CN111714423A - 一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物及其制备方法和应用，所述中药组合提取物的制备原料以重量份数计包括：樱花1‑40份、洋甘菊1‑40份、素馨花1‑40份、金盏花1‑40份和石榴果肉1‑40份。本发明所涉及的中药组合提取物是根据君臣佐使的原则进行遣方用药的，樱花为君药，洋甘菊为臣药，素馨花和金盏花作为佐药，石榴果肉为使药，中药配比合理，可协同增效，补气蕴本，发挥其抗衰舒敏功效，适用于日常生活中易导致的致敏、皱纹增多、皮肤暗黄等症状。

Description

一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物及其制备方法和 应用
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种中药组合提取物及其制备方法和应用，尤其涉及一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物及其制备方法和应用。
背景技术
皮肤衰老是伴随着人体生命活动的必经阶段，它受遗传因素、环境因素及全身复杂的形态结构等各方面的影响。近年来，随着饮食文化的兴起及人们生活习惯的改变，许许多多人的皮肤开始出现不同层次的外源性加速衰老，出现色斑、暗黄等一系列的问题，并开始产生皱纹及皮肤松弛等特征。
另一方面，随着化妆品科技的发展，各种护肤品质量参差不齐，具有抗衰、保湿、美白、抗炎修复等系列的的化妆品也是层出不穷。然而，有些化妆品虽然添加了较多的活性成分，极具功效，但却也因此让许多人产生红斑、肿痛等致敏现象，安全性方面受质疑。加之现阶段化妆品中发挥抗衰功效的成分维C、激素、多肽等成分，尽管其在很短时间内就能看到明显效果，但这些化合物大都具有易积聚不易分解，安全性低、稳定性差等缺点，对人体造成毒性。
中草药有着天然、安全稳定等优点。对中草药按合理配比进行组方，并应用现代提取分离技术，提高活性成分纯度，并添加进化妆品中，发挥抗衰、舒敏、美白、抗炎等功效，也成为了功效原料开发的新潮流。
CN106726923A公开了一种化妆品添加剂及其制备方法和包含该化妆品添加剂的化妆品，该化妆品添加剂由桑白皮提取物、石榴花提取物、洋甘菊提取物和樱花叶精华组成。该添加剂虽具有一定的美白功效，但抗敏功效未见显著，且对其抗衰功效也未做具体阐述。
CN110051580A公开了一种精华水及其制备方法，其由熏衣草提取物、洋甘菊提取物、金盏花提取物、蒸馏水、金缕梅提取物、红石榴提取物、果胶酶、透明质酸、荷荷巴油、黄芪提取物、烟酰胺和山茶籽油组成。该发明阐述具有较好的保湿补水功效，但未有试验例进行证明，且未阐述其他功效。
CN105520873A公开了一种中药抗衰老护肤霜，以黄芩提取物和丹参总酚酸为主要原料，还包括茯苓、党参、皮肤营养物、洋甘菊精华、大豆提取物、增稠剂和抗氧化剂，采用多种中草药相结合的方式，再添加营养物和精华，充分补充肌肤所需营养，促进肌肤血液循环，增强肌肤上皮细胞新陈代谢活力，防止肌肤过早衰老而产生皱纹，抗衰老效果好。该发明虽具有一定的抗衰功效，但抗敏功效未见显著。
因此，开发一种具有好的抗衰、舒敏功效的中药组合物是目前研究的重点。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种中药组合提取物及其制备方法和应用，尤其提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物及其制备方法和应用。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
一方面，本发明提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物，所述中药组合提取物的制备原料以重量份数计包括：樱花1-40份、洋甘菊1-40份、素馨花1-40份、金盏花1-40份和石榴果肉1-40份。
