CN115484961A - 环孢菌素类似物用于治疗癌症的用途 - Google Patents

Abstract

本文公开的内容包括适合用于预防和治疗增生性疾病诸如癌症的方法、组合物和试剂盒。所述方法包括向有相应需要的受试者施用包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物。所述组合物和试剂盒包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体。

Description

环孢菌素类似物用于治疗癌症的用途

相关申请的交叉引用

本申请要求于2020年2月25日提交的美国临时专利申请第62/981,383号的优先权的权益，该美国临时专利申请的内容通过引用以其整体并入本文。

背景

领域

本公开内容总体上涉及分子生物学领域和医学领域。一个方面涉及用亲环蛋白抑制剂预防和治疗癌症。

相关技术的描述

癌症在全球仍然是死亡的主要原因之一。尽管治疗选择可用于多种癌症，但是对于发现在预防和治疗癌症中有效的治疗剂存在需求。

概述

本文公开的内容包括用于在患有增生性疾病的受试者中治疗增生性疾病的方法。该方法可以例如包括向受试者施用包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，该饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，该芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

本文还公开的内容包括用于在患有增生性疾病的受试者中减轻增生性疾病的一种或更多种症状，或者预防或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作的方法，该方法包括向受试者施用包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，该饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，该芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

受试者可以处于增生性疾病的部分缓解中。在一些实施方案中，该方法包括识别患有增生性疾病的受试者。

本文公开的内容包括用于在有相应需要的受试者中预防增生性疾病的方法，该方法包括向受试者施用包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，该饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，该芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

有相应需要的受试者可以是处于发展增生性疾病的风险的受试者，或处于增生性疾病的完全缓解的受试者。该方法可以例如包括识别处于发展增生性疾病的风险的受试者。

在一些实施方案中，式L的环孢菌素类似物是CRV431：

增生性疾病可以是例如癌症。癌症的非限制性实例包括恶性上皮肿瘤(carcinoma)、鳞癌(squamous carcinoma)、腺癌、恶性毒瘤(sarcomata)、子宫内膜癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、输卵管癌、原发性腹膜癌、结肠癌、结肠直肠癌、肛门生殖器区鳞状细胞癌、黑素瘤、肾细胞癌、肺癌、非小细胞肺癌、肺部鳞状细胞癌、胃癌、膀胱癌、胆囊癌、肝癌、甲状腺癌、喉癌、唾液腺癌、食管癌、头颈癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、头颈部鳞状细胞癌、前列腺癌、胰腺癌、间皮瘤、肉瘤、血液学癌症(hematological cancer)、白血病、淋巴瘤、神经瘤、多发性骨髓瘤及其任何组合。在一些实施方案中，癌症是肝癌，例如原发性肝癌或继发性肝癌。在一些实施方案中，肝癌是肝细胞癌(HCC)、胆管癌、血管肉瘤(Angiosarcoma)、恶性血管内皮瘤(hemangiosarcoma)、肝母细胞瘤、血管瘤、肝腺瘤、局灶性结节性增生或其组合。

增生性疾病可以是实体瘤(包括但不限于成神经细胞瘤、尤文肉瘤(Ewingsarcoma)或维尔姆斯瘤(Wilms tumor))，或液体瘤。

在一些实施方案中，组合物包含治疗或预防有效量的式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体。受试者可以是哺乳动物，例如人类。组合物可以包含一种或更多种药学上可接受的赋形剂。

组合物包含一种或更多种另外的治疗剂。在一些实施方案中，该方法还包括向受试者施用一种或更多种另外的治疗剂，向受试者施用一种或更多种癌症疗法，或两者。

一种或更多种另外的治疗剂可以包括例如放射治疗剂、抗免疫抑制剂或免疫刺激剂、化学治疗剂或其组合。在一些实施方案中，一种或更多种另外的治疗剂包括抗PD-1剂、抗PD-L1剂、抗CTLA4剂、抗TIM-3剂、抗LAG-3剂、GITR(糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白)刺激剂、抗IDO剂、抗ICOS剂、蛋白酶体抑制剂、抗OX40剂、抗CSF1R剂、趋化因子信号传导剂、细胞因子信号刺激剂或其组合。在一些实施方案中，一种或更多种另外的治疗剂包括贝伐珠单抗、帕博利珠单抗、纳武利尤单抗、PDR001、REGN2810(SAR-439684)、BGB-A317、BI754091、IBI308、INCSHR-1210、JNJ-63723283、JS-001、MEDI0680(AMP-514)、MGA-012、PF-06801591、REGN-2810、TSR-042、阿替利珠单抗、阿维鲁单抗、CX-072、度伐利尤单抗、FAZ053、LY3300054、PD-L1 millamolecule、阿替利珠单抗、度伐利尤单抗、阿维鲁单抗、LY3300054、氨鲁米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗、β-羟基β-甲基丁酸酯、比卡鲁胺、博来霉素、硼替佐米、布舍瑞林、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡非佐米、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯膦酸盐、秋水仙碱、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素、柔红霉素、德兰佐米(delanzomib)、双烯雌酚、己烯雌酚、双硫仑、多西他赛、多柔比星、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、表柔比星、环氧酶素、雌二醇、雌莫司汀、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟达拉滨、氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、吉西他滨、染料木黄酮、戈舍瑞林、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、干扰素、伊立替康、ironotecan、来曲唑、亚叶酸、亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、伊沙佐米、马里佐米、氮芥(mechlorethamine)、甲羟孕酮、甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、诺考达唑、奥曲肽、奥泼佐米(oprozomib)、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸盐、喷司他丁、普卡霉素、卟吩姆钠(porfimer)、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔单抗、链脲菌素、苏拉明、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、睾酮、硫鸟嘌呤、噻替派、二氯二茂钛、托泊替康、曲妥珠单抗、维甲酸、长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨或其组合。

一种或更多种癌症疗法可以例如包括手术、化学疗法、放射疗法、免疫疗法或其组合。

在一些实施方案中，增生性疾病是多发性骨髓瘤。在一些实施方案中，该方法包括向受试者施用蛋白酶体抑制剂以及式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体。式L的环孢菌素类似物可以是CRV431。在一些实施方案中，蛋白酶体抑制剂是β-羟基β-甲基丁酸酯、硼替佐米、卡非佐米、德兰佐米、双硫仑、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、环氧酶素、伊沙佐米、马里佐米或奥泼佐米。

在一些实施方案中，一种或更多种另外的治疗剂和/或一种或更多种癌症疗法中的至少一种与组合物被共同施用至受试者。在一些实施方案中，一种或更多种另外的治疗剂和/或一种或更多种癌症疗法中的至少一种在施用组合物之前、在施用组合物之后或两者被施用至受试者。组合物可以例如通过静脉内施用、口服施用、肠胃外施用被施用至受试者。组合物可以例如呈粉末、丸剂、片剂、微片剂、小丸(pellet)、微丸(micropellet)、胶囊、含有微片剂的胶囊、液体、气溶胶或纳米颗粒的形式。在一些实施方案中，组合物以从10mg至250mg的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的有效日剂量被施用至受试者。

本文还公开的内容包括一种药物组合物，用于预防或治疗增生性疾病，或者减轻增生性疾病的一种或更多种症状，或者预防或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作，或者预防或延迟增生性疾病的发作，该药物组合物包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，该饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，该芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，环孢菌素类似物是CRV431：

药物组合物可以例如用于静脉内施用、口服施用或肠胃外施用。药物组合物可以例如呈粉末、丸剂、片剂、微片剂、小丸、微丸、胶囊、含有微片剂的胶囊、液体、气溶胶或纳米颗粒的形式。在一些实施方案中，增生性疾病是癌症，包括但不限于鳞癌、腺癌、恶性毒瘤、子宫内膜癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、输卵管癌、原发性腹膜癌、结肠癌、结肠直肠癌、肛门生殖器区鳞状细胞癌、黑素瘤、肾细胞癌、肺癌、非小细胞肺癌、肺部鳞状细胞癌、胃癌、膀胱癌、胆囊癌、肝癌、甲状腺癌、喉癌、唾液腺癌、食管癌、头颈癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、头颈部鳞状细胞癌、前列腺癌、胰腺癌、间皮瘤、肉瘤、血液学癌症、白血病、淋巴瘤、神经瘤或其组合。在一些实施方案中，癌症是肝癌。

本文公开的内容包括一种试剂盒，该试剂盒包含本文公开的药物组合物中的任一种；以及标签，其中标签指示以下中的一种或更多种：(a)试剂盒用于预防或治疗增生性疾病，(b)试剂盒用于减轻增生性疾病的一种或更多种症状，或者预防或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作，以及(c)试剂盒用于预防或延迟增生性疾病的发作。在一些实施方案中，试剂盒还包含用于识别处于发展增生性疾病的风险的受试者的使用说明、用于识别患有增生性疾病的受试者的使用说明或两者。

本文公开的内容包括使癌细胞对抗癌剂或抗癌疗法敏化的方法。该方法可以例如包括使癌细胞与包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物接触，从而使癌细胞对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者敏化，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，该饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，该芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，环孢菌素类似物是CRV431：

在一些实施方案中，使癌细胞与组合物接触在体外、离体和/或体内发生。在一些实施方案中，使癌细胞与组合物接触是在受试者中。在一些实施方案中，受试者对单独的一种或更多种抗癌剂、单独的一种或更多种癌症疗法或两者无响应，或者已知对单独的一种或更多种抗癌剂、单独的一种或更多种癌症疗法或两者具有抗性。在一些实施方案中，受试者先前经受使用一种或更多种抗癌剂的治疗、一种或更多种癌症疗法或两者。受试者可以是哺乳动物，例如人类。

在一些实施方案中，该方法包括在与组合物接触之后，确定癌细胞对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者的敏化。在一些实施方案中，该方法包括使癌细胞与一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者接触。在一些实施方案中，使癌细胞与一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者接触在受试者中发生。在一些实施方案中，该方法包括确定受试者对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者的响应。在一些实施方案中，使癌细胞与一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者接触与使癌细胞与组合物接触同时进行，或者在使癌细胞与组合物接触之后进行。

癌细胞可以例如包括恶性上皮肿瘤细胞、鳞癌细胞、腺癌细胞、恶性毒瘤细胞、子宫内膜癌细胞、乳腺癌细胞、卵巢癌细胞、宫颈癌细胞、输卵管癌细胞、原发性腹膜癌细胞、结肠癌细胞、结肠直肠癌细胞、肛门生殖器区鳞状细胞癌细胞、黑素瘤细胞、肾细胞癌细胞、肺癌细胞、非小细胞肺癌细胞、肺部鳞状细胞癌细胞、胃癌细胞、膀胱癌细胞、胆囊癌细胞、肝癌细胞、甲状腺癌细胞、喉癌细胞、唾液腺癌细胞、食管癌细胞、头颈癌细胞、胶质母细胞瘤细胞、胶质瘤细胞、头颈部鳞状细胞癌细胞、前列腺癌细胞、胰腺癌细胞、间皮瘤细胞、肉瘤细胞、血液学癌症细胞、白血病细胞、淋巴瘤细胞、神经瘤细胞、多发性骨髓瘤细胞或其组合。在一些实施方案中，癌细胞包括肝癌细胞。在一些实施方案中，一种或更多种抗癌剂包括放射治疗剂、抗免疫抑制剂或免疫刺激剂、化学治疗剂或其组合。在一些实施方案中，一种或更多种抗癌剂包括抗PD-1剂、抗PD-L1剂、抗CTLA4剂、抗TIM-3剂、抗LAG-3剂、GITR(糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白)刺激剂、抗IDO剂、抗ICOS剂、蛋白酶体抑制剂、抗OX40剂、抗CSF1R剂、趋化因子信号传导剂、细胞因子信号刺激剂或其组合。在一些实施方案中，一种或更多种抗癌剂包括贝伐珠单抗、帕博利珠单抗、纳武利尤单抗、PDR001、REGN2810(SAR-439684)、BGB-A317、BI 754091、IBI308、INCSHR-1210、JNJ-63723283、JS-001、MEDI0680(AMP-514)、MGA-012、PF-06801591、REGN-2810、TSR-042、阿替利珠单抗、阿维鲁单抗、CX-072、度伐利尤单抗、FAZ053、LY3300054、PD-L1 millamolecule、阿替利珠单抗、度伐利尤单抗、阿维鲁单抗、LY3300054、氨鲁米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗、β-羟基β-甲基丁酸酯、比卡鲁胺、博来霉素、硼替佐米、布舍瑞林、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡非佐米、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯膦酸盐、秋水仙碱、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素、柔红霉素、德兰佐米、双烯雌酚、己烯雌酚、双硫仑、多西他赛、多柔比星、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、表柔比星、环氧酶素、雌二醇、雌莫司汀、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟达拉滨、氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、吉西他滨、染料木黄酮、戈舍瑞林、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、干扰素、伊立替康、ironotecan、来曲唑、亚叶酸、亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、伊沙佐米、马里佐米、氮芥、甲羟孕酮、甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、诺考达唑、奥曲肽、奥泼佐米、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸盐、喷司他丁、普卡霉素、卟吩姆钠、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔单抗、链脲菌素、苏拉明、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、睾酮、硫鸟嘌呤、噻替派、二氯二茂钛、托泊替康、曲妥珠单抗、维甲酸、长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨或其组合。

在一些实施方案中，一种或更多种癌症疗法包括手术、化学疗法、放射疗法、免疫疗法或其组合。

附图简述

图1A-图1C是示出了CRV431在人类精确切割的肝切片(PCLS)中的抗纤维化活性的图。

图2A-图2B是示出了样品和供体的分布的PCA图，针对TGFb/PDGF+CRV431相对于TGFb/PDGF+媒介物的按组比较。

图2C是MA图，以及图3A-图3B是生成的热图，针对TGFb/PDGF+CRV431相对于TGFb/PDGF+媒介物的按组比较。

图4是示出了在按组比较TGFb/PDGF+CRV431相对于TGFb/PDGF+媒介物中识别的显著不同地表达的基因的火山图。

图5A-图5B是示出了所有三种供体之间的明显的基因重叠的维恩图。

图6A-图6B是示出了样品和供体的分布的PCA图，针对未经刺激的+CRV431相对于未经刺激的+媒介物的按组比较。

图6C是MA图，以及图7A-图7B是生成的热图，针对未经刺激的+CRV431相对于未经刺激的+媒介物的按组比较。

图8是示出了在按组比较未经刺激的+CRV431相对于未经刺激的+媒介物中识别的显著不同地表达的基因的火山图。

图9A-图9B是示出了所有三种供体之间的显著的基因重叠的维恩图，针对未经刺激的+CRV431相对于未经刺激的+媒介物的按组比较。

图10A-图10C是示出了HepG2肝细胞癌细胞对柔红霉素的CRV431敏化的图。图10D-图10F是示出了Huh7肝细胞癌细胞对柔红霉素的CRV431敏化的图。

图11A和图12A示出了在治疗结束时的肿瘤负荷(tumor burden)通过肿瘤的数目进行评估。图11B和图12B示出了基于肿瘤的数目和大小的综合评分(0-7等级)。

详细描述

在以下详细描述中，参考了构成其一部分的附图。在附图中，相似的符号通常识别相似的组分，除非上下文另外规定。详细描述、附图和权利要求中描述的说明性实施方案不意味着是限制性的。可以利用其他实施方案，并且可以做出其他改变，而不偏离本文呈现的主题的精神或范围。将容易地理解的是，如本文一般描述的和附图中图示的，本公开内容的方面可以以多种不同的配置被布置、替代、组合、分离和设计，其全部在本文中被明确地考虑并且构成本文的公开内容的一部分。

关于相关技术，所有专利、公布的专利申请、其他出版物以及来自GenBank和本文提及的其他数据库的序列通过引用以其整体并入。

定义

除非另外定义，否则本文使用的技术术语和科学术语具有与由本公开内容所属的领域的普通技术人员通常理解的相同含义。参见，例如Singleton等人,Dictionary ofMicrobiology and Molecular Biology第2版,J.Wiley&Sons(New York,NY 1994)；Sambrook等人,Molecular Cloning,A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Press(Cold Spring Harbor,NY 1989)。为了本公开内容的目的，在下文定义了以下术语。

如本文使用的，“受试者”指的是作为治疗、观察或实验的对象的动物。“动物”包括冷血和温血的脊椎动物和无脊椎动物，诸如鱼类、贝类、爬行动物以及特别是哺乳动物。“哺乳动物”包括但不限于小鼠；大鼠；兔子；豚鼠；犬；猫；绵羊；山羊；奶牛；马；灵长类动物，诸如猴、黑猩猩和猿以及特别是人类。

如本文使用的，“患者”指的是正在由医学专业人员诸如医生(即，对抗疗法医生或骨科医学医生)或兽医医生治疗以尝试治愈特定疾病或紊乱、或者至少缓解特定疾病或紊乱的影响或者防止疾病或紊乱首先发生的受试者。

如本文使用的，“施用(administration)”或“施用(administering)”指的是向脊椎动物给予一定剂量的药学活性成分的方法。施用可以是例如口服施用、作为栓剂施用、局部接触、静脉内施用、腹膜内施用、肌内施用、病灶内施用、鼻内施用或皮下施用，或者向受试者植入缓慢释放装置例如微型渗透泵。施用可以是通过任何合适的途径，包括肠胃外的和经粘膜的(例如，含服的、舌下的、腭的、牙龈的、鼻的、阴道的、直肠的或透皮的)。肠胃外施用包括例如静脉内的、肌内的、微动脉内的、皮内的、皮下的、腹膜内的、心室内的和颅内的。本文公开的药物组合物和治疗物质的其他递送模式包括但不限于脂质体制剂、静脉内输注、透皮贴剂或其组合的使用。

如本文使用的，“剂量”指的是活性成分(例如，环孢菌素类似物，包括CRV431)的组合的量。

如本文使用的，“单位剂量”指的是以单剂量施用至患者的治疗剂的量。

如本文使用的,“日剂量”指的是在一天内施用至患者的治疗剂的总量。

如本文使用的，“治疗有效量”或“药学有效量”意指具有治疗效果的治疗剂的量。当单独施用或与一种或更多种另外的治疗剂组合施用时在治疗中有用的药学活性成分的剂量是治疗有效量。因此，如本文使用的，治疗有效量意指如通过临床试验结果和/或模型动物研究判断产生期望的治疗效果的治疗剂的量。

如本文使用的，术语“治疗(treat)”、“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”指的是为了预防目的和/或治疗目的向受试者施用治疗剂或药物组合物。术语“预防性治疗”指的是治疗尚未表现出疾病或状况的症状，但易患特定疾病或状况或以其他方式处于特定疾病或状况的风险的受试者，由此该治疗降低了患者将发展疾病或状况的可能性。术语“治疗性治疗”指的是向已经患有疾病或状况的受试者施用治疗。如本文使用的，“治疗效果”在一定程度上缓解疾病或紊乱的症状中的一种或更多种。例如，可以通过由受试者传达的主观不适的减少(例如，在自填患者问卷中注意到的减少的不适)来观察治疗效果。

如本文使用的，术语“预防(prophylaxis)”或“预防(prevention)”指的是对受试者例如哺乳动物(包括人类)的亚临床疾病状态的预防性治疗，以用于降低临床疾病状态的发生的概率。基于已知与一般人群相比增加患临床疾病状态的风险的因素，选择受试者进行预防性疗法。“预防”疗法可以被分为(a)一级预防和(b)二级预防。一级预防被定义为对尚未呈现出临床疾病状态的受试者的治疗，而二级预防被定义为防止相同或相似的临床疾病状态的第二次发生。

如本文使用的，术语“配制(formulated)”或“制剂(formulation)”指的是将包括一种或更多种药学活性成分的不同化学物质组合以产生剂型的工艺。在一些实施方案中，两种或更多种药学活性成分可以被共同配制成单一剂型或组合的剂量单位，或者被单独地配制并随后组合成组合的剂量单位。持续释放制剂是被设计成在延长的时间段内在体内缓慢释放治疗剂的制剂，而立即释放制剂是被设计成在缩短的时间段内在体内快速释放治疗剂的制剂。

如本文使用的，术语“水合物”指的是由水分子与溶质的分子或离子组合而形成的复合物。如本文使用的，术语“溶剂化物”指的是由溶剂分子与溶质的分子或离子组合而形成的复合物。溶剂可以是有机化合物、无机化合物或两者的混合物。溶剂化物意图包括水合物、半水合物、通道水合物等。溶剂的一些实例包括但不限于甲醇、N,N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二甲基亚砜和水。

疾病

本文公开的方法、组合物和试剂盒可以用于治疗增生性疾病诸如癌症、预防增生性疾病诸如癌症的发作、延迟增生性疾病诸如癌症的发作和/或减缓增生性疾病诸如癌症的进展。还提供了用于减轻增生性疾病的一种或更多种症状、预防增生性疾病的一种或更多种症状的发作和/或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作的方法、组合物和试剂盒。

如本文描述的，增生性疾病可以例如是过度增生性疾病。在一些实施方案中，增生性疾病是癌症。癌症是细胞的异常生长，其倾向于以不受控制的方式增殖并且在一些情况下转移(扩散)。癌症可以涉及身体的任何组织，并且在每个身体区域中具有许多不同的形式。肿瘤可以是癌性的或良性的。良性肿瘤意味着肿瘤可以生长但不扩散。癌性肿瘤是恶性的，这意味着它可以生长并扩散到身体的其他部位。如果癌症扩散(转移)，则新肿瘤与原始(原发性)肿瘤具有相同的名称。在一些实施方案中，本文公开的方法、组合物和试剂盒用于治疗原发性癌症和/或继发性癌症的一种或更多种症状、预防原发性癌症和/或继发性癌症的一种或更多种症状的发作、延迟原发性癌症和/或继发性癌症的一种或更多种症状的发作、减缓原发性癌症和/或继发性癌症的一种或更多种症状的进展和/或减轻原发性癌症和/或继发性癌症的一种或更多种症状。

本文公开的方法、组合物和试剂盒可以用于多种类型的癌症，包括但不限于黑素瘤(例如，转移性恶性黑素瘤)、肾癌(例如，透明细胞癌)、前列腺癌(例如，激素难治性前列腺腺癌)、胰腺腺癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌(例如，非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC))、食管癌、头颈部鳞状细胞癌、肝癌、卵巢癌、宫颈癌、甲状腺癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、白血病、淋巴瘤和其他赘生性恶性肿瘤。另外，本文提供的疾病或状况包括使用本文公开的方法和组合物可以抑制其生长的难治性或复发性恶性肿瘤。在一些实施方案中，癌症是恶性上皮肿瘤、鳞癌、腺癌、恶性毒瘤、子宫内膜癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、输卵管癌、原发性腹膜癌、结肠癌、结肠直肠癌、肛门生殖器区鳞状细胞癌、黑素瘤、肾细胞癌、肺癌、非小细胞肺癌、肺部鳞状细胞癌、胃癌、膀胱癌、胆囊癌、肝癌、甲状腺癌、喉癌、唾液腺癌、食管癌、头颈癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、头颈部鳞状细胞癌、前列腺癌、胰腺癌、间皮瘤、肉瘤、血液学癌症、白血病、淋巴瘤、神经瘤或其组合。在一些实施方案中，癌症是恶性上皮肿瘤、鳞癌(例如，宫颈管、眼睑、结膜、阴道、肺、口腔、皮肤、膀胱、舌、喉和食道)和腺癌(例如，前列腺、小肠、子宫内膜、宫颈管、大肠、肺、胰腺、食道、直肠、子宫、胃、乳腺和卵巢)。在一些实施方案中，癌症是恶性毒瘤(例如，肌源性肉瘤)、白血病、神经瘤、黑素瘤和淋巴瘤。在一些实施方案中，癌症是肝癌，例如原发性肝癌和继发性肝癌。肝癌的非限制性实例包括肝细胞癌(HCC)、胆管癌、血管肉瘤、恶性血管内皮瘤、肝母细胞瘤、血管瘤、肝腺瘤、局灶性结节性增生及其任何组合。

癌症可以是实体瘤、液体瘤或其组合。在一些实施方案中，癌症是实体瘤，包括但不限于黑素瘤、肾细胞癌、肺癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、胆囊癌、喉癌、肝癌、甲状腺癌、胃癌、唾液腺癌、前列腺癌、胰腺癌、梅克尔细胞癌、脑和中枢神经系统癌及其任何组合。在一些实施方案中，癌症是液体瘤。在一些实施方案中，癌症是血液学癌症。血液学癌症的非限制性实例包括弥漫性大B细胞淋巴瘤(“DLBCL”)、霍奇金淋巴瘤(“HL”)、非霍奇金淋巴瘤(“NHL”)、滤泡性淋巴瘤(“FL”)、急性骨髓性白血病(“AML”)和多发性骨髓瘤(“MM”)。

可以使用本文公开的方法、组合物和试剂盒预防和/或治疗的癌症的非限制性实例包括：肾癌；肾脏癌症(kidney cancer)；多形性胶质母细胞瘤；转移性乳腺癌；乳腺癌；乳腺肉瘤；神经纤维瘤；神经纤维瘤病；小儿肿瘤；成神经细胞瘤；恶性黑素瘤；表皮癌；白血病诸如但不限于急性白血病，急性淋巴细胞白血病，急性髓细胞白血病诸如成髓细胞白血病、早幼粒细胞白血病、粒单核细胞白血病、单核细胞白血病、红白血病和骨髓增生异常综合征，慢性白血病诸如但不限于慢性髓细胞(粒细胞)白血病、慢性淋巴细胞白血病、毛细胞白血病；真性红细胞增多症(polycythemia vera)；淋巴瘤，诸如但不限于霍奇金氏病、非霍奇金氏病；多发性骨髓瘤，诸如但不限于冒烟型多发性骨髓瘤(smoldering multiplemyeloma)、非分泌型骨髓瘤(nonsecretory myeloma)、骨硬化性骨髓瘤、浆细胞白血病、孤立性浆细胞瘤和髓外浆细胞瘤；瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症(Waldenstrom'smacroglobulinemia)；意义未明的单克隆丙种球蛋白病；良性单克隆丙种球蛋白病；重链病；骨癌和结缔组织肉瘤，诸如但不限于骨肉瘤(bone sarcoma)、骨髓瘤骨病、多发性骨髓瘤、胆脂瘤诱导的骨骨肉瘤、骨佩吉特氏病、骨肉瘤(osteosarcoma)、软骨肉瘤、尤文氏肉瘤、恶性巨细胞瘤、骨纤维肉瘤、脊索瘤、骨膜肉瘤、软组织肉瘤、血管肉瘤(恶性血管内皮瘤)、纤维肉瘤、卡波西氏肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、淋巴管肉瘤(lymphangio sarcoma)、神经鞘瘤、横纹肌肉瘤和滑膜肉瘤；脑肿瘤，诸如但不限于胶质瘤、星形细胞瘤、脑干胶质瘤、室管膜瘤、少突神经胶质瘤、非胶质瘤(nonglial tumor)、听神经瘤、颅咽管瘤、髓母细胞瘤、脑膜瘤、松果体细胞瘤、松果体母细胞瘤(pineoblastoma)和原发性脑淋巴瘤；乳腺癌，包括但不限于腺癌、小叶(小细胞)癌、导管内癌、髓样乳腺癌、粘液性乳腺癌、管状乳腺癌、乳头状乳腺癌、佩吉特氏病(包括青少年佩吉特氏病)和炎性乳腺癌；肾上腺癌，诸如但不限于嗜铬细胞癌和肾上腺皮质癌；甲状腺癌，诸如但不限于乳头状甲状腺癌或滤泡性甲状腺癌、髓样甲状腺癌和未分化甲状腺癌；胰腺癌，诸如但不限于胰岛素瘤、胃泌素瘤、胰高血糖素瘤、舒血管肠肽瘤、生长抑素分泌肿瘤和类癌或胰岛细胞瘤；垂体癌，诸如但限于库欣氏病、催乳素分泌肿瘤、肢端肥大症和尿崩症；眼癌，诸如但不限于眼部黑素瘤，诸如虹膜黑素瘤、脉络膜黑素瘤和睫状体黑素瘤，以及成视网膜细胞瘤；阴道癌，诸如鳞状细胞癌、腺癌和黑素瘤；外阴癌，诸如鳞状细胞癌、黑素瘤、腺癌、基底细胞癌、肉瘤和佩吉特氏病；宫颈癌，诸如但不限于鳞状细胞癌和腺癌；子宫癌，诸如但不限于子宫内膜癌和子宫肉瘤；卵巢癌，诸如但不限于卵巢上皮癌、交界性肿瘤、生殖细胞肿瘤和间质瘤；宫颈癌；食管癌，诸如但不限于鳞癌(squamous cancer)、腺癌、腺样囊性癌、粘膜表皮样癌、腺鳞癌、肉瘤、黑素瘤、浆细胞瘤、疣状癌和燕麦细胞(小细胞)癌；胃癌诸如但不限于蕈样(息肉样)、溃疡型、表浅扩散型、弥漫性扩散型腺癌，恶性淋巴瘤，脂肪肉瘤，纤维肉瘤和癌肉瘤；结肠癌；结肠直肠癌、KRAS突变的结肠直肠癌；结肠癌(colon carcinoma)；直肠癌；肝癌诸如但不限于肝细胞癌和肝母细胞瘤，胆囊癌诸如腺癌；胆管癌，诸如但不限于乳头状胆管癌、结节状胆管癌和弥漫性胆管癌；肺癌，诸如KRAS突变的非小细胞肺癌、非小细胞肺癌、鳞状细胞癌(表皮样癌)、腺癌、大细胞癌和小细胞肺癌；肺癌(lung carcinoma)；睾丸癌诸如但不限于胚组织瘤(germinal tumor)，未分化、经典(典型)、精母细胞性精原细胞瘤，非精原细胞瘤，胚胎性癌，畸胎瘤癌，绒毛膜癌(卵黄囊瘤)，前列腺癌诸如但不限于雄激素非依赖性前列腺癌、雄激素依赖性前列腺癌，腺癌，平滑肌肉瘤和横纹肌肉瘤；严重癌(penal cancer)；口腔癌，诸如但不限于鳞状细胞癌；基底癌；唾液腺癌，诸如但不限于腺癌、粘膜表皮样癌和腺样囊性癌；咽癌，诸如但不限于鳞状细胞癌和疣状细胞癌；皮肤癌，诸如但不限于基底细胞癌、鳞状细胞癌和黑素瘤、表浅扩散型黑素瘤、结节性黑素瘤、恶性雀斑痣样黑素瘤、肢端雀斑样痣黑素瘤(acrallentiginous melanoma)；肾脏癌症，诸如但不限于肾细胞癌、腺癌、肾上腺样瘤、纤维肉瘤、移行细胞癌(肾盂和输尿管)；肾癌；维尔姆斯氏瘤；以及膀胱癌，诸如但不限于移行细胞癌、鳞状细胞癌、腺癌、癌肉瘤。在一些实施方案中，癌症是粘液肉瘤、骨原性肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、间皮瘤、滑膜瘤、成血管细胞瘤、上皮癌、囊腺癌、支气管原癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌或乳头状腺癌。

本文公开的方法、组合物和试剂盒可以用于减轻增生性疾病诸如癌症的一种或更多种症状、预防增生性疾病诸如癌症的一种或更多种症状的发作或延迟增生性疾病诸如癌症的一种或更多种症状的发作。症状可以是例如纤维化。纤维化是其中发生纤维结缔组织的过度积聚的病理状况。癌症相关纤维化是癌症的重要调节因子，例如在肿瘤微环境(TME)中。在一些实施方案中，本文公开的方法、组合物和试剂盒用于减轻或预防与癌症相关的慢性炎症相关纤维化(来自感染性病因或自身免疫性病因)，所述癌症包括但不限于肝细胞癌、胃癌、食管癌、头颈癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌、乳腺癌、前列腺癌和外阴癌。在一些实施方案中，所述方法、组合物和试剂盒用于减轻或预防影响例如心脏、肝、肺、肌肉(例如，骨骼肌)、肾脏、眼睛、血管、皮肤、脑、骨髓、胃肠道、腹膜和脉管系统的纤维化。在一些实施方案中，所述方法、组合物和试剂盒用于减轻或预防由炎症相关癌症引起的纤维化。在一些实施方案中，所述方法、组合物和试剂盒用于减轻或预防由用于治疗癌症的医疗程序(例如，手术、化学疗法、免疫疗法)引起的纤维化。纤维化包括但不限于肺纤维化、肝纤维化、骨髓纤维化、皮肤纤维化(例如，肾源性系统性纤维化和瘢痕疙瘩纤维化)、纵隔纤维化、心脏纤维化、肾脏纤维化、间质纤维化、硬膜外纤维化、上皮纤维化、特发性纤维化、肝硬化及其任何组合。

方法

本文公开的内容包括用于在有相应需要的受试者中治疗增生性疾病诸如癌症、预防增生性疾病诸如癌症的发作、延迟增生性疾病诸如癌症的发作和/或减缓增生性疾病诸如癌症的进展的方法、组合物和试剂盒。还公开了可以用于在有相应需要的受试者中减轻增生性疾病的一种或更多种症状、预防增生性疾病的一种或更多种症状的发作和/或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作的方法、组合物和试剂盒。在一些实施方案中，癌症是肝癌。

在一些实施方案中，该方法包括识别患有增生性疾病的受试者。在一些实施方案中，该方法包括识别处于发展增生性疾病的风险的受试者。该试剂盒可以包含用于识别患有增生性疾病的受试者的使用说明、用于识别处于发展增生性疾病的风险的受试者的使用说明或两者。

该方法可以例如包括：向有相应需要的受试者施用包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物。在一些实施方案中，有相应需要的受试者是处于发展增生性疾病的风险的受试者。在一些实施方案中，有相应需要的受试者是患有增生性疾病的受试者。在一些实施方案中，有相应需要的受试者是具有增生性疾病的一种或更多种症状例如纤维化的受试者。在一些实施方案中，有相应需要的受试者是处于增生性疾病的完全缓解或部分缓解的受试者。可以防止发生增生性疾病(例如，癌症)、延迟其发作或减缓其疾病进展。在一些实施方案中，有相应需要的受试者是处于肝癌的完全缓解的受试者。在一些实施方案中，有相应需要的受试者是处于肝癌的不完全缓解的受试者。

所述方法、组合物和试剂盒可以例如预防、减缓或减少癌症的进展。例如，可以减小肿瘤的重量和/或大小。该方法可以包括测量肿瘤的重量、大小和/或形态以确定肿瘤对治疗的响应性和/或效力。

本文公开的方法、组合物和试剂盒可以用于减轻增生性疾病的一种或更多种症状例如纤维化、预防增生性疾病的一种或更多种症状例如纤维化的发作或延迟增生性疾病的一种或更多种症状例如纤维化的发作。在一些实施方案中，防止发生纤维化。在一些实施方案中，纤维化形成在受试者中被禁止。在一些实施方案中，纤维化的发作被延迟。延迟可以是例如一秒或更多秒、一分钟或更多分钟、一小时或更多小时、一天或更多天、一周或更多周、一个月或更多个月或一年或更多年。在一些实施方案中，经治疗的受试者中的延迟是相对于他/她没有接受治疗的同一受试者。在一些实施方案中，经治疗的受试者中的延迟是相对于未经治疗的受试者。在一些实施方案中，纤维化的发作被延迟以下时间或约以下时间：5天、10天、15天、20天、25天、30天、35天、40天、50天、75天、100天、150天、200天、250天、300天、350天，或这些值中的任何值之间的范围。在一些实施方案中，纤维化的发作被延迟以下时间或约以下时间：一个月、两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月、九个月、十个月、十一个月、十二个月或一年、两年、三年、四年、五年、六年、七年、八年、九年、十年、十一年、十二年，或这些值中的任何值之间的范围。在一些实施方案中，纤维化的发作被延迟至少以下时间或至少约以下时间：一个月、两个月、三个月、四个月、五个月、六个月、七个月、八个月、九个月、十个月或一年、两年、三年、四年、五年、六年、七年、八年、九年、十年。在一些实施方案中，纤维化的发作被延迟至少以下时间或至少约以下时间：一小时、两小时、三小时、四小时、五小时、六小时、七小时、八小时、九小时、十小时或更长时间。纤维化可以是例如与肝癌相关的纤维化。

在一些实施方案中，纤维化(例如，组织纤维化)在受试者中被逆转。逆转可以是受试者现有的纤维化的1％、2％、5％、8％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或这些值中的任两个之间的范围，或者可以是受试者现有的纤维化的约1％、约2％、约5％、约8％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％或这些值中的任两个之间的范围。在一些实施方案中，逆转可以是受试者现有的纤维化的至少1％、2％、5％、8％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或更多，或者可以是受试者现有的纤维化的至少约1％、约2％、约5％、约8％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％或更多。

在一些实施方案中，纤维化(例如，组织纤维化)的量在受试者中被减少。在受试者中，纤维化的量的减少可以是1％、2％、5％、8％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或这些值中的任两个之间的范围，或者可以是约1％、约2％、约5％、约8％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％或这些值中的任两个之间的范围。在一些实施方案中，在受试者中，纤维化的量的减少可以是至少1％、2％、5％、8％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或更多，或者可以是至少约1％、约2％、约5％、约8％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％或更多。

在一些实施方案中，纤维化(例如，组织纤维化)的形成在受试者中被减少。在受试者中，纤维化形成的减少可以是1％、2％、5％、8％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或这些值中的任两个之间的范围，或者可以是约1％、约2％、约5％、约8％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％或这些值中的任两个之间的范围。在一些实施方案中，在受试者中，纤维化形成的减少可以是至少1％、2％、5％、8％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或更多，或者可以是至少约1％、约2％、约5％、约8％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％或更多。在一些实施方案中，纤维化是非肝纤维化。经治疗的受试者中的纤维化形成的减少可以是相对于他/她没有接受治疗的同一受试者。在一些实施方案中，经治疗的受试者中的纤维化形成的减少是相对于未经治疗的受试者。

本文公开的环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体中的一种或更多种在减轻纤维化(增生性疾病的症状)、预防纤维化(增生性疾病的症状)的发作或延迟纤维化(增生性疾病的症状)的发作方面的治疗有效性可以使用已知的用于测量受试者的纤维化(例如，受影响的器官、组织或区域的纤维化)的量的方法来确定。受试者可以是例如患有纤维化的患者或最近患有纤维化的患者。受试者的纤维化的量可以通过本领域技术人员已知的用于确定纤维化的量的方法来确定。例如，但不限于，纤维化的量可以通过以下来确定：对受试者进行肌肉活检，将肌肉切片到载玻片上，并且评估如由本领域已知的染色技术(例如，苏木精和伊红(H&E)染色和/或Masson三色染色)所揭示的纤维化的量。作为另一个实例，纤维化的量可以在体内通过使用磁共振成像(MRI)来确定。

可以通过本文公开的组合物、方法或试剂盒实现的示例性治疗终点可以是用本文公开的一种或更多种环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体以及任选的一种或更多种另外的治疗剂(例如，抗纤维化剂)施用的受试者的纤维化的量的减少。受试者的纤维化的相对量可以例如通过组织活检和随后的组织学来定量，包括但不限于，通过将伊文思蓝染料摄取作为肌纤维或细胞损伤的量度进行定量(例如在Heydemann等人,Neuromuscular Disorders 15(9-10):601-9(2005)中描述的)、如在Swaggart等人,Physiol Genomics 43:24-31(2011)中描述的羟脯氨酸含量的定量或两者。在一些实施方案中，与未经如此治疗的患者相比，用本文公开的一种或更多种环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体以及任选的一种或更多种另外的治疗剂(例如，抗癌剂)施用的受试者的纤维化的量减少了以下值或减少了约以下值：1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、100％，或1％至100％内的任何值，或这些值中的任两个之间的范围。在一些实施方案中，与未经如此治疗的患者相比，用本文公开的一种或更多种环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体以及任选的一种或更多种另外的治疗剂(例如，抗癌剂)施用的受试者的纤维化的量减少了至少以下值或减少了至少约以下值：1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％。

治疗剂

抗癌剂，包括本文公开的环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体，可以用于治疗受试者的增生性疾病(例如，癌症)，或者用于受试者的增生性疾病(例如，癌症)的一级预防或二级预防。环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体可以例如延迟受试者(例如，处于发展增生性疾病的风险的受试者)的增生性疾病(例如，癌症)的发作。环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体可以例如治疗或预防受试者的癌症。在一些实施方案中，癌症是肝癌。

在一些实施方案中，环孢菌素类似物是式L的化合物：

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，该饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，该芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，R1-R2选自由以下组成的组：

在一些实施方案中，R1-R2包括2个和5个之间的碳的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，其任选地被选自由以下组成的组的取代基取代：氢、酮、羟基、腈、卤素、氧代、羧酸、酯和1,3-二氧戊环。

在一些实施方案中，R2选自由以下组成的组：

R5是长度为1个和10个之间的碳的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；并且R6是长度为1个和10个之间的碳的单羟基化、二羟基化、三羟基化或多羟基化的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，R23选自由以下组成的组：-CH₃、CH₂CH₃、-CH₂CHCH₂、-CH₂CH₂CH₂I、-(CH₂)₃CH₂I、-(CH₂)₃N⁺(CH₃)₃、-CH₂CCH-CH₂CO₂(t-Bu)、-CH₂Ph、-CH₂OH、-CH(OH)CH₃、-CH(OH)(t-Bu)、-CH(OH)Ph、-COOH、-SCH₃和-S(p-Tol)。在一些实施方案中，R23包括任选地被取代的烷基，包括任选地被取代的C1-C3烷基。所述烷基可以被氨基取代并且可以包括C1-C3-Ala，其中化合物包括氨基酸3的D-差向异构体，该氨基酸3是R23被附接至的氨基酸。在一些实施方案中，R23可以是MeAla。在一些实施方案中，R23是长度为1个至6个、1个至5个、1个至4个、1个至3个或2个碳的直链或支链的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，式L中的

选自由以下组成的组：

在一些实施方案中，环孢菌素类似物是式L的化合物：

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

ii.羧酸；

iii.腈；

iv.酯；

v.酮；

vi.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；

vii.被取代的或未被取代的芳基；

viii.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链，该饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链被选自由以下组成的组的取代基取代：酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环和氧代；

ix.芳香族基团，该芳香族基团被选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、酯和硝基；和

x.viii)的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链和ix)的芳香族基团的组合；以及

d.R23是未被取代的C₁-C₃烷基。

在一些实施方案中，R’是H。

在一些实施方案中，R1是长度为从5个至8个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，R2选自由以下组成的组：

R5是长度为1个和10个之间的碳的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；并且R6是长度为1个和10个之间的碳的单羟基化、二羟基化、三羟基化或多羟基化的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，R1-R2选自由以下组成的组：

在一些实施方案中，R1-R2被选自由以下组成的组的取代基取代：酮、羟基、腈、氧代、羧酸、酯和1,3-二氧戊环。在一些实施方案中，R1-R2的长度为至少6个碳原子。

在一些实施方案中，式L中的

选自由以下组成的组：

在一些实施方案中，R23选自由以下组成的组：-CH₃和-CH₂CH₃。在一些实施方案中，R23是甲基。在一些实施方案中，化合物包括氨基酸3的D-差向异构体，该氨基酸3是R23被附接至的氨基酸。

在一些实施方案中，环孢菌素类似物是选自由以下组成的组的化合物：

其中：

R是

R’是H或乙酰基；和

异构体是氨基酸3的异构体形式，该氨基酸3是R23被附接至的氨基酸。

在一些实施方案中，环孢菌素类似物是式L的化合物：

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

ii.羧酸；

iii.腈；

iv.酯；

v.酮；

vi.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；

vii.被取代的或未被取代的芳基；

viii.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链，该饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链被选自由以下组成的组的取代基取代：酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环和氧代；

ix.芳香族基团，该芳香族基团被选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、酯和硝基；和

x.(viii)的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链和(ix)的芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链，

其中R1-R2的长度为至少6个碳原子。

在一些实施方案中，R’是H。

在一些实施方案中，R1是长度为从5个至8个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，R1-R2选自由以下组成的组：

在一些实施方案中，R1-R2被选自由以下组成的组的取代基取代：酮、羟基、腈、氧代、羧酸、酯和1，3-二氧戊环。

在一些实施方案中，R23选自由以下组成的组：-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CHCH₂、-CH₂CH₂CH₂I、-(CH₂)₃CH₂I、-(CH₂)₃N⁺(CH₃)₃、-CH₂CCH、-CH₂CO₂(t-Bu)、-CH₂Ph、-CH₂OH、-CH(OH)CH₃、-CH(OH)(t-Bu)、-CH(OH)Ph、-COOH、-SCH₃和-S(p-Tol)。在一些实施方案中，R23包括任选地被取代的C₁-C₃烷基。在一些实施方案中，R23被氨基取代。在一些实施方案中，R23是C₁-C₃烷基，并且化合物包括氨基酸3的D-差向异构体，该氨基酸3是R23被附接至的氨基酸。在一些实施方案中，R23是甲基。在一些实施方案中，R23是长度为1个至6个碳的直链或支链的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，式L中的

选自由以下组成的组：

在一些实施方案中，R1-R2是

R23是甲基，并且化合物是氨基酸3的D-差向异构体，该氨基酸3是R23被附接至的氨基酸。

在一些实施方案中，环孢菌素类似物是式L的化合物：

其中：

R’是H或乙酰基；

R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

R2是N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；以及

R23是甲基或乙基。

在一些实施方案中，R’是H。

在一些实施方案中，R1是长度为从5个至8个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，R2是

其中R5是长度为1和10个之间的碳的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，R1-R2选自由以下组成的组：

在一些实施方案中，R23是甲基。

在一些实施方案中，式L中的

是

在一些实施方案中，R’、R1-R2和R23以及所述化合物的异构体选自以下：

其中异构体是氨基酸3的异构体形式，该氨基酸3是R23被附接至的氨基酸。

在一些实施方案中，环孢菌素类似物是式L的化合物：

其中：

R’是H或乙酰基；

R1-R2选自由以下组成的组

以及

R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，R’是H。

在一些实施方案中，R1-R2是

在一些实施方案中，式L中的

是

在一些实施方案中，R23选自由以下组成的组：-CH₃、-CH₂CH₃、-CH₂CHCH₂、-CH₂CH₂CH₂I、-(CH₂)₃CH₂I、-(CH₂)₃N⁺(CH₃)₃、-CH₂CCH、-CH₂CO₂(t-Bu)、-CH₂Ph、-CH₂OH、-CH(OH)CH₃、-CH(OH)(t-Bu)、-CH(OH)Ph、-COOH、-SCH₃和-S(p-Tol)。在一些实施方案中，R23是-CH₃或-CH₂CH₃。在一些实施方案中，R23是-CH₃。在一些实施方案中，R23(a)包括任选地被取代的C1-C3烷基；(b)被氨基取代；(c)是C1-C3-Ala，并且所述化合物包括D-差向异构体；(d)是MeAla；和/或(e)是长度为1个至6个、1个至5个、1个至4个、1个至3个或2个碳的直链或支链的脂肪族碳链。

在一些实施方案中，R’、R1-R2和R23以及所述化合物的异构体选自以下：

环孢菌素类似物可以是小分子亲环蛋白抑制剂CRV431(下文示出)，其是环孢菌素A(CsA)的衍生物，一种由11个氨基酸组成的中性环肽，其中氨基酸1和氨基酸3已经被化学修饰。

CRV431是一种正在临床开发的、用于治疗包括肝纤维化和肝细胞癌的肝病的小分子亲环蛋白抑制剂。在临床前研究中，CRV431在许多体内模型中示出针对包括乙型肝炎、丙型肝炎和HIV的多种病毒的抗病毒活性以及肝中的抗纤维化活性。在非酒精性脂肪性肝炎(“NASH”)的实验模型中，CRV431可以减少由NASH和肝细胞癌肿瘤负荷引起的肝纤维化。

例如，如本文描述的，CRV431可以调节致癌基因，并且具有抗致癌活性。CRV431可以减少从来源于五种细胞类型的成纤维细胞中产生细胞外基质(ECM)分子、胶原和纤连蛋白，所述五种细胞类型包括来自患有特发性肺纤维化(“IPF”)的患者的肺成纤维细胞、心脏成纤维细胞、真皮(皮肤)成纤维细胞、肾系膜细胞和LX2肝星状细胞系。已知的是，IPF是一种迫切需要新的治疗的侵袭性纤维化疾病。如本文描述的，CRV431剂量依赖性地以相似的幅度降低来自所有细胞类型的前胶原和纤连蛋白的分泌，如通过酶联免疫吸附测定(ELISA)测量的。无论细胞是否用促纤维化剂转化生长因子-β(TGFβ)刺激，抑制程度是相似的，这与对ECM合成的直接影响一致。在临床相关浓度，CRV431剂量依赖性地降低ECM产生多达55％，而不引起细胞生存力的任何降低。如本文公开的，CRV431可以用于通过抑制亲环蛋白B来减少ECM产生，并且与该观察结果一致，用小干扰RNA(siRNA)下调亲环蛋白B类似地减少前胶原和纤连蛋白的分泌。

纤维化瘢痕形成是包括癌症的许多疾病的主要病理特征和器官功能障碍的驱动因素。但是极少的治疗可用于减弱瘢痕形成。大多数治疗试图通过靶向成纤维细胞的刺激来减少纤维化，但这些信号传导事件可能因患者、纤维化疾病的类型或疾病阶段而变化。在不局限于任何特定理论的情况下，可以有利的是，在一些实施方案中，使用CRV431用于治疗与癌症相关的纤维化(在肝中以及在除肝以外的器官中)，因为CRV431的作用可以与刺激信号的类型无关。

所述方法、组合物和试剂盒还可以用于使癌细胞对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者敏化。该方法可以包括使癌细胞与包含本文公开的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物接触，从而使癌细胞对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者敏化。使癌细胞与组合物接触可以在体外、离体、体内或以任何组合发生。在一些实施方案中，使癌细胞与组合物接触是在受试者的身体内。在一些实施方案中，癌细胞在细胞培养物中与组合物接触。受试者可以是哺乳动物，例如人类。癌细胞的敏化可以将癌细胞对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者的响应性增加以下值或增加约以下值：1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或这些值中的任两个之间的范围。癌细胞的敏化可以将癌细胞对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者的响应性增加至少以下值或增加至少约以下值：1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或这些值中的任两个之间的范围。在一些实施方案中，癌细胞的响应性的增加是相对于未经治疗的癌细胞。癌细胞的敏化可以将具有癌细胞的受试者对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者的响应性增加以下值或增加约以下值：1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或这些值中的任两个之间的范围。癌细胞的敏化可以将具有癌细胞的受试者对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者的响应性增加至少以下值或增加至少约以下值：1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或这些值中的任两个之间的范围。在一些实施方案中，具有癌细胞的受试者的响应性的增加是相对于未用组合物治疗的受试者。

该方法可以包括在与组合物接触之后，确定癌细胞对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者的敏化。该方法可以包括在与组合物接触的同时和/或在与组合物接触之后，使癌细胞与一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者接触。在一些实施方案中，使癌细胞与一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者接触在受试者的身体内发生。受试者可以是哺乳动物，例如人类。受试者可以是例如对单独的一种或更多种抗癌剂、单独的一种或更多种癌症疗法或两者无响应，或者已知对单独的一种或更多种抗癌剂、单独的一种或更多种癌症疗法或两者具有抗性的受试者。受试者可以是例如先前经受使用一种或更多种抗癌剂的治疗、一种或更多种癌症疗法或两者的受试者。在一些实施方案中，该方法包括确定受试者对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者的响应。

癌细胞可以包括例如恶性上皮肿瘤细胞、鳞癌细胞、腺癌细胞、恶性毒瘤细胞、子宫内膜癌细胞、乳腺癌细胞、卵巢癌细胞、宫颈癌细胞、输卵管癌细胞、原发性腹膜癌细胞、结肠癌细胞、结肠直肠癌细胞、肛门生殖器区鳞状细胞癌细胞、黑素瘤细胞、肾细胞癌细胞、肺癌细胞、非小细胞肺癌细胞、肺部鳞状细胞癌细胞、胃癌细胞、膀胱癌细胞、胆囊癌细胞、肝癌细胞、甲状腺癌细胞、喉癌细胞、唾液腺癌细胞、食管癌细胞、头颈癌细胞、胶质母细胞瘤细胞、胶质瘤细胞、头颈部鳞状细胞癌细胞、前列腺癌细胞、胰腺癌细胞、间皮瘤细胞、肉瘤细胞、血液学癌症细胞、白血病细胞、淋巴瘤细胞、神经瘤细胞、多发性骨髓瘤细胞或其组合。在一些实施方案中，癌细胞包括肝癌细胞。在一些实施方案中，癌细胞包括从患有肝癌的患者中分离的细胞。在一些实施方案中，癌细胞包括多发性骨髓瘤细胞。

抗癌剂可以是例如放射治疗剂、抗免疫抑制剂、免疫刺激剂、化学治疗剂或其任何组合。例如，抗癌剂可以是抗PD-1剂、抗PD-L1剂、抗CTLA4剂、抗TIM-3剂、抗LAG-3剂、GITR(糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白)刺激剂、抗IDO剂、抗ICOS剂、抗OX40剂、抗CSF1R剂、趋化因子信号传导剂、细胞因子信号刺激剂或其组合。抗癌剂的非限制性实例包括贝伐珠单抗、帕博利珠单抗、纳武利尤单抗、PDR001、REGN2810(SAR-439684)、BGB-A317、BI 754091、IBI308、INCSHR-1210、JNJ-63723283、JS-001、MEDI0680(AMP-514)、MGA-012、PF-06801591、REGN-2810、TSR-042、阿替利珠单抗、阿维鲁单抗、CX-072、度伐利尤单抗、FAZ053、LY3300054、PD-L1 millamolecule、阿替利珠单抗、度伐利尤单抗、阿维鲁单抗、LY3300054、氨鲁米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗、β-羟基β-甲基丁酸酯、比卡鲁胺、博来霉素、硼替佐米、布舍瑞林、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡非佐米、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯膦酸盐、秋水仙碱、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素、柔红霉素、德兰佐米、双烯雌酚、己烯雌酚、双硫仑、多西他赛、多柔比星、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、表柔比星、环氧酶素、雌二醇、雌莫司汀、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟达拉滨、氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、吉西他滨、染料木黄酮、戈舍瑞林、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、干扰素、伊立替康、ironotecan、来曲唑、亚叶酸、亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、伊沙佐米、马里佐米、氮芥、甲羟孕酮、甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、诺考达唑、奥曲肽、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸盐、喷司他丁、普卡霉素、卟吩姆钠、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔单抗、链脲菌素、苏拉明、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、睾酮、硫鸟嘌呤、噻替派、二氯二茂钛、托泊替康、曲妥珠单抗、维甲酸、长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨及其组合。癌症疗法的非限制性实例包括手术、化学疗法、放射疗法、免疫疗法及其组合。

组合疗法

本文公开的方法、组合物和试剂盒可以组合地用于任何治疗方法、剂或疗法中，以治疗增生性疾病、预防增生性疾病的发作、抑制增生性疾病的发作或延迟增生性疾病的发作，减缓增生性疾病的进展，和/或减轻增生性疾病的一种或更多种症状、预防增生性疾病的一种或更多种症状的发作或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作。在一些实施方案中，增生性疾病是癌症。例如，本文公开的方法可以包括向受试者施用一种或更多种癌症疗法或一种或更多种另外的治疗剂。癌症疗法的实例包括但不限于手术、化学疗法、放射疗法、激素疗法、免疫疗法、补充疗法或替代疗法及其任何组合。在一些实施方案中，癌症疗法或另外的治疗剂是用于相应癌症的当前护理标准的一部分。

另外的治疗剂可以包括一种或更多种化学治疗剂，包括但不限于有丝分裂抑制剂、烷基化剂、抗代谢物、嵌入抗生素(intercalating antibiotic)、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物响应改性剂(biological response modifier)、抗激素、血管生成抑制剂、蛋白酶体抑制剂和抗雄激素。另外的治疗剂的非限制性实例包括化学治疗剂、细胞毒性剂和非肽类小分子诸如

(甲磺酸伊马替尼)、

(卡非佐米)、

(硼替佐米)、Casodex(比卡鲁胺)、

(吉非替尼)、维奈托克(venetoclax)和阿霉素。化学治疗剂的非限制性实例包括烷基化剂，诸如噻替哌和环磷酰胺(CYTOXANTM)；烷基磺酸酯，诸如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶类，诸如苯佐替哌、卡波醌、美妥替哌和乌瑞替哌；乙烯亚胺类和甲基三聚氰胺类，包括六甲蜜胺、三亚乙基三聚氰胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基三聚氰胺；氮芥类，诸如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺(cholophosphamide)、雌莫司汀、异环磷酰胺、氮芥、盐酸甲氧氮芥、美法仑、新恩比兴、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲洛磷胺、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲类，诸如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀；抗生素类，诸如阿克拉霉素、放线菌素、氨茴霉素、重氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素C(cactinomycin)、卡奇霉素(calicheamicin)、卡柔比星、洋红霉素、嗜癌菌素(carzinophilin)、CasodexTM、色霉素、放线菌素、柔红霉素、地托比星(detorubicin)、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比星、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素、霉酚酸(mycophenolicacid)、诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素、泊非霉素、嘌呤霉素、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星、链黑菌素、链脲菌素、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢物，诸如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，诸如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、二脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素类，诸如卡鲁睾酮、丙酸屈他雄酮、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺素类，诸如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，诸如亚叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；安吖啶；倍曲布西；比生群；依达曲沙；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺；亚丝醌(diaziquone)；依氟鸟氨酸；依利醋铵；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；二胺硝吖啶(nitracrine)；喷司他丁；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；PSK；雷佐生；西索菲兰(sizofiran)；锗螺胺；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2',2”-三氯三乙胺；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；甲托辛(gacytosine)；阿拉伯糖苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替哌；紫杉烷类，例如紫杉醇和多西他赛；维甲酸；埃斯培拉霉素(esperamicin)；卡培他滨；以及上述任何一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物。

在一些实施方案中，一种或更多种另外的剂包括能够调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂，诸如抗雌激素类，包括例如他莫昔芬、(NolvadexTM)、雷洛昔芬、芳香化酶抑制性4(5)-咪唑、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬、凯奥昔芬(keoxifene)、LY 117018、奥那司酮和托瑞米芬(法乐通(Fareston))；以及抗雄激素类，诸如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯嘌呤；甲氨蝶呤；铂类似物，诸如顺铂和卡铂；长春花碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；丝裂霉素C；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；诺维本；二羟基蒽醌(novantrone)；替尼泊苷；柔红霉素；氨基蝶呤；希罗达(xeloda)；伊班膦酸盐；喜树碱-11(CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)。

在一些实施方案中，可以被施用至正在接受、已经接受或将接受本文公开的组合物的施用的受试者的一种或更多种另外的治疗剂包含目前处方的抗癌药物，诸如

ABVD、AVICINE、阿巴伏单抗(Abagovomab)、吖啶甲酰胺、阿德木单抗(Adecatumumab)、17-N-烯丙基氨基-17-脱甲氧基格尔德霉素、Alpharadin、Alvocidib、3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲、氨萘非特、蒽二酮、抗CD22免疫毒素、抗肿瘤药、抗肿瘤药草、阿帕喹酮(Apaziquone)、阿替莫德(Atiprimod)、硫唑嘌呤、贝洛替康、苯达莫司汀、BIBW 2992、比立考达(Biricodar)、Brostallicin、苔藓虫素(Bryostatin)、丁硫氨酸亚砜亚胺(Buthioninesulfoximine)、CBV(化学疗法)、花萼海绵诱癌素、细胞周期非特异性抗肿瘤剂、二氯乙酸、圆皮海绵内酯、依沙芦星、依诺他滨、埃博霉素、艾日布林、依维莫司、依喜替康、依昔舒林、弥罗松酚(Ferruginol)、呋咯地辛、磷雌酚、ICE化学疗法方案、IT-101、伊美克、咪喹莫特、吲哚并咔唑、伊洛福芬、Laniquidar、拉洛他赛、来那度胺、硫蒽酮、勒托替康、马磷酰胺、米托唑胺、萘福昔定、奈达铂、奥拉帕尼、奥他赛(Ortataxel)、PAC-1、Pawpaw、匹克生琼、蛋白酶体抑制剂、蝴蝶霉素(Rebeccamycin)、瑞喹莫德、鲁比替康、SN-38、盐孢菌酰胺A、沙帕他滨(Sapacitabine)、Stanford V、苦马豆素、他拉泊芬、塔利奎达(tariquidar)、优福定(Tegafur-uracil)、替莫唑胺、替司他赛、四硝酸三铂、三(2-氯乙基)胺、曲沙他滨、乌拉莫司汀、Vadimezan、长春氟宁、ZD6126、唑喹达(Zosuquidar)、免疫调节剂、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂、抗体或其组合。

在一些实施方案中，本文公开的方法、组合物和试剂盒可以与放射疗法组合使用，用于抑制异常细胞生长或治疗增生性疾病诸如过度增生性紊乱。放射疗法的非限制性实例包括但不限于外束疗法(external-beam therapy)、内放射疗法、植入放射、立体定向放射外科手术、全身放射疗法、放射疗法和永久性或暂时性间质内近距离放射疗法。

在一些实施方案中，本文公开的方法、组合物或试剂盒与抗血管生成剂、化学治疗剂、抗肿瘤剂、类固醇、信号转导抑制剂、抗增生剂、糖酵解抑制剂和自噬抑制剂中的一种或更多种组合使用。抗血管生成剂可以是MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂、MMP-9(基质金属蛋白酶9)抑制剂和COX-11(环氧合酶11)抑制剂。抗血管生成剂包括例如雷帕霉素、坦西莫司(CCI-779)、依维莫司(RAD001)、索拉非尼、舒尼替尼和贝伐珠单抗。COX-II抑制剂的非限制性实例包括塞来昔布、伐地昔布和罗非昔布。抗肿瘤剂的非限制性实例包括乙酰吗喃(acemannan)、阿柔比星、阿地白介素、阿仑单抗、阿利维甲酸(alitretinoin)、六甲蜜胺、氨磷汀、氨基乙酰丙酸、氨柔比星、安吖啶、阿那格雷、阿那曲唑、ANCER、安塞司亭、阿格拉宾(ARGLABIN)、三氧化二砷、BAM 002(Novelos)、贝沙罗汀、比卡鲁胺、溴尿苷、卡培他滨、西莫白介素、西曲瑞克、克拉屈滨、克霉唑、阿糖胞苷烷磷酯(cytarabine ocfosfate)、DA 3030(Dong-A)、达利珠单抗、地尼白介素(denileukin diftitox)、德舍瑞林、右雷佐生、地拉齐普(dilazep)、多西他赛、二十二醇、度骨化醇、去氧氟尿苷、多柔比星、溴隐亭、卡莫司汀、阿糖胞苷、氟尿嘧啶，HIT双氯芬酸、干扰素α、柔红霉素、多柔比星、维甲酸、依地福新、依决洛单抗、依氟鸟氨酸、乙嘧替氟、表柔比星、倍他依泊汀(epoetin beta)、磷酸依托泊苷、依西美坦、依昔舒林、法倔唑、非格司亭、非那雄胺、磷酸氟达拉滨、福美斯坦、福莫司汀、硝酸镓、吉西他滨、吉妥珠单抗(gemtuzumab)、奥佐米星、吉美拉西/奥替拉西/替加氟组合、glycopine、戈舍瑞林、依铂(heptaplatin)、人类绒毛膜促性腺激素、人类胎儿甲胎蛋白、伊班膦酸、伊达比星、咪喹莫特、干扰素α、天然干扰素α(interferon alfa,natural)、干扰素α-2、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素α-N1、干扰素α-n3、干扰素alfacon-1、天然干扰素α(interferon alpha,natural)、干扰素β、干扰素β-1a、干扰素β-1b、干扰素γ、天然干扰素γ-1a、干扰素γ-1b、白细胞介素-1β、碘苄胍、伊立替康、伊索拉定(irsogladine)、兰瑞肽、LC 9018(Yakult)、来氟米特、来格司亭、硫酸香菇多糖、来曲唑、白细胞α干扰素、亮丙瑞林、左旋咪唑+氟尿嘧啶、利阿唑、洛铂、氯尼达明、洛伐他汀、马索罗酚、美拉胂醇、甲氧氯普胺、米非司酮、米替福新、米立司亭、错配的双链RNA、米托胍腙、二溴卫矛醇、米托蒽醌、莫拉司亭(molgramostim)、那法瑞林、纳洛酮+喷他佐辛、那托司亭、奈达铂、尼鲁米特、诺司卡品、新型红细胞生成刺激蛋白、NSC 631570、奥曲肽、奥普瑞白介素、奥沙特隆、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸、培门冬酶、聚乙二醇干扰素α-2b、木聚硫钠、喷司他丁、毕西巴尼、吡柔比星、兔抗胸腺细胞多克隆抗体、聚乙二醇干扰素α-2a、卟吩姆钠、雷洛昔芬、雷替曲塞、rasburiembodiment、铼Re 186依替膦酸盐、RII维甲酰胺(RII retinamide)、利妥昔单抗、罗莫肽、来昔决南钐(153Sm)、沙格司亭、西索菲兰、索布佐生、索纳明(sonermin)、氯化锶-89、苏拉明、他索纳明、他扎罗汀、替加氟、替莫泊芬、替莫唑胺、替尼泊苷、四氯十氧(tetrachlorodecaoxide)、沙利度胺、胸腺法新、促甲状腺素α、托泊替康、托瑞米芬、托西莫单抗-碘131、曲妥珠单抗、曲奥舒凡、维甲酸、曲洛司坦、三甲曲沙、曲普瑞林、天然肿瘤坏死因子α、乌苯美司、膀胱癌疫苗、丸山疫苗(Maruyama vaccine)、黑素瘤裂解物疫苗、戊柔比星、维替泊芬、长春瑞滨、维如利金(VIRULIZIN)、净司他丁斯酯或唑来膦酸；阿巴瑞克；AE941(Aeterna)、氨莫司汀、反义寡核苷酸、bcl-2(Genta)、APC 8015(Dendreon)、西妥昔单抗、地西他滨、右旋氨鲁米特(dexaminoglutethimide)、亚丝醌、EL 532(Elan)、EM 800(Endorecherche)、恩尿嘧啶、依他硝唑、芬维A胺(fenretinide)、非格司亭SD01(Amgen)、氟维司群、加洛他滨、胃泌素17免疫原、HLA-B7基因疗法(Vical)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、二盐酸组胺、替伊莫单抗、伊洛马司他、IM 862(Cytran)、白细胞介素-2、伊丙昔芬(iproxifene)、LDI 200(Milkhaus)、来立司亭(leridistim)、林妥珠单抗(lintuzumab)、CA125MAb(Biomira)、癌症MAb(Japan Pharmaceutical Development)、HER-2和Fc MAb(Medarex)、个体基因型105AD7 MAb(CRC Technology)、个体基因型CEA MAb(Trilex)、LYM-1-碘131MAb(Techniclone)、多形性上皮粘蛋白-钇90MAb(Antisoma)、马立马司他、美诺立尔(menogaril)、米妥莫单抗、莫特沙芬钆、MX 6(Galderma)、奈拉滨、诺拉曲特、P 30蛋白、培维索孟、培美曲塞、泊非霉素、普啉司他、RL 0903(Shire)、鲁比替康、沙铂、苯乙酸钠、膦门冬酸(sparfosic acid)、SRL 172(SR Pharma)、SU 5416(SUGEN)、TA 077(Tanabe)、四硫钼酸盐、噻布拉亭(thaliblastine)、血小板生成素、本紫红素乙酯锡(tin ethyletiopurpurin)、替拉扎明、癌症疫苗(Biomira)或伐司朴达(Valspodar)。

抗血管生成剂的实例包括但不限于ERBITUX^TM(IMC-C225)，KDR(激酶结构域受体)抑制剂(例如，特异性地结合至激酶结构域受体的抗体和抗原结合区)，抗VEGF剂(例如，特异性地结合VEGF的抗体或抗原结合区，或者可溶性VEGF受体或其配体结合区)诸如AVASTIN^TM或VEGF-TRAP^TM，和抗VEGF受体剂(例如，特异性地结合至其的抗体或抗原结合区)，EGFR抑制剂(例如，特异性地结合至其的抗体或抗原结合区)诸如Vectibix(帕尼单抗)、IRESSA^TM(吉非替尼)、TARCEVA^TM(厄洛替尼)，抗Ang1剂和抗Ang2剂(例如，特异性地结合至其或它们的受体的抗体或抗原结合区，例如Tie2/Tek)，抗Tie2激酶抑制剂(例如，特异性地结合至其的抗体或抗原结合区)，Campath，IL-8，B-FGF，Tek拮抗剂，抗TWEAK剂(例如，特异性地结合抗体或抗原结合区，或者可溶性TWEAK受体拮抗剂)，用于拮抗整合素与其配体的结合、特异性地结合抗eph受体和/或抗ephrin抗体或抗原结合区的ADAM去整合素结构域，抗PDGF-BB拮抗剂(例如，特异性地结合抗体或抗原结合区)以及特异性地结合至PDGF-BB配体的抗体或抗原结合区，以及PDGFR激酶抑制剂(例如，特异性地结合至其的抗体或抗原结合区)。自噬抑制剂包括但不限于氯喹、3-甲基腺嘌呤、羟氯喹(Plaquenil^TM)、巴佛洛霉素A1、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核苷(AICAR)、软海绵酸(okadaic acid)、抑制2A型或1型的蛋白磷酸酶的自噬抑制藻毒素、cAMP的类似物，以及提高cAMP水平的药物诸如腺苷、LY204002、N6-巯基嘌呤核苷和长春花碱。

非限制性化学治疗剂包括天然产物诸如长春花生物碱类(例如，长春花碱、长春新碱和长春瑞滨)、紫杉醇、表鬼臼毒素类(例如，依托泊苷和替尼泊苷)、抗生素类(例如，放线菌素(放线菌霉素D)、柔红霉素、多柔比星和伊达比星)、蒽环类、米托蒽醌、博来霉素、普卡霉素(光神霉素)、丝裂霉素、酶(例如，系统地代谢L-天冬酰胺并剥夺没有合成它们自己的天冬酰胺的能力的细胞的L-天冬酰胺酶)、抗血小板剂、抗增殖/抗有丝分裂烷基化剂诸如氮芥类(例如，氮芥、环磷酰胺及类似物、美法仑和苯丁酸氮芥)、乙烯亚胺类和甲基三聚氰胺类(例如，六甲基三聚氰胺和噻替派)、CDK抑制剂(例如，seliciclib、UCN-01、P1446A-05、PD-0332991、dinaciclib、P27-00、AT-7519、RGB286638和SCH727965)、烷基磺酸酯(例如，白消安)、亚硝基脲类(例如，卡莫司汀(BCNU)及类似物，和链脲菌素)、三氮烯-达卡巴嗪(trazenes-dacarbazinine)(DTIC)、抗增殖/抗有丝分裂抗代谢物诸如叶酸类似物(例如，甲氨蝶呤)、嘧啶类似物(例如，氟尿嘧啶、氟尿苷和阿糖胞苷)、嘌呤类似物和相关的抑制剂(例如，巯嘌呤、硫鸟嘌呤、喷司他丁和2-氯脱氧腺苷)、芳香化酶抑制剂(例如，阿那曲唑、依西美坦和来曲唑)、和铂配位络合物(例如，顺铂和卡铂)、丙卡巴肼、羟基脲、米托坦、氨鲁米特、组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂(例如，曲古抑菌素、丁酸钠、apicidin、辛二酰苯胺异羟肟酸、伏立诺他、LBH 589、罗米地辛、ACY-1215和帕比司他)、mTor抑制剂(例如，坦西莫司、依维莫司、地磷莫司和西罗莫司)、KSP(Eg5)抑制剂(例如，Array 520)、DNA结合剂(例如，Zalypsis)、PI3K δ抑制剂(例如，GS-1101和TGR-1202)、PI3K δ和γ抑制剂(例如，CAL-130)、多激酶抑制剂(例如，TG02和索拉非尼)、激素类(例如，雌激素)和激素激动剂诸如黄体化激素释放激素(LHRH)激动剂(例如，戈舍瑞林、亮丙瑞林和曲普瑞林)、BAFF中和抗体(例如，LY2127399)、IKK抑制剂、p38MAPK抑制剂、抗IL-6(例如，CNTO328)、端粒酶抑制剂(例如，GRN 163L)、极光激酶抑制剂(例如，MLN8237)、细胞表面单克隆抗体(例如，抗CD38(HUMAX-CD38)、抗CS1(例如，埃罗妥珠单抗)、HSP90抑制剂(例如，17AAG和KOS 953)、P13K/Akt抑制剂(例如，哌立福辛)、Akt抑制剂(例如，GSK-2141795)、PKC抑制剂(例如，恩扎妥林(enzastaurin))、FTI(例如，Zarnestra^TM)、抗CD138(例如，BT062)、Torc1/2特异性激酶抑制剂(例如，INK128)、激酶抑制剂(例如，GS-1101)、ER/UPR靶向剂(例如，MKC-3946)、cFMS抑制剂(例如，ARRY-382)、JAK1/2抑制剂(例如，CYT387)、PARP抑制剂(例如，奥拉帕尼和维利帕尼(ABT-888))、BCL-2拮抗剂。其他化学治疗剂可以包括氮芥、喜树碱、异环磷酰胺、他莫昔芬、雷洛昔芬、吉西他滨、诺维本、索拉非尼或前述的任何类似物或衍生物变体。

如本文公开的方法、组合物和试剂盒可以与放射疗法、激素疗法、手术和免疫疗法组合使用，这些疗法是本领域技术人员熟知的。

类固醇的非限制性实例包括21-乙酰氧基孕烯醇酮、阿氯米松、阿尔孕酮、安西奈德、倍氯米松、倍他米松、布地奈德、氯强的松、氯倍他索、氯可托龙、氯泼尼醇、皮质酮、可的松、可的伐唑、地夫可特、地奈德、去羟米松、地塞米松、二氟拉松、二氟可龙、二氟孕甾丁酯、甘草次酸、氟扎可松、氟氯奈德、氟米松、氟尼缩松、氟轻松缩丙酮(fluocinoloneacetonide)、醋酸氟轻松(fluocinonide)、氟可丁丁酯(fluocortin butyl)、氟可龙、氟米龙、醋酸氟培龙、醋酸氟泼尼定、氟泼尼松龙、氟氢缩松、氟替卡松丙酸酯、福莫可他、哈西奈德、卤倍他索丙酸酯、卤米松、氢化可的松、依碳酸氯替泼诺(loteprednol etabonate)、马泼尼酮、甲羟松、甲泼尼松、甲基泼尼松龙、糠酸莫米他松、帕拉米松、泼尼卡酯、泼尼松龙、泼尼松龙25-二乙基氨基乙酸酯、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松、泼尼松龙戊酸酯(prednival)、泼尼立定、利美索龙、替可的松、曲安奈德、曲安奈德缩丙酮(triamcinolone acetonide)、苯曲安奈德(triamcinolone benetonide)、己曲安奈德(triamcinolone hexacetonide)以及其盐和/或衍生物。在特定的实施方案中，本发明的化合物还可以与治疗恶心的另外的药物活性剂组合使用。可以用于治疗恶心的剂的实例包括：屈大麻酚；格拉司琼；甲氧氯普胺；昂丹司琼；和普鲁氯嗪；或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，被施用至受试者的一种或更多种另外的治疗剂包括一种或更多种PD-1拮抗剂、PD-L1拮抗剂、EGFR抑制剂、MEK抑制剂、PI3K抑制剂、AKT抑制剂、TOR抑制剂、Mcl-1抑制剂、BCL-2抑制剂、SHP2抑制剂、蛋白酶体抑制剂以及免疫疗法，包括单克隆抗体、免疫调节酰亚胺(IMiD)、抗PD-1剂、抗PDL-1剂、抗CTLA4剂、抗LAG1剂和抗OX40剂、GITR激动剂、CAR-T细胞和BiTE。蛋白酶体抑制剂包括但不限于

(卡非佐米)、

(硼替佐米)和奥泼佐米。单克隆抗体包括但不限于

(达雷木单抗)、

(曲妥珠单抗)、

(贝伐珠单抗)、

(利妥昔单抗)、

(雷珠单抗)和

(阿柏西普)。在一些实施方案中，一种或更多种另外的治疗剂包括贝伐珠单抗、帕博利珠单抗、纳武利尤单抗、PDR001、REGN2810(SAR-439684)、BGB-A317、BI 754091、IBI308、INCSHR-1210、JNJ-63723283、JS-001、MEDI0680(AMP-514)、MGA-012、PF-06801591、REGN-2810、TSR-042、阿替利珠单抗、阿维鲁单抗、CX-072、度伐利尤单抗、FAZ053、LY3300054、PD-L1 millamolecule、阿替利珠单抗、度伐利尤单抗、阿维鲁单抗、LY3300054、氨鲁米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗、β-羟基β-甲基丁酸酯、比卡鲁胺、博来霉素、硼替佐米、布舍瑞林、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡非佐米、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯膦酸盐、秋水仙碱、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素、柔红霉素、德兰佐米、双烯雌酚、己烯雌酚、双硫仑、多西他赛、多柔比星、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、表柔比星、环氧酶素、雌二醇、雌莫司汀、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟达拉滨、氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、吉西他滨、染料木黄酮、戈舍瑞林、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、干扰素、伊立替康、ironotecan、来曲唑、亚叶酸、亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、伊沙佐米、马里佐米、氮芥、甲羟孕酮、甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、诺考达唑、奥曲肽、奥泼佐米、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸盐、喷司他丁、普卡霉素、卟吩姆钠、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔单抗、链脲菌素、苏拉明、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、睾酮、硫鸟嘌呤、噻替派、二氯二茂钛、托泊替康、曲妥珠单抗、维甲酸、长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨或其组合。

在一些实施方案中，该方法包括施用标准护理治疗和本文公开的环孢菌素类似物(例如，CRV431)(或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体)，用于治疗有需要的受试者的多发性骨髓瘤。标准护理治疗可以包括例如一种或更多种蛋白酶体抑制剂(例如，Velcade(硼替佐米)、Kyprolis(卡非佐米)和Ninlaro(伊沙佐米)、β-羟基β-甲基丁酸酯、德兰佐米、双硫仑、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、环氧酶素、马里佐米和奥泼佐米)。

试剂盒、组合物及施用方法

在一些实施方案中提供的内容包括试剂盒，该试剂盒包含：环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体，以及指示试剂盒的使用的标签。在一些实施方案中，标签指示试剂盒用于治疗受试者的增生性疾病，例如癌症。在一些实施方案中，标签指示试剂盒用于预防受试者的增生性疾病，例如癌症。在一些实施方案中，标签指示试剂盒用于减轻增生性疾病的一种或更多种症状，或者预防或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作。在一些实施方案中，标签指示试剂盒用于预防或延迟增生性疾病的发作。在一些实施方案中，所述方法、组合物和试剂盒可以预防纤维化(例如，肝癌相关纤维化)、治疗纤维化(例如，肝癌相关纤维化)、减少纤维化的量、延迟纤维化的发作、减少或抑制纤维化形成、逆转纤维化或其任何组合。

在一些实施方案中，本文还提供了组合物，该组合物包含：本文公开的一种或更多种环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体，用于治疗增生性疾病，预防增生性疾病，用于减轻增生性疾病的一种或更多种症状，或者预防或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作。

增生性疾病可以例如是过度增生性疾病。在一些实施方案中，增生性疾病是癌症。癌症可以是原发性癌症和/或继发性癌症。癌症可以是实体瘤或液体瘤。在一些实施方案中，癌症是实体瘤，包括但不限于黑素瘤、肾细胞癌、肺癌、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、胆囊癌、喉癌、肝癌、甲状腺癌、胃癌、唾液腺癌、前列腺癌、胰腺癌、梅克尔细胞癌、脑和中枢神经系统癌及其任何组合。在一些实施方案中，癌症是液体瘤。在一些实施方案中，癌症是血液学癌症，包括但不限于弥漫性大B细胞淋巴瘤(“DLBCL”)、霍奇金淋巴瘤(“HL”)、非霍奇金淋巴瘤(“NHL”)、滤泡性淋巴瘤(“FL”)、急性骨髓性白血病(“AML”)和多发性骨髓瘤(“MM”)。

纤维化可以是影响心脏、肝、肺、骨骼肌、肾脏、眼睛、血管、皮肤、脑、骨髓、胃肠道、腹膜、脉管系统或其任何组合的纤维化。在一些实施方案中，纤维化是非肝纤维化。纤维化紊乱可以是本文公开的任何纤维化紊乱，包括但不限于视网膜纤维化、角膜纤维化、结膜纤维化、小梁网的纤维化、肾纤维化、肺纤维化、特发性肺纤维化(IPF)、普通型间质性肺炎(UIP)、间质性肺病(ILD)、隐源性纤维化肺泡炎(CFA)、闭塞性细支气管炎、支气管扩张、肝硬化、肝纤维化、纤维化血管疾病、囊性纤维化、肺纤维化、特发性肺纤维化、肌肉骨骼纤维化、肾纤维化疾病、与HIV相关的淋巴结纤维化、炎性肺纤维化、胰腺纤维化、心脏纤维化、血管纤维化、心肌纤维化或其组合。

在一些实施方案中，组合物是稳定的自微乳化药物递送系统(“SMEDDS”)制剂，其包含环孢菌素A的衍生物或类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体。组合物可以例如使得能够实现环孢菌素A的衍生物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的良好溶解度，并且使得能够实现人类的显著的血液暴露。在一些实施方案中，组合物还包含聚氧乙烯蓖麻油(polyoxyl castor oil)(也被称为聚氧乙烯40氢化蓖麻油、聚乙二醇甘油羟基硬脂酸酯(macrogolglycerol hydroxystearate)和PEG-40氢化蓖麻油诸如

RH40和

RH40)。在一些实施方案中，组合物包含乙醇。在一些实施方案中，组合物包含二乙二醇单乙醚(也被称为2-(2-乙氧基乙氧基)乙醇，诸如

)。在一些实施方案中，组合物包含丙二醇(PG)。在一些实施方案中，组合物包含单亚油酸甘油酯，诸如

CC。在一些实施方案中，组合物包含维生素E。包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐的多种药物组合物/药物递送系统(例如，SMEDDS制剂)已经在作为WO 2020/112562公布的PCT专利申请中描述，该PCT专利申请的内容通过引用以其整体并入本文。

在一些实施方案中，该系统包含维生素E、

CC、丙二醇、

乙醇和

RH40。在不同的实施方案中，该系统中的非环孢菌素A类似物组分的重量比可以是不同的。在一些实施方案中，该系统中的非环孢菌素A类似物组分(例如，维生素E、

CC、丙二醇、

乙醇或

RH40)相对于另一种非环孢菌素A类似物组分(例如，维生素E、

CC、丙二醇、

乙醇或

RH40)的重量比可以在约0.1和约10之间。在一些实施方案中，该系统中的非环孢菌素A类似物组分相对于所有其他非环孢菌素A组分的重量比可以在约0.1和约10之间。在一些实施方案中，该系统中的非环孢菌素A类似物组分相对于另一种非环孢菌素A类似物组分(或相对于所有其他非环孢菌素A组分)的重量比可以是以下值，可以是约以下值，可以是至少以下值，可以是至少约以下值，可以是至多以下值，或可以是至多约以下值：0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95、1、1.05、1.1、1.15、1.2、1.25、1.3、1.35、1.4、1.45、1.5、1.55、1.6、1.65、1.7、1.75、1.8、1.85、1.9、1.95、2、2.05、2.1、2.15、2.2、2.25、2.3、2.35、2.4、2.45、2.5、2.55、2.6、2.65、2.7、2.75、2.8、2.85、2.9、2.95、3、3.05、3.1、3.15、3.2、3.25、3.3、3.35、3.4、3.45、3.5、3.55、3.6、3.65、3.7、3.75、3.8、3.85、3.9、3.95、4、4.05、4.1、4.15、4.2、4.25、4.3、4.35、4.4、4.45、4.5、4.55、4.6、4.65、4.7、4.75、4.8、4.85、4.9、4.95、5、5.05、5.1、5.15、5.2、5.25、5.3、5.35、5.4、5.45、5.5、5.55、5.6、5.65、5.7、5.75、5.8、5.85、5.9、5.95、6、6.05、6.1、6.15、6.2、6.25、6.3、6.35、6.4、6.45、6.5、6.55、6.6、6.65、6.7、6.75、6.8、6.85、6.9、6.95、7、7.05、7.1、7.15、7.2、7.25、7.3、7.35、7.4、7.45、7.5、7.55、7.6、7.65、7.7、7.75、7.8、7.85、7.9、7.95、8、8.05、8.1、8.15、8.2、8.25、8.3、8.35、8.4、8.45、8.5、8.55、8.6、8.65、8.7、8.75、8.8、8.85、8.9、8.95、9、9.05、9.1、9.15、9.2、9.25、9.3、9.35、9.4、9.45、9.5、9.55、9.6、9.65、9.7、9.75、9.8、9.85、9.9、9.95、10或这些值中的任两个之间的数字或范围。例如，该系统包含以1/1/5/5/2.4/4至1/1.5/2.5/5/2.4/5的重量比的维生素E、

CC、丙二醇、

乙醇和

RH40。

该系统可以例如包含以从约10mg/mL至约90mg/mL，包括10mg/mL、20mg/mL、30mg/mL、40mg/mL、50mg/mL、60mg/mL、70mg/mL、80mg/mL、90mg/mL、这些值中的任两个之间的范围或在10mg/mL至90mg/mL内的任何值的浓度的环孢菌素类似物(例如，CRV431)。在一些实施方案中，该系统包含以约90mg/mL的浓度的环孢菌素类似物(例如，CRV431)。在一些实施方案中，该系统包含以70mg/mL或约70mg/mL的浓度的环孢菌素类似物(例如，CRV431)。

组合物可以是例如包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体以及一种或更多种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在一些实施方案中，组合物通过静脉内施用、鼻施用、肺施用、口服施用或肠胃外施用被施用至受试者。在一些实施方案中，组合物呈粉末、丸剂、片剂、微片剂、小丸、微丸、胶囊、含有微片剂的胶囊、液体、气溶胶、悬浮液或纳米颗粒的形式。在一些实施方案中，组合物每天一次、每天两次或每天三次被施用至受试者。在一些实施方案中，组合物在紧急情况下(例如，在正在进行的手术中)被施用至受试者一次或两次。在一些实施方案中，组合物在至少一天、至少两天、至少三天、至少一周或更长时间的进程中被施用至受试者。在一些实施方案中，组合物以从10mg至250mg的环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的有效日剂量被施用至受试者。

环孢菌素类似物(例如，CRV431)的治疗有效量和施用频率以及使用环孢菌素类似物(例如，CRV431)的治疗长度可以取决于多种因素，包括增生性疾病的性质和严重程度，环孢菌素类似物(例如，CRV431)的效力，施用模式，受试者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食以及受试者对治疗的响应，并且可以由治疗医师确定。在一些实施方案中，如本文描述的用于治疗或预防增生性疾病或者用于减少或抑制增生性疾病的进展的环孢菌素类似物(例如，CRV431)的治疗有效量为约0.1mg-200mg、0.1mg-150mg、0.1mg-100mg、0.1mg-50mg、0.1mg-30mg、0.5mg-20mg、0.5mg-10mg或1mg-10mg(例如，每天或每剂)，或者在治疗医师认为合适的情况下，其可以以单剂量或以分开的剂量施用。在一些实施方案中，如本文描述的用于治疗或预防增生性疾病或者用于减少或抑制增生性疾病的进展的环孢菌素类似物(例如，CRV431)的治疗有效剂量(例如，每天或每剂)为约0.1mg-1mg(例如，约0.1mg、0.5mg或1mg)、约1mg-5mg(例如，约1mg、2mg、3mg、4mg或5mg)、约5mg-10mg(例如，约5mg、6mg、7mg、8mg、9mg或10mg)、约10mg-20mg(例如，约10mg、15mg或20mg)、约20mg-30mg(例如，约20mg、25mg或30mg)、约30mg-40mg(例如，约30mg、35mg或40mg)、约40mg-50mg(例如，约40mg、45mg或50mg)、约50mg-100mg(例如，约50mg、60mg、70mg、80mg、90mg或100mg)、约100mg-150mg(例如，约100mg、125mg或150mg)或约150mg-200mg(例如，约150mg、175mg或200mg)。在一些实施方案中，治疗有效剂量的环孢菌素类似物(例如，CRV431)每天一次或更多次(例如，两次、三次或更多次)、或每两天或每三天一次、或每周一次、每周两次或每周三次被施用，或在治疗医师认为合适的情况下被施用。在一些实施方案中，组合物包含治疗或预防有效量的环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体。

环孢菌素类似物(例如，CRV431)也可以以不规则的方式给药。例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431)可以在30分钟、一小时、两小时或更长时间的时间段内以不规则的方式被施用一次、两次或三次。此外，环孢菌素类似物(例如，CRV431)可以按比例(根据需要)服用。例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431)可以被施用1次、2次、3次、4次、5次或更多次，无论是以规则的方式还是不规则的方式，直到疾病状况改善。在实现从紊乱/状况中缓解后，环孢菌素类似物(例如，CRV431)的给药可以任选地被停止。如果紊乱/状况复发，则可以恢复环孢菌素类似物(例如，CRV431)的施用，无论是以规则的方式还是不规则的方式。环孢菌素类似物(例如，CRV431)的适当的剂量、给药频率以及使用环孢菌素类似物(例如，CRV431)的治疗长度可以由治疗医师确定。

环孢菌素类似物(例如，CRV431)也可以预防性地用于治疗或预防增生性疾病，或者预防或减少增生性疾病的发作，或者减少或抑制增生性疾病的进展。环孢菌素类似物(例如，CRV431)的预防有效量可以是本文描述的环孢菌素类似物(例如，CRV431)的任何治疗有效量。

环孢菌素类似物(例如，CRV431)可以经由任何合适的途径施用。环孢菌素类似物(例如，CRV431)的潜在施用途径包括但不限于口服的、肠胃外的(包括肌内的、皮下的、皮内的、血管内的、静脉内的、动脉内的、髓内的和鞘内的)、腔内的、腹膜内的和局部的(包括真皮的/表皮的、透皮的、粘膜的、经粘膜的、鼻内的[例如，通过鼻喷雾剂或鼻滴剂]、眼内的[例如，通过滴眼剂]、肺部的[例如，通过口服吸入或鼻吸入]、含服的、舌下的、直肠的和阴道的)。在一些实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)被口服地施用(例如，作为胶囊或片剂，任选地具有肠溶包衣)。在其他实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)被肠胃外地(例如，静脉内地、皮下地或皮内地)施用。在另外的实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)被局部地(例如，真皮地、表皮地、透皮地、粘膜地、经粘膜地、含服地或舌下地)施用。

在一些实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)在没有食物的情况下被施用。在一些实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)在餐前或在餐后至少约1小时或2小时被施用。在一些实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)在晚餐后至少约2小时被施用。环孢菌素类似物(例如，CRV431)也可以大体上与食物同时服用(例如，在餐前或在餐后约0.5小时、1小时或2小时内服用，或者与餐一起服用)。

在其中期望环孢菌素类似物(例如，CRV431)的治疗水平更快速建立的一些实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)按给药时间表施用，其中负载剂量被施用，随后是(i)一个或更多个另外的负载剂量以及然后一个或更多个治疗有效维持剂量，或(ii)一个或更多个治疗有效维持剂量，而没有另外的负载剂量，如治疗医师认为合适的。药物的负载剂量通常比随后的维持剂量大(例如，是随后的维持剂量的约1.5倍、2倍、3倍、4倍或5倍大)，并且被设计成更快速地建立药物的治疗水平。一个或更多个治疗有效维持剂量可以是本文描述的任何治疗有效剂量。在一些实施方案中，负载剂量是维持剂量的约三倍大。在一些实施方案中，负载剂量的环孢菌素类似物(例如，CRV431)被施用，随后是在适当的时间之后(例如，在约12小时或24小时之后)施用维持剂量的环孢菌素类似物(例如，CRV431)，并且此后持续治疗持续时间—例如，负载剂量的环孢菌素类似物(例如，CRV431)在第1天被施用并且维持剂量在第2天被施用，并且此后持续治疗持续时间。在一些实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)在第1天以约1.5mg、3mg、15mg或30mg(例如，3×约0.5mg、3×1mg、3×5mg或3×10mg)的负载剂量被口服地(例如，作为片剂)施用，随后每天一次口服地(例如，作为片剂)施用约0.5mg、1mg、5mg或10mg的维持剂量，任选地在就寝时间施用，持续至少约2周、1个月(4周)、6周、2个月、10周、3个月、4个月、5个月、6个月、1年、1.5年、2年、3年或更长时间(例如，至少约6周、2个月、3个月或6个月)。在一些实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)在第1天以约15mg(例如，3×约5mg)的负载剂量被口服地(例如，作为片剂)施用，随后每天一次口服地(例如，作为片剂)施用约5mg的维持剂量，任选地在就寝时间施用，持续至少约2周、1个月、6周、2个月、3个月、6个月、1年、1.5年、2年、3年或更长时间(例如，至少约6周、2个月、3个月或6个月)。

在一些实施方案中，第一负载剂量的环孢菌素类似物(例如，CRV431)在第1天被施用，第二负载剂量在第2天被施用并且维持剂量在第3天被施用，并且此后持续治疗持续时间。在一些实施方案中，第一负载剂量是维持剂量的约三倍大，并且第二负载剂量是维持剂量的约两倍大。

如本文公开的，治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))可以被配制用于以药物组合物施用，所述药物组合物包含生理学上可接受的表面活性剂、载体、稀释剂、赋形剂、平滑剂(smoothing agent)、悬浮剂、成膜物质、包衣助剂或其组合。在一些实施方案中，治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))被配制用于与药学上可接受的载体或稀释剂一起施用。治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))可以按照制药领域中常规的标准药学上可接受的载体和/或赋形剂被配制为药物。制剂的确切性质将取决于若干种因素，包括期望的施用途径。在一些实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)被配制用于口服施用、静脉内施用、胃内施用、血管内施用或腹膜内施用。可以使用标准的药物配制技术，诸如在通过引用以其整体并入本文的Remington's The Science and Practice ofPharmacy,第21版,Lippincott Williams&Wilkins(2005)中公开的技术。

术语“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任何和所有的溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。用于药学活性物质的这样的介质和剂的使用是本领域熟知的。除非任何常规的介质或剂与活性成分不相容，否则考虑其在治疗组合物中的使用。此外，可以包括诸如本领域中常用的多种佐剂。对在药物组合物中包含多种组分的考虑例如在Gilman等人(编著)(1990)；Goodman and Gilman's:ThePharmacological Basis of Therapeutics,第8版,Pergamon Press中描述，其通过引用以其整体并入本文。

可以用作药学上可接受的载体或其组分的物质的一些实例是糖，诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，诸如羧甲基纤维素钠、粉末状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石粉；固体润滑剂，诸如硬脂酸和硬脂酸镁；硫酸钙；植物油，诸如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油(theobroma oil)；多元醇，诸如丙二醇、甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；海藻酸；乳化剂，诸如TWEEN；润湿剂，诸如月桂基硫酸钠；着色剂；调味剂；制片剂(tableting agent)、稳定剂；抗氧化剂；防腐剂；无热原水；等渗盐水；以及磷酸盐缓冲剂溶液。

与主题治疗剂结合使用的药学上可接受的载体的选择基本上由组合物被施用的方式决定。

本文描述的组合物优选地以单位剂型提供。如本文使用的，“单位剂型”是包含一定量的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))的组合物，其根据良好的医学实践，适合于以单剂量施用至动物，优选地哺乳动物受试者。然而，单一剂型或单位剂型的制备并不意味着该剂型每天一次或每个疗程一次被施用。这样的剂型被考虑每天一次、两次、三次或更多次被施用，并且可以在一段时间内(例如，从约30分钟至约2小时-6小时)以输注施用，或以连续输注施用，并且可以在疗程期间被给予多于一次，尽管不特别排除单次施用。技术人员将认识到，制剂并不特定地考虑整个疗程，并且这样的决定留给治疗领域的技术人员而不是制剂领域的技术人员。

如上文描述的有用的组合物可以呈用于多种施用途径，例如用于口服的、鼻的、直肠的、局部的(包括透皮的)、眼部的、脑内的、颅内的、鞘内的、动脉内的、静脉内的、肌内的或其他肠胃外施用途径的多种合适形式中的任一种。技术人员将理解，口服组合物和鼻组合物包括通过吸入施用并使用可用的方法制备的组合物。取决于期望的特定施用途径，可以使用本领域中熟知的多种药学上可接受的载体。药学上可接受的载体包括例如固体或液体填充剂、稀释剂、水溶助剂、表面活性剂和包封物质。可以包括任选的药学活性材料，其大体上不干扰治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))的抑制活性。与治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))结合使用的载体的量足以为每单位剂量的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))提供切实可行的量的施用材料。用于制备可用于本文描述的方法的剂型的技术和组合物在全部通过引用并入本文的以下参考文献中描述：ModernPharmaceutics,第4版,第9章和第10章(Banker&Rhodes编著,2002)；Lieberman等人,Pharmaceutical Dosage Forms:Tablets(1989)；以及Ansel,Introduction toPharmaceutical Dosage Forms第8版(2004)。

可以使用多种口服剂型，包括诸如片剂、胶囊和颗粒剂的固体形式。片剂可以是压缩的、片剂研磨的、肠溶包衣的、糖包衣的、膜包衣的或多重压缩的，包含合适的粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、调味剂、流动诱导剂(flow-inducing agent)和熔化剂(melting agent)。液体口服剂型包括水溶液、乳液、悬浮液、由非泡腾颗粒剂重构的溶液和/或悬浮液以及由泡腾颗粒剂重构的泡腾制品，包含合适的溶剂、防腐剂、乳化剂、悬浮剂、稀释剂、甜味剂、熔化剂、着色剂和调味剂。

