CN114569512A - 一种青梅提取物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种青梅提取物及其制备方法和应用，所述制备方法包括如下步骤：原料验收、去核打浆、浓缩、水提取、醇提取、蒸发浓缩以及过滤，通过该制备方法对青梅进行充分浓缩提取，得到青梅提取物，所述青梅提取物能够较好地保留青梅中的营养成分，并且该制备方法工艺简单，能够在提高青梅利用率的同时，提高工作效率，降低生产成本，适合规模化生产；此外，所述青梅提取物包括总黄酮、有机酸以及梅素，有较强的抗氧化和消除自由基的能力，并且该青梅提取物对酪氨酸酶具有明显的抑制作用，在制备化妆品或护肤品中，具有良好的应用前景和市场价值。
Description
技术领域
本发明涉及青梅提取技术领域，特别是涉及一种青梅提取物及其制备方法和应用。
背景技术
梅果，也称为青梅、梅子，属于蔷薇科杏属植物梅Armeniaca mume Sieb.的果实。我国各地均有栽培，但以长江流域以南各省最多，为亚热带特产水果，其含有丰富的有机酸、糖类、氨基酸及人体111所需的多种微量元素等营养成分以及黄酮类、花青素、酚酸等生物活性物质，具有抑菌、抗氧化、促消化等生理功能，有利于人体健康，具有很高的营养保健和药用价值；食用青梅具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、降血脂、调节生理代谢等生理作用，此外，还可作为抑菌剂、抗氧化剂、保鲜剂等天然添加剂应用到食品加工及化妆品原料中，具有较大的研究意义和应用前景。
虽然青梅作为天然添加剂，广泛应用于食品及护肤品行业，但是青梅在制备过程会流失很多的营养成分，导致青梅的利用率较低，且提取物质的有效成分种类较少，生产效率较为低下。
发明内容
基于此，有必要针对青梅在提取过程中营养成分流失较多、导致青梅利用率低以及生产效率低的问题，提供一种青梅提取物及其制备方法和应用。
一种青梅提取物的制备方法，包括如下步骤：
S1：原料验收：选取新鲜、完好无损、大小均一、成熟度相同的青梅作为原材料，经过清水喷淋，75％酒精浸泡消毒10min，再用纯水漂洗，备用；
S2：去核打浆：将清洗后的青梅放入去核打浆机中，去核打浆；
S3：浓缩：将S2中得到的浆液放入搅拌锅中，在100℃的温度下，以30r/min的速度搅拌，浓缩24h，得到青梅浓缩膏；
S4：水提取：将上述青梅浓缩膏放入超声波提取罐中，按照一定的比例加入去离子水，在70℃的温度下，超声频率为320W，超声波提取30min，接着以30r/min的速度搅拌均匀，浸提60min，完成后，收集提取液，备用；
S5：醇提取：将S4中剩余的滤渣进行醇提取，按照一定比例添加含量为60％的食用酒精，在50℃的温度下，超声频率为320W，超声波提取30min，接着以30r/min的速度搅拌均匀，浸提180min，完成后，收集提取液，备用；
S6：蒸发浓缩：将S4和S5中的提取液分别进行抽滤，抽滤后将其提取液进行混合，然后放入真空蒸发罐中，将压力调至200mbar，在70℃的温度下，蒸发回收乙醇，并收集滤液，备用；
S7：过滤：将S6中得到的滤液通过0.45μm孔径的滤芯，除去杂质和细菌，得到青梅提取物。
在其中一个实施例中，在S4步骤中，所述青梅浓缩膏与去离子水的添加比例为1:15。
在其中一个实施例中，在S5步骤中，所述滤渣与食用酒精的添加比例为1:40。
一种青梅提取物，包括总黄酮3％～5％、有机酸30％～35％和梅素0.8％～1.2％。
根据现代药理学研究表示，总黄酮具有很强的抗氧化和消除自由基的能力，其主要作用是可以改善睡眠，促进新陈代谢，调节身体的机能，抗衰老，同时还可以改善血液的循环，保护心脑血管病以及消炎杀毒；有机酸具有抑菌、利胆、消炎、降血糖、抗氧化以及调节机体免疫等作用，能够增加冠状动脉血流量、抑制脑组织脂质过氧化物生成、软化血管、促进钙、铁元素的吸收，同时帮助胃液消化脂肪，还能够预防疾病和促进新陈代谢等作用；梅素能够清除血液中的毒素、垃圾，净化血液，具有惊人的改善血液循环效果。
