CN112694989A - 一株副干酪乳杆菌x11及其组合物便秘复合制剂及乳制品 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食品微生物、生物医药技术领域，公开了一株副干酪乳杆菌X11、组合物、便秘复合制剂及奶制品，所述副干酪乳杆菌在中国典型培养物保藏中心，武汉大学保藏中心进行保藏，并获得保藏中心编号：CCTCC M 2020826。所述抗便秘组合物由副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11和魔芋葡甘露聚糖KGM组成；所述副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11和魔芋葡甘露聚糖KGM混合，比例为1:1～1:10。本发明提供的益生菌组合物具有优良的抗便秘效果，具有非常广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于食品微生物、生物医药技术领域，尤其涉及一株副干酪乳杆菌 X11、组合物、便秘复合制剂及奶制品。
背景技术
目前，便秘是一种以排便困难、排便次数减少及排便感觉不尽为主要临床表现的肠道疾病。近年来，随着社会压力的不断增大，便秘已成为全球高发性疾病，影响全球11％-20％的人口。长期便秘可导致肛裂、痔疮、直肠脱垂等肛肠疾病的发病率增高，严重便秘患者常伴失眠、焦虑、抑郁等，严重影响病人生活质量。由于便秘受到多种因素影响，发病确切机制尚未明确，依靠泄剂、抗便秘乳果糖等药物对便秘进行干预，虽见效快但易复发，无法从根源解决。因此寻找一种能够替代传统治疗方式的新途径具有重要现实意义，微生态疗法从全新的角度解决了传统治疗方式的多种弊端。研究发现便秘患者的肠道菌群不同于健康人，双歧杆菌属、乳杆菌属丰度下降，而一些潜在致病菌如产甲烷古细菌、梭菌的丰度增加，这些改变或许在一定程度上意味着肠道微生态系统的紊乱，肠道菌群失调同时又加重便秘症状。补充益生菌可以改善肠道菌群结构，调节体内代谢，缓解便秘。
魔芋葡甘露聚糖是一种复合性多糖，是已知植物多糖中黏度最大的天然高分子多糖，具有潜在的便秘缓解作用，但有关益生菌与魔芋葡甘露聚糖组合的便秘缓解物质目前未见报道。因此，筛选并开发优良的抗便秘益生菌+活性物质组合产品具有重要的研究意义和应用价值。
在目前已经公开的文献与专利或专利申请中，例如CN111466440A公开了一种可以用于改善便秘的复合菌株发酵乳；CN111493261A公开了一种可以用于改善便秘的复合菌固体饮料；CN111000109A公开了一种防治便秘的合生元固体饮料。针对上述背景技术中已有的实现方案，这些专利或专利申请的共同点都是应用多株混合菌种或菌与多种成分混合使用来预防或缓解便秘，而多种混合物的成分或其他潜在副作用仍不够明朗。
通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：有关益生菌与魔芋葡甘露聚糖组合的便秘缓解物质目前未见报道。原因在于能够与魔芋葡甘露聚糖复配的有效益生菌未被有效开发，同时有效益生菌与魔芋葡甘露聚糖的合理配比与组合效果及机制未被有效验证与探究。
解决以上问题及缺陷的难度为：缺乏有效的抗便秘益生菌株和有效抗便秘的益生菌与魔芋葡甘露聚糖协同效果的组合，缺乏抗便秘组合物的效果验证与机制揭示。
解决以上问题及缺陷的意义为：开发出能够有效缓解便秘的菌株与魔芋葡甘露聚糖组合物，揭示该组合物协同缓解便秘的机制，为临床便秘的缓解提供可靠的理论依据和有效的干预方式。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种抗便秘组合物、制备方法及应用、尤其涉及一种能够显著缓解便秘的副干酪乳杆菌X11+魔芋葡甘露聚糖组合物及其用途。
本发明是这样实现的，一株具备缓解便秘功能的副干酪乳杆菌Lactobacillusparacasei X11。
本发明的另一目的在于提供一种利用上述副干酪乳杆菌Lactobacillusparacasei X11制备的抗便秘组合物，其特征在于，所述抗便秘组合物由副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11和魔芋葡甘露聚糖KGM组成；
所述副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11和魔芋葡甘露聚糖KGM水溶液混合，重量比例为1:1～1:10。
本发明的另一目的在于提供一种利用上述的抗便秘组合物制备的缓解便秘的复合制剂。
本发明的另一目的在于提供一种利用上述的抗便秘组合物制备的缓解便秘的粉状和胶囊状复合制剂。
本发明的另一目的在于提供一种利用上述组合物制备的乳制品。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对本发明实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例提供的抗便秘组合物的制备方法流程图。
图2(a)是本发明实施例提供的Lactobacillus paracasei X11胃肠道存活能力评价中的表面疏水能力和自聚集能力示意图。
