CN113897294B - 一种提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物技术领域，提出了一种提取高纯度酵母β‑葡聚糖的方法，包括以下步骤：S1、向啤酒废酵母中加入水，加热升温；S2、加入自溶剂，加热升温，得到自溶酵母；S3、将自溶后的酵母加入缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；S4、将酵母不溶物与水混合制成悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶和山梨醇酶解后，进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β‑葡聚糖。通过上述技术方案，解决了现有技术中提取工艺复杂，产品收率低纯度低的问题。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体的，涉及一种提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法。
背景技术
我国的啤酒产量位居世界首位，因此我国每年预计会产生80-120万吨左右废啤酒酵母。但是，对于啤酒废酵母的回收利用，仅限于用于简单的加工，甚至大量的废旧酵母直接排放，无法得到合理利用甚至造成了严重的污染。
酵母细胞壁约占细胞干重的20％左右，而酵母细胞壁85％-90％是多糖，10％-13％为蛋白质，其中还含有少量的脂肪等物质。而酵母β-葡聚糖占多糖的30％-50％左右，位于细胞壁的最内层，和原生质体膜相连接。它的主要生理功能是维持细胞壁的机械结构，保持细胞正常的生理形态。酵母β-葡聚糖具有很高的免疫保护效果，能够防止氧化，促进伤口愈合，因此受到了广泛的关注。
黄丹在《酿酒酵母中活性多糖的提取工艺研究》一文中采用酸法提取β-葡聚糖，探究了最佳提取工艺下，酵母β-葡聚糖得率为21.58％，蛋白质含量为7.21％，多糖含量为71.46％，但是水解产物中同时含有甘露糖和葡萄糖。而采用碱式提取时，虽然纯度高，但是多糖的收率较低。酸式和碱式提取方法中，酸碱用量较大，工艺繁琐，劳动强度大。
发明内容
本发明提出一种提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法，解决了现有技术中提取工艺复杂，产品收率低纯度低的问题。
本发明的技术方案如下：
一种提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法，包括以下步骤：
S1、向啤酒废酵母中加入水，加热升温；
S2、加入自溶剂，加热升温，得到自溶酵母；
S3、将自溶后的酵母加入缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
S4、将酵母不溶物与水混合制成悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶和山梨醇酶解后，进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β-葡聚糖。
作为进一步的技术方案，所述步骤S1中，水的质量为啤酒废酵母的2-2.5倍，加热至45-48℃。
作为进一步的技术方案，所述步骤S2中，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为(3-4):(6-8):1。
作为进一步的技术方案，所述自溶剂为水的质量的0.02-0.05倍，升温至80-82℃，保温20-30min。
作为进一步的技术方案，所述步骤S3缓冲液为pH 7的磷酸缓冲液。
作为进一步的技术方案，所述步骤S4中的悬浮液的质量浓度为30％-40％。
作为进一步的技术方案，所述中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％-0.2％，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％-0.2％。
作为进一步的技术方案，所述山梨醇为悬浮液的质量的0.15％-0.3％。
作为进一步的技术方案，所述高压均质的条件具体为压力1400-1600bar。
作为进一步的技术方案，所述步骤S4中，酶解9-12h。
本发明的有益效果为：
1、本发明制备得到的酵母β-葡聚糖纯度高达92.4％-93.5％，产率可达26.0％-26.8％，放置9个月菌落仅为5.3×103-6.3×103CFU/g，纯度和产率都有所提高，长期放置抗菌性较好。
2、本发明采用溴化钠替换常规的氯化钠可以提高自溶效率，而如果用同样的工艺条件，采用氯化钠时，提取效果不如溴化钠，发明人认为这是由于如果采用溴化钠，只需要半小时以内就可以完成溶解，但是如果用氯化钠是无法实现的，所以最终导致纯度和产率都有所降低。本发明使用甲酯化植物油不仅可以促进酯溶解，还能提高最终产物的抗菌性。还添加有山梨醇提高抗菌性和提取效果，但是本发明中的山梨醇含量过多并不能带来更好的效果。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都涉及本发明保护的范围。
实施例1
S1、向啤酒废酵母中加入2.3倍的水，加热升温至45℃；
S2、加入水质量0.03倍的自溶剂，升温至80℃保温25min自溶酵母，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为4:7:1；
S3、将自溶后的酵母加入质量为自溶后的酵母10％的0.2mol/L pH 7的磷酸缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
S4、将酵母不溶物与水混合制成质量浓度为35％悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶、山梨醇，酶解10h后进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β-葡聚糖，高压均质压力1500bar；
中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％，山梨醇为悬浮液的质量的0.15％。
实施例2
S1、向啤酒废酵母中加入2倍的水，加热升温至46℃；
S2、加入水质量0.04倍的自溶剂，升温至81℃保温30min自溶酵母，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为3:7:1；
S3、将自溶后的酵母加入质量为自溶后的酵母10％的0.2mol/L pH 7的磷酸缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
