260 265 270
Phe Phe Gly Leu Tyr Lys Leu
275
<210> 178
<211> 199
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 178
Met Thr Leu His Pro Ser Pro Ile Thr Cys Glu Phe Leu Phe Ser Thr
1 5 10 15
Ala Leu Ile Ser Pro Lys Met Cys Leu Ser His Leu Glu Asn Met Pro
20 25 30
Leu Ser His Ser Arg Thr Gln Gly Ala Gln Arg Ser Ser Trp Lys Leu
35 40 45
Trp Leu Phe Cys Ser Ile Val Met Leu Leu Phe Leu Cys Ser Phe Ser
50 55 60
Trp Leu Ile Phe Ile Phe Leu Gln Leu Glu Thr Ala Lys Glu Pro Cys
65 70 75 80
Met Ala Lys Phe Gly Pro Leu Pro Ser Lys Trp Gln Met Ala Ser Ser
85 90 95
Glu Pro Pro Cys Val Asn Lys Val Ser Asp Trp Lys Leu Glu Ile Leu
100 105 110
Gln Asn Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr Gly Gln Val Ala Pro Asn Ala Asn
115 120 125
Tyr Asn Asp Val Ala Pro Phe Glu Val Arg Leu Tyr Lys Asn Lys Asp
130 135 140
Met Ile Gln Thr Leu Thr Asn Lys Ser Lys Ile Gln Asn Val Gly Gly
145 150 155 160
Thr Tyr Glu Leu His Val Gly Asp Thr Ile Asp Leu Ile Phe Asn Ser
165 170 175
Glu His Gln Val Leu Lys Asn Asn Thr Tyr Trp Gly Ile Ile Leu Leu
180 185 190
Ala Asn Pro Gln Phe Ile Ser
195
<210> 179
<211> 173
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 179
Met Glu Glu Met Pro Leu Arg Glu Ser Ser Pro Gln Arg Ala Glu Arg
1 5 10 15
Cys Lys Lys Ser Trp Leu Leu Cys Ile Val Ala Leu Leu Leu Met Leu
20 25 30
Leu Cys Ser Leu Gly Thr Leu Ile Tyr Thr Ser Leu Lys Pro Thr Ala
35 40 45
Ile Glu Ser Cys Met Val Lys Phe Glu Leu Ser Ser Ser Lys Trp His
50 55 60
Met Thr Ser Pro Lys Pro His Cys Val Asn Thr Thr Ser Asp Gly Lys
65 70 75 80
Leu Lys Ile Leu Gln Ser Gly Thr Tyr Leu Ile Tyr Gly Gln Val Ile
85 90 95
Pro Val Asp Lys Lys Tyr Ile Lys Asp Asn Ala Pro Phe Val Val Gln
100 105 110
Ile Tyr Lys Lys Asn Asp Val Leu Gln Thr Leu Met Asn Asp Phe Gln
115 120 125
Ile Leu Pro Ile Gly Gly Val Tyr Glu Leu His Ala Gly Asp Asn Ile
130 135 140
Tyr Leu Lys Phe Asn Ser Lys Asp His Ile Gln Lys Thr Asn Thr Tyr
145 150 155 160
Trp Gly Ile Ile Leu Met Pro Asp Leu Pro Phe Ile Ser
165 170
<210> 180
<211> 240
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 180
Met Glu Glu Ser Val Val Arg Pro Ser Val Phe Val Val Asp Gly Gln
1 5 10 15
Thr Asp Ile Pro Phe Thr Arg Leu Gly Arg Ser His Arg Arg Gln Ser
20 25 30
Cys Ser Val Ala Arg Val Gly Leu Gly Leu Leu Leu Leu Leu Met Gly
35 40 45
Ala Gly Leu Ala Val Gln Gly Trp Phe Leu Leu Gln Leu His Trp Arg
50 55 60
Leu Gly Glu Met Val Thr Arg Leu Pro Asp Gly Pro Ala Gly Ser Trp
65 70 75 80
Glu Gln Leu Ile Gln Glu Arg Arg Ser His Glu Val Asn Pro Ala Ala
85 90 95
His Leu Thr Gly Ala Asn Ser Ser Leu Thr Gly Ser Gly Gly Pro Leu
100 105 110
Leu Trp Glu Thr Gln Leu Gly Leu Ala Phe Leu Arg Gly Leu Ser Tyr
115 120 125
His Asp Gly Ala Leu Val Val Thr Lys Ala Gly Tyr Tyr Tyr Ile Tyr
130 135 140
Ser Lys Val Gln Leu Gly Gly Val Gly Cys Pro Leu Gly Leu Ala Ser
145 150 155 160
Thr Ile Thr His Gly Leu Tyr Lys Arg Thr Pro Arg Tyr Pro Glu Glu
165 170 175
Leu Glu Leu Leu Val Ser Gln Gln Ser Pro Cys Gly Arg Ala Thr Ser
180 185 190
Ser Ser Arg Val Trp Trp Asp Ser Ser Phe Leu Gly Gly Val Val His
195 200 205
Leu Glu Ala Gly Glu Lys Val Val Val Arg Val Leu Asp Glu Arg Leu
210 215 220
Val Arg Leu Arg Asp Gly Thr Arg Ser Tyr Phe Gly Ala Phe Met Val
225 230 235 240
<210> 181
<211> 239
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 181
Met Glu Ser Val Val Gln Pro Ser Val Phe Val Val Asp Gly Gln Thr
1 5 10 15
Asp Ile Pro Phe Arg Arg Leu Glu Gln Asn His Arg Arg Arg Arg Cys
20 25 30
Gly Thr Val Gln Val Ser Leu Ala Leu Val Leu Leu Leu Gly Ala Gly
35 40 45
Leu Ala Thr Gln Gly Trp Phe Leu Leu Arg Leu His Gln Arg Leu Gly
50 55 60
Asp Ile Val Ala His Leu Pro Asp Gly Gly Lys Gly Ser Trp Glu Lys
65 70 75 80
Leu Ile Gln Asp Gln Arg Ser His Gln Ala Asn Pro Ala Ala His Leu
85 90 95
Thr Gly Ala Asn Ala Ser Leu Ile Gly Ile Gly Gly Pro Leu Leu Trp
100 105 110
Glu Thr Arg Leu Gly Leu Ala Phe Leu Arg Gly Leu Thr Tyr His Asp
115 120 125
Gly Ala Leu Val Thr Met Glu Pro Gly Tyr Tyr Tyr Val Tyr Ser Lys
130 135 140
Val Gln Leu Ser Gly Val Gly Cys Pro Gln Gly Leu Ala Asn Gly Leu
145 150 155 160
Pro Ile Thr His Gly Leu Tyr Lys Arg Thr Ser Arg Tyr Pro Lys Glu
165 170 175
Leu Glu Leu Leu Val Ser Arg Arg Ser Pro Cys Gly Arg Ala Asn Ser
180 185 190
Ser Arg Val Trp Trp Asp Ser Ser Phe Leu Gly Gly Val Val His Leu
195 200 205
Glu Ala Gly Glu Glu Val Val Val Arg Val Pro Gly Asn Arg Leu Val
210 215 220
Arg Pro Arg Asp Gly Thr Arg Ser Tyr Phe Gly Ala Phe Met Val
225 230 235
<210> 182
<211> 183
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 182
Met Glu Arg Val Gln Pro Leu Glu Glu Asn Val Gly Asn Ala Ala Arg
1 5 10 15
Pro Arg Phe Glu Arg Asn Lys Leu Leu Leu Val Ala Ser Val Ile Gln
20 25 30
Gly Leu Gly Leu Leu Leu Cys Phe Thr Tyr Ile Cys Leu His Phe Ser
35 40 45
Ala Leu Gln Val Ser His Arg Tyr Pro Arg Ile Gln Ser Ile Lys Val
50 55 60
Gln Phe Thr Glu Tyr Lys Lys Glu Lys Gly Phe Ile Leu Thr Ser Gln
65 70 75 80
Lys Glu Asp Glu Ile Met Lys Val Gln Asn Asn Ser Val Ile Ile Asn
85 90 95
Cys Asp Gly Phe Tyr Leu Ile Ser Leu Lys Gly Tyr Phe Ser Gln Glu
100 105 110
Val Asn Ile Ser Leu His Tyr Gln Lys Asp Glu Glu Pro Leu Phe Gln
115 120 125
Leu Lys Lys Val Arg Ser Val Asn Ser Leu Met Val Ala Ser Leu Thr
130 135 140
Tyr Lys Asp Lys Val Tyr Leu Asn Val Thr Thr Asp Asn Thr Ser Leu
145 150 155 160
Asp Asp Phe His Val Asn Gly Gly Glu Leu Ile Leu Ile His Gln Asn
165 170 175
Pro Gly Glu Phe Cys Val Leu
180
<210> 183
<211> 197
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 183
Met Glu Gly Glu Gly Val Gln Pro Leu Asp Glu Asn Leu Glu Asn Gly
1 5 10 15
Ser Arg Pro Arg Phe Lys Trp Lys Lys Thr Leu Arg Leu Val Val Ser
20 25 30
Gly Ile Lys Gly Ala Gly Met Leu Leu Cys Phe Ile Tyr Val Cys Leu
35 40 45
Gln Leu Ser Ser Ser Pro Ala Lys Asp Pro Pro Ile Gln Arg Leu Arg
50 55 60
Gly Ala Val Thr Arg Cys Glu Asp Gly Gln Leu Phe Ile Ser Ser Tyr
65 70 75 80
Lys Asn Glu Tyr Gln Thr Met Glu Val Gln Asn Asn Ser Val Val Ile
85 90 95
Lys Cys Asp Gly Leu Tyr Ile Ile Tyr Leu Lys Gly Ser Phe Phe Gln
100 105 110
Glu Val Lys Ile Asp Leu His Phe Arg Glu Asp His Asn Pro Ile Ser
115 120 125
Ile Pro Met Leu Asn Asp Gly Arg Arg Ile Val Phe Thr Val Val Ala
130 135 140
Ser Leu Ala Phe Lys Asp Lys Val Tyr Leu Thr Val Asn Ala Pro Asp
145 150 155 160
Thr Leu Cys Glu His Leu Gln Ile Asn Asp Gly Glu Leu Ile Val Val
165 170 175
Gln Leu Thr Pro Gly Tyr Cys Ala Pro Glu Gly Ser Tyr His Ser Thr
180 185 190
Val Asn Gln Val Pro
195
<210> 184
<211> 285
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 184
Met Asp Asp Ser Thr Glu Arg Glu Gln Ser Arg Leu Thr Ser Cys Leu
1 5 10 15
Lys Lys Arg Glu Glu Met Lys Leu Lys Glu Cys Val Ser Ile Leu Pro
20 25 30
Arg Lys Glu Ser Pro Ser Val Arg Ser Ser Lys Asp Gly Lys Leu Leu
35 40 45
Ala Ala Thr Leu Leu Leu Ala Leu Leu Ser Cys Cys Leu Thr Val Val
50 55 60
Ser Phe Tyr Gln Val Ala Ala Leu Gln Gly Asp Leu Ala Ser Leu Arg
65 70 75 80
Ala Glu Leu Gln Gly His His Ala Glu Lys Leu Pro Ala Gly Ala Gly
85 90 95
Ala Pro Lys Ala Gly Leu Glu Glu Ala Pro Ala Val Thr Ala Gly Leu
100 105 110
Lys Ile Phe Glu Pro Pro Ala Pro Gly Glu Gly Asn Ser Ser Gln Asn
115 120 125
Ser Arg Asn Lys Arg Ala Val Gln Gly Pro Glu Glu Thr Val Thr Gln
130 135 140
Asp Cys Leu Gln Leu Ile Ala Asp Ser Glu Thr Pro Thr Ile Gln Lys
145 150 155 160
Gly Ser Tyr Thr Phe Val Pro Trp Leu Leu Ser Phe Lys Arg Gly Ser
165 170 175
Ala Leu Glu Glu Lys Glu Asn Lys Ile Leu Val Lys Glu Thr Gly Tyr
180 185 190
Phe Phe Ile Tyr Gly Gln Val Leu Tyr Thr Asp Lys Thr Tyr Ala Met
195 200 205
Gly His Leu Ile Gln Arg Lys Lys Val His Val Phe Gly Asp Glu Leu
210 215 220
Ser Leu Val Thr Leu Phe Arg Cys Ile Gln Asn Met Pro Glu Thr Leu
225 230 235 240
Pro Asn Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Ile Ala Lys Leu Glu Glu Gly
245 250 255
Asp Glu Leu Gln Leu Ala Ile Pro Arg Glu Asn Ala Gln Ile Ser Leu
260 265 270
Asp Gly Asp Val Thr Phe Phe Gly Ala Leu Lys Leu Leu
275 280 285
<210> 185
<211> 249
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 185
Met Ala Met Ala Phe Cys Pro Lys Asp Gln Tyr Trp Asp Ser Ser Arg
1 5 10 15
Lys Ser Cys Val Ser Cys Ala Leu Thr Cys Ser Gln Arg Ser Gln Arg
20 25 30
Thr Cys Thr Asp Phe Cys Lys Phe Ile Asn Cys Arg Lys Glu Gln Gly
35 40 45
Arg Tyr Tyr Asp His Leu Leu Gly Ala Cys Val Ser Cys Asp Ser Thr
50 55 60
Cys Thr Gln His Pro Gln Gln Cys Ala His Phe Cys Glu Lys Arg Pro
65 70 75 80
Arg Ser Gln Ala Asn Leu Gln Pro Glu Leu Gly Arg Pro Gln Ala Gly
85 90 95
Glu Val Glu Val Arg Ser Asp Asn Ser Gly Arg His Gln Gly Ser Glu
100 105 110
His Gly Pro Gly Leu Arg Leu Ser Ser Asp Gln Leu Thr Leu Tyr Cys
115 120 125
Thr Leu Gly Val Cys Leu Cys Ala Ile Phe Cys Cys Phe Leu Val Ala
130 135 140
Leu Ala Ser Phe Leu Arg Arg Arg Gly Glu Pro Leu Pro Ser Gln Pro
145 150 155 160
Ala Gly Pro Arg Gly Ser Gln Ala Asn Ser Pro His Ala His Arg Pro
165 170 175
Val Thr Glu Ala Cys Asp Glu Val Thr Ala Ser Pro Gln Pro Val Glu
180 185 190
Thr Cys Ser Phe Cys Phe Pro Glu Arg Ser Ser Pro Thr Gln Glu Ser
195 200 205
Ala Pro Arg Ser Leu Gly Ile His Gly Phe Ala Gly Thr Ala Ala Pro
210 215 220
Gln Pro Cys Met Arg Ala Thr Val Gly Gly Leu Gly Val Leu Arg Ala
225 230 235 240
Ser Thr Gly Asp Ala Arg Pro Ala Thr
245
<210> 186
<211> 281
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 186
Met Ala Met Met Glu Val Gln Gly Gly Pro Ser Leu Gly Gln Thr Cys
1 5 10 15
Val Leu Ile Val Ile Phe Thr Val Leu Leu Gln Ser Leu Cys Val Ala
20 25 30
Val Thr Tyr Val Tyr Phe Thr Asn Glu Leu Lys Gln Met Gln Asp Lys
35 40 45
Tyr Ser Lys Ser Gly Ile Ala Cys Phe Leu Lys Glu Asp Asp Ser Tyr
50 55 60
Trp Asp Pro Asn Asp Glu Glu Ser Met Asn Ser Pro Cys Trp Gln Val
65 70 75 80
Lys Trp Gln Leu Arg Gln Leu Val Arg Lys Met Ile Leu Arg Thr Ser
85 90 95
Glu Glu Thr Ile Ser Thr Val Gln Glu Lys Gln Gln Asn Ile Ser Pro
100 105 110
Leu Val Arg Glu Arg Gly Pro Gln Arg Val Ala Ala His Ile Thr Gly
115 120 125
Thr Arg Gly Arg Ser Asn Thr Leu Ser Ser Pro Asn Ser Lys Asn Glu
130 135 140
Lys Ala Leu Gly Arg Lys Ile Asn Ser Trp Glu Ser Ser Arg Ser Gly
145 150 155 160
His Ser Phe Leu Ser Asn Leu His Leu Arg Asn Gly Glu Leu Val Ile
165 170 175
His Glu Lys Gly Phe Tyr Tyr Ile Tyr Ser Gln Thr Tyr Phe Arg Phe
180 185 190
Gln Glu Glu Ile Lys Glu Asn Thr Lys Asn Asp Lys Gln Met Val Gln
195 200 205
Tyr Ile Tyr Lys Tyr Thr Ser Tyr Pro Asp Pro Ile Leu Leu Met Lys
210 215 220
Ser Ala Arg Asn Ser Cys Trp Ser Lys Asp Ala Glu Tyr Gly Leu Tyr
225 230 235 240
Ser Ile Tyr Gln Gly Gly Ile Phe Glu Leu Lys Glu Asn Asp Arg Ile
245 250 255
Phe Val Ser Val Thr Asn Glu His Leu Ile Asp Met Asp His Glu Ala
260 265 270
Ser Phe Phe Gly Ala Phe Leu Val Gly
275 280
<210> 187
<211> 291
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 187
Met Pro Ser Ser Gly Ala Leu Lys Asp Leu Ser Phe Ser Gln His Phe
1 5 10 15
Arg Met Met Val Ile Cys Ile Val Leu Leu Gln Val Leu Leu Gln Ala
20 25 30
Val Ser Val Ala Val Thr Tyr Met Tyr Phe Thr Asn Glu Met Lys Gln
35 40 45
Leu Gln Asp Asn Tyr Ser Lys Ile Gly Leu Ala Cys Phe Ser Lys Thr
50 55 60
Asp Glu Asp Phe Trp Asp Ser Thr Asp Gly Glu Ile Leu Asn Arg Pro
65 70 75 80
Cys Leu Gln Val Lys Arg Gln Leu Tyr Gln Leu Ile Glu Glu Val Thr
85 90 95
Leu Arg Thr Phe Gln Asp Thr Ile Ser Thr Val Pro Glu Lys Gln Leu
100 105 110
Ser Thr Pro Pro Leu Pro Arg Gly Gly Arg Pro Gln Lys Val Ala Ala
115 120 125
His Ile Thr Gly Ile Thr Arg Arg Ser Asn Ser Ala Leu Ile Pro Ile
130 135 140
Ser Lys Asp Gly Lys Thr Leu Gly Gln Lys Ile Glu Ser Trp Glu Ser
145 150 155 160
Ser Arg Lys Gly His Ser Phe Leu Asn His Val Leu Phe Arg Asn Gly
165 170 175
Glu Leu Val Ile Glu Gln Glu Gly Leu Tyr Tyr Ile Tyr Ser Gln Thr
180 185 190
Tyr Phe Arg Phe Gln Glu Ala Glu Asp Ala Ser Lys Met Val Ser Lys
195 200 205
Asp Lys Val Arg Thr Lys Gln Leu Val Gln Tyr Ile Tyr Lys Tyr Thr
210 215 220
Ser Tyr Pro Asp Pro Ile Val Leu Met Lys Ser Ala Arg Asn Ser Cys
225 230 235 240
Trp Ser Arg Asp Ala Glu Tyr Gly Leu Tyr Ser Ile Tyr Gln Gly Gly
245 250 255
Leu Phe Glu Leu Lys Lys Asn Asp Arg Ile Phe Val Ser Val Thr Asn
260 265 270
Glu His Leu Met Asp Leu Asp Gln Glu Ala Ser Phe Phe Gly Ala Phe
275 280 285
Leu Ile Asn
290
<210> 188
<211> 249
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 188
Met Ala Ala Arg Arg Ser Gln Arg Arg Arg Gly Arg Arg Gly Glu Pro
1 5 10 15
Gly Thr Ala Leu Leu Val Pro Leu Ala Leu Gly Leu Gly Leu Ala Leu
20 25 30
Ala Cys Leu Gly Leu Leu Leu Ala Val Val Ser Leu Gly Ser Arg Ala
35 40 45
Ser Leu Ser Ala Gln Glu Pro Ala Gln Glu Glu Leu Val Ala Glu Glu
50 55 60
Asp Gln Asp Pro Ser Glu Leu Asn Pro Gln Thr Glu Glu Ser Gln Asp
65 70 75 80
Pro Ala Pro Phe Leu Asn Arg Leu Val Arg Pro Arg Arg Ser Ala Pro
85 90 95
Lys Gly Arg Lys Thr Arg Ala Arg Arg Ala Ile Ala Ala His Tyr Glu
100 105 110
Val His Pro Arg Pro Gly Gln Asp Gly Ala Gln Ala Gly Val Asp Gly
115 120 125
Thr Val Ser Gly Trp Glu Glu Ala Arg Ile Asn Ser Ser Ser Pro Leu
130 135 140
Arg Tyr Asn Arg Gln Ile Gly Glu Phe Ile Val Thr Arg Ala Gly Leu
145 150 155 160
Tyr Tyr Leu Tyr Cys Gln Val His Phe Asp Glu Gly Lys Ala Val Tyr
165 170 175
Leu Lys Leu Asp Leu Leu Val Asp Gly Val Leu Ala Leu Arg Cys Leu
180 185 190
Glu Glu Phe Ser Ala Thr Ala Ala Ser Ser Leu Gly Pro Gln Leu Arg
195 200 205
Leu Cys Gln Val Ser Gly Leu Leu Ala Leu Arg Pro Gly Ser Ser Leu
210 215 220
Arg Ile Arg Thr Leu Pro Trp Ala His Leu Lys Ala Ala Pro Phe Leu
225 230 235 240
Thr Tyr Phe Gly Leu Phe Gln Val His
245
<210> 189
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 189
Met Ala Ser Ala Trp Pro Arg Ser Leu Pro Gln Ile Leu Val Leu Gly
1 5 10 15
Phe Gly Leu Val Leu Met Arg Ala Ala Ala Gly Glu Gln Ala Pro Gly
20 25 30
Thr Ser Pro Cys Ser Ser Gly Ser Ser Trp Ser Ala Asp Leu Asp Lys
35 40 45
Cys Met Asp Cys Ala Ser Cys Pro Ala Arg Pro His Ser Asp Phe Cys
50 55 60
Leu Gly Cys Ala Ala Ala Pro Pro Ala His Phe Arg Leu Leu Trp Pro
65 70 75 80
Ile Leu Gly Gly Ala Leu Ser Leu Val Leu Val Leu Ala Leu Val Ser
85 90 95
Ser Phe Leu Val Trp Arg Arg Cys Arg Arg Arg Glu Lys Phe Thr Thr
100 105 110
Pro Ile Glu Glu Thr Gly Gly Glu Gly Cys Pro Gly Val Ala Leu Ile
115 120 125
Gln
<210> 190
<211> 317
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 190
Met Arg Arg Ala Ser Arg Asp Tyr Thr Lys Tyr Leu Arg Gly Ser Glu
1 5 10 15
Glu Met Gly Gly Gly Pro Gly Ala Pro His Glu Gly Pro Leu His Ala
20 25 30
Pro Pro Pro Pro Ala Pro His Gln Pro Pro Ala Ala Ser Arg Ser Met
35 40 45
Phe Val Ala Leu Leu Gly Leu Gly Leu Gly Gln Val Val Cys Ser Val
50 55 60
Ala Leu Phe Phe Tyr Phe Arg Ala Gln Met Asp Pro Asn Arg Ile Ser
65 70 75 80
Glu Asp Gly Thr His Cys Ile Tyr Arg Ile Leu Arg Leu His Glu Asn
85 90 95
Ala Asp Phe Gln Asp Thr Thr Leu Glu Ser Gln Asp Thr Lys Leu Ile
100 105 110
Pro Asp Ser Cys Arg Arg Ile Lys Gln Ala Phe Gln Gly Ala Val Gln
115 120 125
Lys Glu Leu Gln His Ile Val Gly Ser Gln His Ile Arg Ala Glu Lys
