CN115569145A - 聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在制备预防和治疗房颤心房纤维化的产品中的应用 - Google Patents
聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在制备预防和治疗房颤心房纤维化的产品中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在制备预防和治疗房颤心房纤维化的产品中的应用。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，涉及聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐的一种新用途，具体涉及聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在制备预防和治疗房颤心房纤维化的药物、保健品或饮食补充剂中的应用。
背景技术
房颤是临床上最常见的心律失常，可引起血流动力学不稳定、血液高凝状态，易导致脑卒中、血栓栓塞、心力衰竭等并发症，具有高发病率、高致残率和高病死率的特点。房颤不仅为社会增加经济负担，而且严重威胁人类的生命健康。尽管近年来房颤的治疗取得了长足发展，但其治疗仍存在局限性，如抗心律失常药物治疗副作用多，导管消融术具有一定的复发率等，导致房颤的治疗效果不甚理想。阐明房颤发病机制，为房颤的精准治疗寻求有效干预靶点尤为重要。
研究表明，心房电重构、结构重构、自主神经系统改变和异常的钙离子电流相互协同在房颤的发病机制中发挥重要作用。其中，结构重构是房颤发生和维持的关键，而心房纤维化是结构重构最显著的特征。目前已有大量证据表明心房纤维化对促进房颤的复杂折返机制和维持起到关键作用，改善心房纤维化是治疗房颤的关键策略。因此，研发预防和治疗房颤心房纤维化的新型有效的药物、保健品或饮食补充剂具有重要意义。
聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐是一种自海洋褐藻提取分离，并经进一步降解、分级和化学修饰获得的多糖，是由α-1,4-L-古罗糖醛酸和β-1,4-D-甘露糖醛酸连接的线性聚合物。目前国内外文献报告中尚未见将其应用于房颤心房纤维化方面的报道。
发明内容
本发明的旨在提供聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在制备预防和治疗房颤心房纤维化的药物、保健品或饮食补充剂中的应用，即应用聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐改善房颤心房纤维化。
本发明提供了一种活性物质的用途，其特征在于：
上述活性物质为：聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐，或其异构体；
上述用途包含如下用途中的至少一种：
用途1.用于制备治疗、和/或缓解、和/或预防房颤心房纤维化的药物；
用途2.用于制备治疗、和/或缓解、和/或预防房颤心房纤维化的保健品；
用途3.用于制备治疗、和/或缓解、和/或预防房颤心房纤维化的饮食补充剂。
上述聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐采用201710533289.5专利的产品和方法，即、其分子骨架为α-1,4-L-古罗糖醛酸和β-1,4-D-甘露糖醛酸连接的线性聚合物，分子骨架中60％以上为α-1,4-L-古罗糖醛酸，其余为β-1,4-D-甘露糖醛酸，其中聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐中20％～60％的羧基被丙二醇酯化，糖残基中C2和C3位至少有一个-OSO3-，有机硫的含量为5％～20％，重均分子量为5～50KDa。
在一般方法中，该聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐是以聚古罗糖醛酸为原料，经丙二醇酯化和硫酸化修饰制备得到，其具体的制备方法可以为如下所示的方式(即、201710533289.5的专利方法)，也可以为其他可形成上述结构的方式：即、在反应容器中加入1,2-环氧丙烷,然后搅拌加入氢氧化钠，搅拌充分后加入聚古罗糖醛酸，上述组分混合形成的混合物回流反应3～20h；反应结束后，用乙醇溶液洗涤，真空干燥得到聚古罗糖醛酸丙酯；
在反应容器中加入甲酰胺，在冰浴中缓慢滴加氯磺酸，然后再投入上述的聚古罗糖醛酸丙酯；上述组分混合形成的混合物在50～90℃搅拌反应1～5h；反应结束后，冷却，乙醇沉淀，过滤，洗涤，沉淀用水复溶后，缓慢加入碱调节溶液pH至8～10转化成钠盐；醇沉结晶，沉淀干燥即得上述聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐。
上述步骤中聚古罗糖醛酸与1,2-环氧内烷的质量比为1:2.5～6.0，聚古罗糖醛酸与氢氧化钠的质量比为1:0.005～0.01。
上述聚古罗糖醛酸丙酯与甲酰胺的质量比为1:4～12，聚古罗糖醛酸与氯磺酸的质量比为1:1～3。
本发明提供了一种活性物质的用途，其特征在于：
