CN104523836A - 一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法,该发明方法包括:①油梨仁经粉碎、干燥、脱脂后,采用乙醇/水提取,浓缩,调节提取液pH达到蛋白质等电点而使蛋白质沉降,固液分离、干燥得到蛋白;②沉淀蛋白后的上清液,经大孔树脂吸附,流出液干燥得到较高纯度的多糖;③大孔树脂经乙醇溶液洗脱,洗脱液浓缩干燥得到较高纯度的多酚。本发明依次从油梨仁中获得蛋白、多糖和多酚3种产品,且工艺简单,生产条件温和,所得产品纯度较高,适用于工业生产;所用溶剂主要为水和乙醇,对环境污染小,生产成本低。
Description
技术领域
本发明涉及一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法,属于油梨资源综合利用与开发技术领域。
背景技术
油梨又称鳄梨、酪梨或牛油果,系樟科鳄梨属的常绿乔木树种。其果肉富含脂肪酸,且不含胆固醇,营养价值高,享有“森林黄油”及“生命之源”的美誉
上世纪二十年代引种到福建、广东等省,经多年的引种,五十年代后已分布于海南、福建、广东、广西、云南、四川及浙江等省区,产量较为丰富。目前国内外对油梨的研究主要集中在油梨的栽培、保藏和油梨油的提取及利用等方面,而对油梨生产油梨油余下的残渣——果仁,综合利用研究甚少。油梨仁若不用于育苗,往往弃之,这无疑是一种资源的浪费。
植物多糖在植物中由单糖脱水形成,非淀粉、非纤维素的一类具有生理活性的高分子聚合物的总称。具有修复糖代谢混乱、抗氧化、降血糖、抗肿瘤、抗凝血、抗血栓及抗病毒等药理作用和多种保健功能,是目前食品、医药领域研究的热点领域之一,用于糖尿病等疾病的治疗。目前关于油梨仁多糖的提取工艺研究甚少,这些问题妨碍了油梨仁多糖在医药、食品等领域的直接应用。
多酚是植物中含多个酚羟基的一类天然活性物质,主要包括黄酮醇、黄烷醇、酚酸酸类等化合物。植物多酚是良好的天然抗氧化剂,具有降血脂、降血糖、抗衰老、降血压、抗癌防癌、防止冠状动脉粥样硬化等多种药理功效,广泛应用于食品、医药保健、日化等领域。对油梨仁中多酚的提取,具有多种功能和用途,例如可以作为天然的抗氧化剂应用到食品行业中,提高油脂的稳定性,延长油脂的保质期。且原料来源于量大、廉价的油梨仁,是一类具有良好开发前途的天然产物。
目前,有关油梨仁蛋白的提取已有相关报道,但油梨仁中除了蛋白外还富含多糖、多酚等活性成分,目前尚未有一个较为成熟的工艺能从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚等活性物质,而无法合理的综合利用与开发油梨资源。
发明内容
本发明利用乙醇/水浸法和大孔树脂纯化法,提出一种适合产业化放大生产的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法。
本发明是通过下述技术方案实现的。
一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法,包括以下步骤:
(1)油梨仁经粉碎、干燥,过50~80目的筛得到油梨仁粉末;
(2)向油梨仁粉末中加入石油醚使料液比为1g∶4mL~1g∶10mL下浸提,固液分离,液相浓缩回收石油醚,并得到油梨仁油,固相干燥后得到脱脂油梨仁粉末;
(3)向脱脂油梨仁粉末中加入醇/水溶剂提取使料液比为1g∶10mL~1g∶18mL下浸提,固液分离,得到含有蛋白、多糖及多酚的提取液;
(4)将步骤(3)中所得提取液进行浓缩,调节溶液pH,固液分离,固相干燥得到蛋白;
(5)步骤(4)中的水相采用大孔树脂吸附2~5h,用水洗脱,流出液干燥得到多糖;
(6)步骤(5)中的大孔树脂用10~20%的乙醇溶液洗脱进行洗脱以去除杂质,再用60~95%乙醇溶液解析,收集解析液,浓缩得到多酚;
(7)步骤(3)中固液分离得到的滤渣,经滤渣干燥得到膳食纤维。
上述步骤(1)中,所得油梨仁粉末为红色或棕红色。
上述步骤(2)中,所用的石油醚沸程为30~60℃或60~90℃,于在30~90℃下连续浸提2~3次,每次1~3h。
上述步骤(3)中,所述的乙醇/水溶剂为纯水溶剂或10~50%的乙醇水溶液,在50~90℃下浸提2~4h。
上述步骤(4)中,所得提取液浓缩至原体积的一半,再以1~10%的盐酸或硫酸调节溶液pH为2.0~6.0,使蛋白沉淀;固液分离采用常压过滤、减压过滤、离心分离中的一种,固相经常压干燥或冷冻干燥得到蛋白。
上述步骤(5)中,所用大孔树脂为D3520;所述的干燥方式为喷雾干燥。
本发明的优点与积极效果:
(1)采用乙醇/水作为溶剂综合提取蛋白、多糖及多酚,避免了其他有机溶剂(如甲醇等)提取所带来的费用高、安全性差等不足。
(2)利用调节提取液pH至蛋白质的等电点而使得蛋白质沉降,固液分离获得蛋白。
(3)采用大孔树脂对多糖和多酚进行富集、分离及纯化,提高了产品的纯度以及生产效率,还有效的降低了能耗,实现了蛋白、多糖、多酚综合提取及分离纯化。同时大孔树脂可以重复利用,不仅能有效的解决传统提取及纯化工艺难以放大、纯化过程导致有毒溶剂残留(如多糖的纯化采用Sevag试剂(氯仿和正丁醇的混合液)、三氟乙酸等脱除蛋白)、产品失活等问题,还简化了生产工序、降低生产成本。
(4)采用乙醇和水作为溶剂,有机溶剂回收率高,水可循环使用,对环境污染小。
(5)本发明工艺设计合理,可操作性强,生产条件温和,安全无毒,操作简单,所得产品纯度较高,适用于工业化生产。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步说明,但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1
(1)油梨仁粉末50g于50℃下用石油醚(30~60℃)浸提两次,料液比1g∶10mL,每次2.0h,过滤,合并提取液,浓缩回收石油醚得到油梨仁油及脱脂油梨仁粉末。
(2)向脱脂油梨仁粉末中加入纯水,料液比1g∶15mL,于60℃下浸提2.5h,过滤,过滤,残渣烘干即可得到膳食纤维,提取液浓缩至原来体积的一半,用5%盐酸溶液调节pH=4.0,离心分离得到沉淀下来的蛋白,干燥得到蛋白。
(3)取水相部分,用D3520大孔树脂吸附3h,用1倍柱体积纯水洗脱,收集流出液,喷雾干燥得到多糖。
(4)将D3520大孔树脂用20%的乙醇溶液洗脱进行洗脱以去除杂质,再用75%乙醇溶液进行解析,收集解析液,浓缩回收乙醇,并干燥得到多酚。
实施例2
(1)油梨仁粉末500g于70℃下用石油醚(60~90℃)浸提两次,料液比1g∶5mL,每次2.5h,过滤,合并提取液,浓缩回收石油醚得到油梨仁油及脱脂油梨仁粉末。
(2)向脱脂油梨仁粉末中加入纯水,料液比1g∶10mL,于70℃下浸提3.0h,过滤,过滤,残渣烘干即可得到膳食纤维,提取液浓缩至原来体积的1/2,用2%硫酸酸溶液调节pH=4.6,离心分离得到沉淀下来的蛋白,干燥得到蛋白。
(3)取水相部分,用D3520大孔树脂吸附5h,用1.5倍柱体积纯水洗脱,收集流出液,喷雾干燥得到多糖。
(4)将D3520大孔树脂用15%的乙醇溶液洗脱进行洗脱以去除杂质,再用85%乙醇溶液进行解析,收集解析液,浓缩回收乙醇,并干燥得到多酚。
Claims (5)
1.一种从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)油梨仁经粉碎、干燥,过50~80目的筛得到油梨仁粉末;
(2)向油梨仁粉末中加入石油醚浸提,固液分离,液相浓缩回收石油醚,并得到油梨仁油,滤渣干燥后得到脱脂油梨仁粉末;
(3)向脱脂油梨仁粉末中加入醇/水溶剂提取,固液分离,得到含有蛋白、多糖及多酚的提取液;
(4)将步骤(3)中所得提取液进行浓缩,调节溶液pH,固液分离,固相干燥得到蛋白;
(5)步骤(4)中的水相采用大孔树脂吸附,用水洗脱,流出液干燥得到多糖;
(6)步骤(5)中的大孔树脂用乙醇溶液洗脱进行解析,收集解析液,浓缩得到多酚;
(7)步骤(3)中固液分离得到的滤渣,经滤渣干燥得到膳食纤维。
2.根据权利要求1所述的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法,其特征在于:步骤(2)中,所用的石油醚沸程为30~60℃或60~90℃。
3.根据权利要求1所述的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述的乙醇/水溶剂为纯水溶剂或10~50%的乙醇水溶液。
4.根据权利要求1所述的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法,其特征在于:步骤(4)中,所得提取液浓缩至原体积的一半,再以1~10%盐酸或硫酸溶液调节溶液pH=2.0~6.0,使蛋白沉淀;固液分离采用常压过滤、减压过滤、离心分离中的一种,固相经常压干燥或冷冻干燥得到蛋白。
5.根据权利要求1所述的从油梨仁中综合提取蛋白、多糖及多酚的方法,其特征在于:步骤(5)中,所用大孔树脂为D3520;所述的干燥方式为喷雾干燥。
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