CN115166104B - 将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用 - Google Patents

将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN115166104B
CN115166104B CN202211092987.5A CN202211092987A CN115166104B CN 115166104 B CN115166104 B CN 115166104B CN 202211092987 A CN202211092987 A CN 202211092987A CN 115166104 B CN115166104 B CN 115166104B
Authority
CN
China
Prior art keywords
mobile phase
impurities
starting material
impurity
volume fraction
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202211092987.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN115166104A (zh
Inventor
吴蕾
高书俊
孙颖
王聪聪
白俊鹏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tianjin Minxiang Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Kangruixin Tianjin Pharmaceutical Research Institute Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kangruixin Tianjin Pharmaceutical Research Institute Co ltd filed Critical Kangruixin Tianjin Pharmaceutical Research Institute Co ltd
Priority to CN202211092987.5A priority Critical patent/CN115166104B/zh
Publication of CN115166104A publication Critical patent/CN115166104A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115166104B publication Critical patent/CN115166104B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N30/14—Preparation by elimination of some components
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)

Abstract

本发明公开了将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用。本发明的方法，包括以下步骤：采用液相色谱法对溶液中的匹伐他汀钙起始物料和杂质进行分离；所用的色谱柱为C4‑T色谱柱，采用以混合酸‑三乙胺缓冲液为流动相A，四氢呋喃为流动相B，甲醇为流动相C，进行梯度洗脱，流动相A的pH值为2.9~3.7。本发明通过选择合适的流动相，并控制流动相的缓冲盐比例和流速、色谱柱、柱温、检测波长等条件，特别是通过选择合适的色谱柱、控制流动相的pH值以及梯度洗脱程序，来使得起始物料与其三种杂质，在同一个检测方法下可以进行有效地分离，并且检测灵敏度高、专属性好、准确度高。

Description

将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用
技术领域
本发明涉及分析化学技术领域，进一步地说，是涉及将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用。
背景技术
匹伐他汀钙起始物料的化学名为：[[2-环丙基-4-(4-氟苯基)-3-喹啉基]甲基] 三苯基溴化膦，CAS：154057-58-6，其结构式如下：
Figure 50575DEST_PATH_IMAGE001
C37H30BrFNP 618.53。
[(2-环丙基-4-苯基-3-喹啉基)甲基]三苯基溴化膦为此起始物料的脱氟杂质（以 杂质A代表），[[2-环丙基-4-(3-氟苯基)-3-喹啉基]甲基]三苯基溴化膦（以杂质B代表）及 [[2-环丙基-4-(2-氟苯基)-3-喹啉基]甲基]三苯基溴化膦（以杂质C代表）为其氟位置异构 体，三者的结构式分别如下：
Figure 341879DEST_PATH_IMAGE002
、
Figure 703852DEST_PATH_IMAGE003
、
Figure 637173DEST_PATH_IMAGE004
。上 述三种杂质的存在会影响起始物料含量的检测，目前尚无有效分离和检测他汀类药物起始 物料、其脱氟杂质及氟位置异构体的方法。
现有技术中，常规思路液相色谱法采用的五氟苯基柱、正相色谱柱及C18色谱柱均未同时实现三个杂质与匹伐他汀钙起始物料的有效分离。
因此，目前急需一个能同时快速、准确地分离、检测匹伐他汀类药物起始物料、其脱氟杂质及氟位置异构体的方法。
发明内容
为解决现有技术中出现的问题，本发明提出了将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用。本发明通过选择合适的流动相，并控制流动相的缓冲盐比例和流速、色谱柱、柱温、检测波长等条件，特别是通过选择合适的色谱柱、控制流动相的pH值以及梯度洗脱程序，来使得匹伐他汀钙起始物料与其三种杂质，在同一个检测方法下可以进行有效地分离，并且检测灵敏度高、专属性好、准确度高。
本发明的目的之一是提供一种将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法，包括以下步骤：
采用液相色谱法对溶液中的匹伐他汀钙起始物料和杂质进行分离；
所用的色谱柱为C4-T色谱柱，采用以混合酸-三乙胺缓冲液为流动相A，四氢呋喃为流动相B，甲醇为流动相C，进行梯度洗脱，检测波长为228nm~245nm，比如可以为228、230、232、234、236、238、248、242、245以及任意两个数值之间组成的任意范围。
所述流动相A的pH值为 2.9~3.7，比如可以为 2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7以及任意两个数值之间组成的任意范围。
在本发明所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法中，优选地，
检测波长为228nm~245nm；
所述杂质包括脱氟杂质和氟位置异构体杂质；
所述脱氟杂质包括杂质A，杂质A的结构式为
Figure 899527DEST_PATH_IMAGE005
；
氟位置异构体杂质包括杂质B和杂质C；
所述杂质B的结构式为
Figure 627312DEST_PATH_IMAGE006
；
所述杂质C的结构式为
Figure 850483DEST_PATH_IMAGE007
；
所述匹伐他汀钙起始物料的结构式为。
在本发明所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法中，优选地，
所述流动相A的混合酸-三乙胺缓冲液中，混合酸为冰乙酸和三氟乙酸的混合酸；
所述流动相A的pH值为 2.9~3.0或 3.3~3.7。
在本发明所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法中，优选地，
所述冰乙酸和三氟乙酸的体积比为1:3-5；比如可以为1:3、1:4、1:5以及任意两个数值之间组成的任意范围。优选地，所述冰乙酸和三氟乙酸的体积比为1:4；或
每1000ml的流动相A中包括冰乙酸0.5~0.75ml，三氟乙酸2.25~2.5ml，其余为水；比如冰乙酸可以为0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75ml以及任意两个数值之间组成的任意范围；三氟乙酸可以为2.25、2.3、2.35、2.4、2.45、2.5ml以及任意两个数值之间组成的任意范围。优选地，所述流动相A中的混合酸的酸的总体积浓度为0.3%（v/v）。
在本发明所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法中，优选地，
色谱柱的柱温为25℃~35℃，比如可以为25、30、35℃以及任意两个数值之间组成的任意范围；和/或，
流速为1.1ml/min~1.3ml/min，比如可以为1.1、1.2、1.3ml/min以及任意两个数值之间组成的任意范围；和/或，
进样体积10-20μl，比如可以为10、12、14、16、18、20μl；和/或，
检测波长为228nm~232nm。
在本发明所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法中，优选地，
色谱柱的柱温为30℃；流速为1.2ml/min；检测波长为230nm，进样体积20μl。
在本发明所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法中，优选地，
梯度洗脱程序为0min～30min，流动相A的体积分数为70-80％，流动相B的体积分数为0％，流动相C的体积分数为20-30％；
30min～70min，流动相A的体积分数为60％，流动相B的体积分数为2-3％，流动相C的体积分数为37-38％；
70min～80min，流动相A的体积分数为70-80％，流动相B的体积分数为0％，流动相C的体积分数为20-30％。
进一步优选地，梯度洗脱程序为：
0min～30min，流动相A的体积分数为80％，流动相B的体积分数为0％，流动相C的体积分数为20％ ；
30min～70min，流动相A的体积分数为60％，流动相B的体积分数为2％，流动相C的体积分数为38％；
70min～80min，流动相A的体积分数为80％，流动相B的体积分数为0％，流动相C的体积分数为20％。
在本发明所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法中，优选地，
匹伐他汀钙起始物料中，脱氟杂质及氟位置异构杂质的检测限均为1ng。
在本发明所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法中，优选地，
含匹伐他汀钙起始物料和杂质的溶液中，所用的溶剂为甲醇-水的混合溶剂；溶剂只要能满足各杂质及主成分充分溶解即可，优选地，本发明中选择溶剂为甲醇-水的体积比为20∶80；
匹伐他汀钙起始物料溶液的浓度只要能满足检测需求即可，优选地，本发明中匹伐他汀钙起始物料溶液的浓度为0.5~1mg/ml。
在本发明所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法中，优选地，
发明人发现，选择普通C18色谱柱或五氟苯基柱或正相色谱柱，均未实现在一个检测方法下同时分离起始物料及其三种异构体杂质，在本发明选择的C4-T色谱柱下，控制流动相的pH值以及梯度洗脱程序，来使得起始物料与其三种杂质可以进行有效地分离，并且检测灵敏度高、专属性好、准确度高。
所述C4-T色谱柱为ChromCore 300 C4-T，规格为4.6mm×250mm，5μm色谱柱。不同厂家生产的色谱柱具有不同的型号，本领域技术人员可以根据色谱柱型号进行色谱柱筛选。
在本发明中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。在下文中，各个技术方案之间原则上可以相互组合而得到新的技术方案，这也应被视为在本文中具体公开。
与现有技术相比，本发明至少具有以下优点：
本发明提出一种具有较好分离度和检测灵敏度的匹伐他汀钙起始物料中脱氟杂质及氟位置异构体的分析方法。可以实现一个方法中同时使脱氟杂质及氟位置异构体与起始物料达到有效分离，方法灵敏度高、专属性好、准确度高、耐用性好，能准确有效地监控其质量水平。
附图说明
图1为本发明对比例1提供的系统适用性溶液的HPLC图谱；
图2为本发明对比例2提供的系统适用性溶液及定位溶液的HPLC叠加图谱
的HPLC图谱；
图3为本发明实施例11提供的混合溶液的HPLC图谱；
图4为本发明对比例3提供的系统适用性溶液及定位溶液的HPLC叠加图谱
的HPLC图谱；
图5为本发明对比例4提供的系统适用性溶液及定位溶液的HPLC叠加图谱
的HPLC图谱。
图1-图5中横坐标为时间，单位为min，纵坐标为电信号，单位为mAU，本领域通常仅以mAU作为纵坐标即可。
具体实施方式
下面结合具体附图及实施例对本发明进行具体的描述，有必要在此指出的是以下实施例只用于对本发明的进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域技术人员根据本发明内容对本发明做出的一些非本质的改进和调整仍属本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在以下具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，由此而形成的技术方案属于本说明书原始公开内容的一部分，同时也落入本发明的保护范围。
实施例与对比例中采用的原料，如果没有特别限定，那么均是现有技术公开的，例如可直接购买获得或者根据现有技术公开的制备方法制得。
在本发明实施例中，未特殊说明，其配比均按照体积比进行。
在本发明实施例中，未特殊说明，起始物料指的均是纯的[[2-环丙基-4-(4-氟苯基)-3-喹啉基]甲基]三苯基溴化膦物料。
实施例1
系统适用性溶液的制备：用甲醇-水（20∶80）作为溶剂溶解起始物料（即纯的[[2-环丙基-4-(4-氟苯基)-3-喹啉基]甲基]三苯基溴化膦）及杂质A、杂质B、杂质C得到混合溶液，其中，所述混合溶液中起始物料浓度为1mg/ml，杂质浓度均为1μg/ml。将所述系统适用性溶液注入液相色谱仪，其中，色谱条件为：
色谱柱：ChromCore 300 C4-T，4.6mm×250mm，5μm；
流动相A：混合酸-三乙胺缓冲液（取冰乙酸0.6ml，三氟乙酸2.4ml，加水稀释至1000ml，三乙胺调节pH 3.0）；
流动相B：四氢呋喃；
流动相C：甲醇；
柱温：30℃；
流速：1.2ml/min；
检测波长：230nm；
进样体积：20μl;
梯度洗脱程序：
Figure 446549DEST_PATH_IMAGE008
实施例2
与实施例1基本相同，不同之处仅在于，用三乙胺将流动相A的pH值调节为2.9。
实施例3
与实施例1基本相同，不同之处仅在于，用三乙胺将流动相A的pH值调节为3.1。
实施例4
与实施例1基本相同，不同之处仅在于流速为1.1ml/min。
实施例5
与实施例1基本相同，不同之处仅在于流速为1.3 ml/min。
实施例6
与实施例1基本相同，不同之处仅在于柱温为25℃。
实施例7
与实施例1基本相同，不同之处仅在于柱温为35℃。
实施例8
与实施例1基本相同，不同之处仅在于混合酸中冰乙酸和三氟乙酸的体积比为1∶3。
实施例9
与实施例1基本相同，不同之处仅在于混合酸中冰乙酸和三氟乙酸的体积比为1∶5。
实施例1至实施例9条件下各杂质分离情况如表1所示：
表1
Figure 438776DEST_PATH_IMAGE009
从表1的结果可以看出，在实施例3下，系统适用性溶液中杂质A/杂质C与相邻异构体杂质B的分离度小于1.2。其它实施例中系统适用性溶液中主峰（即起始物料的特征峰）与杂质A/杂质C分离度均不低于1.5；杂质A/杂质C与相邻异构体杂质B的分离度均大于1.2。还可以看出当流动相A的pH值大于3.0后，杂质A/杂质C与杂质B之间的分离度变差。
实施例10
与实施例1基本相同，不同之处仅在于，用三乙胺将流动相A的pH值调节为3.3、3.7、4.0。
实施例10条件下各杂质分离情况如表2所示：
表2
Figure 603041DEST_PATH_IMAGE010
从表2中看出，在pH为3.3~3.7时，三个杂质及起始物料共四个成分均有分离趋势，分离度均大于1.0，但在pH为4.0时，四个成分之间的分离度均较差。
对比例1
系统适用性溶液的制备：用甲醇-水（20∶80）作为溶剂溶解起始物料、杂质A、杂质B、杂质C及起始物料的其它杂质1得到的混合溶液，其中，所述混合溶液中起始物料浓度为1mg/ml，杂质A、杂质B、杂质C浓度均为100μg/ml，其它杂质1浓度为10μg/ml。
各杂质定位溶液：用甲醇-水（20∶80）作为溶剂溶解各杂质A、杂质B、杂质C得到其定位溶液，其中，所述杂质浓度均为10μg/ml。
将所述系统适用性溶液及定位溶液注入液相色谱仪，其中，色谱条件为：
色谱柱：DAICEL CHIRALPAK IF柱 4.6*250mm，5µm
流动相：磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾2.7g，加水1000ml使溶解，用三氟乙酸调pH值至2.5）-乙腈（50:50）
柱温：30℃；
流速：1.0ml/min；
检测波长：244nm；
进样体积：10μl；
此色谱柱下最优条件时，杂质A可以与起始物料达到有效分离，分离度为4.34，而杂质B与杂质C与主成分完全重合，具体结果见图1。
对比例2
系统适用性溶液的制备：用甲醇-水（20∶80）作为溶剂溶解起始物料、杂质A、杂质B、杂质C及起始物料的其它杂质1得到的混合溶液，其中，所述混合溶液中起始物料浓度为0.5mg/ml，杂质A、杂质B、杂质C浓度均为0.5μg/ml，其它杂质1浓度为0.05μg/ml。
各杂质定位溶液：用甲醇-水（20∶80）作为溶剂溶解各杂质A、杂质B、杂质C得到其定位溶液，其中，所述杂质浓度均为10μg/ml。
将所述系统适用性溶液及定位溶液注入液相色谱仪，其中，色谱条件为：
色谱柱：Nano ChromCore PFP 4.6*250mm，5µm
流动相A：缓冲盐溶液（取三乙胺3ml，加水稀释至1000ml，乙酸调节pH7.0；
流动相B：乙腈-四氢呋喃（95∶5）
流动相：流动相A-流动相B（10∶90）
柱温：30℃；
流速：1.0ml/min；
检测波长：244nm；
进样体积：10μl
上述色谱条件为此色谱柱下尝试的最优条件时的结果，可以看出杂质A与主峰未完全分离，杂质B与起始物料重合，上述三个杂质在此色谱柱下未完全与主峰分离，具体结果见图2。
另外本发明在优化过程中发现，杂质A及杂质C随色谱条件改变而同时向左或向右移动，从而无法同时与起始物料达到分离效果。
实施例11
专属性试验：各杂质定位溶液：取杂质A、杂质B、杂质C及其它杂质1、杂质2、杂质3、杂质4各约1mg，不同10ml量瓶中，加20%甲醇溶解（杂质1、杂质2、杂质3用乙腈溶解），加20%甲醇稀释至刻度，摇匀。
混合溶液：取本品（起始物料）约10mg，置10ml量瓶中，加入杂质1、杂质2、杂质3、杂质4、杂质A、杂质B、杂质C定位溶液各0.1ml，加20%甲醇稀释至刻度，摇匀。
上述定位溶液及混合溶液采用实施例1相同的色谱条件进行HPLC检测，结果见图3及表3。
表3
Figure 438142DEST_PATH_IMAGE011
由表3可以看出，采用本发明的HPLC检测方法，起始物料中其它杂质均不干扰杂质A、杂质B及杂质C的检测，说明专属性良好。
对比例1和对比例2是现有常规思路中色谱柱的对起始物料和杂质A、杂质B及杂质C的分离情况，可以看出，对比例1和对比例2中杂质A、杂质B及杂质C很难同时达到完全与主峰分离，分离效果差，而本发明的实施例11的杂质A、杂质B及杂质C可以实现同时与主峰分离，分离效果好，且实施例11为本发明方法的专属性验证，还加入了起始物料的其它杂质，该分离结果充分说明本发明的方法的专属性良好。
实施例12
检测限与定量限：取实施例11中杂质A、杂质B及杂质C各定位溶液用20%甲醇逐级稀释，当各成分峰高约为基线噪音值10倍时的溶液为定量限溶液，当各成分峰高约为基线噪音值3倍时的溶液为检测限溶液。HPLC的色谱条件与实施例1相同，结果见表4。
表4
Figure 447686DEST_PATH_IMAGE012
从表4可以看出，本发明的HPLC检测方法对各杂质及起始物料的检测灵敏度高，各杂质均能满足检测要求。
实施例13
线性试验：分别取杂质A、杂质B及杂质C适量，稀释制成含定量限、20%、40%、80%、100%、120%、200%的限度水平浓度（限度水平浓度为1μg/ml），作为线性溶液。取各水平线性溶液采用实施例1的色谱条件进样分析，以主成分和各杂质浓度为横坐标，对应溶液峰面积为纵坐标，计算各自线性回归方程及相关系数r，各杂质的相关系数均大于0.999，Y轴截距在100%响应的10%以内，表明各杂质及起始物料在定量限~200%限度水平，线性关系良好。
实施例14
准确度试验：未加标供试品溶液：取本品（起始物料）约10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加20%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。
准确度储备液：精密量取实施例11中杂质A、杂质B、杂质C定位溶液各1ml，置10ml量瓶中，加20%甲醇稀释至刻度，摇匀。
混合对照溶液：精密量取准确度储备液1ml，置10ml量瓶中，加20%甲醇稀释至刻度，摇匀。
20%水平加标供试品溶液：取起始物料约10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加20%甲醇使溶解，加准确度储备液0.2ml，加稀释剂稀释至刻度，摇匀。平行配制3份，分别记为20%-1、20%-2、20%-3。
80%水平加标供试品溶液：取起始物料约10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加稀释剂使溶解，加准确度储备液0.8ml，加20%甲醇稀释至刻度，摇匀。平行配制3份，分别记为80%-1、80%-2、80%-3。
100%水平加标供试品溶液：取起始物料约10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加稀释剂使溶解，加准确度储备液1ml，加20%甲醇稀释至刻度，摇匀。平行配制3份，分别记为100%-1、100%-2、100%-3。
120%水平加标供试品溶液：取起始物料约10mg，精密称定，置10ml量瓶中，加稀释剂使溶解，加准确度储备液1.2ml，加20%甲醇稀释至刻度，摇匀。平行配制3份，分别记为120%-1、120%-2、120%-3。
取未加标供试品溶液、混合对照溶液及各水平加标供试品溶液采用实施例1的色谱条件进样分析，结合上述溶液，计算各杂质回收率，其中各杂质回收率=（测得量-本底量）/加入量*100%。结果见表5。
表5
Figure 186097DEST_PATH_IMAGE013
从表5可以看出，本发明的HPLC检测方法，各杂质在限度水平的20%~120%之间的回收率均在90%~108%，RSD值均小于5%，均能准确测定，表明准确度良好。
对比例3
色谱柱与实施例1相同，系统适用性溶液及各杂质定位溶液同对比例2。其它色谱条件具体如下：
流动相A：冰乙酸-三乙胺缓冲液（取三乙胺3ml，加水稀释至1000ml，冰乙酸调节pH3.5）；
流动相B：四氢呋喃；
流动相C：甲醇；
柱温：30℃；
流速：1.0ml/min；
检测波长：230nm；
进样体积：10μl；
梯度洗脱程序：
Figure 990105DEST_PATH_IMAGE014
具体结果见图4
对比例4
色谱柱与实施例1相同，系统适用性溶液及各杂质定位溶液同对比例2。其它色谱条件具体如下：
流动相A：三氟乙酸-三乙胺缓冲液（取三乙胺3ml，加水稀释至1000ml，三氟乙酸调节pH 2.5）；
流动相B：四氢呋喃；
流动相C：甲醇；
柱温：25℃；
流速：1.0ml/min；
检测波长：220nm；
进样体积：20μl；
梯度洗脱程序：
Figure 453448DEST_PATH_IMAGE015
具体结果见图5。
从图4、图5中可以看出，在单独使用冰乙酸或单独使用三氟乙酸的两个色谱条件下，杂质A与杂质C的出峰顺序相反，且起始物料与相邻杂质均无法达到有效分离。结合pH的综合作用，表明杂质A与杂质C在这两个流动相体系下，色谱行为发生了较大变化。综上看出在本发明的冰乙酸和三氟乙酸的缓酸体系并结合特定的pH作用下，才能使起始物料及其杂质A、杂质B、杂质C得到较好的分离。
综上，本发明提供的匹伐他汀钙起始物料中脱氟杂质及其氟位置异构体杂质的检测方法，系统适用性溶液中起始物料与相邻杂质分离度均大于1.5，杂质间分离度均大于1.2，在一个方法下即可同时检测，检测专属性强、灵敏度好、准确度高、耐用性好，方法对仪器要求低，检测成本低。
以上结合具体实施方式和范例性实例对本发明进行了详细说明，不过这些说明并不能理解为对本发明的限制。本领域技术人员理解，在不偏离本发明精神和范围的情况下，可以对本发明技术方案及其实施方式进行多种等价替换、修饰或改进，这些均落入本发明的范围内。本发明的保护范围以所附权利要求为准。

Claims (9)

1.一种将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法，其特征在于，包括以下步骤：
采用液相色谱法对溶液中的匹伐他汀钙起始物料和杂质进行分离；
所用的色谱柱为C4-T色谱柱，采用以混合酸-三乙胺缓冲液为流动相A，四氢呋喃为流动相B，甲醇为流动相C，进行梯度洗脱；
所述流动相A的混合酸-三乙胺缓冲液中，混合酸为冰乙酸和三氟乙酸的混合酸；
所述流动相A的pH值为2.9～3.0或3.3～3.7；
所述杂质包括脱氟杂质和氟位置异构体杂质；
所述脱氟杂质包括杂质A，杂质A的结构式为
Figure FDA0003930911920000011
氟位置异构体杂质包括杂质B和杂质C；
所述杂质B的结构式为
Figure FDA0003930911920000012
所述杂质C的结构式为
Figure FDA0003930911920000013
所述匹伐他汀钙起始物料的结构式为
Figure FDA0003930911920000014
2.根据权利要求1所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法，其特征在于：
检测波长为228nm～245nm。
3.根据权利要求1所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法，其特征在于：
所述冰乙酸和三氟乙酸的体积比为1:3-5；或
每1000ml的流动相A中包括冰乙酸0.5～0.75ml，三氟乙酸2.25～2.5ml，其余为水。
4.根据权利要求1所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法，其特征在于：
色谱柱的柱温为25℃～35℃；和/或，
流速为1.1ml/min～1.3ml/min；和/或，
检测波长为228nm～232nm。
5.根据权利要求4所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法，其特征在于：
色谱柱的柱温为30℃；流速为1.2ml/min，检测波长为230nm。
6.根据权利要求1所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法，其特征在于：
梯度洗脱程序为：
0min～30min，流动相A的体积分数为70-80％，流动相B的体积分数为0％，流动相C的体积分数为20-30％；
30min～70min，流动相A的体积分数为60％，流动相B的体积分数为2-3％，流动相C的体积分数为37-38％；
70min～80min，流动相A的体积分数为70-80％，流动相B的体积分数为0％，流动相C的体积分数为20-30％。
7.根据权利要求6所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法，其特征在于：
梯度洗脱程序为：
0min～30min，流动相A的体积分数为80％，流动相B的体积分数为0％，流动相C的体积分数为20％；
30min～70min，流动相A的体积分数为60％，流动相B的体积分数为2％，流动相C的体积分数为38％；
70min～80min，流动相A的体积分数为80％，流动相B的体积分数为0％，流动相C的体积分数为20％。
8.根据权利要求1所述的将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法，其特征在于：
含匹伐他汀钙起始物料和杂质的溶液中，所用溶剂为甲醇-水的混合溶剂；
所述C4-T色谱柱为ChromCore 300C4-T，规格为4.6mm×250mm。
9.根据权利要求1-8任一所述的方法在对匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行液相色谱检测分析中的应用。
CN202211092987.5A 2022-09-08 2022-09-08 将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用 Active CN115166104B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211092987.5A CN115166104B (zh) 2022-09-08 2022-09-08 将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211092987.5A CN115166104B (zh) 2022-09-08 2022-09-08 将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115166104A CN115166104A (zh) 2022-10-11
CN115166104B true CN115166104B (zh) 2022-12-20

Family

ID=83480618

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202211092987.5A Active CN115166104B (zh) 2022-09-08 2022-09-08 将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115166104B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1790012A (zh) * 2005-12-12 2006-06-21 重庆医药工业研究院有限责任公司 一种用液相色谱法分离测定匹伐他汀及其光学异构体的方法
WO2021217887A1 (zh) * 2020-04-30 2021-11-04 山东齐都药业有限公司 匹伐他汀钙片中潜在致突变杂质的检测方法

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102279241B (zh) * 2011-07-14 2013-05-29 北京汉典中西药研究开发中心 阿托伐他汀钙胶囊有关物质的检测方法
CN106706789B (zh) * 2016-12-26 2019-02-01 江苏联环药业股份有限公司 用高效液相色谱法测定盐酸屈他维林注射液中有关物质的方法
CN113092597B (zh) * 2019-12-23 2022-05-31 徐州万邦金桥制药有限公司 一种匹伐他汀钙中间体有关物质的分析方法
CN114076802A (zh) * 2020-08-21 2022-02-22 徐州万邦金桥制药有限公司 一种定量检测匹伐他汀钙中氮氧杂质的分析方法
CN114280181B (zh) * 2021-12-23 2024-06-18 浙江海翔川南药业有限公司 一种瑞舒伐他汀中间体及其有关物质的检测方法
CN114295748B (zh) * 2021-12-30 2023-11-10 苏州正济药业有限公司 一种匹伐他汀钙中间体及杂质的检测方法
CN114384178B (zh) * 2021-12-30 2023-10-20 苏州正济医药研究有限公司 一种匹伐他汀钙中间体及杂质的检测方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1790012A (zh) * 2005-12-12 2006-06-21 重庆医药工业研究院有限责任公司 一种用液相色谱法分离测定匹伐他汀及其光学异构体的方法
WO2021217887A1 (zh) * 2020-04-30 2021-11-04 山东齐都药业有限公司 匹伐他汀钙片中潜在致突变杂质的检测方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
RP-HPLC法测定匹伐他汀钙的含量;郭晓静等;《药物分析杂志》;20081031(第10期);全文 *
毛细管区带电泳法拆分匹伐他汀钙对映体;程晓昆等;《色谱》;20101128(第11期);全文 *
高效毛细管电泳法测定匹伐他汀钙对映体异构体含量;童成亮等;《药物分析杂志》;20131031(第10期);全文 *
高效液相色谱法分离和测定匹伐他汀钙对映体及其含量;曹建军等;《药物分析杂志》;20080831(第08期);全文 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN115166104A (zh) 2022-10-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107037153A (zh) 高效液相色谱法检测al58805原料药或药物制剂中基因毒性杂质的方法
CN113075307A (zh) 富马酸丙酚替诺福韦异构体的检测方法
CN111239287B (zh) 盐酸丙卡特罗口服溶液中有关物质的检测方法
CN112461953A (zh) 一种7-氮鎓双环[2.2.1]庚烷衍生物中溴甲烷的检测方法
CN115166104B (zh) 将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用
CN113447592A (zh) 一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法
CN111624275A (zh) 一种高效液相色谱法测定吸入用复方异丙托溴铵溶液有关物质的方法
CN110261508B (zh) 一种盐酸胺碘酮原料药中有关物质的分析方法
CN109765316B (zh) 一种从药物中检测右乙拉西坦的方法
CN109374791B (zh) 一种用高效液相色谱法测定盐酸瑞芬太尼原料中酸残留的方法
CN110988158A (zh) 一种盐酸替罗非班注射液有关物质的检测方法
CN108982694B (zh) 一种n-溴代丁二酰亚胺有关物质的检测方法
CN113834891B (zh) 一种药物中苯膦类化合物的检测方法
CN110954629A (zh) 一种呋塞米中糠胺含量测定的控制方法
CN107525877A (zh) 一种采用液相色谱法分离测定依匹哌唑及其杂质的方法
CN113504317A (zh) 阿哌沙班中基因毒性杂质的检测方法和应用
CN105301118A (zh) 一种枸橼酸莫沙必利有关物质的检测方法
CN114295746A (zh) 一种匹伐他汀钙的分析检测方法
CN115327004B (zh) 一种氧化氯吡格雷粗品的检测方法
CN115327006B (zh) 一种氧化氯吡格雷异构体的检测方法
CN107091895B (zh) 采用hplc分离测定利奥西呱原料药中有关物质的方法
CN114609277B (zh) 一种复方乙酰水杨酸片的含量测定方法
CN116539765B (zh) 一种替普瑞酮胶囊的有关物质检测方法
CN114414684B (zh) 一种氟雷拉纳中间体及其同分异构体的检测方法
CN106872631A (zh) 测定2‑氯甲基‑3‑甲基‑4‑(3‑甲氧丙氧基)吡啶盐酸盐中有机杂质的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20240419

Address after: 301606 Tai'an Road, Jinghai Economic Development Zone, Binhai New Area, Tianjin

Patentee after: TIANJIN MINXIANG PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Country or region after: China

Address before: Room 602, Building 1, TEDA Small and Medium Enterprise Park, No. 276 Huanghai Road, Economic and Technological Development Zone, Binhai New Area, Tianjin 300457

Patentee before: Kangruixin (Tianjin) Pharmaceutical Research Institute Co.,Ltd.

Country or region before: China

TR01 Transfer of patent right
CP03 Change of name, title or address

Address after: 301606 Tai'an Road, Jinghai District Economic Development Zone, Tianjin City

Patentee after: TIANJIN MINXIANG PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Country or region after: China

Address before: 301606 Tai'an Road, Jinghai Economic Development Zone, Binhai New Area, Tianjin

Patentee before: TIANJIN MINXIANG PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Country or region before: China

CP03 Change of name, title or address