CN113647633A - 一种护肝降脂的植物乳杆菌sf-l-28植物饮品及其制备工艺 - Google Patents
一种护肝降脂的植物乳杆菌sf-l-28植物饮品及其制备工艺 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种护肝降脂的植物乳杆菌SF‑L‑28植物饮品及其制备工艺，原料包括被发酵底物和调味料，被发酵底物包括：净化水，茯苓提取物，玫瑰花提取物，山楂提取物，百合提取物，橘皮提取物，栀子提取物，菊花提取物，决明子提取物，葛根提取物，红枣粉，薏仁粉，黑木耳粉，山药粉，酵母粉；调味料包括：蜂蜜，胡萝卜浓缩汁，水蜜桃浓缩汁，菠萝浓缩汁；被发酵底物经植物乳杆菌SF‑L‑28发酵后与调味料混合调味制得植物乳杆菌SF‑L‑28植物饮品。本发明使用植物乳杆菌SF‑L‑28发酵制备的植物饮品可通过调节肠胃菌群健康，起到护肝降脂、降低肝细胞损伤、提高机体健康的目的。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种护肝降脂的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品及其制备工艺。
背景技术
人体的五脏六腑都有其对应的功能，肝脏是人体重要的代谢器官，主要职责之一就是“解毒”。肝脏就像是我们人体的一个化工厂，掌管着糖、脂肪、蛋白质的解毒、代谢，人体大部分的新陈代谢和有毒物质的转化，所以肝脏也是最易污染的部门。现代社会压力大、饮食结构复杂，脂肪肝、酒精肝成为大众熟知的肝脏疾病。常见的养肝方法有饮食养肝、睡眠养肝、养肝茶、养肝汤等。
专利CN201010548315.1公布了一种养肝护肝保健品，其有效成分由佛手18-20份，余甘子10-15份，茯苓9-14份，黄精8-13份，云芝7-11份，山楂8-12份，葛根8-15份，珍珠4-7份，金银花3-6份，甘草4-8份制成。专利CN201310318748.1公开了一种醒酒养肝保健醋，由葛根40-55份、地黄叶25-35份、桑叶25-35份、蒲公英18-22份、蜜桶花18-22份、竹叶兰18-22份、原醋95-105份、蜂蜜45-55份制成。目前尚未有利用植物乳杆菌制剂或产品护肝的相关报道。
发明内容
针对现有技术缺少利用植物乳杆菌制剂或产品护肝降脂的问题，本发明提供一种护肝降脂的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品及其制备工艺，使用植物乳杆菌SF-L-28发酵制备的植物饮品可通过调节肠胃菌群健康，起到护肝降脂、降低肝细胞损伤、提高机体健康的目的。
第一方面，本发明提供一种护肝降脂的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品，所述植物乳杆菌SF-L-28植物饮品的原料包括被发酵底物和调味料，其中所述被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水50-80份，茯苓提取物1.5-2份，玫瑰花提取物2-4份，山楂提取物1-1.5份，百合提取物0.5-1份，橘皮提取物2-5份，栀子提取物3-6份，菊花提取物3-6份，决明子提取物0.5-1份，葛根提取物0.5-1份，红枣粉1.65-2份，薏仁粉1.65-2份，黑木耳粉1.65-2份，山药粉1.7-2份，酵母粉0.15-1份；
所述调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜2-4份，胡萝卜浓缩汁1.2-2份，水蜜桃浓缩汁2.5-4份，菠萝浓缩汁3-5份；
所述被发酵底物经植物乳杆菌SF-L-28发酵后与调味料混合调味制得植物乳杆菌SF-L-28植物饮品，所述植物乳杆菌SF-L-28已于2020年10月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.20926；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum。
进一步的，所述被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水60份，茯苓提取物1.5份，玫瑰花提取物4份，山楂提取物1.5份，百合提取物0.5份，橘皮提取物4份，栀子提取物3份，菊花提取物5份，决明子提取物0.5份，葛根提取物0.5份，红枣粉1.65份，薏仁粉1.65份，黑木耳粉1.65份，山药粉1.7份，酵母粉0.15份；
所述调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜4份，胡萝卜浓缩汁1.2份，水蜜桃浓缩汁2.5份，菠萝浓缩汁5份。
进一步的，所述植物乳杆菌SF-L-28植物饮品为褐色液体。
进一步的，所述植物乳杆菌SF-L-28植物饮品中含有植物乳杆菌SF-L-28的数量为10-30亿/mL。
进一步的，所述植物乳杆菌SF-L-28植物饮品的食用方式为直接饮用。
第二方面，本发明还提供一种护肝降脂的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品的制备工艺，包括如下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌，冷却后得到灭菌液；
（3）将植物乳杆菌SF-L-28接种到MRS液体培养基中，37℃下培养得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，37℃下培养得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得植物乳杆菌SF-L-28植物饮品。
