CN114634537A - 金叶子二萜的制备方法及其应用 - Google Patents
金叶子二萜的制备方法及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114634537A CN114634537A CN202210381192.XA CN202210381192A CN114634537A CN 114634537 A CN114634537 A CN 114634537A CN 202210381192 A CN202210381192 A CN 202210381192A CN 114634537 A CN114634537 A CN 114634537A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- diterpene
- compound
- leaves
- diterpenoid
- gold
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000004141 diterpene derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 38
- 229930004069 diterpene Natural products 0.000 title claims abstract description 29
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 24
- 239000010931 gold Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 21
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 56
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 20
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 20
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 7
- IVZWRQBQDVHDNG-UHFFFAOYSA-N (-)-Kauran; alpha-Dihydrokauren Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C)C3CCC22CC(C)C1C2 IVZWRQBQDVHDNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- IVZWRQBQDVHDNG-KUIXFMFUSA-N ent-kaurane Chemical compound C([C@@]1(C)[C@@H]2CC3)CCC(C)(C)[C@H]1CC[C@]21C[C@H](C)[C@H]3C1 IVZWRQBQDVHDNG-KUIXFMFUSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229930001567 kaurane Natural products 0.000 claims abstract description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 9
- -1 gold leaf diterpenoid compounds Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 7
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 claims description 6
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 claims description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 6
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims description 5
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 5
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical group [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Chemical group 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 230000036592 analgesia Effects 0.000 claims description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 3
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 3
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 2
- 150000004545 kaurane derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000005325 percolation Methods 0.000 claims description 2
- 238000007670 refining Methods 0.000 claims description 2
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 claims 1
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 claims 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 241000489523 Veratrum Species 0.000 abstract description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 abstract description 3
- 229940057613 veratrum Drugs 0.000 abstract description 3
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 abstract description 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 abstract description 2
