CN114306190A - 一种滇黄精提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种滇黄精提取物及其制备方法和应用，制备方法简单易行，提取过程不使用乙醇、甲醇等有机试剂，所得滇黄精提取物多糖含量较高，且滇黄精提取物具有较强的细胞划痕修复能力、紫外损伤修复能力、炎症因子抑制能力、促进伤口愈合能力，同时不具有致敏性和刺激性，可以作为修复、抗炎活性成分应用在护肤品及医药辅助用品中，起到修复、抗炎、抗刺激、舒敏等作用。

Description

一种滇黄精提取物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种滇黄精提取物及其制备方法和应用。

背景技术

黄精作为一种广泛使用的药食两用中药材，《中国药典》2020年版对其有详细的记载，其根呈肥厚肉质的结节块状，结节长可达10cm以上，宽3～6cm，厚2～3cm。表面淡黄色至黄棕色，具环节，有皱纹及须根痕，结节上侧茎痕呈圆盘状，圆周凹入，中部突出。质硬而韧，不易折断，断面角质，淡黄色至黄棕色。气微，味甜，嚼之有黏性。味苦者不可药用。

黄精，甘，平。归脾、肺、肾经。可补气养阴，健脾，润肺，益肾。用于脾胃气虚，体倦乏力，胃阴不足，口干食少，肺虚燥咳，劳嗽咳血，精血不足，腰膝酸软，须发早白，内热消渴。

黄精历代入药生制兼用，但传统以黄精生用“刺入咽喉”，故多炮制后入药。传统认为黄精如果不炮制或炮制不合理，很可能就会引起某些副作用，所以临床上不应使用生黄精，而应用制黄精或酒黄精。通过炮制，一方面可降低其毒副作用，消除麻味，减轻对咽喉的刺激，另一方面可提高黄精的临床疗效，增强药物补脾润肺、益肾的作用[钟凌云,龚千锋,张的凤,等.黄精炮制研究现状分析[J].中药材,2007,30(12):4.]。

传统的炮制方式虽然会在一定程度上去除黄精中的刺激性成分，同时也会导致黄精中的有效物质流失，且传统的炮制工艺比如九蒸九晒，工艺繁杂，步骤繁多，批次间的稳定性较难控制。

目前，采用现代提取技术对黄精有效成分进行提取的研究，提取方式通常为醇水溶液提取后，再用大孔树脂进行富集[卫冰,许闽,于雷,等.黄精低聚糖的分离纯化及结构分析[J].中成药,2012,34(4):694-697]。由于使用了高比例的乙醇进行提取富集，因此对提取设备的要求有了较高的要求，而且会带来一定的危险性，有机试剂乙醇也会在提取物中残留，不利于提取物的广泛使用。这种方法通过乙醇水溶液加热提取，然后用大孔树脂进行富集，虽然得到的提取物中有时富含糖类物质，但对于得到的提取物是否仍具有刺激性，是否适用在敏感型皮肤人群，以及是否具有毒性，鲜有研究。

黄精化学成分的研究显示，其富含多糖、寡聚糖、生物碱、皂苷、黄酮等多种类型的活性物质。近年来虽进行了大量研究，但仍不够深入，黄精质量控制指标是什么，黄精的化学成分当中，如甾体皂苷、多糖、黄酮、生物碱等，哪些为传统药性的重要的有效成分，哪些为引起刺激等不良反应的成分，至今未见有深入的报道。

中药的生物活性通常是多种化学成分协同作用的结果，对药材中的化学成分分离纯化后的单一成分往往活性会减弱或消失，尤其是对于黄精这种本身具有一定刺激性的中药材，其提取物的获得，需要更加复杂和小心的试探，才能获得活性与安全具备的提取物。

因此，研究一种提取工艺安全环保、有效成分清晰、安全无刺激、生物活性明确的滇黄精提取物，意义重大。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种滇黄精提取物及其制备方法和应用，制备方法简单易行，提取过程不使用乙醇、甲醇等有机试剂，所得滇黄精提取物多糖含量较高，且配制成4mg/mL溶液后，5-羟甲基糠醛含量低于0.01％。所得滇黄精提取物具有较强的细胞划痕修复能力、紫外损伤修复能力和炎症因子抑制能力，同时不具有致敏性和刺激性，动物实验显示，其具有促进伤口愈合能力，可以作为修复、抗炎活性成分应用在护肤品及医药辅助用品中，起到修复、抗炎、抗刺激、舒敏等作用。

