CN114292881A

CN114292881A - 一种桑黄菌代谢产物及其制备方法

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Publication number: CN114292881A
Application number: CN202210042596.6A
Authority: CN
Inventors: 申琳; 耿后玉; 耿馨悦
Original assignee: Beijing Hanfang Shiyuan Ecological Technology Research Institute Co ltd
Current assignee: Beijing Hanfang Shiyuan Ecological Technology Research Institute Co ltd
Priority date: 2022-01-14
Filing date: 2022-01-14
Publication date: 2022-04-08

Abstract

本发明提供了一种桑黄菌代谢产物及其制备方法，属于农产品加工技术领域。一种桑黄菌代谢产物的制备方法，包括如下步骤：(1)将桑叶处理成桑叶小段，依次进行发酵、渥堆；(2)将渥堆后的桑叶进行炒制、汽蒸、冷却；(3)在冷却后的桑叶中接入桑黄菌，进行发菌；(4)发菌结束后进行干燥处理，得到桑黄菌桑叶；(5)对桑黄菌桑叶进行提取，得到桑黄菌代谢产物。本发明的技术方案绕开桑黄菇生产环节，用桑叶“发菌”而不是出菇，直接利用“发菌”过程中生产代谢产物并进行深加工，得到桑黄菌深加工产品。

Description

一种桑黄菌代谢产物及其制备方法

技术领域

本发明涉及农产品加工技术领域，尤其涉及一种桑黄菌代谢产物及其制备方法。

背景技术

桑黄菌又简称桑黄，又称桑黄菇，它属于多孔菌科、木层孔菌属真菌。据《药性论》记载：桑黄性甘平、无毒、治血崩、血淋、脱肛泻血、带下、闭经。野生桑黄菇极为稀少和珍贵，有“森林黄金”之称。人工栽培桑黄菇消耗大量木材原料，而且周期长、耗能高、效率低，难以实现规模化生产。要进一步获得功能性代谢产物和相关产品，需再对桑黄菇进行精深加工，更是工序复杂，难上加难。

桑叶是桑科植物桑树的树叶。现代中、西医把桑叶和桑叶生物制剂作为改善糖尿病及其他各种疑难杂症的药物而使用，认为其药效极为广泛。有清肺润燥、止咳、去热、化痰、治盗汗；补肝、清肝明目、治疗头晕眼花、失眠、消除眼部疲劳；消肿、清血，治疗痢疾、腹痛、减肥、除脚气、利大小肠；抗应激、凉血、降血压、降血脂、预防心肌梗塞、脑溢血、祛头痛、长发；降血糖、抗糖病等。主要功能成分是桑叶生物碱(DNJ)、类黄酮、桑素、γ-氨基丁酸及维生素等。

发明内容

本发明的目的在于提供一种桑黄菌代谢产物及其制备方法，能够简易高效的生产桑黄菌代谢产物，提高代谢产物中活性成分的含量。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种桑黄菌代谢产物的制备方法，包括如下步骤：

(1)将桑叶处理成桑叶小段，依次进行发酵、渥堆；

(2)将渥堆后的桑叶进行炒制、汽蒸、冷却；

(3)在冷却后的桑叶中接入桑黄菌，进行发菌；

(4)发菌结束后进行干燥处理，得到桑黄菌桑叶；

(5)对桑黄菌桑叶进行提取，得到桑黄菌代谢产物。

优选的，所述桑叶小段的长度为1～1.5cm。

优选的，步骤(1)中所述发酵的温度为20～30℃，发酵至桑叶表面无水渍，手捏有粘腻感即可。

优选的，步骤(1)中所述渥堆的体积为2.5～3.5×1.5～2.5×1.5～2.5m³，所述渥堆的时间为12～24h。

优选的，步骤(2)中所述炒制的温度为105～115℃，所述炒制的时间为5～9min，所述炒制后桑叶的含水量为12～18％。

优选的，步骤(2)中所述汽蒸的时间为3～7s；所述冷却后桑叶的温度为10～30℃。

优选的，步骤(3)中所述桑黄菌的接种量为桑叶质量的1～5％；所述发菌的温度为26～28℃，所述发菌的湿度为65～75％，所述发菌的时间为14～16天。

优选的，步骤(4)中所述干燥处理是在发菌结束后每天升温1～3℃，直至桑叶含水量小于12％为止。

优选的，步骤(5)中所述提取为水提；所述桑黄菌桑叶与水的质量体积比为1g：6～10ml；所述水提的温度为65～85℃，所述水提的时间为3～5h，所述水提的次数为1～3次。

