CN113827563B - 一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用 - Google Patents

一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113827563B
CN113827563B CN202111285758.0A CN202111285758A CN113827563B CN 113827563 B CN113827563 B CN 113827563B CN 202111285758 A CN202111285758 A CN 202111285758A CN 113827563 B CN113827563 B CN 113827563B
Authority
CN
China
Prior art keywords
preparation
nanoemulsion
migraine
volatile oil
alginate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202111285758.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113827563A (zh
Inventor
王一涛
陈宇龙
钟章锋
王胜鹏
王芷廷
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Macau
Original Assignee
University of Macau
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of Macau filed Critical University of Macau
Priority to CN202111285758.0A priority Critical patent/CN113827563B/zh
Publication of CN113827563A publication Critical patent/CN113827563A/zh
Priority to PCT/CN2022/083494 priority patent/WO2023077715A1/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113827563B publication Critical patent/CN113827563B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • A61K36/232—Angelica
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • A61K36/236—Ligusticum (licorice-root)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A61K9/1075—Microemulsions or submicron emulsions; Preconcentrates or solids thereof; Micelles, e.g. made of phospholipids or block copolymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/37—Extraction at elevated pressure or temperature, e.g. pressurized solvent extraction [PSE], supercritical carbon dioxide extraction or subcritical water extraction

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开了一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用，本发明提供了一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂，其制备方法包括以下步骤：选取当归和川芎为原料，通过超临界提取法提取中药中的挥发油，其中超临界提取过程中，当归和川芎以重量比为1:0.5‑2；选择壳聚糖和海藻酸盐的材料，通过单乳化溶剂蒸发法，将中药挥发油装载后，完成纳米乳制备，所制备的纳米乳制剂的粒径为200‑300 nm。以上方法制得的中药纳米乳制剂使用效果理想，可有效治疗偏头痛小鼠的头痛症状、降低疾病相关的生化指标，具有缓解偏头痛症状的作用，可制备成治疗的偏头痛药物。

Description

一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及中药提取物和制备技术领域，具体而言，涉及一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用。
背景技术
偏头痛(Migraine)是一种常见的发作性神经血管功能障碍，其症状通常为在单侧或双侧部位发生搏动性剧烈头痛，并伴有多种伴随的神经系统症状，包括恶心，呕吐，畏光和恐惧心理。流行病学研究表明，关于偏头痛的全球发病率女性约为43%，男性约为18%。此外，这种高发病率和低康复率的慢性病严重降低了患者的生活质量，进一步导致重大的经济损失。
佛手散配方是著名的，被广泛用作治疗偏头痛和痛经的中药。它最早记录于宋代著名配方书《朴济本世方》中。根据传统中草药理论，人们认为头痛的发作通常是由风寒，血瘀和营养不足引起的。这个经典的处方由两种中药当归( Angelica sinensis(Oliv.)Diels)和川芎( Ligusticum chuanxiongHort.)组成，质量比为2：1。药理研究表明，川芎具有温热，辛辣的特性，具有改善气血循环，祛风止痛的作用，特别是头痛和风湿性关节炎。另一种草药当归，被广泛用作补血和痛经的主要治疗方法。
目前偏头痛的病因尚不清楚，虽然有一些中、西药治疗方式，能缓解病症，通常需要长期服药，但是疗效不理想，不能较好的根治偏头痛，一旦停药，头痛症状易复发，而且有不同程度的副作用，如对肝肾功能的影响，给患者带来较大的痛苦，并且花费较高。
很多中药复方已被证实具有良好的镇痛作用，抗炎作用和血管调节活性，因此对偏头痛具有重要而直接的影响。研究表明，佛手散对偏头痛的影响与炎症细胞因子、肠道菌群和神经血管系统的调节以及对疼痛信号的传递有关。此外，由于佛手散活性部分属于脂溶性成分，因此开发以多糖为材料的药物递送体系，保证其药理作用。而多糖作为药物载体具有良好的生物兼容性和控释效果。佛手散挥发油用于偏头痛的治疗具有许多优点，例如安全、有确定的作用和较少的不良反应。佛手散挥发油可通过调节血管活性物质水平，干扰疼痛信号传导途径，调节炎症性细胞因子的分泌和肠道菌群的丰度以及维持脑部正常血流量来缓解偏头痛，还可以与其他药物结合进行综合治疗。当归和川芎作为常用的植物药，在治疗疼痛类疾病中具有显著的疗效。同时，当归和川芎同属于伞形科植物，含有丰富的苯酞类化合物，但其理化性质、生物活性，尤其是在偏头痛方面的作用缺乏深入研究。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用。
本发明是这样实现的:
本发明提供一种治疗偏头痛的纳米乳制剂，以当归挥发油和川芎挥发油为有效药物成分，与药物中可接受的辅助添加成分共同组成，有效药物成分来自于当归和川芎以重量比为1:0.5-2进行超临界提取所得。
本发明还提供一种上述治疗偏头痛的纳米乳制剂的制备方法，其包括：以当归挥发油和川芎挥发油为有效药物成分，通过单乳化溶剂蒸发法，制备纳米乳制剂。
本发明还提供一种上述的治疗偏头痛的纳米乳制剂用于制备治疗偏头痛的药物；
优选地，所述纳米乳制剂用于制备预防偏头痛的药物。
本发明具有以下有益效果:
本发明提供一种对于治疗偏头痛的效果较好的中药纳米乳制剂及其制备方法与应用，本发明提供的中药纳米乳制剂以当归挥发油和川芎挥发油为有效药物成分，与药物中可接受的辅助添加成分共同组成，有效药物成分来自于当归和川芎以重量比为1:0.5-2进行超临界提取所得。其中，有效药物成分以超临界二氧化碳循环逆流方式萃取、分离得到。并且将上述的挥发油包封在多糖类生物大分子内，得到纳米乳制剂实验效果理想，制得的中药纳米乳制剂至少具有缓解偏头痛的作用，能减少偏头痛小鼠的发作强度和次数、降低疾病相关的生化指数，为其在制备治疗偏头痛的药物中的应用提供了科学依据。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为实施例4中中药纳米乳制剂的粒径分布图；
图2为实施例4中中药纳米乳制剂的形貌图；
图3为实施例5中小鼠造模及给药时间示意图；
图4为实施例5中不同浓度中药纳米乳制剂对偏头痛小鼠热板潜伏性疼痛反应的影响结果图，# p<0.05，## p<0.01，* p<0.05，** p<0.01；
图5为实施例5中不同浓度中药纳米乳制剂对偏头痛小鼠福尔马林引导舔足反应的影响结果图，# p<0.05，## p<0.01，* p<0.05，** p<0.01；
图6为实施例5中不同浓度中药纳米乳制剂对偏头痛小鼠醋酸引导扭体反应的影响结果图，# p<0.05，## p<0.01，* p<0.05，** p<0.01；
图7为实施例5中不同浓度中药纳米乳制剂对偏头痛小鼠血液CGRP含量的影响结果图，# p<0.05，## p<0.01，* p<0.05，** p<0.01；
图8为实施例5中不同浓度中药纳米乳制剂对偏头痛小鼠血液5-HT含量的影响结果图，# p<0.05，## p<0.01，* p<0.05，** p<0.01；
图9为实施例5中不同浓度中药纳米乳制剂对偏头痛小鼠血液NO含量的影响结果图，# p<0.05，## p<0.01，* p<0.05，** p<0.01。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明的目的之一在于，提供一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂的制备方法，该方法简单，易操作，成本低，可有效地从当归和川芎中制备出中药纳米乳制剂。
本发明的目的之二在于，提供一种由上述制备方法制备而得的治疗偏头痛的中药纳米乳制剂。
本发明的目的之三在于，提供一种上述中药纳米乳制剂的应用，例如用于制备药物。
本发明的目的之五在于，提供一种原料含有上述中药纳米乳制剂的治疗偏头痛的药物。
本发明可这样实现：
第一方面，本发明提供一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂。以当归挥发油和川芎挥发油为有效药物成分，与药物中可接受的辅助添加成分共同组成，有效药物成分来自于当归和川芎以重量比为1:0.5-2进行超临界提取所得。
在可选的实施方式中，以当归挥发油和川芎挥发油为有效药物成分，利用多糖类生物大分子为包封材料，在表面活性剂、助表面活性剂存在下对当归挥发油和川芎挥发油包封，制成纳米乳制剂。
在可选的实施方式中，所述有效药物成分为以超临界二氧化碳循环逆流方式萃取、分离得到当归挥发油和川芎挥发油；
优选地，超临界二氧化碳循环逆流萃取挥发油时，将当归和川芎两种生药原料混合后同时萃取；
优选地，所述多糖类生物大分子选自海藻酸盐和壳聚糖；
优选地，所述表面活性剂选自吐温-80 (Tween-80)、聚乙二醇辛基苯基醚-100(TritonX-100)、蔗糖脂肪酸酯脂肪酰醇胺(Ninol)中的至少一种。
在可选的实施方式中，中药纳米乳制剂的粒径为200-300 nm。
在可选的实施方式中，中药纳米乳制剂的电位为30-60 mV。
在可选的实施方式中，中药纳米乳制剂的聚合物分散指数为0.1-0.2。
第二方面，本发明提供一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂的制备方法，其包括以下步骤：用超临界提取法提取当归根和川芎根的混合粉末，收集两者的混合挥发油，再用壳聚糖和海藻酸盐作为装载材料，通过单乳化溶剂蒸发法，制备纳米乳制剂。
在可选的实施方式中，单乳化溶剂蒸发法包括以下步骤：将当归挥发油和川芎挥发油的混合油与乙醇混合作为油相，海藻酸盐与水、表面活性剂混合作为水相，在搅拌条件下，将上述的油相加入到水相中，然后进行超声，制得初乳；向初乳中继续加入壳聚糖溶液并搅拌，搅拌结束后，蒸发去除溶剂，即得所述纳米乳制剂。
在可选的实施方式中，单乳化溶剂蒸发法包括以下步骤：使用壳聚糖和海藻酸盐作为包封材料，在搅拌条件下，首先将混合油的乙醇溶液加入海藻酸盐、水和表面活性剂的海藻酸盐溶液中，制备初乳，然后向初乳中继续加入壳聚糖溶液并搅拌，再蒸发去除溶剂，制备纳米乳制剂。
在可选的实施方式中，使用超临界提取法提取当归和川芎中的挥发油。
在可选的实施方式中，选取当归100-200g、川芎100-200g。
在可选的实施方式中，选取当归和川芎过程中，所述当归与川芎的质量比为1:0.5-2。
在可选的实施方式中，选取当归和川芎之前，还包括对所述当归和川芎进行磨粉处理。
在可选的实施方式中，磨粉处理是将所述当归和川芎通过打粉机进行粉碎，然后得到其粉碎物。
在可选的实施方式中，所述当归和川芎的粉碎物需通过50-200目筛。
在可选的实施方式中，在超临界提取过程中，系统压强维持在25-45 MPa。
在可选的实施方式中，在超临界提取过程中，系统温度维持在35-55℃。
在可选的实施方式中，在超临界提取过程中，系统二氧化碳流速维持25-35 mL/min。
在可选的实施方式中，超临界提取为1-3小时条件下提取1-3次。
在可选的实施方式中，提取完成后，还包括将提取后的液体静置0.5-2h。
在可选的实施方式中，使用壳聚糖和海藻酸盐作为材料，用于装载挥发油的纳米乳。
在可选的实施方式中，使用壳聚糖和海藻酸盐的材料，进行装载。
在可选的实施方式中，壳聚糖是选择50-150 kDa。
在可选的实施方式中，海藻酸盐是选择来源于棕色海藻的海藻酸钠盐。
在可选的实施方式中，使用单乳化溶剂蒸发法制备纳米乳。
在可选的实施方式中，制备过程中，壳聚糖溶液为将壳聚糖加入水中所得的溶液，且壳聚糖溶液为0.1-1 mg/mL。
在可选的实施方式中，制备过程中，海藻酸盐溶液为将海藻酸盐加入水和表面活性剂中所得的溶液，且海藻酸盐溶液为0.3-1 mg/mL。
在可选的实施方式中，制备过程中，混合油的乙醇溶液为将当归挥发油和川芎挥发油的混合油与乙醇混合得到溶液，且混合油的乙醇溶液的浓度为10-20 mg/mL。
在可选的实施方式中，制备初乳的超声为探头超声，超声时间为10-30 min。
在可选的实施方式中，溶剂蒸发是通过使用旋蒸仪仪器，温度为40-60 ℃，时长为10-30 min。
第三方面，本发明提供如前述实施方式的中药纳米乳制剂的应用，中药纳米乳制剂用于制备治疗偏头痛的药物。
在可选的实施方式中，中药纳米乳制剂用于制备治疗偏头痛的药物。
第五方面，本发明提供一种治疗偏头痛的药物，其原料包括前述实施方式的中药纳米乳制剂。
下面对本发明提供的中药纳米乳制剂及其制备方法与应用进行具体说明。
本发明提出一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂的制备方法，其包括以下步骤：用超临界提取法提取当归根和川芎根的混合粉末，收集挥发油，再用壳聚糖和海藻酸盐为材料，通过单乳化溶剂蒸发法，制备纳米乳制剂。
其中，选取当归100-200g、川芎100-200g。具体的，选取当归的质量可以为100g、125g、150g、175g或200g，也可以为100-200g范围内的其它任意值。选取川芎的质量可以为100g、125g、150g、175g或200g，也可以为100-200g范围内的其它任意值。
上述选取当归和川芎过程中，当归与川芎的质量比可以为1: 0.5-2，如1: 0.5、1:0.75、1: 1、1: 1.5或1: 2等，也可以为1: 0.5-2范围内的其它任意值。
在优选的实施方式中，选取当归200g和川芎100g，当归与川芎的质量比为1: 0.5。
在可选的实施方式中，选取当归和川芎之前，还包括对当归和川芎进行磨粉处理。可参考地，磨粉处理是将当归和川芎通过打粉机进行粉碎，然后得到粉碎物。其中，当归和川芎的粉碎物需通过50-200目筛，如50目、100目、150目或200目等，也可以为50-200目范围内的其它任意值。优选地，当归和川芎的粉碎物可以通过100目筛，上述优选的条件范围内能够将当归和川芎的提取前充分处理。
较佳地，当归根和川芎根先经干燥和粉碎后再进行超临界提取处理，粉碎可提高原料与提取剂的接触面积，从而提高功效成分的溶出率。
进一步地，使用超临界提取法提取挥发油。
在可选的实施方式中，系统压强维持在25-45 MPa(如25 MPa、30 MPa、35 MPa、40MPa或45 MPa，优选35 MPa)，系统温度维持在35-55 ℃(如35 ℃、40 ℃、45 ℃、50 ℃或55℃，优选45 ℃)，和系统二氧化碳流速维持25-35 mL/min (如25 mL/min、30 mL/min或35mL/min，优选30 mL/min)的条件下，超临界提取时间是1-3 h(如1 h、1.5 h、2 h、2.5 h或3h，优选3 h)的条件下提取1-3次(如1 次、2次或3次， 优选3次)。
随后，将提取后的液体静置0.5-2 h，如0.5 h、1 h、1.5 h或2 h，优选2 h。
进一步地，使用壳聚糖和海藻酸盐作为材料，用于装载挥发油的纳米乳。
在可选的实施方式中，使用壳聚糖和海藻酸盐的材料，进行装载。壳聚糖是选择50-150 kDa(如50 kDa、100 kDa或150 kDa， 优选50 kDa)。另外海藻酸盐是选择来源于棕色海藻的海藻酸钠盐。
进一步地，使用单乳化溶剂蒸发法制备纳米乳。纳米乳制备的过程中，使用壳聚糖和海藻酸盐作为包覆材料，一方面，是由于这两种材料天然无毒，价格低，生物兼容性好，另外一方面，在水包油体系中，分次加入壳聚糖和海藻酸盐是由于，油内层的海藻酸盐带负电荷，外层的壳聚糖带正电荷，整个材料是通过静电力作用紧密结合，从而使得混合挥发油能够很好的被包覆形成纳米乳制剂。
在可选的实施方式中，单乳化溶剂蒸发法可使用壳聚糖溶液为0.1-1 mg/mL(如0.1 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL、0.75 mg/mL或1 mg/mL， 优选0.5 mg/mL)，海藻酸盐溶液为0.3-1 mg/mL(如0.3 mg/mL、0.6 mg/mL、0.9 mg/mL或1 mg/mL， 优选0.6 mg/mL)，含中药挥发油的乙醇溶液为10-20 mg/mL(如10 mg/mL、15 mg/mL或20 mg/mL，优选20 mg/mL)。
随后，制备初乳的超声为探头超声，超声时间为10-30 min(如10 min、15 min、20min、25 min或30 min， 优选15 min)。
进一步地，对初乳可采用溶剂蒸发法进行纯化，使用旋蒸仪仪器，从而得到纯化的中药纳米乳制剂。
在可选的实施方式中，旋蒸仪仪器设置温度为40-60 ℃ (如40 ℃、45 ℃、50 ℃、55 ℃或60 ℃， 优选60 ℃)，和时长为10-30 min(如10 min、15 min、20 min、25 min或30min， 优选20 min)。
具体的，上述制备过程可参照：将当归100-200g和川芎100-200g。进行打粉处理，并通过100目筛.转入超临界提取器中提取挥发油，在系统压强维持在25-45 MPa，温度维持在35-55 ℃，和二氧化碳流速维持25-35 mL/min的条件下，超临界提取时间是3小时条件下提取3次。提取完成后，还包括将提取后的液体静置0.5-2h。然后使用壳聚糖和海藻酸盐的材料，进行装载。选用50 kDa壳聚糖和来源于棕色海藻的海藻酸钠盐。使用单乳化溶剂蒸发法制备纳米乳，具体的，壳聚糖溶液为0.1-1 mg/mL，海藻酸盐溶液为0.3-1 mg/mL，制备初乳的超声为探头超声，超声时间为10-30 min，溶剂蒸发是通过使用旋蒸仪仪器，温度为40-60 ℃，时长为10-30 min。
值得说明的是，本发明中上述提取制备步骤也不排除其他现有的常规提取制备方式，在此不做过多赘述。
相应地，本发明还提供由上述提取制备方法制备而得的中药纳米乳制剂。
采用马尔文粒度仪的动态光散射法分析，所得的中药纳米乳制剂的粒径约为200-300 nm，电位约为30-60 mV，聚合物分散指数约为0.1-0.2。
此外，本发明还提供了上述中药纳米乳制剂的应用，例如用于制备治疗偏头痛的药物。
在优选的实施方式中，中药纳米乳制剂用于制备治疗偏头痛的药物。
本发明还提供一种治疗偏头痛的药物，其原料包括上述中药纳米乳制剂。以上述中药纳米乳制剂作为药物原料，可使药物具有安全、有确定的作用和较少的不良反应的优势。
该中药纳米乳制剂具有良好的镇痛作用和神经血管活性，可缓解和治疗偏头痛的作用，能减少偏头痛小鼠的发作强度和次数、降低疾病相关的生化指数。上述中药纳米乳制剂对偏头痛的影响可能与疼痛信号传递、肠道菌群和神经血管系统的调节有关。此外，药物递送材料壳聚糖和海藻酸盐作为药物载体具有良好的控释效果和高生物亲和性。
本发明提供的中药纳米乳制剂可通过调节偏头痛相关生化指标水平，干扰疼痛信号传导途径，以及调节肠道菌群的丰度来缓解偏头痛，还可以与其他药物结合进行综合治疗。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
本发明以下实施例中，原材料来源、组分、制备和实验方法与对比例相同。
实施例1
本实施例提供一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂的制备方法：
(1)选取当归200g、川芎100g，粉碎成100目细粉，以1:0.5的质量比混合均匀，备用。
(2)再通过超临界提取法，在压强35MPa和温度45℃的条件下提取，提取时间为2小时，提取次数为1次，二氧化碳流速是30 mL/min,得到中药挥发油，备用。
(3)选择壳聚糖和海藻酸盐的材料，海藻酸盐是选择来源于棕色海藻的海藻酸钠盐，海藻酸盐溶液是加入6 mg的海藻酸盐到20 mL的蒸馏水中，再加入0.2 g 吐温-80于溶液中，得到水相即0.3 mg/mL的海藻酸盐溶液；油相是加入12 mg的中药挥发油到0.6 mL乙醇溶液中，得到油相即20 mg/mL的含油乙醇溶液；壳聚糖是选择50 kDa的相对分子质量，壳聚糖溶液是加入0.4 mg的壳聚糖到4 mL的蒸馏水中，得到壳聚糖溶液为0.1 mg/mL。单乳化溶剂蒸发法步骤如下: 先将制备好的含油乙醇溶液一滴一滴加入到水相海藻酸盐溶液中，同时需进行搅拌，然后进行探头超声，超声时间为10 min，搅拌30 min，得到初乳，再加入壳聚糖溶液，搅拌30 min，溶剂蒸发是通过使用旋蒸仪仪器，温度为40℃，时长为10 min，过夜平衡，得到装载中药挥发油的纳米乳制剂，完成制备。
实施例2
本实施例提供一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂的制备方法：
(1)选取当归150g、川芎150g，粉碎成50目细粉，以1:1的质量比混合均匀，备用。
(2)再通过超临界提取法，在压强40MPa和温度40℃的条件下提取，提取时间为3小时，提取次数为1次，二氧化碳流速是25 mL/min,得到中药挥发油，备用。
(3)选择壳聚糖和海藻酸盐的材料，海藻酸盐是选择来源于棕色海藻的海藻酸钠盐，海藻酸盐溶液是加入12 mg的海藻酸盐到20 mL的蒸馏水中，再加入0.2 g 吐温-80于溶液中，得到水相即0.6 mg/mL的海藻酸盐溶液；油相是加入12 mg的中药挥发油到0.6 mL乙醇溶液中，得到油相即20 mg/mL的含油乙醇溶液；壳聚糖是选择100 kDa的相对分子质量，壳聚糖溶液是加入2 mg的壳聚糖到4 mL的蒸馏水中，得到壳聚糖溶液为0.5 mg/mL。单乳化溶剂蒸发法步骤如下: 先将制备好的含油乙醇溶液一滴一滴加入到水相海藻酸盐溶液中，同时需进行搅拌，然后进行探头超声，超声时间为20 min，搅拌30 min，得到初乳，再加入壳聚糖溶液，搅拌30 min，溶剂蒸发是通过使用旋蒸仪仪器，温度为50℃，时长为20 min，过夜平衡，得到装载中药挥发油的纳米乳制剂，完成制备。
实施例3
本实施例提供一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂的制备方法：
(1)选取当归100g、川芎200g，粉碎成200目细粉，以1:2的质量比混合均匀，备用。
(2)再通过超临界提取法，在压强30MPa和温度50℃的条件下提取，提取时间为2小时，提取次数为2次，二氧化碳流速是35 mL/min,得到中药挥发油，备用。
(3)选择壳聚糖和海藻酸盐的材料，海藻酸盐是选择来源于棕色海藻的海藻酸钠盐，海藻酸盐溶液是加入18 mg的海藻酸盐到20 mL的蒸馏水中，再加入0.2 g 吐温-80于溶液中，得到水相即0.9 mg/mL的海藻酸盐溶液；油相是加入12 mg的中药挥发油到0.6 mL乙醇溶液中，得到油相即20 mg/mL的含油乙醇溶液；壳聚糖是选择150 kDa的相对分子质量，壳聚糖溶液是加入4 mg的壳聚糖到4 mL的蒸馏水中，得到壳聚糖溶液为1 mg/mL。单乳化溶剂蒸发法步骤如下: 先将制备好的含油乙醇溶液一滴一滴加入到水相海藻酸盐溶液中，同时需进行搅拌，然后进行探头超声，超声时间为30 min，搅拌30 min，得到初乳，再加入壳聚糖溶液，搅拌30 min，溶剂蒸发是通过使用旋蒸仪仪器，温度为60℃，时长为30 min，过夜平衡，得到装载中药挥发油的纳米乳制剂，完成制备。
实施例4
中药纳米乳制剂的粒径分布及透射电子显微镜形貌分析
采用马尔文粒度仪的动态光散射法测定实施例1制得的中药纳米乳制剂的粒径分布及形貌分析，取约50 μL样品，放入电位皿中测定，散射角度为90度和温度控制为25 ℃。
其结果如图1所示：所得的中药纳米乳制剂的粒径约为200-300 nm，电位约为30-60 mV，聚合物分散指数约为0.1-0.2。
其结果如图2所示：所得的中药纳米乳制剂的形貌为球形。
实施例5
中药纳米乳制剂对偏头痛的治疗作用
(1)动物
25只雌性SPF级C57BL/6J小鼠，体重17～24 g，由广东省医学实验动物中心提供。
(2)分组及造模
动物被随机分为5组，对照组、模型组、阳性对照组、中药纳米乳制剂低剂量组、中药纳米乳制剂高剂量组，每组5只。将所有小鼠适应性饲养一周后开始试验，从第0天开始，中药纳米乳制剂各个剂量组分别按照52和104 mg/kg剂量灌胃，对照组、模型组、阳性对照组分别予以相应体积的蒸馏水灌胃，第7天结束，预给药1周。阳性对照组在最后一次给药时，通过腹腔注射阳性药舒马曲坦(sumatriptan)，按照0.6 mg/kg剂量注射。使用硝酸甘油诱导偏头痛小鼠模型，通过皮下注射硝酸甘油，按照10 mg/kg剂量注射，30分钟后成功建立偏头痛动物模型。上述中药纳米乳制剂为实施例1制备得到的中药纳米乳制剂。
(3)小鼠行为学实验(behavioral tests)
实验包括热板潜伏性疼痛反应实验，福尔马林引起舔足实验和乙酸引起扭曲实验。
在热板潜伏性疼痛反应实验期间，首先将雌性小鼠放在55±0.5 ℃的热板上，观察其疼痛反应(舔爪或跳跃)。在实验之前，将每只小鼠先习惯于热板两次。将疼痛反应发生之前的潜伏时间记录为镇痛参数。本研究排除了背景潜在反应时间短于10 s或长于30 s的未经治疗的小鼠。对于热板，必须在观察到反应后立即将动物取回。对于所有测试，定义截止时间为60 s，以避免或限制灼伤的风险。在给药前将测量一次作为基线，给药后30、60、90、120分钟记录每只动物的热板潜伏反应时间。通过记录热板潜伏反应时间来评估镇痛效果。
在福尔马林引起舔足实验期间，使用雌性C-57小鼠，通过皮下注射5%福尔马林溶液在右后足的背部皮肤，注射完成后，将小鼠放入27℃热板中，记录5 min内的舔足总时长。通过记录福尔马林刺激的舔足时间来评估镇痛效果。
在乙酸引起扭曲实验期间，使用雌性C-57小鼠，通过腹腔注射0.6%的乙酸水溶液(0.1 mL / 10g)，建立扭体模型。扭体指标是腹部内凹、同时伴有躯干扭曲与后腿伸张、臀部高起的特征性反应时，完成上述所有动作才算一次完整的扭体。将每只小鼠放在透明的观察盒中，并在注射乙酸后15分钟内计算扭体动作的次数。通过记录乙酸刺激的扭体次数来评估镇痛效果。
实施例5中小鼠造模及给药时间示意图参见图3。
从图4 的热板潜伏反应时间的结果来看，在30-120 min内，模型组的热板潜伏反应时间显著低于对照组(# p<0.05，## p<0.01)。而在60-120 min内，与模型组比较，中药纳米乳制剂高剂量组显著升高(* p<0.05，** p<0.01)，并呈剂量依赖性。
从图5 的福尔马林引起舔足时间的结果来看，模型组的福尔马林引起舔足时间显著高于对照组(# p<0.05，## p<0.01)。而中药纳米乳制剂高剂量组较模型组有明显改善(* p<0.05，** p<0.01)，并呈剂量依赖性。
从图6 的乙酸引起扭曲次数的结果来看，模型组的乙酸引起扭曲次数显著高于对照组(# p<0.05，## p<0.01)。而中药纳米乳制剂高剂量组较模型组有明显改善(* p<0.05，** p<0.01)，并呈剂量依赖性。
(4)偏头痛有关的生化指标变化
本实验对小鼠血液中降钙素基因相关肽(CGRP)、血清素(5-HT)、一氧化氮(NO)含量测定。先将小鼠麻醉，通过腹腔注射3.5 mL/kg的10%水合氯醛溶液，再通过摘眼球取血法，收集血液，然后离心后取上清液，按照ELISA试剂盒的操作说明进行CGRP、5-HT、NO含量测定。
其结果如图7至图9所示显示：与空白组相比，模型组的CGRP、NO含量显著升高，模型组的5-HT含量显著降低(# p<0.05，## p<0.01)，而较模型组相比，中药纳米乳制剂高剂量组可以显著降低血液中CGRP、NO的含量，升高5-HT含量(* p<0.05，** p<0.01)。
对比例1
与实施例1的步骤相似，不同之处仅在于：使用0.67 mg/mL的氯化钙溶液(CaCl2)替代壳聚糖溶液。其得到的纳米乳制剂的粒径为254.8±13.6 nm，明显高于实施例1中得到的纳米乳制剂粒径194.3±3.9 nm，因此使用本发明实施例1中的壳聚糖作为包封材料较优。
对比例2
与实施例2的步骤相似，不同之处仅在于：使用200 kDa的壳聚糖溶液。其得到的纳米乳制剂的粒径为242.8±4.4 nm，明显高于实施例2中得到的纳米乳制剂粒径191.8±5.8nm，因此使用本发明实施例2中的100kDa的壳聚糖较优。
对比例3
与实施例3的步骤相似，不同之处仅在于：探头超声时间为5 min。其得到的纳米乳制剂的粒径为228.3±2.4 nm，明显高于实施例3中得到的纳米乳制剂粒径190.1±5.4 nm，因此使用本发明实施例3中的探头超声时间为30 min较优。
对比例4
与实施例1的步骤相似，不同之处仅在于：使用0.6 mg/mL的海藻酸盐溶液。其得到的纳米乳制剂的粒径为215.8±4.4 nm，明显高于实施例1中得到的纳米乳制剂粒径194.3±3.9 nm，因此使用本发明实施例1中的海藻酸盐溶液作为包封材料较优。
对比例5
与实施例2的步骤相似，不同之处仅在于：使用1 mg/mL的壳聚糖溶液。其得到的纳米乳制剂的粒径为212.0±4.7 nm，明显高于实施例2中得到的纳米乳制剂粒径191.8±5.8nm，因此使用本发明实施例2中的壳聚糖溶液作为包封材料较优。
综上，本发明实施例提供了一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂及其制备方法与应用，本发明实施例提供的一种治疗偏头痛的中药纳米乳制剂，其制备方法包括以下步骤：选取当归和川芎；通过超临界提取法提取中药的挥发油；选择壳聚糖和海藻酸盐的材料，通过单乳化溶剂蒸发法，将中药挥发油装载后，完成纳米乳制备。以上方法制得的中药纳米乳制剂使用效果理想，可有效治疗偏头痛小鼠的头痛症状、降低疾病相关的生化指标，具有缓解偏头痛症状的作用，可制备成治疗的偏头痛药物。
本发明实施例提供的中药纳米乳制剂的制备方法简单，易操作，成本低，可有效地从当归和川芎中提取出挥发油。制得的中药纳米乳制剂至少具有缓解偏头痛的作用，能减少偏头痛小鼠的发作强度和次数、降低疾病相关的生化指数，为其在制备治疗偏头痛的药物中的应用提供了科学依据。
以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (19)

1.一种治疗偏头痛的纳米乳制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将当归挥发油和川芎挥发油的混合油与乙醇混合作为油相，海藻酸盐与水、表面活性剂混合作为水相，在搅拌条件下，将上述的油相加入到水相中，然后超声，制得初乳；向初乳中继续加入壳聚糖溶液并搅拌，搅拌结束后，去除溶剂，即得所述纳米乳制剂，其中，所述表面活性剂选自吐温-80 (Tween-80)、聚乙二醇辛基苯基醚-100 (TritonX-100)和蔗糖脂肪酸酯、脂肪酰醇胺中的至少一种；
通过以上制备方法制备得到的纳米乳制剂，以当归挥发油和川芎挥发油为有效药物成分，与药物中可接受的辅助添加成分共同组成，其中，所述有效药物成分来自于当归和川芎以重量比为1:0.5-2进行超临界提取所得。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，使用超临界提取法提取当归挥发油和川芎挥发油的混合油。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述当归与所述川芎的生药原料质量比为1: 0.5-2，所述当归和所述川芎在进行提取前，将其粉碎得到粉碎物，并将粉碎物通过50-200目筛，备用。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在超临界提取过程中，系统压强维持在25-45 MPa，系统温度维持在35-55℃，系统二氧化碳流速维持25-35 mL/min，并提取1-3次，每次提取时间在1-3 h。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，超临界提取完成后，将提取后的液体静置0.5-2 h。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，使用壳聚糖和海藻酸盐作为包封材料，在搅拌条件下，首先将混合油的乙醇溶液加入海藻酸盐、水和表面活性剂的海藻酸盐溶液中，制备初乳，然后向初乳中继续加入壳聚糖溶液搅拌，再蒸发去除溶剂，制备纳米乳制剂。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖的分子量为50-150 kDa，所述壳聚糖溶液为将壳聚糖加入水中所得的溶液，且壳聚糖溶液的浓度为0.1-1 mg/mL。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述海藻酸盐选择棕色海藻的海藻酸钠盐，所述海藻酸盐溶液为将海藻酸盐加入水和表面活性剂中所得的溶液，且海藻酸盐溶液的浓度为0.3-1 mg/mL。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述混合油的乙醇溶液为将当归挥发油和川芎挥发油的混合油与乙醇混合得到溶液，且混合油的乙醇溶液的浓度为10-20 mg/mL。
10.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，制备初乳的超声为探头超声，超声时间为10-30 min。
11.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，使用旋蒸仪仪器蒸发去除溶剂，蒸发温度为40-60℃，时长为10-30 min。
12.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述有效药物成分为以超临界二氧化碳循环逆流方式萃取、分离得到当归挥发油和川芎挥发油。
13.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，超临界二氧化碳循环逆流萃取挥发油时，将当归和川芎两种生药原料混合后同时萃取。
14. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纳米乳制剂的粒径为200-300nm。
15.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纳米乳制剂的电位为30-60 mV。
16.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述纳米乳制剂的聚合物分散指数为0.1-0.2。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的制备方法制备的治疗偏头痛的纳米乳制剂在制备治疗偏头痛的药物中的应用。
18.根据权利要求17所述的应用，其特征在于，所述纳米乳制剂用于制备预防偏头痛的药物。
19.一种治疗偏头痛的制品，其特征在于，所述制品的原料包括权利要求1-16中任一项所述的制备方法制备的治疗偏头痛的纳米乳制剂，所述制品为药品。
CN202111285758.0A 2021-11-02 2021-11-02 一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用 Active CN113827563B (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111285758.0A CN113827563B (zh) 2021-11-02 2021-11-02 一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用
PCT/CN2022/083494 WO2023077715A1 (zh) 2021-11-02 2022-03-28 一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111285758.0A CN113827563B (zh) 2021-11-02 2021-11-02 一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113827563A CN113827563A (zh) 2021-12-24
CN113827563B true CN113827563B (zh) 2023-05-12

Family

ID=78966727

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111285758.0A Active CN113827563B (zh) 2021-11-02 2021-11-02 一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN113827563B (zh)
WO (1) WO2023077715A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113827563B (zh) * 2021-11-02 2023-05-12 澳门大学 一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1506044A (zh) * 2002-09-06 2004-06-23 山东绿叶天然药物研究开发有限公司 含有挥发油的缓释制剂及其制备方法
CN100381175C (zh) * 2004-10-09 2008-04-16 山西中医学院 一种微乳制剂及其制备方法
CN102488725A (zh) * 2011-12-21 2012-06-13 天津中新药业集团股份有限公司第六中药厂 治疗心脑血管疾病的舒脑欣乳剂及制备方法
CN103830116B (zh) * 2014-03-26 2017-01-04 清华大学 藁本内酯在制备预防皮肤光老化护肤品的用途及使用方法
CN106138212A (zh) * 2016-08-31 2016-11-23 天津中新药业研究中心 一种治疗头痛的组合物及其制备方法
CN112603934A (zh) * 2020-12-31 2021-04-06 北京悦康科创医药科技股份有限公司 一种当归川芎组合物及其制备方法
CN113455625A (zh) * 2021-04-21 2021-10-01 浙江工商大学 一种高钙吸收率的鱼糜制品加工方法
CN113440479A (zh) * 2021-07-14 2021-09-28 南京师范大学 植物精油的纳米乳液及其制备方法和应用
CN113827563B (zh) * 2021-11-02 2023-05-12 澳门大学 一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN113827563A (zh) 2021-12-24
WO2023077715A1 (zh) 2023-05-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3574911B1 (en) Bitter ganoderma lucidum spore powder and preparation method thereof
IL299047A (en) Cannabis fat preparations and methods for their preparation
CN113827563B (zh) 一种治疗偏头痛的纳米乳制剂及其制备方法与应用
CN110742972B (zh) 一种具有改善认知作用的中药组合物及其制备方法和中药制剂
US7799353B2 (en) Pharmaceutical mixture for hepatitis treatment and its preparation method
CN102861283B (zh) 一种用于治疗癫痫病的药物组合物及其制备方法和用途
CN101623475B (zh) 一种参桂鹿茸口服固体制剂的制备方法
KR101863511B1 (ko) 공진단 약침액의 제조방법
CN102988461B (zh) 一种红景天注射液及其制备方法
CN108815227B (zh) 一种活血化瘀的药物组合物及其制备方法
CN113713048A (zh) 固体形式的天麻醒脑中药组合物及其制法和用途
CN109758542B (zh) 具有健胃作用的复合木香油脂肪乳制剂及制备方法与应用
CN104189833A (zh) 一种逍遥丸的制备工艺
CN112076323B (zh) 一种安慰剂及其应用
CN113842461B (zh) 用于缓解、治疗酒精中毒、酒后不适的gabaa受体结合物、组合物及其应用
KR101605107B1 (ko) 마이크로에멀젼 추출용매로 두충과 오갈피를 이용한 보조식품의 제조방법
KR102322782B1 (ko) 산나물 추출물을 유효성분으로 하는 피부장벽 강화 및 아토피 피부염 개선용 조성물
CN111419920B (zh) 具有降糖作用的药物组合物及其制备方法和用途
CN103816307B (zh) 神经生长再造丸及其制备方法
CN116459323B (zh) 一种用于嗅觉障碍的精油组合物及其应用
CN106880656A (zh) 活血止痛胶囊
CN117064976A (zh) 一种治疗青少年抑郁症的中药组合物、制备方法和应用
CN108379242A (zh) 一种大蒜素螺旋藻多糖聚合物脂质纳米粒制剂以及制备方法
CN104940405B (zh) 一种小儿清咽颗粒及其制备方法
CN107693618B (zh) 一种治疗肾虚的药物组合物及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant