CN114395598A - 一种胶原蛋白肽的生产方法 - Google Patents
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Abstract
一种胶原蛋白肽的生产方法，包括如下步骤：将生物原料进行预处理；将生物原料切片处理得到薄片；将薄片置于60‑70℃的条件下，并利用紫外光进行薄片上下表面的同时照射；将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。本申请采用将原料切成薄片之后再进行熟化和变性，采用该种方式处理之后再进行酶解提取，得到的蛋白肽的相对分子量集中度变高，利于后期进行更多的功能化配伍。
Description
技术领域
本申请涉及一种胶原蛋白肽的生产方法。
背景技术
胶原蛋白肽是一类以富含胶原蛋白的新鲜动物组织(包括皮、骨、筋、腱、鳞等)为原料，经过提取、水解、精制生产的，相对分子质量低于10000Da的产品。现有的蛋白肽的相对分子量分布范围过于宽泛，现阶段也没有对于其分布范围进行相对准确控制的方法，若后期分离，又大大提高了成本和操作的难度。
发明内容
为了解决上述问题，本申请公开了一种胶原蛋白肽的生产方法，包括如下步骤：
将生物原料进行预处理；
将生物原料切片处理得到薄片；
将薄片置于60-70℃的条件下，并利用紫外光进行薄片上下表面的同时照射；
将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；
酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。本申请采用将原料切成薄片之后再进行熟化和变性，采用该种方式处理之后再进行酶解提取，得到的蛋白肽的相对分子量集中度变高，利于后期进行更多的功能化配伍。
优选的，所述生物原料为牛皮；预处理包括如下步骤：将牛皮进行切块，切块之后清水冲洗后沥干，然后利用乙醇进行浸泡不少于2h，沥干之后再利用1mol/L的氢氧化钠进行浸泡不少于2h，然后沥干后再用清水冲洗干净；将切块的牛皮进行切片，切片得到的薄片的厚度不超过1mm，薄片再经过3wt％的双氧水水溶液进行喷淋。本申请采用双氧水水溶液喷淋首先是能够带来清洁效果，其次对于后期的酶解效果中的分子量分布也有一定的促进效果。
优选的，将双氧水水溶液喷淋之后的薄片进行60-70℃的加热，时间不低于1h，照度不低于200uw/cm2。
优选的，所述酶解按照如下方式进行：
在浆料中加入缓冲液中，料液比为1:1，然后加入蛋白酶，蛋白酶的添加量为5wt％，温度为40-45℃，酶解时间不低于5h。
优选的，所述酶解按照如下方式进行：所述缓冲液为磷酸缓冲液，pH值为7-8，所述磷酸缓冲液由磷酸一氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液配比而成。
优选的，所述蛋白酶为胰蛋白酶。
优选的，所述薄片在单层设置的情况下铺设到一钢丝网片之上，在钢丝网片的上下分别设置紫外灯管，所述紫外灯管朝向钢丝网片设置。本申请采用钢丝网片上铺设设置的方式使得薄片处于加工空间内，也利于后期用网带等方式替代钢丝网片对其进行工业化生产。
优选的，还包括一加热壳体，所述钢丝网片设置在加热壳体当中，在加热壳体的上侧设置一进风口，在加热壳体的下侧设置一出风口，在进风口上设置一加热管，在钢丝网片一侧设置一温度探头。
优选的，所述出风口朝向钢丝网片的一侧设置有分流板，所述分流板的端部与加热壳体的内侧固连设置，在分流板上设置有若干导风出口，所述分流板设置在上部的紫外灯管的上方。
优选的，紫外光为长波紫外光、波长为320-400nm。
本申请能够带来如下有益效果：
1.本申请采用将原料切成薄片之后再进行熟化和变性，采用该种方式处理之后再进行酶解提取，得到的蛋白肽的相对分子量集中度变高，利于后期进行更多的功能化配伍；
2.本申请采用双氧水水溶液喷淋首先是能够带来清洁效果，其次对于后期的酶解效果中的分子量分布也有一定的促进效果；
3.本申请采用钢丝网片上铺设设置的方式使得薄片处于加工空间内，也利于后期用网带等方式替代钢丝网片对其进行工业化生产。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。在附图中：
图1为实施例的流程示意图；
图2为变性装置的示意图。
具体实施方式
为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，对本申请进行详细阐述。
本申请实质上就是一种胶原蛋白肽的生产方法，如图1所示，包括如下步骤：
S1.将生物原料进行预处理；