本发明所涉及的中药组合提取物以特定重量配比的上述特定五种原料进行配伍，不仅兼具抗衰和舒敏两大功效，同时兼具一定的美白、保湿等功效。五种成分相辅相成，协同配合，缺一不可。其中，樱花，性味平、凉；内含樱花黄酮及天然维生素，有收缩毛孔和平衡油脂的功效，具有极好的抗氧化效果。洋甘菊，味微苦、甘香，具有很好的舒敏、修护敏感肌肤、抗炎的功效，同时内含黄酮类成分，具有较好的抗氧化功效。素馨花，味辛、苦、温，可以对抗自由基，帮助减少皮肤胶原蛋白的流失，改善细纹。金盏花，性味淡、平，具有抗菌消炎、清除自由基等功效，抵抗人体炎症和氧化自由基的破坏作用，延缓皮肤衰老。石榴果肉，性温，味酸、涩，内含石榴多酚、氨基酸、维生素等，有助于防止因皮肤弹性流失而过早形成皮肤皱纹，具有较好的保湿功效。
本发明所涉及的中药组合提取物是根据君臣佐使的原则进行遣方用药的。樱花为君药，通过清除自由基、收缩毛孔、平衡油脂等，可发挥极好的抗氧化、抗炎保湿等功效；洋甘菊为臣药，主要发挥舒敏、修复功效，还具有一定的抗氧化、消炎、保湿等功效；素馨花和金盏花作为佐药，清热解毒，促进皮肤吸收，可以配合君、臣药以加强治疗作用；石榴果肉为使药，能够舒缓、镇静及滋润肌肤，调和方中诸药。本发明中药组合提取物以中医药理论为指导，参考各类药物的习性与功效得出，中药配比合理，可协同增效，补气蕴本，发挥其抗衰舒敏功效，适用于日常生活中易导致的致敏、皱纹增多、皮肤暗黄等症状。
所述樱花的重量份数可以为1份、5份、10份、15份、20份、25份、30份或40份等。
所述洋甘菊的重量份数可以为1份、5份、10份、15份、20份、25份、30份或40份等。
所述素馨花的重量份数可以为1份、5份、10份、15份、20份、25份、30份或40份等。
所述金盏花的重量份数可以为1份、5份、10份、15份、20份、25份、30份或40份等。
所述石榴果肉的重量份数可以为1份、5份、10份、15份、20份、25份、30份或40份等。
上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
进一步地，若中药组合提取物的五种组分在上述重量配比关系下，其在抗衰和舒敏上的功效更加显著。
优选地，所述中药组合提取物的制备原料以重量份数计包括：樱花20-40份、洋甘菊10-30份、素馨花10-20份、金盏花10-20份和石榴果肉10-20份。
另一方面，本发明提供一种如上所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)将樱花、洋甘菊、素馨花、金盏花和石榴果肉进行预处理，得到混合物；
(2)将步骤(1)得到的混合物进行热回流提取，得到提取液；
(3)将步骤(2)得到的提取液离心分离，滤液浓缩，得到浓缩液；
(4)将步骤(3)得到的浓缩液用大孔吸附树脂进行纯化，洗脱液浓缩，浓缩液用醇溶解，过滤，得到所述具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物。
优选地，步骤(1)所述预处理的方法为：将樱花、洋甘菊、素馨花和金盏花混合粉碎，再与粉碎的石榴果肉混合。
优选地，步骤(2)所述热回流提取的方式为水浴加热提取。
优选地，所述水浴加热提取的温度为40-90℃，例如40℃、50℃、60℃、70℃、80℃或90℃等，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述水浴加热提取的次数为2-4次，例如2次、3次或4次，每次1-3h，例如1h、2h或3h等。
优选地，步骤(2)所述热回流提取的提取溶剂包括水和/或乙醇，优选乙醇水溶液。
优选地，所述乙醇水溶液的体积浓度为50-70％，例如50％、55％、60％、65％或70％等，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述提取溶剂的总质量为原料总质量的5-20倍，例如5倍、8倍、10倍、15倍或20倍等。
在上述特定的提取溶剂类型、提取温度、提取时间条件下，最终得到的提取物中含有的有效成分在抗衰和舒敏作用方面具有更好的功效。
优选地，步骤(4)所述大孔吸附树脂包括AB-8型树脂或D101型树脂。
优选地，步骤(4)所述洗脱使用的洗脱剂为体积浓度50-70％(例如50％、55％、60％、65％或70％等)的乙醇水溶液。
在上述特定的洗脱剂类型条件下，最终精制得到的提取物中含有的有效成分在抗衰和舒敏作用方面具有更好的功效。
优选地，步骤(4)所述醇包括丁二醇，所述丁二醇与浓缩液的质量比为2:3-3:2，例如2:3、1:1或3:2等。
作为本发明的优选技术方案，所述具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物的制备方法包括如下步骤：
(1)将樱花、洋甘菊、素馨花和金盏花混合粉碎，再与粉碎的石榴果肉混合，得到混合物；
(2)将步骤(1)得到的混合物与原料总质量5-20倍的体积浓度为50-70％的乙醇水溶液混合，在40-90℃下水浴加热提取2-4次，每次1-3h，得到提取液；
(3)将步骤(2)得到的提取液离心分离，滤液浓缩，得到浓缩液；
(4)将步骤(3)得到的浓缩液用大孔吸附树脂进行纯化，50-70％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩，浓缩液用与浓缩液的质量比为2:3-3:2的丁二醇溶解，过滤，得到所述具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物。
再一方面，本发明提供一种如上所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物在制备化妆品中的应用。
优选地，所述中药组合提取物在所述化妆品中的添加量以质量百分含量计为0.05-30％，例如0.05％、0.1％、0.5％、1％、2％、5％、8％、10％、15％、20％、25％或30％等，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明所涉及的中药组合提取物以特定重量配比的上述特定五种原料进行配伍，是根据君臣佐使的原则进行遣方用药的。樱花为君药，通过清除自由基、收缩毛孔、平衡油脂等，可发挥极好的抗氧化、抗炎保湿等功效；洋甘菊为臣药，主要发挥舒敏、修复功效，还具有一定的抗氧化、消炎、保湿等功效；素馨花和金盏花作为佐药，清热解毒，促进皮肤吸收，可以配合君、臣药以加强治疗作用；石榴果肉为使药，能够舒缓、镇静及滋润肌肤，调和方中诸药。本发明中药组合提取物以中医药理论为指导，参考各类药物的习性与功效得出，中药配比合理，可协同增效，补气蕴本，发挥其抗衰舒敏功效，适用于日常生活中易导致的致敏、皱纹增多、皮肤暗黄等症状。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
实施例1
本实施例提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物(Ⅰ)，其制备原料包括：樱花10g、洋甘菊10g、素馨花10g、金盏花10g、石榴果肉10g。其制备方法如下：
(1)将樱花、洋甘菊、素馨花和金盏花混合粉碎，再与粉碎的石榴果肉混合，得到混合物；
(2)将步骤(1)得到的混合物与原料总质量20倍的体积浓度为50％的乙醇水溶液混合，在85℃下水浴加热提取3次，每次1h，得到提取液；
(3)将步骤(2)得到的提取液离心分离，滤液浓缩至与原料的质量比为1:1，得到浓缩液；
(4)将步骤(3)得到的浓缩液用AB-8型大孔吸附树脂进行纯化，70％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩至50g，浓缩液用50g的丁二醇溶解，过滤，得到所述具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物。
实施例2
本实施例提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物(Ⅱ)，其制备原料包括：樱花16.6g、洋甘菊8.3g、素馨花8.3g、金盏花8.3g、石榴果肉8.3g。其制备方法如下：
(1)将樱花、洋甘菊、素馨花和金盏花混合粉碎，再与粉碎的石榴果肉混合，得到混合物；
(2)将步骤(1)得到的混合物与原料总质量10倍的体积浓度为70％的乙醇水溶液混合，在80℃下水浴加热提取3次，每次2h，得到提取液；
(3)将步骤(2)得到的提取液离心分离，滤液浓缩至与原料的质量比为1:1，得到浓缩液；
(4)将步骤(3)得到的浓缩液用D101型大孔吸附树脂进行纯化，50％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩至50g，浓缩液用50g的丁二醇溶解，过滤，得到所述具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物。
实施例3
本实施例提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物(Ⅲ)，其制备原料包括：樱花14.28g、洋甘菊14.28g、素馨花7.14g、金盏花7.14g、石榴果肉7.14g。其制备方法如下：
(1)将樱花、洋甘菊、素馨花和金盏花混合粉碎，再与粉碎的石榴果肉混合，得到混合物；
(2)将步骤(1)得到的混合物与原料总质量15倍的体积浓度为70％的乙醇水溶液混合，在80℃下水浴加热提取3次，每次3h，得到提取液；
(3)将步骤(2)得到的提取液离心分离，滤液浓缩至与原料的质量比为1:1，得到浓缩液；
(4)将步骤(3)得到的浓缩液用AB-8型大孔吸附树脂进行纯化，50％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩至50g，浓缩液用50g的丁二醇溶解，过滤，得到所述具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物。
实施例4
本实施例提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物(Ⅳ)，其制备原料包括：樱花10g、洋甘菊10g、素馨花10g、金盏花10g、石榴果肉10g。其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(2)中提取液为水，其他条件均保持一致。
实施例5
本实施例提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物(Ⅴ)，其制备原料包括：樱花10g、洋甘菊10g、素馨花10g、金盏花10g、石榴果肉10g。其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(2)中提取液为体积浓度为40％的乙醇水溶液，其他条件均保持一致。
实施例6
本实施例提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物(Ⅵ)，其制备原料包括：樱花10g、洋甘菊10g、素馨花10g、金盏花10g、石榴果肉10g。其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(2)中提取液为体积浓度为80％的乙醇水溶液，其他条件均保持一致。
实施例7
本实施例提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物(Ⅶ)，其制备原料包括：樱花10g、洋甘菊10g、素馨花10g、金盏花10g、石榴果肉10g。其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(4)中洗脱剂为体积浓度为40％的乙醇水溶液，其他条件均保持一致。
实施例8
本实施例提供一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物(Ⅷ)，其制备原料包括：樱花10g、洋甘菊10g、素馨花10g、金盏花10g、石榴果肉10g。其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤(4)中洗脱剂为体积浓度为80％的乙醇水溶液，其他条件均保持一致。
对比例1
本对比例提供一种单一樱花提取物，其制备方法如下：
(1)将50g樱花粉碎；
(2)将其与原料总质量20倍的体积浓度为50％的乙醇水溶液混合，在85℃下水浴加热提取3次，每次1h，得到提取液；
(3)将步骤(2)得到的提取液离心分离，滤液浓缩至与原料的质量比为1:1，得到浓缩液；
(4)将步骤(3)得到的浓缩液用AB-8型大孔吸附树脂进行纯化，70％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩至50g，浓缩液用50g的丁二醇溶解，过滤，得到单一樱花提取物。
对比例2
本对比例提供一种单一洋甘菊提取物，其制备方法与对比例2的区别仅在于将50g樱花替换为50g洋甘菊，其他条件均保持一致。
对比例3
本对比例提供一种单一洋甘菊提取物，其制备方法与对比例2的区别仅在于将50g樱花替换为50g素馨花，其他条件均保持一致。
对比例4
本对比例提供一种单一洋甘菊提取物，其制备方法与对比例2的区别仅在于将50g樱花替换为50g金盏花，其他条件均保持一致。
对比例5
本对比例提供一种单一洋甘菊提取物，其制备方法与对比例2的区别仅在于将50g樱花替换为50g石榴果肉，其他条件均保持一致。
对比例6
本对比例提供一种不含樱花提取物的中药组合提取物，其制备原料包括：洋甘菊12.5g、素馨花12.5g、金盏花12.5g、石榴果肉12.5g。其制备方法参照实施例1的制备方法。
对比例7
本对比例提供一种不含洋甘菊提取物的中药组合提取物，其制备原料包括：樱花12.5g、素馨花12.5g、金盏花12.5g、石榴果肉12.5g。其制备方法参照实施例1的制备方法。
对比例8
本对比例提供一种不含素馨花提取物的中药组合提取物，其制备原料包括：樱花12.5g、洋甘菊12.5g、金盏花12.5g、石榴果肉12.5g。其制备方法参照实施例1的制备方法。
对比例9
本对比例提供一种不含金盏花提取物的中药组合提取物，其制备原料包括：樱花12.5g、洋甘菊12.5g、素馨花12.5g、石榴果肉12.5g。其制备方法参照实施例1的制备方法。
对比例10
本对比例提供一种不含石榴果肉提取物的中药组合提取物，其制备原料包括：樱花12.5g、洋甘菊12.5g、素馨花12.5g、金盏花12.5g。其制备方法参照实施例1的制备方法。
应用例1
本应用例制备一种抗衰舒敏面膜液，其配方如下：
Figure BDA0002613193070000111
Figure BDA0002613193070000121
其制备方法为：
将A相中各原料依次加入主锅，开启搅拌，分散均匀至无不溶物，开始加热；加热至85℃，保温20min，开始降温；降温至40℃，先加三乙醇胺，搅拌5min后，加入B相其他原料，搅拌至均匀无不溶物；预混合C相原料，搅拌至均匀透明，缓慢加入主锅，搅拌至均匀，降温，使用400目以上滤布，过滤，即得抗衰舒敏面膜液。
应用例2
本应用例制备一种抗衰舒敏保湿乳液，其配方如下：
Figure BDA0002613193070000122
其制备方法为：
将A相中的各组分混合，加热到80℃；同时将B相中的各组分混合，加热到90℃(汉生胶用甘油预分散)。将A相加入到B相均质3min，均质后，搅拌降温冷却，待产品冷却到45℃后，加入C相各组分，继续搅拌冷却，降到25℃，即得抗衰舒敏保湿乳液。
试验例1抗氧化功效研究——DPPH自由基清除实验
准确称取DPPH试剂47.7g，定容至100mL棕色容量瓶，取其中5mL用无水乙醇定容至50mL棕色容量瓶，得到DPPH测试液(47.7mg/L)。分别移取2mL DPPH测试液，按下表所示分别加入0.1mL实施例1-8及对比例1-10中制得的产品，再加入适量无水乙醇，使其总质量相等。充分混合后在暗处静置30min，以无水乙醇为空白对照，于517nm处测定其吸光度，并设置维生素C为对照，按照以下公式计算各提取液对DPPH的清除率：
DPPH清除率(％)＝[1-(As-Ar)/A0]×100％
式中：As——提取液与DPPH反应体系的吸光度；Ar——提取液-无水乙醇的吸光度；A0——空白对照无水乙醇的吸光度。
Figure BDA0002613193070000131
DPPH自由基清除率一定程度上反映了其抗氧化能力，其清除率越高，表明其抗氧化程度越好，抗衰老效果也越好，所以可以通过组合物对清除DPPH自由基能力的研究来判断其抗衰老效果。维C是化妆品行业公认的高效抗氧化剂，本次实验以维C为对照，考察其抗氧化能力。测试结果如表1所示：
表1
样品名称 DPPH清除率(％)
维生素C 93.26
实施例1 91.24
实施例2 89.36
实施例3 90.21
实施例4 81.23
实施例5 85.56
实施例6 87.52
实施例7 82.09
实施例8 88.23
对比例1 80.25
对比例2 75.21
对比例3 67.89
对比例4 65.23
对比例5 63.56
对比例6 67.23
对比例7 81.57
对比例8 78.51
对比例9 77.25
对比例10 80.41
由表1可知，本发明所涉及的中药组合提取物对DPPH具有较好的清除效果，清除率在81.23％以上。其中，实施例1的清除率要高于实施例4-8，表明中药组合提取物的制备条件显著影响最终产物的功效；实施例1的清除率要高于对比例1-5，表明本发明所涉及的中药组合提取物的抗氧化能力要高于单一药材提取物，验证了组方配伍的合理性；同时实施例1的清除率要高于对比例6-10，表明本发明所涉及的中药组合提取物的配方是非显而易见的，缺少任何一种成分都会使功效显著下降；并且实施例1-3与阳性对照维生素C相比，其清除率只比其略低且极为接近，表明本发明所涉及的中药组合提取物拥有与维生素C相近的抗氧化能力，抗氧化效果良好。
试验例2抗氧化能力研究——·OH自由基能力的研究
羟自由基(·OH)是人体内重要的氧自由基之一，同时也是人体代谢过程中产生的最活泼、危害最大的一种自由基，它可以使组织中的糖类、蛋白质等物质发生氧化，使人体遭受氧化性损伤与破坏。故可以通过对羟自由基(·OH)进行抑制，来减少其对机体的损害，进而保护肌肤，减缓肌肤衰老。因此考察其对·OH自由基的清除能力，在一定程度上可以直接反应物质的抗氧化抗衰老能力。
以实验例1-8和对比例1-10制得的样品进行试验，采用Fenton反应产生羟自由基。反应体系中先加入1.0mL FeSO4溶液(9.0mmol/L)、1mL水杨酸-乙醇溶液(9.0mmol/mL)、1mL各组样品，再加入1mL H2O2(8.8mmol/mL)，于37℃水浴反应30min，以无水乙醇为空白对照，于510nm处测定其吸光度，并设置维生素C为对照，按照以下公式计算各提取液对·OH的清除率：
·OH清除率(％)＝[(A0-Ax-Ax0)/A0]×100％
式中：Ax——提取液反应体系的吸光度；Ax0——不加H2O2的样品的吸光度(以无水乙醇代替H2O2)；A0——空白对照无水乙醇的吸光度。测试结果如表2所示：
表2
样品名称 对·OH的清除率(％)
维生素C 84.2
实施例1 80.3
实施例2 79.5
实施例3 80.1
实施例4 69.2
实施例5 71.4
实施例6 75.8
实施例7 74.6
实施例8 78.3
对比例1 72.3
对比例2 56.5
对比例3 68.2
对比例4 59.2
对比例5 58.7
对比例6 60.2
对比例7 75.3
对比例8 71.5
对比例9 70.6
对比例10 72.1
由表2可知，本发明所涉及的中药组合提取物对·OH具有较好的清除效果，清除率在69.2-80.3％。其中，实施例1的清除率要高于实施例4-8，表明中药组合提取物的制备条件显著影响最终产物的功效；实施例1的清除率要高于对比例1-5，表明本发明所涉及的中药组合提取物的抗氧化能力要高于单一药材提取物，验证了组方配伍的合理性；同时实施例1的清除率要高于对比例6-10，表明本发明所涉及的中药组合提取物的配方是非显而易见的，缺少任何一种成分都会使功效显著下降；并且实施例1-3与阳性对照维生素C相比，其清除率只比其略低且极为接近，表明本发明所涉及的中药组合提取物拥有与维生素C相近的抗氧化能力，抗氧化效果良好。
试验例3抗敏功效——透明质酸酶体外抑制试验
透明质酸是组织基质内限制水分及其他胞外物质扩散的成分，被透明质酸酶水解后，细胞间则变为非粘性，引起细胞脱颗粒和合成的新介质渗出，发挥生物效应，导致速发型过敏反应的发生。透明质酸酶是过敏反应的参与者，与过敏有强相关作用，可通过抑制透明质酸酶的活性来缓解过敏现象及改善皮肤。
考察实验例1-8及对比例1-10的体外抗敏功效，采用透明质酸酶抑制法。取0.1mLCaCl2溶液(0.25mmol/L)和0.5mL透明质酸酶液(100U/mL)于37℃水浴反应20min；加入提取液0.5mL，保温20min；再加入0.5mL透明质酸钠溶液(0.5g/L),反应30min后取出冷却5min；加入0.1mL氢氧化钠溶液(0.4mol/L)和0.5mL乙酰丙酮溶液(3.5mL乙酰丙酮溶于50mL的1.0mol/L碳酸钠溶液中)，沸水浴15min后立即转移至冰水浴5min；滴加1mL埃尔利希试剂(0.8g对-二甲基氨基苯甲醛溶于15mL浓盐酸和15mL无水乙醇中)，并用3mL无水乙醇稀释，25℃放置20min显色，于540nm处测定其吸光度，并以甘草酸二钾为对照。按照以下公式计算对透明质酸酶抑制率：
透明质酸酶抑制率＝{[(A－B)－(C－D)]/(A-B)}×100％
式中：A——对照溶液吸光度(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液)；B——对照空白溶液吸光度(用醋酸缓冲溶液代替样品溶液及酶液)；C——样品溶液吸光度；D——样品空白溶液吸光度(用醋酸缓冲溶液代替酶液)。
以5％的甘草酸二钾为阳性对照，考察各组样品对透明质酸酶的抑制率，结果如表3所示：
表3
Figure BDA0002613193070000181
Figure BDA0002613193070000191
由表3可知，本发明所涉及的中药组合提取物对透明质酸酶具有较好的抑制效果，抑制率在81.6％以上。其中，实施例1的抑制率要高于实施例4-8，表明中药组合提取物的制备条件显著影响最终产物的功效；实施例1的抑制率要高于对比例1-5，表明本发明所涉及的中药组合提取物的舒敏效果要高于单一药材提取物，验证了组方配伍的合理性；同时实施例1的抑制率要高于对比例6-10，表明本发明所涉及的中药组合提取物的配方是非显而易见的，缺少任何一种成分都会使功效显著下降；并且实施例1-3与阳性对照5％甘草酸二钾相比，其抑制率甚至更高，表明本发明所涉及的中药组合提取物拥有极好的舒敏功效，能够抑制皮肤过敏、缓解肌肤。
试验例4红细胞溶血实验
本项目通过红细胞溶血实验评价刺激性。红细胞溶血实验是兔眼刺激性实验(Draize test)替代方法之一，基本原理是通过测定血红蛋白溶出量及变性程度来评价化学品对眼组织细胞的损伤。国际上主要将RBC实验用于评价化妆品及原料等化学品的眼刺激性研究，分级标准如下表所示。
Figure BDA0002613193070000192
Figure BDA0002613193070000201
对各组样品进行红细胞溶血实验的结果如表4所示，其中HD50为50％红细胞发生溶血时的样品浓度，DI为蛋白质变性指数，L/D为HD50与DI的比值。
表4
Figure BDA0002613193070000202
由表4可知，实施例1中药组合提取物测试所得HD50值为156253mg/L，DI值为0.36％，说明该组合物提取液在较高浓度下才会对红细胞造成溶血现象且极少引起蛋白质变性；同时L/D值大于100，刺激性分级为无刺激，说明该组合提取液具有温和无刺激的特点。同时，实施例1发生溶血时样品浓度HD50比对比例1-10要高，蛋白质变性指数DI却与之相比较小，表明组合物要比单一提取物或者缺少任意一种成分的提取物有更温和无刺激的特点，也表明本发明所涉及的中药组合提取物更加天然温和、无刺激。
试验例5人体重复性体外评价实验研究
将应用例1和2制得的抗衰舒敏面膜液和乳液用于随机选取的30位自我报告肌肤敏感的志愿者(健康、皮肤正常，年龄30-45岁)，连续使用30天，并使用Visia面部检测仪等检测仪器追踪志愿者面部皮肤变化情况，以皮肤弹力、皱纹、光滑度为指标来评价抗衰面膜和乳液的抗衰老效果，以皮肤是否发生过敏现象评价舒敏效果。试验研究结果如表5所示。
表5
平均变化率(％) 应用例1 应用例2
皮肤弹性 +22.5％ +25.7％
皱纹 -15.3％ -18.6％
皮肤光亮度 +26.8％ +29.3％
由表5可知，30位志愿者在使用添加了中药组合提取物的抗衰舒敏面膜30天后，皮肤弹性平均增加22.5％，皱纹平均减少15.3％。皮肤光滑度平均提高26.8％，皮肤衰老情况明显改善；在使用添加了中药组合提取物的抗衰舒敏乳液30天后，皮肤弹性平均增加25.7％，皱纹平均减少18.6％。皮肤光滑度平均提高29.3％，皮肤衰老情况明显改善。并且观察30位志愿者在使用后的过敏状况，发现其全部人均未出现过敏现象。说明本发明所涉及的中药组合提取物具备优良的抗衰舒敏功效。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物及其制备方法和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims (10)

