CN115304564A - 一种s-四氢呋喃甲酸的制备方法 - Google Patents
一种s-四氢呋喃甲酸的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115304564A CN115304564A CN202211049683.0A CN202211049683A CN115304564A CN 115304564 A CN115304564 A CN 115304564A CN 202211049683 A CN202211049683 A CN 202211049683A CN 115304564 A CN115304564 A CN 115304564A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tetrahydrofuran
- enzyme
- reaction
- ethyl
- formate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 64
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Substances C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 51
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 32
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 32
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 89
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 89
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 50
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 44
- ZRNYTEQYVKPGET-UHFFFAOYSA-N ethyl formate oxolane Chemical compound O1CCCC1.C(=O)OCC ZRNYTEQYVKPGET-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 37
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims abstract description 30
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims abstract description 30
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- JAOVOFHFEAKFIQ-UHFFFAOYSA-N formic acid;oxolane Chemical compound OC=O.C1CCOC1 JAOVOFHFEAKFIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 19
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 18
- WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N formic acid ethyl ester Natural products CCOC=O WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 15
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 13
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 13
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- -1 ethyl tetrahydrofurfuryl Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 31
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 claims description 21
- 230000005293 ferrimagnetic effect Effects 0.000 claims description 16
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 13
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 claims description 9
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 8
- 230000005294 ferromagnetic effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims description 5
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 5
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 4
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GQQLWKZRORYGHY-UHFFFAOYSA-N ethyl oxolane-2-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C1CCCO1 GQQLWKZRORYGHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 abstract description 24
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 abstract 1
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 24
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 12
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 12
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 7
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- SNSYYBGUDOYAMB-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-(oxolan-2-yl)acetate Chemical compound CCOC(=O)CC1CCCO1 SNSYYBGUDOYAMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- UJJLJRQIPMGXEZ-UHFFFAOYSA-N tetrahydro-2-furoic acid Chemical compound OC(=O)C1CCCO1 UJJLJRQIPMGXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 3
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 3
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 3
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 3
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 3
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- BCHZICNRHXRCHY-UHFFFAOYSA-N 2h-oxazine Chemical compound N1OC=CC=C1 BCHZICNRHXRCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 206010004446 Benign prostatic hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000004403 Prostatic Hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 241000179532 [Candida] cylindracea Species 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 1
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- VOZWCXPNEZWSAH-UHFFFAOYSA-N formic acid;furan Chemical compound OC=O.C=1C=COC=1 VOZWCXPNEZWSAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- YOBAEOGBNPPUQV-UHFFFAOYSA-N iron;trihydrate Chemical compound O.O.O.[Fe].[Fe] YOBAEOGBNPPUQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N n-butane Chemical compound CCCC IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- UJJLJRQIPMGXEZ-SCSAIBSYSA-N tetrahydrofuran-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1CCCO1 UJJLJRQIPMGXEZ-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D307/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D307/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
- C07B2200/07—Optical isomers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本申请公开了一种S‑四氢呋喃甲酸的制备方法，包括以下步骤：S1、采用外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇为原料，以正己烷为有机溶剂，采用AOL酶作为催化剂，在搅拌条件下进行酯化反应，纯化后得到四氢呋喃甲酸乙酯；S2、将步骤S1制得的四氢呋喃甲酸乙酯加入到NaH2PO4缓冲溶液中，采用CCL酶作为催化剂，在搅拌条件下进行水解反应，将剩余的四氢呋喃甲酸乙酯纯化，制得S‑四氢呋喃甲酸乙酯；S3、将步骤S2制得的S‑四氢呋喃甲酸乙酯，加入稀盐酸中，进行水解反应，纯化后制得S‑四氢呋喃甲酸。本申请整体收率高、光学纯度高，整体工艺过程简单，反应条件温和，适于规模化生产。
Description
技术领域
本申请涉及制药技术领域，尤其是涉及一种S-四氢呋喃甲酸的制备方法。
背景技术
四氢呋喃甲酸全名四氢呋喃-2-甲酸，又称2-四氢糠酸，是制备多种药物及化工原料的重要中间体。四氢呋喃-2-甲酸具有两种异构体，即R-四氢呋喃甲酸和S-四氢呋喃甲酸。S-四氢呋喃甲酸是制备唑嗪类药物的重要原料，而唑嗪类药物除了可以治疗高血压外，目前还发现还可以治疗良性的前列腺肥大。同时，S-四氢呋喃甲酸还是合成头孢类抗生素中间体和手性助剂S乙酰四氢呋喃的重要原料。
目前，工业上对于S-四氢呋喃甲酸的制备，主要采用化学方法。目前应用较为广泛的工艺是以天然或人工合成的手性胺作为拆分剂，以四氢呋喃甲酸为原料，通过手性拆分制备出S-四氢呋喃甲酸。目前也有报道，以手性酒石酸或其衍生物作为手性拆分剂，以四氢呋喃甲酸为原料，通过手性拆分制备出S-四氢呋喃甲酸的工艺方法。上述化学方法中，手性胺具有较大毒性，污染严重，而且收率较低，不超过50％，制备出的S-四氢呋喃甲酸的光学纯度也不高，ees一般不超过70％；而手性酒石酸拆分工艺，需要进行高温、强碱条件下的消旋化处理，收率同样较低，同样不超过50％，制备出的S-四氢呋喃甲酸的光学纯度也不高，ees一般不超过85％。
发明内容
为了解决上述至少一种技术问题，开发一种工艺条件温和，适于工业化生产生产，总体收率较高，制备出的S-四氢呋喃甲酸光学纯度较高的生产工艺，本申请提供一种S-四氢呋喃甲酸的制备方法。
为了实现上述目的，本申请提供了一种S-四氢呋喃甲酸的制备方法，包括以下步骤：S1、采用外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇为原料，以正己烷为有机溶剂，采用AOL酶作为催化剂，在搅拌条件下进行酯化反应，纯化后得到四氢呋喃甲酸乙酯；
S2、将步骤S1制得的四氢呋喃甲酸乙酯加入到酸性NaH2PO4缓冲溶液中，采用CCL酶作为催化剂，在搅拌条件下进行水解反应，将剩余的四氢呋喃甲酸乙酯纯化，制得S-四氢呋喃甲酸乙酯；
S3、将步骤S2制得的S-四氢呋喃甲酸乙酯，加入稀盐酸中，进行水解反应，纯化后制得S-四氢呋喃甲酸。
通过采用上述技术方案，本申请制备的S-四氢呋喃甲酸光学纯度极高，光学纯度能够达到ees 90％以上；同时，本申请的工艺简单，整个工艺过程条件温和，适于大规模工业化生产；最后，本申请制备S-四氢呋喃甲酸的整体收率较高，整体收率能够达到70％以上；本申请制备的S-四氢呋喃甲酸的纯度也较高，杂质含量极少，除含有少量的R异构体杂质外，仅含有及其微量的四氢呋喃甲酸原料中所带杂质。
可选的，所述步骤S1中，所述外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇的摩尔比为1：2～2.5，所述AOL酶的添加量为20～25g/L。
可选的，所述步骤S1中，所述酯化反应的反应温度控制在35～40℃，反应时间6h以上。
通过采用上述技术方案，采用合适的原料配比和酶用量后，酯化反应的整体收率较高，制备的四氢呋喃甲酸乙酯的收率能够进一步提高，而且能够有效提高制备的四氢呋喃甲酸乙酯中S型异构体的占比。
可选的，所述步骤S1中，所述AOL酶采用琼脂糖凝胶固定。
进一步可选的，所述步骤S1中，所述步骤S1中，所述纯化采用以下步骤：首先，过滤滤除琼脂糖凝胶固定的AOL酶；然后，120～130℃蒸馏去除多余的醇和有机溶剂，得到纯化后的四氢呋喃甲酸乙酯。
通过采用上述技术方案，使用琼脂糖凝胶固定的AOL酶，不但能够便于纯化，而且能够有效提高AOL酶选择性酯化的反应收率，进一步提高整体收率。
可选的，所述步骤S2中，所述CCL酶添加量为20～25g/L，所述NaH2PO4缓冲溶液的pH值控制在5.5～6。
可选的，所述步骤S2中，所述水解反应在室温下进行，反应时间12h以上。
通过采用上述技术方案，采用合适的酶用量后，选择性水解反应更为彻底，反应收率更高，能够有效去除选择性酯化后剩余的R异构体，极大提高最终产物S-四氢呋喃甲酸的光学纯度。
可选的，所述步骤2中，所述CCL酶采用三氧化二铁磁性微球固定。
进一步可选的，所述步骤S2中，所述纯化采用以下步骤：首先，过滤滤除三氧化二铁磁性微球固定的CCL酶；然后，静置分层，分离出油层；最后，加入吸湿剂脱除油层中的水分，滤除吸湿剂后，得到纯化后的S-四氢呋喃甲酸乙酯。
通过采用上述技术方案，使用三氧化二铁磁性微球固定的CCL酶，不但能够便于纯化，而且能够有效提高CCL酶选择性水解的反应收率，进一步提高最终产物S-四氢呋喃甲酸的光学纯度。
可选的，所述步骤S3中，所述水解反应在催化剂催化下进行，反应的pH值控制在4～5，反应温度控制在60～80℃，反应时间4h以上；所述纯化采用减压蒸馏的方式进行。
通过采用上述技术方案，采用合适的水解反应条件后，能够确保水解反应的反应收率，进一步提高整体收率。
综上所述，本申请的有益技术效果：
1.本申请制备的S-四氢呋喃甲酸光学纯度极高，光学纯度能够最高达到ees98.5％以上。
2.本申请的工艺简单，适于大规模工业化生产，整个工艺过程反应条件温和，反应过程易于控制，成本也极为低廉。
3.本申请的工艺过程设计巧妙，易于纯化操作，通过简单的过滤和蒸馏就能实现纯化，且纯化效果极佳。
4.本申请制备的S-四氢呋喃甲酸整体收率较高，整体收率能够最高达到接近80％。
5.本申请制备的S-四氢呋喃甲酸的纯度也较高，杂质含量极少，除含有少量的R异构体杂质外，仅含有三种杂质。
具体实施方式
以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。
名词解释：
AOL酶：WZ007米曲霉的脂肪酶；CCL酶：柱状假丝酵母脂肪酶；ees：S型异构体的光学纯度。
本申请设计了一种S-四氢呋喃甲酸的制备方法，采用生物酶拆分的方式，能够大幅提高整体收率和制备的S-四氢呋喃甲酸的光学纯度。
本申请的制备方法，包括以下步骤：
S1、采用外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇为原料，以正己烷为有机溶剂，采用AOL酶作为催化剂，在搅拌条件下进行酯化反应，纯化后得到四氢呋喃甲酸乙酯；
S2、将步骤S1制得的四氢呋喃甲酸乙酯加入到酸性NaH2PO4缓冲溶液中，采用CCL酶作为催化剂，在搅拌条件下进行水解反应，将剩余的四氢呋喃甲酸乙酯纯化，制得S-四氢呋喃甲酸乙酯；
S3、将步骤S2制得的S-四氢呋喃甲酸乙酯，加入稀盐酸中，进行水解反应，纯化后制得S-四氢呋喃甲酸。
首先，以AOL酶作为催化剂，选择性催化酯化反应，将外消旋的四氢呋喃甲酸中R型异构体在酯化过程中，使之生成S型四氢呋喃甲酸乙酯，而外消旋的四氢呋喃甲酸中S型异构体，则直接酯化生成S型四氢呋喃甲酸乙酯。然后，以CCL酶作为催化剂，在酸性条件下，选择性催化水解，将酯化过程中生成的少量的R型四氢呋喃甲酸乙酯，选择性催化水解，水解成为R型四氢呋喃甲酸，从而制备出相对较纯的S-四氢呋喃甲酸乙酯。最后，将S-四氢呋喃甲酸乙酯正常水解，制备得到S-四氢呋喃甲酸。
本申请并未采用目前工业上使用的化学拆分的方式，使用生物酶拆分的方式，能够有效提高外消旋的四氢呋喃甲酸中R型异构体转化生成S型异构体的转化率，从而大幅提高整体收率。本申请的核心是发明人从诸多脂肪酶中挑选出了一组酶组合，从而能够实现四氢呋喃甲酸选择性酯化和四氢呋喃甲酸乙酯选择性水解。本申请的工艺正是基于上述的酶组合的筛选而设计的。
以下是本申请的实施例1～6，主要是对选择性酯化反应条件的优化。
使用原料来源：
外消旋四氢呋喃甲酸：纯度99％以上，北京百灵威；
无水乙醇：纯度99.99％，西安三浦化学试剂；
溶剂：正己烷，无水级，纯度98％，上海阿拉丁；正丁烷，无水级，纯度98％，上海阿拉丁；四氢呋喃，无水级，纯度98％，上海阿拉丁；吡啶，纯度98％，上海阿拉丁；
AOL酶：300000U/g，上海阿拉丁；
酶固定化载体：琼脂糖凝胶，上海阿拉丁；硅藻土535，克拉马尔；三氧化二铁磁性微珠，上海阿拉丁。
本申请实施例1～6的反应条件参数具体见表1，使用硅藻土535作为固相载体固定AOL酶，反应后通过过滤硅藻土，然后蒸馏纯化的方法对反应生成的四氢呋喃甲酸乙酯提纯。
表1实施例1～6反应条件参数表
使用HPLC对实施例1～6的反应产物进行检测，检测反应收率、产物四氢呋喃甲酸乙酯的纯度和产物四氢呋喃甲酸乙酯的光学纯度，具体结果见表2。
表2实施例1～6检测结果表
通过表2的数据可以看出，本申请酯化反应的原料摩尔比在1:2～2.5时反应收率最高，进一步提升原料摩尔比后，收率并没有得到明显的提升。而反应温度对收率有较大影响，反应温度控制在35～40℃时，反应收率最高，温度再次升高后，反应收率下降明显，发明人推测是由于AOL酶对四氢呋喃甲酸的选择性酯化的催化活性，在35～40℃时最高。同时，酶的添加量对反应收率和产物的光学纯度同样有较大影响，酶的添加浓度在20～25g/L时，产物的光学纯度达到最高值，反应收率也较高，进一步提升酶的添加量，收率和纯度的提升并不明显。溶剂的选择对提纯的结果有较大影响，采用正己烷作为溶剂，提纯效果最佳，同时还能起到促进选择性酯化反应进行的效果。
因此，可以确定四氢呋喃甲酸的酯化，最佳的反应条件参数是：原料摩尔比1:2～2.5，反应温度35～40℃，AOL酶添加浓度20～25g/L，溶剂选择正己烷，反应时间6h以上。综合成本因素的考虑，以上述实施例中的实施例3的反应条件参数作为酯化反应的最优参数。
发明人以实施例3的参数为基础，采用琼脂糖凝胶、硅藻土535、三氧化二铁磁性微珠最为固定载体固定酶，同时采用无固定载体直接添加酶进行实验，检测载体对反应效果的影响。发现以琼脂糖凝胶固定酶，效果最佳，除了酶的重复利用次数能够达到12次以上外，还能有效提高反应的收率和产物的光学纯度，反应收率能够达到92％，产物的光学纯度能够达到ees 89.6％。
以下是本申请的实施例7～12，主要是对选择性水解反应条件的优化。
使用原料来源：
四氢呋喃甲酸乙酯：实施例3制备；
酸性NaH2PO4缓冲溶液：自配；
CCL酶：300000U/g，上海阿拉丁；
酶固定化载体：琼脂糖凝胶，上海阿拉丁；硅藻土535，克拉马尔；三氧化二铁磁性微珠，上海阿拉丁。
本申请实施例7～12的反应条件参数具体见表3，使用硅藻土535作为固相载体固定CCL酶，反应后通过过滤硅藻土，然后静置分层，分离出油层，除去油层水分对反应剩余的四氢呋喃甲酸乙酯提纯。
表3实施例7～12反应条件参数表
使用HPLC对实施例7～12的反应剩余的四氢呋喃甲酸乙酯进行检测，检测四氢呋喃甲酸乙酯的纯度和产物四氢呋喃甲酸乙酯的光学纯度，具体结果见表4。
| 纯度 | 光学纯度 | |
| 实施例7 | 99.3％ | ees 91.2％ |
| 实施例8 | 99.2％ | ees 94.7％ |
| 实施例9 | 99.4％ | ees 98.1％ |
| 实施例10 | 99.3％ | ees 98.2％ |
| 实施例11 | 99.4％ | ees 97.3％ |
| 实施例12 | 99.2％ | ees 94.4％ |
表4实施例7～12检测结果表
通过表4的数据可以看出，本申请选择性水解反应的反应温度对水解反应完成度有一定影响，反应温度控制在室温温度时，反应完成度最高，温度高于或低于室温，反应完成度均有下降。同时，酶的添加量对剩余四氢呋喃甲酸乙酯的光学纯度有较大影响，酶的添加浓度在20～25g/L时，剩余四氢呋喃甲酸乙酯的光学纯度达到最高值，进一步提升酶的添加量，纯度的提升并不明显。pH值对反应有较大影响，pH值在5.5～6时，水解反应较为彻底，能够最大程度的去除四氢呋喃甲酸乙酯中的R型异构体。
发明人以实施例10的参数为基础，采用琼脂糖凝胶、硅藻土535、三氧化二铁磁性微珠最为固定载体固定酶，同时采用无固定载体直接添加酶进行实验，检测载体对反应效果的影响。发现以三氧化二铁磁性微珠固定酶，效果最佳，除了酶的重复利用次数能够达到10次以上外，还能有效提高反应的完成度和剩余四氢呋喃甲酸乙酯的光学纯度，剩余四氢呋喃甲酸乙酯的光学纯度能够达到ees 98.8％。
发明人通过检测详细测算了提纯中四氢呋喃甲酸乙酯的损失，基于纯度的考虑，会产生1～2％的损失。
而四氢呋喃甲酸乙酯的常规水解，在盐酸条件下水解，控制pH值在4～5，反应温度在60～80℃，在催化剂催化下，水解反应收率能够控制在98％以上，而且由于四氢呋喃甲酸乙酯沸点低于S-四氢呋喃甲酸，反应残留的四氢呋喃甲酸乙酯、盐酸等均可以采用减压蒸馏的方式彻底去除。
以下为本申请实施例13～18，使用的盐酸外购获得，纯度为医用级。
实施例13
本实施例的工艺具体采用以下步骤：
S1、将外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇以1:2的摩尔比，添加到正己烷有机溶剂中，采用琼脂糖凝胶固定的AOL酶作为催化剂，酶添加浓度在20g/L，在搅拌条件下，在35℃温度下，进行选择性酯化反应，反应6h以上。
S2、将酯化反应完成的反应液冷却至室温，经过滤滤除琼脂糖凝胶固定的AOL酶(回收重复使用)，然后120℃蒸馏去除多余的醇和有机溶剂，制得四氢呋喃甲酸乙酯。
S3、将四氢呋喃甲酸乙酯加入到pH值为5.5的NaH2PO4缓冲溶液中，采用三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶作为催化剂，酶添加浓度在20g/L，在搅拌条件下，在室温下进行选择性水解反应，反应12h以上。
S4、将选择性水解反应后的反应液，经过滤滤除三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶(回收重复使用)，剩余反应液静置分层，取油层加无水硫酸钠脱水后，滤除无水硫酸钠，制得S-四氢呋喃甲酸乙酯。
S5、将S-四氢呋喃甲酸乙酯，加入pH值在3.5的稀盐酸中，在催化剂催化下，在60℃温度下进行水解反应，反应5h以上。
S6、将水解反应的反应液减压蒸馏，去除反应残留的四氢呋喃甲酸乙酯、盐酸等杂质组分，制得S-四氢呋喃甲酸。
实施例14
本实施例的工艺具体采用以下步骤：
S1、将外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇以1:2的摩尔比，添加到正己烷有机溶剂中，采用琼脂糖凝胶固定的AOL酶作为催化剂，酶添加浓度在25g/L，在搅拌条件下，在40℃温度下，进行选择性酯化反应，反应6h。
S2、将酯化反应完成的反应液冷却至室温，经过滤滤除琼脂糖凝胶固定的AOL酶(回收重复使用)，然后130℃蒸馏去除多余的醇和有机溶剂，制得四氢呋喃甲酸乙酯。
S3、将四氢呋喃甲酸乙酯加入到pH值为6的NaH2PO4缓冲溶液中，采用三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶作为催化剂，酶添加浓度在25g/L，在搅拌条件下，在室温下进行选择性水解反应，反应12h以上。
S4、将选择性水解反应后的反应液，经过滤滤除三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶(回收重复使用)，剩余反应液静置分层，取油层加无水硫酸钠脱水后，滤除无水硫酸钠，制得S-四氢呋喃甲酸乙酯。
S5、将S-四氢呋喃甲酸乙酯，加入pH值在4的稀盐酸中，在催化剂催化下，在80℃温度下进行水解反应，反应4h以上。
S6、将水解反应的反应液减压蒸馏，去除反应残留的四氢呋喃甲酸乙酯、盐酸等杂质组分，制得S-四氢呋喃甲酸。
实施例15
本实施例的工艺具体采用以下步骤：
S1、将外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇以1:2.5的摩尔比，添加到正己烷有机溶剂中，采用琼脂糖凝胶固定的AOL酶作为催化剂，酶添加浓度在23g/L，在搅拌条件下，在38℃温度下，进行选择性酯化反应，反应6h。
S2、将酯化反应完成的反应液冷却至室温，经过滤滤除琼脂糖凝胶固定的AOL酶(回收重复使用)，然后125℃蒸馏去除多余的醇和有机溶剂，制得四氢呋喃甲酸乙酯。
S3、将四氢呋喃甲酸乙酯加入到pH值为5.8的NaH2PO4缓冲溶液中，采用三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶作为催化剂，酶添加浓度在22g/L，在搅拌条件下，在室温下进行选择性水解反应，反应12h。
S4、将选择性水解反应后的反应液，经过滤滤除三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶(回收重复使用)，剩余反应液静置分层，取油层加无水硫酸钠脱水后，滤除无水硫酸钠，制得S-四氢呋喃甲酸乙酯。
S5、将S-四氢呋喃甲酸乙酯，加入pH值在4.5的稀盐酸中，在催化剂催化下，在70℃温度下进行水解反应，反应4.5h以上。
S6、将水解反应的反应液减压蒸馏，去除反应残留的四氢呋喃甲酸乙酯、盐酸等杂质组分，制得S-四氢呋喃甲酸。
实施例16
本实施例的工艺具体采用以下步骤：
S1、将外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇以1:2.5的摩尔比，添加到正己烷有机溶剂中，采用琼脂糖凝胶固定的AOL酶作为催化剂，酶添加浓度在22g/L，在搅拌条件下，在36℃温度下，进行选择性酯化反应，反应6h。
S2、将酯化反应完成的反应液冷却至室温，经过滤滤除琼脂糖凝胶固定的AOL酶(回收重复使用)，然后125℃蒸馏去除多余的醇和有机溶剂，制得四氢呋喃甲酸乙酯。
S3、将四氢呋喃甲酸乙酯加入到pH值为5.6的NaH2PO4缓冲溶液中，采用三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶作为催化剂，酶添加浓度在24g/L，在搅拌条件下，在室温下进行选择性水解反应，反应12h以上。
S4、将选择性水解反应后的反应液，经过滤滤除三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶(回收重复使用)，剩余反应液静置分层，取油层加无水硫酸钠脱水后，滤除无水硫酸钠，制得S-四氢呋喃甲酸乙酯。
S5、将S-四氢呋喃甲酸乙酯，加入pH值在5的稀盐酸中，在催化剂催化下，在65℃温度下进行水解反应，反应5.5h以上。
S6、将水解反应的反应液减压蒸馏，去除反应残留的四氢呋喃甲酸乙酯、盐酸等杂质组分，制得S-四氢呋喃甲酸。
实施例17
本实施例的工艺具体采用以下步骤：
S1、将外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇以1:2.5的摩尔比，添加到正己烷有机溶剂中，采用琼脂糖凝胶固定的AOL酶作为催化剂，酶添加浓度在24g/L，在搅拌条件下，在37℃温度下，进行选择性酯化反应，反应6h。
S2、将酯化反应完成的反应液冷却至室温，经过滤滤除琼脂糖凝胶固定的AOL酶(回收重复使用)，然后125℃蒸馏去除多余的醇和有机溶剂，制得四氢呋喃甲酸乙酯。
S3、将四氢呋喃甲酸乙酯加入到pH值为5.6的NaH2PO4缓冲溶液中，采用三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶作为催化剂，酶添加浓度在22g/L，在搅拌条件下，在室温下进行选择性水解反应，反应12h。
S4、将选择性水解反应后的反应液，经过滤滤除三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶(回收重复使用)，剩余反应液静置分层，取油层加无水硫酸钠脱水后，滤除无水硫酸钠，制得S-四氢呋喃甲酸乙酯。
S5、将S-四氢呋喃甲酸乙酯，加入pH值在5.5的稀盐酸中，在催化剂催化下，在75℃温度下进行水解反应，反应4.5h以上。
S6、将水解反应的反应液减压蒸馏，去除反应残留的四氢呋喃甲酸乙酯、盐酸等杂质组分，制得S-四氢呋喃甲酸。
实施例18
本实施例的工艺具体采用以下步骤：
S1、将外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇以1:2.2的摩尔比，添加到正己烷有机溶剂中，采用琼脂糖凝胶固定的AOL酶作为催化剂，酶添加浓度在24g/L，在搅拌条件下，在38℃温度下，进行选择性酯化反应，反应6h。
S2、将酯化反应完成的反应液冷却至室温，经过滤滤除琼脂糖凝胶固定的AOL酶(回收重复使用)，然后125℃蒸馏去除多余的醇和有机溶剂，制得四氢呋喃甲酸乙酯。
S3、将四氢呋喃甲酸乙酯加入到pH值为5.5的NaH2PO4缓冲溶液中，采用三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶作为催化剂，酶添加浓度在22g/L，在搅拌条件下，在室温下进行选择性水解反应，反应13h。
S4、将选择性水解反应后的反应液，经过滤滤除三氧化二铁磁性微珠固定的CCL酶(回收重复使用)，剩余反应液静置分层，取油层加无水硫酸钠脱水后，滤除无水硫酸钠，制得S-四氢呋喃甲酸乙酯。
S5、将S-四氢呋喃甲酸乙酯，加入pH值在4.5的稀盐酸中，在催化剂催化下，在75℃温度下进行水解反应，反应4.5h以上。
S6、将水解反应的反应液减压蒸馏，去除反应残留的四氢呋喃甲酸乙酯、盐酸等杂质组分，制得S-四氢呋喃甲酸。
使用HPLC对实施例13～18的各步反应进行检测，计算整个制备过程的整体收率，同时检测制得的S-四氢呋喃甲酸的纯度和光学纯度。同时，以市售的TCI公司和阿法埃莎公司生产的S-四氢呋喃甲酸作为对比例1、2，比较产品质量，以现有的手性胺拆分和酒石酸拆分工艺作为对比例3、4，比较整体收率和产品质量，具体结果见表5。
表5实施例13～18及对比例检测结果表由表5的数据可以看出，本申请方法制备出的S-四氢呋喃甲酸，其纯度和光学纯度均能够达到或优于国外知名企业生产的S-四氢呋喃甲酸。同时，本申请的整体收率远超目前现有的化学拆分工艺，制备的S-四氢呋喃甲酸的质量也远优于现有的化学拆分工艺制备的S-四氢呋喃甲酸。
以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可作出种种等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。
Claims (10)
1.一种S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、采用外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇为原料，以正己烷为有机溶剂，采用AOL酶作为催化剂，在搅拌条件下进行酯化反应，纯化后得到四氢呋喃甲酸乙酯；
S2、将步骤S1制得的四氢呋喃甲酸乙酯加入到酸性NaH2PO4缓冲溶液中，采用CCL酶作为催化剂，在搅拌条件下进行水解反应，将剩余的四氢呋喃甲酸乙酯纯化，制得S-四氢呋喃甲酸乙酯；
S3、将步骤S2制得的S-四氢呋喃甲酸乙酯，加入稀盐酸中，进行水解反应，纯化后制得S-四氢呋喃甲酸。
2.根据权利要求1所述的S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述外消旋的四氢呋喃甲酸和无水乙醇的摩尔比为1：2~2.5，所述AOL酶的添加量为20~25g/L。
3.根据权利要求1所述的S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述酯化反应的反应温度控制在35~40℃，反应时间6h以上。
4.根据权利要求1所述的S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述AOL酶采用琼脂糖凝胶固定。
5.根据权利要求4所述的S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述步骤S1中，所述纯化采用以下步骤：首先，过滤滤除琼脂糖凝胶固定的AOL酶；然后，120~130℃蒸馏去除多余的醇和有机溶剂，得到纯化后的四氢呋喃甲酸乙酯。
6.根据权利要求1所述的S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述CCL酶添加量为20~25g/L，所述NaH2PO4缓冲溶液的pH值控制在5.5~6。
7.根据权利要求1所述的S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述水解反应在室温下进行，反应时间12h以上。
8.根据权利要求1所述的S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，所述CCL酶采用三氧化二铁磁性微球固定。
9.根据权利要求8所述的S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述纯化采用以下步骤：首先，过滤滤除三氧化二铁磁性微球固定的CCL酶；然后，静置分层，分离出油层；最后，加入吸湿剂脱除油层中的水分，滤除吸湿剂后，得到纯化后的S-四氢呋喃甲酸乙酯。
10.根据权利要求9所述的S-四氢呋喃甲酸的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述水解反应在催化剂催化下进行，反应的pH值控制在4~5，反应温度控制在60~80℃，反应时间4h以上；所述纯化采用减压蒸馏的方式进行。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211049683.0A CN115304564B (zh) | 2022-08-30 | 2022-08-30 | 一种s-四氢呋喃甲酸的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211049683.0A CN115304564B (zh) | 2022-08-30 | 2022-08-30 | 一种s-四氢呋喃甲酸的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115304564A true CN115304564A (zh) | 2022-11-08 |
| CN115304564B CN115304564B (zh) | 2024-09-24 |
Family
ID=83863935
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211049683.0A Active CN115304564B (zh) | 2022-08-30 | 2022-08-30 | 一种s-四氢呋喃甲酸的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115304564B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109868298A (zh) * | 2017-12-01 | 2019-06-11 | 上海弈柯莱生物医药科技有限公司 | 四氢呋喃-2-甲酸的制备方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001092553A1 (en) * | 2000-06-01 | 2001-12-06 | Sk Corporation | Method for optically resolving a racemic alpha-substituted heterocyclic carboxylic acid using enzyme |
| WO2001092554A1 (en) * | 2000-06-01 | 2001-12-06 | Sk Corporation | Method for preparing an r- or s-form of alpha-substituted heterocyclic carboxylic acid and a counter enantiomeric form of alpha-substituted heterocyclic carboxylic acid ester thereto using enzyme |
| CN106957287A (zh) * | 2016-01-12 | 2017-07-18 | 杭州述康生物技术有限公司 | 一种药物中间体(s)-3-羟基四氢呋喃的制备方法 |
| CN107828831A (zh) * | 2017-11-22 | 2018-03-23 | 爱斯特（成都）生物制药股份有限公司 | 一种蛋白酶拆分制备手性2‑四氢糠酸的方法 |
| CN109868298A (zh) * | 2017-12-01 | 2019-06-11 | 上海弈柯莱生物医药科技有限公司 | 四氢呋喃-2-甲酸的制备方法 |
| CN110358752A (zh) * | 2019-07-05 | 2019-10-22 | 浙江工业大学 | 一种米曲霉脂肪酶及在制备布瓦西坦手性中间体中的应用 |
-
2022
- 2022-08-30 CN CN202211049683.0A patent/CN115304564B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001092553A1 (en) * | 2000-06-01 | 2001-12-06 | Sk Corporation | Method for optically resolving a racemic alpha-substituted heterocyclic carboxylic acid using enzyme |
| WO2001092554A1 (en) * | 2000-06-01 | 2001-12-06 | Sk Corporation | Method for preparing an r- or s-form of alpha-substituted heterocyclic carboxylic acid and a counter enantiomeric form of alpha-substituted heterocyclic carboxylic acid ester thereto using enzyme |
| CN106957287A (zh) * | 2016-01-12 | 2017-07-18 | 杭州述康生物技术有限公司 | 一种药物中间体(s)-3-羟基四氢呋喃的制备方法 |
| CN107828831A (zh) * | 2017-11-22 | 2018-03-23 | 爱斯特（成都）生物制药股份有限公司 | 一种蛋白酶拆分制备手性2‑四氢糠酸的方法 |
| CN109868298A (zh) * | 2017-12-01 | 2019-06-11 | 上海弈柯莱生物医药科技有限公司 | 四氢呋喃-2-甲酸的制备方法 |
| CN110358752A (zh) * | 2019-07-05 | 2019-10-22 | 浙江工业大学 | 一种米曲霉脂肪酶及在制备布瓦西坦手性中间体中的应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 曹雪荣等: "固定化柱状假丝酵母脂肪酶的制备与催化性能的研究", 《宁夏大学学报（自然科学版）》, vol. 31, no. 4, pages 351 - 355 * |
| 郭冰涵: "酶法拆分（R, S）-四氢呋喃-2-甲酸的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》, no. 02, pages 016 - 186 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109868298A (zh) * | 2017-12-01 | 2019-06-11 | 上海弈柯莱生物医药科技有限公司 | 四氢呋喃-2-甲酸的制备方法 |
| CN109868298B (zh) * | 2017-12-01 | 2023-05-12 | 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司 | 四氢呋喃-2-甲酸的制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115304564B (zh) | 2024-09-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2021201921B2 (en) | Polyunsaturated fatty acid triglyceride and preparation and uses thereof | |
| CN109295030B (zh) | 一种基于液态固定化酶富集鱼油中dha和epa的方法 | |
| CN115304564B (zh) | 一种s-四氢呋喃甲酸的制备方法 | |
| EP0802261B1 (de) | Enzymatische Acylierung eines Retinolderivates | |
| EP2732041B1 (en) | Separation of R,R- and S,S-lactides | |
| CN106957287A (zh) | 一种药物中间体(s)-3-羟基四氢呋喃的制备方法 | |
| CN108004276A (zh) | 一种酮基还原催化系统的构建及循环运行方法 | |
| CN112921064A (zh) | 一种固定化酶催化合成维生素a棕榈酸酯的方法 | |
| JP5697832B2 (ja) | ホールセル−生体内変換からの反応溶液の後処理 | |
| CN114058655B (zh) | 一种酶-化学一锅法合成(r)-乙酰胺基苯丙醇的方法 | |
| CN105925558B (zh) | 一种用于制备他汀类药物的复合固定化酶及其制备方法 | |
| CN109055446B (zh) | 生物催化合成异丁酸香兰素酯的方法 | |
| CN114507652A (zh) | 一株伯克霍尔德氏菌酯合成酶Bur01的纯化和晶体制备方法 | |
| JP2983655B2 (ja) | ジグリセリドの製造法 | |
| JP5093248B2 (ja) | 光学活性インドリン−２−カルボン酸類またはその誘導体の製造方法 | |
| CN111763626A (zh) | 一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法 | |
| CN111116683B (zh) | 一种葡醛内酯的生物制备方法 | |
| CN114921507B (zh) | 前列腺素手性中间体2-氧杂双环-[3.3.0]辛-6-烯-3-酮的拆分方法 | |
| CN112195203B (zh) | 一种酶法合成(s)-2-氨基丁酰胺的方法 | |
| CN113481247B (zh) | 一种中碳链甘油三酯的制备方法 | |
| CN113717996B (zh) | 一种2-脱氧-2,2-二氟-3,5-二苯甲酰基-d-呋喃核糖的生物合成方法 | |
| CN110257443B (zh) | 一种超滤膜在右反de菊酸的连续化拆分中的应用方法 | |
| CN106946698A (zh) | 一种利用高分子负载介孔催化剂制备三醋酸甘油酯的方法 | |
| JP4069742B2 (ja) | 微生物によるカルボン酸エステルの光学分割法 | |
| JP2828720B2 (ja) | 光学活性１，３―ブタンジオールの製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |