CN115624565B - 一种具有减肥及降脂作用的青稞嫩叶水提多糖及其应用 - Google Patents

一种具有减肥及降脂作用的青稞嫩叶水提多糖及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种具有减肥及降脂作用的青稞嫩叶水提多糖及其应用；包括以青稞嫩叶水提多糖，奶粉，蔗糖酯，阿斯巴甜和甜蜜素为原料制备减肥降脂的咀嚼片。该咀嚼片疗效显著、见效迅速、无毒副作用。在以高脂饲料造模大鼠模型为筛选模型对本发明青稞嫩叶水提多糖咀嚼片减肥降脂效果研究中，其具有显著的减轻大鼠体重、减少机体脂肪堆积的作用，并能降低大鼠血清中TG含量、TC含量、降低LDL含量、提高HDL含量，减肥降脂效果与奥利司他接近。说明该咀嚼片可用于肥胖症的预防和改善作用，有望应用于肥胖人群的体重改善和血脂含量降低。

Description

一种具有减肥及降脂作用的青稞嫩叶水提多糖及其应用
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一种青稞嫩叶水提多糖及其制备方法，特别涉及一种具有减肥及降脂作用的青稞嫩叶水提多糖的提取及其在医药领域中的应用。
背景技术
肥胖是最为常见的一种代谢疾病，严重影响到公众的健康问题，它经常伴随许多合并症，包括二型糖尿病、心脏病和精神疾病。肥胖的发生加剧了这些疾病的发病率和死亡率。肥胖还可加速衰老，肥胖可以使平均寿命减少5-10年，并且与死亡率的增高密切相关，现已成为全球健康的重大挑战。2017年联合国粮食及农业组织发布的调查指出成人肥胖问题尤为严重，世界上每8个成人中就有1个以上肥胖，人数超过6.72亿人。其发生率仍以每年0.3%-0.8%的速度持续增长，并且近年来逐渐由发达国家向发展中国家蔓延，同时在青少年中也发现肥胖的发生率也急剧升高。如果此趋势长期持续下去，到2030年，预计全球成年人中20%将肥胖，人数将达到11.2亿。目前关于减肥的措施主要包括药物治疗、运动以及节食。用于治疗肥胖的药物种类并不多且费用高昂，需要长期服用而且副作用也比较大，它们的副作用包括导致血压升高、心率加快、失眠和自杀倾向，并且具有致畸性。错误的节食和运动减肥也会引发其他的系统损伤或功能障碍，并且停止以后就会出现反弹。因此在临床应用中，这些方法都受到了很大的限制。
青稞起源于青藏高原，是藏族人碳水化合物的主要来源,生活在高原上的农民将野生大麦培育成青稞已有5000多年的历史。青稞由于抗性强、适应性广、产量稳定等特点，其种植面积已扩大到全国。目前，我国青稞种植区域主要分布在西藏自治区和云贵高原部分地区，四川省、甘肃省和青海省也有部分地区种植。青稞嫩叶一般俗称为青稞苗，两者都具有极高的药用价值和悠久的药用历史。明代名医李时珍在其经典医学著作《本草纲目》中论述，认为麦苗主要可以用于消除酒精中毒、发热和黄疸，还可解杯中之毒，除烦解热，消炎退热，降胸热和益小肠。在西方，西医创始人希波克拉底在公元前4世纪就曾用大麦苗汁治疗胃肠道疾病、肝脏疾病、血液病和皮肤病；古罗马医生用大麦苗治疗溃疡；古希腊人从大麦中提取了一种粘性物质，用于治疗胃肠道炎症。研究表明，青稞嫩叶作为一种功能性食品，可以有效防治人类慢性病，但长期以来未引起人们的广泛关注。关于其减肥降脂功效并未被报道。本发明采用青稞嫩叶作为开发对象，开发其减肥降脂功能，扩大了青稞嫩叶的应用，对提高青稞嫩叶产品附加值，实现特色资源的精深加工和综合利用具有重要意义。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种具有减肥及降脂作用的青稞嫩叶水提多糖及其应用；含该青稞嫩叶水提多糖的减重降脂组合物（如青稞嫩叶水提多糖咀嚼片）疗效显著、见效迅速，长期食用对减重降脂具有很好的疗效。
本发明涉及一种青稞嫩叶水提多糖在制备减肥及降脂产品中的用途。
所述产品为药品。
作为一个实施方案，所述药品为：减肥降脂胶囊、软胶囊、颗粒剂、丸剂、片剂中的一种。
作为一个实施方案，所述药品为青稞嫩叶水提多糖咀嚼片，所述咀嚼片由以下原料制成，所述原料包括：青稞嫩叶水提多糖，奶粉，蔗糖酯，阿斯巴甜和甜蜜素。
进一步的，所述咀嚼片由以下原料制成，所述原料按重量份包括：青稞嫩叶水提多糖20-25份；奶粉55-60份；蔗糖酯10-20份；阿斯巴甜0.1-0.5份；甜蜜素0.1-0.5份。
作为一个实施方案，所述青稞嫩叶水提多糖是通过包括如下步骤的方法制备而得：
S1、将青稞嫩叶真空冷冻干燥、打粉过筛后收集获得青稞嫩叶粉；
S2、将青稞嫩叶粉进行脱脂、水提、酶解、醇沉以及干燥得到青稞嫩叶水提多糖。
作为一个实施方案，所述青稞嫩叶为青海黄青稞嫩叶。青海黄青稞种植时间为14天到21天，青稞嫩叶长度在15±1 cm时，收割青稞嫩叶。将青海黄青稞种子过夜浸泡后，与种植盘中种植14-21天，待青稞嫩叶生长至15 cm左右时，将青稞嫩叶从根部剪下清洗，在冷库中储存备用。
作为一个实施方案，步骤S1中，所述真空冷冻干燥的条件为-50～-60℃，4-6小时；-35～-40℃，10-15小时；-10 ～ -20℃，10-15小时；20-25℃，24-48小时，依次进行。
作为一个实施方案，步骤S1中，所述青稞嫩叶粉过80-200目网筛。
作为一个实施方案，步骤S2中，所述脱脂以石油醚作溶剂进行脱脂，青稞嫩叶粉与石油醚的比例为1 g：40-50 mL。脱脂条件为55-65℃浸泡90-120 min，65-75℃抽提120-150min，75-80℃回收15-30 min。
作为一个实施方案，步骤S2中，所述水提是向脱脂后的青稞嫩叶粉中按1:20-1:30加入去离子水，边搅拌边在60-80℃水浴条件下提取2-3小时。提取完成后离心，收集上清液，沉淀重新加入300 mL去离子水，重复提取3次，合并得到上清液。
作为一个实施方案，步骤S2中，所述酶解是在水提、离心得到的上清液中加入5-10μL/g 青稞粉的耐高温α-淀粉酶，60-80℃水浴30-60 min，90-100℃下水浴10-30 min灭活；待溶液冷却后加入5-10 μL/g 青稞粉的木瓜蛋白酶，50-60℃水浴2-3小时，90-100℃下水浴10-30 min灭活；待溶液冷却后加入40-50 μL/g 青稞粉的糖化酶，50-60℃水浴1-2 小时，90-100℃下水浴10-30 min灭活。离心，收集上清液。
作为一个实施方案，步骤S2中，所述醇沉是将酶解、离心得到的上清液于60-80℃下水浴浓缩至原来体积的1/10-1/20，冷却后边搅拌边逐滴加入3~4倍体积的乙醇，静置一天。离心，收集沉淀。
作为一个实施方案，步骤S2中，所述干燥是将醇沉、离心得到的沉淀真空冷冻干燥，获得青稞嫩叶水提多糖。所述真空冷冻干燥是在-80℃下冷冻一天后，进行真空冷冻干燥，条件同步骤S1。
本发明还涉及一种减肥降脂的青稞嫩叶水提多糖咀嚼片，所述咀嚼片由以下原料制成，所述原料包括：青稞嫩叶水提多糖，奶粉，蔗糖酯，阿斯巴甜和甜蜜素。
进一步的，所述咀嚼片由以下原料制成，所述原料按重量份包括：青稞嫩叶水提多糖20-25份；奶粉55-60份；蔗糖酯10-20份；阿斯巴甜0.1-0.5份；甜蜜素0.1-0.5份。该青稞嫩叶水提多糖咀嚼片为片剂包装，每片1-2 g，所得的咀嚼片感官良好，口感细腻、丝滑，无不良气味，风味良好，具有广阔的商业前景。
更进一步地，所述咀嚼片由以下原料制成，所述原料按重量份包括：青稞嫩叶水提多糖24.81%；奶粉55.86%；蔗糖酯18.41%；阿斯巴甜0.46%；甜蜜素0.46%。具体制备方法为：称取青稞嫩叶水提多糖24.81 g；奶粉55.86 g；蔗糖酯18.41 g；阿斯巴甜0.46 g；甜蜜素0.46 g，充分混合后，使用压片机压制成1.5 g咀嚼片，每日推荐摄入量为2片。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1、在以高脂饲料造模大鼠模型为筛选模型对本发明减肥降脂咀嚼片的减肥效果研究中，其具有显著的减轻大鼠体重和降低机体脂肪堆积的作用，并能降低大鼠和小鼠血清中TG含量、TC含量、降低LDL含量、提高HDL含量，说明该组合物可用于肥胖症的预防和改善作用；
2、本发明减重降脂的组合物疗效显著、见效迅速，其减肥降脂效果与奥利司他近似；由于其功效成分来自青稞嫩叶，来源绿色天然，产品安全无毒副作用；因此，可以作为替代或补充目前减肥药物的优先选择，有望应用于肥胖人群的体重改善和血脂含量降低；
3、本发明针对中国青稞种植面积庞大、相关产品附加值低以及生产工艺复杂等特点，开发了青稞嫩叶水提多糖的减肥降脂功能，提高了青稞嫩叶相关产品的附加值，实现了实现特色资源的精深加工和综合利用。
4、本发明确定了一种青稞嫩叶水提多糖咀嚼片的配方，通过响应面实验优化得到最佳配方为水提多糖24.81%；奶粉55.86%；蔗糖酯18.41%；阿斯巴甜0.46%；甜蜜素0.46%；该配方所得的咀嚼片奶香浓郁，口感丝滑，易于咀嚼，可用于工业化大生产。
附图说明
通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显：
图1为三种因素交互作用等高线图（A）和响应面三维图（B）；
图2为造模成功后各组大鼠体重（A）；灌胃处理后各组大鼠体重（B）；
图3为各组大鼠摄食量（A）和能量摄入（B）；
图4为各组大鼠肝脏重量；
图5为各组大鼠肾周脂肪重量；
图6为各组大鼠附睾脂肪重量；
图7为各组大鼠血清中总胆固醇含量（A），甘油三酯含量（B），低密度脂肪酸含量（C）和高密度脂肪酸含量（D）；
图8为造模成功后各组大鼠体重（A）和酶提多糖咀嚼片灌胃后各组大鼠体重（B）；
图9为酶提多糖咀嚼片灌胃后各组大鼠肝脏重量；
图10为酶提多糖咀嚼片灌胃后各组大鼠肾周脂肪重量；
图11为酶提多糖咀嚼片灌胃后各组大鼠附睾脂肪重量；
图12为酶提多糖咀嚼片灌胃后各组大鼠血清中总胆固醇含量（A），甘油三酯含量（B），低密度脂肪酸含量（C）和高密度脂肪酸含量（D）。
具体实施方式
青稞嫩叶一般是指高度为15-30 cm的新鲜青稞嫩茎叶（青稞种子生长21天左右），而青稞谷粒属于青稞作物的果实（青稞种子生长4-5个月），二者在组织形态与营养组成都具有很大的差异（如下表1），因此，通过青稞谷粒推测出青稞嫩叶的功能活性是不合理的。目前的文献只报道了青稞谷粒的相关功能活性，并没有关于青稞嫩叶的研究。并且，本发明获得水提多糖与青稞谷粒中的水提多糖在结构组成上差异很大，相应的其生物活性也不相同。因此，本发明提供了一种具有减肥及降脂作用的青稞嫩叶水提多糖，开发了青稞嫩叶新的功能活性，提高了青稞产品的附加值。
表1 青稞嫩叶与谷粒的营养组成
下面结合实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干调整和改进。这些都属于本发明的保护范围。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试剂、材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
本实施例提供一种具有减肥降脂功能的青稞嫩叶水提多糖的制备方法，包括以下步骤：
(1)将青海黄青稞种子过夜浸泡后，与种植盘中种植21天，待青稞嫩叶生长至15cm左右时，收割青稞嫩叶；
(2)将收获的青稞嫩叶清洗干净后真空冷冻干燥、打粉过200目筛后收集获得青稞嫩叶粉。所述真空冷冻干燥的条件为-60℃，6小时；-35℃，15小时；-20℃，15小时；25℃，48小时；
(3)将青稞嫩叶粉进行脱脂和提取得到青稞嫩叶水提多糖。
脱脂：青稞嫩叶粉与石油醚的比例为1 g：40 mL。脱脂条件为65℃浸泡120 min，75℃抽提150 min，80℃回收30 min。
提取：所述提取过程为向脱脂后的青稞嫩叶粉中按1：30加入去离子水，边搅拌边在80℃水浴条件下提取3小时。提取完成后离心，收集上清液，沉淀重新加入300 mL去离子水，重复提取3次。合并得到的上清液，向上述溶液中加入5 μL/g 青稞粉的耐高温α-淀粉酶，80℃水浴2 h；水浴温度调至60℃，加入5 μL/g 青稞粉的木瓜蛋白酶，水浴2 h；100℃水浴灭酶20 min，冷却后加入40 μL/g 青稞粉的糖化酶，60℃水浴2 h；100℃水浴灭酶20min，冷却后60℃水浴4 h，得到酶解液。离心，收集上清液。
醇沉：将收集的上清液于80℃下水浴浓缩至原来体积的1/10，冷却后边搅拌边逐滴加入4倍体积的乙醇。溶液静置一天，离心，收集沉淀。沉淀在-80℃下冷冻一天，真空冷冻干燥，获得青稞嫩叶水提多糖。真空冷冻干燥的条件为-60℃，6小时；-35℃，15小时；-20℃，15小时；25℃，48小时，依次进行。
实施例2
所述减肥降脂的青稞嫩叶水提多糖咀嚼片配方的优化方法，包括以下步骤：
1.选取实施例1制得的青稞嫩叶水提多糖、奶粉、蔗糖酯以及阿斯巴甜作为咀嚼片的原料组成。通过单因素实验确定每种原料的添加比例范围，具体操作方法如下。
（1）以青稞嫩叶水提多糖作为实验变量，按照青稞嫩叶水提多糖、奶粉、蔗糖酯以及阿斯巴甜的添加比例分别为19：55：15：1，24：55：15：1，29：55：15：1，34：55：15：1和39：55：15：1的比例将四种成分充分混合均匀，并用手动压片机压成1.5g奶片。
（2）以奶粉为实验变量，按照青稞嫩叶水提多糖、奶粉、蔗糖酯以及阿斯巴甜的添加比例分别为29：45：15：1，29：50：15：1，29：55：15：1，29：60：15：1和29：65：15：1的比例将四种成分充分混合均匀，并用手动压片机压成1.5g奶片。
（3）以蔗糖酯的添加量作为实验变量，按照青稞嫩叶水提多糖、奶粉、蔗糖酯以及阿斯巴甜的添加比例分别为29：55：5：1，29：55：10：1，29：55：15：1，29：55：20：1和29：55：25：1的比例将四种成分充分混合均匀，并用手动压片机压成1.5g奶片。
（4）以阿斯巴甜的添加量作为实验变量按照青稞嫩叶水提多糖、奶粉、蔗糖酯以及阿斯巴甜的添加比例分别为29：55：15：0.4，29：55：15：0.6，29：55：15：1，29：55：15：0.8和29：55：15：1.2的比例将四种成分充分混合均匀，并用手动压片机压成1.5g奶片。
实验结果：通过单因素实验，结果表明青稞嫩叶水提多糖、奶粉、蔗糖酯和阿斯巴甜四种成分的最大添加比例分别可以达到29%、60%、15%以及0.8%。34%、57%、12%和0.8%。
2. 选取对实验影响较大的膳食纤维、奶片和蔗糖酯作为实验试验因素，以青稞嫩叶水提多糖咀嚼片的感官评价得分为评价指标，使用Design-Expert 8.0.6.1软件，基于Box-Behnken设计原理，采用三因素三水平响应面分析法进行优化实验（图1），确定青稞嫩叶水提多糖咀嚼片的最佳配方。表2所示为各因素及水平。
实验结果：
（1）响应面分析实验结果如表3所示。运用Design Expert 8.0.6.1软件进行二次多元回归拟合，得到二次多元回归方程：Y=81.07-1.03A+1.05B+0.34C+0.29AB-0.14AC-0.18BC-2.91A2-2.52B2+0.62C2。模型的方差分析结果如表4所示。由方差分析表可知，模型显著P值小于0.05，说明Quadratic模型选择合理；失拟项P值=0.0786>0.05，不显著，说明模型没有明显的失拟情况，非实验因素对青稞嫩叶水提多糖咀嚼片的感官评价得分影响不大；C.V.%=1.89%说明变异系数仅为1.89%，变异不显著；模型的总决定系数R2=0.9926，说明该模型可以解释99.26%的实验数据；综上，模型具有较好的准确性和可靠性。回归方程的一次项系数表明实验因素对青稞嫩叶水提多糖咀嚼片的感官评价得分影响的大小顺序为B>A>C，即奶粉>水提多糖>蔗糖酯。
（2）奶粉和水提多糖的交互作用显示，在一个给定的奶粉添加量的情况下，咀嚼片的感官评价得分随水提多糖添加量的增加而上升，水提多糖添加量达到中心点后感官评价得分逐渐降低；在等高线图中，水提多糖轴方向等高线稀疏而奶粉轴方向等高线密集，表明奶粉添加量对咀嚼片感官评价得分的影响比水提多糖的影响大。蔗糖酯和水提多糖的交互作用显示，在一个给定的蔗糖酯添加量的情况下，咀嚼片感官评价得分随水提多糖添加量的增加而上升，水提多糖添加量达到中心点后感官评价得分开始降低，而且下降的速率要比上升的速率大；在等高线图中，水提多糖轴方向等高线密集而蔗糖酯轴方向等高线稀疏，表明水提多糖添加量对咀嚼片感官评价得分的影响比蔗糖酯的影响大。蔗糖酯和奶粉的交互作用显示，在一个给定的蔗糖酯量下，感官评价得分随奶粉添加量的增加而上升；在等高线图中，奶粉轴方向等高线密集而蔗糖酯轴方向等高线稀疏，表明奶粉添加量对感官评价得分的影响比蔗糖酯的影响大。通过上述分析可知，所选因素对青稞嫩叶水提多糖咀嚼片的感官评价得分影响的强弱顺序为：奶粉>水提多糖>蔗糖酯，与由F值大小比较的结果一致。