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 abstract description 2
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 abstract description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 abstract 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 abstract 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 abstract 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 abstract 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 abstract 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 6
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 3
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- 240000006122 Chenopodium album Species 0.000 description 1
- 235000009344 Chenopodium album Nutrition 0.000 description 1
- 241000208421 Ericaceae Species 0.000 description 1
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 1
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 241000245165 Rhododendron ponticum Species 0.000 description 1
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N digoxin Chemical class C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)[C@H](O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N 0.000 description 1
- 125000000567 diterpene group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 1
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 1
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 231100000862 numbness Toxicity 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 229930002348 tetracyclic diterpenoid Natural products 0.000 description 1
- 150000004197 tetracyclic diterpenoid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 230000008736 traumatic injury Effects 0.000 description 1
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C29/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom not belonging to a six-membered aromatic ring
- C07C29/74—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation
- C07C29/76—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C35/00—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
- C07C35/22—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring polycyclic, at least one hydroxy group bound to a condensed ring system
- C07C35/44—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring polycyclic, at least one hydroxy group bound to a condensed ring system with a hydroxy group on a condensed ring system having more than three rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
- C07H1/08—Separation; Purification from natural products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
- C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
- C07B2200/07—Optical isomers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
- C07C2603/56—Ring systems containing bridged rings
- C07C2603/86—Ring systems containing bridged rings containing four rings
