CN114306491B - 一种首乌生发胶囊及其制备、检测和成分鉴别方法 - Google Patents

一种首乌生发胶囊及其制备、检测和成分鉴别方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种首乌生发胶囊及其制备、检测和成分鉴别方法，所述首乌生发胶囊包括以下按重量份计的组分：制何首乌20～30份、黄芪5～10份、柴胡5～10份、枸杞子5～10份、山药10～20份、桑葚5～10份。将上述原料按重量份称取；将制何首乌、山药各10份粉碎成细粉A；将剩余药材加水煎煮，水煎煮液滤过、浓缩，干燥、粉碎成细粉B；将细粉A与细粉B混匀，制颗粒，干燥，装入胶囊，即得。参照高效液相色谱法(《中国药典》2020年版)进行含量测定，照薄层色谱法进行成分鉴别，可以客观、全面、准确的评价药品的质量，在保证药品疗效的同时也对保证药品的质量有重要意义。

Description

一种首乌生发胶囊及其制备、检测和成分鉴别方法
技术领域
本发明属于中药技术领域，具体涉及一种首乌生发胶囊及其制备、检测和成分鉴别方法。
背景技术
脱发是指头发脱落的现象。正常脱落的头发都是处于退行期及休止期的毛发，由于进入退行期与新进入生长期的毛发不断处于动态平衡，故能维持正常数量的头发。病理性脱发是指头发异常或过度的脱落，其原因很多。随着生活节奏的加快，工作压力大、熬夜等各种原因导致现在脱发的人群越来越多，对很多人的生活和工作造成了困扰。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供一种首乌生发胶囊及其制备、检测和成分鉴别方法，相较于现今解决脱发的如植发、生发液等方法，该首乌生发胶囊更为安全便捷。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种首乌生发胶囊，包括以下按重量份计的组分：制何首乌20～30份、黄芪5～10份、柴胡5～10份、枸杞子5～10份、山药10～20份、桑葚5～10份。
优选地，包括以下按重量份计的组分：制何首乌20份、黄芪5份、柴胡5份、枸杞子5份、山药15份、桑葚5份。
一种首乌生发胶囊的制备方法，包括以下步骤：
(Ⅰ)按重量份称取制何首乌、黄芪、柴胡、枸杞子、山药、桑葚；
(Ⅱ)将制何首乌、山药各10份粉碎成细粉A；
(Ⅲ)将剩余药材加水煎煮，水煎煮液滤过、浓缩，干燥、粉碎成细粉B；
(Ⅳ)将步骤(Ⅱ)所得的细粉A与步骤(Ⅲ)所得的细粉B混匀，制颗粒，干燥，装入胶囊，即得。
一种首乌生发胶囊的检测方法，包括以下步骤：
(A)色谱条件与系统适用性条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水为流动相；检测波长为310nm；
(B)对照品溶液的制备：精密称取2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷对照品，加甲醇制成每1mL含15μg的溶液，即得；
(C)供试品溶液的制备：取待测样品1.0g，精密称定，置于容器中，精密加入甲醇20mL，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(D)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL；注入液相色谱仪，测定；所述首乌生发胶囊中每1g含制何首乌以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷计不少于0.01mg。
优选地，步骤(A)所述甲醇-水的体积比为30:70。
一种首乌生发胶囊的成分鉴别方法，包括以下步骤：
(1)制何首乌成分的鉴别：
(1-1)供试品溶液的制备：取待测样品2g，加甲醇40mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用乙醚提取2次，每次30mL，乙醚液蒸干，残渣加三氯甲烷1mL溶解作为供试品溶液；
(1-2)对照药材溶液的制备：取制何首乌药材2g，加乙醇30mL，置水浴中加热回流1h，滤过，滤液浓缩至1mL，作为对照药材溶液；
(1-3)照薄层色谱法试验：分别吸取对照药材溶液5μL、供试品溶液10μL，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，即表示存在制何首乌成分；
(2)山药成分的鉴别：
(2-1)供试品溶液的制备：取待测样品2g，加乙醇20mL，加热回流30min，放冷，加三氯甲烷20mL振摇提取，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；
(2-2)对照药材溶液的制备：取山药对照药材2g，加乙醇30mL，置水浴中加热回流1h，滤过，滤液浓缩至1mL，作为对照药材溶液；
(2-3)照薄层色谱法试验：吸取对照药材溶液、供试品溶液各10μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点，即表示存在山药成分。
优选地，步骤(1-3)所述正己烷-乙酸乙酯-甲酸的体积比为6:2:0.1。
优选地，步骤(2-3)所述氯甲烷-丙酮的体积比为4:1。
本发明所选药材药理及方解如下：
制何首乌：气微，味微甘而苦涩。苦、甘、涩，温。归肝、心、肾经。具有补肝肾，益精血，乌须发等功效。用于血虚萎黄、眩晕耳鸣、须发早白、腰膝酸软、肢体麻木、崩漏带下、久疟体虚等。为君药。
黄芪：味甘，性微温；归脾、肺经。补气固表，托毒排脓，利尿，生肌。用于气虚乏力、久泻脱肛、自汗等。为臣药。
柴胡：味辛、苦，性微寒。归肝、胆、肺经。和解表里，疏肝解郁。用于感冒发热、寒热往来、胸胁胀痛等。为使药。
枸杞子：味甘，平。入肝、肾经。滋肾，润肺，补肝。治肝肾阴亏，腰膝酸软，头晕，目眩，目昏多泪，虚劳咳嗽，消渴，遗精。为使药。
山药：味甘，温、平。本经。主治伤中，补脾胃亏损，治气虚衰弱、消化不良、遗精、遗尿及无名肿毒等。为佐药。
桑葚：性味甘寒，具有补肝益肾，补血乌发养颜、生津润燥，乌发明目的功效，可用于肝肾阴亏、腰膝酸软、肠燥便秘、口渴烦热等。为使药。
本发明的有益效果如下：
相较于现今解决脱发的方法，如植发、生发液等，本发明的首乌生发胶囊更为安全便捷。
附图说明
图1为实施例3中对照品的2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷紫外扫描图；
图2为实施例3中检测方法的可行性试验的液相色谱图；
图3为实施例3中检测方法的选择性、专一性试验的液相色谱图；
图4为实施例3中对照品的制何首乌含量测定图；
图5为实施例3中供试品的制何首乌含量测定图；
图6为实施例4中制何首乌的薄层色谱图：1为制何首乌阴性对照品，2为对照药材溶液，3-5为供试品溶液；
图7为实施例4中山药的薄层色谱图：1为对照药材溶液，2为山药阴性对照品；3-5为供试品溶液。
具体实施方式
下面结合附图与具体实施例对本发明做进一步详细说明。但本领域技术人员将会理解，以下实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
一种首乌生发胶囊，包括以下按重量份计的组分：制何首乌20～30份、黄芪5～10份、柴胡5～10份、枸杞子5～10份、山药10～20份、桑葚5～10份。
上述首乌生发胶囊的制备方法，具体步骤如下：
(1)按重量份称取制何首乌、黄芪、柴胡、枸杞子、山药、桑葚。
(2)将制何首乌、山药各10份粉碎成细粉A。
(3)将剩余药材加水煎煮，水煎煮液滤过、浓缩，干燥、粉碎成细粉B。
(4)将细粉A与细粉B混匀，制颗粒，干燥，装入胶囊，即得。
实施例2
一种首乌生发胶囊，包括以下按重量份计的组分：制何首乌20份、黄芪5份、柴胡5份、枸杞子5份、山药15份、桑葚5份。
上述首乌生发胶囊的制备方法，具体步骤如下：
(1)称取制何首乌、山药各10份粉碎成细粉A。
(2)称取取制何首乌10份、山药5份、黄芪5份、柴胡5份、枸杞子5份、桑葚5份加水煎煮，水煎煮液滤过、浓缩，干燥、粉碎成细粉B。
(3)将细粉A与细粉B混匀，制颗粒，干燥，装入胶囊，即得。
实施例3
一种首乌生发胶囊的检测方法，具体为首乌生发胶囊中制何首乌的含量测定，照高效液相色谱法(《中国药典》2020年版)测定。包括以下步骤：
(1)对照品溶液的制备：精密称取2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含15μg的溶液，即得。
(2)供试品溶液的制备：取实施例2制得的首乌生发胶囊1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20mL，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
(3)确定最大紫外吸收波长：精密称取2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷对照品0.3mg于10mL量瓶中，甲醇稀释并加至刻度，以甲醇为空白对照，在200～400nm之间扫描，得吸收图谱如图1所示，由图1可以看出，于310nm处有最大吸收峰。
(4)确定该检测方法的可行性：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(30:70，V/V)为流动相；检测波长为310nm。理论板数按2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于4000，精密吸取对照品溶液20μL，注入液相色谱仪，连续测定5次，得到检测结果如图2所示，由图2可知，理论塔板数，分离度，重复性和拖尾因子均符合要求。
(5)确定该检测方法的选择性、专一性：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(30:70，V/V)为流动相；检测波长为310nm。理论板数按2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于4000，精密吸取甲醇2μL。注入液相色谱仪，测定，得到检测结果如图3所示，由图3可知，该方法选择性、专一性良好。
(6)综上，可以得出色谱条件与系统适用性条件为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(30:70，V/V)为流动相；检测波长为310nm。理论板数按2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于4000。
(7)分别精密吸取对照品与供试品溶液各20μL。注入液相色谱仪，测定，得到检测结果。
本品每1g含制何首乌以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷计不得少于0.01mg。
如图4所示为对照品溶液中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷含量测定图，如图5所示为供试品溶液中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷含量测定图，图5显示供试品与图4的对照品一样，于同一时间(22至27分钟左右)出峰，因此可以推断供试品中含有对照药材中的制何首乌成分。
实施例4
一种首乌生发胶囊的成分鉴别方法，具体步骤如下：
1、制何首乌成分的鉴别
(1)供试品溶液的制备：取实施例2制得的首乌生发胶囊2g，加甲醇40mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用乙醚提取2次，每次30mL，乙醚液蒸干，残渣加三氯甲烷1mL溶解作为供试品溶液。
(2)对照药材溶液的制备：取制何首乌药材2g，加乙醇30mL，置水浴中加热回流1h，滤过，滤液浓缩至1mL，作为对照药材溶液。
(3)照薄层色谱法试验：分别吸取对照药材溶液5μL、供试品溶液10μL，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(6:2:0.1，V/V/V)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点清晰。
如图6所示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，可判为供试品中含有对照药材中的制何首乌成分。
2、山药成分的鉴别
(1)供试品溶液的制备：取实施例2制得的首乌生发胶囊2g，加乙醇20mL，加热回流30min，放冷，加三氯甲烷20mL振摇提取，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。
(2)对照药材溶液的制备：取山药对照药材2g，加乙醇30mL，置水浴中加热回流1h，滤过，滤液浓缩至1mL，作为对照药材溶液。
(3)照薄层色谱法试验：吸取对照药材溶液、供试品溶液各10μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮(4:1，V/V)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
如图7所示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点，可判为供试品中含有对照药材中的山药成分。
测试例1
统计收治门诊患者100例，其中男50例，女50例。年龄25-35岁男25例，女25例，35-55岁男25例，女25例。
治疗措施：服用本发明的首乌生发胶囊，每日2次，连续服用30天为一个疗程。
疗效评定标准：
治愈——皮损消退，自觉症状减轻；
显效——脱发改善70％以上，自觉症状减轻；
好转——脱发改善20％以上，自觉症状减轻；
无效——脱发改善不足10％或继续脱落，症状无改变。
治疗结果如下表1所示：
表1疗效观察统计情况表
疗程 治愈 显效 好转 无效 有效率
1 13例 14例 16例 57例 43％
2 20例 16例 20例 44例 66％
3 31例 21例 24例 24例 76％
本发明的首乌生发胶囊100例临床观察，结果表明：治愈31例(25-35岁男7例，女6例；35-55岁男10例，女8例)，显效21例(25-35岁男6例，女4例；35-55岁男6例，女5例)，好转24例(25-35岁男5例，女5例；35-55岁男7例，女7例)，无效24例(25-35岁男7例，女10例；35-55岁男2例，女5例)；显效率52％，好转率24％，总有效率76％。
典型病例：
王某某，男，42岁，河北省石家庄市人。就诊时自述：1年前出现头皮溢脂，伴呈片状脱发，多种治疗方法，均无显效。服用本发明实施例2药物1个月后，脱发改善70％以上，自觉症状减轻。后又继续服用了2个月，皮损消退，自觉症状减轻。
周某某，女，36岁，浙江省丽水市人。就诊时自述：4个月前出现头皮溢脂，头顶头皮可见，多种治疗方法，均无显效。服用本发明实施例2药物1个月后，脱发改善20％以上，自觉症状减轻。后又继续服用了2个月，皮损消退，自觉症状减轻。
以上所述仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围不限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。

Claims (5)

1.一种首乌生发胶囊，其特征在于，由以下按重量份计的组分制成：制何首乌20～30份、黄芪5～10份、柴胡5～10份、枸杞子5～10份、山药10～20份、桑葚5～10份。
2.根据权利要求1所述的一种首乌生发胶囊，其特征在于，由以下按重量份计的组分制成：制何首乌20份、黄芪5份、柴胡5份、枸杞子5份、山药15份、桑葚5份。
3.权利要求1或2所述的一种首乌生发胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(Ⅰ)按重量份称取制何首乌、黄芪、柴胡、枸杞子、山药、桑葚；
(Ⅱ)将制何首乌、山药各10份粉碎成细粉A；
(Ⅲ)将剩余药材加水煎煮，水煎煮液滤过、浓缩，干燥、粉碎成细粉B；
(Ⅳ)将步骤(Ⅱ)所得的细粉A与步骤(Ⅲ)所得的细粉B混匀，制颗粒，干燥，装入胶囊，即得。
4.权利要求1或2所述的一种首乌生发胶囊的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(A)色谱条件与系统适用性条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水为流动相；检测波长为310nm；所述甲醇-水的体积比为30:70；
(B)对照品溶液的制备：精密称取2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷对照品，加甲醇制成每1mL含15μg的溶液，即得；
(C)供试品溶液的制备：取待测样品1.0g，精密称定，置于容器中，精密加入甲醇20mL，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(D)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL；注入液相色谱仪，测定；所述首乌生发胶囊中每1g含制何首乌以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷计不少于0.01mg。
5.权利要求1或2所述的一种首乌生发胶囊的成分鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)制何首乌成分的鉴别：
(1-1)供试品溶液的制备：取待测样品2g，加甲醇40mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，用乙醚提取2次，每次30mL，乙醚液蒸干，残渣加三氯甲烷1mL溶解作为供试品溶液；
(1-2)对照药材溶液的制备：取制何首乌药材2g，加乙醇30mL，置水浴中加热回流1h，滤过，滤液浓缩至1mL，作为对照药材溶液；
(1-3)照薄层色谱法试验：分别吸取对照药材溶液5μL、供试品溶液10μL，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，即表示存在制何首乌成分；所述正己烷-乙酸乙酯-甲酸的体积比为6:2:0.1；
(2)山药成分的鉴别：
(2-1)供试品溶液的制备：取待测样品2g，加乙醇20mL，加热回流30min，放冷，加三氯甲烷20mL振摇提取，三氯甲烷液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液；
(2-2)对照药材溶液的制备：取山药对照药材2g，加乙醇30mL，置水浴中加热回流1h，滤过，滤液浓缩至1mL，作为对照药材溶液；
(2-3)照薄层色谱法试验：吸取对照药材溶液、供试品溶液各10μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点，即表示存在山药成分；所述三氯甲烷-丙酮的体积比为4:1。
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