上述一种青梅提取物，通过本发明的制备方法，对青梅进行充分浓缩提取，能够较好地保留青梅中的营养成分，提高青梅的利用率；并且该制备方法工艺简单，有利于提高工作效率，降低生产成本，适合规模化生产。
一种青梅提取物的应用，所述青梅提取物应用于制备化妆品或护肤品中。
进一步地，将所述青梅提取物添加到化妆品或护肤品中，具有美白保湿、抗衰老和抑菌消炎的作用。
本发明中的青梅提取物，包括总黄酮、有机酸以及梅素，根据该青梅提取物的成分及功效，可以应用于制备化妆品或护肤品中，且安全环保，具有良好的应用前景和市场价值。
附图说明
图1为本发明一种青梅提取物及其制备方法和应用的芦丁标准曲线图；
图2为本发明一种青梅提取物及其制备方法和应用的梅素标准曲线图；
图3为本发明一种青梅提取物及其制备方法和应用的青梅提取物对酪氨酸酶活性影响的结果示意图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
如本文所用术语“由…制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
此外，本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施方式的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
一种青梅提取物的制备方法，包括如下步骤：
S1：原料验收：选取新鲜、完好无损、大小均一、成熟度相同的青梅作为原材料，经过清水喷淋，75％酒精浸泡消毒10min，再用纯水漂洗，备用；
S2：去核打浆：将清洗后的青梅放入去核打浆机中，去核打浆；
S3：浓缩：将S2中得到的浆液放入搅拌锅中，在100℃的温度下，以30r/min的速度搅拌，浓缩24h，得到青梅浓缩膏；
S4：水提取：将上述青梅浓缩膏放入超声波提取罐中，按照一定的比例加入去离子水，在70℃的温度下，超声频率为320W，超声波提取30min，接着以30r/min的速度搅拌均匀，浸提60min，完成后，收集提取液，备用；
S5：醇提取：将S4中剩余的滤渣进行醇提取，按照一定比例添加含量为60％的食用酒精，在50℃的温度下，超声频率为320W，超声波提取30min，接着以30r/min的速度搅拌均匀，浸提180min，完成后，收集提取液，备用；
S6：蒸发浓缩：将S4和S5中的提取液分别进行抽滤，抽滤后将其提取液进行混合，然后放入真空蒸发罐中，将压力调至200mbar，在70℃的温度下，蒸发回收乙醇，并收集滤液，备用；
S7：过滤：将S6中得到的滤液通过0.45μm孔径的滤芯，除去杂质和细菌，得到青梅提取物。
需要说明的是，在制备过程中，S4步骤中所述青梅浓缩膏与去离子水的添加比例为1:15；S5步骤中所述滤渣与食用酒精的添加比例为1:40。
上述一种青梅提取物的制备方法，工艺简单，生产效率高，有利于节省生产成本，适合规模化生产。
进一步地，通过该制备方法制备而成的青梅提取物，放入洁净的容器中，并在阴凉避光处保存。
在本发明中，为了更好地了解所述青梅提取物中的营养成分，将该青梅提取物进行如下分析检测：
1、总黄酮含量的测定
(1)对照品溶液的制备
精密称定干燥至恒重的芦丁对照品20.00mg，置100mL容量瓶中，加60％乙醇水溶液溶解，并稀释至刻度，配制成0.2mg/mL芦丁对照品溶液，备用。
(2)标准曲线的绘制
以芦丁为标准物质，制作标准曲线，方法如下：
精密量取芦丁标准溶液1.0mL，2.0mL，3.0mL，4.0mL，5.0mL，分别置于10mL容量瓶中；加5％亚硝酸钠溶液0.3mL，摇匀，放置6min，再加入10％硝酸铝溶液0.3mL，摇匀，放置6min，再加入1mol/L氢氧化钠溶液4mL，用60％乙醇水溶液稀释至刻度，摇匀，放置15min，在紫外分光光度计上于510nm波长处测定吸光度，其中，吸光度如下表所示：
表1
| 浓度(mg/mL) | 吸光度 |
| 0.02 | 0.243 |
| 0.04 | 0.503 |
| 0.06 | 0.747 |
| 0.08 | 0.982 |
| 0.10 | 1.211 |
根据表1可知，用试剂作为空白参比，以芦丁浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，标准曲线如图1所示，通过该标准曲线得到线性回归方程为：y＝12.075x+0.0127，其中，相关系数R2＝0.9994，由结果表明，芦丁浓度在0.02～0.10mg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系。
(3)总黄酮含量测定
精密吸取青梅提取物0.2mL，置于10mL容量瓶中，用70％乙醇稀释至刻度，摇匀，备用。
精密吸取上述溶液1mL，置于10mL容量瓶中，加5％亚硝酸钠溶液0.3mL，摇匀，放置6min，再加入10％硝酸铝溶液0.3mL，摇匀，放置6min，再加入1mol/L氢氧化钠溶液4mL，用70％乙醇水溶液稀释至刻度，摇匀，放置15min，于510nm波长处测定吸光度，重复三次实验，得到吸光度为0.573±0.002。
根据上述线性回归方程计算样品中总黄酮的质量浓度，得出青梅提取物总黄酮含量(以芦丁计)为4.64±0.06％。
2、总有机酸含量的测定
精密称取乌梅提取物10g，置于250mL圆底烧瓶中，加入100mL蒸馏水，加热回流1.5h，提取2次，冷却后，减压过滤，合并滤液，滤液在减压浓缩后转入50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，得到含有青梅提取物的溶液，备用。
精密吸取含有青梅提取物的溶液各1mL，分别置于锥形瓶中，加水10mL，加酚酞指示剂2滴，用NaOH滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液由无色变为红色，重复三次实验，测得青梅提取物溶液消耗NaOH溶液的体积为10.22±0.08mL；按照《GB 12456-2021食品安全国家标准食品中总酸的测定方法》测得青梅提取物总有机酸含量(以枸橼酸计)为33.04±0.25％。
3、梅素含量的测定
(1)溶液配制
准确称取5.0mg梅素标准品置于5mL容量瓶中，用纯净水定容至刻度。准确称取5-HMF标准品5.0mg放入5mL容量瓶中，用纯净水定容至刻度；使用时，稀释成不同质量浓度的混合标准溶液，过0.45um滤膜，待检测用。
(2)色谱条件
色谱柱：C1s型(5um，4.6mm×150mn)；流动相A：5％乙腈+0.2％甲酸，流动相B：90％乙腈+0.2％甲酸；柱温：25℃；流速：1mL/min；紫外检测器波长：入＝280nm；进样量：10uL。
(3)流动相梯度
以B泵体积分数0为初始梯度，设置3个不同中间梯度的梯度洗脱程序，分别对样品和标准品进样；其中，梯度洗脱：0～10min，B泵0；10～25min，B泵80％；25～30min，B泵0。
(4)标准曲线的绘制及检出限
将500μg/mL的梅素标准品母液逐级稀释，配制成质量浓度分别为0.25，0.50，1.00，5.00，10.00，100.00，250.00μg/mL的标准溶液系列，通过HPLC进行检测，测得的峰面积如下表所示：
表2
| 浓度(μg/mL) | 峰面积 |
| 0.25 | 91544.5 |
| 0.50 | 97417 |
| 1.00 | 109160 |
| 5.00 | 203123 |
| 10.00 | 320575 |
| 100.00 | 2334670 |
| 250.00 | 5958168 |
根据表2绘制标准曲线，标准曲线如图2所示，通过该标准曲线得到线性回归方程为：
y＝23490x+85671
根据测得的峰面积，通过上述回归方程计算梅素的含量，如下表所示：
表3
| 峰面积 | 梅素(mg/g) |
| 320423 | 9.9936 |
| 317558 | 9.872 |
| 321325 | 10.032 |
