CN114751825A - 一种从金银花中高效提取绿原酸的方法 - Google Patents
一种从金银花中高效提取绿原酸的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114751825A CN114751825A CN202210569251.6A CN202210569251A CN114751825A CN 114751825 A CN114751825 A CN 114751825A CN 202210569251 A CN202210569251 A CN 202210569251A CN 114751825 A CN114751825 A CN 114751825A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- honeysuckle
- chlorogenic acid
- enzymolysis
- hemicellulase
- extraction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 title claims abstract description 90
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 90
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 title claims abstract description 90
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 90
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 title claims abstract description 90
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 90
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 title claims abstract description 90
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 title claims abstract description 90
- 241000205585 Aquilegia canadensis Species 0.000 title claims abstract description 86
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 40
- 108010029182 Pectin lyase Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 27
- 229940059442 hemicellulase Drugs 0.000 claims abstract description 27
- 108010002430 hemicellulase Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical group CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 11
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 9
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 9
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 9
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims 1
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 claims 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 abstract 1
- 241000628997 Flos Species 0.000 description 31
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 29
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 16
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 15
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 10
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 7
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 7
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- -1 polyphenol compound Chemical class 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N trans-caffeic acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-DUXPYHPUSA-N 0.000 description 2
- AAWZDTNXLSGCEK-LNVDRNJUSA-N (3r,5r)-1,3,4,5-tetrahydroxycyclohexane-1-carboxylic acid Chemical compound O[C@@H]1CC(O)(C(O)=O)C[C@@H](O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-LNVDRNJUSA-N 0.000 description 1
- ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N (E)-3,4,5-trihydroxycinnamic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ACEAELOMUCBPJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AAWZDTNXLSGCEK-UHFFFAOYSA-N Cordycepinsaeure Natural products OC1CC(O)(C(O)=O)CC(O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AAWZDTNXLSGCEK-ZHQZDSKASA-N Quinic acid Natural products O[C@H]1CC(O)(C(O)=O)C[C@H](O)C1O AAWZDTNXLSGCEK-ZHQZDSKASA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000004103 aerobic respiration Effects 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 235000004883 caffeic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940074360 caffeic acid Drugs 0.000 description 1
- QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N cis-caffeic acid Natural products OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 QAIPRVGONGVQAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- YTJJRAWFHJBAMT-UHFFFAOYSA-N depside Natural products OC(=O)CC1=C(O)C=C(O)C=C1OC(=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 YTJJRAWFHJBAMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000002398 materia medica Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229930015704 phenylpropanoid Natural products 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- JXOHGGNKMLTUBP-HSUXUTPPSA-N shikimic acid Chemical compound O[C@@H]1CC(C(O)=O)=C[C@@H](O)[C@H]1O JXOHGGNKMLTUBP-HSUXUTPPSA-N 0.000 description 1
- JXOHGGNKMLTUBP-JKUQZMGJSA-N shikimic acid Natural products O[C@@H]1CC(C(O)=O)=C[C@H](O)[C@@H]1O JXOHGGNKMLTUBP-JKUQZMGJSA-N 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
- C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
- C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C67/56—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
- C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C67/58—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by liquid-liquid treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
- C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C67/60—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by treatment giving rise to chemical modification
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明涉及绿原酸提取技术领域，提出了一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，包括S1、将金银花粉加水后调节pH至酸性，得到金银花预处理液；S2、向所述金银花预处理液中加入果胶裂解酶、半纤维素酶，搅拌均匀后，进行酶解；S3、酶解完成后添加提取剂，进行超声波提取，离心、纯化、浓缩得到绿原酸浸膏。通过上述技术方案，解决了现有技术中的金银花中绿原酸提取率低、不稳定、杂质多的问题。
Description
技术领域
本发明涉及绿原酸提取技术领域，具体的，涉及一种从金银花中高效提取绿原酸的方法。
背景技术
金银花，又名忍冬。“金银花”一名出自《本草纲目》，由于忍冬花初开为白色，后转为黄色，因此得名金银花。金银花的主要功效成分为绿原酸，绿原酸是一种多酚类化合物，是由咖啡酸与奎尼酸形成的缩酚酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物，具有抗菌、抗病毒、抗氧化、清除自由基等作用。现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、医药和日用化工等多个领域。研究从植物中快速高效低成本高提取率的提取方法，对医药化工食品等行业发展意义重大。
关于金银花中绿原酸的提取，现有技术中最常用的是乙醇多次提取后然后再经过各种除杂技术提纯绿原酸，由于提取时间长，有效成分易被破坏，而且多次提取易产生杂质，绿原酸提取率和纯度不高，资源得不到充分利用，不易实现工业生产规模。除采用有机溶剂提取外，刘佳佳在《金银花绿原酸酶法提取新工艺研究》一文中采用酶解法对金银花中的绿原酸进行了提取，所得提取物中绿原酸含量为20.04％，绿原酸得率为8.10％，所得到的绿原酸含量及绿原酸得率也较低。
发明内容
本发明提出一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，解决了相关技术中的金银花中绿原酸提取率低、不稳定、杂质多的问题。
本发明的技术方案如下：
本发明提供一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，包括以下步骤：
S1、将金银花粉加水后调节pH至酸性，得到金银花预处理液；
S2、向所述金银花预处理液中加入果胶裂解酶、半纤维素酶，搅拌均匀后，进行酶解；
S3、酶解完成后添加提取剂，进行超声波提取，离心、纯化、浓缩得到绿原酸提取物。
作为本发明的进一步技术改进，步骤S1中所述金银花粉为金银花通过烘干和粉碎得到，加入水的质量为金银花粉的10-15倍，调节pH为4.0-5.0。
作为本发明的进一步技术改进，所述烘干温度为40-50℃，粉碎后过60目筛。
作为本发明的进一步技术改进，步骤S2中所述果胶裂解酶添加量为所述金银花预处理液的0.3wt％-0.6wt％、半纤维素酶添加量为所述金银花预处理液的0.5wt％-1.5wt％。
作为本发明的进一步技术改进，步骤S2中所述果胶裂解酶：半纤维素酶的添加质量比为1:5-1:1。
作为本发明的进一步技术改进，步骤S2中所述酶解温度为50-60℃，酶解时间为1-1.5h；灭酶温度为80-85℃，灭酶时间为15-20min；酶解过程中每30min搅拌一次。
作为本发明的进一步技术改进，步骤S3中所述提取剂为乙醇。
作为本发明的进一步技术改进，步骤S3中所述离心转速为4300-4600r/min，离心时间为15-20min，取上清液。
作为本发明的进一步技术改进，步骤S3中所述超声提取功率为100-300w，提取时间为3-5min。
作为本发明的进一步技术改进，步骤S3中所述纯化条件为，调节上清液pH6，通过大孔吸附树脂，采用体积分数40％的乙醇水溶液洗脱，进行分步收集；浓缩温度为50℃。
本发明的工作原理及有益效果为：
1、本发明中将复合酶解法结合超声提取的方法提取金银花中的绿原酸，绿原酸的提取率可达72.55％～74.20％，绿原酸浸膏中绿原酸的含量可达89.45％～92.11％，绿原酸的提取率和绿原酸浸膏中绿原酸的含量都有所提高。
2、本发明在酶解过程中，采用果胶裂解酶和半纤维素酶复配的方式对金银花预处理液进行酶解，通过果胶裂解酶和半纤维素酶的复配协同作用，可促进植物细胞壁的溶解，使更多的植物细胞内容物溶解出来，效果要远高于单一酶解，提高了绿原酸的提取效率及其含量。并且，发明人发现当果胶裂解酶和半纤维素酶的质量比为1:2时，效果最好。
3、在酶解后进一步采用超声波提取法，一方面可有效地破碎金银花的细胞壁，使有效成分呈游离状态并溶入提取溶媒中，另一方面可加速提取溶媒的分子运动，使得提取溶媒和药材中的有效成分快速接触，相互溶合、混合，使金银花提取物中，绿原酸的提取率增大、绿原酸的含量增大，提取物中杂质含量减少。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都涉及本发明保护的范围。
实施例1
将金银花放置在50℃烘箱中进行干燥，然后将干燥的金银花进行粉碎、过筛60目，制得金银花粉，向金银花粉中加入水(水与金银花粉的质量比为15：1)，调节pH为5.0，制得金银花预处理液。向金银花预处理液中添加果胶裂解酶和半纤维素酶，果胶裂解酶添加量为金银花预处理液的0.5wt％、半纤维素酶添加量为金银花预处理液的1wt％，水浴50℃酶解1.5h，每30min搅拌一次，酶解完成后，升温至80℃，恒温15min，制得金银花粗提液。向金银花粗提液中加入95％乙醇，(金银花粗提液与95％乙醇的质量比为1：1)，超声提取功率为300w，提取5min，提取后，于4600r/min离心15min，取上清液，调节pH6，通过大孔吸附树脂，采用体积分数40％的乙醇水溶液洗脱，进行分步收集，并进行浓缩，浓缩温度为50℃，得到绿原酸浸膏，HPLC检测绿原酸的含量为92.11％，参见2020年版《中华人民共和国药典》。
实施例2
将金银花放置在40℃烘箱中进行干燥，然后将干燥的金银花进行粉碎、过筛60目，制得金银花粉，向金银花粉中加入水(水与金银花粉的质量比为10：1)，调节pH为4.0，制得金银花预处理液。向金银花预处理液中添加果胶裂解酶和半纤维素酶，果胶裂解酶添加量为金银花预处理液的0.3wt％、半纤维素酶添加量为金银花预处理液的1.5wt％，水浴60℃酶解1h，每30min搅拌一次，酶解完成后，升温至85℃，恒温20min，制得金银花粗提液。向金银花粗提液中加入95％乙醇(金银花粗提液与95％乙醇的质量比为1：1)，超声提取功率为100w，提取3min，提取后，于4300r/min离心15min，取上清液，调节pH6，通过大孔吸附树脂，采用体积分数40％的乙醇水溶液洗脱，进行分步收集，并进行浓缩，浓缩温度为50℃，得到绿原酸浸膏，HPLC检测绿原酸的含量为89.95％，参见2020年版《中华人民共和国药典》。
实施例3
将金银花放置在50℃烘箱中进行干燥，然后将干燥的金银花进行粉碎、过筛60目，制得金银花粉，向金银花粉中加入水(水与金银花粉的质量比为15：1)，调节pH为4.5，制得金银花预处理液。向金银花预处理液中添加果胶裂解酶和半纤维素酶，果胶裂解酶添加量为金银花预处理液的0.5wt％、半纤维素酶添加量为金银花预处理液的0.5wt％，水浴55℃酶解1.2h，每30min搅拌一次，酶解完成后，升温至83℃，恒温17min，制得金银花粗提液。向金银花粗提液中加入95％乙醇(金银花粗提液与95％乙醇的质量比为1：1)，超声提取功率为200w，提取4min，提取后，于4500r/min离心17min，取上清液，调节pH6，通过大孔吸附树脂，采用体积分数40％的乙醇水溶液洗脱，进行分步收集，并进行浓缩，浓缩温度为50℃，得到绿原酸浸膏，HPLC检测绿原酸的含量为89.45％，参见2020年版《中华人民共和国药典》。
实施例4
将金银花放置在45℃烘箱中进行干燥，然后将干燥的金银花进行粉碎、过筛60目，制得金银花粉，向金银花粉中加入水(水与金银花粉的质量比为15：1)，调节pH为5.0，制得金银花预处理液。向金银花预处理液中添加果胶裂解酶和半纤维素酶，果胶裂解酶添加量为金银花预处理液的0.5wt％、半纤维素酶添加量为金银花预处理液的0.5wt％，水浴50℃酶解1.5h，每30min搅拌一次，酶解完成后，升温至80℃，恒温15min，制得金银花粗提液。向金银花粗提液中加入95％乙醇(金银花粗提液与95％乙醇的质量比为1：1)，超声提取功率为300w，提取5min，提取后，于4600r/min离心15min，取上清液，调节pH6，通过大孔吸附树脂，采用体积分数40％的乙醇水溶液洗脱，进行分步收集，并进行浓缩，浓缩温度为50℃，得到绿原酸浸膏，HPLC检测绿原酸的含量为91.20％，参见2020年版《中华人民共和国药典》。
实施例5
将金银花放置在45℃烘箱中进行干燥，然后将干燥的金银花进行粉碎、过筛60目，制得金银花粉，向金银花粉中加入水(水与金银花粉的质量比为15：1)，调节pH为5.0，制得金银花预处理液。向金银花预处理液中添加果胶裂解酶和半纤维素酶，果胶裂解酶添加量为金银花预处理液的0.5wt％、半纤维素酶添加量为金银花预处理液的0.5wt％，水浴50℃酶解1.5h，每30min搅拌一次，酶解完成后，升温至80℃，恒温15min，制得金银花粗提液。向金银花粗提液中加入95％乙醇(金银花粗提液与95％乙醇的质量比为1：1)，超声提取功率为300w，提取5min，提取后，于4600r/min离心15min，取上清液，调节pH6，通过大孔吸附树脂，采用体积分数40％的乙醇和体积分数50％的丙三醇水溶液洗脱(体积分数40％乙醇与体积分数50％丙三醇的体积比为1:2)，进行分步收集，并进行浓缩，浓缩温度为50℃，得到绿原酸浸膏，HPLC检测绿原酸的含量为91.50％，参见2020年版《中华人民共和国药典》。
对比例1
将金银花放置在45℃烘箱中进行干燥，然后将干燥的金银花进行粉碎、过筛60目，制得金银花粉，向金银花粉中加入水(水与金银花粉的质量比为15：1)，调节pH为5.0，制得金银花预处理液。向金银花预处理液中加入95％乙醇(金银花粗提液与95％乙醇的质量比为1：1)，超声提取功率为300w，提取5min，提取后，于4600r/min离心15min，取上清液，调节pH6，通过大孔吸附树脂，采用体积分数40％的乙醇水溶液洗脱，进行分步收集，并进行浓缩，浓缩温度为50℃，得到绿原酸浸膏，HPLC检测绿原酸的含量为75.60％，参见2020年版《中华人民共和国药典》。
对比例2
本对比例与实施例1的区别在于果胶裂解酶用等量的半纤维素酶代替，得到绿原酸浸膏，HPLC检测绿原酸的含量为85.65％，参见2020年版《中华人民共和国药典》。
对比例3
本对比例与实施例1的区别在于半纤维素酶用等量的果胶裂解酶代替，得到绿原酸浸膏，HPLC检测绿原酸的含量为84.90％，参见2020年版《中华人民共和国药典》
实施例1-4及对比例1-3的制备方法中所用金银花及得到的绿原酸浸膏进行称重，按照如下公式计算提取率：
提取率(％)＝(绿原酸浸膏质量/金银花质量)×100
表1实施例和对比例金银花中绿原酸的提取率和绿原酸浸膏中绿原酸含量
| 组别 | 提取率(％) | 绿原酸含量(％) |
| 实施例1 | 74.20 | 92.11 |
| 实施例2 | 73.50 | 89.95 |
| 实施例3 | 72.55 | 89.45 |
| 实施例4 | 72.65 | 91.20 |
| 实施例5 | 73.15 | 91.50 |
| 对比例1 | 70.55 | 75.60 |
| 对比例2 | 71.66 | 85.65 |
| 对比例3 | 71.45 | 84.90 |
本发明的实施例与对比例相比，绿原酸的提取率可达72.55％～74.20％，绿原酸浸膏中原酸含量可达89.45％～92.11％，绿原酸的提取率和绿原酸浸膏中绿原酸的含量都有所提高，其中实施例1是提取工艺的最佳实施例。
发明人意外的发现，当采用的果胶裂解酶与半纤维素酶的质量比为1:2时，绿原酸的提取率和绿原酸浸膏中绿原酸的含量最高。与对比例1相比，对比例1中未进行酶解，绿原酸提取率和绿原酸浸膏中绿原酸的含量都具有显著的下降，说明本发明中采用果胶裂解酶和半纤维素酶通过破坏细胞壁使更多的植物细胞内容物溶解出来，提高了绿原酸的提取率和绿原酸浸膏中绿原酸的含量。对比例2果胶裂解酶用等量的半纤维素酶代替，对比例3半纤维素酶用等量的果胶裂解酶代替，绿原酸提取率和绿原酸浸膏中绿原酸的含量均都有所下降，说明只采用果胶裂解酶或只采用半纤维素酶都不能将金银花得植物细胞壁进行充分的破坏，限制了植物细胞内绿原酸的溶出，导致绿原酸提取率和绿原酸浸膏中绿原酸的含量都有所下降。实施例5在实施例4的基础上，采用了丙三醇和乙醇复配对大孔吸附树脂进行洗脱，并限定了丙三醇和乙醇的体积比，促进了绿原酸的解吸，提高了绿原酸的提取效率和绿原酸浸膏中绿原酸的含量。
以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将金银花粉加水后调节pH至酸性，得到金银花预处理液；
S2、向所述金银花预处理液中加入果胶裂解酶、半纤维素酶，搅拌均匀后，进行酶解；
S3、酶解完成后添加提取剂，进行超声提取，离心、纯化、浓缩得到绿原酸浸膏。
2.根据权利要求1所述的一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，所述步骤S1中，金银花粉为金银花通过烘干、粉碎得到，加入水的质量为金银花粉的10-15倍，调节pH为4.0-5.0。
3.根据权利要求2中所述的一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，所述烘干温度为40-50℃，粉碎后过60目筛。
4.根据权利要求1所述的一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，所述步骤S2中，果胶裂解酶添加量为所述金银花预处理液的0.3wt％-0.6wt％、半纤维素酶添加量为所述金银花预处理液的0.5wt％-1.5wt％。
5.根据权利要求1所述的一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，所述步骤S2中，果胶裂解酶：半纤维素酶的添加质量比为1:5-1:1。
6.根据权利要求1所述的一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，所述步骤S2的酶解温度为50-60℃，酶解时间为1-1.5h；灭酶温度为80-85℃，灭酶时间为15-20min；酶解过程中每30min搅拌一次。
7.根据权利要求1所述的一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，所述步骤S3中，提取剂为乙醇。
8.根据权利要求1所述的一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，所述步骤S3中，离心转速为4300-4600r/min，离心时间为15-20min，取上清液。
9.根据权利要求1所述的一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，所述步骤S3中，超声提取功率为100-300w，提取时间为3-5min。
10.根据权利要求1所述的一种从金银花中高效提取绿原酸的方法，其特征在于，所述步骤S3中纯化条件为，调节上清液pH6，通过大孔吸附树脂，采用体积分数40％的乙醇水溶液洗脱，进行分步收集；浓缩温度为50℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210569251.6A CN114751825A (zh) | 2022-05-24 | 2022-05-24 | 一种从金银花中高效提取绿原酸的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210569251.6A CN114751825A (zh) | 2022-05-24 | 2022-05-24 | 一种从金银花中高效提取绿原酸的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114751825A true CN114751825A (zh) | 2022-07-15 |
Family
ID=82334170
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210569251.6A Pending CN114751825A (zh) | 2022-05-24 | 2022-05-24 | 一种从金银花中高效提取绿原酸的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114751825A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115957248A (zh) * | 2022-12-30 | 2023-04-14 | 佐今明制药股份有限公司 | 一种金银花提取物及其提取工艺和应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101830804A (zh) * | 2010-03-16 | 2010-09-15 | 天津中新药业集团股份有限公司中新制药厂 | 一种采用复合酶法提取金银花中绿原酸的方法 |
| CN102911055A (zh) * | 2012-11-13 | 2013-02-06 | 西南大学 | 提取绿原酸的方法 |
| CN103086889A (zh) * | 2013-02-22 | 2013-05-08 | 王星敏 | 一种酶催化活化金银花叶提取绿原酸的方法 |
| WO2015032212A1 (zh) * | 2013-09-04 | 2015-03-12 | 四川圣湖生物科技有限公司 | 从绿咖啡豆提取绿原酸的方法 |
| CN104447332A (zh) * | 2014-11-20 | 2015-03-25 | 威海诺达药业集团有限公司 | 一种从金银花中提取绿原酸的方法 |
-
2022
- 2022-05-24 CN CN202210569251.6A patent/CN114751825A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101830804A (zh) * | 2010-03-16 | 2010-09-15 | 天津中新药业集团股份有限公司中新制药厂 | 一种采用复合酶法提取金银花中绿原酸的方法 |
| CN102911055A (zh) * | 2012-11-13 | 2013-02-06 | 西南大学 | 提取绿原酸的方法 |
| CN103086889A (zh) * | 2013-02-22 | 2013-05-08 | 王星敏 | 一种酶催化活化金银花叶提取绿原酸的方法 |
| WO2015032212A1 (zh) * | 2013-09-04 | 2015-03-12 | 四川圣湖生物科技有限公司 | 从绿咖啡豆提取绿原酸的方法 |
| CN104447332A (zh) * | 2014-11-20 | 2015-03-25 | 威海诺达药业集团有限公司 | 一种从金银花中提取绿原酸的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 黄锁义 著: "《天然产物的提取分离技术及其发展研究》", vol. 2020, 吉林大学出版社, pages: 50 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115957248A (zh) * | 2022-12-30 | 2023-04-14 | 佐今明制药股份有限公司 | 一种金银花提取物及其提取工艺和应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101486651A (zh) | 一种杜仲叶中提取绿原酸的方法及其应用 | |
| CN114751825A (zh) | 一种从金银花中高效提取绿原酸的方法 | |
| CN104311676A (zh) | 一种从橡籽仁中提取食用淀粉并副产单宁酸的方法 | |
| CN105777522B (zh) | 一种从贯叶连翘中提取金丝桃素的方法 | |
| CN102397300A (zh) | 一种褐藻多酚的提取方法 | |
| CN107674104A (zh) | 一种蛹虫草中虫草素的提取方法 | |
| CN103864954A (zh) | 一种花生粕多糖的提取方法 | |
| CN107630051B (zh) | 一种利用两相体系酶解与萃取偶联制备还原型萝卜硫素提取物的方法 | |
| CN105707856B (zh) | 具有抑制黄嘌呤氧化酶的李果提取物微胶囊及其制备方法 | |
| CN112321577B (zh) | 一种从芒果叶中提取高纯芒果苷的方法 | |
| CN107188772B (zh) | 一种脲类衍生物双水相体系及其应用 | |
| CN102108350A (zh) | 一种菠萝蛋白酶的制备方法 | |
| CN112704074B (zh) | 一种天然植物内源成分的提取方法 | |
| CN113336734A (zh) | 一种从黑果腺肋花楸果中提取原花青素的方法 | |
| CN102603450A (zh) | 一种西瓜皮中氨基酸和果胶的连续提取方法 | |
| CN111533658A (zh) | 从金银花中提取高纯度绿原酸的方法 | |
| CN110845315B (zh) | 一种高效提取丹皮酚的方法 | |
| CN111517946A (zh) | 从金银花中提取高纯度咖啡酸的方法 | |
| CN111676264A (zh) | 一种从迷迭香中提取咖啡酸的方法 | |
| CN1237980C (zh) | 一种由海藻提取的抗病毒保健品及其制备方法 | |
| CN118146403B (zh) | 一种利用生物质菌草制备半纤维素的方法 | |
| CN111494462B (zh) | 一种从牛油果中提取多酚的方法 | |
| CN107473958A (zh) | 一种从藤黄果中提取羟基柠檬酸的方法 | |
| CN113796536B (zh) | 一种富集花生衣中酚类化合物的方法、该方法制备的花生衣提取物及应用 | |
| CN101781211A (zh) | 一种葵花粕中绿原酸提取方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220715 |