本发明还提供了一种桑黄菌代谢产物。

本发明的技术方案绕开桑黄菇生产环节，用大量可再生的桑叶代替木材，大大降低了原料成本，符合规模化可持续发展方向。并且本发明是用桑叶“发菌”而不是出菇，直接利用“发菌”过程中生产的代谢产物进行深加工，得到桑黄菌深加工产品。从而省去了桑黄菌培养出菇的过程，解决了桑黄菌菇培养困难、周期长、耗能高等问题。并且，本发明采用桑叶作为桑黄菌培养原料，借助桑叶中的特殊营养成分增加代谢产物中的功能成分。

附图说明

图1为实施例1中芦丁的标准曲线。

具体实施方式

(1)将桑叶处理成桑叶小段，依次进行发酵、渥堆；

(2)将渥堆后的桑叶进行炒制、汽蒸、冷却；

(3)在冷却后的桑叶中接入桑黄菌，进行发菌；

(4)发菌结束后进行干燥处理，得到桑黄菌桑叶；

(5)对桑黄菌桑叶进行提取，得到桑黄菌代谢产物。

本发明将桑叶处理成桑叶小段后，依次进行发酵、渥堆。

在本发明中，所述桑叶小段的长度优选为1～1.5cm，进一步优选为1.2cm。

在本发明中，所述桑叶原料中梗含量优选小于15％，其中，梗的长度超过30mm的部分不得超过1％。

在本发明中，所述桑叶小段在发酵前还优选进行静电除杂，所述静电除杂优选采用静电除杂机进行。

在本发明中，所述发酵的温度优选为20～30℃，进一步优选为22～28℃，再进一步优选为25℃。

在本发明中，所述发酵至桑叶表面无水渍，手捏有粘腻感即可。

在本发明中，所述渥堆的体积优选为2.5～3.2×1.5～2.5×1.5～2.5m³，进一步优选为2.2～3.2×1.8～2.2×1.8～2.2m³，再进一步优选为3×2×2m³。

在本发明中，所述渥堆的时间优选为12～24h，进一步优选为16～20h，再进一步优选为18h。

在本发明中，所述渥堆优选渥堆至桑叶变成黄褐色、叶块一打即散，含水量为18％。

本发明在渥堆结束后，将渥堆后的桑叶进行炒制、汽蒸、冷却。

在本发明中，所述炒制的温度优选为105～115℃，进一步优选为108～112℃，再进一步优选为110℃。

在本发明中，所述炒制的时间优选为5～9min，进一步优选为6～8min，再进一步优选为7min。

在本发明中，所述炒制后桑叶的含水量优选为12～18％，进一步优选为14～16％，再进一步优选为15％。

在本发明中，所述汽蒸优选采用水蒸气进行汽蒸。

在本发明中，所述汽蒸的时间优选为3～7s，进一步优选为4～6s，再进一步优选为5s。

在本发明中，汽蒸后优选进行冷却。

在本发明中，所述冷却后桑叶的温度优选为10～30℃，进一步优选为15～25℃，再进一步优选为20℃。

待桑叶冷却后，在冷却后的桑叶中接入桑黄菌，进行发菌。

在本发明中，所述桑黄菌的接种量优选为桑叶质量的1～5％，进一步优选为2～4％，再进一步优选为3％。

在本发明中，所述桑黄菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，生物材料名称火木层孔菌，CGMCC编号5.95。

在本发明中，所述发菌优选在发菌室中进行，所述发菌室在发菌之前优选用紫外灯杀菌30～40min，优选杀菌35min。

在本发明中，所述发菌的温度优选为26～28℃，进一步优选为27℃。

在本发明中，所述发菌的湿度优选为65～75％，进一步优选为70％。

在本发明中，所述发菌的时间优选为14～16天，进一步优选为15天。

本发明在发菌结束后，进行干燥处理，得到桑黄菌桑叶。

在本发明中，所述干燥处理优选是在发菌结束后每天升温1～3℃，进一步优选在发菌结束后每天升温2℃，直至桑叶含水量小于12％为止。

制备得到桑黄菌桑叶后，对桑黄菌桑叶进行提取，得到桑黄菌代谢产物。

在本发明中，所述提取优选为水提和/或醇提，进一步优选为水提。

在本发明中，采用水提对桑黄菌桑叶进行提取时，所述桑黄菌桑叶与水的质量体积比优选为1g：6～10ml，进一步优选为1g：7～9ml，再进一步优选为1g：8ml。

在本发明中，所述水提的温度优选为65～85℃，进一步优选为70～80℃，再进一步优选为75℃。

在本发明中，所述水提的时间优选为3～5h，进一步优选为4h。

在本发明中，所述水提的次数优选为1～3次，进一步优选为2次。

本发明还提供了一种桑黄菌代谢产物，优选按照上述方法制备得到。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

1.制备桑黄菌桑叶

摘取新鲜、无病虫害的桑叶，用清水洗净沥干，摘去长度在30mm以上的桑叶梗，并使桑叶梗的含量小于桑叶总质量的15％，用切茶机将桑叶切成1.2cm长的桑叶小段。然后送入静电除杂机进行除杂，除杂时调整给料机拨料滚高度，使送入静电除杂机的原料薄厚控制在30～50mm之间，随时观察静电除杂机除杂滚上的杂质量并及时清理，杂质量过多会影响除杂效果。随时观察各出料口的出料量，确保出料畅通不堵料并及时更换接料斗，防止料满溢出。工作完成后清理设备及现场，保持现场整洁。

将除杂后的桑叶送入发酵机中进行发酵，设置发酵温度25℃，发酵至桑叶表面无水渍，手捏有粘腻感即可，然后进行渥堆，每个渥堆的长×宽×高为3×2×2m³，使其在自然环境下完成陈化过程，渥堆18个小时后，桑叶变成黄褐色、叶块一打即散，测其含水量为18％，即渥堆结束。

将渥堆后的桑叶放入锅中炒制，炒制时控制炒制温度为110℃，时间为7min，炒制含水量为15％后，置于蒸锅中，用蒸气汽蒸5s，取下冷却至20℃，接入桑叶质量3％的桑黄菌，混合均匀，送入预先杀菌(紫外灯杀菌35min)处理过的发菌室中，控制发菌室的温度为27℃，湿度为70％，发菌15天。从第16天开始每天升高2℃，对桑叶进行干燥，直至桑叶含水量低于12％为止，得到桑黄菌桑叶。该桑黄菌桑叶中含有丰富的桑黄菌代谢产物，通过提取技术能够提出得到优质的桑黄菌代谢产物。

2.提取桑黄菌代谢产物

取1g干燥好的桑黄菌桑叶于烧杯中，加入8ml水在75℃水浴条件下提取2次，每次4h，合并滤液，得到桑黄菌代谢产物的水提液，并通过绘制的芦丁标准曲线测定1g桑黄菌桑叶中总黄酮含量。测得的总黄酮含量为8.54mg/g。

绘制芦丁的标准曲线：以60％乙醇为溶剂，精密配置0.50mg/ml芦丁标准溶液50ml，取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml，分别置于25ml容量瓶中，各加60％乙醇至6.0ml，加入5％亚硝酸钠1.0ml，摇匀，放置6min，加入10％硝酸铝1.0ml，摇匀，放置6min，加4％氢氧化钠溶液10.0ml，加60％乙醇溶液至刻度，摇匀，放置15min，以空白溶液为参比，在波长510nm处测吸光度。绘制标准曲线如图1所示，得线性方程为y＝0.0917x+0.3606，R²＝0.9973。

总黄酮含量(mg/g)＝CV/m；

式中：C表示提取液中黄酮的浓度，mg/ml；

V表示测定的体积，ml；

m表示桑黄菌桑叶的质量，1g。

实施例2

摘取新鲜、无病虫害的桑叶，用清水洗净沥干，摘去长度在30mm以上的桑叶梗，并使桑叶梗的含量小于桑叶总质量的15％，用切茶机切成1.5cm长的桑叶小段。然后送入静电除杂机进行除杂，除杂时调整给料机拨料滚高度，使送入静电除杂机的原料薄厚控制在30～50mm之间，随时观察静电除杂机除杂滚上的杂质量并及时清理，杂质量过多会影响除杂效果。随时观察各出料口的出料量，确保出料畅通不堵料并及时更换接料斗，防止料满溢出。工作完成后清理设备及现场，保持现场整洁。

将除杂后的桑叶送入发酵机中进行发酵，设置发酵温度30℃，发酵至桑叶表面无水渍，手捏有粘腻感即可，然后进行渥堆，每个渥堆的长×宽×高为3×2×2m³，使其在自然环境下完成陈化过程，渥堆12个小时后，桑叶变成黄褐色、叶块一打即散，测其含水量为18％，即渥堆结束。

将渥堆后的桑叶放入锅中炒制，炒制时控制炒制温度为115℃，时间为6min，炒制含水量为12％后，置于蒸锅中，用蒸气汽蒸5s，取下冷却至30℃，接入桑叶质量5％的桑黄菌，混合均匀，送入预先杀菌(紫外灯杀菌30min)处理过的发菌室中，控制发菌室的温度为26℃，湿度为75％，发菌14天。从第15天开始每天升高2℃，对桑叶进行干燥，直至桑叶含水量低于12％为止，得到桑黄菌桑叶。

取1g上述干燥好的桑黄菌桑叶于烧杯中，加入8ml水在80℃水浴条件下提取3次，每次3h，合并滤液，得到桑黄菌代谢产物的水提液，并按照实施例1的方法测得桑黄菌桑叶中总黄酮含量为7.90mg/g。

实施例3

摘取新鲜、无病虫害的桑叶，用清水洗净沥干，摘去长度在30mm以上的桑叶梗，并使桑叶梗的含量小于桑叶总质量的15％，用切茶机切成1.0cm长的桑叶小段。然后送入静电除杂机进行除杂，除杂时调整给料机拨料滚高度，使送入静电除杂机的原料薄厚控制在30～50mm之间，随时观察静电除杂机除杂滚上的杂质量并及时清理，杂质量过多会影响除杂效果。随时观察各出料口的出料量，确保出料畅通不堵料并及时更换接料斗，防止料满溢出。工作完成后清理设备及现场，保持现场整洁。

将除杂后的桑叶送入发酵机中进行发酵，设置发酵温度20℃，发酵至桑叶表面无水渍，手捏有粘腻感即可，然后进行渥堆，每个渥堆的长×宽×高为3×2×2m³，使其在自然环境下完成陈化过程，渥堆24个小时后，桑叶变成黄褐色、叶块一打即散，测其含水量为18％，即渥堆结束。

将渥堆后的桑叶放入锅中炒制，炒制时控制炒制温度为105℃，时间为9min，炒制含水量为15％后，置于蒸锅中，用蒸气汽蒸7s，取下冷却至10℃，接入桑叶质量1％的桑黄菌，混合均匀，送入预先杀菌(紫外灯杀菌40min)处理过的发菌室中，控制发菌室的温度为28℃，湿度为65％，发菌16天。从第17天开始每天升高3℃，对桑叶进行干燥，直至桑叶含水量低于12％为止，得到桑黄菌桑叶。该桑黄菌桑叶中含有丰富的桑黄菌代谢产物，通过提取技术能够提出得到。

取1g上述干燥好的桑黄菌桑叶于烧杯中，加入9ml水在85℃水浴条件下提取5h，取滤液，得到桑黄菌代谢产物的水提液，并按照实施例1的方法测得桑黄菌桑叶中总黄酮含量为7.63mg/g。

对比例1

取新鲜采摘的、无病虫害的桑叶，用清水洗净沥干，摘去桑叶梗，在30℃下烘干至水分含量小于12％。取1g按照实施例1的方法进行提取，得到桑叶提取液，对其总黄酮含量进行测定，测得其中的总黄酮含量为2.14mg/g。

由以上实施例可知，按照本发明的制备方法用桑黄菌发酵桑叶，能够提高桑叶提取物或桑黄菌代谢产物中的总黄酮含量。相比于对比例1未经发酵处理的桑叶，实施例1制备的桑黄菌桑叶中总黄酮含量提高了2.99倍，实施例2制备的桑黄菌桑叶中总黄酮含量提高了2.69倍，实施例3制备的桑黄菌桑叶中总黄酮含量提高了2.56倍，平均提高了2.75倍。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种桑黄菌代谢产物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将桑叶处理成桑叶小段，依次进行发酵、渥堆；

(2)将渥堆后的桑叶进行炒制、汽蒸、冷却；

(3)在冷却后的桑叶中接入桑黄菌，进行发菌；

(4)发菌结束后进行干燥处理，得到桑黄菌桑叶；

(5)对桑黄菌桑叶进行提取，得到桑黄菌代谢产物。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述桑叶小段的长度为1～1.5cm。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述发酵的温度为20～30℃，发酵至桑叶表面无水渍，手捏有粘腻感即可。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述渥堆的体积为2.5～3.5×1.5～2.5×1.5～2.5m³，所述渥堆的时间为12～24h。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述炒制的温度为105～115℃，所述炒制的时间为5～9min，所述炒制后桑叶的含水量为12～18％。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述汽蒸的时间为3～7s；所述冷却后桑叶的温度为10～30℃。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述桑黄菌的接种量为桑叶质量的1～5％；所述发菌的温度为26～28℃，所述发菌的湿度为65～75％，所述发菌的时间为14～16天。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述干燥处理是在发菌结束后每天升温1～3℃，直至桑叶含水量小于12％为止。

9.如权利要求1～8任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述提取为水提；所述桑黄菌桑叶与水的质量体积比为1g：6～10ml；所述水提的温度为65～85℃，所述水提的时间为3～5h，所述水提的次数为1～3次。

10.一种权利要求1～9任一项所述的制备方法得到的桑黄菌代谢产物。