CN113967229B - 一种治疗静脉炎的中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提出了一种中药组合物，以重量比计，所述中药组合物包括：垂盆草1～100份，金银花1～100份，赤芍1～100份，牡丹皮1～100份，熟大黄1～100份，甘草1～100份。对酒石酸长春瑞滨所致家兔耳缘静脉炎血管损伤有改善作用，对氟尿嘧啶所致小鼠尾静脉炎血管损伤有改善作用，对二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症有抑制作用。

Description

一种治疗静脉炎的中药组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种中药组合物及其制备方法和应用。
背景技术
血栓性浅静脉炎是临床上常见的周围血管疾病，是多发生于肢体或躯干部浅静脉的血栓性、炎性病变，常易发生深静脉血栓和肺栓塞。临床表现多为急性发病，沿浅静脉循行处皮肤发红、肿胀、灼热，出现结节或索条状物，有明显的压痛和疼痛，以四肢及胸腹壁多见，急性期过后索条状物变硬，局部皮肤色素沉着。属于中医学“赤脉、青蛇毒、恶脉、黄鳅痈、脉痹”等范畴。本病是一种多发病、常见病，与季节无关，多发于青壮年，男女均可罹患。湿热蕴结、寒湿凝滞、脾虚失运、外伤血脉、痰瘀互结、气虚血瘀、阳气亏虚、气滞血瘀等均可导致本病的发生。
目前，西医治疗的药物临床常用抗血栓，消炎，镇痛药等治疗静脉炎。中医治疗静脉炎以清热利湿、解毒通络、活血化瘀、疏肝解郁是本病的基本治法。
目前在中药新药开发领域，该病疗效评价标准不一，都是凭各医家自身经验在治疗，没有上市中成药。
发明内容
本发明的目的在于弥补现有技术的不足，提供一种中药组合物，以重量比计，所述中药组合物包括：垂盆草1～100份，金银花1～100份，赤芍1～100份，牡丹皮1～100份，熟大黄1～100份，甘草1～100份。本发明的组合物可以直接研磨成粉，也可以是经过本领域常规手段制得的提取物等。本发明组合物中使用的中药也可以以直接研磨成粉、提取物、或者其它加工形态的方式使用。
优选地，所述中药组合物包括：垂盆草30～90份，金银花15～45份，赤芍10～30份，牡丹皮10～30份，熟大黄5～15份，甘草5～15份。
优选地，所述中药组合物包括：垂盆草30～60份，金银花15～30份，赤芍10～20份，牡丹皮10～20份，熟大黄5～10份，甘草5～10份。
优选地，所述中药组合物包括：垂盆草12～72份，金银花6～36份，赤芍4～24份，牡丹皮4～24份，熟大黄2～12份，甘草2～12份。
优选地，所述中药组合物包括：垂盆草24～36份，金银花12～18份，赤芍8～12份，牡丹皮8～12份，熟大黄3～7份，甘草3～7份。
更优选地，所述中药组合物包括：垂盆草27～33份，金银花14～16份，赤芍9～11份，牡丹皮9～11份，熟大黄4～6份，甘草4～6份。
最优选地，所述中药组合物包括：垂盆草30份，金银花15份，赤芍10份，牡丹皮10份，熟大黄5份，甘草5份。
本发明还提出了一种前述任一组合物在制备治疗静脉炎的药物中的应用。
本发明的的组合物能用于制备包括静脉炎血管损伤、急性炎症、血栓形成等的药物。
具体地，所述治疗静脉炎的药物包括治疗静脉炎血管损伤、急性炎症、血栓形成或炎性疼痛的药物。所述静脉炎可主要表现湿热蕴结、寒湿凝滞、脾虚失运、外伤血脉、痰瘀互结、气虚血瘀、阳气亏虚、气滞血瘀等。
优选地，所述静脉炎可以是血栓性浅静脉炎。
本发明还提出了前述任一组合物在制备抗血栓、抗炎或止疼药物中的应用。
具体地，所述用于，可以是包括治疗或预防在内的一切有益于改善患者相应症状的方式。
本发明还提出了一种药物，该药物由前述任一中药组合物与药学上可接受的辅料或添加剂制得。
具体地，该药物选自汤剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、软胶囊、滴丸、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂、注射剂。
本发明还提出了一种前述任一中药组合物的制备方法，所述制备方法为：
取药材加入8～12倍水回流提取，提取液过滤，滤液浓缩至相对密度1.10～1.15，离心滤过，滤液真空干燥。
优选地，取药材加入水回流提取2次，每次1小时，第一次加入12倍水，第二次加入10倍水，合并提取液，过滤，滤液浓缩至与药材比为1:1(相对密度1.10～1.15，60℃)，离心滤过。
前述浓缩后所得浸膏可根据需要进行干燥、粉碎，得到用于制备所需中药制剂的中间体。
本发明还提出了一种中药颗粒剂的制备方法，该制备方法为：取垂盆草30份，金银花15份，赤芍10份，牡丹皮10份，熟大黄5份，甘草5份，加入水提取2次，每次1小时，第一次加入12倍水，第二次加入10倍水，合并提取液，过滤，滤液浓缩至与药材比为1:1(相对密度1.10～1.15，60℃)，离心滤过，滤液减压干燥，粉碎，得中间体组合物3，加入糊精和淀粉，混匀即得。
本发明提出了一种中药组合物，并给出了制备组合物的活性提取物中间体组合物的制备方法。利用本发明提取的方法得到的组合物，对酒石酸长春瑞滨所致家兔耳缘静脉炎血管损伤有改善作用，对氟尿嘧啶所致小鼠尾静脉炎血管损伤有改善作用，对二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症有抑制作用。以上也表明本发明制得的组合物具有治疗静脉炎的作用。
而且，本发明还通过实验证实了所述中药组合物，对鹿角菜胶所致小鼠尾部血栓形成有抑制作用，以及对热板所致小鼠疼痛有抑制作用。这也表明本发明所述中药组合物对鹿角菜胶所致小鼠血栓形成和对热板所致小鼠疼痛有明显的抑制作用。
具体实施方式
如前所述，本发明旨在提供一种中药组合物及其制备方法和应用。以下将结合实验例的内容进行具体描述。
特别需要指出的是，针对本发明所做出的类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
本发明如未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行，所用原料药或辅料，以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1中药复方颗粒
组方：垂盆草30份，金银花15份，赤芍10份，牡丹皮10份，熟大黄5份，甘草5份。
该中药组合物颗粒剂的制备方法：
取上述药材，加入水回流提取2次，每次1小时，第一次加入12倍水，第二次加入10倍水，合并提取液，过滤，滤液浓缩至与药材比为1:1(相对密度1.10～1.15，60℃)，离心滤过，滤液真空干燥，得浸膏粉，加入糊精和淀粉，利用干法制粒获得颗粒。
实施例2中药复方胶囊
组方：垂盆草60份，金银花30份，赤芍15份，牡丹皮15份，熟大黄10份，甘草10份。
该中药组合物胶囊剂的制备方法：
取上述药材，加入水回流提取2次，每次1小时，第一次加入12倍水，第二次加入10倍水，合并提取液，过滤，滤液浓缩至与药材比为1:1(相对密度1.10～1.15，60℃)，离心滤过，滤液真空干燥，得浸膏粉，喷雾干燥制粒，制成胶囊。
实施例3中药复方片剂
组方：垂盆草60份，金银花30份，赤芍20份，牡丹皮20份，熟大黄10份，甘草10份。
该中药组合物片剂的制备方法：
取上述药材，加入水回流提取2次，每次1小时，第一次加入12倍水，第二次加入10倍水，合并提取液，过滤，滤液浓缩至与药材比为1:1(相对密度1.10～1.15，60℃)，离心滤过，滤液真空干燥，得浸膏粉加入微晶纤维素等辅料，制成片剂。
实施例4中药复方软胶囊
组方：垂盆草90份，金银花45份，赤芍30份，牡丹皮30份，熟大黄15份，甘草15份。
该中药组合物的软胶囊的制备方法：
取上述药材，加入水回流提取2次，每次1小时，第一次加入12倍水，第二次加入10倍水，合并提取液，过滤，滤液浓缩至与药材比为1:1(相对密度1.10～1.15，60℃)，离心滤过，滤液真空干燥，得中间体，加入一定辅料，制成软胶囊3。
实施例5本发明组合物对长春瑞滨所致家兔耳缘静脉炎的影响
1、实验材料
1.1药物及试剂
受试药物：实施例1中制备的中药组合物(浸膏粉)，上海图锋医药科技有限公司，批号20190802；曲克芦丁片，亚宝药业集团股份有限公司，国药准字H14022940，批号：190908，规格型号：60mg*100s；脉络舒通丸，鲁南厚普制药有限公司，国药准字Z20090636，批号：18191331，规格型号：每袋装12g(每丸重约0.056g)；0.5％羧甲基纤维素钠(CMC)，成都市科隆化学品有限公司，批号：2019051301，LR。酒石酸长春瑞滨，Medkoo，批号：TZC50930。磷酸二氢钠，福晨(天津)化学试剂有限公司，批号：20190512；磷酸氢二钠，福晨(天津)化学试剂有限公司，批号：20190907；甲醛，成都市科隆化学有限公司生产，批号：2019091901；无水乙醇(AR级)，成都海兴化工试剂厂，批号：GB678-90；二甲苯(AR级)，天津市致远化学试剂有限公司，批号：20200110；苏木素染液，珠海贝索生物技术有限公司，批号：C200301；伊红染液，珠海贝索生物技术有限公司，批号：C200403；中性树胶，Biosharp生物公司，批号：69120060BL704A；氯化钠注射液，安徽丰原药业股份有限公司淮海药厂，批号：181022107；戊巴比妥钠，Merck，批号：020100103254；乌来糖，成都科龙化工试剂厂，批号：20130323；甲醛溶液，成都长联化工试剂有限公司，批号：20190705。
1.2动物
日本大耳白兔56只，雌雄各半，试验体重2kg-2.2kg，购于成都达硕实验动物有限公司，西南医科大学实验动物中心生产，生产许可证号：SCXK(川)2018-17。饲养于四川省中医药科学院实验动物中心家兔饲养区，饲养条件符合普通动物实验室要求，所有试验均在该饲养区完成。实验动物使用许可证号：SYXK(川)2018-100。
1.3仪器
2016转轮式切片机，徕卡；T-12S自动组织脱水机，武汉俊杰电子有限公司；BMJ-A型包埋机，常州郊区中威电子仪器厂；RS36型全自动染色机，常州派斯杰医疗设备有限公司；PHY-Ⅲ型病理组织漂烘仪，常州市中威电子仪器有限公司；BA210Digital数码三目摄像显微镜，麦克奥迪实业集团有限公司。R35刀片，日本羽毛安全剃刀株式会社；80106-1100型组织包埋盒，盐城汇达塑业有限公司；切片盒，襄樊徕卡生物电子仪器厂；载玻片，南通美韦德实验器材有限公司，规格：25mm×75mm×1.1mm；盖玻片，海门世泰实验器材制造有限公司，规格：24mm×50mm；高效切片石蜡，上海华灵康复器械厂，批号：20190918；RTZ-10A-RT型婴儿称，武进市衡器厂，10kg×50g；BSA223S电子天平，赛多利斯，d＝1mg；BP211D电子天平，赛多利斯，d＝0.01mg；一次性使用无菌注射器(5mL)，浙江欧健医用器材有限公司，批号：130523；一次性使用无菌注射器(10mL)，中国双鸽集团聚民生物科技有限公司，批号：181207。一次性使用静脉输液针，浙江康德莱医疗器械股份有限公司，批号：批C 20190102；一次性使用硅橡胶导尿管，扬州市新星硅胶厂，批号：Fr10 3.3mm。
2、实验方法
造模给药：56只日本大耳白兔，雌雄各半，分笼、分性别饲养，正常饮食，检疫观察5天。称量体重后排序。
动物按体重分层随机分为7组，每组8只，雌雄各半，重新进行笼具及动物标记，分别为空白对照组(0.5％CMC)、模型对照组(0.5％CMC)、阳性对照1组(曲克芦丁片27.72mg/kg)、阳性对照2组(脉络舒通丸1.85g/kg)、中药组合物1(高剂量，3.85g生药/kg)组、中药组合物1(中剂量，1.92g生药/kg)组、中药组合物1(低剂量，0.96g生药/kg)组。
1)以前述分组日计为第1日，按计划灌胃给予供试品、对照品或溶媒，体积为3mL/kg，连续6日；
2)除空白对照组外，其他动物给药后即进行模型复制：用静脉输液针从家兔右侧耳缘静脉距耳尖2～3cm处(用中性红溶液预先标注穿刺点)近心方向静脉穿刺，确保无外渗后，用3％戊巴比妥钠生理盐水溶液1mL/kg耳缘静脉注射麻醉动物，再用2mL生理盐水以2mL/min速度冲洗静脉；将前述精确称量的酒石酸长春瑞滨用氯化钠注射液稀释至10mL，从耳缘静脉缓慢注射，注射时间约15min。空白对照组进行同样操作，酒石酸长春瑞滨生理盐水溶液更换为氯化钠注射液。
3)第10日称量体重，按新体重继续给药；给药后1h，对推注部位附近耳缘静脉进行评分(0级，无症状；1级，穿刺部位发红；2级，穿刺部位发红和/或水肿；3级，穿刺部位发红，条状痕/纹形成，可触及条索状静脉；4级，穿刺部位发红，可触及条索状静脉，长度大于2.5cm，有化脓性液体)。
表1试验分组与剂量设计表
Figure SMS_1
指标观察：评分后以30％乌来糖生理盐水溶液麻醉处死所有受试动物，处死后在穿刺点向近心方向，以距离穿刺点2.5cm为中心，取1cm2耳廓组织作为标本，10％甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，HE染色，光镜观察血管内皮细胞脱落(0分：血管内皮及血管壁完整；1分：<血管切面1/3；2分：1/3～2/3血管切面；3分：>血管切面2/3)、血管周围组织水肿(0分：未见水肿；1分：轻微水肿；2分：中度水肿；3分：严重水肿)、炎症细胞浸润(0分：未见炎细胞或偶见单个炎细胞；1分：血管壁或血管周围组织少量炎细胞散在浸润；2分：血管壁或血管周围组织多量炎细胞散在或局灶浸润；3分：血管外组织中大量炎细胞弥漫性或堆积性浸润)和血管内血栓形成(0分：血管内无血栓；1分：<血管切面1/3；2分：1/3～2/3血管切面；3分：>血管切面2/3)等项指标，进行四级评分。
采用SPSS23.0对结果进行统计：评分等级资料以四分位数(M(Q1，Q3))描述，进行K-W非参数检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
3、实验结果：
评分结果如表2所示。空白对照组动物耳缘静脉外观无异常，模型对照组动物穿刺部位发红，条状痕/纹形成，可触及条索状静脉，评分升高，与空白对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。阳性对照曲克芦丁片组与脉络舒通丸组动物外观均有不同程度改善，评分较模型对照组降低，统计学比较均有显著性差异(P<0.05)。中药组合物高、中、低剂量组动物外观也均有不同程度改善，评分较模型对照组降低，统计学比较分别有极显著性和显著性差异(P<0.01，P<0.05)。
表2对耳缘静脉损伤外观评分的影响(n＝8，♀♂，M(Q1，Q3))
Figure SMS_2
注：模型对照组与空白对照组比较(K-W检验)，△P<0.05，△△P<0.01；其余组与模型对照组比较(K-W检验)，*P<0.05，**P<0.01
评分结果如表3。空白对照组动物耳缘静脉病理学检查无异常，模型对照组动物静脉出现明显的炎症反应、内皮损伤及血栓形成，评分升高，与空白对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。阳性对照脉络舒通丸组动物静脉炎症反应、内皮损伤及血栓形成等均有不同程度改善，评分较模型对照组降低，统计学比较有显著性差异(P<0.05)。中药组合物高、中剂量组动物静脉炎症反应、内皮损伤及血栓形成等也均有不同程度改善，评分较模型对照组降低，统计学比较均有显著性差异(P<0.05)。
表3对耳缘静脉损伤病理学检查评分的影响(n＝8，♀♂，(M(Q1，Q3))
Figure SMS_3
Figure SMS_4
注：模型对照组与空白对照组比较(K-W检验)，△P<0.05，△△P<0.01；其余组与模型对照组比较(K-W检验)，*P<0.05，**P<0.01
空白对照组：耳廓组织形态结构完整，血管结构完整清晰，内皮及血管壁完整，管腔内可见不等量红细胞，少量淋巴细胞或中性粒细胞，未见明显病理变化。
模型对照组：耳廓组织形态结构完整，表皮结构完整清晰，皮下少量皮脂腺分布，腺体细胞排列规整，耳廓软骨与皮肤平行，耳缘静脉与软骨组织伴行，绝大部分血管内皮不同程度脱落，见部分血管壁不光滑，内皮细胞缺失；少量血管内形成血栓基本形成完全栓塞；绝大部分血管周围组织中度至重度水肿，见细胞间隙明显增宽，部分间隙内见粉色淡染的水肿液；全部血管壁或血管周围组织少量或较多炎细胞散在浸润，以核圆形深染的淋巴细胞和分叶核的中性粒细胞为主；大部分血管周围组织不同程度出血，见红细胞溢出血管散在或堆积分布于间质；半数以上血管周围组织不同程度纤维组织增生，见成纤维细胞核呈椭圆形，着色较淡。
阳性对照1组(曲克芦丁片)：耳廓组织形态结构完整，表皮结构完整清晰，皮下少量皮脂腺分布，耳廓软骨与皮肤平行，耳缘静脉与软骨组织伴行，其中大部分血管内皮细胞脱落；半数血管内形成大小不等血栓；大部分血管周围组织轻度至中度水肿，大部分间隙内见少量水肿液；血管壁或血管周围组织少量炎细胞散在浸润；大部分血管周围组织不同程度出血；少量血管周围组织少量纤维组织增生。
阳性对照2组(脉络舒通丸)：耳廓组织形态结构完整，表皮结构完整清晰，皮下少量皮脂腺分布，耳廓软骨与皮肤平行，耳缘静脉与软骨组织伴行，其中半数以下血管内皮细胞脱落；大部分血管周围组织不同程度水肿；绝大部分血管壁或血管周围组织炎细胞散在浸润，主要为淋巴细胞和中性粒细胞；半数以上血管周围组织轻度出血，红细胞溢出血管；少数血管周围组织少量纤维组织增生。
中药组合物(高剂量)：耳廓组织形态结构完整，表皮结构完整清晰，皮下少量皮脂腺分布，耳廓软骨与皮肤平行，耳缘静脉与软骨组织伴行，其中极少数少量血管内皮细胞脱落；半数血管周围组织不同程度水肿；绝大部分血管壁或血管周围组织少量炎细胞散在浸润，包括淋巴细胞和中性粒细胞；半数血管周围组织轻度出血；极少数血管周围组织少量纤维组织增生。
中药组合物(中剂量)：耳廓组织形态结构完整，表皮结构完整清晰，皮下少量皮脂腺分布，耳廓软骨与皮肤平行，耳缘静脉与软骨组织伴行，其中半数以上少量或较多血管内皮细胞脱落；极少数血管内形成小血栓；半数血管周围组织不同程度水肿；绝大部分血管壁或血管周围组织少量或较多炎细胞散在浸润，包括淋巴细胞和中性粒细胞；半数以上血管周围组织轻度出血；极少数血管周围组织少量纤维组织增生。
中药组合物(低剂量)：耳廓组织形态结构完整，表皮结构完整清晰，皮下少量皮脂腺分布，耳廓软骨与皮肤平行，耳缘静脉与软骨组织伴行，大部分血管内皮细胞不同程度脱落；半数以上血管内形成大小不等血栓；绝大部分血管周围组织中度至重度水肿；绝大部分血管壁或血管周围组织少量或较多炎细胞散在浸润，包括淋巴细胞和中性粒细胞；半数以上血管周围组织不同程度出血；极少数血管周围组织少量纤维组织增生。
急性血栓性浅静脉炎是位于人体体表的可视静脉的急性非化脓性炎症，是多发生于肢体或躯干部浅静脉的血栓性、炎性病变，常伴有血栓形成。是一种血管血栓性疾病。临床表现沿浅静脉循行处皮肤发红、肿胀、灼热，出现结节或索条状物，有明显的压痛和疼痛。本实验采用中药组合物3.85g、1.92g生药/kg灌胃给予10天，对酒石酸长春瑞滨所致家兔耳缘静脉炎血管损伤有改善作用，各剂量间呈一定的量效关系作用趋势。
实施例6：本发明组合物对氟尿嘧啶所致小鼠尾静脉炎的影响
1、实验材料
1.1药物及试剂
受试药物：实施例1中制备的中药组合物(浸膏粉)，上海图锋医药科技有限公司，批号：20190802；曲克芦丁片，亚宝药业集团股份有限公司，国药准字H14022940，批号：190908，规格型号：60mg*100s；脉络舒通丸，鲁南厚普制药有限公司，国药准字Z20090636，批号：18191331，规格型号：每袋装12g(每丸重约0.056g)；0.5％羧甲基纤维素钠(CMC)，成都市科隆化学品有限公司，批号：2019051301，LR。氟尿嘧啶注射液，上海旭东海普药业有限公司，批号：FA200102；EDTA 2Na，合肥博美生物科技有限责任公司，批号：YE0105；Tris，合肥博美生物科技有限责任公司，批号：ST0497；磷酸二氢钠，福晨(天津)化学试剂有限公司，批号：20190512；磷酸氢二钠，福晨(天津)化学试剂有限公司，批号：20190907；甲醛，成都市科隆化学有限公司生产，批号：2019091901；无水乙醇(AR级)，成都海兴化工试剂厂，批号：GB678-90；二甲苯(AR级)，天津市致远化学试剂有限公司，批号：20200110；苏木素染液，珠海贝索生物技术有限公司，批号：C200301；伊红染液，珠海贝索生物技术有限公司，批号：C200403；中性树胶，Biosharp生物公司，批号：69120060BL704A。
1.2动物
SPF级昆明种小鼠70只，雌雄各半，试验体重18～22g，四川省中医药科学院实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK(川)2018-19。饲养于四川省中医药科学院实验动物中心SPF屏障系统，饲养条件符合SPF动物实验室要求，实验动物使用许可证号：SYXK(川)2018-100。
1.3仪器
2016转轮式切片机，徕卡；T-12S自动组织脱水机，武汉俊杰电子有限公司；BMJ-A型包埋机，常州郊区中威电子仪器厂；RS36型全自动染色机，常州派斯杰医疗设备有限公司；PHY-Ⅲ型病理组织漂烘仪，常州市中威电子仪器有限公司；BA210Digital数码三目摄像显微镜，麦克奥迪实业集团有限公司。R35刀片，日本羽毛安全剃刀株式会社；80106-1100型组织包埋盒，盐城汇达塑业有限公司；切片盒，襄樊徕卡生物电子仪器厂；载玻片，南通美韦德实验器材有限公司，规格：25mm×75mm×1.1mm；盖玻片，海门世泰实验器材制造有限公司，规格：24mm×50mm；高效切片石蜡，上海华灵康复器械厂，批号：20190918。BSA223S电子天平，赛多利斯，d＝1mg；LD6100-1电子天平，沈阳龙腾电子有限公司，d＝0.1g；常用手术器械和注射器。
1、实验方法
造模给药：70只SPF级昆明种小鼠，雌雄各半，分笼、分性别饲养，正常饮食，检疫观察5天。称量体重后排序。
动物按体重分层随机分为7组，每组10只，雌雄各半，重新进行笼具及动物标记，分别为空白对照组(0.5％CMC)、模型对照组(0.5％CMC)、阳性对照1组(曲克芦丁片110.97mg/kg)、阳性对照2组(脉络舒通丸7.40g/kg)、中药组合物1(高剂量，15.41g生药/kg)组、中药组合物1(中剂量，7.71g生药/kg)组、中药组合物1(低剂量，3.85g生药/kg)组。
1)以前述动物分组日计为第1日，按计划灌胃给予供试品、对照品或溶媒，体积为0.1mL/10g。除空白对照组外，其他动物进行尾静脉炎模型复制：于小鼠左侧尾静脉离尾根3.5cm处按0.2mL/10g注射浓度为17.5mg/mL的氟尿嘧啶生理盐水溶液，在1-2min内推注完毕。
2)第4日称量体重，按新体重给药；除空白对照组外，其他动物再次进行尾静脉炎模型复制：于小鼠左侧尾静脉离尾根3.5cm处按0.2mL/10g注射浓度为17.5mg/mL的氟尿嘧啶生理盐水溶液，在1-2min内推注完毕。
3)第7日称量体重，按新体重给药；给药后1h，脱颈椎处死动物，处死后以穿刺点向尾根方向，距离穿刺点1cm取材长度为1cm的尾组织，置于10％甲醛溶液中固定。
4)常规石蜡包埋，HE染色，光镜观察：血管内皮细胞脱落(0分：血管内皮及血管壁完整；1分：<血管切面1/3；2分：1/3～2/3血管切面；3分：>血管切面2/3)、血管周围组织水肿(0分：未见水肿；1分：轻微水肿；2分：中度水肿；3分：严重水肿)、炎症细胞浸润(0分：未见炎细胞或偶见单个炎细胞；1分：血管壁或血管周围组织少量炎细胞散在浸润；2分：血管壁或血管周围组织多量炎细胞散在或局灶浸润；3分：血管外组织中大量炎细胞弥漫性或堆积性浸润)和血管内血栓形成(0分：血管内无血栓；1分：<血管切面1/3；2分：1/3～2/3血管切面；3分：>血管切面2/3)等项指标，进行四级评分。
本研究SPSS19.0对结果进行统计：评分等级资料以四分位数(M(Q1，Q3))描述，进行K-W非参数检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
2、实验结果
空白对照组动物尾静脉病理学检查无异常，模型对照组动物静脉出现炎症反应、内皮损伤及血栓形成，评分升高，与空白对照组比较有极显著性差异(P<0.01)。阳性对照曲克芦丁片组与脉络舒通丸组动物静脉炎症反应、内皮损伤及血栓形成等均有不同程度改善，与模型对照组比较有极显著性和显著性差异(P<0.01，P<0.05)。中药组合物1高、中剂量组动物静脉炎症反应、内皮损伤及血栓形成等也均有不同程度改善，病理学评分与模型对照组比较均有极显著性差异(P<0.01)。中药组合物1低剂量组与模型对照组相比无明显改善，评分无统计学差异。结果见表4。
表4对尾静脉损伤病理学检查评分的影响(n＝10，♀♂，M(Q1，Q3))
Figure SMS_5
Figure SMS_6
注：模型对照组与空白对照组比较(K-W检验)，△P<0.05，△△P<0.01；其余组与模型对照组比较(K-W检验)，*P<0.05，**P<0.01
血栓性浅静脉炎是多发生于肢体或躯干部浅静脉的血栓性、炎性病变，临床表现沿浅静脉循行处皮肤发红、肿胀、灼热，实际上是对血管造成了损伤。本实验表明上述中药组合物对氟尿嘧啶所致小鼠尾静脉炎血管损伤有改善作用。
实施例7：本发明组合物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响
1、实验材料
1.1药物及试剂
受试药物：实施例2中制备的中药组合物(浸膏粉)，上海图锋医药科技有限公司，批号20190802；醋酸地塞米松片，浙江仙琚制药股份有限公司，国药准字：H33020822，批号：170826，规格型号：0.75mg*100s。二甲苯，成都市科伦化工试剂厂，批号：2017022701。0.5％羧甲基纤维素钠(CMC)，成都市科隆化学品有限公司，批号：2019051301，LR。
1.2动物
SPF级昆明种小鼠60只，雄性，试验体重18-22g，四川省中医药科学院实验动物中心生产，生产许可证号：SCXK(川)2018-19。饲养于四川省中医药科学院实验动物中心SPF屏障系统，饲养条件符合屏障系统相关要求。
1.3仪器
LD6100-1电子天平，沈阳龙腾电子有限公司，d＝0.1g；BSA223S电子天平，赛多利斯，d＝1mg；移液枪，Finnpipette，5～50ul；一次性使用无菌注射器，浙江欧健医用器材有限公司，批号：131216
2、实验方法
造模给药：60只大鼠正常喂养3天后，除空白对照组10只给予正常饲料外，其余大鼠开始造模，给予高脂饲料。14天后造模大鼠随机分为5组，每组10只，分别为模型对照组(0.5％CMC)、阳性对照醋酸地塞米松片组、中药组合物(高剂量)、中药组合物(中剂量)、中药组合物(低剂量)
指标观察：按0.1mL/10g灌胃给予供试品、对照品或溶媒，每日1次，连续7d。末次药后40min，于小鼠右耳两面涂抹二甲苯25ul，20min后处死小鼠，沿小鼠耳廓基沿剪取左右两耳，称重，计算肿胀度(右耳重量-左耳重量)、肿胀率(肿胀度/左耳重量×100％)和肿胀抑制率((模型对照组平均肿胀度-受试组或其他对照组平均肿胀度)/空白对照组平均肿胀度)。
本研究采用SPSS23.0对结果进行统计，计量资料用x±s表示，采用t检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
3、实验结果
阳性对照醋酸地塞米松片组肿胀度和肿胀率均降低，与模型对照组比较有极显著性差异(P<0.01)；中药组合物高、中剂量组也可降低肿胀度和肿胀率，与模型对照组比较均有极显著性差异(P<0.01)。结果如表5所示。
表5中药组合物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(n＝10，♂，±s)
Figure SMS_7
注：与模型对照组比较，**P<0.01
血栓性浅静脉炎临床表现多为急性发病，沿浅静脉循行处皮肤发红、肿胀、灼热，有明显的压痛和疼痛，出现结节或索条状物是炎症的表现。中药组合物能明对二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症有抑制作用。
实施例8：本发明组合物对鹿角菜胶所致小鼠尾部血栓的影响
1、实验材料
1.1药物及试剂
受试药物：实施例1中制备的中药组合物(浸膏粉)，上海图锋医药科技有限公司，批号：20190802；肝素钠注射液，成都市海通药业有限公司，国药准字：H51021209，批号：191203；0.5％羧甲基纤维素钠(CMC)，成都市科隆化学品有限公司，批号：2019051301，LR。Ⅰ型鹿角菜胶，SIGMA，批号：127H1227。氯化钠注射液，安徽丰原药业股份有限公司淮海药厂，批号：181022107。
1.2动物
SPF级昆明种小鼠50只，雌雄各半，试验体重18-22g，四川省中医药科学院实验动物中心生产，生产许可证号：SCXK(川)2018-19。饲养于四川省中医药科学院实验动物中心SPF屏障系统，饲养条件符合屏障系统相关要求。实验动物使用许可证号：SYXK(川)2018-100。
1.3仪器
LD6100-1电子天平，沈阳龙腾电子有限公司出品，d＝0.1g；BSA223S电子天平，赛多利斯，d＝1mg；钢尺，最小刻度1mm。
一次性使用无菌注射器带针(1mL)，浙江欧健医用器材有限公司，批号：131216；玻璃注射器(0.25mL)，常州明阳玻璃制品厂。
3、实验方法
造模给药：
SPF级昆明种小鼠50只，雌雄各半，饲养于四川省中医药科学院实验动物中心SPF屏障系统，分笼、分性别饲养，每笼五只，正常饮食，检疫观察1天。检疫次日，动物分性别按体重分层随机均分为5组，每组10只，雌雄各半，重新进行笼具及动物标记，分别为模型对照组(0.5％CMC)、阳性对照组(肝素钠注射液，2055U/kg)、中药组合物(高剂量，15.41g生药/kg)、中药组合物(中剂量，7.71g生药/kg)、中药组合物(低剂量，3.85g生药/kg)。
指标观察：
1)按0.1mL/10g灌胃给予供试品、溶媒；按0.05mL/10g背部皮下注射给予阳性对照品；每日1次，连续7d。
2)给药第5d，所有动物测定全尾长(鼠尾尖至鼠尾根部无毛-毛交界处长度)，随后给药；给药后1h，颈部皮下注射3.0％鹿角菜胶生理盐水混悬液，给予体积为0.1mL/10g，室温控制在16-18℃。
3)注射鹿角菜胶后48h，测量动物无血栓尾长(血栓近鼠尾端至鼠尾根部无毛-毛交界处长度)，计算血栓长度百分比((全尾长-无血栓尾长)/全尾长×100％)。
本研究SPSS19.0对结果进行统计：评分等级资料以四分位数(M(Q1，Q3))描述，进行K-W非参数检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
4、实验结果
试验结果如表6所示。肝素钠注射液组血栓长度百分比降低，与模型对照组比较有极显著性差异(P<0.01)；中药组合物高、中剂量组也可降低血栓长度百分比，与模型对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。
表6中药组合物对鹿角菜胶所致小鼠尾部血栓的影响(n＝10，♀♂，
Figure SMS_8
)
Figure SMS_9
注：与模型对照组比较(采用K-W检验)，**P<0.01，*P<0.05
血栓性浅静脉炎是多发生于肢体或躯干部浅静脉的血栓性、炎性病变，临床表现沿浅静脉循行处皮肤发红、肿胀、灼热，实际上是对血管造成了损伤。本实验表明上述中药组合物对鹿角菜胶所致小鼠尾部血栓形成有抑制作用。
实施例9：本发明组合物对热板所致小鼠疼痛的影响
1、实验材料
1.1药物及试剂
受试药物：实施例1中制备的中药组合物(浸膏粉)，上海图锋医药科技有限公司，批号20190802；布洛芬缓释片，太极集团.西南药业股份有限公司，国药准字：H20013193，批号：190801；规格型号：0.3g*20s。0.5％羧甲基纤维素钠(CMC)，成都市科隆化学品有限公司，批号：2019051301，LR。
1.2动物
SPF级昆明种小鼠120只，雌性，试验体重18-22g，四川省中医药科学院实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK(川)2018-19。饲养于四川省中医药科学院实验动物中心SPF屏障系统，饲养条件符合屏障系统相关要求。实验动物使用许可证号：SYXK(川)2018-100。
1.3仪器
RB-200智能热板仪，成都泰盟科技有限公司；LD6100-1电子天平，沈阳龙腾电子有限公司，d＝0.1g；BSA223S电子天平，赛多利斯，d＝1mg。一次性使用无菌注射器(1mL)，浙江欧健医用器材有限公司，批号：181216。
2、实验方法
造模给药：SPF级昆明种小鼠120只，雌性，分笼饲养，每笼五只，正常饮食，检疫观察1天。检疫次日，将动物逐一放置在预热至55℃的热板仪上，以首次舔后足时间为痛阈值，测定两次，每次间隔10min，选取两次痛阈均在5～30s内的小鼠进行后续试验，并以两次痛阈值均值作为该动物的基础痛阈值。对合格动物进行排序，选择位于顺序中间的50只动物进行试验；按基础痛阈值分层随机均分为5组，分别为模型对照组(0.5％CMC)、阳性对照组(布洛芬缓释片，123.3mg/kg)、中药组合物(高剂量，15.41g生药/kg)、中药组合物(中剂量，7.71g生药/kg)、中药组合物(低剂量，3.85g生药/kg)。
指标观察：按0.1mL/10g灌胃给予供试品、对照品或溶媒，给药第30min、60min、90min，分别将动物放置在预热至55℃热板仪上，记录痛阈值。指标为各时间点痛阈值，与同时间点模型对照组比较。
本研究采用SPSS23.0对结果进行统计，计量资料用x±s表示，采用t检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
3、实验结果
试验结果如表7所示。布洛芬缓释片组在60min能延长小鼠痛阈，与模型对照组比较有极显著性差异(P<0.01)；60min时中药组合物(高剂量)组也有延长痛阈作用，与模型对照组比较有统计学差异(P<0.05)。
表7中药组合物对热板所致小鼠疼痛的影响(n＝10，♀，
Figure SMS_10
)
Figure SMS_11
注：与模型对照组比较(90min数据非正态分布，采用K-W检验；30min数据方差不齐，采用Tamhane's T2检验；60min数据采用LSD检验)，*P<0.05，**P<0.01
以上实验表明，中药组合物能明对热板刺激所致小鼠疼痛有抑制作用。
上述披露的各技术特征并不限于已披露的与其它特征的组合，本领域技术人员还可根据发明目的进行各技术特征之间的其他组合，以实现本发明目的为准。

Claims (9)

1.一种治疗静脉炎的中药组合物，其特征在于，以重量比计，所述中药组合物由以下组分制成：
垂盆草30~90份，金银花15~45份，赤芍10~30份，牡丹皮10~30份，熟大黄5~15份，甘草5~15份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物由以下组分制成：
垂盆草30~60份，金银花15~30份，赤芍10~20份，牡丹皮10~20份，熟大黄5~10份，甘草5~10份。
3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物由以下组分制成：
垂盆草30份，金银花15份，赤芍10份，牡丹皮10份，熟大黄5份，甘草5份。
4.权利要求1-3任一项所述的中药组合物在制备治疗静脉炎药物中的应用。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，中药组合物具有治疗抗血栓、抗炎或止疼作用。
6.一种治疗静脉炎的药物，其特征在于，该药物由权利要求1-3任一所述的中药组合物与药学上可接受的辅料或添加剂制得。
7.根据权利要求6所述的药物，其特征在于，该药物的剂型选自汤剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、酊剂、糖浆剂、栓剂、凝胶剂、喷雾剂、注射剂。
8.一种如权利要求1-3任一所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述中药组合物制备方法为：
取药材加入8~12倍水回流提取，提取液过滤，滤液浓缩至相对密度1.10~1.15，离心滤过，滤液真空干燥。
9.一种如权利要求6或7任一所述药物的制备方法，其特征在于，所述药物选自颗粒剂，其制备方法为：取药材加入水回流提取2次，每次1小时，第一次加入12倍水，第二次加入10倍水，合并提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度1.10~1.15，离心滤过，滤液真空干燥，得浸膏粉，减压干燥，粉碎，得中间体组合物，加入糊精和淀粉，混匀。
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