CN113444675B - 一种干酪乳杆菌sf-l-12及其植物饮品和在卵巢保养中的应用 - Google Patents
一种干酪乳杆菌sf-l-12及其植物饮品和在卵巢保养中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种干酪乳杆菌SF‑L‑12及其植物饮品和在卵巢保养中的应用，干酪乳杆菌SF‑L‑12已于2020年10月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.20927，分类命名为干酪乳杆菌Lactobacillus casei，可用于制备养护卵巢的产品；干酪乳杆菌SF‑L‑12植物饮品的制备方法为以干酪乳杆菌SF‑L‑12对被发酵底物进行发酵，得到发酵液，然后使用调味料进行调味。该干酪乳杆菌SF‑L‑12具有良好的粘附力和胃肠道适应能力，且能够对卵巢起到养护作用。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种干酪乳杆菌SF-L-12及其植物饮品和在卵巢保养中的应用。
背景技术
现代社会生活越来越好，大家越来越追求健康生活，对于自身的身体保养越来越重视，尤其是女性在这方面更是重视。卵巢作是女性最重要的生殖器官，能分泌雌激素和孕激素。随着年龄的不断增大，卵巢功能逐渐衰退并产生萎缩，这会影响到女性的肤色容颜，出现皮肤松弛、斑点、缺乏弹性和光泽等皮肤问题；卵巢如果没有保养好的话，还会引起性生活障碍、衰老、更年期提前、各种妇科疾病等等。要延缓衰老、推迟早更，就要趁早保健和养护卵巢。
为了保养卵巢，盲目地服用一些对卵巢有好处的补品，反而会引起补过头的问题，使卵巢更不健康。
发明内容
针对盲目服用补品可能导致卵巢更不健康的问题，本发明提供一种干酪乳杆菌SF-L-12及其植物饮品和在卵巢保养中的应用，该干酪乳杆菌SF-L-12具有良好的粘附力和胃肠道适应能力，且能够对卵巢起到养护作用。
第一方面，本发明提供一种具有卵巢养护功能的干酪乳杆菌SF-L-12，已于2020年10月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.20927，分类命名为干酪乳杆菌Lactobacillus casei。
进一步的，所述干酪乳杆菌SF-L-12从阴道炎康复者粪便中分离筛选获得。
第二方面，本发明提供一种干酪乳杆菌SF-L-12在制备养护卵巢的产品中的应用。
进一步的，所述养护卵巢的产品为以干酪乳杆菌SF-L-12发酵制备的植物饮品。
第三方面，本发明还提供一种干酪乳杆菌SF-L-12植物饮品的制备方法，以干酪乳杆菌SF-L-12对被发酵底物进行发酵，得到发酵液，然后使用调味料进行调味，得到干酪乳杆菌SF-L-12植物饮品。
进一步的，所述制备方法包括如下步骤：
（1）混合被发酵底物，得混合浆料；
（2）将混合浆料高压灭菌，冷却至30～40℃，得到灭菌液；
（3）将干酪乳杆菌SF-L-12接种到MRS液体培养基中，在37℃下培养制备接种剂；
（4）将接种剂接种到灭菌液中，接种量为500~1000万cfu/mL，37℃发酵24~48h，得发酵液；
（5）发酵液添加调味料调味后经破壁、巴氏灭菌，得干酪乳杆菌SF-L-12植物饮品，破壁压力为20~60Mpa，该植物饮品可直接饮用。
进一步的，被发酵底物包括如下重量份的原料：净化水60~80份、胡萝卜汁5~10份、当归提取物0.1~5份、茯苓提取物0.1~5份、牡蛎提取物0.1~5份、百合提取物0.1~5份、橘皮提取物0.1~5份、桑葚提取物0.1~5份、亚麻籽提取物0.1~5份、黄精提取物0.1~5份、大豆提取物0.1~5份、红枣粉0.1~5份、山药粉0.1~5份。
优选的，被发酵底物包括如下重量份的原料：净化水70份、胡萝卜汁10份、当归提取物1份、茯苓提取物1份、牡蛎提取物1份、百合提取物1份、橘皮提取物2份、桑葚提取物2份、亚麻籽提取物0.5份、黄精提取物0.5份、大豆提取物0.5份、红枣粉0.25份、山药粉0.25份。
进一步的，调味料包括如下重量份的原料：益生元浓缩汁1~5份、水蜜桃浓缩汁1~5份。
优选的，调味料包括如下重量份的原料：益生元浓缩汁5份，水蜜桃浓缩汁5份。
本发明的有益效果在于：
本发明提供的干酪乳杆菌SF-L-12经过耐酸耐胆盐筛选，具有较强的稳定性，能够改善卵巢指数和血清生殖激素水平，对卵巢有一定的养护作用。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明中的技术方案，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
下述实施例所使用的MRS培养液包括以下组分：
10.0g牛肉膏，5.0g酵母膏，10.0g蛋白胨，20.0g葡萄糖，2.0g磷酸氢二钾，5.0g醋酸钠，0.2g七水硫酸镁，0.05g四水合硫酸锰，1.0g吐温80，2.0g柠檬酸三铵，加蒸馏水至1000mL。
下述实施例所使用的MRS培养基包括以下组分：
10.0g牛肉膏，5.0g酵母膏，10.0g蛋白胨，20.0g葡萄糖，2.0g磷酸氢二钾，5.0g醋酸钠，0.2g七水硫酸镁，0.05g四水合硫酸锰，1.0g吐温80，2.0g柠檬酸三铵，15.0g琼脂，加蒸馏水至1000mL。
下述实施例所使用的胡萝卜汁由胡萝卜榨汁获得。
下述实施例所使用的中药提取物由水蒸煮中药粉末获得，所述中药包括当归、茯苓、牡蛎、百合、橘皮、桑葚、亚麻籽、黄精、大豆和淫羊藿，中药与水的重量比为1：15，该方法能够将中药中的有效药物成分浸提出来。
下述实施例所使用的红枣粉由红枣去核烘干粉碎获得，山药粉由山药烘干粉碎获得。
下述实施例所使用的益生元浓缩汁购自山东龙力生物科技股份有限公司，水蜜桃浓缩汁购自山东佳美食品工业有限公司。
实施例1
①菌种来源：阴道炎康复者粪便。
②菌株的分离：
对样品做十倍梯度稀释，每个梯度取100μL均匀涂布于MRS培养基上，随后取出置于厌氧罐中，37℃厌氧培养过夜。次日可见培养基上长有形态大小各异的菌落，挑取若干乳酸菌的特征菌落作二代划线纯化处理，平板厌氧活化1天，得培养物，随后做菌株鉴定。
③16S rDNA序列的测定：
16S rDNA扩增引物使用的是27F：5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3'和1492R：5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'。产物委托有资质的第三方实验室进行Sanger测序。应用BLAST算法在GenBank数据库中把序列和16S rDNA基因进行比较。BLAST分析，表明菌株SF-L-12十分接近干酪乳杆菌（99%亲缘）。
16S rDNA检测结果：
GCTCAGGATGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAGTTCTCGTTGATGATCGGTGCTTGCACCGAGATTCAACATGGAACGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCTTAAGTGGGGGATAACATTTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAGATCCAAGAACCGCATGGTTCTTGGCTGAAAGATGGCGTAAGCTATCGCTTTTGGATGGACCCGCGGCGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGATGATACGTAGCCGAACTGAGAGGTTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGCAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTGGAGAAGAATGGTCGGCAGAGTAACTGTTGTCGGCGTGACGGTATCCAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCTCGGCTTAACCGAGGAAGCGCATCGGAAACTGGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAATGCTAGGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTTTTGATCACCTGAGAGATCAGGTTTCCCCTTCGGGGGCAAAATGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATGACTAGTTGCCAGCATTTAGTTGGGCACTCTAGTAAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAACGAGTTGCGAGACCGCGAGGTCAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGACTGTAGGCTGCAACTCGCCTACACGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCGAAGCCGGTGGCGTAACCCTTTTAGGGAGCGAGCCGTCTAAGGTGGGACAAATGATTAGGGTGAAGTCG。
实施例2 干酪乳杆菌SF-L-12的粘附特性
将干酪乳杆菌SF-L-12按1%的接种量接种于MRS培养液中，37℃培养12h，发酵菌液8000r/min离心15min，除去上清液，收集沉淀的菌体，将菌体和RPMI-1640细胞培养基重混合，使干酪乳杆菌SF-L-12浓度达到108CFU/mL。将制备完成的菌悬液加入到24孔平板中，每孔1mL，将24孔细胞培养板在5%CO2、95%空气的CO2培养箱中37℃培养3h，吸出未粘附的菌悬液，用磷酸盐缓冲液冲洗5次，除去未粘附的菌体，然后加入含有柠檬酸盐缓冲液重悬，接种于MRS培养基，37℃恒温厌氧培养，2天后按照GB4789.35方法统计剩余活菌数。
对比菌株为：干酪乳杆菌LC01、干酪乳杆菌代田株和L. casei Zhang，其中L.casei Zhang为行业内公认的高粘附力干酪乳杆菌种标品，上述菌种均来源于开放的菌种保藏库，能够在市面上购买得到。分别对对比菌株进行上述相同处理，2天后采用相同方法统计剩余活菌数。
结果如下表1所示，可以看出，本发明干酪乳杆菌SF-L-12粘附力有较明显优势。
表1 粘附特性测试结果
实施例3 干酪乳杆菌SF-L-12的胃肠道适应能力
（1）模拟胃液的配置：将胃蛋白酶溶于灭菌的生理盐水（0.9%w/v，pH值为3.0），使胃蛋白酶终浓度为3g/L，以0.22μm无菌滤膜过滤，现配现用；
（2）模拟肠液的配置：将胰蛋白酶溶于灭菌的生理盐水（0.9%w/v，pH值为8.0），使胰蛋白酶终浓度为1g/L，并加入胆盐使胆盐终浓度为0.3%。以0.22μm无菌滤膜过滤，现配现用；
（3）分别将干酪乳杆菌LC01、干酪乳杆菌代田株和干酪乳杆菌SF-L-12连续活化三代（每代18h），测定连续活化三代的菌株在A600下的OD值，通过计算求出OD5所需的菌液量；
（4）将OD5的菌液以8000G离心10min，弃上清，重悬于1mL模拟胃液中，37℃培养3h后进行平板活菌计数；
（5）取模拟胃液处理后的菌液8000G离心10min，弃上清，重悬于等体积的模拟肠液中，37℃培养4h后进行平板活菌计数。
按照如下公式计算各菌株的耐受胃肠液后的存活率，分析各菌株的胃肠道适应能力。
耐受胃肠液后的存活率（%）＝（耐受模拟肠液后菌液中的活菌数/菌液中的原始活菌数）×100%。
结果如下表2所示，可以看出，本发明干酪乳杆菌SF-L-12较其他菌株胃肠适应能力更强。
表2 胃肠道适应能力测试结果
实施例4干酪乳杆菌SF-L-12植物饮品的制备
（1）将净化水、胡萝卜汁、当归提取物、茯苓提取物、牡蛎提取物、百合提取物、橘皮提取物、桑葚提取物、亚麻籽提取物、黄精提取物、大豆提取物、红枣粉、山药粉按照70：10：1：1：1：1：2：2：0.5：0.5：0.5：0.25：0.25的重量比进行混合，得混合浆料；
（2）将混合浆料输送至灭菌容器中于120℃下高压灭菌30min，然后冷却至30℃得到灭菌液；
（3）将干酪乳杆菌SF-L-12接种到MRS液体培养基中，接种量为1%，在37℃下培养18h制备接种剂；
（4）将接种剂接种到灭菌液中，接种量为1000万cfu/mL，37℃发酵48h，得发酵液；
（5）将发酵液添加益生元浓缩汁和水蜜桃浓缩汁（步骤（1）中水与步骤（5）益生元浓缩汁和水蜜桃浓缩汁的重量比为70：5：5）调味后，输送至高压喷雾破壁机中于40Mpa压力下破壁，然后经巴氏灭菌，得干酪乳杆菌SF-L-12植物饮品。
实施例5 干酪乳杆菌SF-L-12的卵巢养护作用
1、试验对象：
性成熟SD大鼠40只（未孕未产），SPF级，体重200-240g，8~9周龄。试验前3天对大鼠进行检疫，期间每天检査大鼠1次，如发现不健康的大鼠立即剔除，选用健康大鼠进行试验。
饲养条件：每箱5~6只，饲养温度为20~26℃，相对湿度为40%~70%，釆用10h：14h昼夜间断照明，饲养期间自由进食、饮水。
2、试验方法：
2.1分组、造模与给药
将纳入试验的大鼠（共32只）适应性饲养3天后，随机分为正常组、模型组、淫羊藿组和试验组，每组8只。除正常组外，其余各组大鼠每天上午于后下肢肌注一次氢化可的松注射液[32mg/(kg·d)]复制卵巢早衰（POF）模型，连续注射12天。成模后，正常组和模型组大鼠饲喂纯净水，淫羊藿组饲喂淫羊藿提取液［1g/(kg·d)］，试验组饲喂实施例4制备的植物饮品［1g/(kg·d)］，每天上午、下午各饲喂1次，连续14天。
2.2一般情况观察
造模和给药期间，每天观察并记录大鼠体形、被毛、皮肤、粪便、肌肉张力、步态、精神、呼吸、进食等情况，同时观察是否出现外生殖器潮湿、阴道口变大、触之兴奋等反应，以及注射部位是否有溃疡创面形成等情况。并且每5天称量大鼠体重1次，每周测量大鼠摄食量1次。
2.3动情周期检查
从造模第1天起，每天上午取大鼠进行连续阴道涂片，性周期消失或紊乱可确定造模成功。涂片后在光镜下观察，根据阴道细胞形态判断大鼠动情周期。
动情前期：光镜下以椭圆形有核上皮细胞占多数，白细胞和角质化上皮细胞很少；
动情期：以片状角化上皮细胞为主，白细胞和有核上皮细胞很少；
动情后期：片状角质化上皮细胞、有核上皮细胞和白细胞3种细胞均有，且比例无明显异常；
动情间期：白细胞占绝大多数，有核上皮细胞和角质化上皮细胞很少。
2.4血清中生殖相关激素水平及脏器指数检测
末次给药后24h，大鼠腹主动脉釆血，离心。取血清，采用放射免疫法按照相应试剂盒说明书操作测定血清中E2、FSH、LH水平，并计算FSH占LH的百分比（FSH/LH×100%）。釆血后处死大鼠，取子宫及双侧卵巢，洗净后分别称定脏器湿质量，根据公式：脏器指数=脏器湿质量（mg）/体重（100g）计算脏器指数。
2.5统计学方法
釆用SPSS 21.0统计软件进行结果分析。计量资料以x±s表示，若数据符合或转换后符合正态分组和方差齐性检验，组间比较采用单因素方差分析；若数据经转换后仍不符合正态分布和方差齐性检验，组间比较则采用秩和检验。计数资料釆用卡方检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
3、结果：
3.1一般情况
造模大鼠在首次注射氢化可的松约1h后均出现精神萎靡、蜷缩、活动减少、嗜睡等症状。持续注射氢化可的松至12天后，大鼠精神萎靡、蜷缩、怕冷等症状明显加重，出现竖毛、毛无光泽、饮食减少、体重降低、拱背少动、反应迟钝、呼吸深迟的症状，并伴有外生殖器潮湿、阴道口变大、触之兴奋等动情期反应。
3.2体重和摄食量
造模前，各组大鼠体重差异均无统计学意义（P>0.05）。模型组大鼠在造模6天后体重较正常组显著降低，在造模期间以及给药1周后摄食量较正常组显著减少（P<0.05）；给药2周后摄食量较正常组差异无统计学意义（P>0.05）。淫羊藿组和试验组大鼠在造模和给药期间体重和摄食量较模型组差异均无统计学意义（P>0.05）。各组大鼠不同时期体重测定结果见表3、摄食量测定结果见表4。
表3 各组大鼠不同时期的体重表（单位：g）
注：与正常组比较，*P<0.05；**P<0.01。
表4 各组大鼠不同时期的采食量表（单位：g）
注：与正常组比较，*P<0.01。
3.3动情周期
造模结束后，大鼠均发生动情周期紊乱现象，全部造模成功。给药1周后，淫羊藿组和试验组大鼠动情周期紊乱现象有所改善，但较模型组差异无统计学意义（P>0.05）。给药2周后，淫羊藿组和试验组大鼠较模型组动情周期紊乱情况明显好转（P<0.05）。各组大鼠不同时期动情周期测定结果见表5。
表5 各组大鼠不同时期动情周期结果（单位：%）
注：与正常组比较，*P<0.05；**P<0.01；与模型组比较，#P<0.05。
3.4血清生殖激素水平
与正常组比较，模型组大鼠血清中E2水平降低，FSH、LH水平及FSH/LH比值升高（P<0.05）。与模型组比较，淫羊藿组大鼠血清中E2、FSH水平升高，LH水平及FSH/LH比值降低（P<0.05或P<0.01），试验组大鼠血清中E2水平升高，FSH、LH水平以及FSH/LH比值降低（P<0.05或P<0.01），且试验组与淫羊藿作用效果相当。各组大鼠血清生殖激素水平测定结果见表6。
表6 各组大鼠血清生殖激素水平结果
注：与正常组比较，*P<0.05；**P<0.01；与模型组比较，#P<0.05，##P<0.01。
模型组大鼠卵巢指数、子宫指数均低于正常组，其中卵巢指数差异有统计学意义(P<0.01)。各给药组大鼠卵巢指数均高于模型组（P<0.01）；子宫指数均低于模型组，但差异无统计学意义（P>0.05）。各组大鼠卵巢、子宫指数测定结果见表7。
表7各组大鼠卵巢、子宫指数结果（单位：mg/100g）
注：与正常组比较，*<0.01；与模型组比较，#P<0.01。
4、讨论
本实施例选择淫羊藿为阳性对照，淫羊藿是公认的经典温补肾阳的中药，性温，味辛、甘，归肝、肾经，具有温补肾阳、驱风除湿之功。在现代治疗卵巢早衰的使用频率最高的前10名中药中，补肾阳药淫羊藿排名第6位。
本实施例通过长时间、大剂量给予外源性糖皮质激素，抑制垂体促肾上腺皮质激素释放，使肾上腺皮质分泌类固醇激素减少，从而使大鼠出现一系列耗竭现象，形成肾阳虚证POF模型，影响动情周期。不孕症卵巢体积（MOV）及基础窦卵泡数（AFC）与年龄成反比，MOV与卵巢指数相关，能反映卵巢功能。本实验中，造模后大鼠的卵巢指数明显降低，给予干酪乳杆菌SF-L-12益生菌饮料后卵巢指数又升高，这说明干酪乳杆菌SF-L-12对肾阳虚证大鼠卵巢有较好的促进生长和修复作用。造模2周后，因没有持续刺激，大鼠摄食量略有增多、体重缓慢恢复增长，肾阳虚证得到改善。
FSH、LH是垂体分泌的促性腺激素，FSH、LH水平升高是POF的早期变化，FSH/LH比值升高说明卵巢功能下降，基础FSH/LH比值能敏感反映卵巢储备功能状态。本实施例相关指标的变化均符合肾阳虚证POF模型特征，表明造模成功。在给药后，与模型组比较，试验组和淫羊藿组大鼠血清中E2水平明显升高、LH水平和FSH/LH比值明显降低，说明类酪乳杆菌SF-L-12和淫羊藿有养护卵巢、补肾阳的功效。从FSH水平来看，试验组略优于淫羊藿组。在造模和给药期间，模型组大鼠的体重和摄食量均低于正常组，说明肾阳虚影响脾阳虚、脾主肌肉四肢，从而影响了脾胃功能，表现为摄食量和体重减少。淫羊藿组、试验组大鼠的体重和摄食量虽从数值上略优于模型组，但差异均无统计学意义。这可能与给药时间不够长，虽有一定药效改善脾肾阳虚状态，但灌胃液占据一定胃部空间影响进食量，以及大鼠有较强的自愈能力相关。
尽管通过优选实施例的方式对本发明进行了详细描述，但本发明并不限于此。在不脱离本发明的精神和实质的前提下，本领域普通技术人员可以对本发明的实施例进行各种等效的修改或替换，而这些修改或替换都应在本发明的涵盖范围内/任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 山东向日葵生物工程有限公司
<120> 一种干酪乳杆菌SF-L-12及其植物饮品和在卵巢保养中的应用
<130> 2021
<160> 3
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 1
agagtttgat cmtggctcag 20
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 2
ggttaccttg ttacgactt 19
<210> 3
<211> 1504
<212> DNA
<213> Lactobacillus casei
<400> 3
gctcaggatg aacgctggcg gcgtgcctaa tacatgcaag tcgaacgagt tctcgttgat 60
gatcggtgct tgcaccgaga ttcaacatgg aacgagtggc ggacgggtga gtaacacgtg 120
ggtaacctgc ccttaagtgg gggataacat ttggaaacag atgctaatac cgcatagatc 180
caagaaccgc atggttcttg gctgaaagat ggcgtaagct atcgcttttg gatggacccg 240
cggcgtatta gctagttggt gaggtaatgg ctcaccaagg cgatgatacg tagccgaact 300
gagaggttga tcggccacat tgggactgag acacggccca aactcctacg ggaggcagca 360
gtagggaatc ttccacaatg gacgcaagtc tgatggagca acgccgcgtg agtgaagaag 420
gctttcgggt cgtaaaactc tgttgttgga gaagaatggt cggcagagta actgttgtcg 480
gcgtgacggt atccaaccag aaagccacgg ctaactacgt gccagcagcc gcggtaatac 540
gtaggtggca agcgttatcc ggatttattg ggcgtaaagc gagcgcaggc ggttttttaa 600
gtctgatgtg aaagccctcg gcttaaccga ggaagcgcat cggaaactgg gaaacttgag 660
tgcagaagag gacagtggaa ctccatgtgt agcggtgaaa tgcgtagata tatggaagaa 720
caccagtggc gaaggcggct gtctggtctg taactgacgc tgaggctcga aagcatgggt 780
agcgaacagg attagatacc ctggtagtcc atgccgtaaa cgatgaatgc taggtgttgg 840
agggtttccg cccttcagtg ccgcagctaa cgcattaagc attccgcctg gggagtacga 900
ccgcaaggtt gaaactcaaa ggaattgacg ggggcccgca caagcggtgg agcatgtggt 960
ttaattcgaa gcaacgcgaa gaaccttacc aggtcttgac atcttttgat cacctgagag 1020
atcaggtttc cccttcgggg gcaaaatgac aggtggtgca tggttgtcgt cagctcgtgt 1080
cgtgagatgt tgggttaagt cccgcaacga gcgcaaccct tatgactagt tgccagcatt 1140
tagttgggca ctctagtaag actgccggtg acaaaccgga ggaaggtggg gatgacgtca 1200
aatcatcatg ccccttatga cctgggctac acacgtgcta caatggatgg tacaacgagt 1260
tgcgagaccg cgaggtcaag ctaatctctt aaagccattc tcagttcgga ctgtaggctg 1320
caactcgcct acacgaagtc ggaatcgcta gtaatcgcgg atcagcacgc cgcggtgaat 1380
acgttcccgg gccttgtaca caccgcccgt cacaccatga gagtttgtaa cacccgaagc 1440
cggtggcgta acccttttag ggagcgagcc gtctaaggtg ggacaaatga ttagggtgaa 1500
gtcg 1504
Claims (8)
1.一种具有卵巢养护功能的干酪乳杆菌SF-L-12，其特征在于，干酪乳杆菌SF-L-12已于2020年10月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.20927，分类命名为干酪乳杆菌Lactobacillus casei。
2.一种如权利要求1所述的干酪乳杆菌SF-L-12在制备养护卵巢的产品中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述养护卵巢的产品为以干酪乳杆菌SF-L-12发酵制备的植物饮品。
4.一种干酪乳杆菌SF-L-12植物饮品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）混合被发酵底物，得混合浆料；
（2）将混合浆料高压灭菌，冷却得到灭菌液；
（3）将如权利要求1所述的干酪乳杆菌SF-L-12接种到MRS培养液中，在37℃下培养制备接种剂；
（4）将接种剂接种到灭菌液中，接种量为500~1000万cfu/mL，37℃发酵24~48h，得发酵液；
（5）发酵液添加调味料调味后经破壁、巴氏灭菌，得干酪乳杆菌SF-L-12植物饮品。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，被发酵底物包括如下重量份的原料：净化水60~80份、胡萝卜汁5~10份、当归提取物0.1~5份、茯苓提取物0.1~5份、牡蛎提取物0.1~5份、百合提取物0.1~5份、橘皮提取物0.1~5份、桑葚提取物0.1~5份、亚麻籽提取物0.1~5份、黄精提取物0.1~5份、大豆提取物0.1~5份、红枣粉0.1~5份、山药粉0.1~5份。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，被发酵底物包括如下重量份的原料：净化水70份、胡萝卜汁10份、当归提取物1份、茯苓提取物1份、牡蛎提取物1份、百合提取物1份、橘皮提取物2份、桑葚提取物2份、亚麻籽提取物0.5份、黄精提取物0.5份、大豆提取物0.5份、红枣粉0.25份、山药粉0.25份。
7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，调味料包括如下重量份的原料：益生元浓缩汁1~5份、水蜜桃浓缩汁1~5份。
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，调味料包括如下重量份的原料：益生元浓缩汁5份、水蜜桃浓缩汁5份。
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