实现上述目的一种技术方案是：一种滇黄精提取物的制备方法，包括以下步骤:

S1，将滇黄精药材粉碎后加入提取罐中，然后加入纯化水，并通入氮气充分排出提取罐中的原始气体，使提取罐内的环境在氮气的包围之中，然后进行加热，使纯化水温度升高为160℃～220℃进行提取，此时提取用的纯化水处于亚临界状态，可以更全面的提取药材中的成分；所述纯化水的用量为滇黄精药材重量的5～10倍；提取时间为20分钟～1小时；

S2，在提取罐中的提取液冷却至60℃以下时，过滤除去药渣，并将滤液减压浓缩，得到黑色浓缩液；

S3，在黑色浓缩液中加入吸附剂，混合均匀后布氏漏斗抽滤，并用10～20倍滇黄精药材重量的纯化水对吸附剂进行淋洗，得到深棕色的滇黄精滤液；所述吸附剂为非极性大孔树脂HPD-100或HPD-300；所述吸附剂的用量为药材重量的2倍～4倍；

S4，向滇黄精滤液中加入PH调节剂，将滇黄精滤液调节至PH＜7；

S5，用活性炭对调节好PH值的滇黄精滤液脱色，所述活性炭用量为滇黄精滤液重量的2％～4％，脱色后所得脱色液用0.1μm孔径的聚四氟乙烯亲水PTFE微孔滤膜进行过滤，除去脱色液中的微粒和菌体杂质，得到无色透明且具有特征性甜味的滇黄精提取液，将滇黄精提取液干燥后得到滇黄精提取物。

上述的一种滇黄精提取物，步骤S1中，所述滇黄精药材为百合科黄精属草本植物滇黄精的干燥根茎。

上述的一种滇黄精提取物，步骤S4中，所述PH调节剂为食用苹果酸或柠檬酸，且通过PH调节剂将滇黄精滤液调节至PH为4.0～6.0。

上述的一种滇黄精提取物，步骤S5中，所述活性炭为767型针用活性炭，所述滇黄精提取液冷冻干燥或者喷雾干燥后得到滇黄精提取物。

本发明还提供了一种滇黄精提取物，采用上述的滇黄精提取物的制备方法制备而成。

上述的一种滇黄精提取物，其中，所述滇黄精提取物中的总多糖含量为滇黄精提取物重量的80％至100％；所述滇黄精提取物中的蛋白含量低于滇黄精提取物重量的0.01％。

上述的一种滇黄精提取物，其中，将所述滇黄精提取物用5％戊二醇溶液配制成4mg/mL的溶液后，该溶液中5-羟甲基糠醛的含量低于0.01％。

上述的一种滇黄精提取物，其中，所述滇黄精提取物具有细胞划痕修复活性、紫外损伤修复能力、炎症因子抑制作用和促进伤口愈合作用。

上述的一种滇黄精提取物，其中，采用H-CLAT测试所述滇黄精提取物的致敏性，在0.5mg/mL浓度以下时，不具有致敏性。

本发明还提供了一种上述的滇黄精提取物的应用，所述滇黄精提取物作为修复、抗炎活性成分应用在护肤品及医药辅助用品中。

本发明的滇黄精提取物及其制备方法的技术方案，具有以下有益效果：

(1)本发明的滇黄精提取物在提取的全过程不使用甲醇乙醇等有机试剂，在环保、安全方面有显著提升；

(2)本发明的滇黄精提取物是通过采用160℃以上的水对滇黄精进行短时间提取，不仅促进了滇黄精刺激性化学成分的转化，还保证了提取的充分性；

(3)本发明的滇黄精提取物溶于水后，无色、澄清、透明，具有特征性甜味，显著区别于传统炮制后黄精的黑褐色性状；

(4)本发明的滇黄精提取物富含功效性糖类成分，同时5-羟甲基糠醛含量极低，确保了其安全性和功效性；

(5)本发明的滇黄精提取物具有显著的细胞划痕修复能力、紫外损伤后修复能力和炎症因子抑制能力；

(6)本发明的滇黄精提取物在H-CLAT模型上不具有致敏性；动物实验显示其不具有刺激性。

(7)本发明的滇黄精提取物在豚鼠模型上测试伤口愈合能力，结果显示其具有显著的促进伤口愈合能力。

本发明的滇黄精提取物，可以作为修复、抗炎活性成分应用在护肤品及医药辅助用品中。

附图说明

图1为不同浓度活性炭脱色后的收率和5-HMF含量图；

图2为滇黄精提取物在孵育不同时间后对细胞划痕的修复能力测定结果图；

图3a为不同浓度滇黄精提取物对RAW264.7细胞的炎症因子抑制作用图(IL-6ELISA相对表达量)；

图3b为不同浓度滇黄精提取物对RAW264.7细胞的炎症因子抑制作用图(NO分泌相对表达量)；

图3c为不同浓度滇黄精提取物对RAW264.7细胞的炎症因子抑制作用图(TNF-αELISA相对表达量)

图4为H-CLAT模型测定所得滇黄精提取物的致敏性的结果图；

图5a为滇黄精提取物对UVA紫外损伤修复能力测定结果图；

图5b为滇黄精提取物对UVB紫外损伤修复能力测定结果图；

图6为豚鼠模型测定所得滇黄精提取物的伤口愈合能力的病理切片对比图。

具体实施方式

为了使本技术领域的技术人员能更好地理解本发明的技术方案，下面结合附图对其具体实施方式进行详细地说明：

下列实例中的溶剂配制均为质量比。

活性炭脱色研究：

滇黄精提取物的制备方法，包括以下步骤：

S1，称取风干后的滇黄精药材400g，粉碎后加入提取罐中，加入纯化水3.2L，密封提取罐，用20L/min氮气鼓吹提取液5min，然后开启加热至170℃，并在170℃保温提取20min，170℃的纯化水形成亚临界水；

S2，提取罐中的提取液降温至50℃，用200目滤网过滤除去药渣，得黑褐色滤液，并将黑褐色滤液减压浓缩至440g(也可约等于滇黄精药材的重量)，得黑色浓缩液；

S3，在黑色浓缩液中加入1000gHPD-100型号大孔树脂(吸附剂)，混合均匀后布氏漏斗抽滤，并用7.6L纯化水冲洗大孔树脂，得深棕色的滇黄精滤液；

S4，用纯化水将滇黄精滤液稀释至10L，并加入柠檬酸(PH调节剂)，调整PH至4.9；

S5，用活性炭对调节好PH值的滇黄精滤液脱色，分别取步骤S4中调节好PH值的滇黄精滤液，按表1不同的活性炭添加量进行分组，进行脱色研究，脱色时间1小时，脱色温度50℃：

组别

A

B

C

D

E

F

G

H

I

J

滤液量

1L

1L

1L

1L

1L

1L

1L

1L

1L

1L

活性炭量

/

5g

10g

15g

20g

25g

30g

40g

50g

60g

表1

请参阅图1，脱色后，用0.1μm的滤膜过滤，对所得脱色液的收率和5-HMF含量进行测定，结果见附图1。随着活性炭用量的增加，提取液的颜色逐渐变淡，至D组颜色几乎全部消失；随着活性炭用量的增加，提取液中干物质的收率逐渐降低，但都保持在70％以上的收率；随着活性炭用量的增加，脱色液中的5-HMF的含量逐渐下降，至E组降至0.01％以下。

随着活性炭使用量的增加，滇黄精提取物的总收率会降低、提取液的色泽会变淡、5-HMF的含量会显著降低。因此，为了平衡5-HMF的含量、收率、色泽，优选的活性炭用量为滇黄精滤液重量的2％～4％，所选的活性炭为767型针用活性炭。

脱色后所得脱色液用0.1μm孔径的聚四氟乙烯亲水PTFE微孔滤膜进行过滤，除去其中的微粒和菌体等杂质，得到澄清透明，具有特征性甜味的滇黄精提取液，将滇黄精提取液干燥后得到滇黄精提取物。干燥方式为冷冻干燥或者喷雾干燥，干燥后即得滇黄精亚临界提取物。冷冻干燥后提取物总得率＞20％；喷雾干燥后提取物的总得率大于15％。

实施例1：

一种滇黄精提取物，采用以下制备方法制备而成：

S1，称取风干后的滇黄精药材500g，粉碎后加入提取罐中，加入纯化水5L，密封提取罐，用20L/min氮气鼓吹提取液5min，然后开启加热至170℃，并在170℃保温提取50min，170℃的纯化水形成亚临界水；

S2，提取罐中的提取液降温至50℃，用200目滤网过滤除去药渣，得黑褐色滤液，并将黑褐色滤液减压浓缩至600g(也可约等于滇黄精药材的重量)，得黑色浓缩液；

S3，在黑色浓缩液中加入900gHPD-100型号大孔树脂(吸附剂)，混合均匀后布氏漏斗抽滤，并用5.4L纯化水冲洗大孔树脂，得深棕色的滇黄精滤液；

S4，用纯化水将滇黄精滤液稀释至10L，并加入苹果酸(PH调节剂)，调整PH至4.9；

S5，在调节好PH值的滇黄精滤液中加入200g活性炭，60℃下搅拌脱色1小时，用0.1μm孔径的聚四氟乙烯亲水PTFE微孔滤膜进行过滤除去活性炭，除去脱色液中的微粒和菌体杂质，得无色澄明的滇黄精提取液；将所得滇黄精提取液采用喷雾干燥法进行干燥，得到淡黄色固体粉末187.8g。

采用硫酸苯酚法测定，滇黄精提取物中的总糖含量为91.04％；将滇黄精提取物用5％戊二醇配制成4mg/mL的溶液后，采用HPLC法测定提取物中的5-HMF的含量，5-羟甲基糠醛的含量低于0.001％；采用考马斯亮蓝染色法测定滇黄精提取物中的总蛋白含量，结果显示其中的总蛋白含量＜0.01％(低于检出限)。

实施例2：

一种滇黄精提取物，采用以下制备方法制备而成：

S1，称取风干后的滇黄精药材500g，粉碎后加入提取罐中，加入纯化水3L，密封提取罐，用20L/min氮气鼓吹提取液5min，然后开启加热至190℃，并在190℃保温提取20min，190℃的纯化水形成亚临界水；

S2，提取罐中的提取液降温至50℃，用200目滤网过滤除去药渣，得黑褐色滤液，并将黑褐色滤液减压浓缩至600g(也可约等于滇黄精药材的重量)，得黑色浓缩液；

S3，在黑色浓缩液中加入1200gHPD-300型号大孔树脂(吸附剂)，混合均匀后布氏漏斗抽滤，并用8.4L纯化水冲洗大孔树脂，得深棕色的滇黄精滤液；

S4，用纯化水将滇黄精滤液稀释至10L，并加入苹果酸(PH调节剂)，调整PH至4.8；

S5，在调节好PH值的滇黄精滤液中加入400g活性炭，55℃下搅拌脱色80分钟，用0.1μm孔径的聚四氟乙烯亲水PTFE微孔滤膜进行过滤，除去活性炭，除去脱色液中的微粒和菌体杂质，得无色澄明的滇黄精提取液；将所得滇黄精提取液采用冷冻干燥法进行干燥，得到微黄色固体粉末206.5g。

采用硫酸苯酚法测定，滇黄精提取物中的总糖含量为93.04％；将滇黄精提取物用5％戊二醇配制成4mg/mL的溶液后，采用HPLC法测定提取物中的5-HMF的含量，5-羟甲基糠醛的含量低于0.001％；采用考马斯亮蓝染色法测定滇黄精提取物中的总蛋白含量，结果显示其中的总蛋白含量＜0.01％(低于检出限)。

实施例3：

一种滇黄精提取物，采用以下制备方法制备而成：

S1，称取风干后的滇黄精药材200g，粉碎后加入提取罐中，加入纯化水1.6L，密封提取罐，用20L/min氮气鼓吹提取液5min，然后开启加热至200℃，并在200℃保温提取20min，200℃的纯化水形成亚临界水；