S4、将酵母不溶物与水混合制成质量浓度为38％悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶、山梨醇，酶解9h后进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β-葡聚糖，高压均质压力1550bar；
中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.2％，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.2％，山梨醇为悬浮液的质量的0.3％。
实施例3
S1、向啤酒废酵母中加入2.5倍的水，加热升温至46℃；
S2、加入水质量0.02倍的自溶剂，升温至82℃保温23min自溶酵母，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为3:7:1；
S3、将自溶后的酵母加入质量为自溶后的酵母10％的0.2mol/L pH 7的磷酸缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
S4、将酵母不溶物与水混合制成质量浓度为34％悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶、山梨醇，酶解12h后进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β-葡聚糖，高压均质压力1450bar；
中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.15％，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.15％，山梨醇为悬浮液的质量的0.2％。
实施例4
S1、向啤酒废酵母中加入2.2倍的水，加热升温至45℃；
S2、加入水质量0.02倍的自溶剂，升温至80℃保温26min自溶酵母，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为3:6:1；
S3、将自溶后的酵母加入质量为自溶后的酵母10％的0.2mol/L pH 7的磷酸缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
S4、将酵母不溶物与水混合制成质量浓度为30％悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶、山梨醇，酶解12h后进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β-葡聚糖，高压均质压力1400bar；
中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1％，山梨醇为悬浮液的质量的0.15％。
实施例5
S1、向啤酒废酵母中加入2.5倍的水，加热升温至48℃；
S2、加入水质量0.02倍的自溶剂，升温至82℃保温30min自溶酵母，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为4:8:1；
S3、将自溶后的酵母加入质量为自溶后的酵母10％的0.2mol/L pH 7的磷酸缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
S4、将酵母不溶物与水混合制成质量浓度为40％悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶、山梨醇，酶解9h后，进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β-葡聚糖，高压均质压力1600bar；
中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.15％，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.15％，山梨醇为悬浮液的质量的0.2％。
对比例1
与实施例1相比，将其中的溴化钠替换为等量的氯化钠，其他与实施例1相同。
对比例2
与实施例1相比，将其中的甲酯化植物油替换为等量的植物油，其他与实施例1相同。
对比例3
与实施例1相比，不添加山梨醇，其他与实施例1相同。
对比例4
与实施例1相比，山梨醇添加量为悬浮液质量的0.6％，其他与实施例1相同。
实验例1
采用红外吸收光谱测定产物样品的特征吸收峰计算纯度。
实验例2
测试上述实施方法制备的酵母β-葡聚糖产率：
酵母β-葡聚糖质量/啤酒酵母质量×100％。
测试方法：
将10mg样品与1.5mL 72％质量浓度的硫酸溶液混合静置3h后，加水至硫酸浓度为2mol/L，加热100℃4h后冷却到室温，调节pH 6.8-7.0后，定容(加入0.2mol/L pH 7磷酸缓冲液)，取2ml于10ml容量瓶中，加入3mL GOPGD双酶试剂，37℃反应1h，加水至10mL，用紫外分光光度计测定吸收值，计算样品中酵母β-葡聚糖含量。
实验例3
将上述实施方法制备得到的酵母β-葡聚糖于25℃，湿度85％中保藏9个月，采用GB/T 4789.2-2010《食品卫生微生物学检验菌落总数测定》测试稳定性。
表1实施例和对比例的测试结果
| 纯度(％) | 产率(％) | 菌落总数CFU/g | |
| 实施例1 | 93.5 | 26.8 | 5.3×103 |
| 实施例2 | 93.1 | 26.1 | 6.1×103 |
| 实施例3 | 92.4 | 26.4 | 5.5×103 |
| 实施例4 | 93.3 | 26.2 | 5.9×103 |
| 实施例5 | 92.8 | 26.0 | 6.3×103 |
| 对比例1 | 89.5 | 24.8 | 6.6×103 |
| 对比例2 | 91.4 | 23.6 | 9.5×103 |
| 对比例3 | 91.9 | 25.1 | 1.6×104 |
| 对比例4 | 91.2 | 24.6 | 1.5×104 |
本发明的实施例与对比例相比，纯度高达92.4％-93.5％，产率可达26.0％-26.8％，放置9个月菌落仅为5.3×103-6.3×103CFU/g，纯度和产率都有所提高，长期放置抗菌性较好，其中实施例1是制备工艺最佳的实施例。
发明人意外的发现，采用溴化钠替换常规的氯化钠可以提高自溶效率，而如果用同样的工艺条件，采用氯化钠时，提取效果不如溴化钠，发明人认为这是由于如果采用溴化钠，只需要半小时以内就可以完成溶解，但是如果用氯化钠是无法实现的，所以最终导致纯度和产率都有所降低。对比例2中使用植物油替代甲酯化植物油，抗菌性降低，提取纯度和产率都降低，说明甲酯化植物油相比于普通油脂，不仅可以促进酯溶解，还能提高最终产物的抗菌性。对比例3中没有添加山梨醇提取效果有所降低，但是抗菌性大幅度降低，而本发明中的山梨醇的含量如果过高，会导致提取效果变差，而且抗菌性增加不明显。
以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、向啤酒废酵母中加入水，加热升温；
S2、加入自溶剂，加热升温，得到自溶酵母；
S3、将自溶后的酵母加入缓冲液重悬后抽提，得到酵母不溶物；
S4、将酵母不溶物与水混合制成悬浮液，加入中性蛋白酶、甘露聚糖酶和山梨醇酶解后，进行高压均质后离心洗涤干燥即得酵母β-葡聚糖；
所述中性蛋白酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1%-0.2%，甘露聚糖酶质量为悬浮液中干物质质量的0.1%-0.2%；
所述山梨醇为悬浮液的质量的0.15%-0.3%；
所述步骤S2中，自溶剂为溴化钠、乙酸乙酯、甲酯化植物油的混合物，三者的质量比为(3-4):(6-8):1。
2.根据权利要求1所述的提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述步骤S1中，水的质量为啤酒废酵母的2-2.5倍，加热至45-48℃。
3.根据权利要求1所述的提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述自溶剂为水的质量的0.02-0.05倍，升温至80-82℃，保温20-30min。
4. 根据权利要求1所述的提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述步骤S3缓冲液为pH 7的磷酸缓冲液。
5.根据权利要求1所述的提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述步骤S4中的悬浮液的质量浓度为30%-40%。
6.根据权利要求1所述的提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述高压均质的条件具体为压力1400-1600bar。
7.根据权利要求1所述的提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述步骤S4中，酶解9-12h。
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101020915A (zh) * | 2007-03-07 | 2007-08-22 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种制备酵母β－葡聚糖的方法 |
| CN101463373A (zh) * | 2009-01-04 | 2009-06-24 | 广东省食品工业研究所 | 一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法 |
| CN103044572A (zh) * | 2013-01-06 | 2013-04-17 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 酵母β-D-葡聚糖的制备方法 |
| CN110105466A (zh) * | 2019-03-21 | 2019-08-09 | 浙江九如堂生物科技有限公司 | 基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法 |
| CN110914312A (zh) * | 2017-03-28 | 2020-03-24 | 嘉吉公司 | 精制β-葡聚糖以及制备它们的方法 |
| CN111635916A (zh) * | 2020-06-28 | 2020-09-08 | 上海应用技术大学 | 一种用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104910292B (zh) * | 2015-05-14 | 2017-06-30 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 利用分子组装增溶技术制备酵母β‑D‑葡聚糖的方法 |
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Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101020915A (zh) * | 2007-03-07 | 2007-08-22 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种制备酵母β－葡聚糖的方法 |
| CN101463373A (zh) * | 2009-01-04 | 2009-06-24 | 广东省食品工业研究所 | 一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法 |
| CN103044572A (zh) * | 2013-01-06 | 2013-04-17 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 酵母β-D-葡聚糖的制备方法 |
| CN110914312A (zh) * | 2017-03-28 | 2020-03-24 | 嘉吉公司 | 精制β-葡聚糖以及制备它们的方法 |
| CN110105466A (zh) * | 2019-03-21 | 2019-08-09 | 浙江九如堂生物科技有限公司 | 基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法 |
| CN111635916A (zh) * | 2020-06-28 | 2020-09-08 | 上海应用技术大学 | 一种用于酵母β-葡聚糖提取的预处理方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Optimization Of Βeta-Glucan Extraction From Waste Brewer’s Yeast Saccharomyces Cerevisiae Using Autolysis, Enzyme, Ultrasonic And Combined Enzyme – Ultrasonic Treatment;Tran Minh Tam等;American Journal of Research Communication;第1卷(第11期);149-158 * |
| 李红梅等.自溶超声波耦合法提取啤酒废酵母中β-1,3-D-葡聚糖.精细化工.2014,第31卷(第1期),45-49. * |
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