由表3可知，测得所述青梅提取物的梅素平均含量为9.9658mg/g，约占所述青梅提取物的1％。
在本发明中，由上述实验1-3的分析结果可知，所述青梅提取物含有4.64±0.06％的总黄酮、33.04±0.25％的有机酸以及1％的梅素；根据现代药理学研究可知，所述总黄酮具有很强的抗氧化和消除自由基的能力，所述有机酸具有抑菌、利胆、消炎、降血糖、抗氧化以及调节机体免疫等作用，所述梅素能够清除血液中的毒素、垃圾，净化血液，具有惊人的改善血液循环效果。
4、青梅提取物对酪氨酸酶活性影响的测定
将青梅提取物稀释成10％，20％，50％，100％四个浓度，按下表所示体积准确吸取C1、C2、T1以及T2四组反应液，先置37℃水浴锅中保温15min，测定时分别将C1、C2、T1、T2四组反应液混匀，加入1.0mL酪氨酸酶溶液，混匀，以磷酸缓冲液(pH＝6.8)为空白对照，读取475nm波长下37℃水浴25min后测定管的吸光度，按下列公式计算出酪氨酸酶活性的抑制率：
酪氨酸酶的抑制百分率(％)＝[1-(T1-T2)/(C1-C2)]×100。
表4
结合图3可知，本发明的青梅提取物对酪氨酸酶具有明显的抑制作用，并且所述青梅提取物对酪氨酸酶的抑制率随着样品浓度的增大而增大。
根据实验结果可知，将所述青梅提取物添加到化妆品或护肤品中，能够起到美白保湿、延缓衰老和抑菌消炎的作用。
上述一种青梅提取物，通过本发明的制备方法，对青梅进行充分浓缩提取，能够较好地保留青梅中的营养成分，有效地解决了对于青梅利用率低的问题；并且该制备方法工艺简单，在提高青梅的利用率的同时，还提高了工作效率，降低生产成本，适合规模化生产。
进一步地，所述青梅提取物包括总黄酮、有机酸以及梅素，并且该青梅提取物对酪氨酸酶具有明显的抑制作用，在制备化妆品或护肤品中，具有良好的应用前景和市场价值。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (5)
1.一种青梅提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：原料验收：选取新鲜、完好无损、大小均一、成熟度相同的青梅作为原材料，经过清水喷淋，75％酒精浸泡消毒10min，再用纯水漂洗，备用；
S2：去核打浆：将清洗后的青梅放入去核打浆机中，去核打浆；
S3：浓缩：将S2中得到的浆液放入搅拌锅中，在100℃的温度下，以30r/min的速度搅拌，浓缩24h，得到青梅浓缩膏；
S4：水提取：将上述青梅浓缩膏放入超声波提取罐中，按照一定的比例加入去离子水，在70℃的温度下，超声频率为320W，超声波提取30min，接着以30r/min的速度搅拌均匀，浸提60min，完成后，收集提取液，备用；
S5：醇提取：将S4中剩余的滤渣进行醇提取，按照一定比例添加含量为60％的食用酒精，在50℃的温度下，超声频率为320W，超声波提取30min，接着以30r/min的速度搅拌均匀，浸提180min，完成后，收集提取液，备用；
S6：蒸发浓缩：将S4和S5中的提取液分别进行抽滤，抽滤后将其提取液进行混合，然后放入真空蒸发罐中，将压力调至200mbar，在70℃的温度下，蒸发回收乙醇，并收集滤液，备用；
S7：过滤：将S6中得到的滤液通过0.45μm孔径的滤芯，除去杂质和细菌，得到青梅提取物。
2.根据权利要求1所述的青梅提取物的制备方法，其特征在于，在S4步骤中，所述青梅浓缩膏与去离子水的添加比例为1:15。
3.根据权利要求2所述的青梅提取物的制备方法，其特征在于，在S5步骤中，所述滤渣与食用酒精的添加比例为1:40。
4.一种根据权利要求1-3中任意一项所述的青梅提取物的制备方法制得的青梅提取物，其特征在于，包括总黄酮3％～5％、有机酸30％～35％和梅素0.8％～1.2％。
5.一种根据权利要求4所述的青梅提取物的应用，其特征在于，所述青梅提取物应用于制备化妆品或护肤品中。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220603 |