进一步的，所述制备工艺包括如下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至30-40℃，得到灭菌液；
（3）将植物乳杆菌SF-L-28接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18-30h得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养20-48h，得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置20-60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得植物乳杆菌SF-L-28植物饮品。
本发明的有益效果在于，
本发明用于发酵的植物乳杆菌SF-L-28具有高粘附性、强肠胃适应能力，可有效调节肠胃菌群健康，提高机体免疫力的功效。
本发明提供的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品能有效提高甘油激酶活性，起到养肝降脂、降低肝细胞损伤的作用，特别适合饮酒时服用，对于酒精肝、脂肪肝有良好的预防效果。
本发明植物乳杆菌SF-L-28植物饮品的被发酵底物具备如下功效：
茯苓：味甘、淡，性平；归心、肺、脾、肾经；利水渗湿，健脾，宁心；
玫瑰：功能主治为理气解郁，和血散瘀；治肝胃气痛，新久风痹；
山楂：酸、甘，微温；消食健胃，行气散瘀，化浊降脂；
百合：味甘，性寒；养阴润肺，清心安神；
橘皮：味苦、辛，性温；理气健脾，燥湿化痰；
栀子：苦，寒；泻火除烦，清热利湿，凉血解毒；
菊花：味苦、甘，性微寒；散风清热，平肝明目，清热解毒；
决明子：味苦、甘、咸，性微寒，清肝明目，利水通便，降血压降血脂；
葛根：甘、辛，凉；有解肌退热，透疹，生津止渴；
红枣：味甘性温、归脾胃经，有补中益气、养血安神、缓和药性的功能；
薏仁：利水消肿、健脾祛湿、清热排脓、抗炎镇痛、增强免疫力；
黑木耳：性味甘平，具有清肺润肠、滋阴补血、活血化瘀、明目养胃等功效；
山药：健脾，补肺，固肾，益精；
酵母粉：含有丰富的蛋白质、必需氨基酸、B族维生素、矿物质和膳食纤维，养肝护肝；
蜂蜜：具有调补脾胃的功效。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
本发明使用的植物乳杆菌SF-L-28已于2020年10月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.20926；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum。
本发明使用的MRS固体平板培养基包括以下组分：
蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、K2HPO4·7H2O 2g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、CH3COONa·3H2O 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、吐温80 1mL、琼脂15.0g、蒸馏水1000mL。
本发明使用的MRS液体培养基包括以下组分：
蛋白胨10g、牛肉粉5g、酵母粉4g、K2HPO4·7H2O 2g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、CH3COONa·3H2O 5g、MgSO4·7H2O 0.2g、MnSO4·4H2O 0.05g、吐温80 1mL、蒸馏水1000mL。
本发明使用的各物质提取物的制备方法为将茯苓、玫瑰花、山楂、百合、橘皮、栀子、菊花、决明子、葛根洗净后破碎成粗粒，分别用10倍量水煎煮2次，两次煎煮时间为3h、1h，合并两次滤液，静置2h后过滤得提取液，将提取液在真空度-0.06~0.08Mpa条件下浓缩至1.10（70-80℃），然后进行喷雾干燥，最后粉碎成80目细粉，即得提取物；
红枣粉的制备方法为红枣去核后加水预煮后得到红枣汁，将红枣汁打碎后加入0.01wt%果胶酶进行酶解（30℃，80min），真空加热浓缩酶解产物至原重量的20%，得到浓缩红枣浆，然后经两级高压均质处理、喷雾干燥，即得红枣粉；
薏仁粉的制备方法为将薏仁米烘干至含水量5%以下，磨碎成80目粉末，即得薏仁粉；
黑木耳粉的制备方法为将黑木耳人工初选除去大部分杂物后再机洗，离心甩干黑木耳水分并使用超低温脱水方法干燥黑木耳，然而粉碎至80目，即得黑木耳粉；
山药粉的制备方法为选择光滑、无病斑、条形直顺的新铁棍鲜山药，洗净去皮，切成0.2~0.3cm厚薄片，并立即浸泡于0.5%亚硫酸氢钠水溶液中，3h后捞出，用清水洗净后放入沸水中烫漂8min，捞出山药薄片并用清水漂去粘液，之后将山药薄片烘干、电磨加工成粉，即得山药粉；
胡萝卜浓缩汁、水蜜桃浓缩汁的制备方法为分别将去皮的胡萝卜丁、水蜜桃丁预煮5min后打浆，用卧螺机提取浆液中的汁液，同时用两效真空蒸发器将物料浓缩至40%，高温杀菌，待物料冷却，即得胡萝卜浓缩汁、水蜜桃浓缩汁；
菠萝浓缩汁的制备方法为将去皮菠萝榨汁后过滤，去除粗纤维、杂质、其他悬浮物及易产生沉淀的胶粒，菠萝汁脱气后灭菌，待菠萝汁冷却至50℃后加入苯甲酸钠（以菠萝汁计，0.5g/kg），真空浓缩至总糖量（以转化糖计）60%，即得菠萝浓缩汁。
上述茯苓提取物、玫瑰花提取物、山楂提取物、百合提取物、橘皮提取物、栀子提取物、菊花提取物、决明子提取物、葛根提取物、红枣粉、薏仁粉、黑木耳粉、山药粉、胡萝卜浓缩汁、水蜜桃浓缩汁、菠萝浓缩汁也可使用其他方法制备或购买相应市售产品。
实施例1 植物乳杆菌SF-L-28的分离和鉴定
1、菌源
2020年6月，中国广西省柳州市，使用粪便采集器对健康成人粪便进行取样。
2、菌株的分离
对健康成人粪便样品做十倍梯度稀释，每个梯度取100μL均匀涂布于MRS固体平板培养基上，随后取出置于厌氧罐中，37℃厌氧培养过夜；
次日可见平板上长有形态大小各异的菌落，挑取若干乳酸菌的特征菌落作二代划线纯化处理，平板厌氧活化1天，得培养物，随后做菌株鉴定。
3、植物乳杆菌SF-L-28的鉴定
(1)鉴定单位
生工生物工程（上海）股份有限公司。
(2)引物序列
27F：5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'；
1492R：5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'。
(3)鉴定的序列
CAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAACTCTGGTATTGATTGGTGCTTGCATCATGATTTACATTTGAGTGAGTGGCGAACTGGTGAGTAACACGTGGGAAACCTGCCCAGAAGCGGGGGATAACACCTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAACAACTTGGACCGCATGGTCCGAGCTTGAAAGATGGCTTCGGCTATCACTTTTGGATGGTCCCGCGGCGTATTAGCTAGATGGTGGGGTAACGGCTCACCATGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGGTAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAACTCTGTTGTTAAAGAAGAACATATCTGAGAGTAACTGTTCAGGTATTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAAGAAGTGCATCGGAAACTGGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGTATGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATACCGTAAACGATGAATGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATACTATGCAAATCTAAGAGATTAGACGTTCCCTTCGGGGACATGGATACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATTATCAGTTGCCAGCATTAAGTTGGGCACTCTGGTGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAACGAGTTGCGAACTCGCGAGAGTAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCAAAGTCGGTGGGGTAACCTTTTAGGAACCAGCCGCCTAAGGTGGGACAGATGATTAGGGTGAAGTCGT。
(4)鉴定结果
该菌株被鉴定为Lactiplantibacillus（乳杆菌属），推测为Lactiplantibacillus plantarum（植物乳杆菌）。其分类单元为：Bacteria; Firmicutes; Bacilli; Lactobacillales; Lactobacillaceae; Lactiplantibacillus。
测试例1 植物乳杆菌SF-L-28的粘附特性测试
将植物乳杆菌SF-L-28按1%的接种量接种于MRS液体培养基中37℃培养14h，发酵菌液以8000r/min离心15分钟，除去上清液，收集沉淀的菌体，将菌体和RPMI-1640细胞培养基（购于武安普诺赛生命科技有限公司）重混合，得到浓度达到108CFU/mL的菌悬液。将菌悬液加入到24孔细胞培养板中，每孔1mL，将24孔细胞培养板在5%CO2、95%空气的CO2培养箱中37℃培养3小时，吸收出未粘附的菌悬液，用磷酸盐缓冲盐冲洗5次，然后加入含有聚乙二醇辛基苯基醚的磷酸盐缓冲液溶解细胞，加入无菌水溶解。最后进行计数，培养条件为37℃恒温厌氧培养，2天后统计活菌数（GB4789.35方法检测）。
以CICC 10345、CICC 10481和BB12作为对比菌种，其中BB12为行业内公认的高粘附力双歧杆菌菌种标品，上述菌种均来源于开放的菌种保藏库，能够在市面上购买得到。
由表1可以看出，0.2%是较理想指标，结果表明，本发明的植物乳杆菌SF-L-28粘附力有明显优势。
表1 细菌粘附特性测试结果
测试例2 植物乳杆菌SF-L-28的胃肠道适应性测试
（1）模拟胃液的配置：将胃蛋白酶溶于灭菌的生理盐水（0.9%w/v，pH值为3.0），使胃蛋白酶终浓度为3g/L，以0.22μm无菌滤膜过滤，现配现用；
（2）模拟肠液的配置：将胰蛋白酶溶于灭菌的生理盐水（0.9%w/v，pH值为8.0），使胰蛋白酶终浓度为1g/L，并加入胆盐使胆盐终浓度为0.3%，以0.22μm无菌滤膜过滤，现配现用；
（3）分别将植物乳杆菌CICC 10345、植物乳杆菌CICC 10481和植物乳杆菌SF-L-28连续活化三代（每代18h），测定连续活化三代的菌株在A600下的OD值，通过计算求出OD5所需的菌液量；
（4）将OD5的菌液以8000G离心10min，弃上清，重悬于1mL模拟胃液中，37℃培养3h后进行平板活菌计数；
（5）取模拟胃液处理后的菌液8000G离心10min，弃上清，重悬于等体积的模拟肠液中，37℃培养4h后进行平板活菌计数。
按照如下公式计算各菌株的耐受胃肠液后的存活率，分析各菌株的胃肠道适应能力。
耐受胃肠液后的存活率（%）＝（耐受模拟肠液后菌液中的活菌数/菌液中的原始活菌数）×100%。
结果如下表2所示，可以看出，本发明植物乳杆菌SF-B-28较其他植物乳杆菌胃肠适应能力强。
表2 植物乳杆菌SF-L-28胃肠道适应性测试
实施例2 一种植物乳杆菌SF-L-28植物饮品
准备原料，包括被发酵底物和调味料，其中被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水60份，茯苓提取物1.5份，玫瑰花提取物4份，山楂提取物1.5份，百合提取物0.5份，橘皮提取物4份，栀子提取物3份，菊花提取物5份，决明子提取物0.5份，葛根提取物0.5份，红枣粉1.65份，薏仁粉1.65份，黑木耳粉1.65份，山药粉1.7份，酵母粉0.15份；
调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜4份，胡萝卜浓缩汁1.2份，水蜜桃浓缩汁2.5份，菠萝浓缩汁5份。
按照如下工艺步骤制备植物乳杆菌SF-L-28植物饮品：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至30℃，得到灭菌液；
（3）将植物乳杆菌SF-L-28接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养20h，得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得到的褐色液体即为植物乳杆菌SF-L-28植物饮品。
实施例3 一种植物乳杆菌SF-L-28植物饮品
准备原料，包括被发酵底物和调味料，其中被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水50份，茯苓提取物2份，玫瑰花提取物3份，山楂提取物1份，百合提取物1份，橘皮提取物5份，栀子提取物6份，菊花提取物6份，决明子提取物1份，葛根提取物1份，红枣粉2份，薏仁粉2份，黑木耳粉2份，山药粉2份，酵母粉1份；
调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜3份，胡萝卜浓缩汁2份，水蜜桃浓缩汁4份，菠萝浓缩汁4份。
按照如下工艺步骤制备植物乳杆菌SF-L-28植物饮品：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至35℃，得到灭菌液；
（3）将植物乳杆菌SF-L-28接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养24h得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养36h，得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置40MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得到的褐色液体即为植物乳杆菌SF-L-28植物饮品。
实施例4 一种植物乳杆菌SF-L-28植物饮品
准备原料，包括被发酵底物和调味料，其中被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水80份，茯苓提取物1.75份，玫瑰花提取物2份，山楂提取物1.25份，百合提取物0.75份，橘皮提取物2份，栀子提取物5份，菊花提取物3份，决明子提取物0.75份，葛根提取物0.75份，红枣粉1.8份，薏仁粉1.8份，黑木耳粉1.8份，山药粉1.8份，酵母粉0.5份；
调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜2份，胡萝卜浓缩汁1.8份，水蜜桃浓缩汁3份，菠萝浓缩汁3份。
按照如下工艺步骤制备植物乳杆菌SF-L-28植物饮品：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至40℃，得到灭菌液；
（3）将植物乳杆菌SF-L-28接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养30h得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养48h，得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置20MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得到的褐色液体即为植物乳杆菌SF-L-28植物饮品。
对比例1 一种植物乳杆菌SF-L-28植物饮品
准备原料，包括被发酵底物和调味料，其中被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水63份，玫瑰花提取物4份，百合提取物0.5份，橘皮提取物4份，栀子提取物3份，菊花提取物5份，决明子提取物0.5份，葛根提取物0.5份，红枣粉1.65份，薏仁粉1.65份，黑木耳粉1.65份，山药粉1.7份，酵母粉0.15份；
调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜4份，胡萝卜浓缩汁1.2份，水蜜桃浓缩汁2.5份，菠萝浓缩汁5份。
制备工艺同实施例2。
对比例2 一种植物乳杆菌SF-L-28植物饮品
准备原料，包括被发酵底物和调味料，其中被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水60份，茯苓提取物1.5份，玫瑰花提取物4份，山楂提取物1.5份，栀子提取物3份，菊花提取物5份，决明子提取物0.5份，葛根提取物5份，红枣粉1.65份，薏仁粉1.65份，黑木耳粉1.65份，山药粉1.7份，酵母粉0.15份；
调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜4份，胡萝卜浓缩汁1.2份，水蜜桃浓缩汁2.5份，菠萝浓缩汁5份。
制备工艺同实施例2。
对比例3 一种罗伊氏乳杆菌CGMCC No.20956植物饮品
按照实施例2准备原料，并按照如下工艺步骤制备植物饮品：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至30-40℃，得到灭菌液；
（3）将罗伊氏乳杆菌SF-L-25接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂，该罗伊氏乳杆菌CGMCC No.20956已公开于中国发明专利申请CN202011342651.0中；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养20h，得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得罗伊氏乳杆菌SF-L-25植物饮品。
对比例4 一种植物乳杆菌CICC 10345植物饮品
按照实施例2准备原料，并按照如下工艺步骤制备植物饮品：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至30-40℃，得到灭菌液；
（3）将植物乳杆菌SF-L-05接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18h得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养20h，得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得植物乳杆菌CICC 10345植物饮品。
测试例3 植物饮品的临床实验
在山东一酒店，10天内随机筛选50人为测试人群，随机分成实施例2组、对比例1组、对比例2组、对比例3组和对比例4组，每组各10人，饮酒前分别服用实施例2、对比例1、对比例2、对比例3和对比例4的护肝健脾植物饮品，各组饮酒量均控制在0.3L-0.5L范围内，第二天进行电话访问，结果如下表3所示。
表3 临床试验结果
通过调查发现，饮酒前服用植物乳杆菌SF-L-28发酵的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品可有效减少酒后头疼现象。
测试例4 植物乳杆菌SF-L-28植物饮品对血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）的影响
将80只SPF级Balb-c健康雄性大鼠（体重180-200g）随机分为4组，每组20只。
对照组：连续30天灌服生理盐水5mL/只，同时灌服56°白酒2mL/只。
低剂量组：连续30天喂食实施例2制备的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品5mL/只，同时灌服56°白酒2mL/只。
中剂量组：连续30天喂食实施例2制备的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品10mL/只，同时灌服56°白酒2mL/只。
高剂量组：连续30天喂食实施例2制备的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品20mL/只，同时灌服56°白酒2mL/只。
试验方法：30天后禁食12h，断头取血，静置2h后，离心，分离血清，-80℃储存备用。AST、ALT检测按试剂盒的说明书操作进行。
由下表4可以看出，本发明提供的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品对在低剂量、中剂量、高剂量下，都能够明显的降低大鼠的血AST、ALT水平，具有明显的解酒、保护肝细胞，减轻酒精对肝细胞损伤的作用。
表4 血清AST、ALT比较（X±S）
尽管通过优选实施例的方式对本发明进行了详细描述，但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换，而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 山东向日葵生物工程有限公司
<120> 一种护肝降脂的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品及其制备工艺
<130> 2021
<160> 3
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 1
agagtttgat cmtggctcag 20
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 2
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<210> 3
<211> 1499
<212> DNA
<213> Lactobacillus plantarum
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caggacgaac gctggcggcg tgcctaatac atgcaagtcg aacgaactct ggtattgatt 60
ggtgcttgca tcatgattta catttgagtg agtggcgaac tggtgagtaa cacgtgggaa 120
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gaccgcatgg tccgagcttg aaagatggct tcggctatca cttttggatg gtcccgcggc 240
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gggtaatcgg ccacattggg actgagacac ggcccaaact cctacgggag gcagcagtag 360
ggaatcttcc acaatggacg aaagtctgat ggagcaacgc cgcgtgagtg aagaagggtt 420
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Claims (7)
1.一种护肝降脂的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品，其特征在于，所述植物乳杆菌SF-L-28植物饮品的原料包括被发酵底物和调味料，所述被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水50-80份，茯苓提取物1.5-2份，玫瑰花提取物2-4份，山楂提取物1-1.5份，百合提取物0.5-1份，橘皮提取物2-5份，栀子提取物3-6份，菊花提取物3-6份，决明子提取物0.5-1份，葛根提取物0.5-1份，红枣粉1.65-2份，薏仁粉1.65-2份，黑木耳粉1.65-2份，山药粉1.7-2份，酵母粉0.15-1份；
所述调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜2-4份，胡萝卜浓缩汁1.2-2份，水蜜桃浓缩汁2.5-4份，菠萝浓缩汁3-5份；
所述被发酵底物经植物乳杆菌SF-L-28发酵后与调味料混合调味制得植物乳杆菌SF-L-28植物饮品，所述植物乳杆菌SF-L-28已于2020年10月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.20926；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum。
2.如权利要求1所述的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品，其特征在于，所述被发酵底物包括如下重量份的组分：
净化水60份，茯苓提取物1.5份，玫瑰花提取物4份，山楂提取物1.5份，百合提取物0.5份，橘皮提取物4份，栀子提取物3份，菊花提取物5份，决明子提取物0.5份，葛根提取物0.5份，红枣粉1.65份，薏仁粉1.65份，黑木耳粉1.65份，山药粉1.7份，酵母粉0.15份。
3.如权利要求1所述的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品，其特征在于，所述调味料包括如下重量份的组分：
蜂蜜4份，胡萝卜浓缩汁1.2份，水蜜桃浓缩汁2.5份，菠萝浓缩汁5份。
4.如权利要求1所述的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品，其特征在于，所述植物乳杆菌SF-L-28植物饮品为褐色液体。
5.如权利要求1所述的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品，其特征在于，所述植物乳杆菌SF-L-28植物饮品中含有植物乳杆菌SF-L-28的数量为10-30亿/mL。
6.一种如权利要求1所述的植物乳杆菌SF-L-28植物饮品的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌，冷却后得到灭菌液；
（3）将植物乳杆菌SF-L-28接种到MRS液体培养基中，37℃下培养得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，37℃下培养得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得植物乳杆菌SF-L-28植物饮品。
7.如权利要求6所述的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：
（1）首先将被发酵底物的各组分混合，得到混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中，120℃高压灭菌30min，然后冷却至30-40℃，得到灭菌液；
（3）将植物乳杆菌SF-L-28接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，37℃下培养18-30h得到接种剂；
（4）将接种剂接种于灭菌液中，接种量为1%，37℃下培养20-48h，得到发酵液；
（5）将发酵液输送至高压喷雾破壁机中，压力设置20-60MPa，进行破壁处理，得到破壁发酵液；
（6）破壁发酵液与调味料混合调味后，进行巴氏灭菌，得植物乳杆菌SF-L-28植物饮品。
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