CN115317534A - 一种桃金娘提取物在降血糖及治疗糖尿病肾病中的应用 - Google Patents
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Abstract
本申请公开一种桃金娘提取物在降血糖及治疗糖尿病肾病中的应用,涉及生物医药技术领域;本申请研究发现桃金娘根提取物在预防和/或治疗糖尿病及其并发症方面有非常好的效果。通过大量科学研究和创造性的劳动发现桃金娘根提取物在预防和/或治疗糖尿病及其并发症方面有非常好的效果,尤其对II型糖尿病及其并发症变具有肯定疗效,其效果甚至优于二甲双胍;且制备方法简便,适于临床应用。
Description
技术领域
本申请涉及生物医药技术领域,尤其涉及一种桃金娘提取物在降血糖及治疗糖尿病肾病中的应用。
背景技术
糖尿病是由于人体胰岛素缺乏或无法有效利用而导致血液中的葡萄糖水平升高而发生的一种慢性疾病。二型糖尿病是临床上最常见的糖尿病类型,约占所有糖尿病病例的90%。在二型糖尿病中,高血糖主要是由于胰岛素抵抗所导致。长期高血糖水平会导致广泛的血管损伤,从而影响心脏、眼睛、肾脏和神经。糖尿病肾病是糖尿病微血管并发症之一,为糖尿病特有的肾脏并发症,也是糖尿病致死、致残的主要原因之一。
桃金娘属于桃金娘科,生长在亚洲的南部及东南部,尤其是在中国的南部比如广东、湖南和广西。据报道,这种植物的提取物具有多种生物活性,有些具有抗菌、抗肝炎的作用,但目前对于桃金娘的进一步开发及相关研究较少,很大程度上限制了桃金娘的开发和利用。
发明内容
本申请目的在于提供一种桃金娘提取物在降血糖及治疗糖尿病肾病中的应用。
为了实现上述发明目的,第一方面,本本申请提供一种桃金娘提取物在降血糖及治疗糖尿病肾病中的应用。
所述的桃金娘提取物为桃金娘的干燥根的提取物。
根据本申请的一些实施方式,所述桃金娘提取物的制备方法包括如下步骤:
将干燥的桃金娘根粉粹,加入低极性溶剂搅拌均匀,得到第一溶液,桃金娘根粉末与低极性溶剂的比例为1:(8-12);
将第一溶液加热回流提取1.5-2.5h后过滤,得到第一滤液及滤渣;
在所述滤渣中加入4-6倍水提取0.3-0.8h,得到第二滤液;
混合两次滤液,加热蒸干,得到所述桃金娘提取物。
根据本申请的一些实施方式,所述桃金娘提取物的制备方法包括如下步骤:
将干燥的桃金娘根粉粹,加入低极性溶剂搅拌均匀,得到第一溶液,桃金娘根粉末与低极性溶剂的比例为1:10;
将第一溶液加热回流提取2h后过滤,得到第一滤液及滤渣;
在所述滤渣中加入5倍水提取0.5h,得到第二滤液;
混合两次滤液,加热蒸干,得到所述桃金娘提取物。
优选的,所述低极性溶剂包括水、甲醇、乙醇中的一种或几种的混合物。
优选的,所述低级性溶剂包括水、甲醇、乙醇之间两种或两种以上任意比例的混合物。
第二方面,本申请提供一种桃金娘提取物在制备预防和/或治疗糖尿病的药物中的应用,所述桃金娘提取物为上述所述的制备方法制成。
本申请还提供一种预防和/或治疗糖尿病及其并发症药物组合物。
本申请还提供一种预防和/或治疗糖尿病及其并发症药盒
根据本申请的一些实施方式,所述糖尿病为II型糖尿病。
根据本申请的一些实施方式,所述并发症选自由以下项所组成的组中的至少一种:糖尿病肾病、糖尿病眼部并发症、糖尿病足、糖尿病心血管并发症、糖尿病性脑血管病、糖尿病周围神经病变和糖尿病皮肤病;所述糖尿病眼部并发症选自由以下项所组成的组中的至少一种:糖尿病性视网膜病变、与糖尿病相关的葡萄膜炎和糖尿病性白内障。
根据本申请的一些实施方式,所述药物的制备原料还包括药用辅料,所述药用辅料选自崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂、湿润剂、矫味剂、助悬剂、表面活性剂或防腐剂中的至少一种。
根据本申请的一些实施方式,本申请所述的药物可以采用任何合适的给药途径,例如胃肠道给药(例如口服)或非胃肠道给药(例如,静脉内、肌内、皮下、皮内、器官内、鼻内、眼内、滴注、脑内、鞘内、透皮、直肠内等)途径。在本申请的一个具体实施方式中,所述的给药途径为口服或注射。