上述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1.用于制备降低房颤诱发频率的药物；
用途2.用于制备降低房颤诱发频率的保健品；
用途3.用于制备降低房颤诱发频率的饮食补充剂。
本发明提供了一种活性物质的用途，其特征在于：
上述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1.用于制备缩短房颤的持续时间的药物；
用途2.用于制备缩短房颤的持续时间的保健品；
用途3.用于制备缩短房颤的持续时间的饮食补充剂。
本发明提供了一种活性物质的用途，其特征在于：
上述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备抑制心房成纤维细胞中TGF-β1/Smad2/3信号通路激活的药物；
用途2、用于制备抑制心房成纤维细胞中TGF-β1/Smad2/3信号通路激活的保健品；
用途3、用于制备抑制心房成纤维细胞中TGF-β1/Smad2/3信号通路激活的饮食补充剂。
本发明提供了一种活性物质的用途，其特征在于：
上述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞增殖的药物；
用途2、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞增殖的保健品；
用途3、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞增殖的饮食补充剂。
本发明提供了一种活性物质的用途，其特征在于：
上述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞迁移的药物；
用途2、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞迁移的保健品；
用途3、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞迁移的饮食补充剂。
本发明提供了一种活性物质的用途，其特征在于：
上述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞的α-SMA的mRNA和蛋白表达的药物；
用途2、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞的α-SMA的mRNA和蛋白表达的保健品；
用途3、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞的α-SMA的mRNA和蛋白表达的饮食补充剂。
本发明提供了一种活性物质的用途，其特征在于：
上述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备下调TGF-β1诱导的心房成纤维细胞中羟脯氨酸分泌、胶原I及结缔组织生长因子CTGF的mRNA表达的药物；
用途2、用于制备下调TGF-β1诱导的心房成纤维细胞中羟脯氨酸分泌、胶原I及结缔组织生长因子CTGF的mRNA表达的保健品；
用途3、用于制备下调TGF-β1诱导的心房成纤维细胞中羟脯氨酸分泌、胶原I及结缔组织生长因子CTGF的mRNA表达的饮食补充剂。
本发明的作用和效果：
本发明采用心房纤维化细胞及动物模型，探索了聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐对TGF-β1诱导的心房成纤维细胞的增殖、迁移、表型转化和分泌细胞外基质能力的影响，探索其对心房特异性纤维化小鼠的心房纤维化程度、房颤诱发频率和持续时间的调控作用及机制。
通过研究发现，聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐对心房纤维化具有显著保护作用，其可通过抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路激活，抑制心房成纤维细胞的增殖、迁移、表型转化和分泌细胞外基质的能力，进而明显改善心房纤维化过程和房颤的触发。
本发明产品来源于海洋天然产物，具有资源丰富、易于产业化、安全有效等优势，在制备预防和治疗房颤心房纤维化的药物、保健品或饮食补充剂方面具有广阔的开发应用前景。
附图说明
图1：聚古罗糖醛丙酯硫酸盐对心房成纤维细胞增殖的影响。
图2：聚古罗糖醛丙酯硫酸盐对心房成纤维细胞迁移能力的影响。
图3：聚古罗糖醛丙酯硫酸盐对心房成纤维细胞中α-SMA的mRNA及蛋白表达的影响。
图4：聚古罗糖醛丙酯硫酸盐对心房成纤维细胞分泌羟脯氨酸分泌及胶原I(COL1a1)和结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA表达的影响。
图5：聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐经腹腔注射心房特异性纤维化小鼠后，对小鼠心房纤维化程度、房颤诱发频率和持续时间的影响。
图6：聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐预处理心房成纤维细胞后经TGF-β1刺激，对心房成纤维细胞中TGF-β1和p-Smad2/3的蛋白表达的影响。
具体实施方式
实施例1：聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐抗房颤心房纤维化的药效学研究
1.材料和方法
1.1主要材料和试剂
胎牛血清、DMEM-F12培养基、0.25％EDTA-胰蛋白酶购自美国Gibco公司；II型胶原酶购自美国Worthington Biochemical公司；TGFβ1购自美国Peprotech公司；TGF-β1抗体购自美国Abcam公司；p-Smad2/3、Smad2/3、α-SMA及GAPDH抗体购自美国Cell SignalingTechnology公司；山羊抗兔二抗、SDS-PAGE凝胶试剂盒购于碧云天公司；PDVF膜购于Merck公司；ECL发光液购于Millipore公司；其他生化试剂均为进口分装或国内分析纯。
聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐，依据201710533289.5，实施例1方法制备所得。
1.2实验方法
1.2.1原代心房成纤维细胞的提取
取20只新生1～3天的SD大鼠乳鼠，75％乙醇浸泡消毒，无菌眼科剪开胸、顺势快速挤出并剪下心脏，去除残留的大血管和心外膜结缔组织，4℃预冷的PBS溶液反复洗涤心脏后仅保留心房组织，眼科剪将心房剪成1mm3的组织块，加入4ml0.125％含EDTA的胰蛋白酶，37℃消化5min。利用PBS溶液去除胰蛋白酶消化液后，加入10ml含0.1％胶原酶II的DMEM低糖培养基，在37℃水浴中消化1.5h，吹打，经自然沉降后收集细胞悬液。细胞悬液经1000rpm离心10min，弃上清、细胞重悬后，置于细胞培养皿中孵育1小时后，更换新的DMEM-F12培养基。利用差速分离获取心房成纤维细胞。
1.2.2细胞培养与处理
心房成纤维细胞利用含有10％胎牛血清和1％青霉素、链霉素的DMEM-F12培养基进行培养，待第2～3代接种到6孔板或细胞培养皿中的细胞密度达到60％～70％，对细胞进行相应处理。心房成纤维细胞分为对照组、TGFβ1组(5ng/mL)和TGFβ1(5ng/mL)+PGGS组(100μg/mL，预处理2h)，24h后收集细胞或培养基进行后续研究。
1.2.3 CCK-8法检测心房成纤维细胞增殖
第2～3代心房成纤维细胞以3×103个细胞/孔的密度接种于96孔细胞培养板中，细胞分组包括对照组、TGFβ1组(5ng/mL)和TGFβ1(5ng/mL)+PGGS组(100μg/mL，预处理2h)，每组设置6个复孔。细胞培养箱中孵育24h后，各孔弃去培养基，加入100μl含CCK-8的DMEM-F12培养基(CCK-8与DMEM-F12培养基比例为1:9)，置于细胞培养箱中孵育2h，用酶标仪检测各孔细胞450nm波长处吸光度值。
1.2.4 Transwell细胞迁移实验
选用8μm孔径的Transwell小室，将不含胎牛血清的心房成纤维细胞悬液(2×104，100μl)接种于Transwell小室上室中，下室中加入600μl不含胎牛血清的含PBS或5ng/mLTGFβ1的DMEM-F12培养基。细胞培养箱中培养24h后，吸干上室液体，用PBS溶液洗涤3遍，转移至预先加入约800μl10％多聚甲醛的24孔细胞培养板内，室温固定15min，吸干上室固定液，适当风干后转移至预先加入约800μl0.1％结晶紫的24孔细胞培养板内，室温染色15-20min。清水冲洗上室数次，取出上室，吸去上室液体，并用棉签小心擦去上室底部表面未迁移的细胞，高倍显微镜下拍摄并计数迁移的心房成纤维细胞。
1.2.5实时定量PCR检测
利用Trizol试剂从对照组、TGFβ1组(5ng/mL)和TGFβ1(5ng/mL)+PGGS组(100μg/mL，预处理2h)的心房成纤维细胞中提取总RNA。1000ng RNA逆转录为cDNA，cDNA稀释5倍后作为实时定量PCR模板，实时定量PCR反应体系为：2μl模板，0.4μl上游引物，0.4μl下游引物，0.4μlDyeII，10μl SBYR green，6.8μlDEPC水。对应纤维化标志基因的扩增引物见表1-2，GAPDH作为内参。
表1-2实时定量PCR引物
1.2.6 Western Blot检测
弃去6孔细胞培养板中的培养基，经4℃预冷的PBS溶液洗涤后，每孔加入含1mMPMSF的细胞裂解液100μl，冰上充分裂解30min，4℃，12000rpm离心20min后小心吸取上清，制备心房成纤维细胞总蛋白提取液。使用BCA蛋白质浓度测定试剂盒测定各样品蛋白浓度。制备12.5％SDS-PAGE凝胶，经过上样、转膜至PVDF膜、封闭、抗体孵育、化学发光检测等，保存显影的图像信息，用AlphaEaseFC软件处理系统定量分析目标带的光密度值。
1.2.7羟脯氨酸含量测定
收集对照组、TGFβ1组(5ng/mL)和TGFβ1(5ng/mL)+PGGS组(100μg/mL，预处理2h)心房成纤维细胞的培养基，按照羟脯氨酸检测试剂盒说明书操作，定量评估各组心房成纤维细胞的培养基中羟脯氨酸的含量。
1.2.8心房特异性纤维化模型选择及动物分组
本研究中的心房特异性纤维化模型选定心肌特异性过表达TGFβ1的转基因小鼠MHC-TGFcys33ser(该小鼠获赠于印第安纳大学医学院LorenJ.Field教授，Circ Res.2004:94(11):1458-1465)。动物实验分为三组，即野生型小鼠(WT组)、心房特异性纤维化的MHC-TGFcys33ser小鼠(Tx组)以及聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐干预组(Tx+PGGS组)，以上均选择3.5月龄雄性小鼠。Tx+PGGS组小鼠每日予50mg/kg PGGS腹腔注射处理，WT组和Tx组小鼠给予等体积的生理盐水腹腔注射，28天后离断脊髓处死小鼠。
1.2.9天狼猩红染色
小鼠处死后解剖并迅速取出心脏，用PBS溶液反复冲洗心脏后置于4％多聚甲醛固定液中，制作心脏组织标本石蜡切片，石蜡切片烤片30min，梯度乙醇水化脱蜡，蒸馏水冲洗，天青石蓝染色10min，蒸馏水冲洗，天狼猩红苦味酸染色20min，蒸馏水冲洗，苏木素染色10min，梯度乙醇脱水分化，二甲苯透明10min，通风并封片，显微镜下观察染色情况。采用Image Pro Plus图像分析软件对心房间质纤维化程度进行量化，胶原容积分数＝胶原纤维面积/视野总面积×100％。
1.2.10房颤诱发频率和房颤持续时间测定
各组小鼠经2％异氟烷气体麻醉后，在倒置显微镜下，将电极导管(1.1F,美国Millar公司)顺着右侧颈外静脉轻轻推入小鼠右心房。导管通过自动化接口与数据采集系统相连，通过电极导管施加5s快速起搏脉冲串，第一个5s的突发起搏脉冲串周期为50ms，接下来每次周期递减2ms，直到周期为10ms的最后一个5s脉冲刺激。当心房节律出现明显的不规则且持续时间超过一秒时，视为成功诱发房颤。通过计算数据采集系统所收集到的数据分析各组小鼠的房颤诱发率和平均房颤持续时间。
1.2.11统计学处理
采用SPSS 19.0统计软件对数据进行分析。计量资料采用均数±标准误表示，计数数据采用率或百分数(％)表示。正态分布计量资料多组件均数的比较采用单因素方差分析。p<0.05认为差异具有统计学意义。
2.实验结果
2.1聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在心房纤维化细胞模型中可显著抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞增殖
CCK-8对各组心房成纤维细胞的增殖情况检测结果见图1。如图1所示，与对照组相比，TGF-β1可促进心房成纤维细胞的增殖，而聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐干预后可明显抑制TGF-β1介导的细胞增殖。
2.2聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在心房纤维化细胞模型中可显著抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞迁移
各组心房成纤维细胞的迁移情况检测结果见图2。如图2所示，与对照组相比，TGF-β1可明显促进心房成纤维细胞的迁移，而聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐干预后可明显抑制TGF-β1介导的细胞迁移。
2.3聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在心房纤维化细胞模型中可显著抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞的α-SMA的mRNA和蛋白表达
实时定量PCR及WesternBlot检测各组心房成纤维细胞中α-SMA的mRNA和蛋白表达结果见图3。如图3所示，与对照组相比，TGF-β1诱导后心房成纤维细胞中α-SMA的mRNA和蛋白表达增加。在此基础上应用聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐干预，可明显逆转TGF-β1介导的成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转化的标志基因α-SMA的表达。
2.3聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在心房纤维化细胞模型中可显著下调TGF-β1诱导的心房成纤维细胞中羟脯氨酸分泌、胶原I(Col1a1)及结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA表达
各组心房成纤维细胞培养基中羟脯氨酸含量测定及实时定量PCR检测各组心房成纤维细胞中Col1a1及CTGF的mRNA表达结果见图4。如图4所示，与对照组相比，TGF-β1诱导后心房成纤维细胞培养基中羟脯氨酸含量明显增加，同时，心房成纤维细胞中Col1a1及CTGF的mRNA表达明显增加。在此基础上应用聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐干预，可明显逆转TGF-β1介导的上述促纤维化作用。
2.4聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐经腹腔注射心房特异性纤维化小鼠后，可明显抑制小鼠的心房纤维化程度，降低小鼠的房颤诱发频率，缩短房颤的持续时间
各组小鼠心房纤维化程度、房颤诱发频率房颤持续时间测定结果见图5。如图5所示，与对照组相比，Tx小鼠表现为心房纤维化程度、房颤的诱发率及持续时间均明显增加。聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐干预后可明显抑制Tx小鼠的心房纤维化程度，同时可显著降低房颤的诱发率及持续时间。
2.5聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐对心房纤维化过程发挥保护作用的机制在于，其可显著抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路激活
聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐预处理心房成纤维细胞后经TGF-β1刺激，对心房成纤维细胞中TGF-β1和p-Smad2/3的蛋白表达的影响见图6。如图6所示，与对照组相比，TGF-β1诱导后心房成纤维细胞中TGF-β1和p-Smad2/3的蛋白表达明显增加。在此基础上应用聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐干预，可明显逆转TGF-β1介导的TGF-β1和p-Smad2/3的蛋白表达量上调。
本实施例通过一系列体外及体内实验对聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐的抗心房纤维化药效进行了系统的观察，实验结果显示：
(1)聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在心房纤维化细胞模型中具有显著的抗纤维化作用，表现为可显著下调TGF-β1诱导的心房成纤维细胞增殖、迁移、表型转化和分泌细胞外基质的能力。
(2)聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐经腹腔注射心房特异性纤维化小鼠后，可明显抑制小鼠的心房纤维化程度，降低小鼠的房颤诱发频率，缩短房颤的持续时间。
(3)聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐对心房纤维化过程发挥保护作用的机制在于，其可显著抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路激活。
综上所述，本发明通过系统化的体内及体外实验证明上述聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐可通过抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路激活，抑制心房成纤维细胞的增殖、迁移、表型转化和分泌细胞外基质的能力，进而明显改善心房纤维化过程和房颤的触发。即、本实施例通过实验证明聚古罗糖醛丙酯硫酸盐在细胞和动物水平证实其可显著抑制房颤心房纤维化过程。
此外，值得注意是，本实施例提供的聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐来源于海洋天然产物，具体地由来源于褐藻中的褐藻胶经降解、分级、化学修饰得到的一种硫酸多糖化合物，资源丰富，毒副作用小，且具有资源丰富，安全有效等诸多优点，可以开发成预防和治疗房颤心房纤维化的药物、保健品或饮食补充剂，具有广阔的市场应用前景。
序列表
<110> 上海交通大学医学院附属新华医院
<120> 聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐在制备预防和治疗房颤心房纤维化的产品中的应用
<160> 8
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 1
Gly Ala Gly Thr Cys Gly Thr Cys Thr Cys Thr Gly Cys Ala Thr Gly
1 5 10 15
Gly Thr Cys Ala
20
<210> 2
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 2
Cys Cys Ala Cys Ala Gly Ala Ala Cys Thr Thr Ala Gly Cys Cys Cys
1 5 10 15
Gly Gly Thr Ala
20
<210> 3
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 3
Thr Cys Gly Ala Thr Thr Cys Ala Cys Cys Thr Ala Cys Ala Gly Cys
1 5 10 15
Ala Cys Gly Cys
20
<210> 4
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 4
Gly Ala Cys Thr Gly Thr Cys Thr Thr Gly Cys Cys Cys Cys Ala Ala
1 5 10 15
Gly Thr Thr Cys Cys
20
<210> 5
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 5
Ala Cys Thr Gly Gly Gly Ala Cys Gly Ala Cys Ala Thr Gly Gly Ala
1 5 10 15
Ala Ala Ala Gly
20
<210> 6
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 6
Cys Ala Thr Cys Thr Cys Cys Ala Gly Ala Gly Thr Cys Cys Ala Gly
1 5 10 15
Cys Ala Cys Ala
20
<210> 7
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 7
Ala Cys Cys Ala Cys Ala Gly Thr Cys Cys Ala Thr Gly Cys Cys Ala
1 5 10 15
Thr Cys Ala Cys
20
<210> 8
<211> 20
<212> PRT
<213> Artificial
<400> 8
Thr Cys Cys Ala Cys Cys Ala Cys Cys Cys Thr Gly Thr Thr Gly Cys
1 5 10 15
Thr Gly Thr Ala
20
Claims (8)
1.一种活性物质的用途，其特征在于：
所述活性物质为：聚古罗糖醛酸丙酯硫酸盐，或其异构体；
所述用途包含如下用途中的至少一种：
用途1.用于制备治疗、和/或缓解、和/或预防房颤心房纤维化的药物；
用途2.用于制备治疗、和/或缓解、和/或预防房颤心房纤维化的保健品；
用途3.用于制备治疗、和/或缓解、和/或预防房颤心房纤维化的饮食补充剂。
2.如权利要求1所述的一种活性物质的用途，其特征在于：
所述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1.用于制备降低房颤诱发频率的药物；
用途2.用于制备降低房颤诱发频率的保健品；
用途3.用于制备降低房颤诱发频率的饮食补充剂。
3.如权利要求1所述的一种活性物质的用途，其特征在于：
所述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1.用于制备缩短房颤的持续时间的药物；
用途2.用于制备缩短房颤的持续时间的保健品；
用途3.用于制备缩短房颤的持续时间的饮食补充剂。
4.如权利要求1所述的一种活性物质的用途，其特征在于：
所述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备抑制心房成纤维细胞中TGF-β1/Smad2/3信号通路激活的药物；
用途2、用于制备抑制心房成纤维细胞中TGF-β1/Smad2/3信号通路激活的保健品；
用途3、用于制备抑制心房成纤维细胞中TGF-β1/Smad2/3信号通路激活的饮食补充剂。
5.如权利要求1所述的一种活性物质的用途，其特征在于：
所述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞增殖的药物；
用途2、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞增殖的保健品；
用途3、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞增殖的饮食补充剂。
6.如权利要求1所述的一种活性物质的用途，其特征在于：
所述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞迁移的药物；
用途2、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞迁移的保健品；
用途3、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞迁移的饮食补充剂。
7.如权利要求1所述的一种活性物质的用途，其特征在于：
所述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞的α-SMA的mRNA和蛋白表达的药物；
用途2、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞的α-SMA的mRNA和蛋白表达的保健品；
用途3、用于制备抑制TGF-β1诱导的心房成纤维细胞的α-SMA的mRNA和蛋白表达的饮食补充剂。
8.如权利要求1所述的一种活性物质的用途，其特征在于：
所述用途还可以为如下用途中的至少一种：
用途1、用于制备下调TGF-β1诱导的心房成纤维细胞中羟脯氨酸分泌、胶原I及结缔组织生长因子CTGF的mRNA表达的药物；
用途2、用于制备下调TGF-β1诱导的心房成纤维细胞中羟脯氨酸分泌、胶原I及结缔组织生长因子CTGF的mRNA表达的保健品；
用途3、用于制备下调TGF-β1诱导的心房成纤维细胞中羟脯氨酸分泌、胶原I及结缔组织生长因子CTGF的mRNA表达的饮食补充剂。
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