CN111494462B - 一种从牛油果中提取多酚的方法 - Google Patents

一种从牛油果中提取多酚的方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于天然植物提取技术领域，具体涉及一种从牛油果中提取多酚的方法。本发明一种从牛油果中提取多酚的方法，包括以下步骤：S1)牛油果果粉的制备；S2)牛油果果粉的提取；S3)多酚的纯化。本发明采用提取溶剂协同超声波辅助提取的方式从牛油果果皮和牛油果果核中提取，并采用大孔树脂纯化，得到多酚，方法简单，可工业应用。

Description

一种从牛油果中提取多酚的方法
技术领域
本发明属于天然植物提取技术领域，具体涉及一种从牛油果中提取多酚的方法。
背景技术
植物多酚又称植物单宁，是植物界分布最广泛的次级代谢产物，主要分布在植物的根、叶、皮、果实中，含量仅次于纤维素和木质素。植物多酚具有一个或多个羟基的芳香环，结构上可以从简单的酚类分子到复杂的高分子量聚合物。植物多酚可以与糖类、蛋白质、核酸、酶等结合，具有抗氧化、抗病毒等作用。
牛油果属于木本油料树种之一，含多种维生素、丰富的脂肪酸和蛋白质和高含量的钠、钾、镁、钙等元素等。研究表明：牛油果皮和果核含有丰富的多酚化合物，抗氧化的同时还能对抗细胞炎症。但目前的研究更多的是在于牛油果果肉所含的活性物质，对于牛油果果皮和果核中的活性研究较少。而中国专利CN107927786A公开了一种从牛油果中提取多酚的方法，通过橡木提取液处理牛油果皮，促进后熟果皮中多酚合成量，增加香味物质含量，然后利用植物乳杆菌和酵母菌协同发酵牛油果皮，添加番茄汁促进菌生长，同时降低苦味物质的产生，减少油脂氧化，最后利用菠萝汁进行多酚提取，不仅能降解木质素和纤维素，同时使提取液澄清，降低苦味物质，使多酚带有菠萝香味。虽然该方法能够提高多酚提取率和香味，但是提取时间长，且总体提取率仍旧比较低。
发明内容
本发明旨在提供一种从牛油果中提取多酚的方法，本发明采用提取溶剂协同超声波辅助提取的方式从牛油果果皮和牛油果果核中提取，并采用大孔树脂纯化，得到提取率为7.83～8.37％的多酚，方法简单，可工业应用。
为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种从牛油果中提取多酚的方法，包括以下步骤：
S1)牛油果果粉的制备：取牛油果的果皮和果核，清洗干净，置于50～60℃烘箱中干燥，粉碎，过筛，得到牛油果果粉；
S2)牛油果果粉的提取：取步骤S1的牛油果果粉与提取溶剂混合后，采用超声辅助提取，冷却，离心，收集滤液；
S3)多酚的纯化：取预处理后的大孔树脂，加入步骤S2中的滤液，采用65～75wt％乙醇溶液洗脱，静态吸附5～6h，收集洗脱液，浓缩除醇，真空冷冻干燥，即得。
在本发明中，通过提取溶剂协同超声辅助的方式对牛油果果粉进行提取，从实验一可以看出，当提取溶剂为乙醇时，提取到的多酚含量不高，有可能是因为牛油果果粉，特别是牛油果果核的结构紧密而限制了多酚的溶出，而在提取溶剂中加入柠檬酸单甘酯后，多酚的含量得到了提高，而上述效果可能是柠檬酸单甘酯能够有利于乙醇通过提取溶剂进入细胞，促使多酚溶出。同时，意外地发现，如果在柠檬酸单甘酯的基础上，加入尿苷二磷酸葡萄糖后能够获得更高含量的多酚。
进一步地，所述牛油果果粉与提取溶剂的料液比为1：(15～20)，g：ml。
进一步地，所述提取溶剂为含有0.07～0.15％柠檬酸单甘酯和0.01～0.02％尿苷二磷酸葡萄糖的乙醇溶液，乙醇溶液中的乙醇浓度为55～60wt％。
进一步地，所述提取溶剂的制备方法为：以55～60wt％的乙醇溶液为溶剂，加入尿苷二磷酸葡萄糖，并使其总浓度为0.01～0.02％，再加入柠檬酸单甘酯，使其总浓度为0.07～0.15％，混合均匀，即得。
进一步地，所述柠檬酸单甘酯和尿苷二磷酸葡萄糖的质量比为1：(0.1～0.18)。
进一步地，所述提取溶剂为含有0.1％柠檬酸单甘酯和0.01％尿苷二磷酸葡萄糖的乙醇溶液，乙醇溶液中的乙醇浓度为60wt％。
进一步地，所述步骤S2中超声辅助提取的温度为40～45℃，功率为150～250W，时间为10～30min。
进一步地，所述步骤S3中预处理后的大孔树脂的制备方法为：将大孔树脂用95wt％乙醇密封浸泡20～24h，用蒸馏水清洗，清洗至无乙醇味，然后置于5％氢氧化钠溶液中浸泡12h，用蒸馏水洗至中性且无浑浊，最后置于5％盐酸溶液浸泡12h，用蒸馏水洗至中性且无浑浊，即得。
进一步地，所述大孔树脂为AB-8大孔树脂、HZ-806大孔树脂。
进一步地，所述步骤S3中真空冷冻干燥的温度为-5～-15℃，真空压力为50～60Pa，时间为1～2h。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明采用提取溶剂协同超声波辅助提取的方式从牛油果果皮和牛油果果核中提取到含有多酚的滤液，并对滤液采用大孔树脂纯化，从而获得多酚，提取率达到7.8％以上。
(2)本发明的方法简单，耗时短，可工业应用，具有较好的经济效益。
附图说明
图1为没食子酸的标准曲线图。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。
一种从牛油果中提取多酚的方法，包括以下步骤：
S1)牛油果果粉的制备：取牛油果的果皮和果核，清洗干净，置于50℃烘箱中干燥，粉碎，过筛，得到牛油果果粉；
S2)牛油果果粉的提取：取步骤S1的牛油果果粉与提取溶剂混合后，采用超声辅助提取，冷却，离心，收集滤液；
S3)多酚的纯化：取预处理后的大孔树脂，加入步骤S2中的滤液，采用70wt％乙醇溶液洗脱，静态吸附6h，收集洗脱液，浓缩除醇，真空冷冻干燥，真空冷冻干燥的温度为-5℃，真空压力为50Pa，时间为1h，即得。
预处理后的大孔树脂的制备方法为：将AB-8大孔树脂用95wt％乙醇密封浸泡24h，用蒸馏水清洗，清洗至无乙醇味，然后置于5％氢氧化钠溶液中浸泡12h，用蒸馏水洗至中性且无浑浊，最后置于5％盐酸溶液浸泡12h，用蒸馏水洗至中性且无浑浊，即得。
提取溶剂的制备方法为：以55～60wt％的乙醇溶液为溶剂，加入尿苷二磷酸葡萄糖，并使其总浓度为0.01～0.02％，再加入柠檬酸单甘酯，使其总浓度为0.07～0.15％，混合均匀，即得。
在上述的基础上按表1的制备方法得到不同组别的多酚
表1
Figure BDA0002514767960000041
Figure BDA0002514767960000051
实验一、滤液中多酚含量的测定
1.1实验对象：实施例1～5和对比例1～5，牛油果品种为“Hass”，从沃尔玛超市中购得；
1.2实验步骤
标准曲线的绘制：精确称取没食子酸标准品0.2500g溶于蒸馏水，定容至50mL容量瓶中，配置成质量浓度为5.0000mg/mL的母液。分别吸取20uL、50uL、100uL、200uL、300uL、400uL、500uL于100mL容量瓶中，用蒸馏水定容制成质量浓度分别为0.0010、0.0025、0.0050、0.0100、0.0150、0.0200、0.0250mg/mL的没食子酸标准液。以蒸馏水作空白参比，在波长270nm下经分光光度计测定吸光度，并绘制出标准曲线，如图1，标准曲线为Y＝58.018X+0.0932，R2＝0.9948。
滤液中多酚含量的计算：实施例和对比例牛油果果粉为5g，按照实施例/对比例得到滤液，测定其吸光度，并计算出多酚的含量。
1.3实验结果
表2
组别 每g牛油果果粉中的多酚含量/g
实施例1 0.0863
实施例2 0.0881
实施例3 0.0858
实施例4 0.0849
实施例5 0.0855
对比例1 0.0527
对比例2 0.0441
对比例3 0.0382
对比例4 0.0575
对比例5 0.0624
从表2可以看出，实施例1～5滤液中的多酚含量较高。对比例1和对比例2的提取溶剂缺少柠檬酸单甘酯或尿苷二磷酸葡萄糖，多酚含量都不高；对比例3为常规的提取方法，但其提取到的多酚含量不高；对比例4调整了柠檬酸单甘酯和尿苷二磷酸葡萄糖的比例，当其提取到的多酚含量不高，与实施例2相比，可能是提取的其它成分被过多溶出，从而影响了多酚的溶出；对比例5延长了提取时间，但当其提取到的多酚含量也不高，也有可能是长时间能够促进其他成分被过多溶出而造成的。
实验二、多酚提取率的测定
2.1实验对象：实施例1～5和对比例1～5，牛油果品种为“Hass”，从沃尔玛超市中购得；
2.2实验步骤：称取步骤S1中牛油果果粉的质量W0，而本次实验中实施例和对比例的W0均为5.0g。当提取完，称取多酚的质量W1，再计算出提取率。
2.3计算公式：
Figure BDA0002514767960000071
2.4实验结果
表3
组别 W1/g W0/g 提取率/％
实施例1 5.0 0.4011 8.02
实施例2 5.0 0.4187 8.37
实施例3 5.0 0.3945 7.89
实施例4 5.0 0.3919 7.83
实施例5 5.0 0.3983 7.96
对比例1 5.0 0.2027 4.05
对比例2 5.0 0.2044 4.08
对比例3 5.0 0.1271 2.54
对比例4 5.0 0.2633 5.26
对比例5 5.0 0.2865 5.73
从表3可以看出，实施例1～5的多酚提取率较高，提取率在7.83～8.37％之间，而对比例1～5的提取率不高。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (5)

1.一种从牛油果中提取多酚的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1)牛油果果粉的制备：取牛油果的果皮和果核，清洗干净，置于50～60℃烘箱中干燥，粉碎，过筛，得到牛油果果粉；
S2)牛油果果粉的提取：取步骤S1的牛油果果粉与提取溶剂混合后，采用超声辅助提取，冷却，离心，收集滤液；
S3)多酚的纯化：取预处理后的大孔树脂，加入步骤S2中的滤液，采用65～75wt％乙醇溶液洗脱，静态吸附5～6h，收集洗脱液，浓缩除醇，真空冷冻干燥，即得；
所述提取溶剂为含有0.07～0.15％柠檬酸单甘酯和0.01～0.02％尿苷二磷酸葡萄糖的乙醇溶液，乙醇溶液中的乙醇浓度为55～60wt％；
所述步骤S3中预处理后的大孔树脂的制备方法为：将大孔树脂用95wt％乙醇密封浸泡20～24h，用蒸馏水清洗，清洗至无乙醇味，然后置于5％氢氧化钠溶液中浸泡12h，用蒸馏水洗至中性且无浑浊，最后置于5％盐酸溶液浸泡12h，用蒸馏水洗至中性且无浑浊，即得；
所述大孔树脂为AB-8大孔树脂；
所述柠檬酸单甘酯和尿苷二磷酸葡萄糖的质量比为1：(0.1～0.18)。
2.根据权利要求1所述从牛油果中提取多酚的方法，其特征在于，所述牛油果果粉与提取溶剂的料液比为1：(15～20)，g：ml。
3.根据权利要求1所述从牛油果中提取多酚的方法，其特征在于，所述提取溶剂为含有0.1％柠檬酸单甘酯和0.01％尿苷二磷酸葡萄糖的乙醇溶液，乙醇溶液中的乙醇浓度为60wt％。
4.根据权利要求1所述从牛油果中提取多酚的方法，其特征在于，所述步骤S2中超声辅助提取的温度为40～45℃，功率为150～250W，时间为10～30min。
5.根据权利要求1所述从牛油果中提取多酚的方法，其特征在于，所述步骤S3中真空冷冻干燥的温度为-5～-15℃，真空压力为50～60Pa，时间为1～2h。
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