CN104833731A - 镇痛活络酊的含量测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及镇痛活络酊的含量测定方法，由以下步骤组成：(1)采用高效液相色谱法，有效分离芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚。色谱条件与系统适应性：用十八烷基键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以乙腈为流动相B，以0.2％冰乙酸溶液为流动相C，按规定进行梯度洗脱；检测波长为254nm，流速1.0ml/min，柱温为35℃，理论板数按大黄酚计应不低于3000；(2)精密量取对照品溶液适量，加甲醇稀释成所需浓度的对照品溶液，摇匀，进样20μl于液相色谱仪，记录色谱图，另取镇痛活络酊本品3ml，置10ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；(3)按外标法以峰面积计算，即得。本发明在同一色谱条件下，完成对大黄酚及总蒽醌的定量分析，测定方法简单可行，测定指标精确。

Description

镇痛活络酊的含量测定方法

技术领域：

本发明涉及化学检验领域和药物分析技术领域，特别是镇痛活络酊的含量测定方法。

背景技术：

镇痛活络酊中含有17种主要成份，其中仅以大黄酚含量测定作为含量测定项目，目前镇痛活络酊含量的检测项目较单一，对产品质量控制单一。

发明内容：

本发明的目的是提供一种测定镇痛活络酊含量的方法，在色谱条件下使镇痛活络酊中的五种主要成分实现有效分离，进而完成了其定量分析，检测方法简易可行，测定含量指标精确。

为实现本发明的目的，本发明所采用的技术方案是：

镇痛活络酊含量测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)色谱条件建立与系统适应性步骤：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以乙腈为流动相B，以0.2％冰乙酸溶液为流动相C，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为254nm，理论板数按大黄酚峰计算应不低于3000；

时间(分钟)	流动相A(％)	流动相B(％)	流动相C(％)
				0～23	48→44	18	34→38
23～30	44→21	18→20	38→59
				30～40	21→25	20	59→55
40～50	25→20	20→15	55→65
				50～56	20→48	15→18	65→34
56～60	48	18	34

(2)测定步骤：

精密量取对照品溶液适量，加甲醇稀释成所需浓度的对照品溶液，摇匀，进样20μl于液相色谱仪，记录色谱图；

另取镇痛活络酊3ml，置10ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得镇痛活络酊供试品溶液，进样20μl于液相色谱仪，记录色谱图；

按外标法以峰面积计算，即得芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量。

本发明在同一色谱条件下，完成对芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的定量分析，测定方法简单可行，测定指标精确。

本发明现有的优点和积极的效果：

本发明是在同一色谱条件下实现了五组分的定量分析，即节约了成本、时间、物力，又实现了方法操作简便、快捷，检验仪器简单常见，数分钟内就可测定一个样品，并且结果准确、可靠、稳定性良好。

附图说明

图1原色谱条件对照品溶液色谱图。

图2原色谱条件供试品溶液色谱图。

图3本发明实施例1对照品混合溶液色谱图。

图4本发明实施例1供试品溶液色谱图。

具体实施方式

本发明镇痛活络酊含量测定方法的实施例，对其中的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品含量同时进行检测：

实施例1

按照《中国药典》2010版一部附录VD高效液相色谱法测定。

实验方法与过程：

1.仪器与试剂

色谱仪：1260型高效液相色谱仪(厂家：安捷伦)

分析天平：XS105型(厂家：梅特勒)

供试品：镇痛活络酊。

2.色谱条件与系统适应性

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以乙腈为流动相B，以0.2％冰乙酸溶液为流动相C，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为254nm，理论板数按大黄酚峰计算应不低于3000。

时间(分钟)	流动相A(％)	流动相B(％)	流动相C(％)
				0～23	48→44	18	34→38
23～30	44→21	18→20	38→59
				30～40	21→25	20	59→55
40～50	25→20	20→15	55→65
				50～56	20→48	15→18	65→34
56～60	48	18	34

3.对照品溶液和供试品溶液的制备

对照品溶液配制：精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品各20mg，置同一100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为混合母液①。

精密称定的大黄素甲醚对照品20mg，置另一100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为母液②。

精密量取对照品混合母液①2ml，大黄素甲醚对照品母液②1ml，置同一100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml中含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各4μg、含大黄素甲醚2μg的对照品溶液。

供试品溶液配制：精密量取镇痛活络酊3ml，置10ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，用滤膜(0.45μm)滤过，即得。

4.测定法：

取上述对照品溶液，自动进样20μl于液相色谱仪记录色谱图。

取上述供试品溶液，自动进样20μl于液相色谱仪记录色谱图。

按外标法以峰面积计算，即得芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量。

当然，上述说明并非对发明的限制，本发明也并不限于上述举例，本技术领域的普通技术人员，在本发明的实质范围内作出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。

Claims (1)

1.镇痛活络酊含量测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)色谱条件建立与系统适应性步骤：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以乙腈为流动相B，以0.2％冰乙酸溶液为流动相C，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为254nm，理论板数按大黄酚峰计算应不低于3000；

时间(分钟) 流动相A(％) 流动相B(％) 流动相C(％) 0～23 48→44 18 34→38 23～30 44→21 18→20 38→59 30～40 21→25 20 59→55 40～50 25→20 20→15 55→65 50～56 20→48 15→18 65→34 56～60 48 18 34

(2)测定步骤：

精密量取对照品溶液适量，加甲醇稀释成所需浓度的对照品溶液，摇匀，进样20μl于液相色谱仪，记录色谱图；

另取镇痛活络酊3ml，置10ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得镇痛活络酊供试品溶液，进样20μl于液相色谱仪，记录色谱图；

按外标法以峰面积计算，即得芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚含量。