CN115644351B - 提高工业酵母发酵活性的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种提高酵母发酵活性的方法，包括如下步骤：1)将酵母分散于液体培养基中，培养，得到细胞菌液；2)将步骤1)得到的细胞菌液与鹰嘴豆肽混合。本发明提高酵母发酵活性的方法不但增强了工业酵母的发酵活性，其成型产品也拥有了较同类产品更优良、更绿色健康的营养价值，制作的馒头硬度与咀嚼性更好，具有广泛的市场潜力。
Description
技术领域
本发明专利涉及食品加工技术技术领域，尤其是指一种利用鹰嘴豆肽提高工业酵母发酵活性的方法。
背景技术
酵母作为预烘焙产品中最重要的微生物发酵剂和蓬松剂，其活力与抗环境胁迫能力对于其成品品质具有重大意义，因环境胁迫作用导致酵母活性下降和产气能力不足是导致冷冻发酵面团品质劣变最重要的因素之一。因市场需要，冷冻生胚往往需要通过冷链运输至深加工地点，而途中的冷冻条件成为了酵母面临的环境胁迫，其对酵母细胞产生的破坏作用主要分为三个方面：1.冷冻导致可冻结水结晶对酵母细胞造成机械损伤；2.水冻结后，体系环境渗透压升高，离子强度和氧化反应均大大增强；3.冷冻过程中，酵母会释放还原剂，该物质会通过减少面筋二硫键来削弱冷冻生胚结构，进一步影响产品品质。
因此，研发一种能有效提高酵母发酵活性的方法显得很有必要。
发明内容
鹰嘴豆(Cicer arietinum L.)是豆科鹰嘴豆属植物，又名桃尔豆、鸡豌豆等，起源于西亚和地中海沿岸地区，因抗旱、耐旱能力较强，在我国新疆地区的分布较为广泛。鹰嘴豆含有丰富的蛋白质、维生素、碳水化合物、矿物质、膳食纤维等，营养丰富。此外，鹰嘴豆集食用与药用于一体，具有抗骨质疏松、降血糖、调节胆固醇和抗氧化等生理作用，保健价值较高，极具发展潜力。
鹰嘴豆肽的研发对于鹰嘴豆肽在烘焙产品中的应用具有重要意义。本发明拟通过这种新型添加剂改良上述情况对酵母细胞产生的不良影响，鹰嘴豆肽能有效提高冷冻循环中酵母的活力，提高其胞内成分含量，改善酵母细胞损伤情况，增强了预发酵产品的发酵产气能力。
本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题之一，由此，在本发明的第一方面，本发明提供一种鹰嘴豆肽在提高酵母发酵活性中的应用。
在本发明的第二方面，本发明提供一种提高酵母发酵活性的方法，包括如下步骤：
1)将酵母分散于液体培养基中，培养，得到细胞菌液；
2)将步骤1)得到的细胞菌液与鹰嘴豆肽混合。
在本发明的一个或多个实施例中，所述步骤1)中，控制酵母的浓度为0.1～0.3g/mL。
在本发明的一个或多个实施例中，所述步骤2)中，控制所述鹰嘴豆肽与细胞菌液的质量体积比为2～5％。
在本发明的一个或多个实施例中，所述步骤2)中，鹰嘴豆肽的制备方法包括如下步骤：
①将鹰嘴豆粉与水混合，制得鹰嘴豆粉混合液；
②调节鹰嘴豆粉混合液的pH值为8～9；
③向步骤②得到的鹰嘴豆粉混合液中加入复合蛋白酶进行酶解处理，制得酶解液；
④将步骤③得到的酶解液加热使复合蛋白酶失活，制得水解液；
⑤将步骤④得到的水解液经离心后取上清液，用超滤膜进行超滤，制得鹰嘴豆多肽液；
⑥将步骤⑤得到的鹰嘴豆多肽液进行冷冻干燥处理得到鹰嘴豆肽。
在本发明的一个或多个实施例中，所述步骤①中，鹰嘴豆粉与水的质量比为1：10～20；
优选地，所述步骤③中，所述复合蛋白酶为风味蛋白酶和碱性蛋白酶；其中，风味蛋白酶质量为鹰嘴豆粉的质量的0.2～0.6％，碱性蛋白酶质量为鹰嘴豆粉质量的3.0～4.0％；酶解处理的温度为50～60℃，处理时间为1～3h；