图2(b)是本发明实施例提供的Lactobacillus paracasei X11胃肠道存活能力评价中的耐酸能力和耐胆盐能力示意图。
图2(c)是本发明实施例提供的Lactobacillus paracasei X11胃肠道存活能力评价中的模拟胃液转运能力和模拟肠液转运能力示意图。
图3(a)是本发明实施例提供的5-8dpf内X11在斑马鱼肠道内的荧光变化观察示意图。
图3(b)是本发明实施例提供的5-8dpf内X11在斑马鱼肠道内的荧光变化半定量分析示意图。
图4是本发明实施例提供的Lactobacillus paracasei X11与KGM组合的不同干预对便秘斑马鱼肠蠕动频率的影响示意图。
图5(a)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对便秘斑马鱼肠组织5-HT 分泌影响的荧光观察示意图。
图5(b)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对便秘斑马鱼血液中5-HT 分泌影响的定量分析示意图。
图6是本发明实施例提供的不同浓度KGM对益生菌X11的体外生长影响示意图。
图7(a)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠粪便含水量的影响示意图。
图7(b)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠首粒黑便时间的影响示意图。
图7(c)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠胃肠道推进率的影响示意图。
图8(a)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠总酸的影响示意图。
图8(b)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠乙酸的影响示意图。
图8(c)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠丙酸的影响示意图。
图8(d)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠丁酸的影响示意图。
图8(e)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠戊酸的影响示意图。
图8(f)是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠异戊酸的影响示意图。
图9是本发明实施例提供的X11与KGM组合对普通便秘小鼠的5-HT水平影响示意图。
图10(a)是本发明实施例提供的X11+KGM对普通便秘小鼠5-HT4R的 mRNA水平影响示意图。
图10(b)是本发明实施例提供的X11+KGM对普通便秘小鼠SERT的mRNA 水平影响示意图。
图11(a)和图11(b)是本发明实施例提供的X11+KGM对普通便秘小鼠 5-HT4R的蛋白水平影响示意图。
图11(c)和图11(d)是本发明实施例提供的X11+KGM对普通便秘小鼠SERT 的蛋白水平影响示意图。
图12是Lactobacillus paracasei X11对便秘斑马鱼肠蠕动改善效果的示意图。
图13是魔芋葡甘露聚糖KGM对便秘斑马鱼肠蠕动改善效果的示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种抗便秘副干酪乳杆菌X11和魔芋葡甘露聚糖组合物制备方法及应用，下面结合附图对本发明作详细的描述。
本发明实施例提供的抗便秘组合物由副干酪乳杆菌Lactobacillus paracaseiX11和魔芋葡甘露聚糖KGM组成；副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11和魔芋葡甘露聚糖KGM水溶液混合，比例为1:1～1:10，浓度分别为109CFU/mL和 0.01g/mL组成。2020年12月02日Lactobacillus paracaseiX11已在中国典型培养物保藏中心——武汉大学保藏中心进行专利保藏，并获得保藏中心编号：CCTCC M 2020826。培养物名称及注明的鉴别特征为：副干酪乳杆菌X11和Lactobacillus paracasei X11。
本发明的副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11的基因序列为：