130 135 140
Ala Met Val Asp Gly Ser Trp Leu Asp Leu Ala Lys Arg Ser Lys Leu
145 150 155 160
Glu Ala Gln Pro Phe Ala His Leu Thr Ile Asn Ala Thr Asp Ile Pro
165 170 175
Ser Gly Ser His Lys Val Ser Leu Ser Ser Trp Tyr His Asp Arg Gly
180 185 190
Trp Ala Lys Ile Ser Asn Met Thr Phe Ser Asn Gly Lys Leu Ile Val
195 200 205
Asn Gln Asp Gly Phe Tyr Tyr Leu Tyr Ala Asn Ile Cys Phe Arg His
210 215 220
His Glu Thr Ser Gly Asp Leu Ala Thr Glu Tyr Leu Gln Leu Met Val
225 230 235 240
Tyr Val Thr Lys Thr Ser Ile Lys Ile Pro Ser Ser His Thr Leu Met
245 250 255
Lys Gly Gly Ser Thr Lys Tyr Trp Ser Gly Asn Ser Glu Phe His Phe
260 265 270
Tyr Ser Ile Asn Val Gly Gly Phe Phe Lys Leu Arg Ser Gly Glu Glu
275 280 285
Ile Ser Ile Glu Val Ser Asn Pro Ser Leu Leu Asp Pro Asp Gln Asp
290 295 300
Ala Thr Tyr Phe Gly Ala Phe Lys Val Arg Asp Ile Asp
305 310 315
<210> 191
<211> 316
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 191
Met Arg Arg Ala Ser Arg Asp Tyr Gly Lys Tyr Leu Arg Ser Ser Glu
1 5 10 15
Glu Met Gly Ser Gly Pro Gly Val Pro His Glu Gly Pro Leu His Pro
20 25 30
Ala Pro Ser Ala Pro Ala Pro Ala Pro Pro Pro Ala Ala Ser Arg Ser
35 40 45
Met Phe Leu Ala Leu Leu Gly Leu Gly Leu Gly Gln Val Val Cys Ser
50 55 60
Ile Ala Leu Phe Leu Tyr Phe Arg Ala Gln Met Asp Pro Asn Arg Ile
65 70 75 80
Ser Glu Asp Ser Thr His Cys Phe Tyr Arg Ile Leu Arg Leu His Glu
85 90 95
Asn Ala Asp Leu Gln Asp Ser Thr Leu Glu Ser Glu Asp Thr Leu Pro
100 105 110
Asp Ser Cys Arg Arg Met Lys Gln Ala Phe Gln Gly Ala Val Gln Lys
115 120 125
Glu Leu Gln His Ile Val Gly Pro Gln Arg Phe Ser Gly Ala Pro Ala
130 135 140
Met Met Glu Gly Ser Trp Leu Asp Val Ala Gln Arg Gly Lys Pro Glu
145 150 155 160
Ala Gln Pro Phe Ala His Leu Thr Ile Asn Ala Ala Ser Ile Pro Ser
165 170 175
Gly Ser His Lys Val Thr Leu Ser Ser Trp Tyr His Asp Arg Gly Trp
180 185 190
Ala Lys Ile Ser Asn Met Thr Leu Ser Asn Gly Lys Leu Arg Val Asn
195 200 205
Gln Asp Gly Phe Tyr Tyr Leu Tyr Ala Asn Ile Cys Phe Arg His His
210 215 220
Glu Thr Ser Gly Ser Val Pro Thr Asp Tyr Leu Gln Leu Met Val Tyr
225 230 235 240
Val Val Lys Thr Ser Ile Lys Ile Pro Ser Ser His Asn Leu Met Lys
245 250 255
Gly Gly Ser Thr Lys Asn Trp Ser Gly Asn Ser Glu Phe His Phe Tyr
260 265 270
Ser Ile Asn Val Gly Gly Phe Phe Lys Leu Arg Ala Gly Glu Glu Ile
275 280 285
Ser Ile Gln Val Ser Asn Pro Ser Leu Leu Asp Pro Asp Gln Asp Ala
290 295 300
Thr Tyr Phe Gly Ala Phe Lys Val Gln Asp Ile Asp
305 310 315
<210> 192
<211> 390
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 192
Met Pro Pro Ser Gly Leu Arg Leu Leu Leu Leu Leu Leu Pro Leu Leu
1 5 10 15
Trp Leu Leu Val Leu Thr Pro Gly Arg Pro Ala Ala Gly Leu Ser Thr
20 25 30
Cys Lys Thr Ile Asp Met Glu Leu Val Lys Arg Lys Arg Ile Glu Ala
35 40 45
Ile Arg Gly Gln Ile Leu Ser Lys Leu Arg Leu Ala Ser Pro Pro Ser
50 55 60
Gln Gly Glu Val Pro Pro Gly Pro Leu Pro Glu Ala Val Leu Ala Leu
65 70 75 80
Tyr Asn Ser Thr Arg Asp Arg Val Ala Gly Glu Ser Ala Glu Pro Glu
85 90 95
Pro Glu Pro Glu Ala Asp Tyr Tyr Ala Lys Glu Val Thr Arg Val Leu
100 105 110
Met Val Glu Thr His Asn Glu Ile Tyr Asp Lys Phe Lys Gln Ser Thr
115 120 125
His Ser Ile Tyr Met Phe Phe Asn Thr Ser Glu Leu Arg Glu Ala Val
130 135 140
Pro Glu Pro Val Leu Leu Ser Arg Ala Glu Leu Arg Leu Leu Arg Leu
145 150 155 160
Lys Leu Lys Val Glu Gln His Val Glu Leu Tyr Gln Lys Tyr Ser Asn
165 170 175
Asn Ser Trp Arg Tyr Leu Ser Asn Arg Leu Leu Ala Pro Ser Asp Ser
180 185 190
Pro Glu Trp Leu Ser Phe Asp Val Thr Gly Val Val Arg Gln Trp Leu
195 200 205
Ser Arg Gly Gly Glu Ile Glu Gly Phe Arg Leu Ser Ala His Cys Ser
210 215 220
Cys Asp Ser Arg Asp Asn Thr Leu Gln Val Asp Ile Asn Gly Phe Thr
225 230 235 240
Thr Gly Arg Arg Gly Asp Leu Ala Thr Ile His Gly Met Asn Arg Pro
245 250 255
Phe Leu Leu Leu Met Ala Thr Pro Leu Glu Arg Ala Gln His Leu Gln
260 265 270
Ser Ser Arg His Arg Arg Ala Leu Asp Thr Asn Tyr Cys Phe Ser Ser
275 280 285
Thr Glu Lys Asn Cys Cys Val Arg Gln Leu Tyr Ile Asp Phe Arg Lys
290 295 300
Asp Leu Gly Trp Lys Trp Ile His Glu Pro Lys Gly Tyr His Ala Asn
305 310 315 320
Phe Cys Leu Gly Pro Cys Pro Tyr Ile Trp Ser Leu Asp Thr Gln Tyr
325 330 335
Ser Lys Val Leu Ala Leu Tyr Asn Gln His Asn Pro Gly Ala Ser Ala
340 345 350
Ala Pro Cys Cys Val Pro Gln Ala Leu Glu Pro Leu Pro Ile Val Tyr
355 360 365
Tyr Val Gly Arg Lys Pro Lys Val Glu Gln Leu Ser Asn Met Ile Val
370 375 380
Arg Ser Cys Lys Cys Ser
385 390
<210> 193
<211> 390
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 193
Met Pro Pro Ser Gly Leu Arg Leu Leu Pro Leu Leu Leu Pro Leu Pro
1 5 10 15
Trp Leu Leu Val Leu Thr Pro Gly Arg Pro Ala Ala Gly Leu Ser Thr
20 25 30
Cys Lys Thr Ile Asp Met Glu Leu Val Lys Arg Lys Arg Ile Glu Ala
35 40 45
Ile Arg Gly Gln Ile Leu Ser Lys Leu Arg Leu Ala Ser Pro Pro Ser
50 55 60
Gln Gly Glu Val Pro Pro Gly Pro Leu Pro Glu Ala Val Leu Ala Leu
65 70 75 80
Tyr Asn Ser Thr Arg Asp Arg Val Ala Gly Glu Ser Ala Asp Pro Glu
85 90 95
Pro Glu Pro Glu Ala Asp Tyr Tyr Ala Lys Glu Val Thr Arg Val Leu
100 105 110
Met Val Asp Arg Asn Asn Ala Ile Tyr Glu Lys Thr Lys Asp Ile Ser
115 120 125
His Ser Ile Tyr Met Phe Phe Asn Thr Ser Asp Ile Arg Glu Ala Val
130 135 140
Pro Glu Pro Pro Leu Leu Ser Arg Ala Glu Leu Arg Leu Gln Arg Leu
145 150 155 160
Lys Ser Ser Val Glu Gln His Val Glu Leu Tyr Gln Lys Tyr Ser Asn
165 170 175
Asn Ser Trp Arg Tyr Leu Gly Asn Arg Leu Leu Thr Pro Thr Asp Thr
180 185 190
Pro Glu Trp Leu Ser Phe Asp Val Thr Gly Val Val Arg Gln Trp Leu
195 200 205
Asn Gln Gly Asp Gly Ile Gln Gly Phe Arg Phe Ser Ala His Cys Ser
210 215 220
Cys Asp Ser Lys Asp Asn Lys Leu His Val Glu Ile Asn Gly Ile Ser
225 230 235 240
Pro Lys Arg Arg Gly Asp Leu Gly Thr Ile His Asp Met Asn Arg Pro
245 250 255
Phe Leu Leu Leu Met Ala Thr Pro Leu Glu Arg Ala Gln His Leu His
260 265 270
Ser Ser Arg His Arg Arg Ala Leu Asp Thr Asn Tyr Cys Phe Ser Ser
275 280 285
Thr Glu Lys Asn Cys Cys Val Arg Gln Leu Tyr Ile Asp Phe Arg Lys
290 295 300
Asp Leu Gly Trp Lys Trp Ile His Glu Pro Lys Gly Tyr His Ala Asn
305 310 315 320
Phe Cys Leu Gly Pro Cys Pro Tyr Ile Trp Ser Leu Asp Thr Gln Tyr
325 330 335
Ser Lys Val Leu Ala Leu Tyr Asn Gln His Asn Pro Gly Ala Ser Ala
340 345 350
Ser Pro Cys Cys Val Pro Gln Ala Leu Glu Pro Leu Pro Ile Val Tyr
355 360 365
Tyr Val Gly Arg Lys Pro Lys Val Glu Gln Leu Ser Asn Met Ile Val
370 375 380
Arg Ser Cys Lys Cys Ser
385 390
<210> 194
<211> 414
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 194
Met His Tyr Cys Val Leu Ser Ala Phe Leu Ile Leu His Leu Val Thr
1 5 10 15
Val Ala Leu Ser Leu Ser Thr Cys Ser Thr Leu Asp Met Asp Gln Phe
20 25 30
Met Arg Lys Arg Ile Glu Ala Ile Arg Gly Gln Ile Leu Ser Lys Leu
35 40 45
Lys Leu Thr Ser Pro Pro Glu Asp Tyr Pro Glu Pro Glu Glu Val Pro
50 55 60
Pro Glu Val Ile Ser Ile Tyr Asn Ser Thr Arg Asp Leu Leu Gln Glu
65 70 75 80
Lys Ala Ser Arg Arg Ala Ala Ala Cys Glu Arg Glu Arg Ser Asp Glu
85 90 95
Glu Tyr Tyr Ala Lys Glu Val Tyr Lys Ile Asp Met Pro Pro Phe Phe
100 105 110
Pro Ser Glu Asn Ala Ile Pro Pro Thr Phe Tyr Arg Pro Tyr Phe Arg
115 120 125
Ile Val Arg Phe Asp Val Ser Ala Met Glu Lys Asn Ala Ser Asn Leu
130 135 140
Val Lys Ala Glu Phe Arg Val Phe Arg Leu Gln Asn Pro Lys Ala Arg
145 150 155 160
Val Pro Glu Gln Arg Ile Glu Leu Tyr Gln Ile Leu Lys Ser Lys Asp
165 170 175
Leu Thr Ser Pro Thr Gln Arg Tyr Ile Asp Ser Lys Val Val Lys Thr
180 185 190
Arg Ala Glu Gly Glu Trp Leu Ser Phe Asp Val Thr Asp Ala Val His
195 200 205
Glu Trp Leu His His Lys Asp Arg Asn Leu Gly Phe Lys Ile Ser Leu
210 215 220
His Cys Pro Cys Cys Thr Phe Val Pro Ser Asn Asn Tyr Ile Ile Pro
225 230 235 240
Asn Lys Ser Glu Glu Leu Glu Ala Arg Phe Ala Gly Ile Asp Gly Thr
245 250 255
Ser Thr Tyr Thr Ser Gly Asp Gln Lys Thr Ile Lys Ser Thr Arg Lys
260 265 270
Lys Asn Ser Gly Lys Thr Pro His Leu Leu Leu Met Leu Leu Pro Ser
275 280 285
Tyr Arg Leu Glu Ser Gln Gln Thr Asn Arg Arg Lys Lys Arg Ala Leu
290 295 300
Asp Ala Ala Tyr Cys Phe Arg Asn Val Gln Asp Asn Cys Cys Leu Arg
305 310 315 320
Pro Leu Tyr Ile Asp Phe Lys Arg Asp Leu Gly Trp Lys Trp Ile His
325 330 335
Glu Pro Lys Gly Tyr Asn Ala Asn Phe Cys Ala Gly Ala Cys Pro Tyr
340 345 350
Leu Trp Ser Ser Asp Thr Gln His Ser Arg Val Leu Ser Leu Tyr Asn
355 360 365
Thr Ile Asn Pro Glu Ala Ser Ala Ser Pro Cys Cys Val Ser Gln Asp
370 375 380
Leu Glu Pro Leu Thr Ile Leu Tyr Tyr Ile Gly Lys Thr Pro Lys Ile
385 390 395 400
Glu Gln Leu Ser Asn Met Ile Val Lys Ser Cys Lys Cys Ser
405 410
<210> 195
<211> 414
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 195
Met His Tyr Cys Val Leu Ser Thr Phe Leu Leu Leu His Leu Val Pro
1 5 10 15
Val Ala Leu Ser Leu Ser Thr Cys Ser Thr Leu Asp Met Asp Gln Phe
20 25 30
Met Arg Lys Arg Ile Glu Ala Ile Arg Gly Gln Ile Leu Ser Lys Leu
35 40 45
Lys Leu Thr Ser Pro Pro Glu Asp Tyr Pro Glu Pro Asp Glu Val Pro
50 55 60
Pro Glu Val Ile Ser Ile Tyr Asn Ser Thr Arg Asp Leu Leu Gln Glu
65 70 75 80
Lys Ala Ser Arg Arg Ala Ala Ala Cys Glu Arg Glu Arg Ser Asp Glu
85 90 95
Glu Tyr Tyr Ala Lys Glu Val Tyr Lys Ile Asp Met Pro Ser His Leu
100 105 110
Pro Ser Glu Asn Ala Ile Pro Pro Thr Phe Tyr Arg Pro Tyr Phe Arg
115 120 125
Ile Val Arg Phe Asp Val Ser Thr Met Glu Lys Asn Ala Ser Asn Leu
130 135 140
Val Lys Ala Glu Phe Arg Val Phe Arg Leu Gln Asn Pro Lys Ala Arg
145 150 155 160
Val Ala Glu Gln Arg Ile Glu Leu Tyr Gln Ile Leu Lys Ser Lys Asp
165 170 175
Leu Thr Ser Pro Thr Gln Arg Tyr Ile Asp Ser Lys Val Val Lys Thr
180 185 190
Arg Ala Glu Gly Glu Trp Leu Ser Phe Asp Val Thr Asp Ala Val Gln
195 200 205
Glu Trp Leu His His Lys Asp Arg Asn Leu Gly Phe Lys Ile Ser Leu
210 215 220
His Cys Pro Cys Cys Thr Phe Val Pro Ser Asn Asn Tyr Ile Ile Pro
225 230 235 240
Asn Lys Ser Glu Glu Leu Glu Ala Arg Phe Ala Gly Ile Asp Gly Thr
245 250 255
Ser Thr Tyr Ala Ser Gly Asp Gln Lys Thr Ile Lys Ser Thr Arg Lys
260 265 270
Lys Thr Ser Gly Lys Thr Pro His Leu Leu Leu Met Leu Leu Pro Ser
275 280 285
Tyr Arg Leu Glu Ser Gln Gln Ser Ser Arg Arg Lys Lys Arg Ala Leu
290 295 300
Asp Ala Ala Tyr Cys Phe Arg Asn Val Gln Asp Asn Cys Cys Leu Arg
305 310 315 320
Pro Leu Tyr Ile Asp Phe Lys Arg Asp Leu Gly Trp Lys Trp Ile His
325 330 335
Glu Pro Lys Gly Tyr Asn Ala Asn Phe Cys Ala Gly Ala Cys Pro Tyr
340 345 350
Leu Trp Ser Ser Asp Thr Gln His Thr Lys Val Leu Ser Leu Tyr Asn
355 360 365
Thr Ile Asn Pro Glu Ala Ser Ala Ser Pro Cys Cys Val Ser Gln Asp
370 375 380
Leu Glu Pro Leu Thr Ile Leu Tyr Tyr Ile Gly Asn Thr Pro Lys Ile
385 390 395 400
Glu Gln Leu Ser Asn Met Ile Val Lys Ser Cys Lys Cys Ser
405 410
<210> 196
<211> 412
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 196
Met Lys Met His Leu Gln Arg Ala Leu Val Val Leu Ala Leu Leu Asn
1 5 10 15
Phe Ala Thr Val Ser Leu Ser Leu Ser Thr Cys Thr Thr Leu Asp Phe
20 25 30
Gly His Ile Lys Lys Lys Arg Val Glu Ala Ile Arg Gly Gln Ile Leu
35 40 45
Ser Lys Leu Arg Leu Thr Ser Pro Pro Glu Pro Thr Val Met Thr His
50 55 60
Val Pro Tyr Gln Val Leu Ala Leu Tyr Asn Ser Thr Arg Glu Leu Leu
65 70 75 80
Glu Glu Met His Gly Glu Arg Glu Glu Gly Cys Thr Gln Glu Asn Thr
85 90 95
Glu Ser Glu Tyr Tyr Ala Lys Glu Ile His Lys Phe Asp Met Ile Gln
100 105 110
Gly Leu Ala Glu His Asn Glu Leu Ala Val Cys Pro Lys Gly Ile Thr
115 120 125
Ser Lys Val Phe Arg Phe Asn Val Ser Ser Val Glu Lys Asn Arg Thr
130 135 140
Asn Leu Phe Arg Ala Glu Phe Arg Val Leu Arg Val Pro Asn Pro Ser
145 150 155 160
Ser Lys Arg Asn Glu Gln Arg Ile Glu Leu Phe Gln Ile Leu Arg Pro
165 170 175
Asp Glu His Ile Ala Lys Gln Arg Tyr Ile Gly Gly Lys Asn Leu Pro
180 185 190
Thr Arg Gly Thr Ala Glu Trp Leu Ser Phe Asp Val Thr Asp Thr Val
195 200 205
Arg Glu Trp Leu Leu Arg Arg Glu Ser Asn Leu Gly Leu Glu Ile Ser
210 215 220
Ile His Cys Pro Cys His Thr Phe Gln Pro Asn Gly Asp Ile Leu Glu
225 230 235 240
Asn Ile His Glu Val Met Glu Ile Lys Phe Lys Gly Val Asp Asn Glu
245 250 255
Asp Asp His Gly Arg Gly Asp Leu Gly Arg Leu Lys Lys Gln Lys Asp
260 265 270
His His Asn Pro His Leu Ile Leu Met Met Ile Pro Pro His Arg Leu
275 280 285
Asp Asn Pro Gly Gln Gly Gly Gln Arg Lys Lys Arg Ala Leu Asp Thr
290 295 300
Asn Tyr Cys Phe Arg Asn Leu Glu Glu Asn Cys Cys Val Arg Pro Leu
305 310 315 320
Tyr Ile Asp Phe Arg Gln Asp Leu Gly Trp Lys Trp Val His Glu Pro
325 330 335
Lys Gly Tyr Tyr Ala Asn Phe Cys Ser Gly Pro Cys Pro Tyr Leu Arg
340 345 350
Ser Ala Asp Thr Thr His Ser Thr Val Leu Gly Leu Tyr Asn Thr Leu
355 360 365
Asn Pro Glu Ala Ser Ala Ser Pro Cys Cys Val Pro Gln Asp Leu Glu
370 375 380
Pro Leu Thr Ile Leu Tyr Tyr Val Gly Arg Thr Pro Lys Val Glu Gln
385 390 395 400
Leu Ser Asn Met Val Val Lys Ser Cys Lys Cys Ser
405 410
<210> 197
<211> 410
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 197
Met His Leu Gln Arg Ala Leu Val Val Leu Ala Leu Leu Asn Leu Ala
1 5 10 15
Thr Ile Ser Leu Ser Leu Ser Thr Cys Thr Thr Leu Asp Phe Gly His
20 25 30
Ile Lys Lys Lys Arg Val Glu Ala Ile Arg Gly Gln Ile Leu Ser Lys
35 40 45
Leu Arg Leu Thr Ser Pro Pro Glu Pro Ser Val Met Thr His Val Pro
50 55 60
Tyr Gln Val Leu Ala Leu Tyr Asn Ser Thr Arg Glu Leu Leu Glu Glu
65 70 75 80
Met His Gly Glu Arg Glu Glu Gly Cys Thr Gln Glu Thr Ser Glu Ser
85 90 95
Glu Tyr Tyr Ala Lys Glu Ile His Lys Phe Asp Met Ile Gln Gly Leu
100 105 110
Ala Glu His Asn Glu Leu Ala Val Cys Pro Lys Gly Ile Thr Ser Lys
115 120 125
Val Phe Arg Phe Asn Val Ser Ser Val Glu Lys Asn Gly Thr Asn Leu
130 135 140
Phe Arg Ala Glu Phe Arg Val Leu Arg Val Pro Asn Pro Ser Ser Lys
145 150 155 160
Arg Thr Glu Gln Arg Ile Glu Leu Phe Gln Ile Leu Arg Pro Asp Glu
165 170 175
His Ile Ala Lys Gln Arg Tyr Ile Gly Gly Lys Asn Leu Pro Thr Arg
180 185 190
Gly Thr Ala Glu Trp Leu Ser Phe Asp Val Thr Asp Thr Val Arg Glu
195 200 205
Trp Leu Leu Arg Arg Glu Ser Asn Leu Gly Leu Glu Ile Ser Ile His
210 215 220
Cys Pro Cys His Thr Phe Gln Pro Asn Gly Asp Ile Leu Glu Asn Val
225 230 235 240
His Glu Val Met Glu Ile Lys Phe Lys Gly Val Asp Asn Glu Asp Asp
245 250 255
His Gly Arg Gly Asp Leu Gly Arg Leu Lys Lys Gln Lys Asp His His
260 265 270
Asn Pro His Leu Ile Leu Met Met Ile Pro Pro His Arg Leu Asp Ser
275 280 285
Pro Gly Gln Gly Ser Gln Arg Lys Lys Arg Ala Leu Asp Thr Asn Tyr
290 295 300
Cys Phe Arg Asn Leu Glu Glu Asn Cys Cys Val Arg Pro Leu Tyr Ile
305 310 315 320
Asp Phe Arg Gln Asp Leu Gly Trp Lys Trp Val His Glu Pro Lys Gly
325 330 335
Tyr Tyr Ala Asn Phe Cys Ser Gly Pro Cys Pro Tyr Leu Arg Ser Ala
340 345 350
Asp Thr Thr His Ser Thr Val Leu Gly Leu Tyr Asn Thr Leu Asn Pro
355 360 365
Glu Ala Ser Ala Ser Pro Cys Cys Val Pro Gln Asp Leu Glu Pro Leu
370 375 380
Thr Ile Leu Tyr Tyr Val Gly Arg Thr Pro Lys Val Glu Gln Leu Ser
385 390 395 400
Asn Met Val Val Lys Ser Cys Lys Cys Ser
405 410
<210> 198
<211> 193
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 198
Met Gly Val His Glu Cys Pro Ala Trp Leu Trp Leu Leu Leu Ser Leu
1 5 10 15
Leu Ser Leu Pro Leu Gly Leu Pro Val Leu Gly Ala Pro Pro Arg Leu
20 25 30
Ile Cys Asp Ser Arg Val Leu Glu Arg Tyr Leu Leu Glu Ala Lys Glu
35 40 45
Ala Glu Asn Ile Thr Thr Gly Cys Ala Glu His Cys Ser Leu Asn Glu
50 55 60
Asn Ile Thr Val Pro Asp Thr Lys Val Asn Phe Tyr Ala Trp Lys Arg
65 70 75 80
Met Glu Val Gly Gln Gln Ala Val Glu Val Trp Gln Gly Leu Ala Leu
85 90 95
Leu Ser Glu Ala Val Leu Arg Gly Gln Ala Leu Leu Val Asn Ser Ser
100 105 110
Gln Pro Trp Glu Pro Leu Gln Leu His Val Asp Lys Ala Val Ser Gly
115 120 125
Leu Arg Ser Leu Thr Thr Leu Leu Arg Ala Leu Gly Ala Gln Lys Glu
130 135 140
Ala Ile Ser Pro Pro Asp Ala Ala Ser Ala Ala Pro Leu Arg Thr Ile
145 150 155 160
Thr Ala Asp Thr Phe Arg Lys Leu Phe Arg Val Tyr Ser Asn Phe Leu
165 170 175
Arg Gly Lys Leu Lys Leu Tyr Thr Gly Glu Ala Cys Arg Thr Gly Asp
180 185 190
Arg
<210> 199
<211> 192
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 199
Met Gly Val Pro Glu Arg Pro Thr Leu Leu Leu Leu Leu Ser Leu Leu
1 5 10 15
Leu Ile Pro Leu Gly Leu Pro Val Leu Cys Ala Pro Pro Arg Leu Ile
20 25 30
Cys Asp Ser Arg Val Leu Glu Arg Tyr Ile Leu Glu Ala Lys Glu Ala
35 40 45
Glu Asn Val Thr Met Gly Cys Ala Glu Gly Pro Arg Leu Ser Glu Asn
50 55 60
Ile Thr Val Pro Asp Thr Lys Val Asn Phe Tyr Ala Trp Lys Arg Met
65 70 75 80
Glu Val Glu Glu Gln Ala Ile Glu Val Trp Gln Gly Leu Ser Leu Leu
85 90 95
Ser Glu Ala Ile Leu Gln Ala Gln Ala Leu Leu Ala Asn Ser Ser Gln
100 105 110
Pro Pro Glu Thr Leu Gln Leu His Ile Asp Lys Ala Ile Ser Gly Leu
115 120 125
Arg Ser Leu Thr Ser Leu Leu Arg Val Leu Gly Ala Gln Lys Glu Leu
130 135 140
Met Ser Pro Pro Asp Thr Thr Pro Pro Ala Pro Leu Arg Thr Leu Thr
145 150 155 160
Val Asp Thr Phe Cys Lys Leu Phe Arg Val Tyr Ala Asn Phe Leu Arg
165 170 175
Gly Lys Leu Lys Leu Tyr Thr Gly Glu Val Cys Arg Arg Gly Asp Arg
180 185 190
<210> 200
<211> 353
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 200
Met Glu Leu Thr Glu Leu Leu Leu Val Val Met Leu Leu Leu Thr Ala
1 5 10 15
Arg Leu Thr Leu Ser Ser Pro Ala Pro Pro Ala Cys Asp Leu Arg Val
20 25 30
Leu Ser Lys Leu Leu Arg Asp Ser His Val Leu His Ser Arg Leu Ser
35 40 45
Gln Cys Pro Glu Val His Pro Leu Pro Thr Pro Val Leu Leu Pro Ala
50 55 60
Val Asp Phe Ser Leu Gly Glu Trp Lys Thr Gln Met Glu Glu Thr Lys
65 70 75 80
Ala Gln Asp Ile Leu Gly Ala Val Thr Leu Leu Leu Glu Gly Val Met
85 90 95
Ala Ala Arg Gly Gln Leu Gly Pro Thr Cys Leu Ser Ser Leu Leu Gly
100 105 110
Gln Leu Ser Gly Gln Val Arg Leu Leu Leu Gly Ala Leu Gln Ser Leu
115 120 125
Leu Gly Thr Gln Leu Pro Pro Gln Gly Arg Thr Thr Ala His Lys Asp
130 135 140
Pro Asn Ala Ile Phe Leu Ser Phe Gln His Leu Leu Arg Gly Lys Val
145 150 155 160
Arg Phe Leu Met Leu Val Gly Gly Ser Thr Leu Cys Val Arg Arg Ala
165 170 175
Pro Pro Thr Thr Ala Val Pro Ser Arg Thr Ser Leu Val Leu Thr Leu
180 185 190
Asn Glu Leu Pro Asn Arg Thr Ser Gly Leu Leu Glu Thr Asn Phe Thr
195 200 205
Ala Ser Ala Arg Thr Thr Gly Ser Gly Leu Leu Lys Trp Gln Gln Gly
210 215 220
Phe Arg Ala Lys Ile Pro Gly Leu Leu Asn Gln Thr Ser Arg Ser Leu
225 230 235 240
Asp Gln Ile Pro Gly Tyr Leu Asn Arg Ile His Glu Leu Leu Asn Gly
245 250 255
Thr Arg Gly Leu Phe Pro Gly Pro Ser Arg Arg Thr Leu Gly Ala Pro
260 265 270
Asp Ile Ser Ser Gly Thr Ser Asp Thr Gly Ser Leu Pro Pro Asn Leu
275 280 285
Gln Pro Gly Tyr Ser Pro Ser Pro Thr His Pro Pro Thr Gly Gln Tyr
290 295 300
Thr Leu Phe Pro Leu Pro Pro Thr Leu Pro Thr Pro Val Val Gln Leu
305 310 315 320
His Pro Leu Leu Pro Asp Pro Ser Ala Pro Thr Pro Thr Pro Thr Ser
325 330 335
Pro Leu Leu Asn Thr Ser Tyr Thr His Ser Gln Asn Leu Ser Gln Glu
340 345 350
Gly
<210> 201
<211> 356
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 201
Met Glu Leu Thr Asp Leu Leu Leu Ala Ala Met Leu Leu Ala Val Ala
1 5 10 15
Arg Leu Thr Leu Ser Ser Pro Val Ala Pro Ala Cys Asp Pro Arg Leu
20 25 30
Leu Asn Lys Leu Leu Arg Asp Ser His Leu Leu His Ser Arg Leu Ser
35 40 45
Gln Cys Pro Asp Val Asp Pro Leu Ser Ile Pro Val Leu Leu Pro Ala
50 55 60
Val Asp Phe Ser Leu Gly Glu Trp Lys Thr Gln Thr Glu Gln Ser Lys
65 70 75 80
Ala Gln Asp Ile Leu Gly Ala Val Ser Leu Leu Leu Glu Gly Val Met
85 90 95
Ala Ala Arg Gly Gln Leu Glu Pro Ser Cys Leu Ser Ser Leu Leu Gly
100 105 110
Gln Leu Ser Gly Gln Val Arg Leu Leu Leu Gly Ala Leu Gln Gly Leu
115 120 125
Leu Gly Thr Gln Leu Pro Leu Gln Gly Arg Thr Thr Ala His Lys Asp
130 135 140
Pro Asn Ala Leu Phe Leu Ser Leu Gln Gln Leu Leu Arg Gly Lys Val
145 150 155 160
Arg Phe Leu Leu Leu Val Glu Gly Pro Thr Leu Cys Val Arg Arg Thr
165 170 175
Leu Pro Thr Thr Ala Val Pro Ser Ser Thr Ser Gln Leu Leu Thr Leu
180 185 190
Asn Lys Phe Pro Asn Arg Thr Ser Gly Leu Leu Glu Thr Asn Phe Ser
195 200 205
Val Thr Ala Arg Thr Ala Gly Pro Gly Leu Leu Ser Arg Leu Gln Gly
210 215 220
Phe Arg Val Lys Ile Thr Pro Gly Gln Leu Asn Gln Thr Ser Arg Ser
225 230 235 240
Pro Val Gln Ile Ser Gly Tyr Leu Asn Arg Thr His Gly Pro Val Asn
245 250 255
Gly Thr His Gly Leu Phe Ala Gly Thr Ser Leu Gln Thr Leu Glu Ala
260 265 270
Ser Asp Ile Ser Pro Gly Ala Phe Asn Lys Gly Ser Leu Ala Phe Asn
275 280 285
Leu Gln Gly Gly Leu Pro Pro Ser Pro Ser Leu Ala Pro Asp Gly His
290 295 300
Thr Pro Phe Pro Pro Ser Pro Ala Leu Pro Thr Thr His Gly Ser Pro
305 310 315 320
Pro Gln Leu His Pro Leu Phe Pro Asp Pro Ser Thr Thr Met Pro Asn
325 330 335
Ser Thr Ala Pro His Pro Val Thr Met Tyr Pro His Pro Arg Asn Leu
340 345 350
Ser Gln Glu Thr
355
<210> 202
<211> 235
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 202
Met Thr Val Leu Ala Pro Ala Trp Ser Pro Thr Thr Tyr Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Leu Leu Leu Ser Ser Gly Leu Ser Gly Thr Gln Asp Cys Ser Phe
20 25 30
Gln His Ser Pro Ile Ser Ser Asp Phe Ala Val Lys Ile Arg Glu Leu
35 40 45
Ser Asp Tyr Leu Leu Gln Asp Tyr Pro Val Thr Val Ala Ser Asn Leu
50 55 60
Gln Asp Glu Glu Leu Cys Gly Gly Leu Trp Arg Leu Val Leu Ala Gln
65 70 75 80
Arg Trp Met Glu Arg Leu Lys Thr Val Ala Gly Ser Lys Met Gln Gly
85 90 95
Leu Leu Glu Arg Val Asn Thr Glu Ile His Phe Val Thr Lys Cys Ala
100 105 110
Phe Gln Pro Pro Pro Ser Cys Leu Arg Phe Val Gln Thr Asn Ile Ser
115 120 125
Arg Leu Leu Gln Glu Thr Ser Glu Gln Leu Val Ala Leu Lys Pro Trp
130 135 140
Ile Thr Arg Gln Asn Phe Ser Arg Cys Leu Glu Leu Gln Cys Gln Pro
145 150 155 160
Asp Ser Ser Thr Leu Pro Pro Pro Trp Ser Pro Arg Pro Leu Glu Ala
165 170 175
Thr Ala Pro Thr Ala Pro Gln Pro Pro Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu
180 185 190
Pro Val Gly Leu Leu Leu Leu Ala Ala Ala Trp Cys Leu His Trp Gln
195 200 205
Arg Thr Arg Arg Arg Thr Pro Arg Pro Gly Glu Gln Val Pro Pro Val
210 215 220
Pro Ser Pro Gln Asp Leu Leu Leu Val Glu His
225 230 235
<210> 203
<211> 232
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 203
Met Thr Val Leu Ala Pro Ala Trp Ser Pro Asn Ser Ser Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Leu Leu Leu Leu Ser Pro Cys Leu Arg Gly Thr Pro Asp Cys Tyr
20 25 30
Phe Ser His Ser Pro Ile Ser Ser Asn Phe Lys Val Lys Phe Arg Glu
35 40 45
Leu Thr Asp His Leu Leu Lys Asp Tyr Pro Val Thr Val Ala Val Asn
50 55 60
Leu Gln Asp Glu Lys His Cys Lys Ala Leu Trp Ser Leu Phe Leu Ala
65 70 75 80
Gln Arg Trp Ile Glu Gln Leu Lys Thr Val Ala Gly Ser Lys Met Gln
85 90 95
Thr Leu Leu Glu Asp Val Asn Thr Glu Ile His Phe Val Thr Ser Cys
100 105 110
Thr Phe Gln Pro Leu Pro Glu Cys Leu Arg Phe Val Gln Thr Asn Ile
115 120 125
Ser His Leu Leu Lys Asp Thr Cys Thr Gln Leu Leu Ala Leu Lys Pro
130 135 140
Cys Ile Gly Lys Ala Cys Gln Asn Phe Ser Arg Cys Leu Glu Val Gln
145 150 155 160
Cys Gln Pro Asp Ser Ser Thr Leu Leu Pro Pro Arg Ser Pro Ile Ala
165 170 175
Leu Glu Ala Thr Glu Leu Pro Glu Pro Arg Pro Arg Gln Leu Leu Leu
180 185 190
Leu Leu Leu Leu Leu Leu Pro Leu Thr Leu Val Leu Leu Ala Ala Ala
195 200 205
Trp Gly Leu Arg Trp Gln Arg Ala Arg Arg Arg Gly Glu Leu His Pro
210 215 220
Gly Val Pro Leu Pro Ser His Pro
225 230
<210> 204
<211> 273
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 204
Met Lys Lys Thr Gln Thr Trp Ile Leu Thr Cys Ile Tyr Leu Gln Leu
1 5 10 15
Leu Leu Phe Asn Pro Leu Val Lys Thr Glu Gly Ile Cys Arg Asn Arg
20 25 30
Val Thr Asn Asn Val Lys Asp Val Thr Lys Leu Val Ala Asn Leu Pro
35 40 45
Lys Asp Tyr Met Ile Thr Leu Lys Tyr Val Pro Gly Met Asp Val Leu
50 55 60
Pro Ser His Cys Trp Ile Ser Glu Met Val Val Gln Leu Ser Asp Ser
65 70 75 80
Leu Thr Asp Leu Leu Asp Lys Phe Ser Asn Ile Ser Glu Gly Leu Ser
85 90 95
Asn Tyr Ser Ile Ile Asp Lys Leu Val Asn Ile Val Asp Asp Leu Val
100 105 110
Glu Cys Val Lys Glu Asn Ser Ser Lys Asp Leu Lys Lys Ser Phe Lys
115 120 125
Ser Pro Glu Pro Arg Leu Phe Thr Pro Glu Glu Phe Phe Arg Ile Phe
130 135 140
Asn Arg Ser Ile Asp Ala Phe Lys Asp Phe Val Val Ala Ser Glu Thr
145 150 155 160
Ser Asp Cys Val Val Ser Ser Thr Leu Ser Pro Glu Lys Asp Ser Arg
165 170 175
Val Ser Val Thr Lys Pro Phe Met Leu Pro Pro Val Ala Ala Ser Ser
180 185 190
Leu Arg Asn Asp Ser Ser Ser Ser Asn Arg Lys Ala Lys Asn Pro Pro
195 200 205
Gly Asp Ser Ser Leu His Trp Ala Ala Met Ala Leu Pro Ala Leu Phe
210 215 220
Ser Leu Ile Ile Gly Phe Ala Phe Gly Ala Leu Tyr Trp Lys Lys Arg
225 230 235 240
Gln Pro Ser Leu Thr Arg Ala Val Glu Asn Ile Gln Ile Asn Glu Glu
245 250 255
Asp Asn Glu Ile Ser Met Leu Gln Glu Lys Glu Arg Glu Phe Gln Glu
260 265 270
Val
<210> 205
<211> 273
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 205
Met Lys Lys Thr Gln Thr Trp Ile Ile Thr Cys Ile Tyr Leu Gln Leu
1 5 10 15
Leu Leu Phe Asn Pro Leu Val Lys Thr Lys Glu Ile Cys Gly Asn Pro
20 25 30
Val Thr Asp Asn Val Lys Asp Ile Thr Lys Leu Val Ala Asn Leu Pro
35 40 45
Asn Asp Tyr Met Ile Thr Leu Asn Tyr Val Ala Gly Met Asp Val Leu
50 55 60
Pro Ser His Cys Trp Leu Arg Asp Met Val Ile Gln Leu Ser Leu Ser
65 70 75 80
Leu Thr Thr Leu Leu Asp Lys Phe Ser Asn Ile Ser Glu Gly Leu Ser
85 90 95
Asn Tyr Ser Ile Ile Asp Lys Leu Gly Lys Ile Val Asp Asp Leu Val
100 105 110
Leu Cys Met Glu Glu Asn Ala Pro Lys Asn Ile Lys Glu Ser Pro Lys
115 120 125
Arg Pro Glu Thr Arg Ser Phe Thr Pro Glu Glu Phe Phe Ser Ile Phe
130 135 140
Asn Arg Ser Ile Asp Ala Phe Lys Asp Phe Met Val Ala Ser Asp Thr
145 150 155 160
Ser Asp Cys Val Leu Ser Ser Thr Leu Gly Pro Glu Lys Asp Ser Arg
165 170 175
Val Ser Val Thr Lys Pro Phe Met Leu Pro Pro Val Ala Ala Ser Ser
180 185 190
Leu Arg Asn Asp Ser Ser Ser Ser Asn Arg Lys Ala Ala Lys Ala Pro
195 200 205
Glu Asp Ser Gly Leu Gln Trp Thr Ala Met Ala Leu Pro Ala Leu Ile
210 215 220
Ser Leu Val Ile Gly Phe Ala Phe Gly Ala Leu Tyr Trp Lys Lys Lys
225 230 235 240
Gln Ser Ser Leu Thr Arg Ala Val Glu Asn Ile Gln Ile Asn Glu Glu
245 250 255
Asp Asn Glu Ile Ser Met Leu Gln Gln Lys Glu Arg Glu Phe Gln Glu
260 265 270
Val
<210> 206
<211> 554
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 206
Met Thr Ala Pro Gly Ala Ala Gly Arg Cys Pro Pro Thr Thr Trp Leu
1 5 10 15
Gly Ser Leu Leu Leu Leu Val Cys Leu Leu Ala Ser Arg Ser Ile Thr
20 25 30
Glu Glu Val Ser Glu Tyr Cys Ser His Met Ile Gly Ser Gly His Leu
35 40 45
Gln Ser Leu Gln Arg Leu Ile Asp Ser Gln Met Glu Thr Ser Cys Gln
50 55 60
Ile Thr Phe Glu Phe Val Asp Gln Glu Gln Leu Lys Asp Pro Val Cys
65 70 75 80
Tyr Leu Lys Lys Ala Phe Leu Leu Val Gln Asp Ile Met Glu Asp Thr
85 90 95
Met Arg Phe Arg Asp Asn Thr Pro Asn Ala Ile Ala Ile Val Gln Leu
100 105 110
Gln Glu Leu Ser Leu Arg Leu Lys Ser Cys Phe Thr Lys Asp Tyr Glu
115 120 125
Glu His Asp Lys Ala Cys Val Arg Thr Phe Tyr Glu Thr Pro Leu Gln
130 135 140
Leu Leu Glu Lys Val Lys Asn Val Phe Asn Glu Thr Lys Asn Leu Leu
145 150 155 160
Asp Lys Asp Trp Asn Ile Phe Ser Lys Asn Cys Asn Asn Ser Phe Ala
165 170 175
Glu Cys Ser Ser Gln Asp Val Val Thr Lys Pro Asp Cys Asn Cys Leu
180 185 190
Tyr Pro Lys Ala Ile Pro Ser Ser Asp Pro Ala Ser Val Ser Pro His
195 200 205
Gln Pro Leu Ala Pro Ser Met Ala Pro Val Ala Gly Leu Thr Trp Glu
210 215 220
Asp Ser Glu Gly Thr Glu Gly Ser Ser Leu Leu Pro Gly Glu Gln Pro
225 230 235 240
Leu His Thr Val Asp Pro Gly Ser Ala Lys Gln Arg Pro Pro Arg Ser
245 250 255
Thr Cys Gln Ser Phe Glu Pro Pro Glu Thr Pro Val Val Lys Asp Ser
260 265 270
Thr Ile Gly Gly Ser Pro Gln Pro Arg Pro Ser Val Gly Ala Phe Asn
275 280 285
Pro Gly Met Glu Asp Ile Leu Asp Ser Ala Met Gly Thr Asn Trp Val
290 295 300
Pro Glu Glu Ala Ser Gly Glu Ala Ser Glu Ile Pro Val Pro Gln Gly
305 310 315 320
Thr Glu Leu Ser Pro Ser Arg Pro Gly Gly Gly Ser Met Gln Thr Glu
325 330 335
Pro Ala Arg Pro Ser Asn Phe Leu Ser Ala Ser Ser Pro Leu Pro Ala
340 345 350
Ser Ala Lys Gly Gln Gln Pro Ala Asp Val Thr Gly Thr Ala Leu Pro
355 360 365
Arg Val Gly Pro Val Arg Pro Thr Gly Gln Asp Trp Asn His Thr Pro
370 375 380
Gln Lys Thr Asp His Pro Ser Ala Leu Leu Arg Asp Pro Pro Glu Pro
385 390 395 400
Gly Ser Pro Arg Ile Ser Ser Leu Arg Pro Gln Gly Leu Ser Asn Pro
405 410 415
Ser Thr Leu Ser Ala Gln Pro Gln Leu Ser Arg Ser His Ser Ser Gly
420 425 430
Ser Val Leu Pro Leu Gly Glu Leu Glu Gly Arg Arg Ser Thr Arg Asp
435 440 445
Arg Arg Ser Pro Ala Glu Pro Glu Gly Gly Pro Ala Ser Glu Gly Ala
450 455 460
Ala Arg Pro Leu Pro Arg Phe Asn Ser Val Pro Leu Thr Asp Thr Gly
465 470 475 480
His Glu Arg Gln Ser Glu Gly Ser Phe Ser Pro Gln Leu Gln Glu Ser
485 490 495
Val Phe His Leu Leu Val Pro Ser Val Ile Leu Val Leu Leu Ala Val
500 505 510
Gly Gly Leu Leu Phe Tyr Arg Trp Arg Arg Arg Ser His Gln Glu Pro
515 520 525
Gln Arg Ala Asp Ser Pro Leu Glu Gln Pro Glu Gly Ser Pro Leu Thr
530 535 540
Gln Asp Asp Arg Gln Val Glu Leu Pro Val
545 550
<210> 207
<211> 552
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 207
Met Thr Ala Arg Gly Ala Ala Gly Arg Cys Pro Ser Ser Thr Trp Leu
1 5 10 15
Gly Ser Arg Leu Leu Leu Val Cys Leu Leu Met Ser Arg Ser Ile Ala
20 25 30
Lys Glu Val Ser Glu His Cys Ser His Met Ile Gly Asn Gly His Leu
35 40 45
Lys Val Leu Gln Gln Leu Ile Asp Ser Gln Met Glu Thr Ser Cys Gln
50 55 60
Ile Ala Phe Glu Phe Val Asp Gln Glu Gln Leu Asp Asp Pro Val Cys
65 70 75 80
Tyr Leu Lys Lys Ala Phe Phe Leu Val Gln Asp Ile Ile Asp Glu Thr
85 90 95
Met Arg Phe Lys Asp Asn Thr Pro Asn Ala Asn Ala Thr Glu Arg Leu
100 105 110
Gln Glu Leu Ser Asn Asn Leu Asn Ser Cys Phe Thr Lys Asp Tyr Glu
115 120 125
Glu Gln Asn Lys Ala Cys Val Arg Thr Phe His Glu Thr Pro Leu Gln
130 135 140
Leu Leu Glu Lys Ile Lys Asn Phe Phe Asn Glu Thr Lys Asn Leu Leu
145 150 155 160
Glu Lys Asp Trp Asn Ile Phe Thr Lys Asn Cys Asn Asn Ser Phe Ala
165 170 175
Lys Cys Ser Ser Arg Asp Val Val Thr Lys Pro Asp Cys Asn Cys Leu
180 185 190
Tyr Pro Lys Ala Thr Pro Ser Ser Asp Pro Ala Ser Ala Ser Pro His
195 200 205
Gln Pro Pro Ala Pro Ser Met Ala Pro Leu Ala Gly Leu Ala Trp Asp
210 215 220
Asp Ser Gln Arg Thr Glu Gly Ser Ser Leu Leu Pro Ser Glu Leu Pro
225 230 235 240
Leu Arg Ile Glu Asp Pro Gly Ser Ala Lys Gln Arg Pro Pro Arg Ser
245 250 255
Thr Cys Gln Thr Leu Glu Ser Thr Glu Gln Pro Asn His Gly Asp Arg
260 265 270
Leu Thr Glu Asp Ser Gln Pro His Pro Ser Ala Gly Gly Pro Val Pro
275 280 285
Gly Val Glu Asp Ile Leu Glu Ser Ser Leu Gly Thr Asn Trp Val Leu
290 295 300
Glu Glu Ala Ser Gly Glu Ala Ser Glu Gly Phe Leu Thr Gln Glu Ala
305 310 315 320
Lys Phe Ser Pro Ser Thr Pro Val Gly Gly Ser Ile Gln Ala Glu Thr
325 330 335
Asp Arg Pro Arg Ala Leu Ser Ala Ser Pro Phe Pro Lys Ser Thr Glu
340 345 350
Asp Gln Lys Pro Val Asp Ile Thr Asp Arg Pro Leu Thr Glu Val Asn
355 360 365
Pro Met Arg Pro Ile Gly Gln Thr Gln Asn Asn Thr Pro Glu Lys Thr
370 375 380
Asp Gly Thr Ser Thr Leu Arg Glu Asp His Gln Glu Pro Gly Ser Pro
385 390 395 400
His Ile Ala Thr Pro Asn Pro Gln Arg Val Ser Asn Ser Ala Thr Pro
405 410 415
Val Ala Gln Leu Leu Leu Pro Lys Ser His Ser Trp Gly Ile Val Leu
420 425 430
Pro Leu Gly Glu Leu Glu Gly Lys Arg Ser Thr Arg Asp Arg Arg Ser
435 440 445
Pro Ala Glu Leu Glu Gly Gly Ser Ala Ser Glu Gly Ala Ala Arg Pro
450 455 460
Val Ala Arg Phe Asn Ser Ile Pro Leu Thr Asp Thr Gly His Val Glu
465 470 475 480
Gln His Glu Gly Ser Ser Asp Pro Gln Ile Pro Glu Ser Val Phe His
485 490 495
Leu Leu Val Pro Gly Ile Ile Leu Val Leu Leu Thr Val Gly Gly Leu
500 505 510
Leu Phe Tyr Lys Trp Lys Trp Arg Ser His Arg Asp Pro Gln Thr Leu
515 520 525
Asp Ser Ser Val Gly Arg Pro Glu Asp Ser Ser Leu Thr Gln Asp Glu
530 535 540
Asp Arg Gln Val Glu Leu Pro Val
545 550
<210> 208
<211> 711
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 208
Met Gly Trp Leu Pro Leu Leu Leu Leu Leu Thr Gln Cys Leu Gly Val
1 5 10 15
Pro Gly Gln Arg Ser Pro Leu Asn Asp Phe Gln Val Leu Arg Gly Thr
20 25 30
Glu Leu Gln His Leu Leu His Ala Val Val Pro Gly Pro Trp Gln Glu
35 40 45
Asp Val Ala Asp Ala Glu Glu Cys Ala Gly Arg Cys Gly Pro Leu Met
50 55 60
Asp Cys Arg Ala Phe His Tyr Asn Val Ser Ser His Gly Cys Gln Leu
65 70 75 80
Leu Pro Trp Thr Gln His Ser Pro His Thr Arg Leu Arg Arg Ser Gly
85 90 95
Arg Cys Asp Leu Phe Gln Lys Lys Asp Tyr Val Arg Thr Cys Ile Met
100 105 110
Asn Asn Gly Val Gly Tyr Arg Gly Thr Met Ala Thr Thr Val Gly Gly
115 120 125
Leu Pro Cys Gln Ala Trp Ser His Lys Phe Pro Asn Asp His Lys Tyr
130 135 140
Thr Pro Thr Leu Arg Asn Gly Leu Glu Glu Asn Phe Cys Arg Asn Pro
145 150 155 160
Asp Gly Asp Pro Gly Gly Pro Trp Cys Tyr Thr Thr Asp Pro Ala Val
165 170 175
Arg Phe Gln Ser Cys Gly Ile Lys Ser Cys Arg Glu Ala Ala Cys Val
180 185 190
Trp Cys Asn Gly Glu Glu Tyr Arg Gly Ala Val Asp Arg Thr Glu Ser
195 200 205
Gly Arg Glu Cys Gln Arg Trp Asp Leu Gln His Pro His Gln His Pro
210 215 220
Phe Glu Pro Gly Lys Phe Leu Asp Gln Gly Leu Asp Asp Asn Tyr Cys
225 230 235 240
Arg Asn Pro Asp Gly Ser Glu Arg Pro Trp Cys Tyr Thr Thr Asp Pro
245 250 255
Gln Ile Glu Arg Glu Phe Cys Asp Leu Pro Arg Cys Gly Ser Glu Ala
260 265 270
Gln Pro Arg Gln Glu Ala Thr Thr Val Ser Cys Phe Arg Gly Lys Gly
275 280 285
Glu Gly Tyr Arg Gly Thr Ala Asn Thr Thr Thr Ala Gly Val Pro Cys
290 295 300
Gln Arg Trp Asp Ala Gln Ile Pro His Gln His Arg Phe Thr Pro Glu
305 310 315 320
Lys Tyr Ala Cys Lys Asp Leu Arg Glu Asn Phe Cys Arg Asn Pro Asp
325 330 335
Gly Ser Glu Ala Pro Trp Cys Phe Thr Leu Arg Pro Gly Met Arg Ala
340 345 350
Ala Phe Cys Tyr Gln Ile Arg Arg Cys Thr Asp Asp Val Arg Pro Gln
355 360 365
Asp Cys Tyr His Gly Ala Gly Glu Gln Tyr Arg Gly Thr Val Ser Lys
370 375 380
Thr Arg Lys Gly Val Gln Cys Gln Arg Trp Ser Ala Glu Thr Pro His
385 390 395 400
Lys Pro Gln Phe Thr Phe Thr Ser Glu Pro His Ala Gln Leu Glu Glu
405 410 415
Asn Phe Cys Arg Asn Pro Asp Gly Asp Ser His Gly Pro Trp Cys Tyr
420 425 430
Thr Met Asp Pro Arg Thr Pro Phe Asp Tyr Cys Ala Leu Arg Arg Cys
435 440 445
Ala Asp Asp Gln Pro Pro Ser Ile Leu Asp Pro Pro Asp Gln Val Gln
450 455 460
Phe Glu Lys Cys Gly Lys Arg Val Asp Arg Leu Asp Gln Arg Arg Ser
465 470 475 480
Lys Leu Arg Val Val Gly Gly His Pro Gly Asn Ser Pro Trp Thr Val
485 490 495
Ser Leu Arg Asn Arg Gln Gly Gln His Phe Cys Gly Gly Ser Leu Val
500 505 510
Lys Glu Gln Trp Ile Leu Thr Ala Arg Gln Cys Phe Ser Ser Cys His
515 520 525
Met Pro Leu Thr Gly Tyr Glu Val Trp Leu Gly Thr Leu Phe Gln Asn
530 535 540
Pro Gln His Gly Glu Pro Ser Leu Gln Arg Val Pro Val Ala Lys Met
545 550 555 560
Val Cys Gly Pro Ser Gly Ser Gln Leu Val Leu Leu Lys Leu Glu Arg
565 570 575
Ser Val Thr Leu Asn Gln Arg Val Ala Leu Ile Cys Leu Pro Pro Glu
580 585 590
Trp Tyr Val Val Pro Pro Gly Thr Lys Cys Glu Ile Ala Gly Trp Gly
595 600 605
Glu Thr Lys Gly Thr Gly Asn Asp Thr Val Leu Asn Val Ala Leu Leu
610 615 620
Asn Val Ile Ser Asn Gln Glu Cys Asn Ile Lys His Arg Gly Arg Val
625 630 635 640
Arg Glu Ser Glu Met Cys Thr Glu Gly Leu Leu Ala Pro Val Gly Ala
645 650 655
Cys Glu Gly Asp Tyr Gly Gly Pro Leu Ala Cys Phe Thr His Asn Cys
660 665 670
Trp Val Leu Glu Gly Ile Ile Ile Pro Asn Arg Val Cys Ala Arg Ser
675 680 685
Arg Trp Pro Ala Val Phe Thr Arg Val Ser Val Phe Val Asp Trp Ile
690 695 700
His Lys Val Met Arg Leu Gly
705 710
<210> 209
<211> 1378
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 209
Met Gly Leu Pro Leu Pro Leu Leu Gln Ser Ser Leu Leu Leu Met Leu
1 5 10 15
Leu Leu Arg Leu Ser Ala Ala Ser Thr Asn Leu Asn Trp Gln Cys Pro
20 25 30
Arg Ile Pro Tyr Ala Ala Ser Arg Asp Phe Ser Val Lys Tyr Val Val
35 40 45
Pro Ser Phe Ser Ala Gly Gly Arg Val Gln Ala Thr Ala Ala Tyr Glu
50 55 60
Asp Ser Thr Asn Ser Ala Val Phe Val Ala Thr Arg Asn His Leu His
65 70 75 80
Val Leu Gly Pro Asp Leu Gln Phe Ile Glu Asn Leu Thr Thr Gly Pro
85 90 95
Ile Gly Asn Pro Gly Cys Gln Thr Cys Ala Ser Cys Gly Pro Gly Pro
100 105 110
His Gly Pro Pro Lys Asp Thr Asp Thr Leu Val Leu Val Met Glu Pro
115 120 125
Gly Leu Pro Ala Leu Val Ser Cys Gly Ser Thr Leu Gln Gly Arg Cys
130 135 140
Phe Leu His Glu Leu Glu Pro Arg Gly Lys Ala Leu His Leu Ala Ala
145 150 155 160
Pro Ala Cys Leu Phe Ser Ala Asn Asn Asn Lys Pro Glu Ala Cys Thr
165 170 175
Asp Cys Val Ala Ser Pro Leu Gly Thr Arg Val Thr Val Val Glu Gln
180 185 190
Gly His Ala Ser Tyr Phe Tyr Val Ala Ser Ser Leu Asp Pro Glu Leu
195 200 205
Ala Ala Ser Phe Ser Pro Arg Ser Val Ser Ile Arg Arg Leu Lys Ser
210 215 220
Asp Thr Ser Gly Phe Gln Pro Gly Phe Pro Ser Leu Ser Val Leu Pro
225 230 235 240
Lys Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Ile Lys Tyr Val Tyr Ser Phe His Ser
245 250 255
Gly Asp Phe Val Tyr Phe Leu Thr Val Gln Pro Ile Ser Val Thr Ser
260 265 270
Pro Pro Ser Ala Leu His Thr Arg Leu Val Arg Leu Asn Ala Val Glu
275 280 285
Pro Glu Ile Gly Asp Tyr Arg Glu Leu Val Leu Asp Cys His Phe Ala
290 295 300
Pro Lys Arg Arg Arg Arg Gly Ala Pro Glu Gly Thr Gln Pro Tyr Pro
305 310 315 320
Val Leu Gln Ala Ala His Ser Ala Pro Val Asp Ala Lys Leu Ala Val
325 330 335
Glu Leu Ser Ile Ser Glu Gly Gln Glu Val Leu Phe Gly Val Phe Val
340 345 350
Thr Val Lys Asp Gly Gly Ser Gly Met Gly Pro Asn Ser Val Val Cys
355 360 365
Ala Phe Pro Ile Tyr His Leu Asn Ile Leu Ile Glu Glu Gly Val Glu
370 375 380
Tyr Cys Cys His Ser Ser Asn Ser Ser Ser Leu Leu Ser Arg Gly Leu
385 390 395 400
Asp Phe Phe Gln Thr Pro Ser Phe Cys Pro Asn Pro Pro Gly Gly Glu
405 410 415
Ala Ser Gly Pro Ser Ser Arg Cys His Tyr Phe Pro Leu Met Val His
420 425 430
Ala Ser Phe Thr Arg Val Asp Leu Phe Asn Gly Leu Leu Gly Ser Val
435 440 445
Lys Val Thr Ala Leu His Val Thr Arg Leu Gly Asn Val Thr Val Ala
450 455 460
His Met Gly Thr Val Asp Gly Arg Val Leu Gln Val Glu Ile Ala Arg
465 470 475 480
Ser Leu Asn Tyr Leu Leu Tyr Val Ser Asn Phe Ser Leu Gly Ser Ser
485 490 495
Gly Gln Pro Val His Arg Asp Val Ser Arg Leu Gly Asn Asp Leu Leu
500 505 510
Phe Ala Ser Gly Asp Gln Val Phe Lys Val Pro Ile Gln Gly Pro Gly
515 520 525
Cys Arg His Phe Leu Thr Cys Trp Arg Cys Leu Arg Ala Gln Arg Phe
530 535 540
Met Gly Cys Gly Trp Cys Gly Asp Arg Cys Asp Arg Gln Lys Glu Cys
545 550 555 560
Pro Gly Ser Trp Gln Gln Asp His Cys Pro Pro Glu Ile Ser Glu Phe
565 570 575
Tyr Pro His Ser Gly Pro Leu Arg Gly Thr Thr Arg Leu Thr Leu Cys
580 585 590
Gly Ser Asn Phe Tyr Leu Arg Pro Asp Asp Val Val Pro Glu Gly Thr
595 600 605
His Gln Ile Thr Val Gly Gln Ser Pro Cys Arg Leu Leu Pro Lys Asp
610 615 620
Ser Ser Ser Pro Arg Pro Gly Ser Leu Lys Glu Phe Ile Gln Glu Leu
625 630 635 640
Glu Cys Glu Leu Glu Pro Leu Val Thr Gln Ala Val Gly Thr Thr Asn
645 650 655
Ile Ser Leu Val Ile Thr Asn Met Pro Ala Gly Lys His Phe Arg Val
660 665 670
Glu Gly Ile Ser Val Gln Glu Gly Phe Ser Phe Val Glu Pro Val Leu
675 680 685
Thr Ser Ile Lys Pro Asp Phe Gly Pro Arg Ala Gly Gly Thr Tyr Leu
690 695 700
Thr Leu Glu Gly Gln Ser Leu Ser Val Gly Thr Ser Arg Ala Val Leu
705 710 715 720
Val Asn Gly Thr Gln Cys Arg Leu Glu Gln Val Asn Glu Glu Gln Ile
725 730 735
Leu Cys Val Thr Pro Pro Gly Ala Gly Thr Ala Arg Val Pro Leu His
740 745 750
Leu Gln Ile Gly Gly Ala Glu Val Pro Gly Ser Trp Thr Phe His Tyr
755 760 765
Lys Glu Asp Pro Ile Val Leu Asp Ile Ser Pro Lys Cys Gly Tyr Ser
770 775 780
Gly Ser His Ile Met Ile His Gly Gln His Leu Thr Ser Ala Trp His
785 790 795 800
Phe Thr Leu Ser Phe His Asp Gly Gln Ser Thr Val Glu Ser Arg Cys
805 810 815
Ala Gly Gln Phe Val Glu Gln Gln Gln Arg Arg Cys Arg Leu Pro Glu
820 825 830
Tyr Val Val Arg Asn Pro Gln Gly Trp Ala Thr Gly Asn Leu Ser Val
835 840 845
Trp Gly Asp Gly Ala Ala Gly Phe Thr Leu Pro Gly Phe Arg Phe Leu
850 855 860
Pro Pro Pro Ser Pro Leu Arg Ala Gly Leu Val Glu Leu Lys Pro Glu
865 870 875 880
Glu His Ser Val Lys Val Glu Tyr Val Gly Leu Gly Ala Val Ala Asp
885 890 895
Cys Val Thr Val Asn Met Thr Val Gly Gly Glu Val Cys Gln His Glu
900 905 910
Leu Arg Gly Asp Val Val Ile Cys Pro Leu Pro Pro Ser Leu Gln Leu
915 920 925
Gly Lys Asp Gly Val Pro Leu Gln Val Cys Val Asp Gly Gly Cys His
930 935 940
Ile Leu Ser Gln Val Val Arg Ser Ser Pro Gly Arg Ala Ser Gln Arg
945 950 955 960
Ile Leu Leu Ile Ala Leu Leu Val Leu Ile Leu Leu Val Ala Val Leu
965 970 975
Ala Val Ala Leu Ile Phe Asn Ser Arg Arg Arg Lys Lys Gln Leu Gly
980 985 990
Ala His Ser Leu Ser Pro Thr Thr Leu Ser Asp Ile Asn Asp Thr Ala
995 1000 1005
Ser Gly Ala Pro Asn His Glu Glu Ser Ser Glu Ser Arg Asp Gly
1010 1015 1020
Thr Ser Val Pro Leu Leu Arg Thr Glu Ser Ile Arg Leu Gln Asp
1025 1030 1035
Leu Asp Arg Met Leu Leu Ala Glu Val Lys Asp Val Leu Ile Pro
1040 1045 1050
His Glu Gln Val Val Ile His Thr Asp Gln Val Ile Gly Lys Gly
1055 1060 1065
His Phe Gly Val Val Tyr His Gly Glu Tyr Thr Asp Gly Ala Gln
1070 1075 1080
Asn Gln Thr His Cys Ala Ile Lys Ser Leu Ser Arg Ile Thr Glu
1085 1090 1095
Val Gln Glu Val Glu Ala Phe Leu Arg Glu Gly Leu Leu Met Arg
1100 1105 1110
Gly Leu His His Pro Asn Ile Leu Ala Leu Ile Gly Ile Met Leu
1115 1120 1125
Pro Pro Glu Gly Leu Pro Arg Val Leu Leu Pro Tyr Met Arg His
1130 1135 1140
Gly Asp Leu Leu His Phe Ile Arg Ser Pro Gln Arg Asn Pro Thr
1145 1150 1155
Val Lys Asp Leu Val Ser Phe Gly Leu Gln Val Ala Cys Gly Met
1160 1165 1170
Glu Tyr Leu Ala Glu Gln Lys Phe Val His Arg Asp Leu Ala Ala
1175 1180 1185
Arg Asn Cys Met Leu Asp Glu Ser Phe Thr Val Lys Val Ala Asp
1190 1195 1200
Phe Gly Leu Ala Arg Gly Val Leu Asp Lys Glu Tyr Tyr Ser Val
1205 1210 1215
Arg Gln His Arg His Ala Arg Leu Pro Val Lys Trp Met Ala Leu
1220 1225 1230
Glu Ser Leu Gln Thr Tyr Arg Phe Thr Thr Lys Ser Asp Val Trp
1235 1240 1245
Ser Phe Gly Val Leu Leu Trp Glu Leu Leu Thr Arg Gly Ala Pro
1250 1255 1260
Pro Tyr Pro His Ile Asp Pro Phe Asp Leu Ser His Phe Leu Ala
1265 1270 1275
Gln Gly Arg Arg Leu Pro Gln Pro Glu Tyr Cys Pro Asp Ser Leu
1280 1285 1290
Tyr His Val Met Leu Arg Cys Trp Glu Ala Asp Pro Ala Ala Arg
1295 1300 1305
Pro Thr Phe Arg Ala Leu Val Leu Glu Val Lys Gln Val Val Ala
1310 1315 1320
Ser Leu Leu Gly Asp His Tyr Val Gln Leu Thr Ala Ala Tyr Val
1325 1330 1335
Asn Val Gly Pro Arg Ala Val Asp Asp Gly Ser Val Pro Pro Glu
1340 1345 1350
Gln Val Gln Pro Ser Pro Gln His Cys Arg Ser Thr Ser Lys Pro
1355 1360 1365
Arg Pro Leu Ser Glu Pro Pro Leu Pro Thr
1370 1375
<210> 210
<211> 11
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Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser
1 5 10
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Ser
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Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Ser
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Gly Gly Ser Leu Asp Pro Lys Gly Gly Gly Gly Ser
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Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
1 5 10 15
Glu Leu Leu Gly
20
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Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu
1 5 10 15
Gly
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Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Ser Ser Glu Gly Ser Gly Ser Thr
1 5 10 15
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Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr
1 5 10 15
Lys Gly
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Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Ser Glu Gly Ser Thr
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Gly Gly Gly Ser Gly
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<400> 262
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<400> 263
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1 5 10
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
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1 5
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<220>
<223> 合成
<400> 265
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1 5 10 15
Pro Pro
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<220>
<223> 合成
<400> 266
Val His Met Pro Leu Gly Phe Leu Gly Pro Gly Gly Leu Ser Gly Arg
1 5 10 15
Ser Asp Asn His
20
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<211> 20
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<220>
<223> 合成
<400> 267
Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn His Gly Gly Val His Met Pro Leu Gly
1 5 10 15
Phe Leu Gly Pro
20
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<212> PRT
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<220>
<223> 合成
<400> 268
Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn His Gly Gly Ser Gly Gly Ser Ile Ser
1 5 10 15
Ser Gly Leu Leu Ser Ser
20
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<211> 22
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 269
Ile Ser Ser Gly Leu Leu Ser Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Leu Ser
1 5 10 15
Gly Arg Ser Gly Asn His
20
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 270
Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn His Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gln Asn
1 5 10 15
Gln Ala Leu Arg Met Ala
20
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<211> 22
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 271
Gln Asn Gln Ala Leu Arg Met Ala Gly Gly Ser Gly Gly Ser Leu Ser
1 5 10 15
Gly Arg Ser Asp Asn His
20
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<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 272
Leu Ser Gly Arg Ser Gly Asn His Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gln Asn
1 5 10 15
Gln Ala Leu Arg Met Ala
20
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<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 273
Gln Asn Gln Ala Leu Arg Met Ala Gly Gly Ser Gly Gly Ser Leu Ser
1 5 10 15
Gly Arg Ser Gly Asn His
20
<210> 274
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 274
Ile Ser Ser Gly Leu Leu Ser Gly Arg Ser Gly Asn His
1 5 10
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<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 275
Ala Val Gly Leu Leu Ala Pro Pro Gly Gly Thr Ser Thr Ser Gly Arg
1 5 10 15
Ser Ala Asn Pro Arg Gly
20
<210> 276
<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 276
Thr Ser Thr Ser Gly Arg Ser Ala Asn Pro Arg Gly Gly Gly Ala Val
1 5 10 15
Gly Leu Leu Ala Pro Pro
20
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<211> 24
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 277
Val His Met Pro Leu Gly Phe Leu Gly Pro Gly Gly Thr Ser Thr Ser
1 5 10 15
Gly Arg Ser Ala Asn Pro Arg Gly
20
<210> 278
<211> 24
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 278
Thr Ser Thr Ser Gly Arg Ser Ala Asn Pro Arg Gly Gly Gly Val His
1 5 10 15
Met Pro Leu Gly Phe Leu Gly Pro
20
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<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 279
Leu Ser Gly Arg Ser Gly Asn His Gly Gly Ser Gly Gly Ser Ile Ser
1 5 10 15
Ser Gly Leu Leu Ser Ser
20
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 280
Pro Arg Phe Lys Ile Ile Gly Gly
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 281
Pro Arg Phe Arg Ile Ile Gly Gly
1 5
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<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 282
Ser Ser Arg His Arg Arg Ala Leu Asp
1 5
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<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 283
Arg Lys Ser Ser Ile Ile Ile Arg Met Arg Asp Val Val Leu
1 5 10
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<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 284
Ser Ser Ser Phe Asp Lys Gly Lys Tyr Lys Lys Gly Asp Asp Ala
1 5 10 15
<210> 285
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 285
Ser Ser Ser Phe Asp Lys Gly Lys Tyr Lys Arg Gly Asp Asp Ala
1 5 10 15
<210> 286
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 286
Ile Glu Gly Arg
1
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<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 287
Ile Asp Gly Arg
1
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 288
Gly Gly Ser Ile Asp Gly Arg
1 5
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<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 289
Pro Leu Gly Leu Trp Ala
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 290
Gly Pro Gln Gly Ile Ala Gly Gln
1 5
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<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 291
Gly Pro Gln Gly Leu Leu Gly Ala
1 5
<210> 292
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 292
Gly Ile Ala Gly Gln
1 5
<210> 293
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 293
Gly Pro Leu Gly Ile Ala Gly Ile
1 5
<210> 294
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 294
Gly Pro Glu Gly Leu Arg Val Gly
1 5
<210> 295
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 295
Tyr Gly Ala Gly Leu Gly Val Val
1 5
<210> 296
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 296
Ala Gly Leu Gly Val Val Glu Arg
1 5
<210> 297
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 297
Ala Gly Leu Gly Ile Ser Ser Thr
1 5
<210> 298
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 298
Glu Pro Gln Ala Leu Ala Met Ser
1 5
<210> 299
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 299
Gln Ala Leu Ala Met Ser Ala Ile
1 5
<210> 300
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 300
Ala Ala Tyr His Leu Val Ser Gln
1 5
<210> 301
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 301
Met Asp Ala Phe Leu Glu Ser Ser
1 5
<210> 302
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 302
Glu Ser Leu Pro Val Val Ala Val
1 5
<210> 303
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 303
Ser Ala Pro Ala Val Glu Ser Glu
1 5
<210> 304
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 304
Asp Val Ala Gln Phe Val Leu Thr
1 5
<210> 305
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 305
Val Ala Gln Phe Val Leu Thr
1 5
<210> 306
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 306
Val Ala Gln Phe Val Leu Thr Glu
1 5
<210> 307
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 307
Ala Gln Phe Val Leu Thr Glu Gly
1 5
<210> 308
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 308
Pro Val Gln Pro Ile Gly Pro Gln
1 5
<210> 309
<211> 422
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 309
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg
20 25 30
Arg Thr Leu Met Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser
35 40 45
Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly
50 55 60
Asn Gln Phe Gln Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile
65 70 75 80
Gln Gln Ile Phe Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp
85 90 95
Asp Glu Thr Leu Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu
100 105 110
Asn Asp Leu Glu Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr
115 120 125
Pro Leu Met Lys Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln
130 135 140
Arg Ile Thr Leu Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp
145 150 155 160
Glu Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn
165 170 175
Leu Gln Glu Ser Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile
180 185 190
Gly Gly Gly Ser Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro
195 200 205
Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
210 215 220
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
225 230 235 240
Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr
245 250 255
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
260 265 270
Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His
275 280 285
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
290 295 300
Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln
305 310 315 320
Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met
325 330 335
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
340 345 350
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn
355 360 365
Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu
370 375 380
Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val
385 390 395 400
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln
405 410 415
Lys Ser Leu Ser Leu Ser
420
<210> 310
<211> 1269
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 310
atggaaaccg acacactgct gctgtgggtg ctgcttttgt gggtgccagg atccacaggc 60
tgtgatctgc ctcaaacgca ttcattgggg tccaggcgca cgcttatgtt gcttgcacag 120
atgaggagaa tatcactttt ctcttgcttg aaggaccgcc acgattttgg ctttccgcag 180
gaagagttcg gtaaccagtt ccaaaaggca gagacaatcc ccgttttgca tgagatgatc 240
caacagatct ttaacctgtt ttcaaccaag gatagcagcg cagcgtggga tgagacactg 300
cttgacaagt tttacaccga gctctatcag caacttaatg atctcgaagc ctgcgtaatt 360
caaggagtag gcgttacaga gacacctttg atgaaggagg attccatcct tgcagtaaga 420
aaatacttcc agaggatcac cctctacctc aaagaaaaga aatactcccc atgcgcgtgg 480
gaagtagtgc gagctgaaat aatgcggagc ttttctttgt caactaatct ccaagaatct 540
ctgagaagca aggagtcagg taggtctgat aatatcgggg gaggttctga atctaagtac 600
ggccctcctt gtcctccatg tcctgctcca gagtttctcg gaggcccctc cgtgttcctg 660
tttcctccaa agcctaagga caccctgatg atcagcagaa cccctgaagt gacctgcgtg 720
gtggtcgacg tttcacaaga ggaccccgag gtgcagttca attggtacgt ggacggcgtg 780
gaagtgcaca acgccaagac caagcctaga gaggaacagt tcaacagcac ctacagagtg 840
gtgtccgtgc tgaccgtgct gcaccaggat tggctgaacg gcaaagagta caagtgcaag 900
gtgtccaaca agggcctgcc tagcagcatc gagaaaacca tcagcaaggc caagggccag 960
ccaagggaac cccaggttta cacactgcca cctagccaag aggaaatgac caagaaccag 1020
gtgtccctga cctgcctggt caagggcttt tacccctccg atatcgccgt ggaatgggag 1080
agcaatggcc agcctgagaa caactacaag accacacctc ctgtgctgga cagcgacggc 1140
tcattcttcc tgtacagcag actgaccgtg gacaagagca gatggcagca gggcaacgtg 1200
ttcagctgca gcgtgatgca cgaggccctg cacaaccact acacccagaa gtctctgagc 1260
ctgagctga 1269
<210> 311
<211> 428
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 311
Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro
1 5 10 15
Gly Ser Thr Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg
20 25 30
Arg Thr Leu Met Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser
35 40 45
Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly
50 55 60
Asn Gln Phe Gln Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile
65 70 75 80
Gln Gln Ile Phe Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp
85 90 95
Asp Glu Thr Leu Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu
100 105 110
Asn Asp Leu Glu Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr
115 120 125
Pro Leu Met Lys Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln
130 135 140
Arg Ile Thr Leu Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp
145 150 155 160
Glu Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn
165 170 175
Leu Gln Glu Ser Leu Arg Ser Lys Glu Ile Ser Ser Gly Leu Leu Ser
180 185 190
Gly Arg Ser Asp Asn Ile Gly Gly Gly Ser Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
195 200 205
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
210 215 220
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
225 230 235 240
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
245 250 255
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
260 265 270
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
275 280 285
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
290 295 300
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
305 310 315 320
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
325 330 335
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
340 345 350
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
355 360 365
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
370 375 380
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
385 390 395 400
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
405 410 415
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
420 425
<210> 312
<211> 1287
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 312
atggaaaccg acacactgct gctgtgggtg ctgcttttgt gggtgccagg atccacaggc 60
tgtgatctgc ctcaaacgca ttcattgggg tccaggcgca cgcttatgtt gcttgcacag 120
atgaggagaa tatcactttt ctcttgcttg aaggaccgcc acgattttgg ctttccgcag 180
gaagagttcg gtaaccagtt ccaaaaggca gagacaatcc ccgttttgca tgagatgatc 240
caacagatct ttaacctgtt ttcaaccaag gatagcagcg cagcgtggga tgagacactg 300
cttgacaagt tttacaccga gctctatcag caacttaatg atctcgaagc ctgcgtaatt 360
caaggagtag gcgttacaga gacacctttg atgaaggagg attccatcct tgcagtaaga 420
aaatacttcc agaggatcac cctctacctc aaagaaaaga aatactcccc atgcgcgtgg 480
gaagtagtgc gagctgaaat aatgcggagc ttttctttgt caactaatct ccaagaatct 540
ctgagaagca aggagattag ttctggcctg ctgtcaggta ggtctgataa tatcggggga 600
ggttctgaat ctaagtacgg ccctccttgt cctccatgtc ctgctccaga gtttctcgga 660
ggcccctccg tgttcctgtt tcctccaaag cctaaggaca ccctgatgat cagcagaacc 720
cctgaagtga cctgcgtggt ggtcgacgtt tcacaagagg accccgaggt gcagttcaat 780
tggtacgtgg acggcgtgga agtgcacaac gccaagacca agcctagaga ggaacagttc 840
aacagcacct acagagtggt gtccgtgctg accgtgctgc accaggattg gctgaacggc 900
aaagagtaca agtgcaaggt gtccaacaag ggcctgccta gcagcatcga gaaaaccatc 960
agcaaggcca agggccagcc aagggaaccc caggtttaca cactgccacc tagccaagag 1020
gaaatgacca agaaccaggt gtccctgacc tgcctggtca agggctttta cccctccgat 1080
atcgccgtgg aatgggagag caatggccag cctgagaaca actacaagac cacacctcct 1140
gtgctggaca gcgacggctc attcttcctg tacagcagac tgaccgtgga caagagcaga 1200
tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac 1260
acccagaagt ctctgagcct gagctga 1287
<210> 313
<211> 391
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 313
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile Cys Pro Pro Cys
165 170 175
Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
180 185 190
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
195 200 205
Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp
210 215 220
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
225 230 235 240
Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
245 250 255
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
260 265 270
Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
275 280 285
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu
290 295 300
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
305 310 315 320
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
325 330 335
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
340 345 350
Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
355 360 365
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
370 375 380
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
385 390
<210> 314
<211> 393
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 314
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile Cys Pro Pro Cys
165 170 175
Pro Ala Pro Glu Phe Glu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
180 185 190
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
195 200 205
Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp
210 215 220
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
225 230 235 240
Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
245 250 255
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
260 265 270
Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
275 280 285
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Gln Glu Glu
290 295 300
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
305 310 315 320
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
325 330 335
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
340 345 350
Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn
355 360 365
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
370 375 380
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
385 390
<210> 315
<211> 221
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 315
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Glu Gly Gly Pro Ser Val Phe
1 5 10 15
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
20 25 30
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val
35 40 45
Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
50 55 60
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
65 70 75 80
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
85 90 95
Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser
100 105 110
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
115 120 125
Cys Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Trp Cys Leu Val
130 135 140
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
145 150 155 160
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
165 170 175
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
180 185 190
Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
195 200 205
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
210 215 220
<210> 316
<211> 221
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 316
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Glu Gly Gly Pro Ser Val Phe
1 5 10 15
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
20 25 30
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val
35 40 45
Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
50 55 60
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
65 70 75 80
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
85 90 95
Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser
100 105 110
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys Thr Leu Pro Pro
115 120 125
Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val
130 135 140
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
145 150 155 160
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
165 170 175
Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
180 185 190
Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
195 200 205
Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
210 215 220
<210> 317
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 317
Ser Asp Asn Ile
1
<210> 318
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 318
Gly Ser Ser Gly Gly Ser
1 5
<210> 319
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 319
Glu Ser Lys Tyr
1
<210> 320
<211> 407
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 320
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe
1 5 10 15
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
20 25 30
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
35 40 45
Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
50 55 60
Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser
65 70 75 80
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
85 90 95
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser
100 105 110
Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
115 120 125
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
130 135 140
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
145 150 155 160
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
165 170 175
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu
180 185 190
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
195 200 205
Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser
210 215 220
Leu Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile Gly Gly
225 230 235 240
Gly Ser Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr
245 250 255
Leu Met Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu
260 265 270
Lys Asp Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln
275 280 285
Phe Gln Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln
290 295 300
Ile Phe Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu
305 310 315 320
Thr Leu Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp
325 330 335
Leu Glu Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu
340 345 350
Met Lys Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile
355 360 365
Thr Leu Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val
370 375 380
Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln
385 390 395 400
Glu Ser Leu Arg Ser Lys Glu
405
<210> 321
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 321
Ser Gly Gly Gly
1
<210> 322
<211> 225
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 322
Ser Asp Asn Ile Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Glu Gly Gly
1 5 10 15
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
20 25 30
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
35 40 45
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
50 55 60
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
65 70 75 80
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
85 90 95
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
100 105 110
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Cys
115 120 125
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
130 135 140
Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
145 150 155 160
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
165 170 175
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Arg Leu Thr Val Asp
180 185 190
Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
195 200 205
Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu
210 215 220
Gly
225
<210> 323
<211> 392
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 323
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Lys Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Thr Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Asp Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Cys Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Met Gln Glu Glu Arg Val Gly Glu Thr Pro Leu Met Asn
100 105 110
Val Asp Ser Ile Leu Ala Val Lys Lys Tyr Phe Arg Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Thr Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Leu Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Arg
145 150 155 160
Leu Arg Arg Lys Glu Leu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile Cys Pro Pro
165 170 175
Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
180 185 190
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
195 200 205
Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn
210 215 220
Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg
225 230 235 240
Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val
245 250 255
Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser
260 265 270
Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys
275 280 285
Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu
290 295 300
Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe
305 310 315 320
Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu
325 330 335
Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe
340 345 350
Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly
355 360 365
Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr
370 375 380
Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
385 390
<210> 324
<211> 165
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 324
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Lys Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Thr Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Asp Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Cys Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Met Gln Glu Glu Arg Val Gly Glu Thr Pro Leu Met Asn
100 105 110
Val Asp Ser Ile Leu Ala Val Lys Lys Tyr Phe Arg Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Thr Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Leu Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Arg
145 150 155 160
Leu Arg Arg Lys Glu
165
<210> 325
<211> 166
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 325
Met Ser Tyr Asn Leu Leu Gly Phe Leu Gln Arg Ser Ser Asn Phe Gln
1 5 10 15
Cys Gln Lys Leu Leu Trp Gln Leu Asn Gly Arg Leu Glu Tyr Cys Leu
20 25 30
Lys Asp Arg Met Asn Phe Asp Ile Pro Glu Glu Ile Lys Gln Leu Gln
35 40 45
Gln Phe Gln Lys Glu Asp Ala Ala Leu Thr Ile Tyr Glu Met Leu Gln
50 55 60
Asn Ile Phe Ala Ile Phe Arg Gln Asp Ser Ser Ser Thr Gly Trp Asn
65 70 75 80
Glu Thr Ile Val Glu Asn Leu Leu Ala Asn Val Tyr His Gln Ile Asn
85 90 95
His Leu Lys Thr Val Leu Glu Glu Lys Leu Glu Lys Glu Asp Phe Thr
100 105 110
Arg Gly Lys Leu Met Ser Ser Leu His Leu Lys Arg Tyr Tyr Gly Arg
115 120 125
Ile Leu His Tyr Leu Lys Ala Lys Glu Tyr Ser His Cys Ala Trp Thr
130 135 140
Ile Val Arg Val Glu Ile Leu Arg Asn Phe Tyr Phe Ile Asn Arg Leu
145 150 155 160
Thr Gly Tyr Leu Arg Asn
165
<210> 326
<211> 203
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 326
Met Thr Ala Asn His Gln Ser Pro Gly Met His Ser Ile Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Leu Leu Pro Ala Leu Thr Thr Thr Phe Ser Cys Asn His Leu Arg
20 25 30
His Gln Asp Ala Asn Phe Ser Trp Lys Ser Leu Gln Leu Leu Gln Asn
35 40 45
Thr Ala Pro Pro Pro Pro Gln Pro Cys Pro Gln Gln Asp Val Thr Phe
50 55 60
Pro Phe Pro Glu Thr Leu Leu Lys Ser Lys Asp Lys Lys Gln Ala Ala
65 70 75 80
Ile Thr Thr Leu Arg Ile Leu Gln His Leu Phe Asn Met Leu Ser Ser
85 90 95
Pro His Thr Pro Lys His Trp Ile Asp Arg Thr Arg His Ser Leu Leu
100 105 110
Asn Gln Ile Gln His Tyr Ile His His Leu Glu Gln Cys Phe Val Asn
115 120 125
Gln Gly Thr Arg Ser Gln Arg Arg Gly Pro Arg Asn Ala His Leu Ser
130 135 140
Ile Asn Lys Tyr Phe Arg Ser Ile His Asn Phe Leu Gln His Asn Asn
145 150 155 160
Tyr Ser Ala Cys Thr Trp Asp His Val Arg Leu Gln Ala Arg Asp Cys
165 170 175
Phe Arg His Val Asp Thr Leu Ile Gln Trp Met Lys Ser Arg Ala Pro
180 185 190
Leu Thr Ala Ser Ser Lys Arg Leu Asn Thr Gln
195 200
<210> 327
<211> 187
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 327
Met Ala Leu Pro Cys Ser Phe Ser Val Ala Leu Val Leu Leu Ser Cys
1 5 10 15
His Ser Leu Cys Cys Leu Ala Cys His Leu Pro Asp Thr His Ser Leu
20 25 30
Arg Asn Trp Arg Val Leu Thr Leu Leu Gly Gln Met Arg Arg Leu Ser
35 40 45
Ala Ser Ser Cys Asp His Tyr Thr Thr Asp Phe Ala Phe Pro Lys Glu
50 55 60
Leu Phe Asp Gly Gln Arg Leu Gln Glu Ala Gln Ala Leu Ser Val Val
65 70 75 80
His Val Met Thr Gln Lys Val Phe His Leu Phe Cys Thr Asn Thr Ser
85 90 95
Ser Ala Pro Trp Asn Met Thr Leu Leu Glu Glu Leu Cys Ser Gly Leu
100 105 110
Ser Glu Gln Leu Asp Asp Leu Asp Ala Cys Pro Leu Gln Glu Ala Gly
115 120 125
Leu Ala Glu Thr Pro Leu Met His Glu Asp Ser Thr Leu Arg Thr Tyr
130 135 140
Phe Gln Arg Ile Ser Leu Tyr Leu Gln Asp Arg Asn His Ser Pro Cys
145 150 155 160
Ala Trp Glu Met Val Arg Ala Glu Ile Gly Arg Ser Phe Phe Ser Leu
165 170 175
Thr Ile Leu Gln Glu Arg Val Arg Arg Arg Lys
180 185
<210> 328
<211> 191
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 328
Met Pro Gly Pro Ser Ala Pro Pro Pro Pro Ala Ile Tyr Ser Ala Leu
1 5 10 15
Ala Leu Leu Leu Leu Leu Thr Pro Pro Ala Asn Ala Phe Ser Cys Ser
20 25 30
Pro Leu Arg Leu His Asp Ser Ala Phe Ala Trp Asp Ser Leu Gln Leu
35 40 45
Leu Arg Asn Met Ala Pro Ser Pro Thr Gln Pro Cys Pro Gln Gln His
50 55 60
Ala Pro Cys Ser Phe Pro Asp Thr Leu Leu Asp Thr Asn Asp Thr Gln
65 70 75 80
Gln Ala Ala His Thr Ala Leu His Leu Leu Gln His Leu Phe Asp Thr
85 90 95
Leu Ser Ser Pro Ser Thr Pro Ala His Trp Leu His Thr Ala Arg His
100 105 110
Asp Leu Leu Asn Gln Leu Gln His His Ile His His Leu Glu Arg Cys
115 120 125
Phe Pro Ala Asp Ala Ala Arg Leu His Arg Arg Gly Pro Arg Asn Leu
130 135 140
His Leu Ser Ile Asn Lys Tyr Phe Gly Cys Ile Gln His Phe Leu Gln
145 150 155 160
Asn His Thr Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Asp His Val Arg Leu Glu Ala
165 170 175
His Ala Cys Phe Gln Arg Ile His Arg Leu Thr Arg Thr Met Arg
180 185 190
<210> 329
<211> 189
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 329
Met Ala Pro Ala Trp Ser Phe Leu Leu Ala Leu Leu Leu Leu Ser Cys
1 5 10 15
Asn Ala Ile Cys Ser Leu Gly Cys His Leu Pro His Thr His Ser Leu
20 25 30
Pro Asn Arg Arg Val Leu Thr Leu Leu Arg Gln Leu Arg Arg Val Ser
35 40 45
Pro Ser Ser Cys Leu Gln Asp Arg Asn Asp Phe Ala Phe Pro Gln Glu
50 55 60
Ala Leu Gly Gly Ser Gln Leu Gln Lys Ala Gln Ala Ile Ser Val Leu
65 70 75 80
His Glu Val Thr Gln His Thr Phe Gln Leu Phe Ser Thr Glu Gly Ser
85 90 95
Ala Ala Ala Trp Asp Glu Ser Leu Leu Asp Lys Leu Arg Ala Ala Leu
100 105 110
Asp Gln Gln Leu Thr Asp Leu Gln Ala Cys Leu Arg Gln Glu Glu Gly
115 120 125
Leu Arg Gly Ala Pro Leu Leu Lys Glu Asp Ala Ser Leu Ala Val Arg
130 135 140
Lys Tyr Phe His Arg Leu Thr Leu Tyr Leu Arg Glu Lys Arg His Asn
145 150 155 160
Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg Ala Glu Val Met Arg Ala Phe Ser
165 170 175
Ser Ser Thr Asn Leu Gln Glu Arg Phe Arg Arg Lys Asp
180 185
<210> 330
<211> 193
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 330
Met Ala Val Pro Ala Ser Pro Gln His Pro Arg Gly Tyr Gly Ile Leu
1 5 10 15
Leu Leu Thr Leu Leu Leu Lys Ala Leu Ala Thr Thr Ala Ser Ala Cys
20 25 30
Asn His Leu Arg Pro Gln Asp Ala Thr Phe Ser His Asp Ser Leu Gln
35 40 45
Leu Leu Arg Asp Met Ala Pro Thr Leu Pro Gln Leu Cys Pro Gln His
50 55 60
Asn Ala Ser Cys Ser Phe Asn Asp Thr Ile Leu Asp Thr Ser Asn Thr
65 70 75 80
Arg Gln Ala Asp Lys Thr Thr His Asp Ile Leu Gln His Leu Phe Lys
85 90 95
Ile Leu Ser Ser Pro Ser Thr Pro Ala His Trp Asn Asp Ser Gln Arg
100 105 110
Gln Ser Leu Leu Asn Arg Ile His Arg Tyr Thr Gln His Leu Glu Gln
115 120 125
Cys Leu Asp Ser Ser Asp Thr Arg Ser Arg Thr Arg Trp Pro Arg Asn
130 135 140
Leu His Leu Thr Ile Lys Lys His Phe Ser Cys Leu His Thr Phe Leu
145 150 155 160
Gln Asp Asn Asp Tyr Ser Ala Cys Ala Trp Glu His Val Arg Leu Gln
165 170 175
Ala Arg Ala Trp Phe Leu His Ile His Asn Leu Thr Gly Asn Thr Arg
180 185 190
Thr
<210> 331
<211> 194
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 331
Met Ala Leu Pro Ser Ser Phe Leu Val Ala Leu Val Ala Leu Gly Cys
1 5 10 15
Asn Ser Val Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Gly Leu
20 25 30
Leu Asn Arg Arg Ala Leu Thr Leu Leu Gly Gln Met Arg Arg Leu Pro
35 40 45
Ala Ser Ser Cys Gln Lys Asp Arg Asn Asp Phe Ala Phe Pro Gln Asp
50 55 60
Val Phe Gly Gly Asp Gln Ser His Lys Ala Gln Ala Leu Ser Val Val
65 70 75 80
His Val Thr Asn Gln Lys Ile Phe His Phe Phe Cys Thr Glu Ala Ser
85 90 95
Ser Ser Ala Ala Trp Asn Thr Thr Leu Leu Glu Glu Phe Cys Thr Gly
100 105 110
Leu Asp Arg Gln Leu Thr Arg Leu Glu Ala Cys Val Leu Gln Glu Val
115 120 125
Glu Glu Gly Glu Ala Pro Leu Thr Asn Glu Asp Ile His Pro Glu Asp
130 135 140
Ser Ile Leu Arg Asn Tyr Phe Gln Arg Leu Ser Leu Tyr Leu Gln Glu
145 150 155 160
Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Ile Val Arg Ala Glu Ile Met
165 170 175
Arg Ser Leu Tyr Tyr Ser Ser Thr Ala Leu Gln Lys Arg Leu Arg Ser
180 185 190
Glu Lys
<210> 332
<211> 186
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 332
Met Ala Asn Lys Cys Ile Leu Gln Ile Ala Leu Leu Met Cys Phe Ser
1 5 10 15
Thr Thr Ala Leu Ser Met Ser Tyr Asp Val Leu Arg Tyr Gln Gln Arg
20 25 30
Ser Ser Asn Leu Ala Cys Gln Lys Leu Leu Gly Gln Leu Pro Gly Thr
35 40 45
Pro Gln Tyr Cys Leu Glu Asp Arg Met Asn Phe Glu Val Pro Glu Glu
50 55 60
Ile Met Gln Pro Pro Gln Phe Gln Lys Glu Asp Ala Val Leu Ile Ile
65 70 75 80
His Glu Met Leu Gln Gln Ile Phe Gly Ile Leu Arg Arg Asn Phe Ser
85 90 95
Ser Thr Gly Trp Asn Glu Thr Val Ile Lys Thr Ile Leu Val Glu Leu
100 105 110
Asp Gly Gln Met Asp Asp Leu Glu Thr Ile Leu Glu Glu Ile Met Glu
115 120 125
Glu Glu Asn Phe Pro Arg Gly Asp Met Thr Ile Leu His Leu Lys Lys
130 135 140
Tyr Tyr Leu Ser Ile Leu Gln Tyr Leu Lys Ser Lys Glu Tyr Arg Ser
145 150 155 160
Cys Ala Trp Thr Val Val Gln Val Glu Ile Leu Arg Asn Phe Ser Phe
165 170 175
Leu Asn Arg Leu Thr Asp Tyr Leu Arg Asn
180 185
<210> 333
<211> 186
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 333
Met Thr His Arg Cys Leu Leu Gln Met Val Leu Leu Leu Cys Phe Ser
1 5 10 15
Thr Thr Ala Leu Ser Arg Ser Tyr Ser Leu Leu Arg Phe Gln Gln Arg
20 25 30
Arg Ser Leu Ala Leu Cys Gln Lys Leu Leu Arg Gln Leu Pro Ser Thr
35 40 45
Pro Gln His Cys Leu Glu Ala Arg Met Asp Phe Gln Met Pro Glu Glu
50 55 60
Met Lys Gln Ala Gln Gln Phe Gln Lys Glu Asp Ala Ile Leu Val Ile
65 70 75 80
Tyr Glu Met Leu Gln Gln Ile Phe Asn Ile Leu Thr Arg Asp Phe Ser
85 90 95
Ser Thr Gly Trp Ser Glu Thr Ile Ile Glu Asp Leu Leu Glu Glu Leu
100 105 110
Tyr Glu Gln Met Asn His Leu Glu Pro Ile Gln Lys Glu Ile Met Gln
115 120 125
Lys Gln Asn Ser Thr Met Gly Asp Thr Thr Val Leu His Leu Arg Lys
130 135 140
Tyr Tyr Phe Asn Leu Val Gln Tyr Leu Lys Ser Lys Glu Tyr Asn Arg
145 150 155 160
Cys Ala Trp Thr Val Val Arg Val Gln Ile Leu Arg Asn Phe Ser Phe
165 170 175
Leu Thr Arg Leu Thr Gly Tyr Leu Arg Glu
180 185
<210> 334
<211> 165
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 334
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Asn
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu
165
<210> 335
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 335
Ser Gly Gly Gly Gly
1 5
<210> 336
<211> 396
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 336
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Arg Ser Asp Asn
165 170 175
Ile Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
180 185 190
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
195 200 205
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
210 215 220
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
225 230 235 240
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
245 250 255
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
260 265 270
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
275 280 285
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
290 295 300
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
305 310 315 320
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
325 330 335
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
340 345 350
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
355 360 365
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
370 375 380
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
385 390 395
<210> 337
<211> 399
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 337
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Arg Ser Asp Asn
165 170 175
Ile Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly
180 185 190
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
195 200 205
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu
210 215 220
Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
225 230 235 240
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg
245 250 255
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
260 265 270
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu
275 280 285
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
290 295 300
Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
305 310 315 320
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
325 330 335
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
340 345 350
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp
355 360 365
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
370 375 380
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
385 390 395
<210> 338
<211> 403
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 338
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Arg Ser Asp Asn
165 170 175
Ile Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
180 185 190
Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
195 200 205
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
210 215 220
Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
225 230 235 240
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
245 250 255
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
260 265 270
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
275 280 285
Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
290 295 300
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn
305 310 315 320
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
325 330 335
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
340 345 350
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg
355 360 365
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
370 375 380
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
385 390 395 400
Ser Leu Ser
<210> 339
<211> 407
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 339
Cys Asp Leu Pro Gln Thr His Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met
1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
Ala Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys
100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val Val Arg
130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Arg Ser Asp Asn
165 170 175
Ile Gly Gly Gly Ser Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys
180 185 190
Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
195 200 205
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
210 215 220
Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp
225 230 235 240
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
245 250 255
Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
260 265 270
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
275 280 285
Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
290 295 300
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu
305 310 315 320
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
325 330 335
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
340 345 350
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
355 360 365
Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
370 375 380
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
385 390 395 400
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser
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<220>
<223> 合成
<400> 340
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1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
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Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
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Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
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Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
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Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile Gly Pro Pro Cys
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<220>
<223> 合成
<400> 341
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1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
20 25 30
Arg His Asp Phe Gly Phe Pro Gln Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln
35 40 45
Lys Ala Glu Thr Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe
50 55 60
Asn Leu Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu
65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
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145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile Glu Ser Lys Tyr
165 170 175
Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro
180 185 190
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
195 200 205
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp
210 215 220
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<220>
<223> 合成
<400> 342
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1 5 10 15
Leu Leu Ala Gln Met Arg Arg Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp
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35 40 45
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65 70 75 80
Leu Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu
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100 105 110
Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr Leu
115 120 125
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130 135 140
Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu Gln Glu Ser
145 150 155 160
Leu Arg Ser Lys Glu Ser Gly Arg Ser Asp Asn Ile Gly Gly Gly Ser
165 170 175
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe
180 185 190
Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr
195 200 205
Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val
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Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val
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Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser
245 250 255
Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu
260 265 270
Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser
275 280 285
Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro
290 295 300
Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln
305 310 315 320
Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala
325 330 335
Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
340 345 350
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu
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Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 343
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1 5 10 15
Ala
<210> 344
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 344
Met Ala Leu Thr Phe Ala Leu Leu Val Ala Leu Leu Val Leu Ser Cys
1 5 10 15
Lys Ser Ser Cys Ser Val Gly
20
<210> 345
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
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<220>
<223> 合成
<400> 504
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<210> 505
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 505
Gly Gln Ser Gly Ser
1 5
<210> 506
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 506
Gln Ser Gly Ser
1
<210> 507
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 507
Gln Gly Gln Ser Gly Gln Gly
1 5
<210> 508
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 508
Gly Gln Ser Gly Gln Gly
1 5
<210> 509
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 509
Gln Ser Gly Gln Gly
1 5
<210> 510
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 510
Ser Gly Gln Gly
1
<210> 511
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 511
Gln Gly Gln Ser Gly Gln
1 5
<210> 512
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 512
Gly Gln Ser Gly Gln
1 5
<210> 513
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 513
Gln Ser Gly Gln
1
<210> 514
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 514
Gln Gly Gln Ser Gly
1 5
<210> 515
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 合成
<400> 515
Gln Gly Gln Ser
1
<210> 516
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Fc中的N端缺失序列
<400> 516
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
1 5 10
<210> 517
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Fc中的N端缺失
<400> 517
Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr
1 5 10
<210> 518
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> Fc中的N端缺失序列
<400> 518
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro
1 5

Claims (162)

1.一种可活化细胞因子构建体(ACC)，其包括第一单体构建体和第二单体构建体，其中：
(a)所述第一单体构建体包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、第一可裂解部分(CM1)和第一二聚化结构域(DD1)，
其中所述CM1位于所述CP1与所述DD1之间；并且
(b)所述第二单体构建体包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)、第二可裂解部分(CM2)和第二二聚化结构域(DD2)，
其中所述CM2位于所述CP2与所述DD2之间；或
(a)所述第一单体构建体包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、第一二聚化结构域(DD1)，并且
(b)所述第二单体构建体包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)、可裂解部分(CM)和第二二聚化结构域(DD2)，其中所述CM位于所述CP2与所述DD2之间，其中所述CM充当蛋白酶的底物；或
(a)所述第一单体构建体包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、可裂解部分(CM)和第一二聚化结构域(DD1)，其中所述CM位于所述CP1与所述DD1之间，并且
(b)所述第二单体构建体包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)和第二二聚化结构域(DD2)，
其中所述CM充当蛋白酶的底物；或
(a)所述第一单体构建体包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)和第一二聚化结构域(DD1)，并且
(b)所述第二单体构建体包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)和第二二聚化结构域(DD2)，其中所述CP1、所述CP2或CP1和CP2两者包括充当蛋白酶的底物的氨基酸序列；
其中(c)所述DD1和所述DD2彼此结合，从而形成所述第一单体构建体和所述第二单体构建体的二聚体；并且
进一步其中(d)所述ACC的特征在于具有与至少一种CP1和/或CP2活性的对照水平相比降低的所述至少一种CP1和/或CP2活性的水平。
2.如权利要求1所述的ACC，其中所述第一单体构建体包含第一多肽，所述第一多肽包含所述CP1、所述CM1和所述DD1。
3.如权利要求1或2中任一项或组合所述的ACC，其中所述第二单体构建体包含第二多肽，所述第二多肽包含所述CP2、所述CM2和所述DD2。
4.如权利要求1至3中任一项或组合所述的ACC，其中所述DD1和所述DD2是选自由以下组成的组的对：一对Fc结构域，来自人类IL-15受体α链(IL15Rα)的寿司结构域和可溶性IL-15；barnase和barnstar；PKA和AKAP；基于突变的RNA酶I片段的衔接子/对接标签模块；表位和sdAb；表位和scFv；以及基于蛋白质突触蛋白、突触结合蛋白、小突触小泡蛋白和SNAP25的相互作用的SNARE模块，抗原结合结构域和表位。
5.如权利要求4所述的ACC，其中所述DD1和所述DD2是一对Fc结构域。
6.如权利要求5所述的ACC，其中所述一对Fc结构域是一对人类Fc结构域。
7.如权利要求6所述的ACC，其中所述人类Fc结构域是人类IgG1 Fc结构域、人类IgG2Fc结构域、人类IgG3 Fc结构域或人类IgG4 Fc结构域。
8.如权利要求7所述的ACC，其中所述人类Fc结构域是人类IgG4 Fc结构域。
9.如权利要求8所述的ACC，其中所述人类Fc结构域包含与SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:315或SEQ ID NO:316具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的序列。
10.如权利要求9所述的ACC，其中所述人类Fc结构域包含与SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:315或SEQ ID NO:316具有至少90％同一性的序列。
11.如权利要求10所述的ACC，其中所述人类Fc结构域包含SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:315或SEQ ID NO:316。
12.如权利要求1至3和5至11中任一项或组合所述的ACC，其中所述DD1和所述DD2相同。
13.如权利要求4所述的ACC，其中DD1包含抗原结合结构域并且DD2包含相应表位。
14.如权利要求13所述的ACC，其中所述抗原结合结构域是抗His标签抗原结合结构域并且其中所述DD2包含His标签。
15.如权利要求13所述的ACC，其中所述抗原结合结构域是单链可变片段(scFv)。
16.如权利要求13所述的ACC，其中所述抗原结合结构域是单结构域抗体(sdAb)。
17.如权利要求1所述的ACC，其中DD1和DD2中的至少一个包含选自由非多肽聚合物和小分子组成的组的二聚化结构域取代基。
18.如权利要求17所述的ACC，其中DD1和DD2包含彼此共价结合的非多肽聚合物。
19.如权利要求18所述的ACC，其中所述非多肽聚合物是含硫聚乙二醇，并且其中DD1和DD2通过一个或多个二硫键彼此共价结合。
20.如权利要求17所述的ACC，其中DD1和DD2中的至少一个包含小分子。
21.如权利要求20所述的ACC，其中所述小分子是生物素。
22.如权利要求20所述的ACC，其中DD1包含生物素并且DD2包含抗生物素蛋白。
23.如权利要求1至22中任一项或组合所述的ACC，其中所述CP1和/或所述CP2各自单独地选自由以下组成的组：干扰素、白介素、GM-CSF、G-CSF、LIF、OSM、CD154、LT-β、TNF-α、TNF-β、4-1BBL、APRIL、CD70、CD153、CD178、GITRL、LIGHT、OX40L、TALL-1、TRAIL、TWEAK、TRANCE、TGF-β1、TGF-β1、TGF-β3、Epo、Tpo、Flt-3L、SCF、M-CSF和MSP。
24.如权利要求1至23中任一项或组合所述的ACC，其中所述CP1和所述CP2相同。
25.如权利要求1至23中任一项或组合所述的ACC，其中所述CP1和所述CP2不同。
26.如权利要求1至23中任一项或组合所述的ACC，其中所述CP1和/或所述CP2是干扰素。
27.如权利要求26所述的ACC，其中所述CP1和所述CP2是干扰素。
28.如权利要求26所述的ACC，其中所述CP1和所述CP2是不同的干扰素。
29.如权利要求26所述的ACC，其中所述CP1和所述CP2是相同的干扰素。
30.如权利要求26所述的ACC，其中所述CP1或所述CP2是干扰素。
31.如权利要求26至30中任一项或组合所述的ACC，其中所述干扰素是人类野生型成熟干扰素。
32.如权利要求26至31中任一项或组合所述的ACC，其中所述干扰素选自由以下组成的组：干扰素-α、干扰素-β、干扰素-ω和干扰素-τ。
33.如权利要求32所述的ACC，其中所述干扰素是干扰素-α。
34.如权利要求33所述的ACC，其中所述干扰素选自由以下组成的组：干扰素α-2a、干扰素α-2b和干扰素α-n3。
35.如权利要求34所述的ACC，其中所述干扰素是干扰素α-2b。
36.如权利要求35所述的ACC，其中所述CP1和/或CP2包含与SEQ ID NO:1具有至少80％同一性的序列。
37.如权利要求36所述的ACC，其中所述CP1和/或CP2包含与SEQ ID NO:1具有至少90％同一性的序列。
38.如权利要求37所述的ACC，其中所述CP1和/或CP2包含SEQ ID NO:1的序列。
39.如权利要求32所述的ACC，其中所述干扰素是干扰素β。
40.如权利要求39所述的ACC，其中所述干扰素β选自由干扰素β-1a和干扰素β-1b组成的组。
41.如权利要求1至40中任一项所述的ACC，其中所述CP1和/或所述CP2包含IFab结构域。
42.如权利要求41所述的ACC，其中所述CP1和/或所述CP2包含白介素。
43.如权利要求42所述的ACC，其中所述白介素选自由以下组成的组：IL-1α、IL-1β、IL-1RA、IL-18、IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-13、IL-15、IL-3、IL-5、IL-6、IL-11、IL-12、IL-10、IL-20、IL-14、IL-16和IL-17。
44.如权利要求1至43中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和/或所述CM2包含总计约3个氨基酸至约15个氨基酸。
45.如权利要求1至44中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和所述CM2包含不同蛋白酶的底物。
46.如权利要求1至44中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和所述CM2包含相同蛋白酶的底物。
47.如权利要求1至46中任一项或组合所述的ACC，其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：ADAM8、ADAM9、ADAM10、ADAM12、ADAM15、ADAM17/TACE、ADAMDEC1、ADAMTS1、ADAMTS4、ADAMTS5、BACE、肾素、组织蛋白酶D、组织蛋白酶E、胱天蛋白酶1、胱天蛋白酶2、胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶5、胱天蛋白酶6、胱天蛋白酶7、胱天蛋白酶8、胱天蛋白酶9、胱天蛋白酶10、胱天蛋白酶14、组织蛋白酶B、组织蛋白酶C、组织蛋白酶K、组织蛋白酶L、组织蛋白酶S、组织蛋白酶V/L2、组织蛋白酶X/Z/P、Cruzipain、天冬酰胺内肽酶、Otubain-2、KLK4、KLK5、KLK6、KLK7、KLK8、KLK10、KLK11、KLK13、KLK14、穿膜肽酶、脑啡肽酶、PSMA、BMP-1、MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-19、MMP-20、MMP-23、MMP-24、MMP-26、MMP-27、活化蛋白C、组织蛋白酶A、组织蛋白酶G、糜酶、FVIIa、FIXa、FXa、FXIa、FXIIa、弹性蛋白酶、颗粒酶B、胍基苯甲酸酯酶、HtrA1、人类中性粒细胞裂解酶、乳铁蛋白、marapsin、NS3/4A、PACE4、纤溶酶、PSA、tPA、凝血酶、类胰蛋白酶、uPA、DESC1、DPP-4、FAP、肝素、Matriptase-2、MT-SP1/Matriptase、TMPRSS2、TMPRSS3和TMPRSS4。
48.如权利要求47所述的ACC，其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：uPA、天冬酰胺内肽酶、MT-SP1、ADAM17、BMP-1、TMPRSS3、TMPRSS4、MMP-2、MMP-9、MMP-12、MMP-13和MMP-14。
49.如权利要求47所述的ACC，其中所述CM1和/或所述CM2包含选自由以下组成的组的序列：LSGRSDNH(SEQ ID NO:5)、TGRGPSWV(SEQ ID NO:6)、PLTGRSGG(SEQ ID NO:7)、TARGPSFK(SEQ ID NO:8)、NTLSGRSENHSG(SEQ ID NO:9)、NTLSGRSGNHGS(SEQ ID NO:10)、TSTSGRSANPRG(SEQ ID NO:11)、TSGRSANP(SEQ ID NO:12)、VHMPLGFLGP(SEQ ID NO:13)、AVGLLAPP(SEQ ID NO:14)、AQNLLGMV(SEQ ID NO:15)、QNQALRMA(SEQ ID NO:16)、LAAPLGLL(SEQ ID NO:17)、STFPFGMF(SEQ ID NO:18)、ISSGLLSS(SEQ ID NO:19)、PAGLWLDP(SEQ IDNO:20)、VAGRSMRP(SEQ ID NO:21)、VVPEGRRS(SEQ ID NO:22)、ILPRSPAF(SEQ ID NO:23)、MVLGRSLL(SEQ ID NO:24)、QGRAITFI(SEQ ID NO:25)、SPRSIMLA(SEQ ID NO:26)、SMLRSMPL(SEQ ID NO:27)、ISSGLLSGRSDNH(SEQ ID NO:28)、AVGLLAPPGGLSGRSDNH(SEQ IDNO:29)、ISSGLLSSGGSGGSLSGRSDNH(SEQ ID NO:30)、LSGRSGNH(SEQ ID NO:31)、SGRSANPRG(SEQ IDNO:32)、LSGRSDDH(SEQ ID NO:33)、LSGRSDIH(SEQ ID NO:34)、LSGRSDQH(SEQ ID NO:35)、LSGRSDTH(SEQ ID NO:36)、LSGRSDYH(SEQ ID NO:37)、LSGRSDNP(SEQ ID NO:38)、LSGRSANP(SEQ ID NO:39)、LSGRSANI(SEQ ID NO:40)、LSGRSDNI(SEQ ID NO:41)、MIAPVAYR(SEQ IDNO:42)、RPSPMWAY(SEQ ID NO:43)、WATPRPMR(SEQ ID NO:44)、FRLLDWQW(SEQ ID NO:45)、ISSGL(SEQ ID NO:46)、ISSGLLS(SEQ ID NO:47)、ISSGLL(SEQ ID NO:48)、ISSGLLSGRSANPRG(SEQ ID NO:49)、AVGLLAPPTSGRSANPRG(SEQ ID NO:50)、AVGLLAPPSGRSANPRG(SEQ ID NO:51)、ISSGLLSGRSDDH(SEQ ID NO:52)、ISSGLLSGRSDIH(SEQID NO:53)、ISSGLLSGRSDQH(SEQ ID NO:54)、ISSGLLSGRSDTH(SEQ ID NO:55)、ISSGLLSGRSDYH(SEQ ID NO:56)、ISSGLLSGRSDNP(SEQ ID NO:57)、ISSGLLSGRSANP(SEQ IDNO:58)、ISSGLLSGRSANI(SEQ ID NO:59)、AVGLLAPPGGLSGRSDDH(SEQ ID NO:60)、AVGLLAPPGGLSGRSDIH(SEQ IDNO:61)、AVGLLAPPGGLSGRSDQH(SEQ ID NO:62)、AVGLLAPPGGLSGRSDTH(SEQ ID NO:63)、AVGLLAPPGGLSGRSDYH(SEQ ID NO:64)、AVGLLAPPGGLSGRSDNP(SEQ ID NO:65)、AVGLLAPPGGLSGRSANP(SEQ IDNO:66)、AVGLLAPPGGLSGRSANI(SEQ ID NO:67)、ISSGLLSGRSDNI(SEQ ID NO:68)、AVGLLAPPGGLSGRSDNI(SEQ ID NO:69)、GLSGRSDNHGGAVGLLAPP(SEQ ID NO:70)、GLSGRSDNHGGVHMPLGFLGP(SEQ ID NO:71)、LSGRSDNHGGVHMPLGFLGP(SEQ ID NO:72)、ISSGLSS(SEQ ID NO:73)、PVGYTSSL(SEQ ID NO:74)、DWLYWPGI(SEQ ID NO:75)、LKAAPRWA(SEQ ID NO:76)、GPSHLVLT(SEQ ID NO:77)、LPGGLSPW(SEQ ID NO:78)、MGLFSEAG(SEQ IDNO:79)、SPLPLRVP(SEQ ID NO:80)、RMHLRSLG(SEQ ID NO:81)、LLAPSHRA(SEQ ID NO:82)、GPRSFGL(SEQ ID NO:83)、GPRSFG(SEQ ID NO:84)、SARGPSRW(SEQ ID NO:85)、GGWHTGRN(SEQ ID NO:86)、HTGRSGAL(SEQ ID NO:87)、AARGPAIH(SEQ ID NO:88)、RGPAFNPM(SEQ IDNO:89)、SSRGPAYL(SEQ ID NO:90)、RGPATPIM(SEQ ID NO:91)、RGPA(SEQ ID NO:92)、GGQPSGMWGW(SEQ ID NO:93)、FPRPLGITGL(SEQ ID NO:94)、SPLTGRSG(SEQ IDNO:95)、SAGFSLPA(SEQ ID NO:96)、LAPLGLQRR(SEQ ID NO:97)、SGGPLGVR(SEQ ID NO:98)、PLGL(SEQ ID NO:99)和SGRSDNI(SEQ ID NO:100)。
50.如权利要求47所述的ACC，其中所述CM1和/或所述CM2包含选自由以下组成的组的序列：ISSGLLSGRSDNH(SEQ ID NO:28)、LSGRSDDH(SEQ ID NO:33)、ISSGLLSGRSDQH(SEQ IDNO:54)、SGRSDNI(SEQ ID NO:100)和ISSGLLSGRSDNI(SEQ ID NO:68)。
51.如权利要求1至50中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和/或所述CM2包含选自SEQ ID No:5-100和263-308的序列。
52.如权利要求1至51中任一项或组合所述的ACC，其中所述蛋白酶由受试者的肿瘤产生。
53.如权利要求52所述的ACC，其中所述受试者已诊断或鉴别为患有癌症。
54.如权利要求1至53中任一项或组合所述的ACC，其中所述CP1和所述CM1在所述第一单体构建体中彼此直接邻接。
55.如权利要求1至54中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和所述DD1在所述第一单体构建体中彼此直接邻接。
56.如权利要求1至55中任一项或组合所述的ACC，其中所述CP2和所述CM2在所述第二单体构建体中彼此直接邻接。
57.如权利要求1至56中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM2和所述DD2在所述第二单体构建体中彼此直接邻接。
58.如权利要求1至57中任一项或组合所述的ACC，其中所述第一单体构建体包含至少一个接头。
59.如权利要求58所述的ACC，其中所述至少一个接头是设置在所述CP1与所述CM1之间的接头L1和/或设置在所述CM1与所述DD1之间的接头L2。
60.如权利要求59所述的ACC，其中所述第二单体构建体包含至少一个接头。
61.如权利要求60所述的ACC，其中所述至少一个接头是设置在所述CP2与所述CM2之间的接头L3和/或设置在所述CM2与所述DD2之间的接头L4。
62.如权利要求61所述的ACC，其中所述第一单体构建体包含接头L1并且所述第二单体构建体包含接头L3。
63.如权利要求62所述的ACC，其中L1和L3相同。
64.如权利要求63所述的ACC，其中所述第二单体构建体包含接头L2并且所述第二单体构建体包含接头L4。
65.如权利要求64所述的ACC，其中L2和L4相同。
66.如权利要求65所述的ACC，其中每个接头具有1个氨基酸至约15个氨基酸的总长度。
67.如权利要求66所述的ACC，其中每个接头具有至少5个氨基酸的总长度。
68.如权利要求1至67中任一项或组合所述的ACC，其中所述第一单体构建体包含至少一个接头，其中每个接头独立地选自由以下组成的组：GSSGGSGGSGG(SEQ ID NO:210)；GGGS(SEQ ID NO:2)；GGGSGGGS(SEQ ID NO:211)；GGGSGGGSGGGS(SEQ ID NO:212)；GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:213)；GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:214)；GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:215)；GGGGS(SEQ IDNO:216)；GS；GGGGSGS(SEQ ID NO:217)；GGGGSGGGGSGGGGSGS(SEQ ID NO:218)；GGSLDPKGGGGS(SEQ ID NO:219)；PKSCDKTHTCPPCPAPELLG(SEQ ID NO:220)；SKYGPPCPPCPAPEFLG(SEQ ID NO:221)；GKSSGSGSESKS(SEQ ID NO:222)；GSTSGSGKSSEGKG(SEQ ID NO:223)；GSTSGSGKSSEGSGSTKG(SEQ ID NO:224)；GSTSGSGKPGSGEGSTKG(SEQ ID NO:225)；GSTSGSGKPGSSEGST(SEQ ID NO:226)；(GS)n、(GGS)n、(GSGGS)n(SEQ ID NO:227)、(GGGS)n(SEQ ID NO:228)、(GGGGS)n(SEQID NO:216)，其中每个n是至少一的整数；GGSG(SEQ ID NO:229)；GGSGG(SEQ ID NO:230)；GSGSG(SEQ ID NO:231)；GSGGG(SEQ ID NO:232)；GGGSG(SEQ ID NO:233)；GSSSG(SEQ IDNO:234)；GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO:213)；GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ IDNO:214)；和GSTSGSGKPGSSEGST(SEQ ID NO:226)。
69.如权利要求68所述的ACC，其中所述接头包含GGGS(SEQ IDNO:2)的序列。
70.如权利要求1至69中任一项或组合所述的ACC，其中所述第一单体构建体在N端至C端方向上包含所述CP1、所述CM1和直接或间接连接至所述CM1的C端的所述DD1。
71.如权利要求1至70中任一项或组合所述的ACC，其中所述第一多肽在C端至N端方向上包含所述CP1、所述CM1和直接或间接连接至所述CM1的N端的所述DD1。
72.如权利要求1至71中任一项或组合所述的ACC，其中所述第二多肽在N端至C端方向上包含所述CP2、所述CM2和直接或间接连接至所述CM2的C端的所述DD2。
73.如权利要求1至72中任一项或组合所述的ACC，其中所述第二多肽在C端至N端方向上包含所述CP2、所述CM2和直接或间接连接至所述CM2的所述DD2。
74.如权利要求70所述的ACC，其中所述第一单体构建体在N端至C端方向上包含所述CP1、所述CM1和所述DD1，其中所述CP1和所述CM1彼此直接邻接，其中所述CM1和所述DD1彼此直接邻接，其中所述CM1是不超过10个氨基酸的肽，其中所述第二单体构建体与所述第一单体构建体相同，并且其中所述第一单体构建体和所述第二单体构建体通过至少两个二硫键彼此共价结合。
75.如权利要求74所述的ACC，其中CP1是干扰素。
76.如权利要求75所述的ACC，其中CP1是干扰素-α。
77.如权利要求1至76中任一项或组合所述的ACC，其中所述至少一种CP1和/或CP2活性是如使用表面等离子体共振所确定的所述CP1和/或所述CP2对其同源受体的结合亲和力(KD)。
78.如权利要求1至76中任一项或组合所述的ACC，其中所述至少一种CP1和/或CP2活性是淋巴瘤细胞的增殖水平。
79.如权利要求1至6中任一项或组合所述的ACC，其中所述至少一种CP1和/或CP2活性是淋巴瘤细胞中JAK/STAT/ISGF3通路活化的水平。
80.如权利要求1至76中任一项或组合所述的ACC，其中所述至少一种活性是淋巴瘤细胞中SEAP产生的水平。
81.如权利要求1至80中任一项或组合所述的ACC，其中所述ACC的特征在于与对照水平相比，至少一种CP1和/或CP2活性降低至少20倍。
82.如权利要求81所述的ACC，其中所述ACC的特征在于与对照水平相比，至少一种CP1和/或CP2活性降低至少50倍。
83.如权利要求82所述的ACC，其中所述ACC的特征在于与对照水平相比，所述CP1和/或CP2的至少一种活性降低至少100倍。
84.如权利要求83所述的ACC，其中所述ACC的特征在于与对照水平相比，至少一种CP1和/或CP2活性降低至少500倍。
85.如权利要求1至84中任一项或组合所述的ACC，其中所述CP1和/或CP2的所述至少一种活性的对照水平是将所述ACC暴露于所述蛋白酶之后所述CP1和/或CP2在所述ACC中的活性。
86.如权利要求1至84中任一项或组合所述的ACC，其中所述至少一种CP1和/或CP2的对照水平是相应野生型成熟细胞因子的相应CP1和/或CP2活性。
87.如权利要求1至86中任一项或组合所述的ACC，其中所述ACC的特征在于在暴露于所述蛋白酶之后产生裂解产物，其中所述裂解产物包含所述CP1和/或CP2的所述至少一种活性。
88.如权利要求87所述的ACC，其中所述CP1和/或CP2的所述至少一种活性是抗增殖活性。
89.如权利要求88所述的ACC，其中所述对照水平是EC50值，并且其中EC50(裂解产物)与EC50(对照水平)的比率小于约10、或小于约9、或小于约8、或小于约7、或小于约6、或小于约5、或小于约4、或小于约3、或小于约2、或小于约1.5。
90.一种组合物，其包含如权利要求1至89中任一项或组合所述的ACC。
91.如权利要求90所述的组合物，其中所述组合物是药物组合物。
92.一种容器、小瓶、注射器、注射笔或药盒，其包括至少一剂如权利要求90或91所述的组合物。
93.一种治疗有需要的受试者的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的如权利要求1至89中任一项或组合所述的ACC或如权利要求90或91所述的组合物。
94.如权利要求93所述的方法，其中所述受试者已被鉴别或诊断为患有癌症。
95.如权利要求94所述的方法，其中所述癌症是淋巴瘤、实体瘤、血液肿瘤、肉瘤、骨肉瘤、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、黑色素瘤、横纹肌肉瘤、尤因肉瘤、骨肉瘤、B细胞肿瘤、多发性骨髓瘤、B细胞淋巴瘤、B细胞非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、骨髓增生异常综合征(MDS)、皮肤T细胞淋巴瘤、视网膜母细胞瘤、膀胱癌、胃癌、尿路上皮癌、肺癌、结肠癌、肾细胞癌、胃和食管癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、鳞状细胞头颈癌、子宫内膜癌、宫颈癌、肝癌或肝细胞癌。
96.如权利要求95所述的方法，其中所述淋巴瘤是伯基特淋巴瘤。
97.一种核酸，其编码包含如权利要求1至89中任一项或组合所述的ACC的所述CP1和CM1的多肽。
98.如权利要求97所述的核酸，其中所述多肽还包含如权利要求1至16或权利要求23至88中任一项或组合所述的DD1。
99.一种核酸，其编码包含如权利要求1至89中任一项或组合所述的ACC的所述CP2和CM2的多肽。
100.如权利要求99所述的核酸，其中所述多肽还包含如权利要求1至16或权利要求23至88中任一项或组合所述的DD2。
101.一种载体，其包含如权利要求97至100中任一项或组合所述的核酸。
102.如权利要求101所述的载体，其中所述载体是表达载体。
103.一种细胞，其包含如权利要求96至99中任一项或组合所述的核酸或如权利要求101或102所述的载体。
104.一种核酸对，所述核酸一起编码包含如权利要求1至89中任一项或组合所述的第一单体构建体的所述CP1和CM1的多肽和包含所述第二单体构建体的所述CP2和CM2的多肽。
105.一种载体对，所述载体一起包含如权利要求104所述的核酸对。
106.如权利要求105所述的载体对，其中所述载体对是表达载体对。
107.一种细胞，其包含如权利要求102所述的核酸对或如权利要求105或106所述的载体对。
108.一种产生ACC的方法，其包括：
在液体培养基中在足以产生所述ACC的条件下培养如权利要求103或107所述的细胞；以及
从所述细胞或所述液体培养基回收所述ACC。
109.如权利要求108所述的方法，其还包括：
分离从所述细胞或所述液体培养基回收的所述ACC。
110.如权利要求109所述的方法，其还包括：
将分离的ACC配制成药物组合物。
111.一种ACC，其通过如权利要求108所述的方法产生。
112.一种组合物，其包含如权利要求111所述的ACC。
113.如权利要求112所述的组合物，其中所述组合物是药物组合物。
114.一种容器、小瓶、注射器、注射笔或药盒，其包括至少一剂如权利要求112或113所述的组合物。
115.一种可活化细胞因子构建体(ACC)，其包含第一单体构建体和第二单体构建体，其中：
(a)所述第一单体构建体包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、第一可裂解部分(CM1)和第一二聚化结构域(DD1)；
(b)所述第二单体构建体包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)、第二可裂解部分(CM2)和第二二聚化结构域(DD2)；
(c)所述第一单体构建体是在N端至C端方向上包含所述CP1、所述CM1和所述DD1的多肽，进一步其中：
(i)所述第一单体构建体及所述第二单体构建体中的每一种包含有包含不超过18个氨基酸的连接区；并且
(ii)所述CP1是成熟干扰素；
(d)进一步其中：
(i)所述第二单体构建体与所述第一单体构建体相同，
(ii)所述第一单体构建体和所述第二单体构建体通过至少一个二硫键彼此共价结合，并且
(iii)所述DD1和所述DD2是一对人类IgG Fc结构域；
(e)所述DD1和所述DD2彼此结合，从而形成所述第一单体构建体和所述第二单体构建体的二聚体；并且
(f)所述ACC的特征在于具有与相应对照干扰素相比降低的干扰素活性水平。
116.如权利要求115所述的ACC，其中所述CP1是成熟人类干扰素α。
117.如权利要求115至116中任一项或组合所述的ACC，其中所述成熟干扰素是成熟干扰素α-2b。
118.如权利要求115至117中任一项或组合所述的ACC，其中所述成熟干扰素是野生型成熟干扰素α-2b的截短形式。
119.如权利要求115至117中任一项或组合所述的ACC，其中所述成熟干扰素包含与SEQID NO:1具有至少95％同一性的序列。
120.如权利要求115至117中任一项或组合所述的ACC，其中所述成熟干扰素α包含SEQID NO:1的序列。
121.如权利要求115至120中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和所述CM2彼此直接邻接，所述CM1和所述DD1彼此直接邻接，并且所述CM1和所述CM2各自包含不超过710个氨基酸，任选不超过7个氨基酸。
122.如权利要求115至121中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和所述CM2各自独立地充当尿激酶(uPa)和/或基质金属蛋白酶(MMP)的底物。
123.如权利要求115至122中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和所述CM2各自独立地充当尿激酶(uPa)和/或MMP-14的底物。
124.如权利要求115至123中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和所述CM2各自包含与SEQ ID NO:100具有至少85％同一性的序列。
125.如权利要求115至124中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1和所述CM2各自包含选自由SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:68和SEQ ID NO:100组成的组的序列。
126.如权利要求115至125中任一项或组合所述的ACC，其中所述DD1和所述DD2是一对人类IgG1 Fc结构域或一对人类IgG4 Fc结构域。
127.如权利要求126所述的ACC，其中所述DD1和所述DD2是一对在N端截短至如EU编号所编号的半胱氨酸226的人类IgG1 Fc结构域或一对在N端截短至如EU编号所编号的半胱氨酸226的人类IgG4 Fc结构域。
128.如权利要求126或127所述的ACC，其中所述DD1和所述DD2是一对包含如EU编号所编号的S228P突变的人类IgG4 Fc结构域。
129.如权利要求115至128中任一项或组合所述的ACC，其中所述DD1和所述DD2各自包含与SEQ ID NO:3具有至少95％同一性的序列。
130.如权利要求115至129中任一项或组合所述的ACC，其中所述DD1和所述DD2各自包含SEQ ID NO:3的序列。
131.如权利要求115至130中任一项或组合所述的ACC，其中所述第一单体构建体和所述第二单体构建体通过至少两个二硫键彼此共价结合。
132.如权利要求115至131中任一项或组合所述的ACC，其中所述第一单体构建体和所述第二单体构建体通过至少三个二硫键彼此共价结合。
133.如权利要求115至132中任一项或组合所述的ACC，其中所述第一单体构建体和所述第二单体构建体通过至少四个二硫键彼此共价结合。
134.如权利要求115至133中任一项或组合所述的ACC，其中所述第一单体构建体还包含直接邻接所述CM1的N端的信号序列。
135.如权利要求134所述的ACC，其中所述信号序列包含与SEQ ID NO:345具有至少95％同一性的序列。
136.如权利要求134所述的ACC，其中所述信号序列包含SEQ IDNO:345的序列。
137.如权利要求115至136中任一项或组合所述的ACC，其中所述第一单体构建体和所述第二单体构建体中的每一种包含有包含不超过12个氨基酸的连接区。
138.如权利要求137所述的ACC，其中所述连接区包含7至12个氨基酸。
139.如权利要求137所述的ACC，其中所述连接区包含7个氨基酸。
140.如权利要求115至139中任一项或组合所述的ACC，其中所述ACC的特征在于与相应对照干扰素相比，干扰素活性降低至少500倍。
141.如权利要求115至140中任一项或组合所述的ACC，其中所述CP1是干扰素α并且所述对照干扰素是重组干扰素α。
142.如权利要求115至140中任一项或组合所述的ACC，其中所述CP1是干扰素α-2b并且所述对照干扰素是聚乙二醇化干扰素α-2b。
143.如权利要求115至142中任一项或组合所述的ACC，其中所述干扰素活性是淋巴瘤细胞中的抗增殖活性。
144.如权利要求115至142中任一项或组合所述的ACC，其中所述干扰素活性是在干扰素反应性HEK293细胞中诱导分泌的胚胎碱性磷酸酶产生。
145.如权利要求115至144中任一项所述的ACC，其中所述ACC的特征还在于在暴露于CM1充当底物的所述蛋白酶后产生裂解产物，其中所述对照干扰素的所述干扰素活性与所述裂解产物的比率小于约2，并且其中所述对照干扰素是相应重组野生型干扰素或相应聚乙二醇化干扰素。
146.如权利要求145所述的ACC，其中所述裂解产物的EC50与所述相应重组野生型干扰素的EC50大致相同。
147.如权利要求115所述的ACC，其中所述第一单体构建体和所述第二单体构建体各自包含与SEQ ID NO:313具有至少95％同一性的序列。
148.如权利要求147所述的ACC，其中所述ACC的特征在于与野生型干扰素α-2b相比，干扰素活性降低至少500倍，并且其中所述ACC的特征还在于在暴露于uPA后产生裂解产物，其中所述裂解产物具有与野生型干扰素α-2b大致相同的干扰素活性，其中干扰素活性是在淋巴瘤细胞中的抗增殖测定或在干扰素反应性HEK293细胞中诱导分泌的胚胎碱性磷酸酶产生的测定中测量的。
149.如权利要求147所述的ACC，其中与野生型干扰素α-2b或聚乙二醇化干扰素α-2b相比，所述ACC在体内展现出更低的毒性。
150.一种可活化细胞因子构建体(ACC)，其包含第一单体构建体和第二单体构建体，其中：
(a)所述第一单体构建体包含第一成熟细胞因子蛋白(CP1)、第一可裂解部分(CM1)和第一二聚化结构域(DD1)；
(b)所述第二单体构建体包含第二成熟细胞因子蛋白(CP2)、第二可裂解部分(CM2)和第二二聚化结构域(DD2)；
(c)所述第一单体构建体是在N端至C端方向上包含所述CP1、所述CM1和所述DD1的多肽，进一步其中：
(i)所述CP1和所述CM1彼此直接邻接，
(ii)所述CM1和所述DD1彼此直接邻接，
(iii)所述CP1包含与SEQ ID NO:1具有至少85％同一性的序列，
(iv)所述CM1包含与SEQ ID:100具有至少85％同一性的序列，(d)进一步其中：
(i)所述第二单体构建体与所述第一单体构建体相同，
(ii)所述第一单体构建体和所述第二单体构建体通过至少一个二硫键彼此共价结合，并且
(iii)所述DD1和DD2是一对人类IgG4 Fc结构域；
(e)所述DD1和所述DD2彼此结合，从而形成所述第一单体构建体和所述第二单体构建体的二聚体；并且
(f)所述ACC的特征在于具有与聚乙二醇化干扰素α-2b的干扰素α活性相比降低的所述干扰素α活性的水平。
151.一种组合物，其包含如权利要求115至150中任一项或组合所述的ACC。
152.如权利要求151所述的组合物，其中所述组合物是药物组合物。
153.一种容器、小瓶、注射器、注射笔或药盒，其包括至少一剂如权利要求151或152所述的组合物。
154.一种治疗有需要的受试者的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的如权利要求115至150中任一项或组合所述的ACC或如权利要求151或152所述的组合物。
155.如权利要求154所述的方法，其中所述受试者已被鉴别或诊断为患有癌症。
156.一种核酸，其编码包含如权利要求115至150中任一项或组合所述的ACC的所述第一单体的多肽。
157.一种载体，其包含如权利要求156所述的核酸。
158.如权利要求157所述的载体，其中所述载体是表达载体。
159.一种哺乳动物细胞，其包含如权利要求156所述的核酸或如权利要求157或158所述的载体。
160.如权利要求159所述的哺乳动物细胞，其中所述哺乳动物细胞是HEK293细胞或CHO细胞。
161.一种制造ACC的方法，所述方法包括：
a.在如权利要求159或160所述的哺乳动物细胞中表达所述ACC；以及
b.纯化所表达的ACC。
162.如权利要求115至150中任一项或组合所述的ACC，其中所述CM1充当在肿瘤组织中过表达的蛋白酶的底物。
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