CN114288705B - 一种从银杏叶提取物中去除银杏酸的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从银杏叶提取物中去除银杏酸的方法，包括如下步骤：(1)前处理：对原料银杏叶进行提取，得银杏叶提取液；或者对原料银杏叶提取物进行溶解，得银杏叶提取液；(2)脱酸：在银杏叶提取液中加入植物油，搅拌，采用陶瓷膜进行过滤；(3)重复步骤(2)，得陶瓷膜透过液；(4)喷雾干燥：将陶瓷膜透过液进行浓缩，喷雾干燥，得银杏叶提取物产品。本发明采用添加植物油的方法从银杏叶提取物中去除银杏酸，一次脱除率在99％以上，植物油使用量少，且回收的植物油可以用于燃料燃烧。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域，具体涉及一种从银杏叶提取物中去除银杏酸的方法。
背景技术
银杏被称为“活化石”植物，是我国特有的珍贵树种，资源拥有量占世界总量的70％，在我国已有六百多年的药用历史，其叶、果实、种子均有较高的药用价值，其药理作用不断被认识，临床应用范围逐步扩大。
银杏叶是一种具有很高药用价值的植物，随着银杏叶中有效成分的药用、保健等综合价值的挖掘和开发，对银杏叶的系统研究在世界范围内掀起了高潮。现代药理研究表明银杏叶提取物中的活性成分主要为银杏黄酮类及萜类内酯类成分，可用于血瘀型胸痹及轻度脑动脉硬化引起的眩晕以及冠心病、心绞痛、心肌梗塞等疾病的治疗。但目前市售的银杏叶提取物中含有一定量的有害物质银杏酸。银杏酸具有细胞毒性、胚胎毒性、致敏及突变作用，当银杏酸浓度达到一定程度后会使大鼠肝细胞存活率大大降低。因此，《中国药典》2020版标准为银杏叶提取物中银杏酸含量小于5ppm。
目前银杏叶提取物中的银杏酸的脱除方法通常采用树脂法或萃取法脱除。树脂法通常采用阴离子交换树脂，但会存在树脂残留，并且树脂再生需要用到大量的酸、碱和饮用水，环境不友好；萃取法通常使用石油醚、正己烷等溶剂，环境不友好，生产成本高；也有使用纳滤膜处理来进行脱除的，如专利CN 106074631A公开了一种低银杏酸低灰分银杏叶提取物的工业化生产方法，但纳滤膜存在使用寿命短的问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服背景技术的技术缺陷，提供一种从银杏叶提取物中去除银杏酸的方法。本发明采用添加植物油的方法从银杏叶提取物中去除银杏酸，一次脱除率在99％以上，植物油使用量少，且回收的植物油可以用于燃料燃烧。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案如下：
一种从银杏叶提取物中去除银杏酸的方法，包括如下步骤：
(1)前处理：取原料银杏叶或银杏叶提取物；
如原料为银杏叶，则采用如下方法进行前处理：
a.提取：取银杏叶粉碎，加入稀乙醇溶剂，加热回流提取，过滤，得银杏叶提取液；
如原料为银杏叶提取物，则采用如下方法进行前处理：
b.溶解：取银杏叶提取物，加入稀乙醇溶剂，搅拌溶解均匀，得银杏叶提取液；
(2)脱酸：在银杏叶提取液中加入植物油，搅拌，采用陶瓷膜进行过滤；
(3)重复步骤(2)，得陶瓷膜透过液；
(4)喷雾干燥：将陶瓷膜透过液进行浓缩，喷雾干燥，得银杏叶提取物产品。
优选地，所述步骤(1)中的步骤a及步骤b中，所述稀乙醇的浓度为50％。
优选地，所述步骤(1)中的步骤a中，所述稀乙醇的加入量为所述银杏叶的重量的8～10倍。
优选地，所述步骤(1)中的步骤b中，所述稀乙醇的加入量为所述银杏叶提取物的重量的8～10倍。
优选地，所述步骤(1)中的步骤a中，所述加热回流提取的次数为两次，提取时间为1小时/次，合并滤液得步骤a所述银杏叶提取液。
优选地，所述步骤(1)中的步骤a及步骤b中，所述银杏叶提取液中的乙醇浓度≤60％；如果所述银杏叶提取液中的乙醇浓度高于60％，则需要适当浓缩回收部分乙醇，将乙醇浓度降低到60％以下再进行陶瓷膜处理。
更优选地，所述步骤(1)中的步骤a及步骤b中，所述银杏叶提取液中的乙醇浓度为40％～58％。
优选地，所述步骤(2)中，所述植物油为大豆油、玉米油、葵花籽油、花生油、橄榄油、菜籽油、芝麻油、山茶油中的任意一种或几种。
更优选地，所述步骤(2)中，所述植物油为大豆油。
优选地，如步骤(1)中所述原料为银杏叶，则所述步骤(2)中，所述植物油的加入量为步骤(1)中的步骤a所述银杏叶的重量的0.1％～1％；如步骤(1)中所述原料为银杏叶提取物，则所述步骤(2)中，所述植物油的加入量为步骤(1)中的步骤b所述银杏叶提取物的重量的5％～20％。
优选地，所述步骤(2)中，所述搅拌的时间为30min。
优选地，所述步骤(2)中，采用100～200nm的陶瓷膜进行过滤。
更优选地，所述步骤(2)中，采用100nm的陶瓷膜进行过滤。
优选地，所述步骤(3)中，脱除银杏酸的次数最少为2次，2次就有效，但也可以增加次数到3次或4次，因此，重复所述步骤(2)的次数为1～3次。
优选地，所述步骤(4)中，所述喷雾干燥时的进风口温度为180℃，出风口温度为90℃。
优选地，如步骤(1)中所述原料为银杏叶，则在所述步骤(1)与步骤(2)之间增加步骤c，或者在所述步骤(3)与所述步骤(4)之间增加步骤d；
如在所述步骤(1)与步骤(2)之间增加步骤c，则所述步骤c包括如下步骤：
将步骤a所述银杏叶提取液浓缩至无乙醇，用适量50℃温水稀释，经过D101大孔树脂纯化，先经过1倍柱体积水洗除杂，后经过3倍柱体积55％乙醇洗脱，得到纯化液；后续所述步骤(2)中在所述纯化液中加入植物油进行脱酸处理；
如在所述步骤(3)与步骤(4)之间增加步骤d，则所述步骤d包括如下步骤：
将步骤(3)所述陶瓷膜透过液浓缩至无乙醇，用适量50℃温水稀释，经过D101大孔树脂纯化，先经过1倍柱体积水洗除杂，后经过3倍柱体积55％乙醇洗脱，得到纯化液；后续所述步骤(4)中将所述纯化液进行浓缩并进行喷雾干燥处理。
本发明的基本原理：
银杏酸由于极性相似相溶，溶于植物油(如大豆油)中，而植物油不溶于银杏叶提取液(稀乙醇溶液)，又由于银杏叶提取液可以通过陶瓷膜，而植物油不能通过陶瓷膜，因此在陶瓷膜过滤过程中，陶瓷膜在将植物油截留的同时将银杏酸脱除，而银杏叶提取液中的总黄酮醇苷和银杏内酯由于更易溶于稀乙醇溶液，从而得到保留。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)本发明采用添加植物油的方法从银杏叶提取物中去除银杏酸，一次脱除率在99％以上，制得的银杏叶提取物产品中的银杏酸含量低至0.7mg/kg，脱酸效果明显，方法简便易行；同时植物油使用量少，且回收的植物油可以用于燃料燃烧，具有较好的经济效益；
(2)本发明制得的银杏叶提取物产品中的银杏酸含量为0.7mg/kg～0.8mg/kg，远低于《中国药典》2020版要求的≤5mg/kg；此外，本发明制得的银杏叶提取物产品中的总黄酮醇苷含量为24.9％～26.1％，总黄酮醇苷得率为90.2％～92.5％，银杏内酯含量为7.2％～8.1％，银杏内酯得率为92.1％～93.9％，活性成分的含量满足《中国药典》2020版的要求，且活性成分的得率较高。
具体实施方式
为了更好地理解本发明的内容，下面结合具体实施例作进一步说明。应理解，这些实施例仅用于对本发明进一步说明，而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明所述的内容后，该领域的技术人员对本发明作出一些非本质的改动或调整，仍属于本发明的保护范围。
实施例1
取银杏叶粉碎100kg，其总黄酮醇苷含量为0.81％，银杏酸含量为0.25％(即2500mg/kg)，银杏内酯含量为0.30％，加入8倍量稀乙醇溶剂，加热回流提取2次，提取时间1小时/次，过滤，合并滤液得银杏叶提取液，提取液中总黄酮醇苷得率为98％，银杏内酯得率为92％。
在银杏叶提取液中加入1kg大豆油，搅拌30min，再采用100nm的陶瓷膜过滤，将大豆油去除的同时，将银杏酸去除，重复以上操作一次，得陶瓷膜透过液。
提取液中银杏酸含量为11610mg/kg(折干计算)，脱除后，通过陶瓷膜一次的透过液中的银杏酸含量的测试结果为92.4mg/kg，两次的结果为0.7mg/kg，第一次的银杏酸的脱除率为99.2％。
将透过液浓缩至无乙醇，用适量50℃温水稀释，经过D101大孔树脂纯化，得纯化液；大孔树脂纯化步骤为：经过1倍柱体积水洗除杂，3倍柱体积55％乙醇洗脱，得到纯化液。
将纯化液浓缩，喷雾干燥，喷雾进风口温度为180℃，出风口温度为90℃，得到银杏叶提取物产品。
经检测(按照《中国药典》2020版银杏叶提取物含量测定方法)，产品中银杏酸含量为0.7mg/kg(远低于《中国药典》2020版要求的≤5mg/kg)，总黄酮醇苷含量为26.1％，总黄酮醇苷得率为90.2％，银杏内酯含量为7.9％，银杏内酯得率为93.9％。
实施例2
取银杏叶粉碎100kg，其总黄酮醇苷含量为0.92％，银杏酸含量为0.21％(即2100mg/kg)，银杏内酯含量为0.29％，加入8倍量稀乙醇溶剂，加热回流提取2次，提取时间1小时/次，过滤，合并滤液得银杏叶提取液，提取液中总黄酮醇苷得率为98.3％，银杏内酯得率为97.6％。
将提取液浓缩至无乙醇，用适量50℃温水稀释，经过D101大孔树脂纯化，得纯化液；大孔树脂纯化步骤为：经过1倍柱体积水洗除杂，3倍柱体积55％乙醇洗脱，得到纯化液。
取以上纯化液，加入1kg大豆油，搅拌30min，再采用100nm的陶瓷膜过滤，将大豆油去除的同时，将银杏酸去除，重复以上操作一次，得陶瓷膜透过液。
提取液中银杏酸含量为10980mg/kg(折干计算)，脱除后，通过陶瓷膜一次的透过液中的银杏酸含量的测试结果为102.8mg/kg，两次的结果为0.8mg/kg，第一次的银杏酸的脱除率为99.06％。
将透过液浓缩，喷雾干燥，喷雾进风口温度为180℃，出风口温度为90℃，得到银杏叶提取物产品。
经检测(按照《中国药典》2020版银杏叶提取物含量测定方法)，产品中银杏酸含量为0.8mg/kg(远低于《中国药典》2020版要求的≤5mg/kg)，总黄酮醇苷含量为25.5％，总黄酮醇苷得率为91.4％，银杏内酯含量为8.1％，银杏内酯得率为92.1％。
实施例3
取干燥的银杏叶提取物40kg，其总黄酮醇苷含量为25.3％，银杏酸含量为0.892％(即8920mg/kg)，银杏内酯含量为7.3％，加入10倍量稀乙醇溶液，搅拌溶解均匀，加入5kg大豆油，再搅拌30min，再采用100nm的陶瓷膜过滤，将大豆油去除的同时，将银杏酸去除，重复以上操作一次，得陶瓷膜透过液。
通过陶瓷膜一次的透过液中的银杏酸含量的测试结果为58.9mg/kg，两次的结果为0.7mg/kg，第一次的银杏酸的脱除率为99.34％。
将透过液浓缩，喷雾干燥，喷雾进风口温度为180℃，出风口温度为90℃，得到银杏叶提取物产品。
经检测(按照《中国药典》2020版银杏叶提取物含量测定方法)，产品中银杏酸含量为0.7mg/kg(远低于《中国药典》2020版要求的≤5mg/kg)，总黄酮醇苷含量为24.9％，总黄酮醇苷得率为92.5％，银杏内酯含量为7.2％，银杏内酯得率为93.4％。
上述说明并非对本发明的限制，本发明也并不限于上述举例。本技术领域的普通技术人员在本发明的实质范围内，做出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。
Claims (1)
1.一种从银杏叶提取物中去除银杏酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）前处理：取原料银杏叶或银杏叶提取物；
如原料为银杏叶，则采用如下方法进行前处理：
a.提取：取银杏叶粉碎，加入稀乙醇溶剂，加热回流提取，过滤，得银杏叶提取液；
如原料为银杏叶提取物，则采用如下方法进行前处理：
b.溶解：取银杏叶提取物，加入稀乙醇溶剂，搅拌溶解均匀，得银杏叶提取液；
（2）脱酸：在银杏叶提取液中加入植物油，搅拌，采用陶瓷膜进行过滤；
（3）重复步骤（2），得陶瓷膜透过液；
（4）喷雾干燥：将陶瓷膜透过液进行浓缩，喷雾干燥，得银杏叶提取物产品；
步骤（1）中的步骤a及步骤b中，所述稀乙醇的浓度为50%；
所述步骤（1）中的步骤a中，所述稀乙醇的加入量为所述银杏叶的重量的8~10倍；所述步骤（1）中的步骤b中，所述稀乙醇的加入量为所述银杏叶提取物的重量的8~10倍；
所述步骤（1）中的步骤a中，所述加热回流提取的次数为两次，提取时间为1小时/次，合并滤液得步骤a所述银杏叶提取液；
所述步骤（1）中的步骤a及步骤b中，所述银杏叶提取液中的乙醇浓度为40%~58%；
所述步骤（2）中，所述植物油为大豆油；
如步骤（1）中所述原料为银杏叶，则所述步骤（2）中，所述植物油的加入量为步骤（1）中的步骤a所述银杏叶的重量的0.1%~1%；如步骤（1）中所述原料为银杏叶提取物，则所述步骤（2）中，所述植物油的加入量为步骤（1）中的步骤b所述银杏叶提取物的重量的5%~20%；
所述步骤（2）中，采用100nm的陶瓷膜进行过滤；
步骤（3）中，重复所述步骤（2）的次数为1~3次；
如步骤（1）中所述原料为银杏叶，则在所述步骤（1）与步骤（2）之间增加步骤c，或者在所述步骤（3）与步骤（4）之间增加步骤d；
如在所述步骤（1）与步骤（2）之间增加步骤c，则所述步骤c包括如下步骤：
将步骤a所述银杏叶提取液浓缩至无乙醇，用适量50℃温水稀释，经过D101大孔树脂纯化，先经过1倍柱体积水洗除杂，后经过3倍柱体积55%乙醇洗脱，得到纯化液；后续所述步骤（2）中在所述纯化液中加入植物油进行脱酸处理；
如在所述步骤（3）与步骤（4）之间增加步骤d，则所述步骤d包括如下步骤：
将步骤（3）所述陶瓷膜透过液浓缩至无乙醇，用适量50℃温水稀释，经过D101大孔树脂纯化，先经过1倍柱体积水洗除杂，后经过3倍柱体积55%乙醇洗脱，得到纯化液；后续所述步骤（4）中将所述纯化液进行浓缩并进行喷雾干燥处理。
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