1.一种具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物，其特征在于，所述中药组合提取物的制备原料以重量份数计包括：樱花1-40份、洋甘菊1-40份、素馨花1-40份、金盏花1-40份和石榴果肉1-40份。
2.如权利要求1所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物，其特征在于，所述中药组合提取物的制备原料以重量份数计包括：樱花20-40份、洋甘菊10-30份、素馨花10-20份、金盏花10-20份和石榴果肉10-20份。
3.如权利要求1或2所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)将樱花、洋甘菊、素馨花、金盏花和石榴果肉进行预处理，得到混合物；
(2)将步骤(1)得到的混合物进行热回流提取，得到提取液；
(3)将步骤(2)得到的提取液离心分离，滤液浓缩，得到浓缩液；
(4)将步骤(3)得到的浓缩液用大孔吸附树脂进行纯化，洗脱液浓缩，浓缩液用醇溶解，过滤，得到所述具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物。
4.如权利要求3所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述预处理的方法为：将樱花、洋甘菊、素馨花和金盏花混合粉碎，再与粉碎的石榴果肉混合。
5.如权利要求3或4所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述热回流提取的方式为水浴加热提取；
优选地，所述水浴加热提取的温度为40-90℃；
优选地，所述水浴加热提取的次数为2-4次，每次1-3h。
6.如权利要求3-5中任一项所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述热回流提取的提取溶剂包括水和/或乙醇，优选乙醇水溶液；
优选地，所述乙醇水溶液的体积浓度为50-70％；
优选地，所述提取溶剂的总质量为原料总质量的5-20倍。
7.如权利要求3-6中任一项所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述大孔吸附树脂包括AB-8型树脂或D101型树脂；
优选地，步骤(4)所述洗脱使用的洗脱剂为体积浓度50-70％的乙醇水溶液；
优选地，步骤(4)所述醇包括丁二醇，所述丁二醇与浓缩液的质量比为2:3-3:2。
8.如权利要求3-7中任一项所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)将樱花、洋甘菊、素馨花和金盏花混合粉碎，再与粉碎的石榴果肉混合，得到混合物；
(2)将步骤(1)得到的混合物与原料总质量5-20倍的体积浓度为50-70％的乙醇水溶液混合，在40-90℃下水浴加热提取2-4次，每次1-3h，得到提取液；
(3)将步骤(2)得到的提取液离心分离，滤液浓缩，得到浓缩液；
(4)将步骤(3)得到的浓缩液用大孔吸附树脂进行纯化，50-70％的乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩，浓缩液用与浓缩液的质量比为2:3-3:2的丁二醇溶解，过滤，得到所述具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物。
9.如权利要求1或2所述的具有抗衰舒敏功效的中药组合提取物在制备化妆品中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述中药组合提取物在所述化妆品中的添加量以质量百分含量计为0.05-30％。
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