S2，提取罐中的提取液降温至50℃，用200目滤网过滤除去药渣，得黑褐色滤液，并将黑褐色滤液减压浓缩至220g(也可约等于滇黄精药材的重量)，得黑色浓缩液；

S3，在黑色浓缩液中加入500gHPD-100型号大孔树脂(吸附剂)，混合均匀后布氏漏斗抽滤，并用3.8L纯化水冲洗大孔树脂，得深棕色的滇黄精滤液；

S4，用纯化水将滇黄精滤液稀释至5L，并加入柠檬酸(PH调节剂)，调整PH至4.9；

S5，在调节好PH值的滇黄精滤液中加入175g活性炭，55℃下搅拌脱色90分钟，用0.1μm孔径的聚四氟乙烯亲水PTFE微孔滤膜进行过滤，除去活性炭，除去脱色液中的微粒和菌体杂质，得无色澄明的滇黄精提取液；将所得滇黄精提取液采用喷雾干燥法进行干燥，得到淡黄色固体粉末79.4g。

采用硫酸苯酚法测定，滇黄精提取物中的总糖含量为91.84％；将滇黄精提取物用5％戊二醇配制成4mg/mL的溶液后，采用HPLC法测定提取物中的5-HMF的含量，5-羟甲基糠醛的含量低于0.001％；采用考马斯亮蓝染色法测定滇黄精提取物中的总蛋白含量，结果显示其中的总蛋白含量＜0.01％(低于检出限)。

滇黄精提取物中的总糖含量测定：

以葡萄糖为对照品，采用硫酸苯酚法测定采用本发明的制备方法得到的滇黄精提取物中的总糖含量。

取葡萄糖对照品，配制成0.64mg/mL的标准品溶液，用倍半稀释法将其稀释成0.32mg/mL，0.16mg/mL，0.08mg/mL，0.04mg/mL的标准品溶液；按实施例3所述方法制备3批滇黄精提取物，分别配制成0.52mg/mL，0.48mg/mL，0.51mg/mL的溶液，作为待测样。取标准品溶液和待测样各1mL，加入1mL的4％的苯酚溶液，混匀后加入4mL的浓硫酸，混匀后室温静置20分钟，在485nm下测定吸光度。以吸光度和标准品溶液浓度为坐标绘制标准曲线：

y＝1.3602x+0.0682R²＝0.9914

其中，y为吸光度，x为总糖浓度，R²为数据相关性系数。

经计算，三批次滇黄精提取物中总糖含量如表2所示：

批次	1	2	3
				总糖含量	90.7％	93.5％	91.4％

表2

采用该方法测定常规提取方式获得的滇黄精提取物中的总糖含量，结果显示其多糖含量约为53.6％。常规提取方式为100g滇黄精药材，80％乙醇回流提取1小时，除去药渣后减压浓缩即得滇黄精提取物。

滇黄精提取物中的5-HMF含量测定：

以5-HMF为对照品，采用高效液相色谱法测定采用本发明的制备方法得到的滇黄精提取物中的5-HMF含量。

取5-HMF对照品，配制成0.55mg/mL的标准品溶液，用倍半稀释法将其稀释成0.275mg/mL，0.138mg/mL，0.069mg/mL，0.035mg/mL，0.017mg/mL的标准品溶液；按实施例3所述方法制备三批次黄精提取物，用5％戊二醇配制成4mg/mL的滇黄精提取液，另取常规提取获得的滇黄精提取物，用5％戊二醇配制成4mg/mL的溶液，作为待测样。取标准品溶液和待测样用HPLC进行分析，对5-HMF的色谱峰进行积分，以积分面积和浓度为坐标绘制标准曲线：

y＝5645.6x-13.741R²＝0.9999

其中，y为积分面积，x为5-HMF的浓度，R²为数据相关性系数。

经计算，三批次滇黄精提取物中5-HMF含量如表3所示：

组别	1	2	3	常规提取
					5-HMF含量	0.23％	0.17％	0.21％	14.22％

表3

采用本发明的制备方法获得的滇黄精提取物中5-HMF含量显著低于常规提取所获得的滇黄精提取物，其中5-HMF在4mg/mL的滇黄精提取液中的含量均低于0.001％。

以牛血清蛋白为对照品，采用考马斯亮蓝染色法测定按实施例3所述方法制备的三批次黄精提取物中的水溶性蛋白含量，结果显示三个批次中均为检出水溶性蛋白，说明本发明的制备方法对滇黄精中的蛋白去除比较彻底。

请参阅图2，以人永生化角质形成细胞HaCaT为模型，采用细胞划痕修复评价方法，评价本发明的滇黄精提取物对角质层细胞的修复能力，结果显示其在0.1％浓度时，孵育16小时后，划痕愈合94％；孵育24小时后，划痕愈合100％。对划痕的修复能力与1000IU/mL的阳性EGF相当，具有较强的修复能力，滇黄精提取物对细胞划痕修复能力结果见表4。

表4

请参阅图3a、图3b和图3c，采用巨噬细胞RAW264.7评价滇黄精提取物在240μg/mL和120μg/mL时对不同炎症因子的抑制作用，结果显示本发明的滇黄精提取物对IL-6(图3a)、NO(图3b)、TNF-α(图3c)均具有极显著的抑制作用，对炎症因子的抑制可以有效的舒缓皮肤的敏感症状，因此本发明所得滇黄精提取物可以作为活性物质加入健康产品中起到舒缓的作用。CTRL表示控制组；LPS表示模型组；DEX表示地塞米松组；H表示滇黄精提取物240μg/mL；I表示滇黄精提取物120μg/mL。

请参阅图4，采用人急性单核细胞白血病细胞株THP-1，通过h-CLAT细胞实验验证所得滇黄精提取物的致敏性，结果显示本发明的滇黄精提取物在0.5mg/mL浓度及以下时无致敏性。

请参阅图5a和图5b，采用HaCaT人永生化角质形成细胞构建的光损伤模型，测定滇黄精提取物在30μg/mL、60μg/mL、120μg/mL时对紫外损伤后的细胞修复能力，结果显示本发明所得滇黄精提取物在30μg/mL、60μg/mL、120μg/mL对UVA(图5a)损伤后的细胞均具有显著的修复能力，且修复能力随浓度提升而提升；本发明所得滇黄精提取物在120μg/mL对UVB(图5b)损伤后的细胞具有显著的修复能力。本发明所得滇黄精提取物可以作为活性物添加到晒后修复的产品中，起到皮肤损伤后修复作用。

请参阅图6，采用伤口愈合实验，考察本发明所得滇黄精提取物对伤口愈合的作用，取本发明所得提取物，配制成75μg/mL的溶液，空白组选用去离子水。试验方法如下：

选健康白色豚鼠15只，剃去每只动物背部脊柱二侧5cm×5cm左右范围的被毛，用手术刀作无菌操作，在两侧皮肤作“一”字形切口(以渗血为度)后，涂抹样品。每天1次，连续5天后处死动物，解剖，取皮肤切口试验区作病理切片，进行组织学观察。

试验结果：

样品病理切片在显微镜下标尺测量的伤口宽度和深度的平均数结果见表5：

表5

请参阅图6，采用豚鼠测试滇黄精提取物的促进伤口愈合能力，伤口愈合实验结果显示在75μg/mL浓度时，滇黄精提取物比其他样品伤口的宽度和深度小，可以显著促进伤口愈合，故有一定的促进皮肤伤口的愈合作用。

采用家兔，按照《化妆品安全技术规范》2015版测定其皮肤刺激，结果显示该提取物不具有皮肤刺激性；按照《化妆品安全技术规范》2015版测定所得滇黄精提取物的眼刺激性，结果显示该提取物不具有眼刺激性。

本发明的滇黄精提取物在提取的全过程不使用甲醇乙醇等有机试剂，在环保、安全方面有显著提升；是通过采用160℃以上的水对滇黄精进行短时间提取，不仅促进了滇黄精刺激性化学成分的转化，还保证了提取的充分性；本发明的滇黄精提取物溶于水后，无色、澄清、透明，具有特征性甜味，显著区别于传统炮制后黄精的黑褐色性状；本发明的滇黄精提取物富含功效性糖类成分，同时5-羟甲基糠醛含量极低，确保了其安全性和功效性；本发明的滇黄精提取物具有显著的细胞划痕修复能力、紫外损伤后修复能力和炎症因子抑制能力；本发明的滇黄精提取物在H-CLAT模型上不具有致敏性；动物实验显示其不具有刺激性。

本发明的滇黄精提取物，可以作为修复、抗炎活性成分应用在护肤品及医药辅助用品中。

综上所述，本发明的滇黄精提取物及其制备方法和应用，制备方法简单易行，提取过程不使用乙醇、甲醇等有机试剂，所得滇黄精提取物多糖含量较高，且滇黄精提取物具有较强的细胞划痕修复能力、紫外损伤修复能力和炎症因子抑制能力，同时不具有致敏性和刺激性，可以作为修复、抗炎活性成分应用在护肤品及医药辅助用品中，起到修复、抗炎、抗刺激、舒敏等作用。

本技术领域中的普通技术人员应当认识到，以上的实施例仅是用来说明本发明，而并非用作为对本发明的限定，只要在本发明的实质精神范围内，对以上所述实施例的变化、变型都将落在本发明的权利要求书范围内。

Claims (10)

1.一种滇黄精提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:

S1，将滇黄精药材粉碎后加入提取罐中，然后加入纯化水，并通入氮气充分排出提取罐中的原始气体，使提取罐内的环境在氮气的包围之中，然后进行加热，使纯化水温度升高为160℃～220℃，进行提取；所述纯化水的用量为滇黄精药材重量的5～10倍；提取时间为20分钟～1小时；

S2，在提取罐中的提取液冷却至60℃以下时，过滤除去药渣，并将滤液减压浓缩，得到黑色浓缩液；

S3，在黑色浓缩液中加入吸附剂，混合均匀后布氏漏斗抽滤，并用10～20倍滇黄精药材重量的纯化水对吸附剂进行淋洗，得到深棕色的滇黄精滤液；所述吸附剂为非极性大孔树脂HPD-100或HPD-300；所述吸附剂的用量为药材重量的2倍～4倍；

S4，向滇黄精滤液中加入PH调节剂，将滇黄精滤液调节至PH＜7；

S5，用活性炭对调节好PH值的滇黄精滤液脱色，所述活性炭用量为滇黄精滤液重量的2％～4％，脱色后所得脱色液用0.1μm孔径的聚四氟乙烯亲水PTFE微孔滤膜进行过滤，除去脱色液中的微粒和菌体杂质，得到无色透明且具有特征性甜味的滇黄精提取液，将滇黄精提取液干燥后得到滇黄精提取物。

2.如权利要求1所述的一种滇黄精提取物，其特征在于，步骤S1中，所述滇黄精药材为百合科黄精属草本植物滇黄精的干燥根茎。

3.如权利要求1所述的一种滇黄精提取物，其特征在于，步骤S4中，所述PH调节剂为食用苹果酸或柠檬酸，且通过PH调节剂将滇黄精滤液调节至PH为4.0～6.0。

4.如权利要求1所述的一种滇黄精提取物，其特征在于，步骤S5中，所述活性炭为767型针用活性炭，所述滇黄精提取液冷冻干燥或者喷雾干燥后得到滇黄精提取物。

5.一种滇黄精提取物，其特征在于，采用如权利要求1至4任意一项所述的滇黄精提取物的制备方法制备而成。

6.如权利要求5所述的一种滇黄精提取物，其特征在于，所述滇黄精提取物中的总多糖含量为滇黄精提取物重量的80％至100％；所述滇黄精提取物中的蛋白含量低于滇黄精提取物重量的0.01％。

7.如权利要求5所述的一种滇黄精提取物，其特征在于，将所述滇黄精提取物用5％戊二醇溶液配制成4mg/mL的溶液后，该溶液中5-羟甲基糠醛的含量低于0.01％。

8.如权利要求5所述的一种滇黄精提取物，其特征在于，所述滇黄精提取物具有细胞划痕修复活性、紫外损伤修复能力、炎症因子抑制作用和促进伤口愈合作用。

9.如权利要求5所述的一种滇黄精提取物，其特征在于，采用H-CLAT测试所述滇黄精提取物的致敏性，在0.5mg/mL浓度以下时，不具有致敏性。

10.一种如权利要求5所述的滇黄精提取物的应用，其特征在于，所述滇黄精提取物作为修复、抗炎活性成分应用在护肤品及医药辅助用品中。

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