本申请所述的药物可以为任何合适的剂型,例如经胃肠道给药剂型或非经胃肠道给药剂型,优选包括但不限于片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、锭剂、糖浆剂、液体、乳剂、微乳剂、混悬剂、注射剂、喷雾剂、气雾剂、粉雾剂、洗剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂、滴眼剂、滴鼻剂、舌下片剂、栓剂、气雾剂、泡腾片、滴丸剂、凝胶剂等等。
根据本申请的一些实施方式,本申请所述的药物可以含有重量比为0.01-99.5%(具体如,0.01%、0.1%、0.5%、1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%、99.5%)的所述提取物,或其药学上可接受的盐、立体异构体、前药、溶剂化物或代谢产物。
本申请所述的“共晶”是指本申请的化合物与其他生理上可接受的酸、碱、非离子化合物,通过氢键、范德华力、π-π堆积作用、卤键等非共价键作用下结合而成的晶体。
本申请所述的“立体异构体”包括对映体、非对映体和几何异构体的形式存在。
本申请所述的“前药”指药物经过化学结构修饰后得到的在体外或非特定靶位无活性或活性较小、在体内经酶或非酶转化释放出活性药物而发挥药效的化合物。
本申请所述的“溶剂化物”是指本申请的化合物与一种或多种溶剂分子的物理结合。该物理结合包括各种程度的离子和共价键合,包括氢键合。在某些情况下,溶剂化物可被分离出来,例如当一个或多个溶剂分子掺入到结晶固体的晶格中。溶剂化物包括溶液相和可分离的溶剂化物。代表性的溶剂化物包括乙醇化物、甲醇化物等。
本申请所述的“代谢产物”是指本申请的化合物在体内生理条件下使其发生化学降解所得产物。
本申请所述的药物可以为人用药或兽用药。
第三方面,本申请提供一种桃金娘提取物在制备预防和/或治疗糖尿病的食物中的应用。
根据本申请的一些实施方式,本申请所述的食物含有所述桃金娘提取物。
与现有技术相比,本申请的有益效果在于:本申请开创性的发现桃金娘根提取物在降血糖及治疗糖尿病中的应用,给予1倍人用剂量的桃金娘的低剂量组相较于给予五倍人用剂量的二甲双胍的阳性对照组的对比实验中,低剂量组的无论是0.5h的糖耐测试实验还是2h的糖耐测试实验均能够媲美阳性对照组,且血糖波动同样稳定;在进一步的关于小鼠肾脏实验中,从小鼠血清检测出的HDL、LDL、尿素氮、肌酐(Cr)等含量及对应的肾脏指数数据,均可明显看出桃金娘根系提取物于治疗糖尿病肾病中的显著疗效,且优于二甲双胍。
具体实施方式
下面结合具体的实施例、对比例进一步详细描述本申请的技术方案。实施例和对比例中给出的具体材料、含量、数据以及其它条件和细节都是用来解释本申请的,本申请的保护范围并不受实施例的限制。所有依据本申请的实质所作的任何简单修改、等同变化和修饰均属于本申请的权利要求书的范围。
除非另外说明,本文中所有的百分比、份数、比值等均是按重量计。
单数形式的“一个”、“一种”包括多数个提到的物体,除非另有说明。
当以范围、优选范围或者优选数值的上限以及优选的数值下限的形式表达某个量或其它值的时候,应当理解相当于具体解释通过将任意一对范围上限或下限结合起来的任何范围,而不考虑范围是否具体揭示。
实施例
一、实验动物
8-20g雄性昆明种小鼠80只,广东省实验动物中心提供,许可证号:SCXK(粤)2013-0002。适应性饲养7天后进入实验。
二、实验试剂
链脲佐菌素(Streptozotocin)Sigma公司;胰岛素试剂盒(上海酶联生物科技有限公司,批号:201606);肌酐(Cr)试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号:20160402);盐酸二甲双胍片。
三、实验仪器
721型紫外可见光分光光度计,北京普析通用仪器有限公司;ELx800吸收光酶标仪,美国伯腾仪器有限公司;TGL16MC台式高速冷冻离心机,长沙湘锐离心机有限公司;艾科灵睿血糖仪,艾康生物技术有限公司。
四、实验方法
1、桃金娘根水提物的制备
将干燥的桃金娘根粉粹,按1:10加入蒸馏水,加热回流提取2h,过滤,收集滤渣加入5倍水提取0.5h,合并两次滤液,加热蒸干,粉碎,4℃保存,加入蒸馏水制成不同浓度待用。
2、动物造模、分组及给药
雄性昆明小鼠80只,随机取12只作为空白对照组,余下68只小鼠禁食不禁水16h后,按80mg/kg剂量腹腔注射STZ溶液(STZ溶于pH4.5、0.1mol/L柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液中)。3天后小鼠禁食不禁水16h,尾端静脉采集血液,用血糖仪测定各小鼠血糖值,将血糖高于16.7mmol/L的小鼠视为造模成功小鼠纳入下一步实验。筛选出50只造模成功小鼠后,随机分配,分为模型对照组、阳性(二甲双胍)对照组、桃金娘根高剂量组、桃金娘根中剂量组、桃金娘根低剂量组,每组10只。在饲养环境相同的情况下,各组小鼠均给予相同的水量及饲料量。空白对照组和模型对照组每天灌胃相对剂量的蒸馏水,阳性对照组灌胃5倍人用剂量的二甲双胍,桃金娘根低剂量组灌胃1倍人用剂量(0.026g/20g)的桃金娘根水提液,桃金娘根中剂量组灌胃2.5倍人用剂量的水提液,桃金娘根高剂量组灌胃5倍人用剂量的水提液,连续灌胃28天。
3、指标检测
灌胃给药第7d、14d、21d、28d禁食不禁水16h,分别测定各小鼠空腹血糖值(FBG),第28d测定FBG后进行末次灌胃给药,并按2.0g/kg给各组小鼠灌胃葡萄糖水,分别在0h、0.5h、2h测定各组小鼠血糖值,计算血糖曲线下面积(AUC),并观察各组给葡萄糖后各时点血糖曲线下面积的变化。血糖曲线下面积=(0h血糖值+0.5h血糖值)×0.5/2+(0.5h血糖+2h血糖)×1.5/2。结束糖耐量实验后,测定各小鼠体重,摘眼球取小鼠全血,取血后颈椎脱臼处死小鼠,并迅速取出小鼠左肾,称重,并按公式(1)计算小鼠肾脏指数。
肾脏指数=肾脏重量/体重
小鼠全血于37℃温浴30min,3000r离心10min分离血清,-20℃保存待用。按照试剂盒法操作方法测定小鼠血清中甘油三酯、总胆固醇、HDL、LDL、果糖胺、尿素氮、肌酐(Cr)含量和胰岛素(INS)水平。
酶标法检测小鼠肾脏中SOD、MCP-1含量。
4、数据处理
所有数据采用SPSS 22.0进行分析比较。表中参数用X±s表示,组间差异采用独立样本t检验。差异显著水平为P<0.05,差异极显著水平为P<0.01。
五、实验结果
表1不同浓度桃金娘根水提物对小鼠FBG的影响
注:和空白组相比,ΔΔp<0.01;和模型组相比,**p<0.01
表2桃金娘根水提物对小鼠OGTT的影响
注:和空白组相比,ΔΔp<0.01;和模型组相比,**p<0.01
表3桃金娘根水提物对小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、HDL、LDL的影响
注:和空白组相比,ΔΔp<0.01;和模型组相比,**p<0.01
表4桃金娘根水提物对小鼠血清果糖胺、肌酐、尿素氮,肾脏指数,肾脏GSH、SOD的影响
注:和空白组相比,ΔΔp<0.01;和模型组相比,**p<0.01
表5桃金娘根水提物对小鼠肾脏指数,肾脏GSH、SOD、MCP-1的影响
注:和空白组相比,ΔΔp<0.01;和模型组相比,**p<0.01
表6桃金娘根水提物对小鼠血清胰岛素的影响
注:和空白组相比,ΔΔp<0.01;和模型组相比,**p<0.01
综上,从表2及表6中可以看出,桃金娘低剂量组、中剂量组及高剂量组对照模型对照组,于OGTT0.5h及OGTT2h效果明显,基本可媲美阳性对照组中的二甲双胍的药效,但进一步比对的桃金娘低剂量组采用的是一倍人用剂量,而阳性对照组中的二甲双胍采用的五倍人用剂量,于该水平比对下,桃金娘的药效要优于二甲双胍;且从糖耐量曲线面积中可看出,阳性对照组及桃金娘三组实验组的血糖波动均能实现平稳;从小鼠血清中胰岛素含量可看出,低剂量组的桃金娘实验组其胰岛素含量接近于五倍人用剂量的二甲双胍的阳性对照组,可见桃金娘根系提取物的效果显著。
从表3中可以看出,桃金娘三组实验组的甘油三酯、HDL及LDL含量均低于模型对照组,且低于阳性对照组;于总胆固醇含量中的测试结果可看出桃金娘中剂量组与高剂量组均低于阳性对照组,结合表2中可见,桃金娘对小鼠血糖调节明显,且对小鼠血脂调节作用也较为明显,其且于血脂调节上明显优于二甲双胍。
从表4中可以看出,桃金娘三组实验组及阳性对照组于肌酐调节上作用明显,果糖胺指标中桃金娘三组实验组与阳性对照组效果差异不大,于尿氮素调节上桃金娘三组实验组优于阳性对照组。
综上所述,可知经水提取后得到的桃金娘根提取物明显降低小鼠血糖,也对血脂具有一定调节作用;表明相对于现有技术而言,桃金娘根水提物在降血糖及治疗糖尿病肾病中的应用效果优于二甲双胍,用于治疗糖尿病及相应及糖尿病肾病具有非常好的治疗效果。
需要说明的是,在上述各个实施例中,上述各步骤之间并不必然存在一定的先后顺序,本领域普通技术人员,根据本申请实施例的描述可以理解,不同实施例中,上述各步骤可以有不同的执行顺序,亦即,可以并行执行,亦可以交换执行等等。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本申请所作的进一步详细说明,不能认定本申请的具体实施只局限于这些说明。对于本申请所属领域的技术人员来说显然可以容易地对这些实施例做出各种修改,因此在不脱离本申请构思和精神的前提下,做出的若干简单推演或替换,都应当视为属于本申请的保护范围。
Claims (9)
1.一种桃金娘提取物在降血糖及治疗糖尿病肾病中的应用,其特征在于:所述的桃金娘提取物为桃金娘的干燥根的提取物。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述桃金娘提取物的制备方法包括如下步骤:
将干燥的桃金娘根粉粹,加入低极性溶剂搅拌均匀,得到第一溶液,桃金娘根粉末与低极性溶剂的比例为1:(8-12);
将第一溶液加热回流提取1.5-2.5h后过滤,得到第一滤液及滤渣;
在所述滤渣中加入4-6倍水提取0.3-0.8h,得到第二滤液;
混合两次滤液,加热蒸干,得到所述桃金娘提取物。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述低极性溶剂包括水、甲醇、乙醇中的一种或几种的混合物。
4.一种桃金娘提取物在制备预防和/或治疗糖尿病的药物中的应用,其特征在于:所述桃金娘提取物为权利要求2-3任一项所述的制备方法制成。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述糖尿病为II型糖尿病。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述药物的制备原料还包括药用辅料,所述药用辅料选自崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂、湿润剂、矫味剂、助悬剂、表面活性剂或防腐剂中的至少一种。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述药物的剂型选自水溶液、非水溶液或混悬液。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:所述药物的剂型选自片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、锭剂、糖浆剂、液体、乳剂、微乳剂、混悬剂、注射剂、喷雾剂、气雾剂、粉雾剂、洗剂、软膏剂、硬膏剂、糊剂、贴剂、滴眼剂、滴鼻剂、舌下片剂、栓剂、气雾剂、泡腾片、滴丸剂、凝胶剂中的一种。
9.一种桃金娘提取物在制备预防和/或治疗糖尿病的食物中的应用。
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