JP6813796B2 - 筋肉活性化剤 - Google Patents
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Description
(1)コエンドロ抽出物を有効成分として含有する、筋肉活性化剤。
(2)コエンドロ抽出物がアルコール抽出物または含水アルコール抽出物である、前記(1)に記載の筋肉活性化剤。
(3)アルコールがエタノールである、前記(2)に記載の筋肉活性化剤。
(4)筋肉活性化剤が筋肉増強剤である、前記(1)〜(3)のいずれかに記載の筋肉活性化剤。
(5)筋肉活性化剤が筋肉減衰予防剤である、前記(1)〜(3)のいずれかに記載の筋肉活性化剤。
(6)筋肉活性化剤が皮膚改善剤である、前記(1)〜(3)のいずれかに記載の筋肉活性化剤。
本発明にかかるコエンドロ抽出物(以下、「本発明抽出物」ともいう)は、セリ科コエンドロ属に属する植物の抽出物である。コエンドロ属に含まれる植物としては、コエンドロ(Coriandrum sativum L.)を挙げることができる。本発明にかかるコエンドロ抽出物には、上記植物の各部位、例えば、葉、茎、根、果実、果皮、種子、種皮、地上部、地下部又は全草の抽出物を用いることができる。好ましくは、葉の抽出物である。
本発明にかかる筋肉活性化剤(以下、「本発明筋肉活性化剤」という。)は、筋芽細胞賦活作用、筋芽細胞増殖促進作用、筋管形成促進作用を有し、筋肉の増量、増強や筋萎縮抑制作用、運動による筋肉損傷からの回復促進作用、運動不足や老化に伴うサルコペニアおよびロコモティブシンドロームの予防および治療等に有用である。また、本発明筋肉活性化剤は、皮膚領域近傍に存在する筋芽細胞を活性化し、その周辺の皮膚のたるみや張り等を改善する皮膚改善効果や、疲労の軽減作用、筋肉疲労緩和による肩こりおよび眼精疲労軽減作用も期待される。
製造例1 コエンドロのメタノール抽出物の製造
コエンドロ乾燥葉2gを粉砕後、メタノール10gに7日間浸漬させ、濾過後にロータリーエバポレーターにて濃縮・乾固を行いコエンドロのメタノール抽出物を得た。
製造例2 コエンドロのメタノール抽出物の製造
コエンドロ乾燥葉2gを粉砕後、メタノール40gで80℃、90分間抽出を行い、濾過後にロータリーエバポレーターにて濃縮・乾固を行いコエンドロのメタノール抽出物を得た。
製造例3 コエンドロの水抽出物の製造
製造例2の方法に準じて、メタノールの代わりに水を使用して、コエンドロの水抽出物を得た。
製造例4 コエンドロの含水エタノール抽出物の製造
製造例2の方法に準じて、メタノールの代わりに、エタノール含量がそれぞれ40%、60%、または80%の含水エタノールを使用して、コエンドロの含水エタノール抽出物(40%、60%、または80%)を得た。
試験例1 本発明コエンドロ抽出物(メタノール)の筋芽細胞賦活活性測定
細胞はマウス筋芽細胞株 (C2C12細胞、DSファーマバイオメディカル社製 )を用いた。C2C12細胞は、10% FBS(Fetal Bovine Serum、Gibco社製)を含有するDMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium、Gibco社製)(以下、「10% FBS/DMEM培地」という。)に分散し、接着系細胞用培養フラスコ(底面積:25cm2、日本バイオサイエンス社製)に5.0 × 10−4個播種し、CO2インキュベーター(三洋電機バイオメディカ社製;CO2濃度5%, 湿度90%)を用いて37℃で3日間培養した。80%コンフルエントになったことを顕微鏡で確認し、実験に使用した。80%コンフルエントになったC2C12細胞をTrypsin−EDTA(Gibco社製)を用いてフラスコから剥離させ回収した。この細胞を10% FBS/DMEM培地に懸濁し、3.0×10−4 cells/mLの細胞密度で100μLずつ96 well plate(Corning社製)に播種した。37℃、5%CO2条件下で24時間培養後、培地をアスピレーターで除去し、2% FBS/DMEM培地で調製したサンプル含有培地200μLに置換した。サンプルは、製造例1で調製したメタノール抽出物を終濃度の1000倍濃度でDMSOを用いて調整し、その後2% FBS/DMEM培地で1000倍希釈し、サンプル濃度が5、10、20ppmの培地をそれぞれ調製し、使用した。また、コントロールにはDMSOを、陽性対照には、筋芽細胞賦活作用が知られているIGF−1(Insulin−like Growth Factor−1、LifeTechnologies社製)を同様のサンプル調製法により0.05ppmで調整し、実験に用いた。サンプル添加の48時間後に100μLの無血清DMEM培地に交換し、そこにWST−1試薬(ロシュ・ダイアグノスティックス社製)を10μL添加した。30分間培養を行った後、450nmの吸光値をマイクロプレートリーダー(CORONA ELECTRIC 社製、MTP−300)で測定することにより細胞賦活活性を求めた。結果を図1に示す。
試験例2 本発明コエンドロ抽出物(含水エタノール、メタノール)の筋芽細胞賦活活性測定
試験例1の方法に準じて、製造例2および4で調整した抽出エキスを10ppmの濃度で添加した。コントロール群には薬剤を添加しなかった。その結果を図2に示す。
図2から明らかなように、コントロール群と比べて40%、60%または80%含水エタノール抽出物群、メタノール抽出物群については、賦活作用が認められた。
試験例3 本発明コエンドロ抽出物(メタノール)の筋管形成促進活性の検討
C2C12細胞を10% FBS/DMEM培地に懸濁し、1.0×10−5cells/mLの密度で6well plate(Corning社製)に1mL/well播種した。播種して24時間後に2%HS (Horse Serum、Gibco社製)を含むDMEM培地(以下、「2% HS/DMEM」という。)に交換した。さらに1回目の培地交換から48時間後に再度2% HS/DMEMに交換した。培地交換の24時間後にさらに2% HS/DMEM培地で調製したサンプル含有培地2mLに置換した。サンプルは、製造例1で調製したメタノール抽出物を終濃度の1000倍濃度でDMSOを用いて調整し、その後2%FBS/DMEMで1000倍希釈し、サンプル濃度が10ppmの培地を作製し、使用した。また、コントロールにはDMSOを、陽性対照には筋管形成促進作用が知られているIGF−1(Insulin−like Growth Factor−1、Life Technologies社製)を同様のサンプル調製法により0.1ppmで調整し実験に用いた。サンプル添加の48時間後にメタノールでの細胞固定およびギムザ染色を行い細胞の染色を行った。染色後、Fusion index((筋管細胞内核数/総核数)×100)を計測することで筋管形成度を測定した。その結果を図3に示す。
Claims (7)
- コエンドロ抽出物を有効成分として含有する筋肉活性化用食品であって、
該コエンドロ抽出物が、体積%濃度で40%以上のエタノールを含む含水エタノール又はエタノールによる抽出物であり、
該コエンドロ抽出物が、コエンドロの地上部の抽出物である、
筋肉活性化用食品。 - 前記コエンドロの地上部の抽出物が、コエンドロの葉の抽出物である、請求項1に記載の筋肉活性化用食品。
- 抽出に使用するコエンドロ:溶媒の重量比が1:2〜1:30である、請求項1又は2に記載の筋肉活性化用食品。
- 筋肉活性化が筋肉増強である、請求項1〜3のいずれかに記載の筋肉活性化用食品。
- 筋肉活性化が皮膚改善である、請求項1〜3のいずれかに記載の筋肉活性化用食品。
- コエンドロ抽出物を有効成分として含有する筋芽細胞賦活用食品であって、
該コエンドロ抽出物が、体積%濃度で40%以上のエタノールを含む含水エタノール又はエタノールによる抽出物であり、
該コエンドロ抽出物が、コエンドロの地上部の抽出物である、
筋芽細胞賦活用食品。 - 前記コエンドロの地上部の抽出物が、コエンドロの葉の抽出物である、請求項6に記載の筋芽細胞賦活用食品。
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