CN109527602A - 提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，包括：步骤1、原料预处理：将冷冻干燥后的青稞若叶苗粉碎、过筛；步骤2、发酵：采用米根霉对步骤1所得的青稞若叶粉进行发酵后灭菌；步骤3、酸解：向步骤2所得发酵产物加入适量的水，用盐酸调节pH进行酸解；步骤4、酶解：向步骤3产物加入木聚糖酶和纤维素酶；步骤5、醇沉：对步骤4所得产物进行抽滤，得滤液，向所得滤液滴加乙醇，静置过夜后离心，得沉淀；步骤6、真空冷冻干燥：将所得沉淀复溶，旋蒸浓缩后真空冷冻干燥。本发明制作的青稞若叶粉可溶性膳食纤维可作为保健食品或其添加物，该产品可降低餐后血糖水平、降低胆固醇、预防心血管疾病、抗肿瘤。

Description

提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法
技术领域
本发明属于食品领域，具体涉及一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法。
背景技术
青稞属于禾本科大麦属，因其籽粒内外稃与颖果分离，籽粒外露，故也被称为裸大麦，是大麦的一种特殊类型。青稞在我国青藏高原地区已经有超过5000年的种植历史，是藏族人民最主要的碳水化合物来源。青藏高原高寒、缺氧、强光照等极端环境使青稞获得了极强的抗逆性，具有丰富独特的营养成分，如蛋白质、多酚、黄酮、矿质元素、维生素、膳食纤维等。青藏高原虽然自然环境恶劣，但百岁老人却并不鲜见，这与长期食用具有丰富营养价值及突出医疗保健功效的青稞是密不可分的。
大麦若叶苗是指苗高15-30cm的新鲜大麦嫩茎叶。大麦苗兼具药食两用的作用，自古就有用于医疗治病的案例：《普济方》中记载了药王孙思邈以冬霜大麦叶熬汁治好了疫区传染性肝病，明代李时珍在《本草纲目》中论述，认为“麦苗主治消酒毒暴热，酒疸目黄；又解蛊毒，除烦闷，解时疫狂热，退胸隔热，利小肠”；公元前四世纪，西方医学鼻祖希波克拉底利用大麦苗汁治疗皮肤、肝脏、血液疾病及肠胃功能失调，古希腊人用大麦中提取的粘性物质治疗肠胃发炎；罗马医师普林尼将大麦苗用于治疗痔疮。
膳食纤维是指不能被人体小肠消化吸收而在在大肠中部分或全部发酵的可食用植物性成分、碳水化合物及其相类似物质的总称，被称为继碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、矿物质和水之外的人体“第七营养素”，是一种维系人体健康、不能被其他物质代替的营养素。根据其在水中的溶解性，可分为可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维两大类。可溶性膳食纤维主要包括果胶、树胶、粘液质、部分储存多糖以及部分半纤维素，不可溶性膳食纤维则主要包括纤维素、部分半纤维素、木质素等。膳食纤维一般是由单糖为基本单位聚合而成的有机化合物及其衍生物，其主链和支链上的羟基等活泼官能团可与其他物质发生甲基化、羟甲基化、酯化、醚化、络合、氢键吸附等相互作用，这些相互作用决定了膳食纤维对人体特有的保健功能。不溶性膳食纤维主要可缩短粪便在肠道内的停留时间，增加排便量，从而达到预防便秘的效果。可溶性膳食纤维在小肠中能形成胶状物质将胆固醇经肝脏代谢后的产物胆酸包围并通过消化道排出体外，阻止胆酸通过小肠壁吸收回肝脏转变成胆固醇，肝脏只能靠吸收血液中的胆固醇来补充消耗的胆酸，从而降低了血液中的胆固醇，并能降低因高胆固醇引发的冠心病、中风等疾病的发病率；可溶性膳食纤维在胃肠中形成一种粘膜减慢食物消化过程，延缓胃排空、产生饱腹感，使得进餐后人体的血糖值不会急剧上升，并且降低人体对胰岛素的需求，有利于改善糖尿病病情；可溶性膳食纤维能促进肠道双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌的产生，不同于不溶性膳食纤维，可溶性膳食纤维在结肠中易被发酵并且产生大量乙酸、醋酸、叶酸和乳酸等短链脂肪酸，这些改善有益菌群的繁殖环境，促进肠道健康，起到预防结肠癌等肠道疾病的效果；研究还表明不溶性膳食纤维可以预防乳腺癌和前列腺癌等癌症。此外，膳食纤维还可用于食品加工领域：在肉制品或乳制品中加入可溶性膳食纤维，不仅能够改善质构特性和口感，而且同时满足了人体对动物性和植物性营养成分的需求。青稞若叶是膳食纤维的丰富来源，其总膳食纤维含量达叶片干重的近50％，但是可溶性膳食纤维含量不到叶片干重的2％，鉴于可溶性膳食纤维具有诸多生理功效及良好加工特性，提高青稞若叶粉的可溶性膳食纤维含量就十分必要。提高可溶性膳食纤维的含量的方法有很多：物理方法，通过高温高压及强剪切力作用使大分子部分转化为小分子；化学方法，通过强酸或强碱断裂原有的糖苷键产生新还原性末段降低大分子聚合度以提高水溶性；微生物发酵法，利用微生物生长过程中消耗原料中的碳氮源减少其他非纤维成分的同时分泌酶水解破坏部分长链结构提高可溶性膳食纤维含量；酶法，通过体系外加酶作用于不溶性膳食纤维β-1,4糖苷键打断大分子结构提高溶解性。尽管化学法、微生物发酵法、酶法都是通过降低大分子结构来提高可溶性膳食纤维的含量，但每种方法攻击的反应位点具有专一性，因此难以通过单一的修饰方式来获得最佳提取率。而本发明创新性的采用发酵-化学-酶法联合制备方法，综合生物、化学、酶学的优势，达到高效制备可溶性膳食纤维含量、改善其理化性质及生理功能的目的。
发明内容
针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
本发明提供了一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，所述制备方法包括如下步骤：
步骤1、原料预处理：将冷冻干燥后的青稞若叶苗粉碎、过筛；
步骤2、发酵：采用米根霉对步骤1所得的青稞若叶粉进行发酵后灭菌；
步骤3、酸解：向步骤2所得发酵产物加入适量的水，用盐酸调节pH进行酸解；
步骤4、酶解：向步骤3产物加入木聚糖酶和纤维素酶；
步骤5、醇沉：对步骤4所得产物进行抽滤，得滤液，向所得滤液滴加乙醇，静置过夜后离心，得沉淀；
步骤6、真空冷冻干燥：将所得沉淀复溶，旋蒸浓缩后真空冷冻干燥。
优选地，步骤1中，所述青稞若叶苗是指播种后长至15-30cm的青稞苗；所述粉碎采用多次粉碎处理，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s；所述过筛为过45目筛。
优选地，步骤2中，发酵具体操作为：在超净工作台中，将4℃保存的米根霉接种于PDA斜面试管培养基上，28℃培养7d，待其长出成熟的孢子后用无菌水冲洗PDA斜面，收集孢子，适当稀释使孢子浓度在108-109个/mL，按1:50(v:v)的比例将孢子悬浮液接种至种子培养基(种子培养基成分：葡萄糖0.5g、蛋白胨0.05g、营养盐溶液5mL、微量元素溶液0.05mL、吐温-80 0.1mL，高压蒸汽灭菌后冷却。其中营养盐溶液：(NH4)2SO4 14g/L、KH2PO4 20g/L、MgSO4·7H2O 3g/L、CaCl2 3g/L、尿素3g/L，微量元素溶液：ZnSO4·7H2O 1.4g/L、MnSO4·H2O1.6g/L、Fe2(SO4)3·7H2O 5g/L、CoCl2·H2O 3.7g/L)，培养48h后，取适量种子培养液接种至灭菌的青稞若叶粉中，28℃培养2-7d后灭菌。
优选地，步骤3中，酶解的具体方法为：按15-30mL/g青稞若叶粉的比例加水，用盐酸调节pH至1-3，缓慢升温至60-90℃，保温1-3h。
优选地，步骤4中，所述酶解具体方法为：用NaOH溶液调节pH至5，加入200-1600U/g青稞若叶粉的木聚糖酶和200-1600U/g青稞若叶粉的纤维素酶，40-60℃保温1-3h后100℃水浴灭酶10-20min。
优选地，步骤5中，所述醇沉的方法具体为：用两层滤纸，减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出，在200-400转/分钟磁力搅拌下，滴加滤液4倍体积的95％乙醇，4000rpm/min离心15-30min。
优选地，步骤6中，真空冷冻干燥的具体方法为：用蒸馏水复溶沉淀，蒸馏水与沉淀的体积比为50:1-100：1，50-60℃旋蒸浓缩至总体积的为10％-20％，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥24-48h。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
(1)本发明方法所用的青稞若叶，天然健康、绿色安全、成本低廉，且富含不溶性膳食纤维，是生产可溶性膳食纤维的理想原料；
(2)本发明反应过程安全高效、步骤简单、容易实现，且生产效率高、运行成本低；
(3)本发明联合使用了物理法、微生物发酵法、化学法和酶法对青稞若叶粉不可溶性膳食纤维进行改性，可显著提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量；
(4)本发明制得的可溶性膳食纤维具有多种用途，可以用于食品加工领域，或者作为一种新型健康食品或添加剂，可以降低胆固醇、减少血糖波动、防止胰岛素分泌紊乱、预防癌症等。
附图说明
通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显：
图1为本发明实施例和对比例的效果图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变化和改进。这些都属于本发明的保护范围。
青稞若叶粉可溶性膳食纤维含量使用爱尔兰Megazyme公司的试剂盒进行测定，测定步骤1所得的青稞若叶粉中可溶性膳食纤维的含量为1.74％，如图1所示的原青稞若叶粉组。
实施例1
本实施例涉及一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、在超净工作台中，将4℃保存的米根霉接种于PDA斜面试管培养基上，28℃培养7d，待其长出成熟的孢子后用无菌水冲洗PDA斜面，收集孢子，适当稀释使孢子浓度在108-109个/mL，按1:50(v:v)的比例将孢子悬浮液接种至种子培养基(种子培养基成分：葡萄糖0.5g、蛋白胨0.05g、营养盐溶液5mL、微量元素溶液0.05mL、吐温-80 0.1mL，高压蒸汽灭菌后冷却。其中营养盐溶液：(NH4)2SO4 14g/L、KH2PO4 20g/L、MgSO4·7H2O 3g/L、CaCl2 3g/L、尿素3g/L，微量元素溶液：ZnSO4·7H2O 1.4g/L、MnSO4·H2O 1.6g/L、Fe2(SO4)3·7H2O 5g/L、CoCl2·H2O 3.7g/L)，培养48h后，取0.8mL种子培养液接种至2g灭菌的青稞若叶粉中，28℃培养4d后灭菌；
步骤3、向步骤2所得发酵产物加入50mL蒸馏水，用盐酸调节pH至2，缓慢升温至80℃，保温2h；
步骤4、用NaOH溶液调节pH至5，加入800U/g青稞若叶粉的木聚糖酶和400U/g青稞若叶粉的纤维素酶，50℃保温2h后100℃水浴灭酶20min。
步骤5、用两层滤纸，对步骤4所得产物减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出，在300转/分钟磁力搅拌下，滴加滤液4倍体积的95％乙醇，4000rpm/min离心20min。
步骤6、用50mL蒸馏水将沉淀复溶，55℃旋蒸浓缩至5mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥48h。
实施效果：本实施例青稞若叶粉可溶性膳食纤维得率为27.76％，比处理前1.74％的可溶性膳食纤维含量有显著提高。
实施例2
本实施例涉及一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、在超净工作台中，将4℃保存的米根霉接种于PDA斜面试管培养基上，28℃培养7d，待其长出成熟的孢子后用无菌水冲洗PDA斜面，收集孢子，适当稀释使孢子浓度在108-109个/mL，按1:50(v:v)的比例将孢子悬浮液接种至种子培养基(种子培养基成分：葡萄糖0.5g、蛋白胨0.05g、营养盐溶液5mL、微量元素溶液0.05mL、吐温-80 0.1mL，高压蒸汽灭菌后冷却。其中营养盐溶液：(NH4)2SO4 14g/L、KH2PO4 20g/L、MgSO4·7H2O 3g/L、CaCl2 3g/L、尿素3g/L，微量元素溶液：ZnSO4·7H2O 1.4g/L、MnSO4·H2O 1.6g/L、Fe2(SO4)3·7H2O 5g/L、CoCl2·H2O 3.7g/L)，培养48h后，取0.8mL种子培养液接种至2g灭菌的青稞若叶粉中，28℃培养2d后灭菌；
步骤3、向步骤2所得发酵产物加入50mL蒸馏水，用盐酸调节pH至1，缓慢升温至60℃，保温3h；
步骤4、用NaOH溶液调节pH至5，加入1600U/g青稞若叶粉的木聚糖酶和800U/g青稞若叶粉的纤维素酶，50℃保温2h后100℃水浴灭酶20min。
步骤5、用两层滤纸，对步骤4所得产物减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出，在300转/分钟磁力搅拌下，滴加滤液4倍体积的95％乙醇，4000rpm/min离心20min。
步骤6、用100mL蒸馏水将沉淀复溶，55℃旋蒸浓缩至5mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥48h。
实施效果：本实施例青稞若叶粉可溶性膳食纤维得率为25.04％，比处理前1.74％的可溶性膳食纤维含量有显著提高。
实施例3
本实施例涉及一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、在超净工作台中，将4℃保存的米根霉接种于PDA斜面试管培养基上，28℃培养7d，待其长出成熟的孢子后用无菌水冲洗PDA斜面，收集孢子，适当稀释使孢子浓度在108-109个/mL，按1:50(v:v)的比例将孢子悬浮液接种至种子培养基(种子培养基成分：葡萄糖0.5g、蛋白胨0.05g、营养盐溶液5mL、微量元素溶液0.05mL、吐温-80 0.1mL，高压蒸汽灭菌后冷却。其中营养盐溶液：(NH4)2SO4 14g/L、KH2PO4 20g/L、MgSO4·7H2O 3g/L、CaCl2 3g/L、尿素3g/L，微量元素溶液：ZnSO4·7H2O 1.4g/L、MnSO4·H2O 1.6g/L、Fe2(SO4)3·7H2O 5g/L、CoCl2·H2O 3.7g/L)，培养48h后，取0.8mL种子培养液接种至2g灭菌的青稞若叶粉中，28℃培养7d后灭菌；
步骤3、向步骤2所得发酵产物加入30mL蒸馏水，用盐酸调节pH至3，缓慢升温至90℃，保温1h；
步骤4、用NaOH溶液调节pH至5，加入800U/g青稞若叶粉的木聚糖酶和200U/g青稞若叶粉的纤维素酶，50℃保温3h后100℃水浴灭酶15min。
步骤5、用两层滤纸，对步骤4所得产物减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出，在400转/分钟磁力搅拌下，滴加滤液4倍体积的95％乙醇，4000rpm/min离心15min。
步骤6、用50mL蒸馏水将沉淀复溶，55℃旋蒸浓缩至10mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥48h。
实施效果：本实施例青稞若叶粉可溶性膳食纤维得率为26.56％，比处理前1.74％的可溶性膳食纤维含量有显著提高。
实施例4
本实施例涉及一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、在超净工作台中，将4℃保存的米根霉接种于PDA斜面试管培养基上，28℃培养7d，待其长出成熟的孢子后用无菌水冲洗PDA斜面，收集孢子，适当稀释使孢子浓度在108-109个/mL，按1:50(v:v)的比例将孢子悬浮液接种至种子培养基(种子培养基成分：葡萄糖0.5g、蛋白胨0.05g、营养盐溶液5mL、微量元素溶液0.05mL、吐温-80 0.1mL，高压蒸汽灭菌后冷却。其中营养盐溶液：(NH4)2SO4 14g/L、KH2PO4 20g/L、MgSO4·7H2O 3g/L、CaCl2 3g/L、尿素3g/L，微量元素溶液：ZnSO4·7H2O 1.4g/L、MnSO4·H2O 1.6g/L、Fe2(SO4)3·7H2O 5g/L、CoCl2·H2O 3.7g/L)，培养48h后，取0.8mL种子培养液接种至2g灭菌的青稞若叶粉中，28℃培养5d后灭菌；
步骤3、向步骤2所得发酵产物加入60mL蒸馏水，用盐酸调节pH至1，缓慢升温至60℃，保温1h；
步骤4、用NaOH溶液调节pH至5，加入200U/g青稞若叶粉的木聚糖酶和1600U/g青稞若叶粉的纤维素酶，50℃保温3h后100℃水浴灭酶20min。
步骤5、用两层滤纸，对步骤4所得产物减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出，在400转/分钟磁力搅拌下，滴加滤液4倍体积的95％乙醇，4000rpm/min离心20min。
步骤6、用60mL蒸馏水将沉淀复溶，55℃旋蒸浓缩至5mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥24h。
实施效果：本实施例青稞若叶粉可溶性膳食纤维得率为24.63％，比处理前1.74％的可溶性膳食纤维含量有显著提高。
对比例1
本实施例涉及一种提高青稞若叶粉可溶性膳食纤维含量的方法，与实施例1的方法基本相同，不同之处仅在于：本对比例的步骤4中仅采用木聚糖酶酶解。所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、称取步骤1所得的青稞若叶粉2g，加入50mL水，加入250U/g青稞若叶粉的耐高温α-淀粉酶，100℃水浴1h；水浴温度调至60℃，加入1000U/g青稞若叶粉的木瓜蛋白酶，水浴1h；用0.561M盐酸调pH至4.5，加入300U/g青稞若叶粉的糖化酶，60℃水浴1h；100℃水浴灭酶15min；
步骤3、调节pH值至5.0；
步骤4、加入800U/g青稞若叶粉的木聚糖酶，50℃振荡水浴3h；100℃水浴灭酶15min；
步骤5、用两层滤纸对酶解液进行减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出；
步骤6、在300转/分钟磁力搅拌下，缓慢滴加滤液4倍体积的95％乙醇，静置过夜后4000rpm/min离心20min；
步骤7、用50mL蒸馏水将沉淀复溶，50-60℃旋蒸浓缩至5-mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥48h。
实施效果：本对比例青稞若叶粉可溶性膳食纤维得率为18.87％，而实施例1可溶性膳食纤维得率为27.76％，本对比例的可溶性膳食纤维得率较低。
对比例2
本对比例涉及一种提高青稞若叶粉可溶性膳食纤维含量的方法，与实施例1的方法基本相同，不同之处仅在于：本对比例的步骤4中仅采用纤维素酶酶解。所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、称取步骤1所得的青稞若叶粉2g，加入50mL水，加入250U/g青稞若叶粉的耐高温α-淀粉酶，100℃水浴1h；水浴温度调至60℃，加入1000U/g青稞若叶粉的木瓜蛋白酶，水浴1h；用0.561M盐酸调pH至4.5，加入300U/g青稞若叶粉的糖化酶，60℃水浴1h；100℃水浴灭酶15min；
步骤3、调节pH值至5.0；
步骤4、加入400U/g青稞若叶粉的纤维素酶，50℃振荡水浴3h；100℃水浴灭酶15min；
步骤5、用两层滤纸对酶解液进行减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出；
步骤6、在300转/分钟磁力搅拌下，缓慢滴加滤液4倍体积的95％乙醇，静置过夜后4000rpm/min离心20min；
步骤7、用50mL蒸馏水将沉淀复溶，55℃旋蒸浓缩至5-mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥48h。
实施效果：本对比例的青稞若叶粉中可溶性膳食纤维得率为19.45％，而实施例1的可溶性膳食纤维得率为27.76％，本对比例的可溶性膳食纤维得率较低。
对比例3
本对比例涉及一种提高青稞若叶粉可溶性膳食纤维含量的方法，所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、称取步骤1所得的青稞若叶粉2g，加入50mL水，加入250U/g青稞若叶粉的耐高温α-淀粉酶，100℃水浴1h；水浴温度调至60℃，加入1000U/g青稞若叶粉的木瓜蛋白酶，水浴1h；用0.561M盐酸调pH至4.5，加入300U/g青稞若叶粉的糖化酶，60℃水浴1h；100℃水浴灭酶15min；
步骤3、80℃水浴2h；
步骤5、用两层滤纸对酶解液进行减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出；
步骤6、在300转/分钟磁力搅拌下，缓慢滴加滤液4倍体积的95％乙醇，静置过夜后4000rpm/min离心20min；
步骤7、用50mL蒸馏水将沉淀复溶，55℃旋蒸浓缩至5mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥48h。
实施效果：本对比例的青稞若叶粉中可溶性膳食纤维得率为4.17％，而实施例1的可溶性膳食纤维得率为27.76％，本对比例的可溶性膳食纤维得率低。
对比例4
本对比例涉及一种提高青稞若叶粉可溶性膳食纤维含量的方法，所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、称取步骤1所得的青稞若叶粉2g，加入50mL水，加入250U/g青稞若叶粉的耐高温α-淀粉酶，100℃水浴1h；水浴温度调至60℃，加入1000U/g青稞若叶粉的木瓜蛋白酶，水浴1h；用0.561M盐酸调pH至4.5，加入300U/g青稞若叶粉的糖化酶，60℃水浴1h；100℃水浴灭酶15min；
步骤3、4000rpm/min离心20min，收集滤液，残渣用50mL0.5M的NaOH复溶，80℃水浴2h；
步骤4、用两层滤纸对酶解液进行减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出；
步骤5、合并步骤3和4的滤液，在300转/分钟磁力搅拌下，缓慢滴加滤液4倍体积的95％乙醇，静置过夜后4000rpm/min离心20min；
步骤7、用50mL蒸馏水将沉淀复溶，55℃旋蒸浓缩至5-mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥48h。
实施效果：本对比例的青稞若叶粉中可溶性膳食纤维得率为19.14％，而实施例1可溶性膳食纤维得率为27.76％，本对比例的可溶性膳食纤维得率较低。
对比例5
本对比例涉及一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、在超净工作台中，将4℃保存的米根霉接种于PDA斜面试管培养基上，28℃培养7d，待其长出成熟的孢子；
步骤3、用无菌水冲洗PDA斜面，收集孢子，加入玻璃珠分散孢子，适当稀释，用血球计数板计数，使孢子浓度在108-109个/mL，取1mL孢子悬浮液接种至50mL种子培养基(种子培养基成分：葡萄糖0.5g、蛋白胨0.05g、营养盐溶液5mL、微量元素溶液0.05mL、吐温-800.1mL，高压蒸汽灭菌后冷却。其中营养盐溶液：(NH4)2SO4 14g/L、KH2PO4 20g/L、MgSO4·7H2O 3g/L、CaCl2 3g/L、尿素3g/L，微量元素溶液：ZnSO4·7H2O 1.4g/L、MnSO4·H2O 1.6g/L、Fe2(SO4)3·7H2O 5g/L、CoCl2·H2O 3.7g/L)，培养48h；
步骤4、称取步骤1所得的青稞若叶粉2g于120mm玻璃培养皿，加入6mL水混合均匀后121℃高压蒸汽灭菌；
步骤5、在超净工作台中向步骤4获得的灭菌后的青稞若叶粉中接入步骤3的种子培养液0.8mL，28℃培养4d后灭菌；
步骤6、加入50mL水80℃水浴2h，4000rpm/min离心15min，收集上清液；
步骤7、在300转/分钟磁力搅拌下，向上清液缓慢滴加滤液4倍体积的95％乙醇，静置过夜后4000rpm/min离心20min；
步骤8、用50mL蒸馏水将沉淀复溶，55℃旋蒸浓缩至5-mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥48h。
实施效果：本对比例的青稞若叶粉中可溶性膳食纤维得率为14.75％，而实施例1可溶性膳食纤维得率为27.76％，本对比例的可溶性膳食纤维得率低。
对比例6
本对比例涉及一种提高青稞若叶粉可溶性膳食纤维含量的方法，所述步骤如下：
步骤1、将冷冻干燥后的青稞若叶苗多次粉碎，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s，后过45目筛；
步骤2、称取步骤1所得的青稞若叶粉2g，置于0.235MPa、121℃中30min；
步骤3、加入50mL水，加入250U/g青稞若叶粉的耐高温α-淀粉酶，100℃水浴1h；水浴温度调至60℃，加入1000U/g青稞若叶粉的木瓜蛋白酶，水浴1h；用0.561M盐酸调pH至4.5，加入300U/g青稞若叶粉的糖化酶，60℃水浴1h；100℃水浴灭酶15min；
步骤5、用两层滤纸对酶解液进行减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出；
步骤6、在300转/分钟磁力搅拌下，缓慢滴加滤液4倍体积的95％乙醇，静置过夜后4000rpm/min离心20min；
步骤7、用50mL蒸馏水将沉淀复溶，55℃旋蒸浓缩至5-mL，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥48h。
实施效果：本对比例的青稞若叶粉中可溶性膳食纤维得率为18.80％，而实施例1可溶性膳食纤维得率为27.76％，本对比例的可溶性膳食纤维得率低。
对比例7
本对比例涉及一种提高青稞若叶粉可溶性膳食纤维含量的方法，与实施例1的方法基本相同，不同之处仅在于：本对比例不进行步骤3的处理。
实施效果：本对比例的青稞若叶粉中可溶性膳食纤维得率为20.54％，而实施例1可溶性膳食纤维得率为27.76％，本对比例的可溶性膳食纤维得率低。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改，这并不影响本发明的实质内容。在不冲突的情况下，本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。

Claims (7)

1.一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
步骤1、原料预处理：将冷冻干燥后的青稞若叶苗粉碎、过筛；
步骤2、发酵：采用米根霉对步骤1所得的青稞若叶粉进行发酵后灭菌；
步骤3、酸解：向步骤2所得发酵产物加入适量的水，用盐酸调节pH进行酸解；
步骤4、酶解：向步骤3产物加入木聚糖酶和纤维素酶；
步骤5、醇沉：对步骤4所得产物进行抽滤，得滤液，向所得滤液滴加乙醇，静置过夜后离心，得沉淀；
步骤6、真空冷冻干燥：将所得沉淀复溶，旋蒸浓缩后真空冷冻干燥。
2.根据权利要求1所述的提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，其特征在于，步骤1中，所述青稞若叶苗是指播种后长至15-30cm的青稞苗；所述粉碎采用多次粉碎处理，每次粉碎处理的时间为5-15s，粉碎转速为15000-25000r/min，每次粉碎处理的间隔时间为15-25s；所述过筛为过45目筛。
3.根据权利要求1所述的提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，其特征在于，步骤2中，发酵具体操作为：在超净工作台中，将4℃保存的米根霉接种于PDA斜面试管培养基上，28℃培养7d，待其长出成熟的孢子后用无菌水冲洗PDA斜面，收集孢子，适当稀释使孢子浓度在108-109个/mL，按1:50(v:v)的比例将孢子悬浮液接种至种子培养基(种子培养基成分：葡萄糖0.5g、蛋白胨0.05g、营养盐溶液5mL、微量元素溶液0.05mL、吐温-80 0.1mL，高压蒸汽灭菌后冷却。其中营养盐溶液：(NH4)2SO4 14g/L、KH2PO4 20g/L、MgSO4·7H2O 3g/L、CaCl2 3g/L、尿素3g/L，微量元素溶液：ZnSO4·7H2O 1.4g/L、MnSO4·H2O 1.6g/L、Fe2(SO4)3·7H2O 5g/L、CoCl2·H2O 3.7g/L)，培养48h后，取适量种子培养液接种至灭菌的青稞若叶粉中，28℃培养2-7d后灭菌。
4.根据权利要求1所述的提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，其特征在于，步骤3中，酶解的具体方法为：按15-30mL/g青稞若叶粉的比例加水，用盐酸调节pH至1-3，缓慢升温至60-90℃，保温1-3h。
5.根据权利要求1所述的提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，其特征在于，步骤4中，所述酶解具体方法为：用NaOH溶液调节pH至5，加入200-1600U/g青稞若叶粉的木聚糖酶和200-1600U/g青稞若叶粉的纤维素酶，40-60℃保温1-3h后100℃水浴灭酶10-20min。
6.根据权利要求1所述的提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，其特征在于，步骤5中，所述醇沉的方法具体为：用两层滤纸，减压抽滤，收集滤液，至滤饼中无液体继续滤出，在200-400转/分钟磁力搅拌下，滴加滤液4倍体积的95％乙醇，4000rpm/min离心15-30min。
7.根据权利要求1所述的一种提高青稞若叶粉中可溶性膳食纤维含量的方法，其特征在于，步骤6中，真空冷冻干燥的具体方法为：用蒸馏水复溶沉淀，蒸馏水与沉淀的体积比为50:1-100：1，50-60℃旋蒸浓缩至总体积的为10％-20％，-20℃冷冻后，真空冷冻干燥24-48h。
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