（3）通过模型预测热水法制备青稞嫩叶提多糖咀嚼片的最佳配方为水提多糖24.81%；奶粉55.86%；蔗糖酯18.41%；阿斯巴甜0.46%；甜蜜素0.46%。以此配方制得的青稞嫩叶水提多糖咀嚼片奶香浓郁，口感丝滑，易于咀嚼，具有广阔的商业前景，其外观如图2所示，为白色片状，每片1.5 g。
表2 Box-Behnken响应面分析因素和水平表
表3 Box-Behnken试验设计及结果
表4 回归方程方差分析表
功能性检测实验
大鼠体脂指标检测采用6周龄，SPF级SD大鼠雄性大鼠，体重180-200g。将大鼠适应7天后，随机分为6组，每组10只。动物饲养保持环境温度为21±2℃，湿度为30-70％，12h光照交替，自由饮水，自由摄入饲料。通过对SD大鼠饲喂高脂饲料为期12周诱发肥胖症，肥胖造模成功后对大鼠进行灌胃处理，为期4周。实验期间每周对大鼠的摄食量和体重进行检测，最后检测大鼠体重、附睾和肾周脂肪重量，血脂四项变化来判断咀嚼片是否具有减轻大鼠体重和降脂的功能。基础饲料和高脂饲料其组成、主要营养成分及能量如表5和表6所示。动物实验分组及处理如下：
对照组：基础饲料喂养；
模型组：高脂饲料喂养造模成功后，灌胃生理盐水；
药物组：高脂饲料喂养造模成功后，灌胃奥利司他水溶液，灌胃剂量为40 mg/kgBW；
低剂量组：高脂饲料喂养造模成功后，灌胃低剂量咀嚼片水溶液，灌胃剂量为250mg/kg BW；
中剂量组：高脂饲料喂养造模成功后，灌胃中剂量咀嚼片水溶液，灌胃剂量为500mg/kg BW；
高剂量组：高脂饲料喂养造模成功后，灌胃高剂量咀嚼片水溶液，灌胃剂量为1000mg/kg BW。
表5维持饲料组成
表6高脂饲料组成
实验结果：
（1）由图2A可知，与对照组相比，为期12周的高脂饲料饲养使得其他各组大鼠体重显著模型高于对照组，并且高脂饲料饲养组大鼠体重并无明显差异，说明造模成功。图2B结果表明，经过4周咀嚼片和奥利司他灌胃后，与模型组相比，大鼠体重显著降低，并且低剂量咀嚼片灌胃组与奥利司他灌胃组大鼠体重并无显著差异，说明低剂量的咀嚼片就具有很好的减肥功效，与减肥药物奥利司他的效果接近。由图3可知，与模型组相比，咀嚼片灌胃组与奥利司他灌胃组大鼠摄食量和摄入能量没有显著性差异，说明青稞嫩叶水提多糖咀嚼片不是通过降低大鼠摄食量和摄入能量来减轻体重。
（2）由图4可知，与模型组相比，对照组肝脏重显著低于模型组；中剂量和高剂量咀嚼片灌胃组大鼠肝脏重量均显著降低，且两组之间并无显著差异。说明咀嚼片灌胃剂量在500和1000 mg/kg BW时能够显著降低肥胖个体肝脏重量，减少肝脏内脂肪堆积。由图5和图6可知，与模型组相比，咀嚼片灌胃组与奥利司他灌胃组大鼠肾周脂肪和附睾脂肪重量均显著降低。说明咀嚼片灌胃能够显著降低肥胖大鼠体内脂肪堆积，减轻体重。
（3）由图7A可知，对照组、咀嚼片灌胃组与奥利司他灌胃组大鼠血清总胆固醇水平显著低于模型组。由图7B可知，中剂量咀嚼片灌胃组大鼠血清甘油三酯水平显著低于模型组。图7C表明，对照组，中剂量和高剂量咀嚼片灌胃组大鼠血清低密度脂蛋白水平显著低于模型组。由图7D可知，奥利司他灌胃可以显著提高肥胖大鼠血清中高密度脂肪酸的含量，而咀嚼片灌胃则是微弱的提高大鼠血清中高密度脂肪酸的水平。这些结果都明青稞嫩叶水提多糖咀嚼片灌胃能够显著降低机体血脂水平，进而发挥减肥降作用。
总之，青稞嫩叶水提多糖咀嚼片能够显著降低体重，减少脂肪堆积，降低血脂，是一株具有减肥降脂功能的新型产品，其有效推荐摄入量为每日2片。
对比例1
制备青稞嫩叶酶提多糖：包括以下步骤：
（1）将青海黄青稞种子浸泡过夜，于种植盘中种植21天，待青稞嫩叶生长至15 cm左右时收割青稞嫩叶，清洗干净；
（2）将青稞叶真空冷冻干燥、打粉后过80目筛，收集获得青稞嫩叶粉。所述真空冷冻干燥的条件为-60℃，6小时；-35℃，15小时；-20℃，15小时；20℃，48小时；
（3）将青稞嫩叶粉进行脱脂、酶提以及醇沉得到青稞嫩叶酶提多糖。所述脱脂过程中以石油醚作溶剂进行脱脂，青稞嫩叶粉与石油醚的比例为1 g：40 mL；所述酶解为将青稞粉和水1:20的重量比投加水，向上述溶液中加入5 μL/g 青稞粉的耐高温α-淀粉酶，80℃水浴2 h；水浴温度调至60℃，加入5 μL/g 青稞粉的木瓜蛋白酶，水浴2 h；100℃水浴灭酶20min，冷却后加入40 μL/g 青稞粉的糖化酶，80℃水浴2 h；100℃水浴灭酶20 min，冷却后60℃水浴4 h，得到酶解液；然后用NaOH溶液调节pH至5，加入600 U/g青稞嫩叶粉的木聚糖酶和200 U/g青稞嫩叶粉的纤维素酶，60℃保温3 h后100℃水浴灭酶20 min将酶解所得上清液于60℃下水浴浓缩至50 mL，冷却后加入5倍体积的乙醇，静置，离心，收集沉淀；用水复溶，-80℃冰箱冷冻一天后，真空冷冻干燥，获得青稞嫩叶酶提多糖粉末。所得青稞嫩叶酶提多糖为具有青稞嫩叶香气的淡黄色无味粉末。真空冷冻干燥的条件为-60℃，6小时；-35℃，15小时；-20℃，15小时；25℃，48小时，依次进行。
对青稞嫩叶酶提多糖咀嚼片配方同样结合响应面分析进行优化，通过模型预测热水法制备青稞嫩酶提多糖咀嚼片的最佳配方为酶提多糖33.91%，奶粉49.58%，蔗糖酯15.65%，阿斯巴甜0.43%以及甜蜜素0.43%。
因此，本对比例按照酶提多糖33.91%，奶粉49.58%，蔗糖酯15.65%，阿斯巴甜0.43%以及甜蜜素0.43%的配方制备青稞嫩叶酶提多糖咀嚼片。采用SD大鼠，在维持饲料中添加15％蔗糖、15％猪油、10％酪蛋白来诱发SD大鼠肥胖症。将大鼠适应7天后，随机分为6组，每组10只。动物饲养保持环境温度为21±2℃，湿度为30-70％，12h光照交替，自由饮水，自由摄入饲料。酶提多糖咀嚼片灌胃剂量与水提多糖咀嚼片相同。实验期间每周对大鼠的摄食量和体重进行检测，最后检测大鼠体重、附睾和肾周脂肪重量，血脂四项变化来判断咀嚼片是否具有减轻大鼠体重和降脂的功能。
实验结果：由图8和图2对比可知，青稞嫩叶酶提多糖咀嚼片和青稞嫩叶水提多糖咀嚼片都具有很好的减肥功效，与减肥药物奥利司他的效果接近。相同剂量下，水提多糖咀嚼片降低肥胖大鼠体重的效果稍优于酶提多糖咀嚼片。由图9和图4对比可知，两种多糖咀嚼片均能够显著降低肥胖个体肝脏重量，减少肝脏内脂肪堆积。但是，在相同灌胃剂量下，水提多糖咀嚼片可以更多减少肥胖大鼠肝脏脂肪堆积。由图10-12和图5-7结果可知，肥胖大鼠在两种多糖咀嚼片灌胃后，其肾周脂肪和附睾脂肪重量均显著降低，咀嚼片灌胃后显著降低了肥胖大鼠血浆中的血脂水平。总体来说，两种咀嚼片的减肥降脂效果不相上下，水提多糖和酶提多糖咀嚼片灌胃都能够显著降低肥胖大鼠体内脂肪堆积，从而发挥减肥降功效。两种多糖为结构截然不同的多糖，但是都具有很好的减肥功效。水提多糖的单糖组成结果表明，其为半乳糖构成主链骨架，支链上为其他单糖组合的多糖结构；而酶提多糖的单糖组成结构则表明，其为木糖构成主链骨架，支链上为其他单糖组合的多糖结构，它们是两种不同的物质。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。

Claims (6)

1.一种青稞嫩叶水提多糖在制备减肥及降脂药品中的用途，所述青稞嫩叶水提多糖为半乳糖构成主链骨架、支链上为其他单糖组合的多糖结构；所述青稞嫩叶水提多糖是通过包括如下步骤的方法制备而得：
S1、将青稞嫩叶真空冷冻干燥、打粉过筛后收集获得青稞嫩叶粉；
S2、将青稞嫩叶粉进行脱脂、水提、酶解、醇沉以及干燥得到青稞嫩叶水提多糖；
所述水提是向脱脂后的青稞嫩叶粉中按1:20-1:30加入去离子水，边搅拌边在60-80℃水浴条件下提取2-3小时；所述酶解是在水提、离心得到的上清液中加入5-10 μL/g 青稞粉的耐高温α-淀粉酶，60-80℃水浴30-60 min，90-100℃下水浴10-30 min灭活；待溶液冷却后加入5-10 μL/g 青稞粉的木瓜蛋白酶，50-60℃水浴2-3小时，90-100℃下水浴10-30 min灭活；待溶液冷却后加入40-50 μL/g 青稞粉的糖化酶，50-60℃水浴1-2 小时，90-100℃下水浴10-30 min灭活；
所述醇沉是将酶解、离心得到的上清液于60-80℃下水浴浓缩至原来体积的1/10-1/20，冷却后边搅拌边逐滴加入3~4倍体积的乙醇，静置过夜；所述干燥是醇沉、离心得到的沉淀在-80℃下冷冻一天后，进行真空冷冻干燥，条件为-50～-60℃，4-6小时；-35～-40℃，10-15小时；-10～-20℃，10-15小时；20-25℃，24-48小时，依次进行。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药品为：减肥降脂胶囊、颗粒剂、丸剂、片剂中的一种。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药品为青稞嫩叶水提多糖咀嚼片，所述咀嚼片包括青稞嫩叶水提多糖20-25份，奶粉55-60份，蔗糖酯10-20份，阿斯巴甜0.1-0.5份，甜蜜素0.1-0.5份。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述青稞嫩叶为青海黄青稞嫩叶；步骤S1中，所述青稞嫩叶粉过80-200目网筛。
5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，步骤S1中，所述真空冷冻干燥的条件为-50-60℃，4-6小时；-35-40℃，10-15小时；-10-20℃，10-15小时；20-25℃，24-48小时，依次进行。
6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，步骤S2中，所述脱脂以石油醚作溶剂进行脱脂，青稞嫩叶粉与石油醚的比例为1 g：40-50 mL。
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