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了一种金叶子中二萜的制备方法及其应用，该类二萜主要为木藜芦毒烷和贝壳杉烷及其衍生物。以含水醇为溶剂对金叶子进行提取，将提取液用串联大孔树脂法进行分离纯化，再经干燥处理后得到金叶子二萜。金叶子二萜经多种色谱得到单体化合物。本发明的制备工艺能有效去除糖类、黄酮类及色素等杂质，得到纯度较高的二萜类成分。工艺过程简单、可控、适合工业化生产。本发明同时公开了金叶子二萜总提取物及单体化合物的镇痛作用。
Description
技术领域
本发明属于中药提取物制备工艺领域，涉及从金叶子中制备木藜芦烷型二萜的工艺，该二萜类成分具有镇痛的作用。
背景技术
金叶子(Craibiodendron yunnanense W.W.Smith)为杜鹃花科常绿小乔木。分布于广西、云南、西藏，主产于云南。金叶子涩，微辛，性温，有剧毒。有发表温经，活络止痛之功效，临床可用于治疗跌打损伤，风湿麻木，外感风寒，也可治骨折，瘫痪和胃痛。
金叶子中含有多种化学成分，主要为黄酮和二萜类成分，其中木藜芦毒烷型四环二萜类成分为主要的活性成分。目前，尚无关于金叶子二萜类成分制备工艺及应用的相关报道，本研究的工艺路线可除去金叶子二萜中的大部分杂质，特别是多糖和黄酮类杂质，得到纯度较高的二萜类总样，同时还可制备得到单体化合物，对于金叶子二萜开发为镇痛类中药新药具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的是提供来源于杜鹃科植物金叶子中二萜类总提物及单体成分的制备方法。本发明的另一个目的是提供此类成分在镇痛方面的应用。
金叶子二萜类化合物为木藜芦毒烷或贝壳杉烷及其衍生物或其它类型的二萜。
所述的木藜芦毒烷衍生物，其特征在于具有如下结构式：
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8＝葡萄糖基、羟基、氢或OCO(CH2)n CH3
或可选择的C10和C20，C15和C16形成双键；
或C2和C3，C6和C10，C7和C10形成氧桥。
所述的贝壳杉烷衍生物，其特征在于具有如下结构式：
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8＝葡萄糖基、羟基、氢或OCO(CH2)n CH3
或可选择的R7为羰基；
或可选择的C10和C11，C16和C17形成双键。
所述的其它类型的二萜类化合物，其特征在于具有如下结构式：
R1、R2＝葡萄糖基或羟基。
所述的二萜类化合物，其特征在于，该二萜类化合物可以为二萜总提取物也可以是单体化合物。
所述的二萜总提取物的制备方法，其特征在于将干燥的金叶子的叶子药材用含水醇浸泡后进行提取，提取溶剂为40％～90％的乙醇，溶剂用量与药材质量之比为15:1～25:1(L/kg)，提取方式可以为回流提取、渗漉提取、超声提取；使用串联树脂法，先用HPD-100型、AB-8型或D101型大孔树脂对提取液进行粗分离，以60～90％的乙醇为溶剂进行洗脱，收集洗脱液，将洗脱液用D941型大孔树脂进行精制处理，干燥得到金叶子二萜总提取物。
所述的单体化合物的分离纯化方法，其特征在于，该单体化合物的分离纯化方法为使用硅胶、凝胶、ODS、制备及半制备液相等多种色谱材料对金叶子二萜总提取物进行分离纯化，得到单体化合物1(compound 1)和化合物2(compound 2)。
所述的二萜总提取物及单体化合物，其特征在于，该二萜总提取物及单体化合物在镇痛方面的应用。
本发明主要通过以下几个步骤实现：
(1)用含水醇对金叶子进行提取。
(2)用树脂串联法对提取物进行纯化。
(3)对纯化后的二萜总提取物进行干燥。
(4)对二萜总提取物进行分离鉴定得到单体化合物。
(5)镇痛实验，用醋酸扭体实验对镇痛活性进行了评价。
其中步骤(1)中，将干燥的金叶子的叶子用40～90％乙醇浸泡4～6小时，溶剂用量为15～25倍。回流提取2～3次，每次0.5～2小时；或渗漉提取，渗漉流速为5～20ml/kg*h；或超声提取3次，每次半小时；将提取液减压浓缩至无醇味。
步骤(2)中，首先用HPD-100型、AB-8型或D101型大孔树脂对提取液进行粗分离，先用纯化水冲洗2～4个柱体积，再用60～90％的乙醇洗脱3～5个柱体积，乙醇洗脱液直接通过D941大孔树脂，收集流出液，减压回收溶剂。
步骤(3)中，可用减压干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等方式。
步骤(4)中，可用硅胶、凝胶、ODS、制备及半制备液相等多种色谱材料进行分离纯化。
步骤(5)镇痛实验采用醋酸扭体实验对二萜总提取物及单体化合物的镇痛活性进行评价。
附图说明
图1为通式1；
图2为通式2；
图3为通式3；
图4为通式4。
具体实施方式
为了更好的理解本发明的内容，结合具体实施例对本发明作进一步详细描述，但不作为对本发明的限定。
实施例1
将干燥的金叶子的叶子用40％乙醇浸泡4小时，溶剂用量为25倍。回流提取3次，每次2小时，合并3次的提取液减压浓缩至无醇味，用HPD-100型大孔树脂对提取液进行粗分离，先用纯化水冲洗2个柱体积，再用60％的乙醇洗脱3个柱体积，60％乙醇洗脱液直接通过D941大孔树脂，收集流出液，减压回收溶剂，70℃下减压干燥，既得二萜总提取物。
实施例2
将干燥的金叶子的叶子用40％乙醇浸泡6小时，溶剂用量为15倍。回流提取2次，每次0.5小时，合并2次的提取液减压浓缩至无醇味，用HPD-100型大孔树脂对提取液进行粗分离，先用纯化水冲洗4个柱体积，再用90％的乙醇洗脱5个柱体积，90％乙醇洗脱液直接通过D941大孔树脂，收集流出液，减压回收溶剂，70℃下减压干燥，既得二萜总提取物。
实施例3
将干燥的金叶子的叶子用75％乙醇浸泡4小时，溶剂用量为15倍。渗漉提取，流速5ml/kg*h，提取液减压浓缩至无醇味，用AB-8型大孔树脂对提取液进行粗分离，先用纯化水冲洗4个柱体积，再用60％的乙醇洗脱5个柱体积，60％乙醇洗脱液直接通过D941大孔树脂，收集流出液，减压回收溶剂，喷雾干燥，既得二萜总提取物。
实施例4
将干燥的金叶子的叶子用75％乙醇浸泡6小时，溶剂用量为25倍。渗漉提取，流速20ml/kg*h，提取液减压浓缩至无醇味，用AB-8型大孔树脂对提取液进行粗分离，先用纯化水冲洗2个柱体积，再用90％的乙醇洗脱3个柱体积，90％乙醇洗脱液直接通过D941大孔树脂，收集流出液，减压回收溶剂，喷雾干燥，既得二萜总提取物。
实施例5
将干燥的金叶子的叶子用90％乙醇浸泡5小时，溶剂用量为25倍。超声提取3次，每次半小时，合并3次的提取液，提取液减压浓缩至无醇味，用D101型大孔树脂对提取液进行粗分离，先用纯化水冲洗3个柱体积，再用90％的乙醇洗脱4个柱体积，90％乙醇洗脱液直接通过D941大孔树脂，收集流出液，减压回收溶剂，-30℃冷冻干燥，既得二萜总提取物。
实施例6
取二萜总提取物，乙醇溶解，硅胶拌样后，硅胶柱层析划段，以氯仿、甲醇(CHCl3:MeOH＝25:1→6:1)洗脱，得到4个粗粉极性段JR-1、JR-2、JR-3、JR-4。将JR-1用反向材料ODS中压柱层析以甲醇-水(0:100→60:40,v/v)进行分离，得到(Fr.1-Fr.6)；Fr.2经正向硅胶柱层析以氯仿-甲醇(15:1)洗脱，得到化合物1(80.0mg)；Fr.4经以甲醇-水为溶剂进行重结晶纯化后，得到化合物2(120.0mg)。