适合于制备用于经口施用的单位剂型的药学上可接受的载体是本领域熟知的。片剂通常包含作为惰性稀释剂的常规药学上相容的佐剂，诸如碳酸钙、碳酸钠、甘露糖醇、乳糖和纤维素；粘合剂，诸如淀粉、明胶和蔗糖；崩解剂，诸如淀粉、海藻酸和交联羧甲基纤维素；润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸和滑石粉。助流剂诸如二氧化硅可以用于改善粉末混合物的流动特性。着色剂诸如FD&C染料可以被添加用于外观。甜味剂和调味剂诸如阿斯巴甜、糖精、薄荷醇、薄荷和水果香料是用于咀嚼片的有用佐剂。胶囊通常包含一种或更多种上文公开的固体稀释剂。载体组分的选择取决于次要考虑如味道、成本和储存稳定性，该次要考虑不是关键的，并且可以由本领域技术人员容易地进行。

经口组合物还包括液体溶液、乳液、悬浮液及类似物。适合于制备这样的组合物的药学上可接受的载体是本领域熟知的。糖浆、酏剂、乳液和悬浮液的载体的典型组分包括乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、液体蔗糖、山梨糖醇和水。对于悬浮液，典型的悬浮剂包括羧甲基纤维素钠、AVICEL RC-591、黄蓍胶和海藻酸钠；典型的润湿剂包括卵磷脂和聚山梨醇酯80；并且典型的防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯和苯甲酸钠。经口液体组合物还可以包含一种或更多种组分诸如上文公开的甜味剂、调味剂和着色剂。

可用于实现主题治疗剂的全身递送的其他组合物包括舌下剂型、含服剂型和鼻剂型。这样的组合物通常包含以下中的一种或更多种：可溶性填充剂物质诸如蔗糖、山梨糖醇和甘露糖醇；以及粘合剂诸如阿拉伯树胶、微晶纤维素、羧甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素。还可以包括上文公开的助流剂、润滑剂、甜味剂、着色剂、抗氧化剂和调味剂。

对于局部使用，采用包含本文公开的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))的乳膏、软膏、凝胶、溶液或悬浮液等。局部制剂通常可以包含药物载体、助溶剂、乳化剂、渗透增强剂、防腐剂体系和润肤剂。

对于静脉内施用，本文描述的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))和组合物可以溶解或分散在药学上可接受的稀释剂诸如盐水或右旋糖溶液中。可以包括合适的赋形剂以达到期望的pH，包括但不限于NaOH、碳酸钠、乙酸钠、HC1和柠檬酸。在多种实施方案中，最终组合物的pH在从2至8，或优选地从4至7的范围内。抗氧化剂赋形剂可以包括亚硫酸氢钠、丙酮亚硫酸氢钠、甲醛钠、次硫酸盐、硫脲和EDTA。在最终静脉内组合物中存在的合适的赋形剂的其他非限制性实例可以包括磷酸钠或磷酸钾、柠檬酸、酒石酸、明胶和碳水化合物诸如右旋糖、甘露糖醇和右旋糖酐。另外的可接受的赋形剂在Powell等人,Compendiumof Excipients for Parenteral Formulations,PDA J Pharm Sci and Tech 1998,52238-31 1以及Nema等人,Excipients and Their Role in Approved InjectableProducts:Current Usage and Future Directions,PDA J Pharm Sci and Tech 2011,65287-332中描述，这两篇文献通过引用以其整体并入本文。还可以包括抗微生物剂以实现抑细菌溶液或抑真菌溶液，包括但不限于硝酸苯汞、硫柳汞、苄索氯铵、苯扎氯铵、苯酚、甲酚和氯丁醇。

用于静脉内施用的组合物可以以一种或更多种固体的形式提供给护理人员，所述固体在施用之前不久用合适的稀释剂诸如无菌水、盐水或在水中的右旋糖重构。在其他实施方案中，组合物以准备进行肠胃外地施用的溶液提供。在还其他实施方案中，组合物以溶液提供，该溶液在施用之前被进一步稀释。在包括施用本文描述的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))和另一种剂的组合的实施方案中，该组合可以作为混合物提供给护理人员，或者护理人员可以在施用之前混合这两种剂，或者这两种剂可以被分开地施用。

在非人类动物研究中，潜在产品的应用以较高的剂量水平开始，随着剂量的减少，直到不再实现期望的效果或不良副作用消失。取决于期望的效果和治疗适应症，剂量范围可能很广。通常，剂量可以在约0.1mg/kg体重和4000mg/kg体重之间，优选地在约80mg/kg体重和1600mg/kg体重之间。可选择地，如本领域技术人员所理解的，剂量可以基于患者的表面积并根据患者的表面积计算。

取决于待被治疗的状况的严重程度和反应性，给药也可以是缓慢释放组合物的单次施用，其中疗程持续从数天至数周或直到治愈被实现或疾病状态的减轻被实现。当然，待被施用的组合物的量将取决于许多因素，包括所治疗的受试者、痛苦的严重程度、施用的方式、处方医师的判断。本文公开的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))或治疗剂的组合可以以每天从0.1mg/kg患者体重至4000mg/kg患者体重的剂量口服地或经由注射施用。对于成人的剂量范围通常是从1g/天至100g/天。以离散单位提供的片剂或其他呈递形式可以方便地包含一定量的本文公开的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))或治疗剂的组合，其在这样的剂量或作为多个这样的剂量是有效的，例如包含1g至60g(例如，从约5g至20g、从约10g至50g、从约20g至40g或从约25g至35g)的单位。施用至患者的治疗剂的精确量将由巡诊医师(attendant physician)负责。然而，采用的剂量将取决于许多因素，包括患者的年龄和性别、被治疗的确切紊乱以及其严重程度。另外，施用途径可能取决于状况及其严重程度而变化。治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))的典型剂量可以是每kg体重从0.02g至1.25g，例如每kg体重从0.1g至0.5g，这取决于这样的参数。在一些实施方案中，治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))的剂量可以是从1g至100g，例如从10g至80g、从15g至60g、从20g至40g或从25g至35g。医师将能够确定治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))针对任何特定受试者的所需剂量。

本文公开的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))或治疗剂的组合的药物组合物的确切的制剂、施用途径和剂量可以由个体医师考虑患者的状况来选择。通常，施用至患者的组合物的剂量范围可以是从约0.1mg/kg患者体重至约4000mg/kg患者体重。根据患者的需要，剂量可以是在一天或更多天的进程中给予的单个剂量或两个或更多个剂量的系列。在其中已经针对至少一些状况确定治疗剂的人体剂量的情况下，本公开内容将使用那些相同的剂量，或者确定的人体剂量的在约0.1％和约5000％之间、更优选地在约25％和约1000％之间的剂量。在没有确定人体剂量的情况下，正如新发现的药物化合物的情况，可以从ED₅₀值或ID₅₀值或者从体外或体内研究得出的其他适当值(如通过在动物中的毒性研究和效力研究所证实的)推断出合适的人体剂量。

应当注意的是，主治医师将知道如何以及何时由于毒性或器官功能障碍而终止、中断或调节施用。相反地，如果临床响应不充分(排除毒性)，主治医师也将知道将治疗调节至较高水平。在管理关注的紊乱时所施用的剂量的大小将随着待被治疗的状况的严重程度和施用途径而变化。状况的严重程度可以例如部分地通过标准的预后评价方法来评价。此外，剂量和可能的给药频率也将根据个体患者的年龄、体重和响应而变化。与上文讨论的程序相当的程序可以用于兽医学。

尽管确切的剂量将基于不同的药物来确定，但是在大多数情况下，可以进行关于剂量的一些一般化。在施用药学上可接受的盐的情况下，剂量可以作为游离碱计算。在一些实施方案中，组合物每天1次至4次被施用。可选择地，本文公开的组合物可以通过连续静脉内输注施用，例如，以每天多达100g的每种活性成分的剂量施用。如本领域技术人员将理解的，在某些情况下，可能有必要以超过或甚至远远超过上文陈述的优选的剂量范围的量施用本文公开的组合物，以便有效且积极地治疗特别有侵袭性的疾病或感染。在一些实施方案中，本文公开的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))或治疗剂的组合将被施用持续连续治疗的时间段，例如持续一周或更长时间，或持续数月或数年。

在一些实施方案中，本文公开的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))或治疗剂的组合的给药方案被施用持续一段时间，该时间段可以是例如从至少约1周到至少约4周、从至少约4周到至少约8周、从至少约4周到至少约12周、从至少约4周到至少约16周或更长时间。本文公开的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))或治疗剂的组合的给药方案可以每天三次、每天两次、每天、每隔一天、每周三次、每隔一周、每月三次、每月一次、大体上连续地或连续地被施用。

环孢菌素类似物(例如，CRV431)可以单独施用或以组合物(例如，药物组合物)的形式施用。在一些实施方案中，药物组合物包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、笼形包合物、多晶型物、前药或代谢物，以及一种或更多种药学上可接受的载体或赋形剂。组合物可以任选地包含如本文描述的一种或更多种另外的治疗剂。药物组合物包含治疗有效量的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))以及一种或更多种药学上可接受的载体或赋形剂，并且被配制用于施用至受试者以用于治疗用途。出于药物组合物的含量的目的，术语“治疗剂”、“活性成分”、“活性剂”和“药物”涵盖前药。

药物组合物包含呈大体上纯的形式的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))。在一些实施方案中，治疗剂的纯度是至少约95％、96％、97％、98％或99％。在一些实施方案中，治疗剂的纯度是至少约98％或99％。此外，药物组合物大体上不含污染物或杂质。在一些实施方案中，药物组合物中除了残余溶剂以外的污染物或杂质的水平相对于预期的活性成分和非活性成分的组合重量不大于约5％、4％、3％、2％或1％。在一些实施方案中，药物组合物中除了残余溶剂以外的污染物或杂质的水平相对于预期的活性成分和非活性成分的组合重量不大于约2％或1％。药物组合物通常根据当前的优良生产规范(GMP)制备，如通过例如联邦食品、药物和化妆品法案§501(a)(2)(B)和国际协调协合会Q7指南所推荐或要求的。

药学上可接受的载体和赋形剂包括药学上可接受的材料、媒介物和物质。赋形剂的非限制性实例包括液体和固体填充剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂、助流剂、增溶剂、表面活性剂、分散剂、崩解剂、乳化剂、润湿剂、悬浮剂、增稠剂、溶剂、等渗剂、缓冲剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、抗氧化剂、抗微生物剂、抗细菌剂、抗真菌剂、吸收延迟剂、甜味剂、调味剂、着色剂、佐剂、包封材料和包衣材料。这样的赋形剂在药物制剂中的用途是本领域已知的。例如，常规的媒介物和载体包括但不限于油(例如，植物油，诸如芝麻油)、含水溶剂(例如，盐水、磷酸盐缓冲盐水[PBS]和等渗溶液[例如，林格氏溶液])以及溶剂(例如，二甲基亚砜[DMSO]和醇[例如，乙醇、甘油和丙二醇])。除非任何常规的载体或赋形剂与活性成分不相容，否则本公开内容涵盖常规的载体和赋形剂在包含治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))的制剂中的使用。参见，例如，Remington:The Science and Practice ofPharmacy,第21版,Lippincott Williams&Wilkins(Philadelphia,Pennsylvania[2005])；Handbook of Pharmaceutical Excipients,第5版,Rowe等人,编著,The PharmaceuticalPress and the American Pharmaceutical Association(2005)；Handbook ofPharmaceutical Additives,第3版,Ash and Ash,编著,Gower Publishing Co.(2007)；以及Pharmaceutical Preformulation and Formulation,Gibson编著,CRC Press(BocaRaton,Florida,2004)。

适当的制剂可以取决于多种因素，诸如选择的施用模式。包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)的药物组合物的潜在施用模式包括但不限于口服的、肠胃外的(包括肌内的、皮下的、皮内的、血管内的、静脉内的、动脉内的、腹膜内的、髓内的、鞘内的和局部的)、腔内的和局部的(包括真皮的/表皮的、透皮的、粘膜的、经粘膜的、鼻内的[例如，通过鼻喷雾剂或滴鼻剂]、肺部的[例如，通过口服吸入或鼻吸入]、含服的、舌下的、直肠的[例如，通过栓剂]和阴道的[例如，通过栓剂])。

作为实例，适合于口服施用的环孢菌素类似物(例如，CRV431)的制剂可以作为例如快速推注剂(bolus)；片剂、胶囊、丸剂、扁囊剂或锭剂；作为粉末或颗粒剂；作为半固体、舐剂(electuary)、糊剂或凝胶；作为在含水液体或/和非含水液体中的溶液或悬浮液；或作为水包油液体乳液或油包水液体乳液呈现。

片剂可以包含与例如填充剂或惰性稀释剂(例如，碳酸钙、磷酸钙、乳糖、甘露糖醇或微晶纤维素)、粘合剂(例如，淀粉、明胶、阿拉伯树胶、海藻酸或其盐或微晶纤维素)、润滑剂(例如，硬脂酸、硬脂酸镁、滑石粉或二氧化硅)和崩解剂(例如，交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠或胶体二氧化硅)以及任选的表面活性剂(例如，月桂基硫酸钠)混合的环孢菌素类似物(例如，CRV431)。片剂可以是无包衣的，或者可以用例如保护活性成分免受胃的酸性环境影响的肠溶包衣，或用延迟活性成分在胃肠道中的崩解和吸收并由此在较长的时间段内提供持续的作用的材料来包衣。在一些实施方案中，片剂包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)、甘露糖醇、微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠和月桂基硫酸钠以及任选的乳糖一水合物，并且片剂任选地被膜包衣(例如，用

)。

推入配合式胶囊(Push-fit capsule)或两件式硬明胶胶囊可以包含与例如填充剂或惰性固体稀释剂(例如，碳酸钙、磷酸钙、高岭土或乳糖)、粘合剂(例如，淀粉)、助流剂或润滑剂(例如，滑石粉或硬脂酸镁)和崩解剂(例如，交联聚维酮)以及任选的稳定剂或/和防腐剂混合的环孢菌素类似物(例如，CRV431)。对于软胶囊或单件式明胶胶囊，环孢菌素类似物(例如，CRV431)可以溶解或悬浮在合适的液体(例如，液体聚乙二醇或油介质，诸如脂肪油、花生油、橄榄油或液体石蜡)中，并且液体填充的胶囊可以包含一种或更多种其他液体赋形剂或/和半固体赋形剂，诸如稳定剂或/和两亲性剂(例如，甘油、丙二醇或山梨糖醇的脂肪酸酯)。

用于口服施用的组合物也可以被配制为在含水液体或/和非含水液体中的溶液或悬浮液，或者被配制为水包油液体乳液或油包水液体乳液。环孢菌素类似物(例如，CRV431)的可分散的粉末或颗粒剂可以与含水液体、有机溶剂或/和油以及任何合适的赋形剂(例如，分散剂、润湿剂、悬浮剂、乳化剂或/和防腐剂的任何组合)的任何合适的组合混合，以形成溶液、悬浮液或乳液。

环孢菌素类似物(例如，CRV431)也可以被配制用于通过注射或输注的肠胃外施用，以规避胃肠吸收和首过代谢。代表性的肠胃外途径是静脉内的。

静脉内施用的另外的优点包括将治疗剂直接施用到体循环中以实现快速的全身效果，以及如果需要，连续地或/和以大体积施用剂的能力。用于注射或输注的制剂可以呈例如在油性媒介物或含水媒介物中的溶液、悬浮液或乳液的形式，并且可以包含赋形剂，诸如悬浮剂、分散剂或/和稳定剂。例如，含水或非含水(例如，油性)无菌注射溶液可以包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)连同赋形剂诸如抗氧化剂、缓冲剂、抑细菌剂以及致使制剂与受试者的血液等渗的溶质。含水或非含水无菌悬浮液可以包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)连同赋形剂诸如悬浮剂和增稠剂以及任选的稳定剂和增加环孢菌素类似物(例如，CRV431)的溶解度的剂，以允许制备更浓的溶液或悬浮液。作为另一个实例，用于注射或输注(例如，皮下地或静脉内地)的无菌水溶液可以包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)、NaCl、缓冲剂(例如，柠檬酸钠)、防腐剂(例如，间甲酚)以及任选的碱(例如，NaOH)或/和酸(例如，HCl)以调节pH。

对于局部施用，环孢菌素类似物(例如，CRV431)可以被配制为例如含服或舌下片剂或丸剂。含服或舌下片剂或丸剂可以避免首过代谢和规避胃肠吸收。含服或舌下片剂或丸剂可以被设计以提供环孢菌素类似物(例如，CRV431)的更快释放，以用于将其更快速摄取到体循环中。除了治疗有效量的环孢菌素类似物(例如，CRV431)之外，含服或舌下片剂或丸剂可以包含合适的赋形剂，包括但不限于填充剂和稀释剂(例如，甘露糖醇和山梨糖醇)、粘合剂(例如，碳酸钠)、润湿剂(例如，碳酸钠)、崩解剂(例如，交联聚维酮和交联羧甲基纤维素钠)、润滑剂(例如，二氧化硅[包括胶体二氧化硅]和硬脂基富马酸钠)、稳定剂(例如，碳酸氢钠)、调味剂(例如，绿薄荷香料(spearmint flavor))、甜味剂(例如，三氯蔗糖)和着色剂(例如，黄色氧化铁)的任何组合。

对于局部施用，环孢菌素类似物(例如，CRV431)也可以被配制用于鼻内施用。鼻粘膜提供大的表面积、多孔的内皮、血管丰富的上皮下层和高吸收率，并且因此允许高生物利用度。此外，鼻内施用避免了首过代谢，并且可以将相当大浓度的环孢菌素类似物(例如，CRV431)引入到中枢神经系统，允许环孢菌素类似物(例如，CRV431)经由在延髓中的咳嗽中枢中的孤束核(其中迷走神经传入神经终止)阻断中枢咳嗽反射。鼻内溶液或悬浮液制剂可以包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)连同赋形剂诸如溶解度增强剂(例如，丙二醇)、保湿剂(例如，甘露糖醇或山梨糖醇)、缓冲剂和水以及任选的防腐剂(例如，苯扎氯铵)、粘膜粘附剂(mucoadhesive agent)(例如，羟乙基纤维素)或/和渗透增强剂。在一些实施方案中，鼻喷雾制剂包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、右旋糖和水以及任选的酸(例如，HC1)以调节pH。鼻内溶液或悬浮液制剂可以通过任何合适的手段被施用至鼻腔，所述手段包括但不限于滴管、移液管或使用例如计量雾化喷雾泵的喷雾。另外的局部施用模式是肺部的，包括通过口服吸入和鼻吸入。

在一些实施方案中，环孢菌素类似物(例如，CRV431)由持续释放组合物递送。如本文使用的，术语“持续释放组合物”涵盖持续释放的、延长释放的、延时释放的、缓慢释放的和控制释放的组合物、系统和装置。持续释放组合物的使用可以具有益处，诸如在一段时间内递送至靶位点的药物或其活性代谢物的量的改善的概况，包括在延长的时间段内递送治疗有效量的药物或其活性代谢物。在一些实施方案中，持续释放组合物在至少约1天、2天、3天、1周、2周、3周、1个月、2个月、3个月或更长时间的时间段内递送环孢菌素类似物(例如，CRV431)。在一些实施方案中，持续释放组合物是药物包封系统，诸如纳米颗粒、微粒或由例如可生物降解的聚合物或/和水凝胶制成的胶囊。在一些实施方案中，持续释放组合物包含水凝胶。水凝胶可以包含的聚合物的非限制性实例包括聚乙烯醇、丙烯酸酯聚合物(例如，聚丙烯酸钠)和具有相对大量的亲水性基团(例如，羟基基团或/和羧酸酯基团)的其他均聚物和共聚物。在一些实施方案中，持续释放药物包封系统包含膜封闭的储器，其中储器包含药物，并且膜对药物是可渗透的。这样的药物递送系统可以呈例如透皮贴剂的形式。

在一些实施方案中，持续释放组合物是口服剂型，诸如片剂或胶囊。例如，药物可以被嵌入不溶性多孔基质中，使得溶解药物必须在药物可以通过胃肠道吸收之前使其离开基质。可选择地，药物可以被嵌入基质中，该基质溶胀以形成凝胶，由此药物离开。持续释放也可以通过单层或多层渗透控制释放口服递送系统(OROS)的方式来实现。OROS是一种具有半渗透外部膜和在其中的一个或更多个小的激光钻孔的片剂。随着片剂通过身体，水经由渗透通过半渗透膜被吸收，并且所得到的渗透压将药物通过片剂中的孔推出并进入胃肠道，在胃肠道中，药物可以被吸收。

持续释放组合物可以被配制为聚合物纳米颗粒或微粒，其中聚合物颗粒可以例如通过吸入或注射或从植入物递送。在一些实施方案中，聚合物植入物或聚合物纳米颗粒或微粒包含可生物降解的聚合物。在一些实施方案中，可生物降解的聚合物包含乳酸或/和乙醇酸[例如，基于L-乳酸的共聚物，诸如聚(L-丙交酯-共-乙交酯)或聚(L-乳酸-共-D,L-2-羟基辛酸)]。例如，包含聚乳酸或/和聚乙醇酸的可生物降解的聚合物微球可以用作持续释放肺部药物递送系统。聚合物植入物或聚合物纳米颗粒或微粒的可生物降解的聚合物可以被选择为使得聚合物在预期治疗期结束的时间附近大体上完全降解，并且使得聚合物降解的副产物如聚合物是生物相容的。

对于环孢菌素类似物(例如，CRV431)的延迟释放或持续释放，组合物也可以被配制为可以被植入或注射(例如，肌内地或皮下地)到受试者中的储库。储库制剂可以被设计以在较长的时间段内，例如在至少约1周、2周、3周、1个月、6周、2个月、3个月或更长时间的时间段内递送环孢菌素类似物(例如，CRV431)。例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431)可以与聚合物材料(例如，聚乙二醇(PEG)、聚乳酸(PLA)或聚乙醇酸(PGA)或其共聚物(例如，PLGA))、疏水性材料(例如，作为油中的乳液)或/和离子交换树脂一起配制，或者作为微溶性衍生物(例如，微溶性盐)配制。作为说明性实例，环孢菌素类似物(例如，CRV431)可以被并入或嵌入包含PLGA的持续释放微粒中，并且作为每月储库配制。

环孢菌素类似物(例如，CRV431)也可以被包含或分散在基质材料中。基质材料可以包含聚合物(例如，乙烯-乙酸乙烯酯)，并且通过控制化合物从例如储器中的溶解或/和扩散来控制化合物的释放，并且可以增强化合物在被包含在储器中时的稳定性。这样的释放系统可以被设计为持续释放系统，可以被配置为例如透皮贴剂或经粘膜贴剂，并且可以包含可以加速化合物的释放的赋形剂，诸如有助于将化合物排出储器的水可溶胀的材料(例如，水凝胶)。

释放系统当需要血浆水平的时间变化时可以提供时间调制的释放概况(例如，脉冲式释放)，或者当需要恒定的血浆水平时可以提供更连续或一致的释放概况。脉冲式释放可以从单独的储器中或从多于一个储器中实现。例如，在每个储器提供单个脉冲的情况下，多个脉冲(“脉冲式”释放)通过在时间上错开来自多个储器中的每一个的单个脉冲释放来实现。

此外，包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)的药物组合物可以被配制为例如脂质体、胶束(例如，包含可生物降解的天然聚合物或/和合成聚合物诸如乳糖体(lactosome)的胶束)、微球、微粒或纳米颗粒，无论是否设计用于持续释放。

药物组合物可以以本领域已知的任何合适的方式制造，例如借助于常规的混合、溶解、悬浮、制粒、糖衣丸制造(dragee-making)、磨细(levigating)、乳化、包封、包埋或压缩工艺制造。

药物组合物可以以作为单一剂量的单位剂型呈现，其中所有活性成分和非活性成分在合适的系统中组合，并且组分不需要被混合以形成待被施用的组合物。单位剂型可以包含有效剂量的或有效剂量的适当分数的治疗剂(例如，环孢菌素类似物(例如，CRV431))。单位剂型的代表性实例包括用于口服施用的片剂、胶囊或丸剂，以及用于口服吸入或鼻吸入的小瓶或安瓿中的粉末。

本文公开的药物组合物可以作为试剂盒呈现，其中活性成分、赋形剂和载体(例如，溶剂)被提供在两个或更多个单独的容器(例如，安瓿、小瓶、管、瓶子或注射器)中，并且需要被组合以形成待被施用的组合物。试剂盒可以包含用于储存、制备和施用组合物(例如，待被静脉内地注射的溶液)的使用说明。

试剂盒可以包含呈单位剂型的所有活性成分和非活性成分或者在两个或更多个单独的容器中的活性成分和非活性成分，并且可以包含用于使用药物组合物的使用说明。在一些实施方案中，试剂盒包含环孢菌素类似物(例如，CRV431)或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、笼形包合物、多晶型物、前药或代谢物，以及用于施用化合物的使用说明。

实施例

上文讨论的实施方案的一些方面在以下实施例中被更详细地公开，这些实施例不以任何方式意图限制本公开内容的范围。

实施例1

人类精确切割的肝切片(PCLS)的CRV431处理

该实施例描述了用人类PCLS进行的研究，以确定CRV431的抗纤维化活性，其中观察到来自所有5个人类供体的PCLS具有一些预先存在的纤维化，所述预先存在的纤维化通过TGFβ+PDGF-BB刺激增加至按分数面积计7％-11％。CRV431在预防TGFβ+PDGF-BB诱导的组织纤维化方面是五种NASH药物候选中最有效的。在不存在外源性TGFβ+PDGF-BB的情况下，大多数CRV431处理的切片在培养6天之后也示出比媒介物处理的切片更少的纤维化。减少的组织纤维化伴随着胶原1α1、纤连蛋白、透明质酸、IL-6和MCP-1的减少的分泌，以及胶原1α1、αSMA、TIMP1、IL-6和MCP-1的RNA水平的降低，如通过qRT-PCR所展示的。RNA-Seq分析类似地示出，CRV431减少了许多纤维化相关基因(包括多于10种胶原基因)的表达、胶原羟化酶和氧化酶、ACTA2、VEGF和TIMP。基因表达在供体之间有相当大的变化，使得在所有供体中，少于200个基因的表达通过CRV431普遍改变。许多这些泛供体转录变化与文献中关于基因所描述的抗NASH活性、抗纤维化活性和抗致癌活性一致。在不存在TGFβ+PDGF-BB的情况下受到CRV431普遍影响的显著基因是ESM1(RNA的2.2倍减少；-2.2)、NCOA3(-2.7)、IFI44L(-4.8)、mIR-194-2(-7.9)和DKK1(RNA的3.8倍增加；+3.8)。在存在外源性TGFβ+PDGF-BB的情况下，受到CRV431普遍影响的显著基因是LOXL2(-1.9)、UBD/FAT10(-2.0)、ESM1(-2.6)、STRA6(-3.1)、RCCD1(-3.6)和DUOX2(-4.5)。不受任何特定理论的束缚，据信本文描述的结果指示CRV431能够预防纤维化形成和逆转纤维化。

PCLS获自5名经历肝癌切除术的人类供体。取决于实验方案，重复切片从切除的健康边缘收集并且培养持续4天或6天。在非刺激方案中，将切片培养持续6天，并且在整个时间段内用DMSO媒介物或5μM CRV431处理。在刺激方案中，将切片静置持续1天，并且然后施用细胞因子TGFβ和PDGF-BB持续3天，以刺激炎症和纤维化。DMSO媒介物、CRV431(1μM和5μM)、Alk5i(10μM)、奥贝胆酸(obeticholic acid)(5μM)、elafibranor(5μM)、resmetirom(5μM)和Aramchol(5μM)在用TGFβ+PDGF-BB同时进行的刺激方案中作为药物处理被单独地施用。每天更换培养基处理。

对PCLS进行四种类型的评价：(a)炎症和纤维化生物标志物向培养基中的分泌，(b)天狼星红的组织学染色和定量作为组织纤维化的量度，(c)通过RT-PCR的炎症和纤维化生物标志物的基因表达，以及(d)完整转录组的RNA测序(RNA-Seq)。四种类型的评价中的每一种在下文中描述：

(a)生物标志物分泌。对于每种处理，每天从重复切片中收集用过的培养基。使用ELISA来定量单核细胞趋化蛋白(MCP-1)、白细胞介素-6(IL-6)、金属蛋白酶-1的组织抑制剂(TIMP1)、透明质酸、纤连蛋白和胶原1α1的分泌。对于每种供体，每种处理组的生物标志物分泌的平均水平被表示为相对于DMSO媒介物的百分比变化、对所有供体平均的百分比以及最后从所有评价的天数计算的平均每日百分比变化。结果在图1A中示出(分泌的标志物-％每日平均变化)。

(b)天狼星红组织学染色。在实验结束时对PCLS进行组织学处理，并且用天狼星红染色以展示组织纤维化。天狼星红在组织学切片中以形态计量学被定量为来自每种处理的10个切片中具有天狼星红染色的百分比面积。在非刺激方案中，天狼星红染色的量相对于媒介物组表示。在刺激方案中，天狼星红染色的量相对于未经刺激的PCLS(0％)和TGFβ+PDGF-BB-刺激的+媒介物PCLS(100％)表示。结果在图1B中示出(组织纤维化的天狼星红染色)。

(c)通过RT-PCR的基因表达。在实验结束时，每种处理从重复肝切片中分离RNA，并且通过RT-PCR评价5种炎症和纤维化标志物：MCP-1、IL-6、TIMP1、αSMA和胶原1α1。β肌动蛋白被用作参考基因，以计算每种靶基因RNA的相对水平。以5μM浓度应用的CRV431与Alk5i(TGFβ受体激酶的抑制剂)、吡非尼酮(用于IPF的经批准的治疗)和尼达尼布(用于IPF的经批准的治疗)相似地减少了所有标志物的平均每日分泌和基因表达。结果在图1C中示出(通过RT-PCR的基因表达)。

(d)通过RNA-Seq的基因表达。对来自得自非刺激方案和刺激方案两者的3种供体的媒介物处理组和5μM CRV431处理组进行完整转录组的RNA测序(每样品3000万次读取)。通过生物信息学软件程序分析数据以识别在媒介物处理和CRV431处理之间差异表达的基因。

为了对(d)进行的评价，研究了对应于3种不同的供体载玻片、经历了4种不同的处理的12个样品。在该分析中进行的比较是：(1)TGFb/PDGF+CRV相对于TGFb/PDGF+媒介物(V)，以及(2)未经刺激的+CRV相对于未经刺激的+媒介物。表1示出了样品ID和对应的处理。

表1.用于评价(d)的样品

样品ID	处理
		CVR_2.1_3	TGFb/PDGF+V
CVR_2.1_9	TGFb/PDGF+CRV
		CVR_2.1_19	对照+V
CVR_2.1_21	对照+CRV
		CVR_2.2_3	TGFb/PDGF+V
CVR_2.2_9	TGFb/PDGF+CRV
		CVR_2.2_19	对照+V
CVR_2.2_21	对照+CRV
		CVR_2.4_3	TGFb/PDGF+V
CVR_2.4_9	TGFb/PDGF+CRV
		CVR_2.4_19	对照+V
CVR_2.4_21	对照+CRV

对所有样品进行质量控制检查。对于序列中的几乎所有碱基，所有样品具有多于3000万次读取和平均质量评分>35。重复水平是预期的，因为它是RNA测序，并且相同RNA的不同拷贝被预期存在于样品中。所有样品具有良好的读取量和质量，因此所有样品通过QC检查并且被包含在分析中。

按组比较TGFb/PDGF+CRV431相对于TGFb/PDGF+媒介物。生成主成分分析(PCA)图来分析样品的分布(图2A)，其示出了供体的强烈影响，因为它们基于供体聚集在一起；然而，在处理之间也存在差异，因为它们在PCA图中分开，如图2B中示出的。

在图2C的MA图中，平均计数相对于对数倍数变化作图。以红色示出在比较TGFb/PDGF+CRV和TGFb/PDGF+媒介物中不同地表达的显著基因(p-调整<0.05)。

还生成了热图以绘制显著不同地表达的基因，以用于比较TGFb/PDGF+CRV和TGFb/PDGF+媒介物(p-调整<0.05，对数倍数变化>0.5)。按组分组的样品的热图在图3A中示出，以观察组内存在的不同表达模式(蓝色＝媒介物；红色＝CRV)。相同的显著基因也被绘制到另一个热图(图3B)中，但现在将样品按供体分组绘制以便观察供体之间的差异(蓝色＝媒介物；红色＝CRV)。

此外，显著命中(significant hit)被绘制在火山图(图4)中，其中显著基因以红色绘制并且用其对应的符号ID标记。下调和上调是相对于CRV处理。

在比较TGFb/PDGF+CRV和TGFb/PDGF+媒介物(p-调整>0.05，对数倍数变化>0.5)中识别的显著不同地表达的基因在表2中示出。倍数变化是相对于处理(CRV)。

表2.在比较TGFb/PDGF+CRV和TGFb/PDGF+媒介物中识别的显著不同地表达的基因

如PCA分析中示出的，存在供体的强烈影响。因此，对每种供体单独地进行分析。按供体对TGFb/PDGF+CRV341相对于TGFb/PDGF+媒介物进行计数比较。首先，选择具有计数数量的差异(TGFb/PDGF+媒介物-TGFb/PDGF+CRV)<-300的基因。因此，媒介物组比CRV处理少至少300个拷贝。换句话说，处理比媒介物多至少300个拷贝。在对每种供体单独地进行该选择之后，绘制了维恩图，示出了所有三种供体之间的重叠。如图5A中示出的，117个基因在经CRV处理的样品中比在媒介物中多至少300个拷贝。

然后，选择具有计数数量的差异(TGFb/PDGF+媒介物-TGFb/PDGF+CRV)>300的基因，因此，选择与经CRV处理相比在媒介物样品中多至少300个拷贝的那些基因。因此，与媒介物相比，它们在CRV处理中少至少300个拷贝。在对每种供体单独地进行选择之后，绘制了维恩图，示出了所有三种供体之间的重叠。如图5B中示出的，279个基因在经CRV处理中比在媒介物中少至少300个拷贝。

然后按组比较未经刺激的+CRV431相对于未经刺激的+媒介物。生成主成分分析(PCA)图来分析样品的分布(图6A)。如所预期的，观察到供体的强烈影响，因为它们基于供体而不是基于处理聚集在一起。但是处理之间存在差异，因为它们在PCA图中分开(图6B)。

对于图6C中示出的MA图，平均计数相对于对数倍数变化作图。以红色示出在比较未经刺激的+CRV和未经刺激的+媒介物中不同地表达的显著基因(p-调整<0.05)。

通过绘制显著不同地表达的基因来生成热图，以用于比较未经刺激的+CRV和未经刺激的+媒介物(p-调整<0.05，对数倍数变化>0.5)。首先，示出了按组分组的样品的热图(图7A)，以便观察组内存在的不同表达模式(蓝色＝媒介物；红色＝CRV)。然后，相同的显著基因被绘制到热图(图7B)中，但现在将样品按供体分组绘制以便观察供体之间的差异(蓝色＝媒介物；红色＝CRV)。

显著命中被绘制在火山图(图8)中。显著基因以红色绘制并且用其对应的符号ID标记。下调基因和上调基因是相对于CRV处理。

在比较未经刺激的+CRV和未经刺激的+媒介物(p-调整>0.05，对数倍数变化>0.5)中识别的显著不同地表达的基因在表3中提供。所示出的倍数变化是相对于CRV处理。

表3.在比较未经刺激的+CRV和未经刺激的+媒介物中识别的显著不同地表达的基因

然后按供体比较未经刺激的+CRV431相对于未经刺激的+媒介物。如PCA中示出的，存在供体的强烈影响。因此，与先前的比较一样重复分析。首先，选择具有计数数量的差异(未经刺激的+媒介物-未经刺激的+CRV)<-300的基因，因此媒介物组比CRV处理少至少300个拷贝。换句话说，在CRV处理中比在媒介物中多至少300个拷贝。在对每种供体单独地进行该选择之后，绘制了维恩图，示出了所有三种供体之间的重叠。如图9A中示出的，210个基因在CRV处理中比在媒介物中多至少300个拷贝。然后，选择具有计数数量的差异(未经刺激的+媒介物-未经刺激的+CRV)>300的基因，因此，选择与经CRV处理相比在媒介物样品中多至少300个拷贝的那些基因。因此，与媒介物相比在经处理的组中少至少300个拷贝。在对每种供体单独地进行选择之后，绘制了维恩图，示出了所有三种供体之间的重叠。如图9B中示出的，255个基因在经CRV处理中比在媒介物中少至少300个拷贝。

实施例2

肝细胞癌细胞对柔红霉素的CRV431敏化

将HepG2肝细胞癌细胞系和Huh7肝细胞癌细胞系以半汇合(subconfluent)密度放置在96孔板中。化疗化合物柔红霉素和CRV431在每次处理的重复孔中以指定的浓度单独或组合应用。在孵育4天之后，用Cell Titer Glo 2.0评估细胞生存力。

如图10A-图10C中示出的，对于HepG2细胞，CRV431增加了柔红霉素的细胞毒性。在0.37μM柔红霉素和浓度范围为从0.25μM–4μM的CRV431的情况下观察到CRV431的最强的、剂量依赖性的敏化作用。

如图10D-图10F中示出的，对于Huh7细胞，CRV431增加了柔红霉素的细胞毒性。在0.37μM柔红霉素和浓度范围为从1μM–4μM的CRV431的情况下观察到CRV431的最强的、剂量依赖性的敏化作用。

实施例3

CRV431处理

NASH在2日龄的C57BL/6J雄性小鼠中通过腹膜内注射200mg链脲菌素(S0130；Sigma-Aldrich)引发，以破坏胰腺β细胞、诱导糖尿病并促进肝肥胖。小鼠在3周龄断奶，并且在研究的持续时间内开始具有60％千卡脂肪的高脂肪饮食(D12492N；Research Diets)。另外，具有常规饮食(D12450KN；Research Diets)和不具有链脲菌素的小鼠作为阴性对照被包括。将CRV431溶解在自微乳化药物媒介物中，并且然后用PBS稀释并每天通过口服灌胃以每天50mg/kg施用。媒介物和CRV431处理的开始时间和持续时间取决于研究而变化。

在第14周检查的小鼠肝没有肿瘤，而在第30周经媒介物处理的小鼠具有广泛的肿瘤负荷，这指示肝肿瘤在第14-30周期间的某个时候发展。组织病理学评估指示肿瘤本质上是细胞性的，并且因此可能代表肝细胞癌。此外，在媒介物对照组中，所有小鼠具有肝肿瘤，并且10个肝中的3个肝具有直径为1cm或更大的结节。相比之下，从第20周至第30周的CRV431处理导致肿瘤数目的一半，其中平均肿瘤较小，经CRV431处理的小鼠的10个肝中的2个肝没有肿瘤。反映肿瘤数目和大小的组合的评分系统揭示，CRV431将肿瘤负荷减少了52％。需要进一步的研究来确定是否减少的肿瘤负荷在机械上与较低的纤维化水平相关，或者反映了对细胞的更直接影响。

在两个单独的实验中，在处理结束时的肿瘤负荷通过肿瘤的数目(图11A和图12A)和基于肿瘤的数目和大小的综合评分(0-7等级；图11B和图12B)来评估。表4分别示出了通过媒介物和通过CRV431处理的两个组中的肿瘤数目和肿瘤评分的平均值。

表4.肿瘤数目和评分

在先前描述的实施方案中的至少一些中，在一种实施方案中使用的一个或更多个要素可以可互换地在另一种实施方案中使用，除非这样的替换在技术上是不可行的。本领域技术人员将理解，可以对上文描述的方法和结构进行多种其他省略、添加和修改，而不脱离所要求保护的主题的范围。所有这样的修改和改变意图落在如由所附权利要求定义的主题的范围内。