生物原料为牛皮；预处理包括如下步骤：将牛皮进行切块，切块之后清水冲洗后沥干，然后利用乙醇进行浸泡不少于2h，沥干之后再利用1mol/L的氢氧化钠进行浸泡不少于2h，然后沥干后再用清水冲洗干净。
S2.将生物原料切片处理得到薄片；
将切块的牛皮进行切片，切片得到的薄片的厚度不超过1mm，薄片再经过3wt％的双氧水水溶液进行喷淋。
S3.将薄片置于60-70℃的条件下，并利用紫外光进行薄片上下表面的同时照射；加热时间不低于1h，紫外光照度不低于200uw/cm2，紫外光为长波紫外光、波长为320-400nm。
薄片的加热变性在一变性装置进行，如图2所示，薄片在单层设置的情况下铺设到一钢丝网片1之上，在钢丝网片1的上下分别设置紫外灯管2，紫外灯管2朝向钢丝网片1设置。还包括一加热壳体3，钢丝网片1设置在加热壳体3当中，在加热壳体3的上侧设置一进风口4，在加热壳体3的下侧设置一出风口7，在进风口4上设置一加热管5，在钢丝网片1一侧设置一温度探头6。出风口7朝向钢丝网片1的一侧设置有分流板8，分流板8的端部与加热壳体3的内侧固连设置，在分流板8上设置有若干导风出口，分流板8设置在上部的紫外灯管2的上方。
S4.将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；
在浆料中加入缓冲液中，料液比为1:1，然后加入蛋白酶，蛋白酶的添加量为5wt％，温度为40-45℃，酶解时间不低于5h。酶解按照如下方式进行：缓冲液为磷酸缓冲液，pH值为7-8，磷酸缓冲液由磷酸一氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液配比而成。蛋白酶为胰蛋白酶。
S5.酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。
上述方法是本申请的主要生产工艺，具体生产的实施例和对比例在下文做详细阐述。
实施例1：
S1.将生物原料进行预处理；
生物原料为牛皮；预处理包括如下步骤：将牛皮进行切块，切块之后清水冲洗后沥干，然后利用乙醇进行浸泡2h，沥干之后再利用1mol/L的氢氧化钠进行浸泡2h，然后沥干后再用清水冲洗干净。
S2.将生物原料切片处理得到薄片；
将切块的牛皮进行切片，切片得到的薄片的厚度0.8mm，薄片再经过3wt％的双氧水水溶液进行喷淋。
S3.将薄片置于60-70℃的条件下，并利用紫外光进行薄片上下表面的同时照射；加热时间1h，紫外光照度300uw/cm2，紫外光为长波紫外光、波长为320-400nm。薄片的加热变性在前面所说的变性装置进行。
S4.将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；
在浆料中加入缓冲液中，料液比为1:1，然后加入蛋白酶，蛋白酶的添加量为5wt％，温度为40-45℃，酶解时间5h。酶解按照如下方式进行：缓冲液为磷酸缓冲液，pH值为7-8，磷酸缓冲液由磷酸一氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液配比而成。蛋白酶为胰蛋白酶。
S5.酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。
用GB/T 22729-2008海洋鱼低聚肽粉进行胶原蛋白肽分子量检测，分子量在2000-2500道尔顿的为82％。
实施例2：
S1.将生物原料进行预处理；
生物原料为牛皮；预处理包括如下步骤：将牛皮进行切块，切块之后清水冲洗后沥干，然后利用乙醇进行浸泡3h，沥干之后再利用1mol/L的氢氧化钠进行浸泡3h，然后沥干后再用清水冲洗干净。
S2.将生物原料切片处理得到薄片；
将切块的牛皮进行切片，切片得到的薄片的厚度1mm，薄片再经过3wt％的双氧水水溶液进行喷淋。
S3.将薄片置于60-70℃的条件下，并利用紫外光进行薄片上下表面的同时照射；加热时间1.5h，紫外光照度200uw/cm2，紫外光为长波紫外光、波长为320-400nm。薄片的加热变性在前面所说的变性装置进行。
S4.将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；
在浆料中加入缓冲液中，料液比为1:1，然后加入蛋白酶，蛋白酶的添加量为5wt％，温度为40-45℃，酶解时间6h。酶解按照如下方式进行：缓冲液为磷酸缓冲液，pH值为7-8，磷酸缓冲液由磷酸一氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液配比而成。蛋白酶为胰蛋白酶。
S5.酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。
用GB/T 22729-2008海洋鱼低聚肽粉进行胶原蛋白肽分子量检测，分子量在2000-2500道尔顿的为84％。
实施例3：
S1.将生物原料进行预处理；
生物原料为牛皮；预处理包括如下步骤：将牛皮进行切块，切块之后清水冲洗后沥干，然后利用乙醇进行浸泡2.5h，沥干之后再利用1mol/L的氢氧化钠进行浸泡2.5h，然后沥干后再用清水冲洗干净。
S2.将生物原料切片处理得到薄片；
将切块的牛皮进行切片，切片得到的薄片的厚度0.9mm，薄片再经过3wt％的双氧水水溶液进行喷淋。
S3.将薄片置于65℃的条件下，并利用紫外光进行薄片上下表面的同时照射；加热时间1.2h，紫外光照度250uw/cm2，紫外光为长波紫外光、波长为320-400nm。薄片的加热变性在前面所说的变性装置进行。
S4.将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；
在浆料中加入缓冲液中，料液比为1:1，然后加入蛋白酶，蛋白酶的添加量为5wt％，温度为40-45℃，酶解时间5.5h。酶解按照如下方式进行：缓冲液为磷酸缓冲液，pH值为7-8，磷酸缓冲液由磷酸一氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液配比而成。蛋白酶为胰蛋白酶。
S5.酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。
用GB/T 22729-2008海洋鱼低聚肽粉进行胶原蛋白肽分子量检测，分子量在2000-2500道尔顿的为85％。
对比例1：
S1.将生物原料进行预处理；
生物原料为牛皮；预处理包括如下步骤：将牛皮进行切块，切块之后清水冲洗后沥干，然后利用乙醇进行浸泡2.5h，沥干之后再利用1mol/L的氢氧化钠进行浸泡2.5h，然后沥干后再用清水冲洗干净。
S2.将生物原料切片处理得到薄片；
将切块的牛皮进行切片，切片得到的薄片的厚度0.9mm，薄片再经过3wt％的双氧水水溶液进行喷淋。
S3.将薄片置于65℃的条件下，加热时间1.2h。
S4.将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；
在浆料中加入缓冲液中，料液比为1:1，然后加入蛋白酶，蛋白酶的添加量为5wt％，温度为40-45℃，酶解时间5.5h。酶解按照如下方式进行：缓冲液为磷酸缓冲液，pH值为7-8，磷酸缓冲液由磷酸一氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液配比而成。蛋白酶为胰蛋白酶。
S5.酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。
用GB/T 22729-2008海洋鱼低聚肽粉进行胶原蛋白肽分子量检测，分子量在2000-2500道尔顿的为71％。
对比例2：
S1.将生物原料进行预处理；
生物原料为牛皮；预处理包括如下步骤：将牛皮进行切块，切块之后清水冲洗后沥干，然后利用乙醇进行浸泡2.5h，沥干之后再利用1mol/L的氢氧化钠进行浸泡2.5h，然后沥干后再用清水冲洗干净。
S2.将生物原料切片处理得到薄片；
将切块的牛皮进行切片，切片得到的薄片的厚度0.9mm，薄片再经过水溶液进行喷淋。
S3.将薄片置于65℃的条件下，并利用紫外光进行薄片上下表面的同时照射；加热时间1.2h，紫外光照度250uw/cm2，紫外光为长波紫外光、波长为320-400nm。薄片的加热变性在前面所说的变性装置进行。
S4.将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；
在浆料中加入缓冲液中，料液比为1:1，然后加入蛋白酶，蛋白酶的添加量为5wt％，温度为40-45℃，酶解时间5.5h。酶解按照如下方式进行：缓冲液为磷酸缓冲液，pH值为7-8，磷酸缓冲液由磷酸一氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液配比而成。蛋白酶为胰蛋白酶。
S5.酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。
用GB/T 22729-2008海洋鱼低聚肽粉进行胶原蛋白肽分子量检测，分子量在2000-2500道尔顿的为72％。
对比例3：
S1.将生物原料进行预处理；
生物原料为牛皮；预处理包括如下步骤：将牛皮进行切块，切块之后清水冲洗后沥干，然后利用乙醇进行浸泡2.5h，沥干之后再利用1mol/L的氢氧化钠进行浸泡2.5h，然后沥干后再用清水冲洗干净。
S2.将生物原料切片处理得到薄片；
将切块的牛皮进行切片，切片得到的薄片的厚度1.2mm，薄片再经过3wt％的双氧水水溶液进行喷淋。
S3.将薄片置于65℃的条件下，并利用紫外光进行薄片上下表面的同时照射；加热时间1.2h，紫外光照度250uw/cm2，紫外光为长波紫外光、波长为320-400nm。薄片的加热变性在前面所说的变性装置进行。
S4.将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；
在浆料中加入缓冲液中，料液比为1:1，然后加入蛋白酶，蛋白酶的添加量为5wt％，温度为40-45℃，酶解时间5.5h。酶解按照如下方式进行：缓冲液为磷酸缓冲液，pH值为7-8，磷酸缓冲液由磷酸一氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液配比而成。蛋白酶为胰蛋白酶。
S5.酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。
用GB/T 22729-2008海洋鱼低聚肽粉进行胶原蛋白肽分子量检测，分子量在2000-2500道尔顿的为78％。
以上仅为本申请的实施例而已，并不用于限制本申请。对于本领域技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原理之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的权利要求范围之内。
Claims (10)
1.一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：包括如下步骤：
将生物原料进行预处理；
将生物原料切片处理得到薄片；
将薄片置于60-70℃的条件下，并利用紫外光进行薄片上下表面的同时照射；
将薄片进行破碎得到浆料、然后加入蛋白酶进行酶解；
酶解之后离心取上清液，然后进行超滤、干燥得到最终产品。
2.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：所述生物原料为牛皮；预处理包括如下步骤：将牛皮进行切块，切块之后清水冲洗后沥干，然后利用乙醇进行浸泡不少于2h，沥干之后再利用1mol/L的氢氧化钠进行浸泡不少于2h，然后沥干后再用清水冲洗干净；将切块的牛皮进行切片，切片得到的薄片的厚度不超过1mm，薄片再经过3wt％的双氧水水溶液进行喷淋。
3.根据权利要求2所述的一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：将双氧水水溶液喷淋之后的薄片进行60-70℃的加热，时间不低于1h，照度不低于200uw/cm2。
4.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：所述酶解按照如下方式进行：
在浆料中加入缓冲液中，料液比为1:1，然后加入蛋白酶，蛋白酶的添加量为5wt％，温度为40-45℃，酶解时间不低于5h。
5.根据权利要求4所述的一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：所述酶解按照如下方式进行：所述缓冲液为磷酸缓冲液，pH值为7-8，所述磷酸缓冲液由磷酸一氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液配比而成。
6.根据权利要求4所述的一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：所述蛋白酶为胰蛋白酶。
7.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：所述薄片在单层设置的情况下铺设到一钢丝网片之上，在钢丝网片的上下分别设置紫外灯管，所述紫外灯管朝向钢丝网片设置。
8.根据权利要求7所述的一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：还包括一加热壳体，所述钢丝网片设置在加热壳体当中，在加热壳体的上侧设置一进风口，在加热壳体的下侧设置一出风口，在进风口上设置一加热管，在钢丝网片一侧设置一温度探头。
9.根据权利要求8所述的一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：所述出风口朝向钢丝网片的一侧设置有分流板，所述分流板的端部与加热壳体的内侧固连设置，在分流板上设置有若干导风出口，所述分流板设置在上部的紫外灯管的上方。
10.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白肽的生产方法，其特征在于：紫外光为长波紫外光、波长为320-400nm。
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