GAACGAGTTCTCGTTGATGATCGGTGCTTGCACCGAGATTCAACATGGAACGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCTTAAGTGGGGGATAACATTTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAG ATCCAAGAACCGCATGGTTCTTGGCTGAAAGATGGCGTAAGCTATCGCTTTTGGATGGACCCGCGGCG TATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGATGATACGTAGCCGAACTGAGAGGTTGATCG GCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATG GACGCAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTT GGAGAAGAATGGTCGGCAGAGTAACTGTTGTCGGCGTGACGGTATCCAACCAGAAAGCCACGGCTA ACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCG AGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCTCGGCTTAACCGAGGAAGCGCATCGGAAACT GGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGG AAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGGGTA GCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAATGCTAGGTGTTGGAGGGTTTCC GCCCTTCAGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACT CAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGA ACCTTACCAGGTCTTGACATCTTTTGATCACCTGAGAGATCAGGTTTCCCCTTCGGGGGCAAAATGAC AGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAAC CCTTATGACTAGTTGCCAGCATTTAGTTGGGCACTCTAGTAAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAG GTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTAC AACGAGTTGCGAGACCGCGAGGTCAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGACTGTAGGCTG CAACTCGCCTACACGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCACGCCGCGGTGAATACGTTCCC GGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCGAAGCCGGTGGCGTAACCCT TTTAGGGAGCGAGCCGTCTAATAGTGGCAATGGTTTG
如图1所示，本发明实施例提供的抗便秘组合物的制备方法包括以下步骤：
S101，Lactobacillus paracasei X11培养：将副干酪乳杆菌Lactobacillusparacasei X11接种到发酵罐的增菌MRS培养基中培养，得发酵液；
S102，Lactobacillus paracasei X11干燥：将Lactobacillus paracasei X11依次进行冷冻前预冷处理、预冻处理、主干燥处理及解析干燥处理，完成副干酪乳杆菌冻干产品的制备；
S103，Lactobacillus paracasei X11和KGM复合制剂的包装：将粉状副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11与KGM混合，得到复合粉剂或胶囊剂；
S104，Lactobacillus paracasei X11和KGM复合制剂的应用：将粉状副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11与KGM混合，合理配比乳、香蕉汁等，得风味乳制品。
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步的描述。
1、Lactobacillus paracasei X11特点的内容：
(1)菌株形态特征及生长特点
在兼性厌氧条件下，将液体菌株培养基按照10倍梯度稀释后，涂布到MRS 培养基上，放入培养箱37℃培养48h，选择整体圆形但边缘不整齐，乳白色，直径约为3-4mm，杆较为粗短的菌落。通过APICH50L生理生化试剂盒进行鉴定。
(2)生长状况
Lactobacillus paracasei X11，生长速度快，在10mL液体MRS培养基中，仅需30h便可达到稳定期，此时吸光度为1.40，菌体浓度达到1×109CFU/mL。
(3)对营养的要求
Lactobacillus paracasei X11对营养要求简单，在不需要其他生长的促进因子的普通MRS培养基中便可良好生长。
(4)对氧气的要求
Lactobacillus paracasei X11属于兼性厌氧，有无氧气均可良好生长。
(5)对培养温度的要求
Lactobacillus paracasei X11对于培养温度要求较低，适应范围较广，35-39℃均可生长，最适生长温度为37℃。
2、Lactobacillus paracasei X11功能性
(1)Lactobacillus paracasei X11具有优良的胃肠道生存能力
I具有优良的表面疏水性和自聚集能力
与模式菌株Bifidobacterium animalis 12(BB12)相比，X11的表面疏水能力达到86.68±0.23％，优于BB12的67.77±1.39％；自聚集能力达到97.56±0％，优于 BB12的93.98±0.06％，因此具有优良的黏附性(见图2a)。
II具有优良的耐酸耐胆盐能力
X11在pH为3.00的酸性环境中消化3小时后，不仅能够良好地存活，还能实现一定程度的增长，高达103.80±0.42％，优于BB12的101.53±0.03％；X11 在0.3％的胆盐性环境中消化4小时后，存活率高达85.08±0.47％，优于BB12 的69.03±0.91％(见图2b)。
III具有优良的耐受模拟胃肠液能力
X11在pH为3.00的模拟胃液环境中消化3小时后，存活率高达 99.91±0.09％，优于BB12的97.52±0.18％；之后转为pH为8.00的模拟肠液环境中消化8小时后，不仅能够良好存活，还能实现一定程度地增长，高达 103.77±0.01％，优于BB12的95.19±0.19％(见图2c)。
IV在斑马鱼肠道具有优良的滞留能力
以活体斑马鱼为模型，进一步评价X11的体内滞留能力。将菌株X11与荧光染料FITC结合，浸浴斑马鱼后，观察5-8dpf之间斑马鱼肠道荧光变化。从图 3可以看出，X11在5-6dpf时显示出清晰的荧光，尤其是前肠和中肠；在6-7dpf 时，斑马鱼前肠和中肠有清晰荧光，后肠的荧光逐渐减弱；在7-8dpf时斑马鱼前肠和中肠清晰可见，但整体荧光亮度与前一天相比逐渐降低(见图3a)。对图中荧光进一步半定量分析后，发现5-8dpf内X11在斑马鱼体内整体滞留性较好，5-6dpf下降趋势较快，6-7dpf下降趋势平缓，能够较好地滞留肠道内；7-8dpf 下降趋势较快。整体而言，X11在5-8dpf内都能较好地滞留在斑马鱼肠内(见图3b)。
(2)Lactobacillus paracasei X11+KGM对便秘斑马鱼具有良好的改善效果
选取实验室库存中已有的鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus GG为模式菌株，采用盐酸洛哌丁胺法构建便秘斑马鱼模型。施加菌株X11，LGG和阳性药物多潘立酮浸浴斑马鱼24h之后，通过肠道蠕动频率评价其促蠕动效果。与模型组相比，施加不同益生菌干预后，斑马鱼肠蠕动有不同程度的改善。与模型组相比，效果最好的依次是X11,LGG。其中X11的效果接近阳性药物，且与阳性药物无显著性差异，同时显著优于模式菌株LGG(p<0.01)(见图12)。
根据报道选取具有潜在抗便秘功能的活性物质--魔芋葡甘露聚糖KGM，通过便秘斑马鱼模型评价其促蠕动效果(见图13)。与模型组相比，施加活性物质魔芋葡甘露聚糖KGM干预后，便秘斑马鱼肠蠕动有很大程度的改善，与阳性药物效果接近。
将益生菌X11与活性物质魔芋葡甘露聚糖KGM组合后，进行促肠蠕动效果评价。施加KGM与X11组合，X11和KGM之后斑马鱼肠道蠕动频率均有所改善，其中X11接近阳性药物效果，KGM略低于阳性药物。当X11与KGM组合后，其组合效果不仅显著优于单物质效果，且显著优于阳性药物效果，对于斑马鱼肠道蠕动具有更好的改善效果(见图4)。
与模型组相比，施加了KGM与菌株X11、KGM、X11之后，斑马鱼肠道组织中的5-HT释放显著增加(见图5a)。与模型组相比，施加了KGM与菌株X11 组合、KGM、X11之后，斑马鱼血液中的5-HT表达水平显著增加，其中KGM与 X11组合中的5-HT的表达量最高(见图5b)。
(3)Lactobacillus paracasei X11联合魔芋葡甘露聚糖KGM具有良好的调控5-HT缓解小鼠便秘功能
I KGM组合X11具有良好的体外生长能力
选取不同浓度梯度的KGM 0.1mg mL-1、1mg mL-1、10mg mL-1和100mg mL-1与益生菌X11进行体外共培养48h，期间每隔2h测定一次菌体的生长浓度。X11和 X11与KGM组合物在30h左右达到稳定期，当KGM浓度达到100mg mL-1时，KGM 对X11的生长表现出明显的抑制作用。当KGM浓度小于10mg mL-1时，与单一菌株相比，添加KGM对X11的生长没有明显的抑制作用，因此KGM与X11共培养的最佳浓度范围在0.1-10mg mL-1之间(见图6)。
II Lactobacillus paracasei X11与魔芋葡甘露聚糖KGM组合具有良好的便秘改善效果
采用盐酸洛哌丁胺成功构建便秘小鼠模型后，进行为期17天的干预。干预结束后，与便秘模型组相比，X11+KGM有效促进了小鼠粪便含水量的增加，达到 57.34±0.43％(p＝0.022)，接近阳性药物水平60.17±3.35％(见图7a)。与便秘模型组相比，X11+KGM显著缩短了小鼠的首粒黑便排出时间，由179.75±5.85min缩短为123.00±10.68min(p<0.01)，接近阳性药物水平116.75±14.06min(见图7b)。与模型组相比，X11+KGM显著改善了便秘小鼠的肠道转运率，由48.23±13.22％提升为90.30±8.35％(p<0.01)，接近阳性药物水平91.26±5.73(见图7c)。
与正常小鼠相比，便秘导致小鼠体内总短链脂肪酸和各分型短链脂肪酸均显著降低。与模型组相比，KGM+X11可以显著提高便秘小鼠的总酸含量(p<0.01)，优于模式菌株LGG(p<0.01)，同时接近正常组水平(见图8a)。具体而言， KGM+X11显著提高了便秘小鼠体内乙酸，丙酸和丁酸的水平，效果优于LGG (p<0.01)，且接近正常水平(见图8b,c,d)。与此同时，KGM+X11干预后虽然戊酸水平也有所提高，且与LGG水平相当，但LGG的缓解便秘效果并不突出，因此戊酸并不是主要的便秘缓解成分(见图8e)；KGM+X11干预后异戊酸含量没有发生显著变化(见图8f)。因此，KGM+X11的干预可以显著提高便秘小鼠的乙酸、丙酸、丁酸和总酸水平。
与正常组小鼠相比，便秘小鼠体内的5-HT显著降低(p<0.01)。施加KGM+X11 干预后，小鼠体内的5-HT水平显著高于模型组，阳性药物组和LGG组(p<0.01)，说明KGM+X11能有效改善便秘小鼠的5-HT表达水平(见图9)。
小鼠发生便秘后，体内的5-HT4R和SERT基因表达量显著降低(见图10)。施加KGM+X11后可以显著提高便秘小鼠5-HT4R的基因表达水平，且优于模式菌株LGG，接近正常水平；同时，与模型组相比，施加KGM+X11干预后可以显著提高便秘小鼠SERT的基因表达水平，且优于模式菌株LGG，与正常组无显著性差异。小鼠产生便秘后，体内的5-HT4R和SERT蛋白表达量显著降低(见图11)。施加KGM+X11后可以显著提高便秘小鼠5-HT4R的蛋白表达水平，且优于模式菌株LGG，接近正常水平；同时，与模型组相比，施加KGM+X11干预后可以显著提高便秘小鼠SERT的蛋白表达水平，且优于模式菌株LGG，与正常组无显著性差异。根据上述研究结果，X11+KGM可以有效提高便秘小鼠的乙酸、丙酸、丁酸和总酸水平，从而刺激小鼠体内5-HT的表达水平，同时通过上调5-HT关键受体5-HT4R表达，增加SERT转运蛋白含量，从而实现5-HT通路对便秘的缓解作用。
3、产品与剂型
(1)抗便秘复合粉状制剂
粉剂是副干酪乳杆菌制品的一类。其生产最为便利，采用设备也最为简单。其也具有携带及使用方便的特点。该类产品主要以副干酪乳杆菌X11冻干菌粉为主，添加魔芋葡甘露聚糖和低聚果糖等食品原料及食品添加剂，混合均匀。产品可以不同的克重和活菌数进行规格的分类。
(2)抗便秘复合胶囊状制剂
胶囊剂也是副干酪乳杆菌制品的一类，其分为固体胶囊剂以及液体胶囊剂，固体胶囊剂，是将副干酪乳杆菌X11+魔芋葡甘露聚糖粉剂或者副干酪乳杆菌+ 魔芋葡甘露聚糖颗粒剂，经胶囊机制作成为胶囊产品；液体胶囊剂，是将副干酪乳杆菌菌粉+魔芋葡甘露聚糖粉与大豆油脂混合，通过胶囊剂制作成软胶囊产品。以上两种产品均可以不同的克重和活菌数进行规格的分类。
(3)抗便秘复合制剂在乳制品中的应用
本发明的副干酪乳杆菌X11可以在制备乳制品中使用，乳制品包括风味乳等。但本发明的乳制品不限于此，还包括其他形式的乳制品。本发明的各种乳制品可以通过将本发明的副干酪乳杆菌X11菌粉和魔芋葡甘露聚糖粉作为原料，按照本领域常规的方法，以常规的比例添加制成。
实施案例：副干酪乳杆菌X11与魔芋葡甘露聚糖复合型香蕉风味乳
一种香蕉风味乳饮料，由以下重量含量的原料制成：全脂奶粉2％，浓缩香蕉汁0.8％，白砂糖3％，增稠剂0.4％，甜味剂0.4％，酸度调节剂0.2％，食用盐 0.1-0.13％，食用香精0.02％。所述增稠剂为果胶，所述甜味剂为甜蜜素、安赛蜜和阿斯巴甜按1：1：1混合；所述酸度调节剂为柠檬酸和乳酸，按需要进行适量调节。
原料预处理全脂奶粉溶解于55℃的温水中，加入浓缩香蕉汁，搅拌均匀，于4℃条件下保存；配料加入发酵剂0.003％-0.01％和副干酪乳杆菌X11菌粉 0.003％-0.005％，魔芋多糖粉0.003％-0.05％，白砂糖搅拌至全部溶解，再加入调配好的增稠剂、甜味剂及食用盐，温度升至58℃，继续搅拌10min，最后加入酸度调节剂，搅拌均匀；采用真空脱气后，于120℃条件下杀菌6s；进行无菌灌装，灌装温度80-85℃。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
<110>中国海洋大学
<120>一株副干酪乳杆菌X11及其组合物便秘复合制剂及乳制品
<160>1
<210> 1
<211> 1450
<212> DNA
<213>人工序列(Artificial Sequence)
<400>1
gaacgagttctcgttgatgatcggtgcttgcaccgagattcaacatggaacgagtggcggacgggtgagtaacacgtgggtaacctgcccttaagtgggggataacatttggaaacagatgctaataccgcatagatccaagaaccgcatggttcttggctgaaagatggcgtaagctatcgcttttggatggacccgcggcgtattagctagttggtgaggtaatggctcaccaaggcgatgatacgtagccgaactgagaggttgatcggccacattgggactgagacacggcccaaactcctacgggaggcagcagtagggaatcttccacaatggacgcaagtctgatggagcaacgccgcgtgagtgaagaaggctttcgggtcgtaaaactctgttgttggagaagaatggtcggcagagtaactgttgtcggcgtgacggtatccaaccagaaagccacggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttatccggatttattgggcgtaaagcgagcgcaggcggttttttaagtctgatgtgaaagccctcggcttaaccgaggaagcgcatcggaaactgggaaacttgagtgcagaagaggacagtggaactccatgtgtagcggtgaaatgcgtagatatatggaagaacaccagtggcgaaggcggctgtctggtctgtaactgacgctgaggctcgaaagcatgggtagcgaacaggattagataccctggtagtccatgccgtaaacgatgaatgctaggtgttggagggtttccgcccttcagtgccgcagctaacgcattaagcattccgcctggggagtacgaccgcaaggttgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggtcttgacatcttttgatcacctgagagatcaggtttccccttcgggggcaaaatgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccttatgactagttgccagcatttagttgggcactctagtaagactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgacctgggctacacacgtgctacaatggatggtacaacgagttgcgagaccgcgaggtcaagctaatctcttaaagccattctcagttcggactgtaggctgcaactcgcctacacgaagtcggaatcgctagtaatcgcggatcagcacgccgcggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccatgagagtttgtaacacccgaagccggtggcgtaacccttttagggagcgagccgtctaatagtggcaatggtttg
Claims (8)
1.一株副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11，其特征在于，所述副干酪乳杆菌在中国典型培养物保藏中心，武汉大学保藏中心进行保藏，并获得保藏中心编号：CCTCC M2020826。
2.一种如权利要求1所述副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11在缓解便秘功能性食品中的用途。
3.一种如权利要求1所述副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11在缓解便秘医用益生菌中的用途。
4.一种利用权利要求1所述副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11制备的抗便秘组合物，其特征在于，所述抗便秘组合物由副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei X11和魔芋葡甘露聚糖KGM组成。
5.如权利要求4所述的抗便秘组合物，其特征在于，所述副干酪乳杆菌Lactobacillusparacasei X11和魔芋葡甘露聚糖KGM混合，比例为1:1～1:10。
6.一种利用权利要求4所述的抗便秘组合物制备的缓解便秘的复合制剂。
7.一种利用权利要求4所述的抗便秘组合物制备的缓解便秘粉状或胶囊状复合制剂。
8.一种利用权利要求2所述缓解功能性食品制备的缓解便秘乳制品。
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