关于本文的大体上任何复数和/或单数术语的使用，本领域技术人员可以根据上下文和/或应用适当地将复数翻译为单数和/或将单数翻译为复数。多种单数/复数排列可以为了清楚而在本文中明确地阐述。如本说明书和所附权利要求中使用的，除非上下文另外清楚地指出，否则单数形式“一(a)”、“一(an)”和“该(the)”包括复数指示物。除非另外陈述，否则在本文中对“或”的任何提及意图涵盖“和/或”。

本领域技术人员将理解，一般地，本文使用的术语，且尤其是在所附权利要求(例如，所附权利要求的主体)中使用的术语通常意指“开放式的”术语(例如，术语“包括(including)”应被解释为“包括但不限于”，术语“具有”应被解释为“至少具有”，术语“包括(includes)”应被解释为“包括但不限于”等)。本领域技术人员还将理解，如果意图是特定数目的引入的权利要求叙述，则这样的意图将在权利要求中明确地叙述，并且在不存在这样的叙述的情况下，这样的意图不存在。例如，作为对理解的帮助，以下所附权利要求可以包含引导性短语“至少一个”和“一个或更多个”的使用，以引入权利要求叙述。然而，这样的短语的使用不应被解释为意味着权利要求叙述通过不定冠词“一(a)”或“一(an)”的引入将含有这样引入的权利要求叙述的任何特定的权利要求限制为含有仅仅一个这样的叙述的实施方案，即使当同一个权利要求包括引导性短语“一个或更多个”或“至少一个”和诸如“一(a)”或“一(an)”的不定冠词(例如，“一(a)”和/或“一(an)”应被解释为意指“至少一个”或“一个或更多个”)时；这也适用于用于引入权利要求叙述的定冠词的使用。此外，即使引入的权利要求叙述的具体数目被明确地叙述，本领域技术人员将认识到，这样的叙述应被解释为意指至少所叙述的数目(例如，“两个叙述”的没有其他修饰语的纯叙述，意指至少两个叙述，或者是指两个或更多个叙述)。此外，在使用与“A、B和C等中的至少一个”相似的惯例的那些情况下，一般地，这样的结构在意义上意图是本领域技术人员在惯例中所理解的意思(例如，“具有A、B和C中的至少一个的系统”将包括但不限于只具有A、只具有B、只具有C、具有A和B一起、A和C一起、B和C一起、和/或A、B和C一起等的系统)。在使用与“A、B或C等中的至少一个”相似的惯例的那些情况下，一般地，这样的结构在意义上意图是本领域技术人员在惯例中所理解的意思(例如，“具有A、B或C中的至少一个的系统”将包括但不限于只具有A、只具有B、只具有C、具有A和B一起、A和C一起、B和C一起、和/或A、B和C一起等的系统)。本领域技术人员还将理解，实际上表示两个或更多个可选择的术语的任何转折性词语和/或短语，无论是在说明书、权利要求还是附图中，都应被理解为考虑了包括一个术语、术语中的任一个、或两个术语的可能性。

此外，当本公开内容的特征或方面根据马库什组来描述时，本领域技术人员将认识到，本公开内容从而还根据马库什组的任何单独的成员或成员的子组来描述。

如将被本领域技术人员所理解的，出于任何和所有的目的，诸如在提供书面描述的方面，本文公开的所有范围还涵盖任何和所有可能的子范围和其子范围的组合。任何所列出的范围可以容易地被认识为充分地描述且能够使相同的范围被分解成至少相等的一半、三分之一、四分之一、五分之一、十分之一等。作为非限制性实例，本文讨论的每个范围可以容易地被分解成下三分之一、中间的三分之一和上三分之一等。如还将被本领域技术人员所理解的，所有措辞诸如“多达(up to)”、“至少”、“大于”、“小于”及类似措辞包括所列举的数值并且指的是如上文讨论的随后可以被分解成子范围的范围。最后，如将被本领域技术人员所理解的，范围包括每个单独的成员。因此，例如，具有1个-3个项的组指的是具有1个、2个或3个项的组。类似地，具有1个-5个项的组指的是具有1个、2个、3个、4个或5个项的组等等。

虽然多个方面和实施方案已经在本文中公开，但是其他的方面和实施方案对于本领域技术人员来说将是明显的。本文公开的多个方面和实施方案是为了说明的目的并且不意图是限制性的，其中真正的范围和精神通过所附权利要求指示。

Claims (61)

1.一种用于在患有增生性疾病的受试者中治疗所述增生性疾病的方法，包括向所述受试者施用包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，所述芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的所述芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

2.一种用于在患有增生性疾病的受试者中减轻所述增生性疾病的一种或更多种症状，或者预防或延迟所述增生性疾病的一种或更多种症状的发作的方法，包括向所述受试者施用包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，所述芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的所述芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中所述受试者处于所述增生性疾病的部分缓解中。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，包括识别患有所述增生性疾病的受试者。

5.一种用于在有相应需要的受试者中预防增生性疾病的方法，包括向所述受试者施用包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，所述芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的所述芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述有相应需要的受试者是处于发展所述增生性疾病的风险的受试者，或处于所述增生性疾病的完全缓解的受试者。

7.根据权利要求5-6中任一项所述的方法，包括识别处于发展所述增生性疾病的风险的受试者。

8.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述式L的环孢菌素类似物是CRV431：

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述增生性疾病是癌症。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述癌症是恶性上皮肿瘤、鳞癌、腺癌、恶性毒瘤、子宫内膜癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、输卵管癌、原发性腹膜癌、结肠癌、结肠直肠癌、肛门生殖器区鳞状细胞癌、黑素瘤、肾细胞癌、肺癌、非小细胞肺癌、肺部鳞状细胞癌、胃癌、膀胱癌、胆囊癌、肝癌、甲状腺癌、喉癌、唾液腺癌、食管癌、头颈癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、头颈部鳞状细胞癌、前列腺癌、胰腺癌、间皮瘤、肉瘤、血液学癌症、白血病、淋巴瘤、神经瘤、多发性骨髓瘤或其组合。

11.根据权利要求9所述的方法，其中所述癌症是肝癌。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述肝癌是原发性肝癌或继发性肝癌。

13.根据权利要求11所述的方法，其中所述肝癌是肝细胞癌(HCC)、胆管癌、血管肉瘤、恶性血管内皮瘤、肝母细胞瘤、血管瘤、肝腺瘤、局灶性结节性增生或其组合。

14.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述增生性疾病是实体瘤，并且任选地所述实体瘤是成神经细胞瘤、尤文肉瘤或维尔姆斯瘤。

15.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述增生性疾病是液体瘤。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述组合物包含治疗或预防有效量的式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。

18.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述受试者是人类。

19.根据权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述组合物包含一种或更多种药学上可接受的赋形剂。

20.根据权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述组合物包含一种或更多种另外的治疗剂。

21.根据权利要求1-19中任一项所述的方法，还包括向所述受试者施用一种或更多种另外的治疗剂，向所述受试者施用一种或更多种癌症疗法，或两者。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述一种或更多种另外的治疗剂包括放射治疗剂、抗免疫抑制剂或免疫刺激剂、化学治疗剂或其组合。

23.根据权利要求21所述的方法，其中所述一种或更多种另外的治疗剂包括抗PD-1剂、抗PD-L1剂、抗CTLA4剂、抗TIM-3剂、抗LAG-3剂、GITR(糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白)刺激剂、抗IDO剂、抗ICOS剂、蛋白酶体抑制剂、抗OX40剂、抗CSF1R剂、趋化因子信号传导剂、细胞因子信号刺激剂或其组合。

24.根据权利要求21所述的方法，其中所述一种或更多种另外的治疗剂包括贝伐珠单抗、帕博利珠单抗、纳武利尤单抗、PDR001、REGN2810(SAR-439684)、BGB-A317、BI 754091、IBI308、INCSHR-1210、JNJ-63723283、JS-001、MEDI0680(AMP-514)、MGA-012、PF-06801591、REGN-2810、TSR-042、阿替利珠单抗、阿维鲁单抗、CX-072、度伐利尤单抗、FAZ053、LY3300054、PD-L1 millamolecule、阿替利珠单抗、度伐利尤单抗、阿维鲁单抗、LY3300054、氨鲁米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗、β-羟基β-甲基丁酸酯、比卡鲁胺、博来霉素、硼替佐米、布舍瑞林、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡非佐米、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯膦酸盐、秋水仙碱、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素、柔红霉素、德兰佐米、双烯雌酚、己烯雌酚、双硫仑、多西他赛、多柔比星、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、表柔比星、环氧酶素、雌二醇、雌莫司汀、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟达拉滨、氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、吉西他滨、染料木黄酮、戈舍瑞林、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、干扰素、伊立替康、ironotecan、来曲唑、亚叶酸、亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、伊沙佐米、马里佐米、氮芥、甲羟孕酮、甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、诺考达唑、奥曲肽、奥泼佐米、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸盐、喷司他丁、普卡霉素、卟吩姆钠、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔单抗、链脲菌素、苏拉明、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、睾酮、硫鸟嘌呤、噻替派、二氯二茂钛、托泊替康、曲妥珠单抗、维甲酸、长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨或其组合。

25.根据权利要求21所述的方法，其中所述一种或更多种癌症疗法包括手术、化学疗法、放射疗法、免疫疗法或其组合。

26.根据权利要求1-25中任一项所述的方法，其中所述增生性疾病是多发性骨髓瘤。

27.根据权利要求26所述的方法，包括向所述受试者施用蛋白酶体抑制剂以及所述式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体。

28.根据权利要求26-27中任一项所述的方法，其中所述式L的环孢菌素类似物是CRV431。

29.根据权利要求27-28中任一项所述的方法，其中所述蛋白酶体抑制剂是β-羟基β-甲基丁酸酯、硼替佐米、卡非佐米、德兰佐米、双硫仑、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、环氧酶素、伊沙佐米、马里佐米或奥泼佐米。

30.根据权利要求21-29中任一项所述的方法，其中所述一种或更多种另外的治疗剂和/或所述一种或更多种癌症疗法中的至少一种与所述组合物被共同施用至所述受试者。

31.根据权利要求21-29中任一项所述的方法，其中所述一种或更多种另外的治疗剂和/或所述一种或更多种癌症疗法中的至少一种在施用所述组合物之前、在施用所述组合物之后或两者被施用至所述受试者。

32.根据权利要求1-31中任一项所述的方法，其中所述组合物通过静脉内施用、口服施用、肠胃外施用被施用至所述受试者。

33.根据权利要求1-32中任一项所述的方法，其中所述组合物呈粉末、丸剂、片剂、微片剂、小丸、微丸、胶囊、含有微片剂的胶囊、液体、气溶胶或纳米颗粒的形式。

34.根据权利要求1-33中任一项所述的方法，其中所述组合物以从10mg至250mg的所述环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的有效日剂量被施用至所述受试者。

35.一种药物组合物，包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体，用于在预防或治疗增生性疾病，或者减轻增生性疾病的一种或更多种症状，或者预防或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作，或者预防或延迟增生性疾病的发作中使用，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，所述芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的所述芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

36.根据权利要求35所述的药物组合物，其中所述环孢菌素类似物是CRV431：

37.根据权利要求35所述的药物组合物，其中所述药物组合物用于静脉内施用、口服施用或肠胃外施用。

38.根据权利要求35-37中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物呈粉末、丸剂、片剂、微片剂、小丸、微丸、胶囊、含有微片剂的胶囊、液体、气溶胶或纳米颗粒的形式。

39.根据权利要求35-38中任一项所述的药物组合物，其中所述增生性疾病是癌症。

40.根据权利要求39所述的药物组合物，其中所述癌症是恶性上皮肿瘤、鳞癌、腺癌、恶性毒瘤、子宫内膜癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、输卵管癌、原发性腹膜癌、结肠癌、结肠直肠癌、肛门生殖器区鳞状细胞癌、黑素瘤、肾细胞癌、肺癌、非小细胞肺癌、肺部鳞状细胞癌、胃癌、膀胱癌、胆囊癌、肝癌、甲状腺癌、喉癌、唾液腺癌、食管癌、头颈癌、胶质母细胞瘤、胶质瘤、头颈部鳞状细胞癌、前列腺癌、胰腺癌、间皮瘤、肉瘤、血液学癌症、白血病、淋巴瘤、神经瘤或其组合。

41.根据权利要求39所述的药物组合物，其中所述癌症是肝癌。

42.一种试剂盒，包含：

根据权利要求35-41中任一项所述的药物组合物；以及

标签，其中所述标签指示以下中的一种或更多种：

(a)所述试剂盒用于预防或治疗增生性疾病，

(b)所述试剂盒用于减轻增生性疾病的一种或更多种症状，或者预防或延迟增生性疾病的一种或更多种症状的发作，以及

(c)所述试剂盒用于预防或延迟增生性疾病的发作。

43.根据权利要求42所述的试剂盒，还包含用于识别处于发展所述增生性疾病的风险的受试者的使用说明、用于识别患有所述增生性疾病的受试者的使用说明或两者。

44.一种使癌细胞对抗癌剂或抗癌疗法敏化的方法，包括使癌细胞与包含式L的环孢菌素类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体的组合物接触，从而使所述癌细胞对一种或更多种抗癌剂、一种或更多种癌症疗法或两者敏化，

其中：

a.R’是H或乙酰基；

b.R1是长度为从2个至15个碳原子的饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族碳链；

c.R2选自由以下组成的组：

i.H；

ii.未被取代的、N-取代的或N,N-二取代的酰胺；

iii.N-取代的或未被取代的酰基保护的胺；

iv.N-取代的或未被取代的胺；

v.羧酸；

vi.腈；

vii.酯；

viii.酮；

ix.羟基烷基、二羟基烷基、三羟基烷基或多羟基烷基；和

x.被取代的或未被取代的芳基；

xi.饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链，所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链任选地包含选自由以下组成的组的取代基：氢、酮、羟基、腈、羧酸、酯、1,3-二氧戊环、卤素和氧代；

xii.芳香族基团，所述芳香族基团包含选自由以下组成的组的取代基：卤素、酯和硝基；和

xiii.(xi)的所述饱和或不饱和的直链或支链的脂肪族链和(xii)的所述芳香族基团的组合；以及

d.R23是饱和或不饱和的直链或支链的任选地被取代的脂肪族碳链。

45.根据权利要求44所述的方法，其中所述环孢菌素类似物是CRV431：

46.根据权利要求44-45中任一项所述的方法，其中使癌细胞与所述组合物接触在体外、离体和/或体内发生。

47.根据权利要求44-46中任一项所述的方法，其中使癌细胞与所述组合物接触是在受试者中。

48.根据权利要求47所述的方法，其中所述受试者对单独的所述一种或更多种抗癌剂、单独的所述一种或更多种癌症疗法或两者无响应，或者已知对单独的所述一种或更多种抗癌剂、单独的所述一种或更多种癌症疗法或两者具有抗性。

49.根据权利要求47-48中任一项所述的方法，其中所述受试者先前经受使用所述一种或更多种抗癌剂的治疗、所述一种或更多种癌症疗法或两者。

50.根据权利要求47-49中任一项所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物，并且任选地所述哺乳动物是人类。

51.根据权利要求44-50中任一项所述的方法，包括在与所述组合物接触之后，确定所述癌细胞对所述一种或更多种抗癌剂、所述一种或更多种癌症疗法或两者的敏化。

52.根据权利要求44-51中任一项所述的方法，包括使所述癌细胞与所述一种或更多种抗癌剂、所述一种或更多种癌症疗法或两者接触。

53.根据权利要求52所述的方法，其中使所述癌细胞与所述一种或更多种抗癌剂、所述一种或更多种癌症疗法或两者接触在所述受试者中发生。

54.根据权利要求52-53中任一项所述的方法，包括确定所述受试者对所述一种或更多种抗癌剂、所述一种或更多种癌症疗法或两者的响应。

55.根据权利要求52-54中任一项所述的方法，其中使所述癌细胞与所述一种或更多种抗癌剂、所述一种或更多种癌症疗法或两者接触与使所述癌细胞与所述组合物接触同时进行，或者在使所述癌细胞与所述组合物接触之后进行。

56.根据权利要求44-55中任一项所述的方法，其中所述癌细胞包括恶性上皮肿瘤细胞、鳞癌细胞、腺癌细胞、恶性毒瘤细胞、子宫内膜癌细胞、乳腺癌细胞、卵巢癌细胞、宫颈癌细胞、输卵管癌细胞、原发性腹膜癌细胞、结肠癌细胞、结肠直肠癌细胞、肛门生殖器区鳞状细胞癌细胞、黑素瘤细胞、肾细胞癌细胞、肺癌细胞、非小细胞肺癌细胞、肺部鳞状细胞癌细胞、胃癌细胞、膀胱癌细胞、胆囊癌细胞、肝癌细胞、甲状腺癌细胞、喉癌细胞、唾液腺癌细胞、食管癌细胞、头颈癌细胞、胶质母细胞瘤细胞、胶质瘤细胞、头颈部鳞状细胞癌细胞、前列腺癌细胞、胰腺癌细胞、间皮瘤细胞、肉瘤细胞、血液学癌症细胞、白血病细胞、淋巴瘤细胞、神经瘤细胞、多发性骨髓瘤细胞或其组合。

57.根据权利要求44-55中任一项所述的方法，其中所述癌细胞包括肝癌细胞。

58.根据权利要求44-57中任一项所述的方法，其中所述一种或更多种抗癌剂包括放射治疗剂、抗免疫抑制剂或免疫刺激剂、化学治疗剂或其组合。

59.根据权利要求44-57中任一项所述的方法，其中所述一种或更多种抗癌剂包括抗PD-1剂、抗PD-L1剂、抗CTLA4剂、抗TIM-3剂、抗LAG-3剂、GITR(糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白)刺激剂、抗IDO剂、抗ICOS剂、蛋白酶体抑制剂、抗OX40剂、抗CSF1R剂、趋化因子信号传导剂、细胞因子信号刺激剂或其组合。

60.根据权利要求44-57中任一项所述的方法，其中所述一种或更多种抗癌剂包括贝伐珠单抗、帕博利珠单抗、纳武利尤单抗、PDR001、REGN2810(SAR-439684)、BGB-A317、BI754091、IBI308、INCSHR-1210、JNJ-63723283、JS-001、MEDI0680(AMP-514)、MGA-012、PF-06801591、REGN-2810、TSR-042、阿替利珠单抗、阿维鲁单抗、CX-072、度伐利尤单抗、FAZ053、LY3300054、PD-L1 millamolecule、阿替利珠单抗、度伐利尤单抗、阿维鲁单抗、LY3300054、氨鲁米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗、β-羟基β-甲基丁酸酯、比卡鲁胺、博来霉素、硼替佐米、布舍瑞林、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡非佐米、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、氯膦酸盐、秋水仙碱、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素、柔红霉素、德兰佐米、双烯雌酚、己烯雌酚、双硫仑、多西他赛、多柔比星、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、表柔比星、环氧酶素、雌二醇、雌莫司汀、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟达拉滨、氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他胺、吉西他滨、染料木黄酮、戈舍瑞林、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、干扰素、伊立替康、ironotecan、来曲唑、亚叶酸、亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、伊沙佐米、马里佐米、氮芥、甲羟孕酮、甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、诺考达唑、奥曲肽、奥泼佐米、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸盐、喷司他丁、普卡霉素、卟吩姆钠、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔单抗、链脲菌素、苏拉明、他莫昔芬、替莫唑胺、替尼泊苷、睾酮、硫鸟嘌呤、噻替派、二氯二茂钛、托泊替康、曲妥珠单抗、维甲酸、长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨或其组合。

61.根据权利要求44-57中任一项所述的方法，其中所述一种或更多种癌症疗法包括手术、化学疗法、放射疗法、免疫疗法或其组合。

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