实施例7药理实验
取SPF级KM小鼠(18～22g)，全雄，随机分为空白组、阳性对照组(阿司匹林，400mg/kg)，和实验组，每组均为10只；各实验组均以20mL/kg给药容积灌胃给药，受试样品组给予相应样品，空白组给予等体积纯水，1次/d，连续3d。于末次给药后1h，以10mL/kg给药体积腹腔注射0.6％冰醋酸，10min后观察小鼠在15min内的扭体反应次数(以小鼠出现腹部内凹、躯干与后肢伸张，臀部抬起反应为准)，计算抑制率：抑制率(％)＝(模型组平均扭体次数-给药组平均扭体次数)/模型组平均扭体次数×100％。实验结果以平均值±SD表示，并对结果进行统计学分析。
表1.二萜总提取物及化合物1对冰醋酸致小鼠扭体次数影响
注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01
表2.化合物2对冰醋酸致小鼠扭体次数影响
注：与空白组比较，**P<0.01。
Claims (8)
1.金叶子二萜类化合物，其特征在于该类化合物为木藜芦毒烷或贝壳杉烷及其衍生物或其它类型的二萜。
2.根据权利要求1所述的木藜芦毒烷衍生物，其特征在于具有如下结构式：
通式1
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8 =葡萄糖基、羟基、氢或OCO(CH2)n CH3
或可选择的C10和C20，C15和C16形成双键；
或C2和C3，C6和C10，C7和C10形成氧桥。
3.根据权利要求1所述的贝壳杉烷衍生物，其特征在于具有如下结构式：
通式2
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8 =葡萄糖基、羟基、氢或OCO(CH2)n CH3
或可选择的R7为羰基；
或可选择的C10和C11，C16和C17形成双键。
4.根据权利要求1所述的其它类型的二萜类化合物，其特征在于具有如下结构式：
通式3
R1、R2 =葡萄糖基或羟基。
5.根据权利要求1所述的二萜类化合物，其特征在于，该二萜类化合物可以为二萜总提取物也可以是单体化合物。
6.根据权利要求6所述的二萜总提取物的制备方法，其特征在于将干燥的金叶子的叶子药材用含水醇浸泡后进行提取，提取溶剂为40%~90%的乙醇，溶剂用量与药材质量之比为15:1~25:1（L/kg），提取方式可以为回流提取、渗漉提取、超声提取；使用串联树脂法，先用HPD-100型、AB-8型或D101型大孔树脂对提取液进行粗分离，以60~90%的乙醇为溶剂进行洗脱，收集洗脱液，将洗脱液用D941型大孔树脂进行精制处理，干燥得到金叶子二萜总提取物。
7.根据权利要求6所述的单体化合物的分离纯化方法，其特征在于，该单体化合物的分离纯化方法为使用硅胶、凝胶、ODS、制备及半制备液相等多种色谱材料对金叶子二萜总提取物进行分离纯化，得到单体化合物1（compound 1）和化合物2（compound 2），
8.根据权利要求6所述的二萜总提取物及单体化合物，其特征在于，该二萜总提取物及单体化合物在镇痛方面的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210381192.XA CN114634537A (zh) | 2022-04-12 | 2022-04-12 | 金叶子二萜的制备方法及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210381192.XA CN114634537A (zh) | 2022-04-12 | 2022-04-12 | 金叶子二萜的制备方法及其应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114634537A true CN114634537A (zh) | 2022-06-17 |
Family
ID=81951565
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210381192.XA Pending CN114634537A (zh) | 2022-04-12 | 2022-04-12 | 金叶子二萜的制备方法及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114634537A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117964671A (zh) * | 2024-03-29 | 2024-05-03 | 云南省药物研究所 | 一种从三七茎叶中制备人参黄酮苷的方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1507915A (zh) * | 2002-12-18 | 2004-06-30 | 云南省药物研究所 | 治疗肿痛的外用药物组合物 |
| CN1723928A (zh) * | 2005-07-07 | 2006-01-25 | 云南省药物研究所 | 治疗肿痛的外用药物组合物 |
| CN105218320A (zh) * | 2015-09-29 | 2016-01-06 | 贵阳中医学院 | 一种对映-贝壳杉烷型二萜化合物及其制备方法和应用 |
| CN111195277A (zh) * | 2018-11-19 | 2020-05-26 | 上海张江中药现代制剂技术工程研究中心 | 一种羊踯躅二萜有效部位及其制备工艺方法和用途 |
-
2022
- 2022-04-12 CN CN202210381192.XA patent/CN114634537A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1507915A (zh) * | 2002-12-18 | 2004-06-30 | 云南省药物研究所 | 治疗肿痛的外用药物组合物 |
| CN1723928A (zh) * | 2005-07-07 | 2006-01-25 | 云南省药物研究所 | 治疗肿痛的外用药物组合物 |
| CN105218320A (zh) * | 2015-09-29 | 2016-01-06 | 贵阳中医学院 | 一种对映-贝壳杉烷型二萜化合物及其制备方法和应用 |
| CN111195277A (zh) * | 2018-11-19 | 2020-05-26 | 上海张江中药现代制剂技术工程研究中心 | 一种羊踯躅二萜有效部位及其制备工艺方法和用途 |
Non-Patent Citations (12)
| Title |
|---|
| CHENG ZHOU，等: "Chemical constituents from the leaves of Craibiodendron yunnanense", 《BIOCHEMICAL SYSTEMATICS AND ECOLOGY》, vol. 45, pages 179 - 182 * |
