CN113699051B - 耐高糖和低pH的酵母菌及其应用 - Google Patents
耐高糖和低pH的酵母菌及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113699051B CN113699051B CN202110760100.4A CN202110760100A CN113699051B CN 113699051 B CN113699051 B CN 113699051B CN 202110760100 A CN202110760100 A CN 202110760100A CN 113699051 B CN113699051 B CN 113699051B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- yeast
- fermented
- cgmcc
- sugar
- preserved
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 title claims abstract description 70
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 61
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 61
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims abstract description 38
- 235000009917 Crataegus X brevipes Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000013204 Crataegus X haemacarpa Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000009685 Crataegus X maligna Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000009444 Crataegus X rubrocarnea Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000009486 Crataegus bullatus Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000017181 Crataegus chrysocarpa Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000009682 Crataegus limnophila Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000004423 Crataegus monogyna Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000002313 Crataegus paludosa Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 235000009840 Crataegus x incaedua Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 12
- 235000014663 Kluyveromyces fragilis Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 244000253911 Saccharomyces fragilis Species 0.000 claims abstract description 11
- 235000018368 Saccharomyces fragilis Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 11
- 229940031154 kluyveromyces marxianus Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims abstract description 4
- 241001092040 Crataegus Species 0.000 claims abstract 10
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 21
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 21
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 20
- 238000009923 sugaring Methods 0.000 claims description 14
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 13
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 13
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 10
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims description 8
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 6
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 5
- 235000007106 Crataegus suborbiculata Nutrition 0.000 claims 1
- 241000073432 Crataegus suborbiculata Species 0.000 claims 1
- 235000013202 a hawthorn Nutrition 0.000 claims 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract description 9
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 abstract description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 55
- 240000000171 Crataegus monogyna Species 0.000 description 22
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 17
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 11
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 235000013569 fruit product Nutrition 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 235000004876 Physalis pruinosa Nutrition 0.000 description 1
- 240000006285 Physalis pubescens Species 0.000 description 1
- 235000009230 Physalis pubescens Nutrition 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019629 palatability Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 235000019614 sour taste Nutrition 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
- C12N1/165—Yeast isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23B—PRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
- A23B7/00—Preservation or chemical ripening of fruit or vegetables
- A23B7/02—Dehydrating; Subsequent reconstitution
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23B—PRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
- A23B7/00—Preservation or chemical ripening of fruit or vegetables
- A23B7/08—Preserving with sugars
- A23B7/085—Preserving with sugars in a solution of sugar
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23B—PRESERVING, e.g. BY CANNING, MEAT, FISH, EGGS, FRUIT, VEGETABLES, EDIBLE SEEDS; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES; THE PRESERVED, RIPENED, OR CANNED PRODUCTS
- A23B7/00—Preservation or chemical ripening of fruit or vegetables
- A23B7/10—Preserving with acids; Acid fermentation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
- A23G3/00—Sweetmeats; Confectionery; Marzipan; Coated or filled products
- A23G3/34—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof
- A23G3/36—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
- A23G3/364—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins
- A23G3/366—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins containing microorganisms, enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
- A23G3/00—Sweetmeats; Confectionery; Marzipan; Coated or filled products
- A23G3/34—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof
- A23G3/36—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
- A23G3/48—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing plants or parts thereof, e.g. fruits, seeds, extracts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种耐高糖和低pH的酵母菌及其应用。本发明所提供的耐高糖和低pH的酵母菌，于2021年6月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏编号为CGMCC No.22681。耐高糖和低pH的酵母菌在发酵山楂果脯中的应用、发酵果脯的生产方法是本发明所要重点保护的范围。首先发酵酵母菌获得种子液，然后将去核山楂加入糖渍液中处理，加热、煮沸、冷却，再采用种子液发酵经处理的物料，继续发酵，烘干，获得成品发酵山楂果脯。本发明首次公开了一株耐高糖和低pH的马克斯克鲁维酵母CGMCC No.22681及其应用。利用本发明提供的马克斯克鲁维酵母CGMCC No.22681，可在高糖和低pH条件下进行微生物发酵，具有良好的工业应用价值。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种耐高糖和低pH的酵母菌及其应用。
背景技术
果脯是以果蔬为原料经糖渍、干燥等工艺制成的略有透明感，表面无糖霜析出的制品。果脯既可以直接食用，也可以添加到其他食品中作为点缀或改善风味之用，广受消费者喜爱。目前市场上占主流的传统果脯存在口味单一，产品色泽、透明度、饱满度较差，保质期短等问题。微生物发酵是一种有助于保护食物、改善其营养价值和增强其感官特性的生物技术。有关微生物发酵水果和蔬菜的研究越来越受到人们的关注，其发酵制品不仅可直接提高发酵果蔬的营养价值和适口性，而且还产生了发酵特殊的风味和营养成分，如有机酸、维生素、氨基酸和抗氧化物质等，具有维持肠道菌群平衡、促进人体消化吸收、抗氧化、抗衰老、提高人体免疫力、预防心血管疾病等功效。将微生物发酵引入传统的果脯生产，既可以保存果蔬的营养成分，延长果蔬的供应期，调节淡忘季的需求，又具有微生物发酵特有的作用，改善产品风味，解决传统果脯口味单一，果脯微生物超标等行业问题，同时提高了果脯产品的保健价值，产品市场开发前景广阔，必将成为果脯行业研究的热点和发展方向。
目前发酵果脯的研究主要集中在低糖的液体发酵或固态发酵的方式，生产过程复杂且产品口感风味不均一，所以目前市场上还缺乏有竞争力的发酵果脯产品。如何实现在果脯高糖度糖渍工艺的同时进行微生物发酵成为该领域突破的一个方向。因此，选育性能优良、可耐受高糖度且低pH的发酵益生菌仍是解决发酵果脯应用的重要课题之一，也具有重要的实用价值和学术研究价值。
王赢等人在《毛酸浆发酵果脯的研制》一文中，披露了发酵pH为3.89至3.75时，果脯有光泽，外观较饱满，表面光滑富有弹性，味道酸甜度适口。成少宁等人在《一株优良果脯加工废糖液酒精发酵酵母菌生长条件的研究》一文中披露：酵母菌最适的生长条件是pH3，而关于在更低的pH值更高的糖渍下发酵，鲜有文献披露。并且上述的果脯制作过程中，也并非是采用的糖渍发酵，若是糖渍发酵，其波美度更高，酵母菌对这种高糖低pH的耐受性能更差。
因此，需要寻找一株能耐受高糖低pH的菌株以实现在果脯高糖度糖渍工艺的同时进行微生物发酵。
发明内容
为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种耐高糖和耐低pH的酵母菌，该酵母菌于2021年6月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；分类命名为马克斯克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus；保藏编号为CGMCC No.22681。
上述的耐高糖和低pH的酵母菌在发酵山楂果脯中的应用，也是本发明所要保护的范围。
本发明还要保护的是一种发酵果脯的生产方法，该生产方法最大的特点是，采用酵母菌CGMCC No.22681来发酵山楂果脯。
具体的，一种发酵果脯的生产方法，包括以下的步骤：
（1）发酵酵母菌CGMCC No.22681
在种子培养基中接种发酵培养酵母菌CGMCC No.22681；
（2）将山楂去核，加入到糖渍液中，加热、煮沸、冷却，再加入蔗糖调整糖渍液糖度；
（3）在（2）中所得的物料中加入（1）中培养好的酵母菌CGMCC No.22681种子液，继续发酵；
（4）将发酵物料烘烤，获得酵母菌发酵山楂果脯。
优选的，（1）中，种子培养基为：蛋白胨2-10g/L、葡萄糖30-200g/L，发酵培养的pH5.0-6.0、温度为28～37℃、时间为20～28h。
优选的，（1）中，种子培养基为：蛋白胨5g/L、葡萄糖50-200g/L，发酵培养的pH5.0-6.0；发酵培养的pH5.5、温度为32℃、时间为24h。
优选的，（2）中，将山楂去核，加入到糖度为42～48%Brix的糖渍液中，加热、煮沸、冷却，再加入蔗糖调整糖渍液糖度。
优选的，（2）中，将山楂去核，加入到糖度为42～48%Brix的糖渍液中，加热至92～98℃维持10～20min，然后加热煮沸10～20min，自然冷却浸泡20～28h，再加入蔗糖调整糖渍液糖度至48～52%。
优选的，（3）中，种子液的接种量为10%，继续发酵的条件是，于30～34℃发酵45～50小时；
（4）中，将发酵物料于55～65℃的下烘6～10h，获得酵母菌发酵山楂果脯。
优选的，上述的一种发酵果脯的生产方法，包括以下的步骤：
（1）发酵酵母菌CGMCC No.22681
在种子培养基中接种发酵培养酵母菌CGMCC No.22681；种子培养基为：蛋白胨5g/L、葡萄糖50-200g/L，发酵培养的pH5.0-6.0；发酵培养的pH5.5、温度为32℃、时间为24h；
（2）将山楂去核，加入到糖度为45%Brix的糖渍液中，加热至92～98℃维持15min，然后加热煮沸15min，自然冷却浸泡24h，再加入蔗糖调整糖渍液糖度至50%；
（3）在（2）中所得的物料中加入（1）中培养好的酵母菌CGMCC No.22681种子液，种子液的接种量为10%，于32℃发酵48小时；
（4）将发酵物料于60℃的下烘8h，获得酵母菌发酵山楂果脯。
本发明首次公开了一株耐高糖和低pH的马克斯克鲁维酵母CGMCC No.22681及其应用。利用本发明提供的马克斯克鲁维酵母CGMCC No.22681，可在高糖和低pH条件下进行微生物发酵，具有良好的工业应用价值，在高糖和低pH的条件下，普通酵母菌无法存活，而本发明的酵母菌依然保持着优异的活性，通过实施例3可以看出，在55%Brix、pH2.3的条件下，酵母菌CGMCC No.22681的菌体生长情况良好。
本发明的有益效果在于：
（1）与普通的酵母菌相比，本发明所提供的酵母菌CGMCC No.22681耐糖渍性能优异，普通的酵母菌在55%Brix下不再生长，而本发明中的酵母菌CGMCC No.22681在该条件下能顺利生长，并且发酵产酒；
（2）通过本发明的方法发酵获得的山楂果脯，色泽均匀，鲜亮、甜度适中、韧性好、发酵风味浓厚。
附图说明
图1为菌株SL 6#的平板照片和显微镜照片；
图2为菌株SL 6#的系统进化树；
图3为酵母菌CGMCC No.22681发酵过程曲线；
图4为酵母菌CGMCC No.22681不同糖度及pH下的菌体生长数据；
图5为普通酿酒酵母与酵母菌CGMCC No.22681的发酵过程对比照片；
图6为酵母菌CGMCC No.22681发酵山楂果脯照片。
具体实施方式
为了能使本领域技术人员更好的理解本发明，现结合具体实施方式对本发明进行更进一步的阐述。
酿酒活性干酵母采购厂家：安琪酵母股份有限公司；
本发明中的其它原料比如蔗糖、蛋白胨、氯化钠等均为常规实验材料，普通市售产品；
以下结合具体实施例，对本发明做进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限制本发明的范围。
本发明的酵母菌已于2021年06月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为北京朝阳区北辰西路1号院3 号中国科学院微生物研究所，分类命名为马克斯克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus；保藏号CGMCC No.22681。
实施例1
SL6#菌株的选育
将实验室保藏的多株酿酒酵母菌在活化培养基（蔗糖20 g/L，蛋白胨5g/L，氯化钠0.5 g/L，pH6.0）进行活化，然后菌悬液在30W紫外灯下分别照射10-120s不等，将菌液经无菌水稀释后涂布于筛选培养基（蔗糖500 g/L，蛋白胨5g/L，氯化钠0.5 g/L，pH6.0，琼脂20g/L）30 ℃培养2～3 天。将获得的菌落最大的培养物转种于新的固体平板上，平板划线直至出现单菌落。经过复筛后，最终得到一株纯培养物，编号为SL 6#。
实施例2
SL 6#的鉴定
将实施例1获得的SL6#进行了18SrDNA鉴定，经过用从NCBI blast 中得到的部分序列构建进化树，从用MP法构建进化树确定SL6#为马克斯克鲁维酵母（Kluyveromycesmarxianus）。
从附图2中可以看出，本发明中所获得的菌株确为马克斯克鲁维酵母菌。
实施例3
酵母菌CGMCC No.22681的发酵
将实施例2 获得的酵母菌CGMCC No.22681进行多批次发酵培养。发酵培养基：300g山楂加糖度为40% Brix的1L蔗糖水溶液蒸煮30min，添加蔗糖调节糖度至55%Brix，自然pH（pH2.3）；接种量10％，发酵温度为32℃，发酵48h。取发酵液进行菌体生长及酒精度检测，菌体生长及发酵产酒曲线如附图3所示，从附图3中可以看出：酵母菌CGMCC No.22681在糖度55%、pH2.3的条件下仍然能够维持较高菌体生长和发酵代谢产酒精水平，在发酵24h即可达到菌体生长稳定性，在发酵36h发酵酒精度即可达到12%以上的酒精度。
维持发酵培养基其它组分不变分别调整不同的糖度，实验酵母菌CGMCC No.22681在不同糖度中的菌体生长情况；维持发酵培养基组分不变，分别调整不同的发酵液pH，实验酵母菌CGMCC No.22681在不同pH中的菌体生长情况。分别取发酵24h的发酵液检测菌体OD600，结果见附图4。由图可以看出，酵母菌CGMCC No.22681在糖度60%以下均能保持较好的生长，而且在糖度80%仍然可以耐受，最适糖度为30%；在pH2.5-8.5均能维持较好的生长，可以耐受1.5的低pH，最适pH为6.5。
实施例4
酵母菌CGMCC No.22681发酵山楂果脯
将山楂去核，添加至蔗糖制成的糖度为45%Brix的糖渍液中，加热至95℃维持15min，然后加热煮沸15min，自然冷却浸泡24h，然后添加蔗糖调整糖渍液糖度至50%Brix，然后加入培养好的酵母菌CGMCC No.22681种子液（培养条件如下：蛋白胨5g/L、葡萄糖50g/L、pH5.5，33℃培养24h），接种量10%，33℃继续发酵48h，然后捞出山楂置于60℃的环境下烘8h获得发酵风味浓厚的酵母菌发酵山楂果脯。
实施例5
酵母菌CGMCC No.22681发酵山楂果脯
将山楂去核，添加至蔗糖制成的糖度为45%Brix的糖渍液中，加热至92℃维持17min，然后加热煮沸17min，自然冷却浸泡24h，然后添加蔗糖调整糖渍液糖度至50%Brix，然后加入培养好的酵母菌CGMCC No.22681种子液（培养条件如下：蛋白胨8g/L、葡萄糖50g/L、pH5.8，32℃下培养24h），接种量10%，32℃继续发酵45h，然后捞出山楂置于55℃的环境下烘8h获得发酵风味浓厚的酵母菌发酵山楂果脯。
实施例6
酵母菌CGMCC No.22681发酵山楂果脯
将山楂去核，添加至蔗糖制成的糖度为45%Brix的糖渍液中，加热至95℃维持15min，然后加热煮沸15min，自然冷却浸泡24h，然后添加蔗糖调整糖渍液糖度至50%Brix，然后加入培养好的酵母菌CGMCC No.22681种子液（培养条件如下：蛋白胨10g/L、葡萄糖80g/L、pH6.0，37℃培养24h），接种量10%，37℃继续发酵48h，然后捞出山楂置于60℃的环境下烘8h获得发酵风味浓厚的酵母菌发酵山楂果脯。
实施例7
酵母菌CGMCC No.22681发酵山楂果脯
将山楂去核，添加至蔗糖制成的糖度为45%Brix的糖渍液中，加热至95℃维持15min，然后加热煮沸15min，自然冷却浸泡24h，然后添加蔗糖调整糖渍液糖度至50%Brix，然后加入培养好的酵母菌CGMCC No.22681种子液（培养条件如下：蛋白胨5g/L、葡萄糖50g/L、pH5.0，35℃培养22h），接种量10%，35℃继续发酵46h，发酵pH2.3；然后捞出山楂置于55℃的环境下烘8h获得发酵风味浓厚的酵母菌发酵山楂果脯。
关于本发明所提供的酵母菌CGMCC No.22681在发酵山楂果脯中的优势，本发明人进行了如下的实验：
在同样发酵条件下接种市场上采购的普通酿酒活性干酵母，35℃继续发酵46h未发现明显上泡发酵现象，继续维持发酵96h，未闻到明显的发酵风味，也未发现明显的上泡和菌体沉淀，具体的发酵情况见附图5，从附图5中可以看出，普通酿酒活性干酵母对山楂果脯没有任何发酵作用，这说明普通的普通酿酒活性干酵母无法耐受50%Brix的高糖浓度以及pH2.3的环境。
将普通酵母发酵后的山楂置于同样条件下烘干获得山楂果脯，口感品评未出现发酵风味，与普通的山楂果脯无差别。可判断普通的酿酒酵母无法同时耐受50%的高糖度和pH2.3的低pH，无法用于发酵山楂果脯的生产。
Claims (10)
1.耐高糖和低pH的酵母菌，其特征在于：该菌株于2021年6月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏编号为CGMCC No.22681，其分类命名为：马克斯克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus）。
2.如权利要求1所述的耐高糖和低pH的酵母菌在发酵山楂果脯中的应用。
3.一种发酵果脯的生产方法，其特征在于，采用酵母菌CGMCC No.22681来发酵山楂果脯。
4.一种发酵果脯的生产方法，包括以下的步骤：
（1）发酵酵母菌CGMCC No.22681
在种子培养基中接种发酵培养酵母菌CGMCC No.22681；
（2）将山楂去核，加入到糖渍液中，加热、煮沸、冷却，再加入蔗糖调整糖渍液糖度；
（3）在（2）中所得的物料中加入（1）中培养好的酵母菌CGMCC No.22681种子液，继续发酵；
（4）将发酵物料烘烤，获得酵母菌发酵山楂果脯。
5.如权利要求4所述的一种发酵果脯的生产方法，其特征在于，（1）中，种子培养基为：蛋白胨2-10g/L、葡萄糖30-200g/L，发酵培养的pH5.0-6.0、温度为28～37℃、时间为20～28h。
6.如权利要求4所述的一种发酵果脯的生产方法，其特征在于，（1）中，种子培养基为：蛋白胨5g/L、葡萄糖50-200g/L；发酵培养的pH5.5、温度为32℃、时间为24h。
7.如权利要求4所述的一种发酵果脯的生产方法，其特征在于，（2）中，将山楂去核，加入到糖度为42～48%Brix的糖渍液中，加热、煮沸、冷却，再加入蔗糖调整糖渍液糖度。
8.如权利要求4所述的一种发酵果脯的生产方法，其特征在于，（2）中，将山楂去核，加入到糖度为42～48%Brix的糖渍液中，加热至92～98℃维持10～20min，然后加热煮沸10～20min，自然冷却浸泡20～28h，再加入蔗糖调整糖渍液糖度至48～52%。
9.如权利要求4所述的一种发酵果脯的生产方法，其特征在于，（3）中，种子液的接种量为10%，继续发酵的条件是，于30～34℃发酵45～50小时；
（4）中，将发酵物料于55～65℃的下烘6～10h，获得酵母菌发酵山楂果脯。
10.如权利要求4所述的一种发酵果脯的生产方法，包括以下的步骤：
（1）发酵酵母菌CGMCC No.22681
在种子培养基中接种发酵培养酵母菌CGMCC No.22681；种子培养基为：蛋白胨5g/L、葡萄糖50-200g/L，发酵培养的pH5.0-6.0；发酵培养的pH5.5、温度为32℃、时间为24h；
（2）将山楂去核，加入到糖度为45%Brix的糖渍液中，加热至92～98℃维持15min，然后加热煮沸15min，自然冷却浸泡24h，再加入蔗糖调整糖渍液糖度至50%；
（3）在（2）中所得的物料中加入（1）中培养好的酵母菌CGMCC No.22681种子液，种子液的接种量为10%，于32℃发酵48小时；
（4）将发酵物料于60℃的下烘8h，获得酵母菌发酵山楂果脯。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110760100.4A CN113699051B (zh) | 2021-07-06 | 2021-07-06 | 耐高糖和低pH的酵母菌及其应用 |
| LU501542A LU501542B1 (en) | 2021-07-06 | 2022-02-24 | Yeast tolerant to high sugar and low ph, and application thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110760100.4A CN113699051B (zh) | 2021-07-06 | 2021-07-06 | 耐高糖和低pH的酵母菌及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113699051A CN113699051A (zh) | 2021-11-26 |
| CN113699051B true CN113699051B (zh) | 2023-01-10 |
Family
ID=78648318
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110760100.4A Active CN113699051B (zh) | 2021-07-06 | 2021-07-06 | 耐高糖和低pH的酵母菌及其应用 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113699051B (zh) |
| LU (1) | LU501542B1 (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109700019A (zh) * | 2019-02-27 | 2019-05-03 | 中康亨通（北京）医药技术股份有限公司 | 一种改善睡眠的牡丹酵素及其生产方法 |
| CN110013027A (zh) * | 2018-01-08 | 2019-07-16 | 江苏鼎丰生态农业发展有限公司 | 一种糙米酵素粉的发酵生产方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7344876B2 (en) * | 2003-01-24 | 2008-03-18 | Phage Biotechnology, Inc. | Kluyveromyces strains metabolizing cellulosic and hemicellulosic materials |
-
2021
- 2021-07-06 CN CN202110760100.4A patent/CN113699051B/zh active Active
-
2022
- 2022-02-24 LU LU501542A patent/LU501542B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110013027A (zh) * | 2018-01-08 | 2019-07-16 | 江苏鼎丰生态农业发展有限公司 | 一种糙米酵素粉的发酵生产方法 |
| CN109700019A (zh) * | 2019-02-27 | 2019-05-03 | 中康亨通（北京）医药技术股份有限公司 | 一种改善睡眠的牡丹酵素及其生产方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Purification and characterization of an inulinase produced by a Kluyveromyces marxianus strain isolated from blue agave bagasse;Jonathan Trapala;《Protein Expr Purif》;20200807;全文 * |
| 耐高温酵母菌的筛选及其乙醇发酵特性;刘超帝;《食品科学》;20161231;第37卷(第19期);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113699051A (zh) | 2021-11-26 |
| LU501542B1 (en) | 2023-01-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN109439489B (zh) | 一种火龙果果酒的制备方法 | |
| CN111004752B (zh) | 一株耐乙醇植物乳杆菌及其在发酵食品中的应用 | |
| CN1826963A (zh) | 发酵辣椒产品及其生产方法 | |
| CN102907643A (zh) | 一种榨菜腌制工艺 | |
| CN101194636A (zh) | 一种快速生产粘豆包的方法 | |
| KR101701827B1 (ko) | 불릴 필요없는 발효 곡물의 제조방법 | |
| CN113151042B (zh) | 一种产l-乳酸和乙酸乙酯的米酸发酵工艺及其专用菌 | |
| CN113969242B (zh) | 一种高产γ-氨基丁酸的酿酒酵母菌以及在制备γ-氨基丁酸产品中的应用 | |
| CN110915972A (zh) | 一种风味苹果果脯的糖渍方法 | |
| CN113005053B (zh) | 一种快速产l-乳酸的米酸发酵工艺及其专用菌 | |
| CN101250478A (zh) | 葛根葡萄醋制备工艺 | |
| CN110004090A (zh) | 一种肠膜明串珠菌及其在发酵酸菜中的应用 | |
| CN107259260B (zh) | 一种降火消食的枸杞果醋饮料及其制备方法 | |
| CN110218663B (zh) | 高产α-糖苷酶抑制剂的解淀粉芽孢杆菌Q4菌株及功能性黄酒和制备方法 | |
| CN109593627B (zh) | 一种沙棘枸杞保健果酒的电场强化酿造工艺 | |
| CN113699051B (zh) | 耐高糖和低pH的酵母菌及其应用 | |
| CN110583932A (zh) | 一种发酵型玉米胚芽粕饮料的制备方法 | |
| KR102028683B1 (ko) | 초산 발효능을 갖는 신규한 아세토박터 파스퇴리아누스 균주 및 그를 이용한 발효식초의 제조방법 | |
| CN109497499A (zh) | 一种桑葚酱油 | |
| CN105482982A (zh) | 一种利用脐橙渣多菌种液态深层发酵生产高品质果醋的方法 | |
| CN109527144A (zh) | 一种谷物普洱茶混合发酵饮料及其制备方法 | |
| CN114304564A (zh) | 一种微生物发酵组合物及其应用 | |
| CN109929768B (zh) | 一种酿酒酵母菌株及其在生产低醇精酿雪梨果酒中的应用 | |
| CN106011025A (zh) | 食品发酵用的乳酸菌菌株、发酵剂及其应用 | |
| CN106047733A (zh) | 食品发酵用的酵母菌菌株、发酵剂及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |