CN114236031B - 黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法，涉及药材检验技术领域。本发明色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，包括以下步骤：步骤S1：以乙腈‑0.1％磷酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，以水为流动相C；步骤S2：梯度洗脱时长0‑20min，取流动相A占比100％，流动相B占比0％，流动相C占比0％；步骤S3：梯度洗脱时长20‑25min，取流动相A占比0％，流动相B占比8％，流动相C占比92％；步骤S4：梯度洗脱时长25‑55min，取流动相A占比0％等。本发明改进的色谱条件和方法可以更好的检验黄柏原药材及饮片的黄柏碱含量，做到保留时间稳定，杂质洗脱干净，同时大大节约了检验的时间，节约了流动相试剂试液。
Description
技术领域
本发明涉及药材检验技术领域，特别是涉及黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法。
背景技术
黄柏为芸香科植物黄皮树的干燥树皮，习称“川黄柏”，剥取树皮后，除去粗皮，晒干，黄柏是中国的传统中药材，具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮的作用，临床应用广泛，用量极大；
目前黄柏原药材及饮片中黄柏碱的含量测定依据为《中国药典》2020版，该方法色谱条件检验方法时间长，保留时间不稳定，杂质洗脱不干净，甚至于样品按照原来的色谱条件在运行2小时后仍有杂峰干扰后面的样品；因此，我们提出黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法。
发明内容
本发明的目的在于提供黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法，从保留时间的稳定性，锋面积的稳定性，锋状态等一系列的条件中评估出新方法，以解决上述背景中提出的问题。
为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：
本发明为黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法，色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，包括以下步骤：
步骤S1：以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，以水为流动相C；
步骤S2：梯度洗脱时长0-20min，取流动相A占比100％，流动相B占比0％，流动相C占比0％；
步骤S3：梯度洗脱时长20-25min，取流动相A占比0％，流动相B占比8％，流动相C占比92％；
步骤S4：梯度洗脱时长25-55min，取流动相A占比0％，流动相B占比8％，流动相C占比92％；
步骤S5：梯度洗脱时长55-60min，取流动相A占比0％，流动相B占比100％，流动相C占比0％；
步骤S6：梯度洗脱时长60-90min，取流动相A占比0％，流动相B占比100％，流动相C占比0％；
步骤S7：梯度洗脱时长90-95min，取流动相A占比0％，流动相B占比10％，流动相C占比90％；
步骤S8：梯度洗脱时长95-110min，取流动相A占比0％，流动相B占比10％，流动相C占比90％；
步骤S9：梯度洗脱时长110-112min，取流动相A占比100％，流动相B占比0％，流动相C占比0％；
步骤S10：梯度洗脱时长112-142min，取流动相A占比100％，流动相B占比0％，流动相C占比0％。
优选地，所述步骤S1中流动相A每100ml加十二烷基磺酸钠0.1g，加0.5ml三乙胺(35︰65)。
优选地，所述步骤S2-步骤S10中，检测波长为284nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算不低于6000。
为了优化出黄柏药材及饮片中黄柏碱的含量测定的色谱条件，本发明方案进行了相关药学研究，并且在不改变色谱柱等其他影响因素下按照新的色谱条件做了18批黄柏药材及饮片中黄柏碱的含量，从保留时间的稳定性，锋面积的稳定性，锋状态等一系列的条件中评估出新方法大大的优于原检验方法。
本发明具有以下有益效果：
本发明黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法，针对于现有黄柏含量测定黄柏碱方法测定多批次时间长，保留时间不稳定，批次之间杂质互相干扰的问题，本方案色谱条件可以使保留时间稳定，杂质洗脱干净，大大节约了检验的时间，节约了流动相试剂试液。
当然，实施本发明的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1所示：本发明为黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法，色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸溶液(每100ml加十二烷基磺酸钠0.1g，加0.5ml三乙胺)(35︰65)为流动相A，乙腈为流动相B，水为流动相C，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为284nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于6000。
本发明技术应用于黄柏原药材及饮片中黄柏含量黄柏碱的高效液相色谱检验，黄柏原药材及饮片中黄柏碱的含量测定依据为《中国药典》2020版，该方法色谱条件检验方法时间长，保留时间不稳定，杂质洗脱不干净，改进的色谱方法可以更好的检验黄柏原药材及饮片的黄柏碱含量，做到保留时间稳定，杂质洗脱干净，大大节约了检验的时间，节约了流动相试剂试液。
本发明检测方法实际操作过程中应注意色谱条件，包括试剂加入类别、试剂加入比例和梯度洗脱过程。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“示例”、“具体示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
以上公开的本发明优选实施例只是用于帮助阐述本发明。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该发明仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本发明的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本发明。本发明仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。
Claims (1)
1.黄柏原药材含量测定中黄柏碱的高效液相色谱检验方法，色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，其特征在于，包括以下步骤：
步骤S1：以乙腈和0.1%磷酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，以水为流动相C；
步骤S2：梯度洗脱时长0-20min，取流动相A占比100%，流动相B占比0%，流动相C占比0%；
步骤S3：梯度洗脱时长20-25min，取流动相A占比0%，流动相B占比8%，流动相C占比92%；
步骤S4：梯度洗脱时长25-55min，取流动相A占比0%，流动相B占比8%，流动相C占比92%；
步骤S5：梯度洗脱时长55-60min，取流动相A占比0%，流动相B占比100%，流动相C占比0%；
步骤S6：梯度洗脱时长60-90min，取流动相A占比0%，流动相B占比100%，流动相C占比0%；
步骤S7：梯度洗脱时长90-95min，取流动相A占比0%，流动相B占比10%，流动相C占比90%；
步骤S8：梯度洗脱时长95-110min，取流动相A占比0%，流动相B占比10%，流动相C占比90%；
步骤S9：梯度洗脱时长110-112min，取流动相A占比100%，流动相B占比0%，流动相C占比0%；
步骤S10：梯度洗脱时长112-142min，取流动相A占比100%，流动相B占比0%，流动相C占比0%；
所述步骤S1中流动相A每100ml加十二烷基磺酸钠0.1g，加0.5ml三乙胺，所述乙腈与0.1%磷酸溶液的体积比为35:65，所述步骤S2-步骤S10中，检测波长为284nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算不低于6000。
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