CN113614074A

CN113614074A - 用于治疗炎性疾病的氨基酸衍生物

Info

Publication number: CN113614074A
Application number: CN202080021880.4A
Authority: CN
Inventors: C.金; D.帕里斯; M.穆兰
Original assignee: Roskamp Institute
Current assignee: Roskamp Institute
Priority date: 2019-01-22
Filing date: 2020-01-22
Publication date: 2021-11-05
Also published as: US20220081415A1; MX2021008748A; ECSP21062210A; EP3924349A2; BR112021014372A2; WO2020154420A3; WO2020154420A2; CL2021001944A1; SG11202107977TA; IL284980A; AU2020211980A1; CA3127246A1; CO2021010931A2; JP2022524571A; WO2020154420A4; KR20210141930A; ZA202105229B; MA54940A

Abstract

本公开内容提供了抑制NF‑κB活化并因此可用于治疗炎性疾病的某些氨基酸衍生物。还提供了含有此类化合物的药物组合物和制备此类化合物的方法。

Description

用于治疗炎性疾病的氨基酸衍生物

技术领域

本公开内容提供了抑制由炎症刺激诱导的核因子-κB(NF-κB)活化的某些氨基酸衍生物。因此，本公开内容的化合物可用于治疗炎性疾病，诸如类风湿性关节炎、多发性硬化症、哮喘、和炎症性肠病。还提供了含有此类化合物的药物组合物及其制备方法。

背景技术

炎症是宿主对感染或损伤的重要反应。然而，这种反应的失调，产生持续或不适当的炎症，导致广泛的病理过程。炎性疾病包括自身免疫性疾病、过敏、哮喘、慢性阻塞性肺病和脓毒症，它们是疾病和死亡的主要原因。也越来越明显的是，低级慢性炎症是许多疾病(包括糖尿病、癌症、心血管疾病和神经退行性疾病)的基础。因此，确定抑制炎症的新药是一个非常令人感兴趣的领域。

NF-κB是一种广泛表达的转录因子，其调节参与炎症和疼痛的基因的表达。NF-κB的活化通过其诱导促炎基因转录的能力在炎症中起核心作用(参见Tak等人NF-κB:a keyrole in inflammatory diseases.J Clin Inv 2001；107:7-11；和Liu等人NF-κBsignaling in inflammation.Signal Transduct Target Ther.2017；2.pii:17023)。促炎细胞因子(诸如TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8)的合成由NF-κB介导，环氧合酶2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、粘附分子(ICAM-1、E-选择素和VCAM-1)、趋化因子(MCP-1、KC、MIP-1)和金属蛋白酶的表达也是如此。相反地，细胞因子(诸如TNF-α和IL-1β或由COX-2产生的前列腺素)触发NF-κB活化，从而产生炎症级联反应。

NF-κB在多种疾病(包括类风湿性关节炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化症、哮喘、炎症性肠病、糖尿病、帕金森病、阿尔茨海默病、肌萎缩侧索硬化症、骨质疏松症、系统性红斑狼疮、慢性阻塞性肺疾病、中风、急性肾损伤、肾小球肾炎、银屑病、特应性皮炎等)的炎症部位被活化(Pai等人Immune deficiency or hyperactivity-Nf-kappabilluminates autoimmunity.J Autoimmun 2008；31:245–251；Zhang等人NFkB ininflammation and renal diseases.Cell Biosci 2015；5:63；Roman-Blas等人NF-κB asa potential therapeutic target in osteoarthritis and rheumatoidarthritis.OsteoArthritis and Cartilage 2006；14:839-848)。

皮质类固醇已被开发用于治疗炎症性病症，并且具有许多可能是轻度或严重的副作用，特别是当皮质类固醇长期使用时。例如，皮质类固醇可导致体重增加、水肿、高血压、青光眼、低钾血症、白内障、精神障碍、骨质疏松症、和免疫系统减弱。非甾体抗炎药(NSAID)通过抑制环氧合酶(COX)同工酶发挥作用，其在开具处方时广泛使用，但长期使用NSAID与常见副作用有关，包括心血管事件(高血压、心肌梗塞、中风和心力衰竭)，胃肠道副作用(弥漫性胃炎以及胃和十二指肠溃疡)，其可能是致命的，肾脏副作用(间质性肾炎)以及肝脏不良反应(转氨酶，肝炎)。已开发靶向炎症性细胞因子的生物制剂。虽然生物制剂已被证明可以改善炎性疾病的病理和进展，但由于重度不良反应以及它们消除宿主对感染的防御，它们的使用受到限制(Rider等人Biologics for Targeting Inflammatory Cytokines,Clinical Uses,and Limitations.Int J Cell Biol.2016；2016:9259646)。

因此，需要开发其他具有较少副作用的长期使用的抗炎药物。本发明满足了这种和相关的需要。

发明内容

一方面，提供了式(I)化合物：

其中：

n为0、1、2或3；

虚线是任选的键；

Het是杂芳基，其任选取代有R^a、R^b和/或R^c，它们独立地选自烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、羟基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、和烷氧基羰基；

R¹是氢或烷基；

R²是氢或烷基；

R³是氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、羟烷基、烷氧基烷基、硫代烷基、烷基硫代烷基、氨基烷基、酰基氨基烷基、羧烷基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、或杂芳烷基，其中芳基或杂芳基本身作为芳烷基或杂芳烷基的一部分任选取代有R^d、R^e和/或R^f，它们独立地选自烷基、烷氧基、羟基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、羧基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、和二烷基氨基；

R⁴是氢或烷基；以及

R⁵是-C(O)R⁶，其中R⁶是烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、或杂环烷基烷基，其中芳基或杂芳基本身或作为芳烷基或杂芳烷基的一部分任选取代有R^g、R^h和/或Rⁱ，它们独立地选自烷基、烷氧基、氨基烷氧基、羟基烷氧基、烷氧基烷氧基、环烷氧基、环烷基烷氧基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷氧基、任选取代的杂环烷氧基、任选取代的杂环烷基烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、羟基、羧基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰基氨基和磺酰氨基；或

R⁴和R⁵与它们所连接的氮原子一起形成5至7元杂环氨基环；或

其药学上可接受的盐。

第二方面，本公开内容涉及一种药物组合物，包含式(I)化合物(或本文所述的其任何实施方案)或其药学上可接受的盐；和药学上可接受的赋形剂。

第三方面，本公开内容涉及一种治疗可通过抑制NF-κB活化治疗的疾病的方法，包括向有需要的患者给药治疗有效量的在药物组合物中的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，该药物组合物包含式(I)化合物(或本文所述的其任何实施方案)和药学上可接受的赋形剂。在一个实施方案中，该疾病是炎性疾病，包括自身免疫性疾病、疼痛、过敏、哮喘、慢性阻塞性肺病和脓毒症。在另一个实施方案中，该疾病是类风湿性关节炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化症、哮喘、炎症性肠病、糖尿病、帕金森病、阿尔茨海默病、肌萎缩侧索硬化症、骨质疏松症、系统性红斑狼疮、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、中风、急性肾损伤、肾小球肾炎、银屑病、特应性皮炎、白塞病(Behcet’s disease)、肺结核、克罗恩病(Crohn’sdisease)、结肠炎、Pagett病、胰腺炎、牙周炎(periodonitis)、炎症性肺病、和狼疮性肾炎。

第四方面，本公开内容涉及式(I)化合物(或本文所述的其任何实施方案)或其药学上可接受的盐用作药物。在一个实施方案中，式(I)化合物(及本文所述的其任何实施方案)或其药学上可接受的盐用于治疗炎性疾病，包括自身免疫性疾病、疼痛、过敏、哮喘、慢性阻塞性肺病和脓毒症。在另一个实施方案中，该疾病是类风湿性关节炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化症、哮喘、炎症性肠病、糖尿病、帕金森病、阿尔茨海默病、肌萎缩侧索硬化症、骨质疏松症、系统性红斑狼疮、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、中风、急性肾损伤、肾小球肾炎、银屑病、特应性皮炎、白塞病、肺结核、克罗恩病、结肠炎、Pagett病、胰腺炎、牙周炎、炎症性肺病、和狼疮性肾炎。

第五方面，提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐(和本文公开的其任何实施方案)用于治疗患者的疾病，其中NF-κB活化有助于该疾病的病理和/或症状。在一个实施方案中，该疾病是炎性疾病，包括自身免疫性疾病、疼痛、过敏、哮喘、慢性阻塞性肺病和脓毒症。在另一个实施方案中，该疾病是类风湿性关节炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化症、哮喘、炎症性肠病、糖尿病、帕金森病、阿尔茨海默病、肌萎缩侧索硬化症、骨质疏松症、系统性红斑狼疮、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、中风、急性肾损伤、肾小球肾炎、银屑病、特应性皮炎、白塞病、肺结核、克罗恩病、结肠炎、Pagett病、胰腺炎、牙周炎、炎症性肺病、和狼疮性肾炎。

第六方面，提供了式(II)中间体：

其中虚线、n、Het、R¹、R²和R³如上式(I)(包括本文公开的其实施方案)所限定。一方面，该中间体具有结构(IIB)：

其中n、Het、R¹、R²和R³如式(I)(包括本文公开的其实施方案)所限定。另一方面，该中间体具有结构(IIB’)：

其中R¹、R²和R³如式(I)(包括本文公开的其实施方案)所限定并且吡啶基任选取代有R^a、R^b和/或R^c。

第七方面，提供了制备式(IB)化合物的方法：

其中，n、Het、R¹、R²和R³如上所限定，R⁴是氢或烷基并且R⁵是-COR⁶，其中R⁶如上所限定，该方法包括：

使式(IIB)化合物：

其中虚线、n、Het、R¹、R²和R³如上所限定；

(i)与式R⁶COLG化合物在酰化反应条件下反应，其中R⁶如上式(I)所限定并且LG是离去基团；或

(ii)与式R⁶COOH化合物在氨基酸偶联反应条件下反应；

(iii)任选地将从步骤(i)或(ii)获得的式(IB)化合物转化为酸加成盐；或

(iv)任选地将从步骤(i)或(ii)获得的式(IB)化合物转化为游离碱。

具体实施方式

定义：

除非另有说明，否则说明书和权利要求中使用的以下术语是用于本申请的目的而定义的，并具有以下含义：

“烷基”是指一至六个碳原子的直链饱和单价烃基或者三至六个碳原子的支链饱和单价烃基，例如，甲基、乙基、丙基、2-丙基、丁基、戊基等。

“亚烷基”是指一至六个碳原子的直链饱和二价烃基或者三至六个碳原子的支链饱和二价烃基，除非另有说明，例如，亚甲基、亚乙基、亚丙基、1-甲基亚丙基、2-甲基亚丙基、亚丁基、亚戊基等。

“烷硫基”是指-SR基团，其中R是如上定义的烷基，例如，甲硫基、乙硫基等。

“烷基磺酰基”是指-SO₂R基团，其中R是如上定义的烷基，例如，甲基磺酰基、乙基磺酰基等。

“氨基”是指-NH₂。

“烷基氨基”是指-NHR基团，其中R是如上定义的烷基，例如，甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、或2-丙基氨基等。

“氨基烷基”是指取代有-NR’R”的一至六个碳原子的直链单价烃基或者三至六个碳的支链单价烃基”，其中R’和R”独立地是如上定义的氢或烷基，例如，氨基甲基、氨基乙基、甲基氨基甲基等。

“烷氧基”是指-OR基团，其中R是如上定义的烷基，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、或2-丙氧基、正丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基等。

“烷氧基烷基”是指取代有至少一个烷氧基(诸如一个或两个如上定义的烷氧基)的具有一至六个碳原子的直链单价烃基团或者具有三至六个碳原子的支链单价烃基团，例如，2-甲氧基乙基，1-、2-或3-甲氧基丙基，2-乙氧基乙基等。

“烷氧基烷氧基”是指-(O)R基团，其中R是如上定义的烷氧基烷基，例如,甲氧基乙氧基、乙氧基乙氧基等。

“氨基烷氧基”是指-O-亚烷基-R基团，其中R是-NR’R”，其中R’和R”独立地是如上定义的氢或烷基，例如，氨基乙氧基、甲基氨基乙氧基、二甲基氨基乙氧基、二乙基氨基乙氧基等。

“硫代烷基”是指取代有-SH基团的一至六个碳原子的直链单价烃基或三至六个碳的支链单价烃基，例如，硫代乙基，1-、2-或3-硫代丙基等。

“烷基硫代烷基”是指取代有如上定义的烷硫基的具有一至六个碳原子的直链单价烃基或者三至六个碳的支链单价烃基，例如，2-甲基硫代乙基，1-、2-或3-乙基硫代丙基等。

“烷氧基羰基”是指-C(O)OR基团，其中R是如上定义的烷基，例如，甲氧基羰基、乙氧基羰基等。

“烷氧基羰基烷基”是指取代有如上定义的烷氧基羰基的具有一至六个碳原子的直链单价烃基或者具有三至六个碳原子的支链单价烃基，例如，2-甲基羧乙基，甲基羧甲基，1-、2-或3-乙基羧丙基等。

“酰基”是指-C(O)R基团，其中R是如上定义的烷基，例如，甲基羰基、乙基羰基等。

“酰氨基”是指-NHC(O)R基团，其中R是如上定义的烷基，例如，甲基羰基氨基、乙基羰基氨基等，或R可以任选取代有一个、两个或三个取代基，其独立地选自如本文公开的取代基，例如烷基、羟基、环烷基、杂环烷基、羧基、烷氧基羰基、羟基、烷氧基、烷硫基、烷基磺酰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、和氰基。

“酰氨基烷基”是指取代有如上定义的酰氨基的具有一至六个碳原子的直链单价烃基或者具有三至六个碳的支链单价烃基，例如，2-乙酰氨基乙基，1-、2-或3-乙酰氨基丙基等。

“氨基羰基烷基”是指取代有-CONRR’基团的一至六个碳原子的直链单价烃基或者三至六个碳的支链单价烃基，其中R是氢或烷基并且R’是氢、烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基，或者R和R’与它们所连接的氮原子一起形成杂环氨基，例如，氨基羰基乙基，甲基氨基羰基乙基，甲基氨基羰基甲基，1-、2-或3-乙基氨基羰基丙基，吡咯烷基甲基，哌啶基乙基等。

“芳基”是指具有6至10个环原子的单环或双环芳烃基团，例如，苯基或萘基。

“芳烷基”是指-(亚烷基)-R基团，其中R是如上定义的芳基，例如，苄基、苯乙基等。

“环烷基”是指三至十个碳原子的环状饱和单价烃基，例如，环丙基、环丁基、环戊基、或环己基等。

“环烷氧基”是指-O-R，其中R是如上定义的环烷基，例如，环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基等。

“环烷基烷基”是指-(亚烷基)-R基团，其中R是如上定义的环烷基，例如，环丙基甲基、环己基甲基等。

“环烷基烷氧基”是指如上定义的-O-环烷基烷基，例如，环丙基甲氧基，2-环丙基乙氧基，1-、2-、3-环丁基丙氧基等。

“羧基”是指-COOH。

“羧烷基”是指取代有如上定义的羧基的具有一至六个碳原子的直链单价烃基或者具有三至六个碳的支链单价烃基，例如，2-羧乙基，1-、2-或3-羧丙基等。

“二烷基氨基”是指-NRR’基团，其中R和R’是如上定义的烷基，例如，二甲基氨基、甲基乙基氨基等。

“卤素”是指氟、氯、溴、或碘，优选为氟或氯。

“卤代烷基”是指取代有一个或多个卤素原子(诸如一至五个卤素原子，诸如氟或氯)的如上定义的烷基基团，包括取代有不同卤素的那些，例如，-CH₂Cl、-CF₃、-CHF₂、-CH₂CF₃、-CF₂CF₃、-CF(CH₃)₂等。当烷基仅取代有氟时，在本申请中可称其为氟代烷基。

“卤代烷氧基”是指-OR基团，其中R是如上定义的卤代烷基，例如，-OCF₃、-OCHF₂等。当R是其中烷基仅取代有氟的卤代烷基时，在本申请中可称为氟代烷氧基。

“羟烷基”是指取代有一个或两个羟基的一至六个碳原子的直链烃基或者三至六个碳原子的支链单价烃基，前提是如果存在两个羟基，它们不在同一个碳原子上。代表性实例包括但不限于羟甲基、2-羟基-乙基、2-羟丙基、3-羟丙基、1-(羟甲基)-2-甲基丙基、2-羟丁基、3-羟丁基、4-羟丁基、2,3-二羟丙基、1-(羟甲基)-2-羟乙基、2,3-二羟丁基、3,4-二羟丁基和2-(羟甲基)-3-羟丙基，优选为2-羟乙基、2,3-二羟丙基、和1-(羟甲基)-2-羟乙基。

“羟基烷氧基”是指-O-R基团，其中R是如上定义的羟烷基，例如，羟基甲氧基，2-羟基乙氧基，1-、2-、3-羟基丙氧基等。

“杂环烷基”或“杂环基”是指具有4至8个环原子的饱和或不饱和单价单环基团，其中一个、两个或三个环原子是选自N、O或S(O)_n的杂原子，其中n为0至2的整数，其余环原子为C。此外，杂环基环中的一个或两个环碳原子可以任选地被-CO-基团替代并且杂环烷基任选与苯基或如上定义的者5-或6-元杂芳基稠合。更具体地，术语杂环基包括但不限于吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代哌啶烷基、吗啉基、哌嗪基、四氢吡喃基、硫代吗啉基等。当杂环基环不饱和时，它可以含有一个或两个环双键，前提是该环不是芳族的。当杂环基基团含有至少一个氮原子时，它在本文中也称为杂环氨基并且是杂环基基团的一个子集。除非另有说明，否则杂环烷基环任选取代有一个、两个或三个取代基，其独立地选自烷基、羟基、烷氧基、氨基、烷基氨基、和二烷基氨基。

“杂环烷基烷基”是指-(亚烷基)-R基团，其中R是如上定义的杂环烷基环，例如，四氢呋喃基甲基、哌嗪基甲基、吗啉基乙基等。

“杂环氨基”是指具有4至8个环原子的饱和或不饱和单价单环基团，其中一个或两个环原子是选自N、O或S(O)_n的杂原子，其中n为0至2的整数，除非另有说明，其余环原子为C，前提是至少一个环原子为N。此外，杂环氨基环中的一个或两个环碳原子可以任选取代有-CO-基团。杂环氨基任选与苯基或如上定义的5-或6-元杂芳基稠合。更具体地，术语杂环基包括但不限于吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代哌啶烷基、吗啉基、哌嗪基、硫代吗啉基等。除非另有说明，否则杂环氨基环可以任选取代有一个、两个或三个取代基，其独立地选自烷基、卤素、羟基、烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羟烷基、烷氧基烷基、或氨基烷基，其各自如本文所定义。

“杂芳基”是指具有5至10个环原子的单价单环或双环芳族基团，除非另有说明，其中一个或多个(在一个实施方案中，一个、两个或三个)环原子是选自N、O、或S的杂原子，其余的环原子是碳。代表性实例包括但不限于吡咯基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、呋喃基、吲哚基、异吲哚基、噁唑基、异噁唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹啉基、异喹啉基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基、四唑基等。如本文所定义，术语“杂芳基”和“芳基”是相互排斥的。当杂芳环含有5-或6个环原子时，它在本文中也称为5-或6-元杂芳基。

“杂芳烷基”是指-(亚烷基)-R基团，其中R是如上定义的杂芳基，例如，吡啶基甲基等。当杂芳烷基中的杂芳环含有5-或6个环原子时，它在本文中也称为5-或6-元杂芳烷基。

“患者”是指哺乳动物，优选为人。

本公开内容还包括本公开内容的化合物(I)的受保护衍生物。例如，当本公开内容的化合物含有诸如羟基、羧基、硫醇或含有氮原子的任何基团时，这些基团可以受合适的保护基团保护。合适的保护基团的完整列表可见于T.W.Greene,Protective Groups inOrganic Synthesis,John Wiley&Sons,Inc.(1999)，其公开内容通过引用以其全文并入本文。本公开内容的化合物的受保护衍生物可以通过本领域公知的方法制备。

本公开内容还包括本公开内容的化合物的多晶型和氘代形式或其药学上可接受的盐。

化合物的“药学上可接受的盐”是指药学上可接受的并且具有母体化合物的期望药理学活性的盐。此类盐包括：

酸加成盐，与无机酸(诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等)形成；或与有机酸(诸如甲酸、乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、葡庚糖酸、4,4'-亚甲基双-(3-羟基-2-烯-1-羧酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等)形成；或

当母体化合物中的酸质子被金属离子(例如，碱金属离子、碱土金属离子或铝离子)取代时形成的盐；或与有机碱(诸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨基丁三醇、N-甲基葡糖胺等)配位。应当理解，药学上可接受的盐是无毒的。关于合适的药学上可接受的盐的其他信息可见于Remington’s Pharmaceutical Sciences,17th ed.,Mack PublishingCompany,Easton,PA,1985，其通过引用以其全文并入本文。

本公开内容的化合物可以具有不对称中心。含有不对称取代原子的本公开化合物可以以旋光形式或外消旋形式分离。本领域公知如何制备旋光形式，诸如通过材料解析。所有手性、非对映异构体、所有手性或非对映异构形式的混合物、以及外消旋形式均在本公开内容的范围内，除非具体指出具体的立体化学或异构形式。本领域普通技术人员还将理解，当化合物被表示为(R)或(S)立体异构体时，它可能含有相应的(S)或(R)立体异构体作为杂质，优选非期望的对映异构体以小于约10％、优选5％w/w存在。约为初始值的+或–10％。

本公开内容的某些化合物可以以互变异构体和/或几何异构体存在。所有可能的互变异构体以及顺式和反式异构体，作为其单独形式和混合物均在本公开内容的范围内。此外，如本文所用，术语烷基包括所述烷基基团的所有可能的异构形式，尽管仅列出了几个实例。类似地，当环状基团(诸如芳基、杂芳基、杂环基等)被取代时，它们包括所有位置异构体，尽管仅列出了几个实例。此外，本公开内容的化合物的所有水合物均在本公开内容的范围内。

“氧代”或“羰基”是指＝(O)基团。

“任选取代的烷基”是指任选取代有一个、两个或三个取代基的如上定义的烷基，该取代基独立地选自，例如，烷基、羟基、环烷基、杂环烷基、羧基、烷氧基羰基、羟基、烷氧基、烷硫基、烷基磺酰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、和氰基。

“任选取代的芳基”是指任选取代有一个、两个或三个取代基的如上定义的芳基，该取代基独立地选自烷基、羟基、环烷基、羧基、烷氧基羰基、羟基、烷氧基、烷硫基、烷基磺酰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、和氰基。

“任选取代的芳氧基”是指-O-亚烷基-R基团，其中R是如上定义的任选取代的芳基，例如，苄氧基、甲氧基苄氧基、卤代苄氧基、2-苯乙氧基等。

“任选取代的芳烷基”是指-亚烷基-R，其中R是任选取代的芳基，其各自如上所定义。“任选取代的芳烷氧基”是指-O-亚烷基-R基团，其中R是如上定义的任选取代的芳基，例如，苄氧基、甲氧基苄氧基、卤代苄氧基、2-苯乙氧基等。

“任选取代的杂芳基”是指任选取代有一个、两个或三个取代基的如上定义的杂芳基，该取代基独立地选自烷基、烷硫基、烷基磺酰基、羟基、环烷基、羧基、烷氧基羰基、羟基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、和氰基。

“任选取代的杂芳氧基”是指-O-R基团，其中R是如上定义的任选取代的杂芳基，例如，吡啶氧基、呋喃氧基、噻吩氧基等。

“任选取代的杂芳烷氧基”是指-O-亚烷基-R基团，其中R是如上定义的任选取代的杂芳基。

“任选取代的杂环烷基”是指任选取代有一个、两个或三个取代基的如上定义的杂环烷基，该取代基独立地选自烷基、烷硫基、烷基磺酰基、羟基、环烷基、羧基、烷氧基羰基、羟基、羟烷基、烷氧基、烷氧基烷基、氨基烷基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、和氰基。

“任选取代的杂环烷基烷基”是指-亚烷基-R基团，其中R是如上定义的任选取代的杂环烷基，例如，哌啶基甲基、吡咯烷基乙基、哌嗪-1-基乙基等。

“任选取代的杂环烷氧基”是指-O-R基团，其中R是如上定义的任选取代的杂环烷基，例如，哌啶氧基、吡咯烷氧基、四氢呋喃氧基等。

“任选取代的杂环烷基烷氧基”是指-O-亚烷基-R基团，其中R是如上定义的任选取代的杂环烷基，例如，哌啶基甲氧基、吡咯烷基乙氧基、哌嗪-1-基乙氧基等。

“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可能发生，但不是必须发生，该描述包括事件或情况发生的实例和不发生的实例。例如，“任选取代有烷基的杂环基”是指烷基可以存在，但不是必须存在，并且描述包括其中杂环基基团取代有烷基基团的情况以及其中杂环基基团未取代有烷基的情况。

“药学上可接受的载体或赋形剂”是指可用于制备通常安全、无毒且在生物学或其他方面均无不良反应的药物组合物的载体或赋形剂，并且包括可用于兽医用途以及人用药物用途的载体或赋形剂。说明书和权利要求中使用的“药学上可接受的载体/赋形剂”包括一种和多于一种此类赋形剂。

“磺酰氨基”是指-NRSO₂R’基团，其中R是氢或烷基并且R’是烷基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂芳基、或任选取代的杂芳烷基，其各自如上定义。

疾病的“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”包括：

(1)预防疾病，即，使可能暴露于或易患疾病但尚未出现或表现出疾病症状的哺乳动物不发展疾病的临床症状；

(2)抑制疾病，即，阻止或减少疾病或其临床症状的发展；或

(3)缓解疾病，即，使疾病或其临床症状消退。

“治疗有效量”是指本公开内容的化合物和/或其药学上可接受的盐当向患者给药以治疗疾病时，足以产生疾病的此类治疗的量。“治疗有效量”将根据化合物、疾病及其严重程度以及待治疗的哺乳动物的年龄、体重等而变化。

实施方案：

实施方案1：

在实施方案1中，式(I)化合物如以上发明内容中所限定。

实施方案2：

在实施方案2中，式(I)化合物具有结构(IA)：

其中Het、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵和n如发明内容中所限定。

实施方案3：

在实施方案3中，式(I)化合物具有结构(IB)：

其中Het、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵和n如发明内容中所限定。

实施方案4：

在实施方案4中，实施方案1、2和3中任一项的化合物是其中n为1、2或3的那些化合物。

实施方案5：

在实施方案5中，实施方案1、2、3和4中任一项的化合物是其中n为1的那些化合物。

实施方案6：

在实施方案6中，实施方案1、2和3中任一项的化合物是其中n为0或2的那些化合物。在实施方案6的一个子实施方案中，实施方案1、2和3中任一项的化合物是其中n为0的那些化合物。在实施方案6的第二子实施方案中，实施方案1、2和3中任一项的化合物是其中n为2的那些化合物。

实施方案7：

在实施方案7中，实施方案1至6和其中包含的子实施方案中任一项的化合物是其中R⁴是氢或烷基并且R⁵是-C(O)R⁶的那些化合物，其中R⁶是烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、或杂环烷基烷基，其中芳基或杂芳基本身或作为芳烷基或杂芳烷基的一部分任选取代有R^g、R^h和/或Rⁱ，他们独立地选自烷基、烷氧基、氨基烷氧基、羟基烷氧基、烷氧基烷氧基、环烷氧基、环烷基烷氧基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷氧基、任选取代的杂环烷氧基、任选取代的杂环烷基烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、羟基、羧基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰基氨基、和磺酰氨基。在实施方案7的一个子实施方案中，实施方案1至6中任一项的化合物是其中R⁶是任选取代有如上(此处所用的如上是指实施方案7)所限定的R^g、R^h和/或Rⁱ的芳基或杂芳基(例如，噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、或吲唑基)的那些化合物。在实施方案7的第二子实施方案中，实施方案1至6中任一项的化合物是其中R⁶是任选取代有如上所限定的R^g、R^h和/或Rⁱ的芳烷基或杂芳烷基的那些化合物。在实施方案7的第三子实施方案中，实施方案1至6中任一项的化合物是其中R⁶是任选取代有如上所限定的R^g、R^h和/或Rⁱ的苯基的那些化合物。在实施方案7的第四子实施方案中，实施方案1至6中任一项的化合物是其中R⁶是任选取代有如上所限定的R^g、R^h和/或Rⁱ的杂芳基(例如，噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、或吲唑基)的那些化合物。在实施方案7的第五实施方案中，实施方案1至6中任一项的化合物以及实施方案7中的子实施方案一至四内的化合物，是其中R^g是烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、或氰基并且R^h和Rⁱ独立地选自以下项的那些化合物：烷基、烷氧基、氨基烷氧基、羟基烷氧基、烷氧基烷氧基、环烷氧基、环烷基烷氧基、任选取代的芳烷氧基，任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂环烷氧基、任选取代的杂环烷基烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、羟基、羧基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰基氨基、和磺酰氨基。在实施方案7的第六子实施方案中，实施方案1至6中任一项的化合物以及实施方案7中的第一至第五子实施方案中的化合物，是其中R^g、R^h和/或Rⁱ独立地选自以下项的那些化合物：烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、羟基、氨基、酰氨基，优选为甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氯、氟、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基、乙酰氨基、丁酰氨基、和戊酰氨基。

实施方案8：

在实施方案8中，实施方案1至6和其中包含的子实施方案中任一项的化合物，是其中R⁴和R⁵与它们所连接的氮原子一起形成5至7元杂环氨基环的那些化合物。在实施方案8的一个子实施方案中，杂环氨基环是吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代哌啶基、吗啉基、哌嗪基、硫代吗啉基、异吲哚啉基、或1,3-二氧代异吲哚啉-2-基，其任选取代有一个、两个或三个取代基，该取代基独立地选自烷基、羟基、烷氧基、羟烷基、烷氧基烷基、和氨基烷基。

实施方案9：

在实施方案9中，实施方案1至8和其中包含的子实施方案中任一项的化合物是其中R¹和R²独立地是氢或甲基，优选为氢的那些化合物。

实施方案10：

在实施方案10中，实施方案1至9和其中包含的子实施方案中任一项的化合物是其中当R¹和R²均为烷基时，它们不与同一环碳键合的那些化合物。

实施方案11：

在实施方案11中，实施方案1至10和其中包含的子实施方案中任一项的化合物，是其中Het是以下项的那些化合物：吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、喹啉基、异喹啉基、吡唑基、或吲哚基，每个环任选取代有R^a、R^b和/或R^c，它们独立地选自烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、羟基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、和烷氧基羰基；优选R^a、R^b和/或R^c独立地选自甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氯、氟、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、氨基、甲基氨基、和二甲基氨基。在一个子实施方案中，Het是吡啶-2-基。

实施方案12：

在实施方案12中，实施方案1至11和其中包含的子实施方案中任一项的化合物是其中R³是以下项的那些化合物：氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、羟烷基、烷氧基烷基、硫代烷基、烷基硫代烷基、氨基烷基、酰基氨基烷基、羧烷基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、或杂芳烷基，其中芳基或杂芳基本身或在芳烷基和杂芳烷基中的芳基或杂芳基任选取代有R^d、R^e和/或R^f，它们独立地选自烷基、烷氧基、羟基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、羧基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、或二烷基氨基。在实施方案12的一个子实施方案中，实施方案1至11中任一项的化合物是其中R³是氢或烷基，优选为甲基、乙基、丙基、异丙基、仲丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基的那些化合物。

在实施方案12的第二子实施方案中，实施方案1至11中任一项的化合物是其中R³是任选取代有如上定义的R^d、R^e和/或R^f的芳烷基，优选地R³是苄基或苯乙基，更优选地任选取代有如上定义的R^d、R^e和/或R^f的苄基，甚至更优选为苄基的那些化合物。

在实施方案12的第三子实施方案中，实施方案1至11中任一项的化合物是其中R³是任选取代有如上定义的R^d、R^e和/或R^f的环烷基烷基，优选为任选取代有如上定义的R^d、R^e和R^f的环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、或环己基甲基的那些化合物。

在实施方案12的第四子实施方案中，实施方案1至11中任一项的化合物是其中R³是任选取代有如上定义的R^d、R^e和/或R^f的杂芳烷基(例如，噻吩基甲基、呋喃基甲基、吡啶基甲基、喹啉基甲基、异喹啉基甲基、吲哚基甲基、或吲唑基甲基)的那些化合物。

在实施方案12的第五子实施方案中，实施方案1至11中任一项的化合物是其中R³是羟烷基、烷氧基烷基、或氨基烷基，优选为羟甲基、羟乙基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、氨基甲基、或氨基丁基的那些化合物。

在一个实施方案中，R³所连接的碳的立体化学为(S)。

在另一个实施方案中，R³所连接的碳的立体化学为(R)。

其中R¹和R²是H，n为1并且其他基团如下表1所示的代表性式(I)化合物是：

表1

下表2中提供了另外考虑的式(I)化合物：

表2

一般合成方案

本公开内容的化合物可以通过如下所示的反应方案中描述的方法制备。

用于制备这些化合物的起始材料和试剂可从商业供应商诸如Aldrich ChemicalCo.,(Milwaukee,Wis.)、Bachem(Torrance,Calif.)或Sigma(St.Louis,Mo.)获得，或者通过本领域技术人员已知的方法按照参考文献(诸如Fieser and Fieser’s Reagents forOrganic Synthesis,Volumes 1-17(John Wiley and Sons,1991)；Rodd’s Chemistry ofCarbon Compounds,Volumes 1-5 and Supplementals(Elsevier Science Publishers,1989)；Organic Reactions,Volumes 1-40(John Wiley and Sons,1991),March’sAdvanced Organic Chemistry,(John Wiley and Sons,4th Edition)and Larock’sComprehensive Organic Transformations(VCH Publishers Inc.,1989))中所述的步骤制备。这些方案仅是对可以合成本公开内容的化合物的一些方法的说明，并且可以对这些方案进行各种修改并将向阅读本公开内容的本领域技术人员提出建议。如有需要，可以使用常规技术(包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱等)分离和纯化起始材料和中间体以及反应的最终产物。这种材料可以使用常规手段(包括物理常数和光谱数据)进行表征。除非另有说明，本文所述的反应在大气压下在约-78℃至约150℃，诸如约0℃至约125℃的温度范围内发生，并且进一步诸如在约室温(或环境温度)例如约20℃下发生。

式(IA)和(IB)化合物，其中R¹、R²、R³、Het如发明内容中所限定，R⁴是氢或烷基并且R⁵是-COR⁶，其中R⁶如发明内容中所限定，可以如以下方案1所述制备。

方案1

用肼水溶液处理化合物(I')，其中R⁴和R⁵与氮原子一起形成邻苯二甲酰亚胺环，如以下方案2中所述制备，提供式1的氨基化合物。该反应可以在醇类溶剂(诸如甲醇、乙醇或异丙醇等)中进行。

在室温下，在有机溶剂(诸如二氯甲烷、氯仿等)中，在偶联剂(诸如HOBt、EDC等)和非亲核碱(诸如三乙胺、二异丙胺、i-Pr₂Net等)存在下，将式1化合物与式2的酸偶联，其中R⁶如发明内容中所限定，提供化合物(I”)。

可选地，式(I)化合物可以通过式1化合物与式R⁶CO(LG)的乙酰基在酰化反应条件下反应制备，其中LG是卤素，优选为氯。

式2化合物可商购获得或者它们可以通过本领域公知的方法从容易获得的起始材料制备。例如，苯甲酸，邻、间和对硝基苯甲酸，苯乙酸，三氟苯甲酸，吡啶甲酸，烟酸，甲氧基苯甲酸，氟苯甲酸，氯苯甲酸，羟基苯甲酸，3-氟-5-甲氧基苯甲酸，3-氨基苯甲酸，乙酸，丙酸，环丙烷甲酸，环戊烷甲酸可商购获得。式2化合物也可以由市售化合物制备。例如，式2化合物(其中R⁶是取代有羟基的芳基、芳烷基、杂芳基、或杂芳烷基)可以与任选取代的芳烷基卤化物、任选取代的杂环烷基卤化物、和任选取代的杂环烷基烷基卤化物在烷基化反应条件下反应得到相应的式2化合物，其中R⁶分别任选取代有任选取代的芳烷氧基、任选取代的杂环烷氧基、任选取代的杂环烷基烷氧基。类似地，式2化合物(其中R⁶取代有氨基)可以与酰卤或磺酰卤化物在酰化和磺酰化反应条件下反应，得到相应的式2化合物，其中R⁶分别取代有酰氨基或磺酰氨基。

可选地，上述转化还可以对式(I”)或(I”')的化合物进行，其中R⁶是取代有羟基或氨基的芳基、芳烷基、杂芳基、或杂芳烷基。

式(IA)和(IB)的化合物，其中虚线、R¹、R²、R³、Het如发明内容中所限定，并且R⁴和R⁵与它们所连接的氮原子一起形成邻苯二甲酰亚胺环，可以如以下方案2所述制备。

方案2

式4化合物(其中R³如发明内容中所限定)可以通过在升高的温度下在碱性条件(参见J.C.Sheehan，D.W.Chapman和R.W.Roth，J.Am.Chem.Soc.,74,3822(1952))或酸性条件(参见R.Mahboub,int.J.Chem.Sci,7(1),2009,28-36)下使式3化合物与邻苯二甲酸酐反应进行制备。当使用碱性反应条件时，反应在有机碱(诸如Et₃N、iPr₂Net等)的存在下，在芳香族有机溶剂(诸如苯、甲苯等)中进行。式3化合物可商购获得或通过本领域已知的方法容易地制备。

化合物(I)可以通过在酰化反应条件下加入式6化合物与式5酰氯的溶液来制备。合适的溶剂包括芳族或卤化有机溶剂，诸如无水形式的苯、甲苯或DCM。

式5化合物可以通过在本领域公知的条件下使式4化合物与氯化剂(诸如SOCl₂、(COCl)₂或PCl₅)反应来制备。式6化合物(诸如(R)-2-(哌啶-2-基)吡啶和S-2-(哌啶-2-基)吡啶)可商购获得或它们可以通过本领域公知的方法制备。

式(IA)和(IB)化合物，其中虚线、R¹、R²、R³、Het如发明内容中所限定，并且R⁴和R⁵与它们所连接的氮原子一起形成吡咯烷基、哌啶基或高哌啶基，可以如以下方案3中所述制备。

方案3

用合适的氨基保护基(诸如Boc、苄基或Ns)保护式1化合物中的氨基，然后用式8化合物(其中每个X是离去基团，诸如卤素(诸如氯或溴)、甲苯磺酸盐、或甲磺酸盐，并且m为0至2)处理所得式7化合物，提供式9化合物。该反应在NaH的存在下在THF溶液中进行。除去氨基保护基，然后在碱(诸如氢氧化钾、氢氧化钠等)的存在下在合适的有机溶剂(诸如二氯甲烷)中环化所得胺，提供式(I)化合物。

本领域技术人员将认识到，通过如上所述进行但使用其他起始材料，诸如双(2-氯乙基)胺、氧基双(乙烷-2,1-二基)双(4-甲基苯磺酸酯)、(Z)-1,4-二氯丁-2-烯、2-(溴甲基)苯甲酸、2-(2-溴乙基)苯甲酸、2-(溴甲基)-5-甲氧基苯甲酸、和2-(溴甲基)-4-氟苯甲酸，可以合成式(I)化合物，其中NR⁴R⁵形成其他杂环氨基环。

给药和药物组合物

通常，本公开内容的化合物将以治疗有效量通过用于具有相似效用的药剂的任何可接受的给药方式给药。本公开内容的化合物的治疗有效量可以在每天每kg患者体重约0.01至约500mg的范围内，其可以单次给药或多次给药。合适的剂量水平可以是每天约0.1至约250mg/kg；或每天约0.5至约100mg/kg。合适的剂量水平可以是每天约0.01至约250mg/kg、每天约0.05至约100mg/kg、或每天约0.1至约50mg/kg。在该范围内，剂量可以为每天约0.05至约0.5、约0.5至约5、或约5至约50mg/kg。对于口服给药，组合物可以以含有约1.0至约1000毫克活性成分(特别是约1、5、10、15、20、25、50、75、100、150、200、250、300、400、500、600、750、800、900和1000毫克活性成分)的片剂形式提供。本公开内容的化合物，即活性成分的实际量将取决于多种因素，诸如待治疗疾病的严重程度、患者的年龄和相对健康状况、所用化合物的效力、给药途径和形式、以及其他因素。

通常，本公开内容的化合物将通过以下任一种途径以药物组合物给药：口服、全身(例如，透皮、鼻内或通过栓剂)、或肠胃外(例如，肌内、静脉内或皮下)给药。优选的给药方式是口服，使用方便的每日剂量方案，其可根据病痛程度进行调整。组合物可以采取片剂、丸剂、胶囊、半固体、粉剂、缓释制剂、溶液、悬浮液、酏剂、气雾剂、或任何其他合适的组合物的形式。

制剂的选择取决于多种因素，诸如药物给药方式(例如，对于口服给药，优选为以片剂、丸剂或胶囊形式的制剂，包括肠溶衣或延释片剂、丸剂或胶囊)和原料药的生物利用度。最近，基于生物利用度可以通过增加表面积(即减小粒径)来增加的原理，已经开发出特别用于生物利用度差的药物的药物制剂。例如，美国专利号4,107,288描述了具有10至1,000nm尺寸范围的颗粒的药物制剂，其中活性材料负载在交联的大分子基质上。美国专利号5,145,684描述药物制剂的生产，其中在表面改性剂的存在下将原料药粉碎成纳米颗粒(平均粒径为400nm)，然后分散在液体介质中，从而得到表现出明显高生物利用度的药物制剂。

组合物通常由本公开内容的化合物与至少一种药学上可接受的赋形剂组合组成。可接受的赋形剂是无毒的，有助于给药，并且未不良影响本公开内容的化合物的治疗获益。此类赋形剂可以是本领域技术人员通常可获得的任何固体、液体、半固体、或在气溶胶组合物的情况下的气态赋形剂。

固体药用赋形剂包括淀粉、纤维素、滑石粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、氯化钠、脱脂奶粉等。液体和半固体赋形剂可以选自甘油、丙二醇、水、乙醇和各种油，包括石油，动物、植物或合成来源的油，例如花生油、豆油、矿物油、芝麻油等。优选的液体载体，特别是注射液，包括水、生理盐水、右旋糖水溶液、和乙二醇。

压缩气体可用于以气溶胶形式分散本公开内容的化合物。适用于此目的的惰性气体是氮气、二氧化碳等。

其他合适的药用赋形剂及其制剂在Remington’s Pharmaceutical Sciences，由E.W.Martin编辑(Mack Publishing Company,20th ed.,2000)中描述。

制剂中化合物的水平可在本领域技术人员采用的全范围内变化。通常，以重量百分比(wt.％)计，基于制剂总量，制剂将含有约0.01-99.99wt.％的本公开内容的化合物，余量为一种或多种合适的药物赋形剂。例如，该化合物以约1-80wt.％的水平存在。

本公开内容的化合物可以与一种或多种其他药物组合用于治疗本公开内容的化合物或其他药物可能对其有用的疾病或病症。此类其他药物可以通过其通常使用的途径和量与本公开内容的化合物同时或序贯给药。当本公开内容的化合物与一种或多种其他药物同时使用时，优选含有此类其他药物和本公开内容的化合物的单位剂型的药物组合物。然而，联合疗法还可以包括其中本公开内容的化合物和一种或多种其他药物以不同的重叠时间表给药的疗法。还预期当与一种或多种其他活性成分组合使用时，本公开内容的化合物和其他活性成分可以以比各自单独使用时更低的剂量使用。

实施例

给出式(I)化合物的以下制备以使本领域技术人员能够更清楚地理解和实践本公开内容。它们不应被视为限制本公开内容的范围，而仅是对其进行说明和代表。

合成实施例

实施例1

2-((2S)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物1)的合成

步骤1

向配备冷凝器和Dean-Stark装置的单颈圆底烧瓶(1L)中依次装入L-丙氨酸(17.9g，0.2摩尔)、邻苯二甲酸酐(29.6g，0.2摩尔)、甲苯(300mL)和Et₃N(2.6mL)。所得混合物回流16小时直至不再产生H₂O。将H₂O(300mL)加入冷却的溶液中并分离各层。有机层进一步用盐水洗涤、干燥并浓缩。粗品从EtOAc/己烷(80mL/200mL)结晶，得到(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酸(34.5g，79％)，为白色固体。

步骤2

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酸(2.3g，10mmol)在己烷/苯(20mL/20mL)的混合物中的溶液中滴加草酰氯(1.7mL，20mmol)，然后加入DMF(0.01mL)。4小时后，通过旋转蒸发仪完全去除所有挥发物。所得(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯为粗品，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯(～10mmol)在无水DCM(60mL)中的溶液中加入(+/-)-新烟草碱(1.4g，9mmol))和Et₃N(1.7mL，12mmol)。将所得溶液在室温下搅拌20小时并用H₂O(60mL)淬灭。分离各层并用DCM(60mL×3)萃取水层。合并的有机层用2NHCl、饱和NaHCO₃和盐水洗涤、干燥并浓缩。使用正相柱(己烷/EtOAc＝50/50)的快速色谱得到标题化合物(1.0g，31％)，为白色泡沫状。MS(ESI，正离子)m/z：362.1(M+1)。

实施例2

2-((S)-1-氧代-1-((S)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物2)的合成

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯(4.5g，20mmol)在无水苯(120mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(3.0g，19mmol)。将所得溶液在室温下搅拌20小时并用饱和NaHCO₃(100mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩。粗2-((2S)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(4.7g，68％)以两种非对映异构体：(A)2-((S)-1-氧代-1-((S)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮；(B)2-((S)-1-氧代-1-((R)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮的混合物获得，为淡黄色泡沫状，其使用HP C18 AqGOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行分离。分配基于水解实验：A非对映异构体得到S-新烟草碱并且B非对映异构体得到R-新烟草碱。

实施例3

2-((S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物3)和2-((S)-3-甲基-1-氧代-1-((R)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物4)的合成

步骤1

向配备冷凝器和Dean-Stark装置的单颈圆底烧瓶(1L)中依次装入L-缬氨酸(23.4g，0.2摩尔)、邻苯二甲酸酐(29.6g，0.2摩尔)、甲苯(300mL)和Et₃N(2.6mL)。所得混合物回流16小时直至不再产生H₂O。将H₂O(300mL)加入冷却的溶液中并分离各层。有机层进一步用盐水洗涤、干燥并浓缩。粗品从EtOAc/己烷(80mL/200mL)结晶，得到(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-甲基丁酸(39.0g，80％)，为白色固体。

步骤2

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-甲基丁酸(5.0g，20mmol)在己烷/苯(40mL/40mL)的混合物中的溶液中滴加草酰氯(3.5mL，40mmol)，然后加入DMF(0.02mL)。4小时后，通过旋转蒸发仪完全去除所有挥发物。所得(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-甲基丁酰氯为粗品，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向((S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-甲基丁酰氯(20mmol)在无水苯(120mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(3.0g，19mmol)。将所得溶液在室温下搅拌20小时并用饱和NaHCO₃(100mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩。粗品使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化。(A)：第一峰，2-((S)-3-甲基-1-氧代-1-((S)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.2g，15％)，为白色泡沫状。MS(ESI，正离子)m/z：390.1(M+1)；(B)：第二峰，2-((S)-3-甲基-1-氧代-1-((R)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.0g，12％)，为白色泡沫状。MS(ESI，正离子)m/z：390.1(M+1)。

实施例4

2-((S)-1-氧代-1-((S)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮和2-((R)-1-氧代-1-((R)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物5)的混合物以及2-((S)-1-氧代-1-((R)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮和2-((R)-1-氧代-1-((S)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物6)的混合物的合成

步骤1

向配备冷凝器的单颈圆底烧瓶(200mL)中依次装入DL-2-氨基丁酸(3.5g，34mmol)、邻苯二甲酸酐(5.0g，33.8mmol)和冰醋酸(75mL)。所得混合物回流6小时。在真空中完全除去溶剂，得到2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丁酸(7.3g，92％)，为透明油状。

步骤2

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丁酸(7.0g，29.3mmol)在己烷/苯(100mL/100mL)的混合物中的溶液中滴加草酰氯(5.1mL，58.6mmol))，然后加入DMF(0.02mL)。4小时后，通过旋转蒸发仪完全去除所有挥发物。所得2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丁酰氯为粗品，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丁酰氯(29mmol)在无水苯(120mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(4.2g，27mmol)。将所得溶液在室温下搅拌20小时并用饱和NaHCO₃(100mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到2-(1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮粗品(5.5g，54％)。外消旋非对映异构体使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行分离。(A)：第一峰，2-((S)-1-氧代-1-((S)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮和2-((R)-1-氧代-1-((R)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮，为白色泡沫状。MS(ESI，正离子)m/z：376.1(M+1)；(B)：第二峰，2-((S)-1-氧代-1-((R)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮和2-((R)-1-氧代-1-((S)-6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丁-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮，为白色泡沫状。MS(ESI，正离子)m/z：376.1(M+1)。

实施例5

2-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物7)的合成

步骤1

向配备冷凝器的单颈圆底烧瓶(200mL)中依次装入DL-苯丙氨酸(5.6g，34mmol)、邻苯二甲酸酐(5.0g，33.8mmol)和冰醋酸(100mL)。所得混合物回流6小时。在真空中完全除去溶剂，并且残留物从乙酸乙酯和己烷的混合物中析出，得到2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯丙酸(7.0g，70％)，为白色固体。

步骤2

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酸(5.0g，16.9mmol)在己烷/苯(100mL/100mL)的混合物中的溶液中滴加草酰氯(3.5mL，40.2mmol)，然后加入DMF(0.02mL)。4小时后，通过旋转蒸发仪完全去除所有挥发物。所得2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯为粗品，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯(16.9mmol)在无水苯(100mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(2.4g，15.7mmol)。将所得溶液在室温下搅拌20小时并用饱和NaHCO₃(100mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 AqGOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后得到2-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(4.5g，65％)，为白色泡沫状，以2种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：438.1(M+1)。

实施例6

2-(2-氧代-2-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物8)的合成

步骤1

向配备冷凝器的单颈圆底烧瓶(200mL)中依次装入甘氨酸(5.1g，68mmol)、邻苯二甲酸酐(10.0g，67.5mmol)和冰醋酸(120mL)。所得混合物回流6小时。在真空中完全除去溶剂，并且残留物从乙酸乙酯和己烷的混合物中析出，得到2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)乙酸(10.8g，80％)，为白色固体。

步骤2

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)乙酸(4.1g，20mmol)在己烷/苯(40mL/40mL)的混合物中的溶液中滴加草酰氯(3.5mL，40mmol))，然后加入DMF(0.02mL)。4小时后，通过旋转蒸发仪完全去除所有挥发物。所得2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)乙酰氯为粗品，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)乙酰氯(20mmol)在无水苯(120mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(2.9g，19.0mmol)。将所得溶液在室温下搅拌20小时并用饱和NaHCO₃(100mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后得到2-(2-氧代-2-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮(3.8g，58％)，为白色泡沫状。MS(ESI，正离子)m/z：348.1(M+1)。

实施例7

2-((2R)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物17)的合成

步骤1

向配备冷凝器的单颈圆底烧瓶(200mL)中依次装入D-丙氨酸(5.0g，56.2mmol)、邻苯二甲酸酐(18.2g，56.2mmol)和冰醋酸(100mL)。所得混合物回流3小时。在真空中完全除去溶剂，并且残留物从乙酸乙酯和己烷的混合物中析出，得到(R)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酸(8.0g，64％)，为白色固体。

步骤2

向(R)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酸(7.5g，33.3mmol)在无水DCM(120mL)中的溶液分批加入PCl₅(7.6g，36.5mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌3小时。通过旋转蒸发仪完全去除所有挥发物。残留物(R)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯为透明油状物，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向(R)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯(33mmol)在无水苯(120mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(5.3g，34.7mmol)。将所得溶液在室温下搅拌20小时并用饱和NaHCO₃(100mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到2-((2R)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(9.7g，81％)，为泡沫状，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：362.1(M+1)。

实施例8

3-硝基-N-((2S)-(1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物9)的合成

步骤1

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酸(11.2g，50.0mmol)在无水DCM(150mL)中的溶液中分批加入PCl₅(11.4g，55mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌5小时。通过旋转蒸发仪完全去除所有挥发物。残留物(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯为透明油状物，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤2

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙酰氯(～50mmol)在无水苯(120mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(7.6g，50mmol)。将所得溶液在室温下搅拌20小时并用饱和NaHCO₃(100mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到(S)-2-(1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(13.5g，74％)，为粗品，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：362.4(M+1)。

步骤3

向(S)-2-(1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(13.5g，37mmol)在EtOH(200mL)中的溶液中加入一水合肼(3.6mL)。反应溶液回流2小时，所得悬浮液在室温下过滤。将滤液浓缩，得到(S)-2-氨基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(9.0g，77％，来自步骤2)，为粗品，以两种非对映异构体的混合物存在。

步骤4

向3-硝基苯甲酸(0.50g，3.0mmol)和(S)-2-氨基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.7g，3.0mmol)的溶液中加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.72g，3.8mmol)和i-Pr₂NEt(0.70mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在烧瓶中得到3-硝基-N-(1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.2g，17％)，为薄膜状，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：381.3(M+1)。

实施例9-13中的化合物通过与实施例8类似的程序由相应的苯甲酸起始制备。

实施例9：3-甲氧基-N-((2S)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.5g，46％)。(化合物10)

MS(ESI，正离子)m/z：366.1(M+1)。

实施例10：3,4-二乙氧基-N-((2S)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.6g，47％)。(化合物11)

MS(ESI，正离子)m/z：424.2(M+1)。

实施例11：3,4-二甲氧基-N-((2S)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.7g，59％)。(化合物12)

MS(ESI，正离子)m/z：396.1(M+1)。

实施例12：4-硝基-N-((2S)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.1g，8％)，其由MeCN结晶得到。(化合物13)

MS(ESI，正离子)m/z：381.1(M+1)。

实施例13：4-氯-N-((2S)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(150mg，13％)，其由MeCN结晶得到。(化合物14)

MS(ESI，正离子)m/z：370.1(M+1).

实施例14

3-硝基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物15)的合成

步骤1

向配备冷凝器的单颈圆底烧瓶(200mL)中依次装入DL-苯丙氨酸(11.2g。68mmol)、邻苯二甲酸酐(10.0g，67.6mmol)和冰醋酸(200mL)。所得混合物回流2小时。在真空中完全除去溶剂，并且残留物从乙酸乙酯和己烷的混合物中析出，得到2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酸(18.1g，90％)，为白色固体。

步骤2

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯丙酸(19.8g，67.1mmol)在无水DCM(300mL)中的溶液分批加入PCl₅(15,3g，73.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。通过旋转蒸发器完全除去所有挥发物，得到2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯为粗品，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯(67mmol)在无水苯(300mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(12.0g，75.0mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜并用饱和NaHCO₃(300mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到2-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(25.0g，86％)，为泡沫状，以2种非对映异构体的混合物存在，其无需进一步纯化。

步骤4

向2-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(25.0g)在EtOH(300mL)中的溶液中加入一水合肼(5.0mL)。反应溶液回流3小时并将所得悬浮液在室温下过滤。将滤液溶解在EtOAc和己烷的混合物中并放置过夜。滤出所得固体并浓缩滤液，得到2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(16.7g，54％)为粗品，以两种非对映异构体的混合物存在。

步骤5

向3-硝基苯甲酸(0.5g，3.0mmol)和2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.9g，3.0mmol)的溶液中加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.7g，3.8mmol)和i-Pr₂NEt(0.7mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后在烧瓶中得到3-硝基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.6g，43％)，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：457.1(M+1)。

可选的步骤5

向3-硝基苯甲酸(0.8g，5mmol)在DCM(20mL)中的溶液中加入PCl₅(1.2g)。将反应混合物在室温下搅拌2小时、浓缩并用无水DCM稀释，将其转移至2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(1.5g，5mmol)和Et₃N(7.5mmol)的溶液。后处理和纯化提供以上步骤5中所述的标题产物。

实施例15

3-甲氧基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物16)的合成

向3-甲氧基苯甲酸(0.46g，3.0mmol)和2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.92g，3.0mmol)的溶液中加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.72g，3.8mmol)和i-Pr₂Net(0.70mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用正相硅胶柱以EtOAc和己烷作为洗脱流动相，用

进行纯化后在烧瓶中得到3-甲氧基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.60g，45％)，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：442.2(M+1)。

实施例16

3-氯-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物18)的合成

步骤1

在室温下，向KMnO₄(4.0g，25.0mmol)和Na₂HPO₄(6.7g，25mmol)在H₂O(100mL)中的紫色溶液中滴加3-氯苯甲醛(3.5g，25mmol)在MeOH(100mL)中的溶液。将反应混合物搅拌约30分钟直至形成棕色悬浮液。所得悬浮液通过

的垫过滤，滤液通过旋转蒸发浓缩并用H₂O(100mL)稀释。稀释的滤液用1N HCl酸化直至pH达到3-4。将所得沉淀物过滤并在76℃下真空干燥过夜，得到3-氯苯甲酸(3.5g，90％)，为白色固体。

步骤2

向3-氯苯甲酸(0.47g，3.0mmol)和2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.92g，3.0mmol)的溶液中加入在DCM(10mL)中的EDC水合物(0.75g，3.8mmol)和i-Pr₂NEt(0.72mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后在烧瓶中得到3-氯-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.30g，20％)，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：446.1(M+1)。

实施例17

3-氟-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物19)的合成

步骤1

在室温下，向KMnO₄(4.0g，25.0mmol)和Na₂HPO₄(6.7g，25mmol)在H₂O(100mL)中的紫色溶液中滴加3-氟苯甲醛(3.1g，25mmol)在MeOH(100mL)中的溶液。将反应混合物搅拌约30分钟直至形成棕色悬浮液。所得悬浮液通过

的垫过滤，滤液通过旋转蒸发浓缩并用H₂O(100mL)稀释。稀释的滤液用1N HCl酸化直至pH达到3-4。将所得沉淀物过滤并在76℃下真空干燥过夜，得到3-氟苯甲酸(2.0g，57％)，为白色固体。

步骤2

向3-氟苯甲酸(0.46g，3.0mmol)和2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.92g，3.0mmol)的溶液中加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.72g，3.8mmol)和i-Pr₂NEt(0.70mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后在烧瓶中得到3-氟-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.50g，39％)，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：430.1(M+1)。

实施例18

3-乙氧基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物20)的合成

步骤1

向3-羟基苯甲醛(6.1g，50mmol)在DMF(200mL)中的溶液中依次加入碘乙烷(9.4g，60mmol)和K₂CO₃(10.3g，75mmol)。将所得悬浮液加热至120℃持续4小时，并冷却至室温。反应用H₂O(200mL)淬灭并用乙醚(200mL)萃取。醚层用H₂O(200mL×3)洗涤、干燥并浓缩，得到3-乙氧基苯甲醛(6.2g，83％)，为透明油状物。

步骤2

在室温下，向KMnO₄(6.2g，39.0mmol)和Na₂HPO₄(10.5g，39mmol)在H₂O(150mL)中的紫色溶液中滴加3-乙氧基苯甲醛(5.8g)在MeOH(150mL)中的溶液。将反应混合物搅拌约30分钟直至形成棕色悬浮液。所得悬浮液通过

垫过滤，滤液通过旋转蒸发浓缩并用H₂O(100mL)稀释。稀释的滤液用1N HCl酸化直至pH达到3-4。将所得沉淀物过滤并在76℃下真空干燥过夜，得到3-乙氧基苯甲酸(2.9g，50％)，为白色固体。

步骤3

向3-乙氧基苯甲酸(0.55g，3.0mmol)和2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.92g，3.0mmol)的溶液中加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.72g，3.8mmol)和i-Pr₂NEt(0.70mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后在烧瓶中得到3-乙氧基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.66g，48％)，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：456.2(M+1)。

与以上实施例18类似地进行，使用相应制备的或市售的苯甲酸合成实施例19-22中的化合物。

实施例19：3,4-二甲氧基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.35g，25％)。(化合物21)

MS(ESI，正离子)m/z：472.2(M+1)。

实施例21：N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺(0.55g，38％)。(化合物23)

MS(ESI，正离子)m/z：480.1(M+1)。

实施例22：3-氟-5-甲氧基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.57g，41％)。(化合物24)

MS(ESI，正离子)m/z：460.2(M+1)。

实施例23

3-甲氧基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物25)的合成

步骤1

向配备冷凝器的单颈圆底烧瓶(500mL)中依次装入D-苯丙氨酸(25.0g，151.3mmol)、邻苯二甲酸酐(22.2g，151.3mmol)和冰醋酸(300mL)。所得混合物回流4小时。在真空中完全除去溶剂，并且残留物从乙酸乙酯和己烷的混合物中析出，得到(R)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯丙酸(38.4g，86％)，为白色固体。

步骤2

向(R)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯丙酸(37.9g，128.0mmol)在无水DCM(500mL)中的溶液中分批加入PCl₅(29.4g，141.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。通过旋转蒸发器完全除去所有挥发物，得到(R)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯为粗品，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向(R)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯(128mmol)在无水苯(500mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(20.6g，128.7mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜并用饱和NaHCO₃(500mL)溶液淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到2-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(43.3g，79％)，为泡沫状，以两种非对映异构体的混合物存在，其无需进一步纯化。

步骤4

向2-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(43.3g)在EtOH(500mL)中的溶液中加入一水合肼(8.7mL)。反应溶液回流3小时，所得悬浮液在室温下过滤。将滤液溶解在EtOAc和己烷的混合物中并放置过夜。滤出所得固体并浓缩滤液，得到(2R)-2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(32.3g，82％)为粗品，以两种非对映异构体的混合物存在。

步骤5

向3-甲氧基苯甲酸(0.46g，3.0mmol)和(2R)-2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.92g，3.0mmol)的溶液中加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.72g，3.8mmol)和i-Pr₂NEt t(0.70mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 AqGOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后在烧瓶中得到3-甲氧基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.73g，55％)，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：442.2(M+1)。

实施例24

3-乙氧基-4-甲氧基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物26)的合成

步骤1

在0℃下，向3-乙氧基-4-羟基苯甲醛(8.6g，50mmol)在DMF(200mL)中的溶液中分批加入NaH(3.0g，75mmol，60wt.％)，然后加入MeI(3.35mL，60mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用水淬灭。用乙醚(100mL×3)进行萃取。洗涤醚层、干燥并浓缩，得到3-乙氧基-4-甲氧基苯甲醛(5.9g，66％)为粗品。

步骤2

在室温下，向KMnO₄(5.1g，32.0mmol)和Na₂HPO₄(8.4g，32mmol)在H₂O(120mL)中的紫色溶液中滴加3-乙氧基-4-甲氧基苯甲醛(5.6g)在MeOH(120mL)中的溶液。将反应混合物搅拌约30分钟直至形成棕色悬浮液。所得悬浮液通过

的垫过滤，滤液通过旋转蒸发浓缩并用H₂O(100mL)稀释。稀释的滤液用1N HCl酸化直至pH达到3-4。将所得沉淀物过滤并在76℃下真空干燥过夜，得到3-乙氧基-4-甲氧基苯甲酸(4.0g，66％)，为白色固体。

步骤3

向3-乙氧基-4-甲氧基苯甲酸(0.59g，3.0mmol)和(2R)-2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.92g，3.0mmol)的溶液加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.72g，3.8mmol)和i-Pr₂NEt(0.70mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 AqGOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后在烧瓶中得到3-乙氧基-4-甲氧基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：486.2(M+1)。

与以上实施例24中所述类似地进行，通过取代合成的或市售的苯甲酸来制备实施例25-30中的化合物。

实施例25：2-氯-5-甲氧基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.76g，53％)。(化合物27)

MS(ESI，正离子)m/z：476.1(M+1)。

实施例26：3,5-二甲氧基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.86g，61％)。(化合物28)

MS(ESI，正离子)m/z：472.2(M+1)。

实施例27：5-甲氧基-2-甲基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.76g，56％)。(化合物29)

MS(ESI，正离子)m/z：456.2(M+1)。

实施例28：4-氯-2-甲氧基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.56g，41％)。(化合物30)

MS(ESI，正离子)m/z：476.1(M+1)。

实施例29：4-氟-3-甲氧基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.65g，47％)。(化合物31)

MS(ESI，正离子)m/z：460.2(M+1)。

实施例30：2-甲氧基-N-((2R)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺。(化合物32)

MS(ESI，正离子)m/z：442.3(M+1)。

实施例31

3-乙氧基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物33)的合成

步骤1

向配备冷凝器的单颈圆底烧瓶(500mL)中依次装入L-苯丙氨酸(25.0g，151.3mmol)、邻苯二甲酸酐(22.2g，151.3mmol)和冰醋酸(300mL)。所得混合物回流4小时。在真空中完全除去溶剂，并且残留物从乙酸乙酯和己烷的混合物中析出，得到(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酸(42.8g，96％)，为白色固体。

步骤2

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯丙酸(42.3g，142.0mmol)在无水DCM(550mL)中的溶液中分批加入PCl₅(32.8g，157.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。通过旋转蒸发器完全除去所有挥发物，得到(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯为粗品，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯(142mmol)在无水苯(550mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(23.0g，142.9mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜并用饱和NaHCO₃(550mL)溶液淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到2-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(57.7g，100％)，为泡沫状，以2种非对映异构体的混合物存在，其无需进一步纯化。

步骤4

向2-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(57.7g)在EtOH(500mL)中的溶液中加入一水合肼(11.6mL)。反应溶液回流过夜并将所得悬浮液在室温下过滤。将滤液溶解在EtOAc和己烷的混合物中并放置过夜。滤出所得固体并浓缩滤液，得到(2S)-2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(39.0g，99％)为粗品，以两种非对映异构体的混合物存在。

步骤5

向3-乙氧基苯甲酸(0.83g，5.0mmol)和(2S)-2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(1.5g，5.0mmol)的溶液中加入在DCM(30mL)中的EDC盐酸盐(1.2g，6.3mmol)和i-Pr₂NEt(1.1mL，6.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(30mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后在烧瓶中得到3-乙氧基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(1.3g，63％)，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：456.2(M+1)。

与以上实施例31中所述类似地进行，通过取代合成的或市售的苯甲酸来制备实施例32-33中的化合物。

实施例32：4-氟-3-甲氧基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.4g，29％)。(化合物34)

MS(ESI，正离子)m/z：460.2(M+1)。

实施例33：3-甲氧基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(0.8g，36％)。(化合物35)

MS(ESI，正离子)m/z：442.2(M+1)。

与以上实施例31中所述类似地进行，实施例40-56中的化合物通过用可商购的羧酸或可容易地由氨基苯甲酸和相应的酰氯或酸使用偶联反应制备的羧酸进行取代来制备。

实施例40：3-(3-甲基丁酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为棕褐色固体(0.90g，60％)。(化合物42)

MS(ESI，正离子)m/z：511.2(M+1)。

实施例41：N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)-3-新戊酰氨基苯甲酰胺为灰色固体(0.93g，62％)。(化合物43)

MS(ESI，正离子)m/z：511.2(M+1)。

实施例42：3-(环丙甲酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为白色固体(1.01g，69％)。(化合物44)

MS(ESI，正离子)m/z：495.2(M+1)。

实施例43：3-(环丁烷甲酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为橙色固体(1.05g，69％)。(化合物45)

MS(ESI，正离子)m/z：509.2(M+1)。

实施例44：3-(环戊烷甲酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为白色固体(0.69g，64％)。(化合物46)

MS(ESI，正离子)m/z：523.2(M+1)。

实施例45：2-丁酰氨基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为白色固体(0.12g，12％)。(化合物47)

MS(ESI，正离子)m/z：497.2(M+1)。

实施例46：4-丁酰氨基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为白色固体(0.45g，45％)。(化合物48)

MS(ESI，正离子)m/z：497.2(M+1)。

实施例47：N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)喹啉-2-甲酰胺为白色固体(0.50g，53％)。(化合物49)

MS(ESI，正离子)m/z：463.2(M+1)。

实施例48：N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)吡嗪-2-甲酰胺为黄色固体(0.50g，61％)。(化合物50)

MS(ESI，正离子)m/z：414.1(M+1)。

实施例49：N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)烟酰胺为白色固体(0.41g，50％)。(化合物51)

MS(ESI，正离子)m/z：413.1(M+1)。

实施例50：N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)呋喃-2-甲酰胺为白色固体(0.50g，63％)。(化合物52)

MS(ESI，正离子)m/z：402.1(M+1)。

实施例51：N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺为淡黄色固体(0.20g，25％)。(化合物56)

MS(ESI，正离子)m/z：401.1(M+1)。

实施例52：3-((S)-2-甲基丁酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为淡黄色固体(0.60g，56％)。(化合物57)

MS(ESI，正离子)m/z：511.2(M+1)。

实施例53：3-((R)-2-甲基丁酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为淡黄色固体(0.67g，65％)。(化合物58)

MS(ESI，正离子)m/z：511.2(M+1)。

实施例54：3-(N-甲基丁酰氨基)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为淡黄色固体(0.80g，78％)。(化合物59)

MS(ESI，正离子)m/z：511.2(M+1)。

实施例55：3-(丁氨基)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为淡黄色固体(0.82g，85％)。(化合物60)

MS(ESI，正离子)m/z：483.2(M+1)。

实施例56：1-丁基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)-1H-吡咯-2-甲酰胺为黄色油状物(0.21g，23％)。(化合物61)

MS(ESI，正离子)m/z：457.2(M+1)。

实施例34

N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)-3-戊酰氨基苯甲酰胺(化合物36)的合成

步骤1

在0℃下，向3-氨基苯甲酸(5.0g，36.5mmol)在DCM(120mL)中的悬浮液中依次加入吡啶(6.5mL)和戊酰氯(5.5mL，45.6mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜并用水淬灭。分离各层并将有机层洗涤、干燥并浓缩，得到3-戊酰氨基苯甲酸(7.2g，90％)，为白色固体。

步骤2

向3-戊酰氨基苯甲酸(0.66g，3.0mmol)和2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.92g，3.0mmol)的溶液加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.72g，3.8mmol)和i-Pr₂NEt(0.70mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H₂O作为洗脱流动相，用

进行纯化后在烧瓶中得到N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)-3-戊酰氨基苯甲酰胺(0.81g，59％)，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：511.2(M+1)。

与以上实施例34中所述类似地进行，通过取代合成的或市售的苯甲酸来制备实施例35-37中的化合物。

实施例35：3-丁酰氨基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺。(化合物37)

MS(ESI，正离子)m/z：497.2(M+1)。

实施例36：3-氨基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺。(化合物38)

MS(ESI，正离子)m/z：427.2(M+1)。

实施例37：3-乙酰胺-N-(1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(169mg，12％)。(化合物39)

MS(ESI，正离子)m/z：469.2(M+1)。

实施例38

3-丁酰氨基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(2-(喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物40)的合成

3-丁酰氨基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(2-(喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(1,2-组合化合物)的合成方案：

步骤1

N-苯基乙酰胺的

合成

在冰浴下1小时内向苯胺(5g，53.7mmol)在2N NaOH(40.3mL)中的悬浮液中滴加乙酰氯(4.63g，59.07mmol，1.1eq.)在40.3mL二氯甲烷中的溶液。所得混合物在室温下再搅拌一小时。有机层用稀冰、NaHCO₃和盐水洗涤。减压浓缩有机层，得到期望产物，为粗乙酰苯胺。粗乙酰苯胺在用蒸馏水溶解后重结晶，得到纯且干燥的乙酰苯胺，为白色结晶固体(6.3g，87％分离收率)。

步骤2

2-氯喹啉-3-甲醛的

合成

向DMF(10.82g，148mmol,2.5eq.)中滴加磷酰氯(63.5g，414.13mmol,7eq.)，通过冰浴冷却(30min)。将混合物在0℃下再搅拌30分钟，然后一次性加入乙酰苯胺(8g，59.18mmol,1eq.)。白色悬浮液变成绿色溶液，加热过夜。将混合物倒入冰中。过滤黄色沉淀并干燥，得到橙黄色固体(6.8g，60％分离收率)

步骤3

喹啉-3-甲醛

的合成

在23℃和氮气气氛下，向在DMF(18mL)中的2-氯喹啉-3-甲醛(3g，15.69mmol,1eq.)中加入三乙胺(19.05g，188.28mmol,12eq.)、四(三苯基膦)钯(0)(0.9g，0.78mmol,5mol％)和甲酸(3.9g，84.72mmol,5.4eq.)。在110℃下搅拌3小时后，将反应混合物用水(90mL)和乙酸乙酯(3×60mL)冷却至23℃。合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥并过滤。在真空下浓缩滤液得到粗产物，将其在快速色谱上使用50％EtOAc/己烷纯化，得到期望产物，为红棕色固体(1.5g，60.8％分离收率)。

步骤4

(E)-N-烯丙基-1-(喹啉-3-基)甲胺

的合成

在250mL圆底烧瓶中，将烯丙胺(1.3g，22.92mmol,1.2eq.)加入喹啉-3-甲醛(3g，19.1mmol,1eq.)在无水二氯甲烷(96mL)中的搅拌溶液(含有活化的4°A MS(5g))中。然后将所得混合物在室温下搅拌24小时。随后，将分子筛滤出，用DCM洗涤，在溶剂蒸发后，获得亚胺产物，为棕色固体(4.3g，95％分离收率)。

步骤5

(N-烯丙基-1-(喹啉-3-基)丁-3-烯-1-胺

的合成

在250mL 2颈烧瓶中，将烯丙基溴(3.95g，32.63mmol，2eq.)滴加入(E)-N-烯丙基-1-(喹啉-3-基)甲胺(3.2g，16.31mmol,1eq.)和铟粉(2.79g，24.46mmol,1.5eq.)的冷(0℃)无水乙醇(83mL)溶液中。所得混合物在相同温度下搅拌30分钟。之后，使温度达到室温，并将系统再搅拌3.5小时。随后，真空蒸发溶剂，将残留物溶解在EtOAc(60mL)中并用饱和NaHCO₃水溶液(40mL)处理。将两层分离，水层用EtOAc(3×20mL)萃取。使用无水Na₂SO₄干燥合并的有机层，过滤并在减压下蒸发溶剂。所得粗产物在柱色谱上纯化，使用50％EtOAc/己烷作为洗脱剂，得到纯产物，为黄棕色油状物(3.4g，88％分离收率)。

步骤63-(1,2,3,6-四氢吡啶-2-基)喹啉

的合成

在配备磁力搅拌器的100mL 2颈梨形烧瓶中，将N-烯丙基-1-(喹啉-3-基)丁-3-烯-1-胺(1.56g，6.55mmol,1eq.)溶解于无水二氯甲烷(64mL)中。加入对甲苯磺酸一水合物(2.74g，14.41mmol,2.2eq.)并将混合物搅拌10分钟。加入Grubb直至发现溶液的pH为9-10。分离有机层并用无水Na₂SO₄干燥、过滤并减压蒸发溶剂。将所得粗产物纯化，加入第二代催化剂(0.555g，0.65mmol,10mol％)并将所得混合物在室温下搅拌18h。使用50mL 2N NaOH中和反应混合物并搅拌20分钟。收集有机层并用水(3×50mL)洗涤。有机层用无水Na₂SO₄干燥并减压浓缩。将残留物溶解于100mL EtOAc中，然后加入30mL 6N HCl、70mL去离子水、20mL盐水溶液并将混合物搅拌20分钟。收集水层，并且水层用EtOAc(3×50mL)进一步萃取。将水层转移到500mL圆底烧瓶中并在0℃下冷却。将120mL甲基叔丁基醚加入水层，无水碳酸钾在装有按20:1比例的己烷和氢氧化铵混合物的柱层析柱上，使用4％甲醇/氯仿作为洗脱液，得到纯产品，为红棕色油状物(0.325g，28％分离收率)。

步骤72-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯

的合成

步骤7(i)

向配备冷凝器和Dean-Stark装置的烘箱干燥的单颈圆底烧瓶(500mL)中依次加入DL-苯丙氨酸(20g，121mmole,1eq.)、邻苯二甲酸酐(17.9g，121mmole,1eq.)、甲苯(180mL)和Et₃N(1.6mL)。所得混合物回流16小时直至不再产生水。将H₂O(180mL)加入冷却的溶液中并析出产物。过滤产物并在高真空下干燥过夜。收集干燥产物2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酸，为白色固体(29.5g，82.6％分离收率)。¹H NMR(CDCl₃):7.80-7.78(m,2H),7.70-7.69(m,2H),7.27-7.13(m,5H),5.23(t,J＝8.2Hz,1H),3.61(d,J＝7.5Hz,2H)；¹³CNMR(CDCl₃):174.1,167.3,136.4,134.1,131.4,128.8,128.5,126.9,123.5,53.0,34.4。

步骤7(ii)

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酸(2.5g，8.47mmol,1eq.)在无水DCM(32mL)中的溶液中分批加入PCl₅(1.93g，9.28mmol,1.09eq.)。将所得反应混合物在室温下搅拌3小时。在减压下完全除去所有挥发物。残留物2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯(2.12g)为白色固体，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤82-(1-氧代-3-苯基-1-(2-(喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮的合成

向2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯(6.78mmol)在无水苯(25mL)中的溶液中缓慢加入3-(1,2,3,6-四氢吡啶-2-基)喹啉(1.5g，7.13mmo,1.05eq.)。将所得溶液在室温下搅拌20小时并用饱和NaHCO₃(20mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到3-(1,2,3,6-四氢吡啶-2-基)喹啉为粗产物。粗产物在柱色谱上纯化，使用50％EtOAc/己烷混合物作为洗脱剂，得到期望产物(1.4g，42.3％)，为白色固体，以非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：488.2(M+1)。

步骤92-氨基-3-苯基-1-(2-(喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮的合成

向2-(1-氧代-3-苯基-1-(2-(喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.4.g，2.9mmol)在EtOH(20mL)中的溶液加入一水合肼(0.45mL)。反应溶液在85℃下回流过夜，所得悬浮液在室温下过滤。将滤液浓缩并进一步用20mL 1:1EtOAc/己烷混合物溶解并在0℃下保持过夜。过滤混合物并浓缩滤液，得到2-氨基-3-苯基-1-(2-(喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.8g，77％)，为棕色油状物，以非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：358.19(M+1)。

步骤102-氨基-3-苯基-1-(2-(喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮的合成

向3-丁酰氨基苯甲酸(0.47g，2.15mmol,1eq.)和2-氨基-3-苯基-1-(2-(喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.47g，2.15mmol,1eq.)的溶液中加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.56g，2.8mmol,1.3eq.)和i-Pr₂NEt(0.5mL，2.80mmol,1.3eq.)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩得到粗产物，粗产物用乙腈作为溶剂结晶。将晶体过滤并收集，为白色收集物(0.45g，38.3％)，以非对映异构体的混合物存在。MS(ESI，正离子)m/z：547.5(M+1)。

与以上实施例38中所述类似地进行，从相应的氨基酸起始制备实施例65-66中的化合物。

实施例65：3-丁酰氨基-N-(1-(2-(2-氯喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)-1-氧代-3-苯丙烷-2-基)苯甲酰胺为浅黄色固体(0.05g，17.2％)。(化合物67)

MS(ESI，正离子)m/z：581.3(M+1)。

实施例66：3-丁酰氨基-N-(1-氧代-1-(2-(喹啉-3-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为乳白色固体(0.13g，38.6％)。(化合物68)

MS(ESI，正离子)m/z：471.4(M+1)。

实施例39

3-{5-[(3aS,4S,6aR)-2-氧代-六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基]戊酰胺}-N-[(2S)-1-氧代-3-苯基-1-{1,2,3,6-四氢-[2,3'-联吡啶]-1-基}丙-2-基]苯甲酰胺(化合物41)的合成

步骤1

在室温下，向3-硝基苯甲酸(8.4g，50mmol)在MeOH(150mL)中的溶液中缓慢加入SOCl2(7.1mL，100mmol)。将反应混合物回流2小时。除去所有溶剂得到3-硝基苯甲酸甲酯(9.1g，100％)为粗品。

步骤2

向3-硝基苯甲酸甲酯(9.1g，50mmol)在EtOH(150mL)中的溶液中一次性加入SnCl2·2H2O(22.5g，100mmol)。将反应混合物回流2小时，然后除去溶剂。残留物用EtOAc萃取。将有机层洗涤、干燥并浓缩，得到3-氨基苯甲酸甲酯(8.4g，100％)，为棕色油状物。

步骤3

向3-氨基苯甲酸甲酯(0.87g，5.7mmol)和生物素(1.4g，5.7mmol)在DCM(15mL)中的溶液中加入EDC(1.3g，7.0mmol)和i-Pr2NEt(1.2mL，7.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H2O(10mL)淬灭。分离各层，有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到3-(5-(2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊酰氨基)苯甲酸甲酯(1.13g，52％)。

步骤4

向3-(5-(2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊酰氨基)苯甲酸甲酯(1.13g，2.9mmol)在THF(15mL)和H2O(15mL)的混合物中的溶液中一次性加入LiOH(0.36g，14mmol)并在室温下搅拌过夜。反应进一步用1N NaOH稀释，水层用EtOAc洗涤，用1N HCl中和。收集所得固体，得到3-(5-(2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊酰氨基)苯甲酸(0.7g，83％)，为粗品。

步骤5

向3-(5-(2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊酰氨基)苯甲酸(0.7g，1.9mmol)和(2S)-2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.6g，1.9mmol)的溶液加入DCM(20mL)中的EDC盐酸盐(0.5g，2.4mmol)和i-Pr2NEt(0.4mL，2.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H2O(30mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H2O作为洗脱流动相，通过

进行纯化后得到3-{5-[(3aS,4S,6aR)-2-氧代-六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基]戊酰胺}-N-[(2S)-1-氧代-3-苯基-1-{1,2,3,6-四氢-[2,3'-联吡啶]-1-基}丙-2-基]苯甲酰胺(80mg，7％)，为粉末。MS(ESI，正离子)m/z：653.5(M+1)。

实施例57

3-(3-氨基丙酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺盐酸盐(化合物54)的合成

3-(3-氨基丙酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺盐酸盐的合成方案：

向3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸(0.62g，2.0mmol)和(2S)-2-氨基-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-1-酮(0.62g，2.0mmol)的溶液中加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.57g，2.9mmol)和i-Pr₂NEt(0.47mL，3.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H2O作为洗脱流动相，通过

进行纯化后在烧瓶中得到3-(3-氨基丙酰氨基)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺，为薄膜，以两种非对映异构体的混合物存在。将苯甲酰胺溶解在5ml 1,4-二噁烷中，并使用在1,4-二噁烷中的2eq.的4N HCl通过搅拌1小时转化为苯甲酰胺盐酸盐，然后浓缩反应混合物，得到3-(3-氨基丙酰氨基)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺盐酸盐，为棕色固体(0.89g，84％)MS(ESI，正离子)m/z：498.2(M+1)。

与以上实施例57类似地进行，从相应的苯甲酸起始制备实施例58-59中的化合物。

实施例58：3-(2-氨基乙酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺盐酸盐为米色固体(0.83g，83％)。(化合物53)

MS(ESI，正离子)m/z：484.2(M+1)。

实施例59：3-(4-氨基丁酰胺)-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺盐酸盐为米色固体(0.40g，36％)。(化合物55)

MS(ESI，正离子)m/z：512.2(M+1)。

实施例61

3-丁酰氨基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(2-(吡啶-3-基)哌啶-1-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物63)的合成

3-丁酰氨基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(2-(吡啶-3-基)哌啶-1-基)丙-2-基)苯甲酰胺的合成方案：

步骤1

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酸(1.3g，4.4mmol)在无水DCM(20mL)中的溶液中分批加入PCl₅(1.0g，4.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。通过旋转蒸发器完全除去所有挥发物，得到(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤2

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-苯基丙酰氯(4.8mmol)在无水苯(20mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟碱(0.8g，4.9mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜并用饱和NaHCO3(20mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到2-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(2-(吡啶-3-基)-哌啶-1-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮，为泡沫状(1.5g)，以两种非对映异构体的混合物存在，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向2-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(2-(吡啶-3-基)-哌啶-1-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.5g)在EtOH(30mL)中的溶液中加入一水合肼(0.3mL)。将反应溶液回流过夜并将所得悬浮液在室温下过滤。将滤液溶解在EtOAc和己烷的混合物中并放置过夜。滤出所得固体并浓缩滤液，得到(2S)-2-氨基-3-苯基-1-(2-(吡啶-3-基)哌啶-1-基)丙-1-酮(0.82g)，以两种非对映异构体的混合物存在，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤4

向3-丁酰氨基苯甲酸(0.56g，2.7mmol)和(2S)-2-氨基-3-苯基-1-(2-(吡啶-3-基)哌啶-1-基)丙-1-酮(0.82g，2.7mmol)的溶液加入在DCM(20mL)中的EDC盐酸盐(0.78g，4.0mmol)和i-Pr2NEt(0.65mL，4.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(20mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H2O作为洗脱流动相，通过

进行纯化后得到3-丁酰氨基-N-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(2-(吡啶-3-基)哌啶-1-基)丙-2-基)苯甲酰胺，为淡黄色固体(0.64g，32％)MS(ESI，正离子)m/z：499.2(M+1)，以两种非对映异构体的混合物存在。

实施例62

3-丁酰氨基-N-((2S)-3-(萘-1-基)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺(化合物64)的合成

步骤1

向配备冷凝器的单颈圆底烧瓶(100mL)中依次加入3-(1-萘基)-L-丙氨酸(1.0g，4.6mmol)、邻苯二甲酸酐(0.7g，4.6mmol)和冰醋酸(10mL)。所得混合物回流4小时。在真空中完全除去溶剂，残留物从乙酸乙酯和己烷的混合物中析出，得到(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-(萘-1-基)丙酸(0.52g)，为米色固体。

步骤2

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-(萘-1-基)丙酸(0.52g，1.4mmol)在无水DCM(10mL)中的溶液中分批加入PCl₅(0.32g，1.6mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。通过旋转蒸发器完全除去所有挥发物，得到(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-(萘-1-基)丙酰氯，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤3

向(S)-2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-3-(萘-1-基)丙酰氯(0.5g，1.3mmol)在无水苯(10mL)中的溶液中缓慢加入(+/-)-新烟草碱(0.2g，1.3mmol)。将所得溶液在室温下搅拌过夜并用饱和NaHCO₃(10mL)淬灭。分离各层并且苯层用盐水洗涤、干燥并浓缩，得到2-((2S)-1-氧代-3-苯基-1-(2-(吡啶-3-基)-哌啶-1-基)丙-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮，为棕色固体(0.33g)，以两种非对映异构体的混合物存在，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤4

向2-((2S)-1-(3,6-二氢-[2.3'-联吡啶]-1(2H)-基)-3-(萘-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(0.33g)在EtOH(10mL)中的溶液加入一水合肼(0.1mL)。反应溶液回流3小时，所得悬浮液在室温下过滤。将滤液溶解在EtOAc和己烷的混合物中并放置过夜。滤出所得固体，浓缩滤液，得到(2S)-2-氨基-1-(3,6-二氢-[2,3'-联吡啶]-1(2H)-基)-3-(萘-1-基)丙-1-酮，为棕色油状物(0.38g)，以两种非对映异构体的混合物存在，其无需进一步纯化即可用于下一步。

步骤5

向3-丁酰氨基苯甲酸(0.21g，1.0mmol)和(2S)-2-氨基-1-(3,6-二氢-[2,3'-联吡啶]-1(2H)-基)-3-(萘-1-基)丙-1-酮(0.36g，1.0mmol)的溶液加入在DCM(10mL)中的EDC盐酸盐(0.28g，1.4mmol)和i-Pr2NEt(0.23mL，1.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜并用H₂O(10mL)淬灭。分离各层并且有机层用盐水洗涤、干燥并浓缩，在使用HP C18 Aq GOLD柱以MeCN/缓冲H2O作为洗脱流动相，通过

进行纯化后得到3-丁酰氨基-N-((2S)-3-(萘-1-基)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺，为黄色固体(0.19g)MS(ESI，正离子)m/z：547.2(M+1)，以两种非对映异构体的混合物存在。

与以上实施例62类似地进行，从相应的苯甲酸起始制备实施例63-64中的化合物。

实施例63：3-丁酰氨基-N-((2S)-3-(萘-2-基)-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为黄色固体(0.35g)。(化合物65)

MS(ESI，正离子)m/z：547.2(M+1)。

实施例64：3-丁酰氨基-N-((2S)-3-环己基-1-氧代-1-(6-(吡啶-3-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-基)丙-2-基)苯甲酰胺为黄色固体(0.06g)。(化合物66)

MS(ESI，正离子)m/z：503.3(M+1)。

生物实施例

实施例1

体外测定TNFα诱导的NF-κB活化的抑制作用

使用TNFα荧光素酶测定法测定本文公开的化合物抑制由TNFα诱导的NFkB活化的能力。HEK293/NF-κB荧光素酶细胞系通过pNFkB-luc载体与pHyg(Panomics，CA，USA)共转染，然后经潮霉素选择获得。HEK293/NFkB荧光素酶细胞在补充有10％胎牛血清、100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素/Fungizone和100μg/ml潮霉素B作为选择剂的DMEM培养基中生长。HEK293 NFκB荧光素酶细胞在T75培养瓶(Nunc^TM细胞培养处理的EasYFlasks^TM)中在37℃和5％CO₂下在细胞培养箱中生长。

在生物安全柜下用10ml无菌PBS(不含钙和镁)洗涤汇合的T75细胞培养瓶(每瓶约8-10百万个细胞)。用无菌玻璃移液管吸取PBS后，在室温下用1ml不含酚红的TrypLE^TMExpress(Gibco)覆盖细胞层(对于每个T75培养瓶)。孵育一分钟后，通过轻敲培养瓶的侧面将HEK293机械重悬于TrypLE中。然后用10ml预热的完全培养基重悬细胞并转移到锥形管中。细胞在室温下以4000rpm(1000g)离心5分钟。用24ml预热的细胞培养基重悬细胞沉淀，并使用多道移液器将200ml细胞悬液(每孔约80,000个细胞)铺板于96孔细胞培养板(Costar#3599，Corning，NY，USA)的每个孔中，并反向移液以防止气泡形成。铺板后，细胞在处理前在细胞培养箱中保持过夜。对于每个96孔细胞培养板，8个孔用作“对照孔”(仅加入培养基)并且向8个孔中仅加入TNFα。在存在和不存在(对照条件)的不同剂量范围的待测化合物的情况下，用25ng/ml TNF-α激发NF-κB荧光素酶报告细胞系4小时。对于每种化合物，重复四次测试浓度的剂量范围并用于确定IC₅₀。

根据制造商(Invitrogen)和BioTek Synergy HT读板器(BioTek Instruments,VT,USA)的说明，使用

Extended-Glow荧光素酶报告基因测定系统通过化学发光监测荧光素酶活性。下表3中提供了对于所示编号的化合物的IC₅₀，即NF-κB活化降低50％时的浓度。

表3

实施例2

使用小鼠急性LPS炎症模型的体内模型测定抗炎活性

本文公开的化合物减轻炎症的能力通过使用上述小鼠模型在体内测定。可以在各种组织(例如，血浆、脑、肠、脾、肺等)中评价化合物对LPS诱导的促炎细胞因子产生的影响。成年C57Bl6/J野生型小鼠用于评估本文公开的化合物(“测试”化合物)对腹腔注射LPS(脂多糖)[来自大肠杆菌O111:B4的LPS，Sigma-Aldrich#L4391]诱导的细胞因子产生的影响。在接受LPS(溶解在无菌PBS中1mg/Kg(腹腔注射))处理之前，将小鼠随机分组至安慰剂/对照组，它们接受腹腔(IP)注射用于溶解测试化合物的溶媒(50％PEG4000/50％DMSO)，和分组至处理组(IP接受20mg/Kg的测试化合物)。在注射LPS前15分钟向小鼠注射测试化合物或溶媒。

然后在腹腔注射LPS后四小时对小鼠实施安乐死。安乐死后，使用EDTA作为抗凝剂，通过心内穿刺收集血液。血液立即以1500g离心4分钟，收集血浆并在液氮中快速冷冻。快速解剖所有其他组织并在液氮中快速冷冻。样品在-80℃下储存。

组织匀浆通过在冰冷的M-PER试剂(Pierce Biotechnology，Rockford，IL，USA)中进行超声处理来制备，该试剂含有1mM苯甲磺酰氟、1X蛋白酶混合物抑制剂(Roche，Inc.，USA)和1mM原钒酸钠(Sigma-Aldrich,MO,USA)。使用来自V-Plex测定试剂盒Pro-Inflammatory Panel 1(小鼠)试剂盒(Mesoscale discovery，USA)的MULTI-SPOT板，通过电化学发光对细胞因子进行定量。所有LPS处理的样品均用试剂盒中的稀释剂41稀释10倍，对照样品未经稀释进行测定。与对照组相比，处理组产生的促炎细胞因子干扰素-γ、IL-1β和TNFα的量较少。

制剂实施例

以下是含有本公开内容的化合物的代表性药物制剂。

片剂制剂

将以下成分充分混合并压制成单刻痕片剂。

胶囊制剂

将以下成分充分混合并装入硬壳明胶胶囊中。

注射剂

本公开内容的化合物(例如，化合物1)在DI水中的2％HPMC、1％吐温80中，pH 2.2，含MSA，q.s.至少20mg/mL

吸入组合物

为了制备用于吸入递送的药物组合物，将20mg本文公开的化合物与50mg无水柠檬酸和100mL 0.9％氯化钠溶液混合。将混合物并入适合吸入给药的吸入递送单元，诸如雾化器。

局部凝胶组合物

为了制备药用局部凝胶组合物，将100mg本文公开的化合物与1.75g羟丙基纤维素、10mL丙二醇、10mL肉豆蔻酸异丙酯和100mL纯化醇USP混合。然后将所得凝胶混合物并入适合局部给药的容器，诸如管中。

眼用溶液组合物

为了制备眼用溶液组合物，将100mg本文公开的化合物与0.9g NaCl在100mL纯化水中混合并使用0.2微米过滤器过滤。然后将所得等渗溶液并入适合眼科给药的眼科递送单元，诸如滴眼液容器。

鼻喷雾液

为了制备药物鼻喷雾液，将10g本文公开的化合物与30mL0.05M磷酸盐缓冲溶液(pH 4.4)混合。将溶液置于鼻腔给药器中，每次施用可提供100ul喷雾。

权利要求书(按照条约第19条的修改)

1.式(I)化合物：

其中：

n为0、1或2；

虚线是任选的键；

R¹是氢或烷基；

R²是氢或烷基；

R⁴是氢或烷基；以及

其药学上可接受的盐。

2.根据权利要求1的化合物，其中所述化合物具有结构(IA)：

3.根据权利要求1的化合物，其中所述化合物具有结构(IB)：

4.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中n为1、2或3。

5.根据权利要求1-4中任一项的化合物，其中n为1。

6.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中n为0或2。

7.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中n为0。

8.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中n为2。

9.根据权利要求1-8中任一项的化合物，其中R⁴是氢或烷基并且R⁵是-C(O)R⁶，其中R⁶是烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、环烷基、或杂环烷基，其中芳基或杂芳基本身或作为芳烷基或杂芳烷基的一部分任选取代有R^g、R^h和/或Rⁱ，它们独立地选自烷基、烷氧基、氨基烷氧基、羟基烷氧基、烷氧基烷氧基、环烷氧基、环烷基烷氧基、任选取代的芳烷氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂环烷氧基、任选取代的杂环烷基烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、羟基、羧基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰基氨基和磺酰氨基。

10.根据权利要求9的化合物，其中R⁵是芳基或杂芳基，其任选取代有R^g、R^h和/或Rⁱ。

11.根据权利要求9的化合物，其中R⁵是芳烷基或杂芳烷基，其任选取代有R^g、R^h和/或Rⁱ。

12.根据权利要求9的化合物，其中R⁵是苯基，其任选取代有R^g、R^h和/或Rⁱ。

13.根据权利要求1至12中任一项的化合物，其中R^g是烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、或氰基，并且R^h和Rⁱ独立地选自烷基、烷氧基、氨基烷氧基、羟基烷氧基、烷氧基烷氧基、环烷氧基、环烷基烷氧基、任选取代的芳烷氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂环烷氧基、任选取代的杂环烷基烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、羟基、羧基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、酰基氨基、或磺酰氨基。

14.根据权利要求1至12中任一项的化合物，其中R^g、R^h和Rⁱ独立地选自烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、羟基、氨基、酰氨基，优选为甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氯、氟、三氟甲基、三氟甲氧基、羟基、乙酰氨基、丁酰氨基、和戊酰氨基。

15.根据权利要求1至8中任一项的化合物，其中R⁴和R⁵与它们所连接的氮原子一起形成5至7元杂环氨基环。

16.根据权利要求1至15中任一项的化合物，其中R¹和R²独立地为氢或甲基，优选为氢。

17.根据权利要求1至16中任一项的化合物，其中当R¹和R²均为烷基时，它们不与相同的环碳结合。

18.根据权利要求1至17中任一项的化合物，其中Het是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、喹啉基、异喹啉基、吡唑基、或吲哚基，每个环任选取代有R^a、R^b和R^c，它们独立地选自烷基、烷氧基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、羟基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、和烷氧基羰基。

19.根据权利要求1至17中任一项的化合物，其中R^a、R^b和R^c独立地选自甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氯、氟、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、氨基、甲基氨基或二甲基氨基。

20.根据权利要求1至17中任一项的化合物，其中Het是吡啶-3-基。

21.根据权利要求1至20中任一项的化合物，其中R³是氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、羟烷基、烷氧基烷基、硫代烷基、烷基硫代烷基、氨基烷基、酰基氨基烷基、羧烷基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、或杂芳烷基，其中芳基或杂芳基本身或在芳烷基和杂芳烷基中的芳基或杂芳基任选取代有R^d、R^e和/或R^f，它们独立地选自烷基、烷氧基、羟基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、羧基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、和二烷基氨基。

22.根据权利要求1至20任一项的化合物，其中R³是氢或烷基，优选为甲基、乙基、丙基、异丙基、仲丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基。

23.根据权利要求1至20中任一项的化合物，其中R³是芳烷基，其任选取代有R^d、R^e和/或R^f，优选R³是苄基或苯乙基，更优选为苄基，其任选取代有R^d、R^e和/或R^f，甚至更优选R³是苄基。

24.根据权利要求1至20中任一项的化合物，其中R³是环烷基烷基，其任选取代有R^d、R^e和/或R^f，优选R³是环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、或环己基甲基，它们任选取代有R^d、R^e和/或R^f。

25.根据权利要求1至20中任一项的化合物，其中R³是杂芳烷基(例如，噻吩基甲基、呋喃基甲基、吡啶基甲基、喹啉基甲基、异喹啉基甲基、吲哚基甲基、或吲唑基甲基)，其任选取代有R^d、R^e和/或R^f。

26.根据权利要求1至20中任一项的化合物，其中R³是羟烷基、烷氧基烷基、氨基烷基，优选R³是羟甲基、羟乙基、甲氧基甲基、甲氧基乙基、氨基甲基、或氨基丁基。

27.根据权利要求1至26中任一项的化合物，其中R³所连接的碳的立体化学为(S)。

28.根据权利要求1至26中任一项的化合物，其中R³所连接的碳的立体化学为(R)。

29.一种药物组合物，包含权利要求1-28中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。

30.一种治疗可通过抑制NF-κB活化治疗的疾病的方法，包括向有需要的患者给药权利要求29的药物组合物。

31.根据权利要求30的方法，其中所述疾病是炎性疾病。

32.根据权利要求31的方法，其中所述疾病选自自身免疫性疾病、疼痛、过敏、哮喘、慢性阻塞性肺病和脓毒症。

33.根据权利要求30的方法，其中所述疾病选自：类风湿性关节炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、多发性硬化症、哮喘、炎症性肠病、糖尿病、帕金森病、阿尔茨海默病、肌萎缩侧索硬化症、骨质疏松症、系统性红斑狼疮、慢性阻塞性肺病、囊性纤维化、中风、急性肾损伤、肾小球肾炎、银屑病、特应性皮炎、白塞病、肺结核、克罗恩病、结肠炎、Pagett病、胰腺炎、牙周炎、炎症性肺病、和狼疮性肾炎。

说明或声明(按照条约第19条的修改)

以下所附内容是根据PCT条约第19条修改的内容

国际局于2020年9月26日收到的有关权利要求书修改。

以新的权利要求第1-33项替换原始的权利要求第1-33项。

Claims

1.式(I)化合物：

其中：

n为0、1或2；

虚线是任选的键；

R¹是氢或烷基；

R²是氢或烷基；

R⁴是氢或烷基；以及

其药学上可接受的盐。

2.根据权利要求1的化合物，其中所述化合物具有结构(IA)：

3.根据权利要求1的化合物，其中所述化合物具有结构(IB)：

4.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中n为1、2或3。

5.根据权利要求1-4中任一项的化合物，其中n为1。

6.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中n为0或2。

7.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中n为0。

8.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中n为2。

20.根据权利要求1至17中任一项的化合物，其中Het是吡啶-2-基。

31.根据权利要求30的方法，其中所述疾病是炎性疾病。