CN115054557A - 一种防脱发组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种防脱发组合物及其应用，所述防脱发组合物由油茶籽提取物和小果咖啡籽提取物组成，所述油茶籽提取物和小果咖啡籽提取物的质量比为1：8～8：1。油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物联合使用，能够显著提高DHT损伤后人真皮乳头细胞的活力，降低炎症因子表达水平，5α‑还原酶SRD5A2和雄激素受体基因表达量均显著降低，油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物对于缓解雄激素性脱发具有较强的协同作用，用于防脱发产品中具有较好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于防脱发产品技术领域，具体涉及一种防脱发组合物及其应用。
背景技术
雄激素性脱发(Androgenic Alopecia,AGA)又称为脂溢性脱发，近年来患病率不断升高并呈年轻化趋势。雄激素性脱发是一种雄激素依赖的、环境因素和多种基因影响共同作用的遗传性疾病，具体表现为进行性脱发、毛囊萎缩，常常伴有头皮屑、油腻等症状，随年龄增长而逐渐严重，影响人们的正常生活和心理健康，其发病机制还未完全明确。
迄今研究表明雄激素代谢异常与雄激素脱发发病有着密不可分的关系，雄激素脱发区域雄激素受体(Androgen receptor，AR)表达增加、炎症因子分泌异常以及Ⅱ型5α-还原酶活性增强。睾酮在Ⅱ型5α-还原酶的作用下变成与AR更亲和的二氢睾酮，加速脱发。人真皮乳头细胞是雄激素代谢靶细胞。因此，利用二氢睾酮作为刺激物，建立真皮乳头细胞的雄激素损伤模型，考查药物对二氢睾酮作用下真皮乳头细胞的影响，从而探索活性成分的缓解雄激素性脱发的功效。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
作为本发明其中一个方面，本发明提供一种防脱发组合物及其应用，其中，所述防脱发组合物由油茶籽提取物和小果咖啡籽提取物组成，所述油茶籽提取物和小果咖啡籽提取物的质量比为1：8～8：1。
作为本发明所述的防脱发组合物的一种优选方案：所述油茶籽提取物和小果咖啡籽提取物的质量比为1～4：4～1。
作为本发明所述的防脱发组合物的一种优选方案：所述油茶籽提取物的主要活性成份为黄酮。
作为本发明所述的防脱发组合物的一种优选方案：所述油茶籽提取物，其制备方法为：将脱脂油茶茶麸粉碎、过筛、烘干，加入浓度为50～60％的乙醇，加入酶进行酶解决处理，过滤后冷冻干燥得产物。
作为本发明所述的防脱发组合物的一种优选方案：所述加入酶进行酶解决处理，为加入纤维素酶和/或果胶酶进行酶解处理。
作为本发明所述的防脱发组合物的一种优选方案：所述加入酶进行酶解决处理，酶的质量浓度为1～5％。
作为本发明所述的防脱发组合物的一种优选方案：还包括，在加入浓度为50～60％的乙醇同时进行微波处理。
作为本发明的另一个方面，本发明还提供所述的防脱发组合物在防脱发产品中的应用。其中，所述防脱发产品包括洗发水、护发产品、头皮护理产品中的一种或几种。所述防脱发组合物在防脱发产品中的添加量为0.05～2wt％。
本发明的有益效果：本发明用人真皮乳头细胞损伤模型，研究防脱发组合物缓解雄激素性脱发的功效，研究发现，油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物联合使用，能够显著提高DHT损伤后人真皮乳头细胞的活力，降低炎症因子表达水平，5α-还原酶SRD5A2和雄激素受体基因表达量均显著降低，油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物对于缓解雄激素性脱发具有较强的协同作用，用于防脱发产品中具有较好的应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：
图1为各实验组的细胞活力值。
图2为炎症因子IL-1α表达量相对值。
图3为SRD5A2基因表达量相对值.
图4为AR基因表达量相对值。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
实施例1：
本发明防脱组合物由原料1和原料2组成，具体组分如下：
原料1：名称：油茶籽提取物(参考专利CN113425636A方法提取油茶籽的茶麸，油茶籽提取物中主要活性成份为茶麸黄酮)；
原料2：INCI名称：小果咖啡籽提取物(购买市售产品)；
将原料1和原料2分别按照表1中的比例和浓度复配混合。
表1
| 实验编号 | 组分 |
| 1 | 油茶籽提取物 |
| 2 | 小果咖啡籽提取物 |
| 3 | 油茶籽提取物：小果咖啡籽提取物＝1：1 |
| 4 | 油茶籽提取物：小果咖啡籽提取物＝8：1 |
| 5 | 油茶籽提取物：小果咖啡籽提取物＝1：8 |
表1中，实验1为油茶籽提取物组，分别配制油茶籽提取物的浓度为5μg/mL，10μg/mL，20μg/mL，50μg/mL；实验2为小果咖啡籽提取物组，分别配制小果咖啡籽提取物的浓度为5μg/mL，10μg/mL，20μg/mL，50μg/mL；实验3为油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物按照质量比1：1混合，油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物的混合物总浓度分别为5μg/mL，10μg/mL，20μg/mL，50μg/mL；实验4为油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物按照质量比8：1混合，油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物的混合物总浓度分别为5μg/mL，10μg/mL，20μg/mL，50μg/mL；实验5为油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物按照质量比1：8混合，油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物的混合物总浓度分别为5μg/mL，10μg/mL，20μg/mL，50μg/mL。
为研究所述防脱组合物的防脱效果，采用MTT法测定二氢睾酮刺激后人真皮毛乳头细胞(Human Dermal Papilla cells,HDPCs，购于上海青旗生物技术发展有限公司)的活力：
消化对数生长期细胞，血球板计数器计数，每孔接种1×104个细胞于96孔细胞培养板，24h培养后弃去上清液，以仅添加培养基、无防脱组合物且无DHT添加组为空白对照组；向细胞培养基中加入二氢睾酮(DHT)作为阳性对照组(DHT组)，使得二氢睾酮浓度为50μg/mL；实验组：向细胞培养基中加入二氢睾酮(DHT)，二氢睾酮浓度为50μg/mL，之后按照表1中实验1-5分别向各孔的细胞培养基中分别添加各防脱发组合物分别作为实验组1-5，各实验组防脱发组合物在细胞培养基中的总浓度分别为5μg/mL，10μg/mL，20μg/mL，50μg/mL，培养24h后，弃去上清液并用PBS洗涤，每孔加入0.5mg/mL(溶于DMEM培养基)新鲜配制的MTT溶液100μL。孵育4h后弃掉上清液，每孔加入100μL DMSO溶解结晶，37℃振荡5min，在酶标仪490nm处读取吸光值，以不加入细胞，仅加入测试溶剂作为溶剂组，细胞增殖计算公式为：
式中：A0表示溶剂组的吸光值；A1表示各样品组(包括阳性对照组和各实验组)的吸光值；A2表示空白对照组的吸光值。
MTT实验结果：将空白对照组的细胞活力测定吸光值结果记为1，测得50μg/mLDHT阳性对照组(DHT组)的细胞活力平均值为0.555，添加不同浓度的防脱发组合物的各实验组的细胞活力平均值见表2和图1。
表2
为方便数据分析，将上述MTT实验中，阳性对照组(DHT组)的细胞活力记为1，将数据转化为各实验组的防脱发组分对DHT损伤作用的减轻效果，并采用CompuSyn软件计算CI值，CI值0.1～0.3强烈协同作用，0.3～0.7具有协同作用，统计分析结果见表3。
表3
从实验结果可知，与空白对照组相比，阳性对照组50μg/mL的二氢睾酮(DHT)显著诱导真皮乳头细胞凋亡，抑制真皮乳头细胞的增殖。在实验组同时添加DHT和防脱发组合物样品条件下，DHT对真皮乳头细胞凋亡作用得到明显缓解，细胞活力提升。将数据转化为DHT对细胞活力损伤作用的减轻效果。以单纯DHT作用细胞活力下降值为参比进行归一化处理，数据越低代表防脱发组合物作用下DHT对细胞活力的影响越小，即防脱发组合物减轻了DHT对真皮乳头细胞的凋亡作用，其中油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物按照质量比1：1复配时具有强协同作用。
二氢睾酮及防脱发组合物对真皮乳头细胞炎症因子的影响：
将真皮乳头细胞悬液，按照1×106个/孔的密度接种于12孔板中，培养24h后用200ng/ml二氢睾酮溶液(本领域认为该浓度无细胞毒性，但会刺激炎症因子表达)孵育细胞24h，收集细胞上清液，按照ELISA试剂盒的操作说明书，检测真皮乳头细胞炎症因子的分泌量。用含200ng/ml二氢睾酮及不同质量分数防脱发组合物的溶液共同孵育细胞24h，测定防脱发组合物对细胞炎症因子产生的影响。
以仅添加培养基、无防脱组合物且无DHT添加组为空白对照组；向细胞培养基中加入二氢睾酮(DHT)作为阳性对照组(DHT组)，使得二氢睾酮浓度为200ng/mL；实验组：向细胞培养基中加入二氢睾酮(DHT)，二氢睾酮浓度为200ng/mL，之后按照表1分别向各孔的细胞培养基中分别添加各防脱发组合物分别作为实验组1-3，各实验组防脱发组合物在细胞培养基中的总浓度分别为5μg/mL，10μg/mL，20μg/mL，50μg/mL。测试DHT刺激下各实验组细胞炎症因子IL-1α的表达量(单位：pg/mL)。
空白对照组的IL-1α的表达量为4.0pg/mL，阳性对照组(DHT组)的IL-1α的表达量为10.8pg/mL，实验组1-3的IL-1α表达量见表4。
表4 ELISA检测DHT刺激下IL-1α表达量(pg/mL)
以单纯DHT作用时炎症水平进行规一化处理，将阳性对照组200ng/ml二氢睾酮处理后测得的IL-1α表达量相对值记为1，得到实验组1-3的炎症因子IL-1α表达量相对值见表5和图2。CI值代表0.1～0.3强烈协同作用，0.3～0.7代表具有协同作用。
表5
与空白对照组相比，200ng/mL二氢睾酮作用使真皮乳头细胞炎症因子IL-1α的分泌量显著上升(P<0.01)，表明二氢睾酮诱导了真皮乳头细胞的炎症反应。以200ng/mL二氢睾酮为炎症刺激浓度建立真皮乳头细胞炎症模型，探究防脱发组合物对二氢睾酮产生炎症的缓解作用，并以单纯DHT作用时炎症水平进行规一化处理，数据越低代表提取物作用下炎症水平越低，即防脱发组合物减轻了DHT作用下真皮乳头细胞的炎症反应，且油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物按照质量比1：1复配时对于降低炎症反应具有强协同作用。
相关基因表达水平检测：将真皮乳头细胞悬液，按照5×106个/瓶的密度接种于T25培养瓶中，培养24h后用200ng/mL二氢睾酮孵育细胞24h，培养结束收集细胞。用PBS洗涤细胞2次(1500rpm离心5min收集细胞沉淀)。细胞沉淀加入1mL的RNA提取液，吹打破碎细胞。加入三氯甲烷250μL，充分混匀静置3min。4℃下12000rpm离心10min，收集上清液转移到新的离心管，加入0.8倍体积的异丙醇混匀，于-20℃冰箱放置15min。4℃,12000rpm离心10min，收集管底白色沉淀，即为样品RNA。目的基因以及内参基因GAPDH的引物设计与合成，委托上海圆创生物科技有限公司完成，引物序列如表6所示。ΔCT法计算目的基因表达水平的倍数变化。
表6引物序列
以仅添加培养基、无防脱组合物且无DHT添加组为空白对照组；向细胞培养基中加入200ng/mL二氢睾酮(DHT)作为阳性对照组(DHT组)；实验组：向细胞培养基中加入二氢睾酮(DHT)，使得二氢睾酮浓度为200ng/mL，之后分别向各孔的细胞培养基中添加10μg/mL的油茶籽提取物，10μg/mL的小果咖啡籽提取物，油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物按照质量比1：1混合，混合物总浓度为10μg/mL。SRD5A2基因表达量相对值见图3，AR基因表达量相对值见图4。
二氢睾酮诱导真皮乳头细胞产生的抑制性旁分泌和自分泌因子是雄激素脱发的关键因素之一。通过定量PCR对二氢睾酮和防脱发组合物共同作用下真皮乳头细胞相关酶(SRD5A2)、雄激素受体(AR)的表达进行检测，探究防脱发组合物对真皮乳头细胞生长的影响。与未处理的空白对照组比，二氢睾酮孵育模型组中的SRD5A2、AR表达量均显著上升(P<0.01)，10μg/mL防脱发组合物与二氢睾酮共同处理真皮乳头细胞后，AR和SRD5A2表达量大幅降低，且油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物按照质量比1：1混合后与单一组分相比具有显著性差异。
本发明用人真皮乳头细胞损伤模型，研究防脱发组合物缓解雄激素性脱发的功效，研究发现，油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物联合使用，能够显著提高DHT损伤后人真皮乳头细胞的活力，降低炎症因子表达水平，5α-还原酶SRD5A2和雄激素受体基因表达量均显著降低，油茶籽提取物与小果咖啡籽提取物对于缓解雄激素性脱发具有较强的协同作用，用于防脱发产品中具有较好的应用前景。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (10)
1.一种防脱发组合物，其特征在于：所述防脱发组合物由油茶籽提取物和小果咖啡籽提取物组成，所述油茶籽提取物和小果咖啡籽提取物的质量比为1：8～8：1。
2.根据权利要求1所述的防脱发组合物，其特征在于：所述油茶籽提取物和小果咖啡籽提取物的质量比为1～4：4～1。
3.根据权利要求1或2所述的防脱发组合物，其特征在于：所述油茶籽提取物的主要活性成份为黄酮。
4.根据权利要求1或2所述的防脱发组合物，其特征在于：所述油茶籽提取物，其制备方法为：将脱脂油茶茶麸粉碎、过筛、烘干，加入浓度为50～60％的乙醇，加入酶进行酶解决处理，过滤后冷冻干燥得产物。
5.根据权利要求4所述的防脱发组合物，其特征在于：所述加入酶进行酶解决处理，为加入纤维素酶和/或果胶酶进行酶解处理。
6.根据权利要求5所述的防脱发组合物，其特征在于：所述加入酶进行酶解决处理，酶的质量浓度为1～5％。
7.根据权利要求1或2所述的防脱发组合物，其特征在于：还包括，在加入浓度为50～60％的乙醇同时进行微波处理。
8.权利要求1所述的防脱发组合物在防脱发产品中的应用。
9.权利要求8所述的应用，其特征在于：所述防脱发产品包括洗发水、护发产品、头皮护理产品中的一种或几种。
10.权利要求9所述的应用，其特征在于：所述防脱发组合物在防脱发产品中的添加量为0.05～2wt％。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115475126A (zh) * | 2022-09-21 | 2022-12-16 | 广州德谷个人护理用品有限公司 | 一种兼具控油和舒缓功效的组合物及其应用 |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102005010142A1 (de) * | 2005-03-02 | 2005-11-03 | Dr. Kurt Wolff Gmbh & Co. Kg | Mittel zur Aktivierung der Haarwurzeln und Verwendung des Mittels |
| US20120199152A1 (en) * | 2005-10-03 | 2012-08-09 | Shapiro Steven D | Composition and method for treatment of hair loss with a combination of natural ingredients |
| US20140349947A1 (en) * | 2012-02-07 | 2014-11-27 | Aleksey Valentinovich Odintsov | Hair growth agent (embodiments) and method for hair regrowth |
| CN106860086A (zh) * | 2017-01-23 | 2017-06-20 | 康美氏（厦门）生物科技有限公司 | 一种智能抗衰老组合物及其制作工艺及其在化妆品中的应用 |
| CN110840762A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-02-28 | 刘召栋 | 一种含有油茶籽提取物的洗发水及制备方法 |
| CN111821242A (zh) * | 2020-09-03 | 2020-10-27 | 私人定制(广州)科技有限公司 | 一种含银离子的生发育发精华液 |
| CN111870559A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-11-03 | 何礼明 | 一种防脱生发的洗发水及制备方法 |
| CN112121135A (zh) * | 2020-09-28 | 2020-12-25 | 广西高企科技有限公司 | 一种头皮和头发护理中药护发素及其制备方法 |
| CN113425636A (zh) * | 2021-05-21 | 2021-09-24 | 广州德谷个人护理用品有限公司 | 一种茶麸黄酮的制备方法及其在防脱发产品中的应用 |
-
2022
- 2022-08-05 CN CN202210936805.1A patent/CN115054557B/zh active Active
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102005010142A1 (de) * | 2005-03-02 | 2005-11-03 | Dr. Kurt Wolff Gmbh & Co. Kg | Mittel zur Aktivierung der Haarwurzeln und Verwendung des Mittels |
| EP1700617A1 (de) * | 2005-03-02 | 2006-09-13 | Dr. Kurt Wolff GmbH & Co. KG | Mittel zur Aktivierung der Haarwurzeln und Verwendung des Mittels |
| US20120199152A1 (en) * | 2005-10-03 | 2012-08-09 | Shapiro Steven D | Composition and method for treatment of hair loss with a combination of natural ingredients |
| US20140349947A1 (en) * | 2012-02-07 | 2014-11-27 | Aleksey Valentinovich Odintsov | Hair growth agent (embodiments) and method for hair regrowth |
| CN106860086A (zh) * | 2017-01-23 | 2017-06-20 | 康美氏（厦门）生物科技有限公司 | 一种智能抗衰老组合物及其制作工艺及其在化妆品中的应用 |
| CN110840762A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-02-28 | 刘召栋 | 一种含有油茶籽提取物的洗发水及制备方法 |
| CN111870559A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-11-03 | 何礼明 | 一种防脱生发的洗发水及制备方法 |
| CN111821242A (zh) * | 2020-09-03 | 2020-10-27 | 私人定制(广州)科技有限公司 | 一种含银离子的生发育发精华液 |
| CN112121135A (zh) * | 2020-09-28 | 2020-12-25 | 广西高企科技有限公司 | 一种头皮和头发护理中药护发素及其制备方法 |
| CN113425636A (zh) * | 2021-05-21 | 2021-09-24 | 广州德谷个人护理用品有限公司 | 一种茶麸黄酮的制备方法及其在防脱发产品中的应用 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115475126A (zh) * | 2022-09-21 | 2022-12-16 | 广州德谷个人护理用品有限公司 | 一种兼具控油和舒缓功效的组合物及其应用 |
| CN115475126B (zh) * | 2022-09-21 | 2023-11-28 | 广州德谷个人护理用品有限公司 | 一种兼具控油和舒缓功效的组合物及其应用 |
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