优选地，所述步骤④中，控制加热温度为80～90℃，加热时间为10～15min；
优选地，所述步骤⑤中，所述超滤膜为3000Da超滤膜。
在本发明的第三方面，本发明提供一种高活性酵母，所述高活性酵母包括酵母和鹰嘴豆肽。
在本发明的一个或多个实施例中，所述高活性酵母是由在本发明的第二方面所述的方法制备得到的。
在本发明的第四方面，本发明提供一种在本发明的第三方面所述的高活性酵母在制备冷冻生胚中的应用。
在本发明的第五方面，本发明提供一种冷冻生胚的发酵方法，包括：加入面包粉、精制盐、水、在本发明的第三方面所述的高活性酵母，揉面。
本发明具有如下优点：
鹰嘴豆多肽含有较高的谷氨酸、精氨酸和天冬氨酸，具有抗氧化、提高免疫力、降血脂缓解失眠等功效。鹰嘴豆多肽在人体摄入后，多肽在肠道被肠道微生物利用进而产短链脂肪酸。短链脂肪酸是肠道pH值的重要调节剂。它有助于保持环境的稳定。它有助于使肠道保持足够的酸性，以使肠道内有益微生物得以繁衍生息并存活，可以阻止机会性细菌进入并黏附。本发明不但增强了工业酵母的发酵活性，其成型产品也拥有了较同类产品更优良、更绿色健康的营养价值，制作的馒头硬度与咀嚼性更好，具有广泛的市场潜力。
附图说明
图1为本发明各实施例制配的酵母菌生长情况的结果图；
图2为本发明各实施例制配的酵母菌冻融4次细胞活力结果图；图中不同字母表示差异有统计学意义(P＜0.05)；
图3本发明各实施例制配的酵母菌冻融4次胞内海藻糖含量结果图；
图4本发明各实施例制配的酵母菌冻融4次胞内甘油含量结果图；
图5本发明各实施例制配的酵母菌冻融4次的细胞微观结构结果图；
图6本发明各实施例制配的冷冻生胚冻融2次的发酵产气结果图；
图7本发明各实施例制配的冷冻生胚冻融4次的成品馒头硬度结果图；
图8本发明各实施例制配的冷冻生胚冻融4次的成品馒头弹性结果图；
图9本发明各实施例制配的冷冻生胚冻融4次的成品馒头咀嚼性结果图。
具体实施方式
以下结合具体实施例和附图对本发明作进一步说明，但下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。
以下实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行，使用的方法如无特别说明，均为本领域公知的常规方法，使用的耗材和试剂如无特别说明，均为市场购得。除非另有说明，本文中所用的专业与科学术语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法或材料也可应用于本发明中。实施例中使用的干酵母购自安琪酵母。
下述实施例中所使用的鹰嘴豆多肽通过复合酶解法制备得到，具体包括如下步骤：
(1)将鹰嘴豆粉与蒸馏水按质量比1：10混合，制得鹰嘴豆粉混合液。
(2)用0.5M NaOH调节鹰嘴豆粉混合液的pH值为8.5。
(3)向鹰嘴豆粉混合液中加入复合蛋白酶进行酶解处理，制得酶解液。所述的复合蛋白酶由风味蛋白酶和碱性蛋白酶组成。其中，风味蛋白酶加酶量为鹰嘴豆粉质量的0.5％，碱性蛋白酶的加酶量为鹰嘴豆粉质量的3.5％。酶解处理的温度为50℃，处理时间为2h。风味蛋白酶(F861436)购自上海麦克林生化科技有限公司，规格为20000u/g；碱性蛋白酶(P824138)购自上海麦克林生化科技有限公司，规格为200000u/g。
(4)将所制得的酶解液加热至90℃，加热时间为10min使复合蛋白酶失活，制得水解液。
(5)水解液经离心后取上清液，用3000Da超滤膜进行超滤，制得鹰嘴豆多肽液。
(6)将鹰嘴豆肽液进行低温冷冻干燥处理制得鹰嘴豆多肽。
一种利用鹰嘴豆肽提高工业酵母发酵活性的方法，包括如下步骤：
(1)酵母来源：取商用干酵母进行活化，随后进行划线分离出单菌落，得到酵母菌液；
(2)提高活性处理：取(1)中得到的酵母菌液进行二次活化，加入其含量3％～10％的鹰嘴豆肽，得到添加鹰嘴豆肽的酵母菌液；
(3)冻融循环：将(2)中处理的酵母菌液放入-18℃—-20℃冰箱冷冻36h，然后在4℃冰箱解冻12h，2天为一次循环，共循环4次。
所述(1)活化温度为25～30℃，活化时间为12～48h。
所述(2)向菌液加入鹰嘴豆肽后需进行涡旋处理，使其充分溶解。
实施例1
一种利用鹰嘴豆肽提高工业酵母发酵活性的方法，包括如下步骤：
(1)前期准备：取商用干酵母进行活化，随后进行划线分离出单菌落，得到酵母菌液，取酵母菌液培养至对数生长期，备用，控制酵母的浓度为0.2g/mL；(2)提高活性处理：取(1)中活化后的酵母菌液进行二次活化，加入鹰嘴豆肽，加入量为酵母菌液的3％(W/V)，得到添加鹰嘴豆肽的酵母菌液；
(3)生胚制取：生胚配方由250g面粉5g精制盐，120g无菌水组成，加入(2)中得到的添加鹰嘴豆肽的酵母菌液2mL后进行8min揉面操作，取出后将面团切割为315g，静置10min，备用；
(4)冻融循环：菌液：将(2)中得到的添加鹰嘴豆肽的酵母菌液放入-18℃—-20℃冰箱冷冻36h，然后在4℃冰箱解冻12h，2天为一次循环，共循环4次；冷冻生胚：将(3)中处理后的生胚放入-18℃-20℃冰箱冷冻36h，然后在4℃冰箱解冻12h，2天为一次循环，共循环2次；
监测酵母菌液的生长曲线，冻融循环后的细胞活力、胞内成分、微观结构、冷冻生胚发酵产气情况以及成品馒头各项质构变化情况，评估鹰嘴豆肽对冻融酵母、冷冻生胚和成品馒头的改善情况。
实施例2
一种利用鹰嘴豆肽提高工业酵母发酵活性的方法，包括如下步骤：
(1)前期准备：取商用干酵母进行活化，随后进行划线分离出单菌落，得到酵母菌液，取酵母菌液培养至对数生长期，备用，控制酵母的浓度为0.2g/mL；(2)提高活性处理：取(1)中活化后的酵母菌液进行二次活化，加入鹰嘴豆肽，加入量为酵母菌液的5％(W/V)，得到添加鹰嘴豆肽的酵母菌液；
(3)生胚制取：生胚配方由250g面粉5g精制盐，120g无菌水组成，加入(2)中得到的添加鹰嘴豆肽的酵母菌液后进行8min揉面操作，取出后将面团切割为315g，静置10min，备用；
(4)冻融循环：菌液：将(2)中得到的添加鹰嘴豆肽的酵母菌液放入-18℃—-20℃冰箱冷冻36h，然后在4℃冰箱解冻12h，2天为一次循环，共循环4次；冷冻生胚：将(3)中处理后的生胚放入-18℃—-20℃冰箱冷冻36h，然后在4℃冰箱解冻12h，2天为一次循环，共循环2次；
监测酵母菌液的生长曲线，冻融循环后的细胞活力、胞内成分、微观结构、冷冻生胚发酵产气情况以及成品馒头各项质构变化情况，评估鹰嘴豆肽对冻融酵母、冷冻生胚和成品馒头的改善情况。
实施例3
一种利用鹰嘴豆肽提高工业酵母发酵活性的方法，包括如下步骤：
(1)前期准备：取商用干酵母进行活化，随后进行划线分离出单菌落，得到酵母菌液，取酵母菌液培养至对数生长期，备用，控制酵母的浓度为0.2g/mL；(2)提高活性处理：取(1)中活化后的酵母菌液进行二次活化，加入鹰嘴豆肽，加入量为酵母菌液的10％(W/V)，得到添加鹰嘴豆肽的酵母菌液；
(3)生胚制取：配方由250g面粉5g精制盐，120g无菌水组成，加入(2)中的得到的添加鹰嘴豆肽的酵母菌液后进行8min揉面操作，取出后将面团切割为315g，静置10min，备用；
(4)冻融循环：菌液：将(2)中得到的添加鹰嘴豆肽的酵母菌液放入-18℃—-20℃冰箱冷冻36h，然后在4℃冰箱解冻12h，2天为一次循环，共循环4次；冷冻生胚：将(3)中处理的生胚放入-18℃—-20℃冰箱冷冻36h，然后在4℃冰箱解冻12h，2天为一次循环，共循环2次；
监测酵母菌液的生长曲线，冻融循环后的细胞活力、胞内成分、微观结构、冷冻生胚发酵产气情况以及成品馒头各项质构变化情况，评估鹰嘴豆肽对冻融酵母、冷冻生胚和成品馒头的改善情况。
对比例
本对比例为未添加鹰嘴豆肽处理酵母菌液和冷冻生胚的方法，可作为实施例的空白组，明确本发明真实有效，操作步骤为：
(1)前期准备：取商用干酵母进行活化，随后进行划线分离出单菌落，得到酵母菌液，取酵母菌液培养至对数生长期，备用，控制酵母的浓度为0.2g/mL；
(2)处理：取(1)中活化后的酵母菌液进行二次活化，不经处理，得到未添加鹰嘴豆肽的酵母菌液；
(3)冷冻生胚制取：配方由250g面粉5g精制盐，120g无菌水组成，加入(2)中的酵母菌液后进行8min揉面操作，取出后将面团切割为315g，静置10min，备用；
(4)冻融循环：菌液：将(2)中得到的酵母菌液放入-18℃—-20℃冰箱冷冻36h，然后在4℃冰箱解冻12h，2天为一次循环，共循环4次；冷冻生胚：将(3)中得到的生胚放入-18℃—-20℃冰箱冷冻36h，然后在4℃冰箱解冻12h，2天为一次循环，共循环2次；
监测酵母菌液的生长曲线，冻融循环后的细胞活力、胞内成分、微观结构、冷冻生胚发酵产气情况以及成品馒头各项质构变化情况，评估鹰嘴豆肽对冻融酵母、冷冻生胚和成品馒头的改善情况。
对实施例1～3和对比例所述冻融循环过程中的菌液、冷冻生胚以及成品馒头进行以下检测。
1.生长曲线
将实施例1～4中步骤(4)冻融循环4次后的酵母菌液分别分散于50mLYPD液体培养基中，置于恒温摇床30℃、200r/min培养12h；取菌液于96孔板在酶标仪中进行吸光度测定，空白培养基作为参比溶液，测量波长为600nm，测定周期为12h，间隔1小时。结果如图1所示(实施例1对应3％CP，实施例2对应5％CP，实施例3对应10％CP，对比例对应Blank)，图1为鹰嘴豆肽对酵母生长曲线的影响，采用曲线拟合以便直观的进行观察，由图可知，鹰嘴豆肽延长了酵母的迟滞期。具体地说，未处理组达到OD600值0.8需要8h，而3％组达到相同OD600值需要9h，5％和10％组则需要10h。随着鹰嘴豆肽浓度的增加，酵母生长速率降低，这可能与鹰嘴豆肽处理使酵母细胞生长代谢速度减缓有关，随着培养时间延长至12h，实验组酵母细胞仍在增值。有试验表明，酵母在迟滞期发酵不活跃，但是在此期间细胞内会积累甘油、海藻糖等保护性代谢物。
2.细胞活力
分别取实施例1～4中步骤(4)冻融循环4次后的酵母菌液100μL，稀释一倍，用100μL台盼蓝染液进行染色(4～5min)，用胶头滴管滴1滴于于光学显微镜100倍观察，计数活细胞的数量。酵母细胞存活率如图2所示(实施例1对应3％CP，实施例2对应5％CP，实施例3对应10％CP，对比例对应Blank)，施用鹰嘴豆肽的实验组在经2、4次冻融处理后，其酵母细胞存活率均高于未处理组。试验证明，鹰嘴豆肽在一定程度上能延缓细胞膜功能的退化，使其排异功能保持正常水平。
3.胞内成分
(1)海藻糖含量：采用硫酸蒽酮法测定酵母胞内海藻糖含量。分别将实施例1～4中步骤(4)冻融循环4次后的酵母菌液加入10mL三氯乙酸溶液(0.5mol/L)中，置于冰水浴中提取30min，共提取3次；上清稀释后，取菌液200μL加水至2.00mL，摇匀，每管分别加入0.2％蒽酮-硫酸试剂8.00mL，在沸水浴中加热2分钟(从水浴中重新沸腾的时间开始)，取出，用自来水冷却，用紫外分光光度计在620nm处测定吸光度。
(2)甘油含量：分别取实施例1～4中步骤(4)冻融循环4次后的酵母菌液，在1mL菌液样品中加入1mL 0.015mol/L高碘酸钠溶液，反应10min后，将溶液与2mL 0.1％ L-鼠李糖混合，再加入4mLNash试剂，于53℃水浴中将混合物加热15min，用分光光度计在412nm处测定吸光度。
观察胞内成分含量如图3和图4所示(实施例1对应3％CP，实施例2对应5％CP，实施例3对应10％CP，对比例对应Blank)，由图可知，鹰嘴豆肽实验组甘油含量与海藻糖含量均高于未处理组，甘油等代谢物的积累是酵母细胞对环境胁迫的响应，有利于细胞在不良环境中生存，当酵母细胞受到冷冻胁迫后，甘油和海藻糖是最典型且积累量最多的两种代谢物，与其他积累代谢物往往不在一个数量级，因此本发明选用这两种代谢物测定含量。
4.微观结构检测
分别取实施例1～4中步骤(4)冻融循环4次后的酵母菌液于4750rpm离心3min，用预冷磷酸缓冲液(pH7.2)换洗三次，然后用2.5％的戊二醛磷酸缓冲液(0.1mol/L，pH7.1)在4℃冰箱重悬2h。然后，继续用预冷磷酸缓冲液(pH7.2)换洗三次，随后依次用浓度为30％、50％、70％、80％、90％、100％的乙醇溶液进行脱水15min，之后样品在冻干机冻干48h；干燥后的酵母细胞样品喷金处理，最后用扫描电镜在加速电压20KV，放大5000倍观察酵母细胞微观结构。
扫描电镜微观结构如图5所示(实施例1对应3％CP，实施例2对应5％CP，实施例3对应10％CP，对比例对应Blank)，由图可知，经过冻融处理后的酵母细胞观察到了凹陷的表面，且鹰嘴豆肽处理组酵母细胞能观察到些许鹰嘴豆肽吸附层，这也有利用细胞膜的保护，该吸附层也说明了该物质与酵母细胞之间可能存在静电相互作用。酵母的发酵和产气对其最终产品至关重要，直接影响最终产品的感官和口感品质。
5.发酵产气检测
使用F4流变发酵仪测量冷冻生胚CO2产气量。将上述分别取实施例1～4中步骤(4)的冷冻生胚经过0和2次冻融循环后放入流变发酵仪腔体中，于38℃下发酵3.5h。测定其发酵过程中CO2产气量。
结果如图6所示(实施例1对应3％CP，实施例2对应5％CP，实施例3对应10％CP，对比例对应Blank)，由图可知，当冷冻生胚尚未进行冻融循环时，未经处理组比鹰嘴豆肽处理组产生了更多的CO2气体，产生这种现象的原因可能是产生CO2气体的量与酵母的生长周期有关，鹰嘴豆肽处理组在冻融循环过程中保持了冷冻生胚的产气能力和气体保留性能，并保护了面筋网络和酵母细胞免受冷冻和冰晶重结晶的损害。
6.馒头质构检测
将上述分别取实施例1～4中步骤(4)的冷冻生胚经过0、2、4次冻融循环后放入温度38℃，相对湿度为85％的醒发箱中发酵30min，之后置于烧开的蒸锅上蒸制20min，停火2min，得到成品馒头。待馒头温度下降至室温后，沿同一方向切成厚度为10mm的均匀薄片，取中间部分进行质构测定。采用TA-XTplus物性测试仪对冷冻面团馒头进行质构测定，选用二次咀嚼实验，探头采用P36R压盘式探头。
质构检测结果如图7、8、9所示，由图可知，馒头的硬度与咀嚼性随冻融次数的增加均呈上升趋势，弹性反之。硬度的增加和弹性的降低表明馒头柔软度和筋性下降，说明随着冻融次数增加，馒头的质构品质有所降低，添加鹰嘴豆肽的馒头质构特性虽然也有所下降，但在相同冻融次数下，实验组的冷冻生胚馒头的质构特性明显优于空白组。说明鹰嘴豆肽可以提高馒头质构特性，这可能是因为鹰嘴豆肽可以提高酵母的发酵活性，强化生胚持水性，使面团内水分分布更均匀，从而使得冷冻面团质地细腻且柔软。
本发明对各个实施例和对比例的0～4次冻融循环前后酵母监测了细胞活力、胞内成分、微观结构、冷冻生胚的发酵产气以及成品馒头的质构检测，如图7～9所示，与空白对照组相比，本发明可以有效缓解酵母在冻融循环过程中面对的活力与发酵能力降低的情况，有效提高了工业酵母的发酵活性。酵母细胞的耐冷冻能力有限，长期冻藏最终会导致酵母细胞的损伤及死亡。酵母细胞处于冷冻和冻藏条件下，经受着一系列如渗透压、温度和氧化胁迫等环境胁迫，这些胁迫在一定程度上能够诱导酵母细胞内部的生物代谢网络发生一系列动态变化，包括基因、蛋白和代谢物等的变化，以尽快适应变化的环境，保护细胞免受损伤。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种高活性酵母在制备冷冻生胚中的应用，其特征在于，所述高活性酵母包括酵母和鹰嘴豆肽；所述高活性酵母的制备方法，包括如下步骤：
1)将酵母分散于液体培养基中，培养，得到细胞菌液；
2)将步骤1)得到的细胞菌液与鹰嘴豆肽混合；
所述步骤2)中，鹰嘴豆肽的制备方法包括如下步骤：
①将鹰嘴豆粉与水混合，制得鹰嘴豆粉混合液；
②调节鹰嘴豆粉混合液的pH值为8～9；
③向步骤②得到的鹰嘴豆粉混合液中加入复合蛋白酶进行酶解处理，制得酶解液；
④将步骤③得到的酶解液加热使复合蛋白酶失活，制得水解液；
⑤将步骤④得到的水解液经离心后取上清液，用超滤膜进行超滤，制得鹰嘴豆多肽液；
⑥将步骤⑤得到的鹰嘴豆多肽液进行冷冻干燥处理得到鹰嘴豆肽；
所述步骤2)中，控制所述鹰嘴豆肽与细胞菌液的质量体积比为3～10％。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤1)中，控制酵母的浓度为0.1～0.3g/mL。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤①中，鹰嘴豆粉与水的质量比为1：10～20。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤③中，所述复合蛋白酶为风味蛋白酶和碱性蛋白酶；其中，风味蛋白酶质量为鹰嘴豆粉的质量的0.2～0.6％，碱性蛋白酶质量为鹰嘴豆粉质量的3.0～4.0％；酶解处理的温度为50～60℃，处理时间为1～3h。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤④中，控制加热温度为80～90℃，加热时间为10～15min。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤⑤中，所述超滤膜为3000Da超滤膜。
7.一种冷冻生胚的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：加入面包粉、精制盐、水、高活性酵母，揉面；
所述高活性酵母包括酵母和鹰嘴豆肽；所述高活性酵母的制备方法，包括如下步骤：
1)将酵母分散于液体培养基中，培养，得到细胞菌液；
2)将步骤1)得到的细胞菌液与鹰嘴豆肽混合；
所述步骤2)中，鹰嘴豆肽的制备方法包括如下步骤：
①将鹰嘴豆粉与水混合，制得鹰嘴豆粉混合液；
②调节鹰嘴豆粉混合液的pH值为8～9；
③向步骤②得到的鹰嘴豆粉混合液中加入复合蛋白酶进行酶解处理，制得酶解液；
④将步骤③得到的酶解液加热使复合蛋白酶失活，制得水解液；
⑤将步骤④得到的水解液经离心后取上清液，用超滤膜进行超滤，制得鹰嘴豆多肽液；
⑥将步骤⑤得到的鹰嘴豆多肽液进行冷冻干燥处理得到鹰嘴豆肽。
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