| HUA-PING ZHANG，等: "Grayanane diterpenoids from the leaves of Craiobiodendron yunnanense", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY》, vol. 13, 28 June 2005 (2005-06-28), pages 5289 - 5298 * |
| HUA-PING ZHANG，等: "Grayanane diterpenoids from the leaves of Craiobiodendron yunnanense", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY》, vol. 13, pages 5289 - 5298 * |
| LI-QUAN WANG，等: "Diterpene glucosides from Pieris formosa", 《PHYTOCHEMISTRY》, vol. 54, 31 December 2000 (2000-12-31), pages 847 - 852 * |
| NA SUN，等: "Analgesic diterpenoids with diverse carbon skeletons from the leaves of Rhododendron auriculatum", 《PHYTOCHEMISTRY》, vol. 168, pages 112113 * |
| NA SUN，等: "Rhodomicranosides A−I, analgesic diterpene glucosides with diverse carbon skeletons from Rhododendron micranthum", 《PHYTOCHEMISTRY》, vol. 158, 14 November 2018 (2018-11-14), pages 1 - 12 * |
| NA SUN，等: "Rhodomicranosides A−I, analgesic diterpene glucosides with diverse carbon skeletons from Rhododendron micranthum", 《PHYTOCHEMISTRY》, vol. 158, pages 1 - 12, XP018534936 * |
| QIAN LI，等: "Grayanane diterpenoids from Craibiodendron yunnanense with anti-inflammatory and antinociceptive activities", 《PHYTOCHEMISTRY》, vol. 212, pages 113729 * |
| 周成: "两种药用植物的化学成分研究及其化学分类学讨论", 《昆明理工大学硕士论文》, pages 45 - 48 * |
| 宋美娜: "三种药用植物化学成分及生物活性研究", 《济南大学硕士学位论文》, pages 49 - 53 * |
| 李蓉涛，等: "金叶子的化学成分", 《云南植物研究》, vol. 27, no. 5, 31 December 2005 (2005-12-31), pages 565 - 571 * |
| 杨胜祥: "金叶子的化学成分研究", 《西北农林科技大学硕士论文》, pages 25 - 27 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117964671A (zh) * | 2024-03-29 | 2024-05-03 | 云南省药物研究所 | 一种从三七茎叶中制备人参黄酮苷的方法 |
| CN117964671B (zh) * | 2024-03-29 | 2024-05-31 | 云南省药物研究所 | 一种从三七茎叶中制备人参黄酮苷的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102976909B (zh) | 一种从生姜中提取纯化6-姜酚的方法 | |
| CN101260131A (zh) | 从杜仲中提取环烯醚萜活性部位及单体的方法 | |
| CN105481711B (zh) | 一种羟基‑β‑山椒素单体的制备方法 | |
| CN102746362A (zh) | 从黄芪中提取精制黄芪甲苷的方法 | |
| CN103058978B (zh) | 从镰形棘豆中同步制备乔松素和2’,4’-二羟基查尔酮的工艺方法 | |
| CN101348474A (zh) | 一种从丹参茎叶中制备丹酚酸b和丹参素的方法 | |
| CN114634537A (zh) | 金叶子二萜的制备方法及其应用 | |
| CN101747195B (zh) | 菊芋中二咖啡酰奎尼酸组分的分离提纯方法 | |
| CN102659864B (zh) | 一种抗过敏天然产物thbp的制备方法 | |
| WO2012061984A1 (zh) | 制备芍药内酯苷和芍药苷的方法 | |
| CN102078341A (zh) | 高纯度银杏黄酮及组合物 | |
| CN105175426B (zh) | 一种从四方藤中提取纯化岩白菜素的方法 | |
| CN104193758A (zh) | 一种从墨旱莲中提取蟛蜞菊内酯类单体化合物的制备方法 | |
| CN114790222B (zh) | 一种基于淫羊藿的黄酮类化合物及其制备方法 | |
| CN111205302A (zh) | 一种大果木姜子果实提取物、提取方法及制备方法和应用 | |
| CN111228326A (zh) | 一种甘草中生物碱类化合物的制备方法及用途 | |
| CN105294793A (zh) | 景天三七中柚皮苷的分离方法 | |
| CN106674239A (zh) | 一种天目琼花枝叶木脂素及提取方法和用途 | |
| CN1253456C (zh) | 一种从桃儿七中制备鬼臼毒素的改进工艺 | |
| CN102477055A (zh) | 一种从大蓟中提取纯化柳穿鱼叶苷的方法 | |
| CN102093210A (zh) | 6种银杏酸单体的纯化制备方法 | |
| CN101195645B (zh) | 抗乙肝病毒的鹊肾树提取物及其提取工艺 | |
| CN113214211B (zh) | 一种提取自牡丹皮炭的化合物及其制备方法和制药用途 | |
| CN112390809B (zh) | 一种从黄花败酱中提取环烯醚萜类化合物的方法 | |
| CN109966323B (zh) | 一种从红豆杉中提取抗哮喘炎症提取物的方法及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |