CN114404344A - 酵母菌/大麦籽发酵产物,含其产品及其制备方法和应用 - Google Patents

酵母菌/大麦籽发酵产物,含其产品及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种酵母菌/大麦籽发酵产物,含其产品及其制备方法和应用。酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法包括如下步骤:将发酵底物的原料组合物经纤维素酶酶解,制得发酵底物;将酵母菌接种到发酵底物中,经发酵培养,灭菌,即可;其中,发酵底物的原料组合物包括大麦籽和水,大麦籽和水的质量比为1:(40~100)。本发明酵母菌/大麦籽发酵产物在制备过程中减少了资源浪费,对植物全成分进行提取,减少大麦籽中活性成分的流失,发酵条件温和,不采用任何化学试剂,降低生产成本,减少环境污染,具有理想的抗氧化功效,有效活性成分含量高,拓展大麦籽在皮肤外用剂领域的研究进展。

Description

酵母菌/大麦籽发酵产物,含其产品及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于发酵技术领域,尤其涉及一种酵母菌/大麦籽发酵产物,含其产品及其制备方法和应用。
背景技术
随着科技的飞速发展,人类物质生活条件改善,人口老龄化不断加剧,积极探索和开发抗氧化、抗衰老产品对减缓社会人口老龄化具有重要意义。在大量实验证据的基础上,现代衰老学说中自由基学说最受重视。该学说指出,机体细胞在正常代谢过程中产生较多的活性氧自由基。自由基在人体内处于不断产生和不断清除的动态平衡之中,当人体受到外源性因素以及内源性因素的影响时,自由基产生过多或者清除过少都有可能造成组织细胞的损伤,进而引起机体的衰老以及其它的疾病。因此,自由基消除能力成为评价抗衰化妆品优良的主要标准。因此,制备具有理想抗氧化活性的成分成为化妆品领域研究热点。
大麦籽(又称青稞)中含有膳食纤维、β-葡聚糖、酚类化合物、微生物E等活性成分,这些活性成分使大麦籽具有良好的抗癌、预防心血管疾病、降血压、降血脂、改善肠道菌群等作用,促使大麦籽在酿酒、保健品和食品领域被广泛应用。但鲜有将大麦籽作为原料用在化妆品领域的相关报道。
因此,本领域亟需研发一种可从大麦籽中提取出可用于皮肤外用剂的有效活性成分的制备工艺,使有效活性成分具有理想的美容功效,制备工艺简单等特性。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中大麦籽普遍用于保健品、食品和酿酒领域,在皮肤外用剂中的应用研究较少等缺陷,而提供一种酵母菌/大麦籽发酵产物,含其产品及其制备方法和应用。本发明酵母菌/大麦籽发酵产物在制备过程中减少了资源浪费,对植物全成分进行提取,减少大麦籽中活性成分的流失,发酵条件温和,不采用任何化学试剂,降低生产成本,减少环境污染,具有理想的抗氧化功效,有效活性成分含量高,拓展大麦籽在皮肤外用剂领域的研究进展。
本发明采用以下技术方案解决上述技术问题:
本发明提供一种酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法,其包括如下步骤:将发酵底物的原料组合物经纤维素酶酶解,制得发酵底物;将酵母菌接种到所述发酵底物中,经发酵培养,灭菌,即可;
其中,所述发酵底物的原料组合物包括大麦籽和水,所述大麦籽和所述水的质量比为1:(40~100)。
一些实施例中,所述酵母菌可包括酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae),较佳地包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YWY-1,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编为100101,保藏日期为2019年03月27日,保藏编号为CGMCC No.17452。
一些实施例中,所述酵母菌可按照本领域常规以酵母菌菌液的形式添加,所述酵母菌菌液中所述酵母菌的浓度可为106~109CFU/mL,较佳地为106~108CFU/mL。
一些实施例中,以所述发酵底物的原料组合物中的所述水的体积为基准,所述酵母菌的接种量可为5×104~5×107CFU/mL,较佳地为5×104~5×106CFU/mL。
一较佳实施方案中,所述酵母菌菌液的制备方法可为本领域常规,具体包括如下步骤:(1)所述酵母菌接种到YPD固体培养基中划线活化,培养,制得单菌落;(2)所述单菌落接种到YPD液体培养基中经培养,即可。
其中,步骤(1)中,所述培养的温度可为本领域该类操作常规的温度,较佳地为25~30℃,例如28℃。
其中,步骤(1)中,所述培养的时间可为本领域该类操作常规的时间,较佳地为30~50h,例如48h。
其中,步骤(2)中,所述培养的温度可为本领域该类操作常规的温度,较佳地为25~30℃,例如28℃。
其中,步骤(2)中,所述培养的时间可为本领域该类操作常规的时间,较佳地为36~72h,例如48h。
其中,步骤(2)中,所述培养可按照本领域常规在摇床上进行,所述摇床的转速可为150~250rpm,较佳地为180rpm。
一些实施例中,所述大麦籽的粒径可为本领域常规,较佳地为50~100目,更佳地为60~80目。将大麦籽粉碎更容易充分释放大麦籽中活性成分。
一些实施例中,所述大麦籽和所述水的质量比较佳地为1:(40~80)。
一些实施例中,所述酶解的温度可为本领域该类操作常规的温度,较佳地为40~60℃,更佳地为45~55℃。
一些实施例中,所述酶解的时间可为本领域该类操作常规的时间,较佳地为50~100min,更佳地为60~80min。
一些实施例中,以所述发酵底物的原料组合物中的所述水的质量为基准,所述纤维素酶占所述水的质量百分比可为0.1%~1%,较佳地为0.5%~0.8%,例如0.6%。
一些实施例中,所述接种的操作前还可进一步包括对所述发酵底物进行灭菌的操作。
其中,所述灭菌的条件和方法可为本领域该类操作常规的条件和方法,一般可为高温灭菌法。
当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的温度可为本领域该类操作常规的温度,较佳地为110~125℃,更佳地为115~121℃。
当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的时间可为本领域该类操作常规的时间,较佳地为20~60min,更佳地为20~40min,例如30min。
当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的压力可为本领域该类操作常规的压力,较佳地为0.1~0.14Mpa,更佳地为0.1~0.13MPa,例如0.12MPa。
其中,按照本领域常规,所述灭菌的操作后还可进一步包括冷却的操作,一般可为冷却至室温。
一些实施例中,所述发酵培养可为本领域常规使用的有氧发酵。
一些实施例中,所述发酵培养的条件和方法可为本领域常规,一般可在摇床上进行,所述摇床的转速可为150~300rpm,较佳地为150~250rpm,例如180rpm。
一些实施例中,所述发酵培养的时间可为24~96h,较佳地为24~72h,更佳地为24~50h。
一些实施例中,所述发酵培养的温度可为25~37℃,较佳地为25~32℃。
一些实施例中,所述灭菌的条件和方法可为本领域常规,一般可为高温灭菌法。
当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的温度可为本领域该类操作常规的温度,较佳地为110~125℃,更佳地为115~121℃。
当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的时间可为本领域该类操作常规的时间,较佳地为20~50min,更佳地为25~35min,例如30min。
当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的压力可为本领域该类操作常规的压力,较佳地为0.1~0.14MPa,更佳地为0.1~0.13MPa,例如0.12MPa。
一些实施例中,所述灭菌的操作后,还可进一步包括冷却和/或离心,收集上清液的操作。
其中,按照本领域常规,所述冷却可为冷却至室温。
其中,所述离心的转速可为本领域该类操作常规的转速,较佳地为3000~9000rpm,更佳地为4000~6000rpm,例如4800rpm。
其中,所述离心的半径可为本领域该类操作常规的半径,较佳地为8~15cm。
其中,所述离心的时间可为本领域该类操作常规的时间,较佳地为10~40min,更佳地为20~40min,例如30min。
其中,所述离心的操作后还可进一步包括二次灭菌和/或与防腐剂混合的操作。
所述二次灭菌的方法可为本领域常规使用的高温灭菌法。
当采用所述高温灭菌法进行所述二次灭菌时,所述二次灭菌的温度可为本领域该类操作常规的温度,较佳地为110~125℃,更佳地为115~121℃。
当采用所述高温灭菌法进行所述二次灭菌时,所述二次灭菌的时间可为本领域该类操作常规的时间,较佳地为20~40min,更佳地为25~35min。
当采用所述高温灭菌法进行所述二次灭菌时,所述二次灭菌的压力可为本领域该类操作常规的压力,较佳地为0.1~0.14MPa,更佳地为0.1~0.13MPa。
与所述防腐剂混合的过程中,所述混合的温度可为本领域该类操作常规的温度,较佳地为50~80℃,更佳地为70~80℃。
与所述防腐剂混合的过程中,所述防腐剂可按照本领域常规包括对羟基苯乙酮和/或1,2-己二醇。
当所述防腐剂包括所述对羟基苯乙酮和所述1,2-己二醇时,所述对羟基苯乙酮占所述离心后制得物料的质量百分数可为0.1%~0.5%,所述1,2-己二醇占所述离心后制得物料的质量百分数可为0.5%~1%;较佳地,所述对羟基苯乙酮占所述离心后制得物料的质量百分数为0.5%,所述1,2-己二醇占所述离心后制得物料的质量百分数为0.5%。
本发明还提供一种酵母菌/大麦籽发酵产物,其由如上所述的酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法制得。
本发明还提供一种如上所述的酵母菌/大麦籽发酵产物直接作为产品、作为添加剂或作为基底在制备皮肤外用剂中的应用。
一些实施例中,所述酵母菌/大麦籽发酵产物可作为所述皮肤外用剂中的抗氧化活性成分。
其中,所述抗氧化活性成分可为具有总抗氧化能力的抗氧化活性成分。
本发明还提供一种皮肤外用剂,其包括如上所述的酵母菌/大麦籽发酵产物。
一些实施例中,所述皮肤外用剂中还可进一步包括本领域常规使用的活性成分,一般可包括保湿活性成分、美白活性成分、抗炎活性成分、抗敏活性成分和抗氧化活性成分中至少一种。
一些实施例中,所述皮肤外用剂可按照本领域常规包括但不限于面膜、精华或爽肤水。
一些实施例中,所述酵母菌/大麦籽发酵产物占所述皮肤外用剂的质量百分比可为5%~99%,较佳地为60%~99%。
一些实施例中,所述室温一般指15~40℃。
在符合本领域常识的基础上,上述各优选条件,可任意组合,即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于:本发明酵母菌/大麦籽发酵产物在制备过程中减少资源浪费,对植物全成分进行提取,减少大麦籽中活性成分的流失,发酵条件温和,不采用任何化学试剂,降低生产成本,减少环境污染,具有理想的抗氧化功效,有效活性成分含量高,拓展大麦籽在皮肤外用剂领域的研究进展。
附图说明
本公开可以通过参考下文中结合附图所给出的描述而得到更好的理解。所述附图连同下面的详细说明一起包含在本说明书中并且形成本说明书的一部分,而且用来进一步举例说明本公开的优选实施例和解释本公开的原理和优点。其中:
图1为实施例1~3和对比例1~5制得产品的总糖含量对比图;
图2为实施例1~3和对比例1~5制得产品的总抗氧化能力对比图;
图3为实施例1~3和对比例1~5制得产品中蛋白质含量对比图;
图4为不同浓度实施例1~3和对比例1~5制得产品对人体皮肤成纤维细胞毒性结果对比图。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明,但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,按照常规方法和条件,或按照商品说明书选择。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例和对比例中,使用的酿酒酵母菌为酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)YWY-1,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编为100101,保藏日期为2019年03月27日,保藏编号为CGMCC No.17452。
下述实施例和对比例中,保藏编号为CGMCC No.17452酿酒酵母菌菌液的制备方法包括如下步骤:将保藏编号为CGMCC No.17452的酿酒酵母菌接种到YPD固体培养基中划线活化,在温度为28℃的培养箱中培养48h,制得单菌落;(2)将单菌落接种到YPD液体培养基中,在温度为28℃的摇床中培养48h,摇床的转速为200rpm,即可。
纤维素酶购自山东隆科特酶制剂有限公司。
实施例1
(1)将大麦籽粉碎成目数为80目的大麦籽粉末,称取大麦籽粉末5g与300mL去离子水混合,于温度为50℃的条件下进行纤维素酶酶解处理,纤维素酶的添加量为1.8g,酶解70min,酶解结束后于温度为121℃,压力为0.12MPa的高压灭菌锅中灭菌35min,灭菌后冷却至室温,得到发酵底物;
(2)在发酵底物中接种上述制得的酵母菌菌液进行有氧发酵培养;其中,酵母菌菌液中活菌数为107CFU/mL,酵母菌菌液的接种量为5%(以发酵底物的原料组合物中水的体积为基准,菌液总体积占发酵底物体积的百分比),酵母菌菌液的添加量均为15mL,在28℃恒温振荡器中培养48h,振荡器转速为180r/min;发酵培养结束后,在温度为121℃,压力为0.12MPa的高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌30min,再冷却至室温;将灭菌冷却后的发酵液离心30min,离心转速为4800r/min;离心结束后对上清液进行二次灭菌,二次灭菌的温度为121℃,二次灭菌的时间为30min,二次灭菌完成后,将温度降至75℃,添加防腐剂;以二次灭菌后制得物料的质量为基准,加入0.5%对羟基苯乙酮和0.5%的1,2-己二醇,制得酵母菌/大麦籽发酵产物。
实施例2
与实施例1相比,区别仅在于发酵时间为92h,其他条件参数同实施例1。
实施例3
与实施例1相比,区别仅在于发酵时间为24h,其他条件参数同实施例1。
对比例1
与实施例1相比,区别仅在于不进行发酵处理,为实施例1步骤(1)制得的发酵底物。
对比例2
与实施例1相比,区别仅在于大麦籽与水的质量比为1∶30,其他条件参数同实施例1。
对比例3
与实施例1相比,区别仅在于大麦籽与水的质量比为1∶200,其他条件参数同实施例1。
对比例4
与实施例1相比,区别仅在于发酵底物的制备工艺不同,具体包括如下步骤:将大麦籽粉碎成目数为80目的大麦籽粉末,称取大麦籽粉末5g与300mL去离子水混合,进行热水浸提,热水浸提的温度为90℃,热水浸提的时间为1h,再于温度为121℃,压力为0.12MPa的高压灭菌锅中灭菌35min,灭菌后冷却至室温,得到发酵底物;其他条件参数同实施例1,制得酵母菌/大麦籽发酵产物。
对比例5
与实施1相比,区别仅在于步骤1中不进行酶解处理,其他条件参数同实施例1,制得酵母菌/大麦籽发酵产物。
效果实施例1
采用北京索莱宝科技有限公司生产的货号为BC2715的总糖含量检测试剂盒测试实施例1~3和对比例1~5制得的产品中总糖含量,结果见表1。
表1
总糖含量(μg/mL)
实施例1 126.95±4.02
实施例2 154.78±4.19
实施例3 137.9±5.19
对比例1 99.91±3.37
对比例2 95.29±4.79
对比例3 89.58±3.55
对比例4 107.87±2.65
对比例5 95.95±3.3
从表1和图1的结果可看出,本发明实施例1~3制得的酵母菌/大麦籽发酵产物的总糖含量显著高于对比例1~5制得产品的总糖含量。图1中,*p<0.05,表示与实施例1相比有统计学差异,降低;**p<0.01,表示与实施例1相比有显著性统计学差异,显著降低;***p<0.001,表示与实施例1相比有极其显著性统计学差异,极显著降低。##p<0.01,表示与实施例1相比有显著性差异,显著升高;#p<0.05,表示与实施例1相比有统计学差异,升高。
效果实施例2
采用碧云天生物技术有限公司生产的货号为S0119的总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS法)测试实施例1~3和对比例1~5制得的产品的总抗氧化能力,结果见表2和图2。
表2
Figure BDA0003493444480000081
Figure BDA0003493444480000091
从表2和图2的结果可看出,本发明实施例1~3制得的酵母菌/大麦籽发酵产物的总抗氧化能力显著高于对比例1~5制得产品的总抗氧化能力。图2中,***p<0.001,表示与实施例1相比有极其显著性统计学差异,极其显著降低;**p<0.01,表示与实施例1相比有显著性统计学差异,显著降低;#p<0.05,表示与实施例1相比有统计学差异,升高;ns,表示与实施例1相比无显著性差异。
效果实施例3
采用北京百瑞极生物科技有限公司生产的货号为BN27109的BCA蛋白定量检测试剂盒测试实施例1~3和对比例1~5制得的产品中蛋白质含量,结果见表3和图3。
表3
总蛋白含量(μg/mL)
实施例1 148.67±3.73
实施例2 185.26±5.11
实施例3 122.71±3.64
对比例1 89.16±1.37
对比例2 102.67±2.5
对比例3 72.66±2.93
对比例4 110.91±2.45
对比例5 100.9±2.55
从表3和图3的结果可看出,本发明实施例1~3制得的酵母菌/大麦籽发酵产物中的活性成分总蛋白含量显著高于对比例1~5制得产品中的总蛋白含量。图3中,***p<0.001,表示与实施例1相比有极其显著性统计学差异,极其显著降低;###p<0.001,表示与实施例1相比有极其显著性差异,极其显著升高。
效果实施例4
人体皮肤成纤维细胞毒性实验
本实验采用人体皮肤成纤维细胞,来自中国科学细胞库,验证上述实施例1~3和对比例1~5制得产品的细胞毒性。
试剂:0.25%(含EDTA)胰蛋白酶的生产厂家为美国GIBCO公司;DMEM培养基的生产厂家为美国GIBCO公司;双抗的生产厂家为美国Corning公司;CCK-8的生产厂家为北京拜尔迪生物技术有限公司;胎牛血清的生产厂家为美国GIBCO公司;磷酸盐缓冲液的生产厂家为北京百瑞极生物科技有限公司。
设备:WJ-80A-Ⅱ型CO2恒温培养箱的厂家为上海圣科仪器设备有限公司;Sunrise酶标仪的厂家为帝肯贸易有限公司;TL80-2型医用离心机的厂家为江苏天力医疗器械有限公司;NUNC96孔细胞培养板的厂家为赛默飞世尔科技公司。
1、实验步骤:
分别将上述实施例1~3和对比例1~5制得的产品用无血清的DMEM培养基配置成体积百分数为5%、2.5%和1.25%的实验组待测液。人体皮肤成纤维细胞养于含10%胎牛血清以及1%双抗(1×105U/L的青霉素、100mg/L的链霉素)的DMEM培养基中。细胞生长于37℃、5%CO2饱和湿度的培养箱中,当细胞融合达到85%以上时,以0.05%胰酶消化对数生长期细胞,用含血清的DMEM终止消化反应。细胞计数板计数,将细胞悬液浓度调整到7×104个/mL,将细胞悬液按照每孔100μL的比例接种到96孔板上,37℃、5%CO2条件下孵育12h。去除旧培养液,用磷酸盐缓冲液清洗细胞两遍。实验组中每孔加入100μL上述配置的已过滤除菌的不同浓度的实验组待测液,每个待测液做6个复孔;对照组含有细胞,加入无血清的DMEM培养基;空白对照组无细胞,加入100μL的PBS。再于37℃、5%CO2条件下孵育24h。然后每孔加入10μL的CCK-8溶液,再孵育3h,在450nm波长下测定吸光度值,计算各组细胞存活率,结果见表4和图4。
细胞存活率的计算公式如下:
细胞存活率(%)=(A实验组-A空白对照组)/(A对照组-A空白对照组)×100%。
表4
Figure BDA0003493444480000111
从表4和图4的结果可看出,本发明实施例1~3制得的酵母菌/大麦籽发酵产物对人体皮肤成纤维细胞无明显毒性;而对比例1~5制得的产品与实施例1~3相比细胞存活率降低。图4中,ns表示与实施例1相比无统计学差异;**p<0.01,表示与实施例1相比有显著性统计学差异,显著降低;***p<0.001,表示与实施例1相比有极其显著性统计学差异,极其显著降低;#p<0.05,表示与实施例1相比有统计学差异,升高;##p<0.01,表示与实施例1相比有显著性差异,显著升高;###p<0.001,表示与实施例1相比有极其显著性差异,极其显著升高。
最后,还需要说明的是,在本发明中术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管上面已经通过本公开的具体实施例的描述对本公开进行了披露,但是,应该理解,本领域技术人员可在所附方案的精神和范围内设计对本公开的各种修改、改进或者等同物。这些修改、改进或者等同物也应当被认为包括在本公开所要求保护的范围内。

Claims (10)

1.一种酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法,其特征在于,其包括如下步骤:将发酵底物的原料组合物经纤维素酶酶解,制得发酵底物;将酵母菌接种到所述发酵底物中,经发酵培养,灭菌,即可;
其中,所述发酵底物的原料组合物包括大麦籽和水,所述大麦籽和所述水的质量比为1:(40~100)。
2.如权利要求1所述的酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足下述条件中的至少一种:
所述酵母菌包括酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae),较佳地包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YWY-1,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编为100101,保藏日期为2019年03月27日,保藏编号为CGMCC No.17452;
所述酵母菌以酵母菌菌液的形式添加,所述酵母菌菌液中所述酵母菌的浓度为106~109CFU/mL,较佳地为106~108CFU/mL;
以所述发酵底物的原料组合物中的所述水的体积为基准,所述酵母菌的接种量为5×104~5×107CFU/mL,较佳地为5×104~5×106CFU/mL;
所述大麦籽的粒径为50~100目,较佳地为60~80目;
所述大麦籽和所述水的质量比为1:(40~80)。
3.如权利要求1所述的酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足下述条件中的至少一种:
所述酶解的温度为40~60℃,较佳地为45~55℃;
所述酶解的时间为50~100min,较佳地为60~80min;
以所述发酵底物的原料组合物中的所述水的质量为基准,所述纤维素酶占所述水的质量百分比为0.1%~1%,较佳地为0.5%~0.8%。
4.如权利要求1所述的酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法,其特征在于,所述接种的操作前还进一步包括对所述发酵底物进行灭菌的操作;
较佳地,所述灭菌的方法为高温灭菌法;当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的温度为110~125℃,较佳地为115~121℃;当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的时间为20~60min,较佳地为20~40min;当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的压力为0.1~0.14Mpa,较佳地为0.1~0.13MPa;
较佳地,所述灭菌的操作后还进一步包括冷却至室温的操作。
5.如权利要求1所述的酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法,其特征在于,所述制备方法满足下述条件中的至少一种:
所述发酵培养为有氧发酵;
所述发酵培养在摇床上进行,所述摇床的转速为150~300rpm,较佳地为150~250rpm;
所述发酵培养的时间为24~96h,较佳地为24~72h,更佳地为24~50h;
所述发酵培养的温度为25~37℃,较佳地为25~32℃;
所述灭菌的方法为高温灭菌法;当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的温度为110~125℃,较佳地为115~121℃;当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的时间为20~50min,较佳地为25~35min;当采用所述高温灭菌法进行所述灭菌时,所述灭菌的压力为0.1~0.14MPa,较佳地为0.1~0.13MPa。
6.如权利要求1~5中任意一项所述的酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法,其特征在于,所述灭菌的操作后,还进一步包括冷却和/或离心,收集上清液的操作;
较佳地,所述冷却为冷却至室温;
较佳地,所述离心的转速为3000~9000rpm,更佳地为4000~6000rpm;
较佳地,所述离心的半径为8~15cm;
较佳地,所述离心的时间为10~40min,更佳地为20~40min。
7.如权利要求6所述的酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法,其特征在于,所述离心的操作后还进一步包括二次灭菌和/或与防腐剂混合的操作;
较佳地,所述二次灭菌的方法为高温灭菌法;当采用所述高温灭菌法进行所述二次灭菌时,所述二次灭菌的温度为110~125℃,较佳地为115~121℃;当采用所述高温灭菌法进行所述二次灭菌时,所述二次灭菌的时间为20~40min,较佳地为25~35min;当采用所述高温灭菌法进行所述二次灭菌时,所述二次灭菌的压力为0.1~0.14MPa,较佳地为0.1~0.13MPa;
较佳地,与所述防腐剂混合的过程中,所述混合的温度为50~80℃,更佳地为70~80℃;
较佳地,与所述防腐剂混合的过程中,所述防腐剂包括对羟基苯乙酮和/或1,2-己二醇;当所述防腐剂包括所述对羟基苯乙酮和所述1,2-己二醇时,所述对羟基苯乙酮占所述离心后制得物料的质量百分数为0.1%~0.5%,所述1,2-己二醇占所述离心后制得物料的质量百分数为0.5%~1%;较佳地,所述对羟基苯乙酮占所述离心后制得物料的质量百分数为0.5%,所述1,2-己二醇占所述离心后制得物料的质量百分数为0.5%。
8.一种酵母菌/大麦籽发酵产物,其特征在于,其由如权利要求1~7中任意一项所述的酵母菌/大麦籽发酵产物的制备方法制得。
9.一种如权利要求8所述的酵母菌/大麦籽发酵产物直接作为产品、作为添加剂或作为基底在制备皮肤外用剂中的应用;
较佳地,所述酵母菌/大麦籽发酵产物作为所述皮肤外用剂中的抗氧化活性成分;更佳地,所述抗氧化活性成分为具有总抗氧化能力的抗氧化活性成分。
10.一种皮肤外用剂,其特征在于,其包括如权利要求8所述的酵母菌/大麦籽发酵产物;
较佳地,所述皮肤外用剂中还进一步包括保湿活性成分、美白活性成分、抗炎活性成分、抗敏活性成分和抗氧化活性成分中的至少一种;
较佳地,所述皮肤外用剂包括面膜、精华或爽肤水;
较佳地,所述酵母菌/大麦籽发酵产物占所述皮肤外用剂的质量百分比为5%~99%,较佳地为60%~99%。
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