CN114814040B - 一种茶叶中溴甲烷残留量的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种茶叶中溴甲烷残留量的检测方法，所述的检测方法为顶空气相色谱法。方法包括如下步骤：（1）制备标准储备液和标准工作液；（2）制备待测样品；（3）顶空气相色谱分析条件；（4）建立标准工作曲线；（5）结果分析。本方法建立了茶叶中溴甲烷残留量的顶空气相色谱法。本发明弥补了茶叶中溴甲烷残留量检测方法的检测空白，该方法简便快速,重现性好,适用于茶叶中溴甲烷残留量的日常检测。

Description

一种茶叶中溴甲烷残留量的检测方法

技术领域

本发明涉及一种茶叶中溴甲烷残留量的测定顶空气相色谱法。

背景技术

溴甲烷是一种无色无味的气体，具有强烈的熏蒸作用，能高效、广谱地杀灭各种有害生物，主要用于需贮存的货物和易腐物品的熏蒸。在茶叶制作中，我国最新版的食品中农药残留最大限量（GB 2763-2021）中规定了茶叶中溴甲烷的最大残留限量（限量值为0.02mg/kg），但如何准确检测出茶叶中溴甲烷的残留量，目前尚无未找到茶叶中溴甲烷的残留量的检测方法，难于快速及时、准确地监测评估茶叶中溴甲烷的残留量，如何准确检测出茶叶中溴甲烷的残留量是个急需解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种茶叶中溴甲烷残留量的顶空气相色谱检测方法，用于弥补和解决目前尚无茶叶中溴甲烷检测方法的不足，使得该方法能够针对茶叶中溴甲烷残留量进行准确分析；为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

该方法是一种能够实现茶叶中溴甲烷残留量的检测方法，其主要特点是，本发明是一种茶叶中溴甲烷残留量的检测方法，其包括如下步骤：

（1）制备标准储备液和标准工作液，所述标准储备液为100 mg/L的标准储备液，标准工作液为将溴甲烷的标准储备液采用逐级稀释法用丙酮配制浓度为0.010 mg/L、0.020mg/L、0.050 mg/L、0.100 mg/L、0.200 mg/L、0.500 mg/L、1.00 mg/L的系列标准工作溶液；（2）制备待测样品：将密封状态下的待测样品置于-20 ℃下冷冻保存至少2小时，在低温环境下迅速称取茶叶样品于20 mL顶空瓶中，立即压盖封口；（3）所用仪器为顶空气相色谱仪，顶空炉温：50 ℃，顶空定量环温度：60 ℃，传输线温度：70 ℃，填充压力：15psi，顶空瓶平衡时间：10 min，定量环充满时间：0.5 min，GC循环时间：20 min。气相色谱检测器为电子俘获检测器（ECD），色谱柱为DB-1（30 m×530 μm×5 μm），流速：3 mL/min，进样口温度：200℃，不分流进样，升温程序：35 ℃保持5.5 min，以35 ℃/min升温到220 ℃，保持2 min；

（4）标准曲线的绘制：将溴甲烷的系列标准工作溶液各加入100 μL于含有茶叶样品的顶空瓶中，供顶空气相色谱仪测定，在步骤（3）的色谱条件下进行检测，以保留时间定性，根据各浓度所测峰面积的大小与其浓度的对应关系绘制标准曲线；

（5）结果分析：取（2）中样品于顶空气相色谱仪中，在步骤（3）的色谱条件下进行检测，测得样品中溴甲烷的峰面积，以保留时间定性，根据（4）中制作的标准曲线定量，计算出待测样品中溴甲烷的残留量。

与现有技术相比较，本发明具有以下突出优点：

1.本发明填补了茶叶中溴甲烷残留量检测领域空白，现有技术主要针对粮谷中溴甲烷的测定，茶叶与粮谷基质完全不同，急需建立新的技术来满足茶叶中溴甲烷的检测需求。

2.本发明选择DB-1厚液膜气相色谱柱，规格为30 m×530 μm×5 μm，而常规测定农残的气相色谱柱，一般采用液膜较薄的色谱柱，规格为30 m×250 μm×0.25 μm等，对于溴甲烷这种易挥发的物质，液膜较厚的色谱柱可以得到更高的保留，且与杂质能够完全分离，同时获得最佳峰型和灵敏度。

3.本发明所使用的分析仪器为顶空气相色谱仪配备有电子俘获检测器（ECD），相对于气质联用仪等造价高昂的仪器，更加易于方法普及和推广应用。

本发明建立了顶空气相色谱法测定茶叶中溴甲烷残留量。该方法简单快速，重现性好，适用于茶叶中溴甲烷的定量检测，可为茶叶生产企业、监督部门及进出口检测部门提供技术支持。

附图说明

图1为本发明的茶叶中溴甲烷的标准溶液气相色谱分离图。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。但本发明的保护范围不限于以下的实施例。

实施例

实施案例在以本发明上述技术为前提下进行实施，现给出详细实施方式和具体的操作过程;

1 试剂和材料

1.1丙酮：分析纯。

1.2标准品：溴甲烷CAS：74-83-9，由BePure 福建化玻科教仪器有限公司提供。

1.3溶液配制：准确移取100 mg/L的标准储备液0.10 mL于10 mL容量瓶中，丙酮定容至刻度线，混匀，得溴甲烷标准使用液浓度为1.0 mg/L；标准工作液采用逐级稀释法用丙酮稀释浓度为0.010 mg/L、0.020 mg/L、0.050 mg/L、0.100 mg/L、0.200 mg/L、0.500 mg/L、1.00 mg/L的系列标准工作溶液。所有标准储备液和标准工作溶液置于冰箱中于-20 ℃温度下保存。

2 仪器和设备

2.1顶空气相色谱仪：配电子俘获检测器（ECD）。

2.2分析天平（精度0.1mg）。

3 方法

3.1顶空进样器检测条件

顶空炉温：50 ℃，顶空定量环温度：60 ℃，传输线温度：70 ℃，填充压力：15psi，顶空瓶平衡时间：10 min，定量环充满时间：0.5 min，GC循环时间：20 min。

3.2气相色谱检测条件

a).色谱柱：DB-1（30 m×530 μm×5 μm）；

b).流速：3 mL/min；

c).进样口温度：200℃；

d).不分流进样；

e).升温程序：35 ℃保持5.5 min，以35 ℃/min升温到220 ℃，保持2 min。

3.3标准曲线绘制

将溴甲烷的系列标准工作溶液（1.3）各加入100 μL于含有茶叶样品的顶空瓶中，按照3.1-3.2的色谱条件进行测定。以分析物的峰面积（Y）对应的质量浓度（X，μg）进行线性回归绘制标准曲线，得到线性方程。

4 样品测试步骤

4.1样品前处理

将密封状态下的待测样品置于-20 ℃下冷冻保存至少2小时，在低温环境下迅速称取1.0 g茶叶样品于20 mL顶空瓶中，立即压盖封口，供分析用。

4.2样品测试

在相同色谱条件下，将制备的样品进行色谱测定，以保留时间定性，以外标法定量。

5 分析结果的表述

试样中溴甲烷的含量按下式（1）计算：

（1）

式中：X——样品中溴甲烷含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

——试样的浓度，单位为微克（μg）；

m——试样质量，单位为克（g）。

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。

6 方法学考察，其包括线性、检出限、定量限、回收率、精密度。

6.1 线性、检出限、定量限：制备溴甲烷含量为0.001 μg/g到0.100 μg/g之间的系列标准工作样，以峰面积对浓度进行线性回归，线性方程、相关系数见表1。结果表明，溴甲烷在0.001 μg/g ~ 0.100 μg/g内具有很好的线性关系，相关系数r为0.9997，方法完全能满足茶叶中溴甲烷残留量的检测要求。

表1溴甲烷的回归方程、相关系数、线性范围

组分	线性方程/Y=ax+b	相关系数/r	线性范围/(μg/g）
				溴甲烷	y = 40613x - 30758	0.9997	0.001-0.100

Y：峰面积；x：质量浓度，μg/g.

6.2回收率和精密度：在优化后的检测条件下，取空白基质茶叶样品进行加标回收率测试，加标水平分别为0.005 μg/g、0.015 μg/g、0.050 μg/g，每个水平重复分析6次，结果见表2。从表2中可知，该方法的加标回收率范围为89.4%~102.1%，相对标准偏差RSD范围为1.90%~3.85%，结果表明，该方法适用于茶叶中溴甲烷残留量的日常分析检测。

表2 茶叶样品加标回收率实验结果(n=6)

6.3稳定性：取标准曲线范围内0.050 mg/L、0.150 mg/L和0.500 mg/L三个质量浓度的溴甲烷标准溶液，于-20 ℃冷冻下放置2 h、4 h、6 h、8 h、16 h和2~6 天，考察溴甲烷标准溶液日内和日间稳定性。实验结果表明，低、中、高三个质量浓度的溴甲烷标准溶液日内稳定性的精密度分别为1.2%~1.9%、1.2%~1.5%和0.1%~1.1%，日间稳定性的精密度分别为0.5%~2.3%、0.2%~1.9%和0.9%~1.8%。由此可见，溴甲烷日内和日间稳定性均较好，有利于实验的进行。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (2)

1.一种茶叶中溴甲烷残留量的检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括：

（1）制备标准储备液和标准工作液，所述标准储备液为100 mg/L的标准储备液，标准工作液为将溴甲烷的标准储备液采用逐级稀释法用丙酮配制浓度为0.010 mg/L、0.020 mg/L、0.050 mg/L、0.100 mg/L、0.200 mg/L、0.500 mg/L、1.00 mg/L的系列标准工作溶液；

（2）制备待测样品：将密封状态下的待测样品置于-20 ℃下冷冻保存至少2小时，在低温环境下迅速称取茶叶样品于20 mL顶空瓶中，立即压盖封口；

（3）所用仪器为顶空气相色谱仪，顶空炉温：50 ℃，顶空定量环温度：60 ℃，传输线温度：70 ℃，填充压力：15psi，顶空瓶平衡时间：10 min，定量环充满时间：0.5 min，GC循环时间：20 min；

气相色谱检测器为电子俘获检测器（ECD），色谱柱为DB-1，规格为：30 m×530 μm×5 μm，流速：3 mL/min，进样口温度：200℃，不分流进样，升温程序：35 ℃保持5.5 min，以35℃/min升温到220 ℃，保持2 min；

（4）标准曲线的绘制:将溴甲烷的系列标准工作溶液各加入100 μL于含有茶叶样品的顶空瓶中，供顶空气相色谱仪测定，在步骤（3）的色谱条件下进行检测，以保留时间定性，根据各浓度所测峰面积的大小与其浓度的对应关系绘制标准曲线；

（5）结果分析：取（2）中样品于顶空气相色谱仪中，在步骤（3）的色谱条件下进行检测，测得样品中溴甲烷的峰面积，以保留时间定性，根据（4）中制作的标准曲线定量，计算出待测样品中溴甲烷的残留量。

2.根据权利要求1所述茶叶中溴甲烷残留量的检测方法，其特征在于，（4）中所述标准曲线相关系数不小于0.999。