CN113197868A

CN113197868A - 一种增效复方氟苯尼考颗粒

Info

Publication number: CN113197868A
Application number: CN202110511520.9A
Authority: CN
Inventors: 李思聪; 梁歌; 李旭廷; 王斌; 张敏; 李金良; 黄伟; 曹良
Original assignee: Sichuan Dingjian Animal Medicine Co ltd; SICHUAN ANIMAL HUSBANDRY SCIENCE RESEARCH INSTITUTE
Current assignee: Sichuan Dingjian Animal Medicine Co ltd; SICHUAN ANIMAL HUSBANDRY SCIENCE RESEARCH INSTITUTE
Priority date: 2021-05-11
Filing date: 2021-05-11
Publication date: 2021-08-03
Anticipated expiration: 2041-05-11
Also published as: CN113197868B

Abstract

本发明涉及兽药技术领域，具体涉及一种增效复方氟苯尼考颗粒，包括氟苯尼考、藁本提取物、载体，本发明将氟苯尼考与藁本联用，与单用氟苯尼考灌服相比，药动学参数结果发生明显变化，T_max减少、C_max增加，氟苯尼考的吸收速度和吸收程度均增加，t_1/2z增加、CL_z减少，氟苯尼考在鸡体内的代谢减缓，提高了氟苯尼考在体内的生物利用度，且本发明与传统兽药氟苯尼考比较，具有疗效显著、无效率低、有效率及显效率高的特点。

Description

一种增效复方氟苯尼考颗粒

技术领域

本发明涉及兽药技术领域，具体涉及一种增效复方氟苯尼考颗粒。

背景技术

氟苯尼考是畜禽专用的新型广谱抗菌药，在畜禽和水产动物的细菌性疾病防治中应用广泛，但是由于氟苯尼考的水溶性很差，动物服食后在机体内的吸收效果差，导致生物利用度低，治疗效果不佳，限制了其在制剂和临床上的应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种增效复方氟苯尼考颗粒，通过调节机体药物代谢酶以及转运体表达量及活性，提高氟苯尼考的生物利用度、从而提高其临床治疗效果。

本发明通过下述技术方案实现：包括如下各组分：氟苯尼考、藁本提取物、载体。

优选地，包括如下以重量计的各组分：氟苯尼考5％～20％、藁本提取物5％～10％、载体70％～90％。

优选地，所述载体由葡萄糖和可溶性淀粉组成。

优选地，包括如下以重量计的各组分：氟苯尼考5％～20％、藁本提取物5％～10％、葡萄糖35％～45％、可溶性淀粉35％～45％。

优选地，包括如下以重量计的各组分：氟苯尼考5％、藁本提取物10％，葡萄糖40％，可溶性淀粉45％。

优选地，包括如下以重量计的各组分：氟苯尼考20％、藁本提取物5％，葡萄糖40％，可溶性淀粉35％。

优选地，采用以下步骤制备：

S1：藁本提取物备用；

S2：按照配比称取S1中的藁本提取物、氟苯尼考、葡萄糖、可溶性淀粉，翻动混匀，整粒、总混、分装。

优选地，采用以下具体步骤制备：

S1：取藁本饮片干燥粉碎，加入相当于藁本8倍重量的乙醇溶液，60℃下提取2小时，重复提取过程2次，过滤，合并滤液，减压干燥得藁本提取物，备用；

S2：按照配比，称取重量为5％～10％的藁本提取物、5％～20％氟苯尼考、35％～45％葡萄糖、35％～45％可溶性淀粉，并依次加入到制粒机中，翻动搅拌均匀，整粒、总混、分装

本发明中，藁本在鸡体内抑制了空肠上药物外排转运体的表达量及活性，减少了氟苯尼考在空肠段的外排，从而增加了氟苯尼考的吸收，另外藁本可以抑制肝脏药物代谢酶细胞色素P4503A37(CYP3A37)、鸡外源性核受体(CXR)，和P-糖蛋白(P-gp)的表达含量及其活性，降低了氟苯尼考的代谢速率，从而增加了氟苯尼考血药浓度。

本发明与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：

本发明将氟苯尼考与藁本联用，与单用氟苯尼考灌服相比，药动学参数结果发生明显变化，T_max减少、C_max增加，氟苯尼考的吸收速度和吸收程度均增加，t_1/2z增加、CL_z减少，氟苯尼考在鸡体内的代谢减缓，提高了氟苯尼考在体内的生物利用度，且本发明的复方氟苯尼考颗粒能与传统兽药氟苯尼考比较，具有疗效显著、无效率低、有效率及显效率高的特点。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本发明实施例的进一步理解，构成本申请的一部分，并不构成对本发明实施例的限定。在附图中：

图1为实施例4中血浆中氟苯尼考浓度标准曲线图。

图2为实施例4中经步骤1.2处理得到的空白血浆样品的液相色谱图。

图3为实施例4中经步骤1.2处理得到的含氟苯尼考的血浆样品的液相色谱图，其中色谱峰1代表氟苯尼考，色谱峰2代表内标物。

图4为实验组与对照组鸡服用氟苯尼考不同时间后，两组鸡体内氟苯尼考的药时曲线图。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例和附图，对本发明作进一步的详细说明，本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明，并不作为对本发明的限定。

一种增效复方氟苯尼考颗粒，包括氟苯尼考、藁本提取物、载体，载体由葡萄糖和可溶性淀粉组成，各组分以重量计为：氟苯尼考5％～20％、藁本提取物5％～10％、葡萄糖35％～45％、可溶性淀粉35％～45％，其中葡萄糖为液体状，可溶性淀粉为粉剂，氟苯尼考为粉剂。

制备过程为：

(1)取藁本饮片干燥粉碎，加入乙醇溶液，提取，重复多次，过滤，合并滤液，减压干燥得藁本提取物，备用；

(2)按照配比，称取占配制量5％～10％的藁本提取物、5％～20％氟苯尼考、35％～45％葡萄糖、35％～45％可溶性淀粉，并依次加入到一步制粒机中，翻动搅拌时均匀，整粒、总混、分装。

以下以具体的实施例进行详细说明：

实施例1：

1、处方组成：氟苯尼考0.5kg、藁本提取物1kg，葡萄糖4kg，可溶性淀粉4.5kg。

2、制备方法：

(1)取藁本饮片干燥粉碎，加入质量分数为50％的乙醇溶液适量，60℃下提取2小时，重复提取过程2次，过滤，合并滤液，减压干燥得藁本提取物，备用；

(2)称取步骤(1)中制备的藁本提取物1kg、氟苯尼考0.5kg、葡萄糖4kg、可溶性淀粉4.5kg，并依次加入到一步制粒机中，翻动搅拌均匀，整粒、总混、分装，得到复方氟苯尼考颗粒。

3、服用方法：1日2次，疗程为3天。

实施例2：

1、处方组成：氟苯尼考2kg、藁本提取物0.5kg，葡萄糖4kg，可溶性淀粉3.5kg。

2、制备方法：

(2)称取步骤(1)中制备的藁本提取物0.5kg、氟苯尼考2kg、葡萄糖4kg、可溶性淀粉3.5kg，并依次加入到一步制粒机中，翻动搅拌均匀，整粒、总混、分装，得到复方氟苯尼考颗粒。

使用方法同上。

实施例3：

1、处方组成：氟苯尼考1kg、藁本提取物1kg，葡萄糖4kg，可溶性淀粉4kg。

2、制备方法：

(2)称取步骤(1)中制备的藁本提取物1kg、氟苯尼考1kg、葡萄糖4kg、可溶性淀粉4kg，并依次加入到制粒机中，翻动搅拌均匀，整粒、总混、分装，得到复方氟苯尼考颗粒。

使用方法同上。

实施例4：本发明制备的复方氟苯尼考颗粒在肉鸡体内的药动学研究

1、研究方法

1.1试验分组：将20只健康鸡随机分为2组，每组10只，分为试验组和对照组。

试验组灌服本发明的复方氟苯尼考颗粒，此颗粒中含重量为10％的氟苯尼考，此颗粒的灌服剂量为0.3g/kg，以氟苯尼考计灌服剂量为30mg/kg，此颗粒剂量为0.3g/kg，以氟苯尼考计单剂量为30mg/kg；对照组则给予含有相同含量的氟苯尼考单方颗粒，在灌服给药0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、10、12、24h后，对每只鸡服药不同时间后进行翅下静脉采集血液，于各个采血管中均加入EDTA抗凝，4000r/min，离心5min，分离血浆置于EP管中，置-20℃的冰箱中保存待用。

另外随机选一只健康鸡，对该健康鸡翅下静脉采集血液，于采血管中均加入EDTA抗凝，4000r/min，离心5min，分离血浆置于EP管中，得到空白血浆，置-20℃的冰箱中保存待用。

1.2样品的处理

分别取步骤1.1中得到的各鸡只血浆0.2mL于1.5mLEP管，作如下处理：每个EP管中加入10μL的500μg/mL的氯霉素内标液500μg/mL和800μL的乙酸乙酯溶液，涡动混合2min，4000r/min离心10min，吸取上层液，然后再加入乙酸乙酯800μL重复提取1次，合并两次的上层液，在40℃水浴中用氮气吹干仪氮气吹干，吹干后得到的残渣加入400μL流动相溶解，涡动混合2min，12000r/min离心10min，将上清液转移至进样瓶，取20μL进样，检测氟苯尼考的血药浓度。

同样取空白血浆0.2mL，于EP管中，除了不加入氯霉素内标液外，其余与试验组、对照组进行相同的处理。

1.3标准曲线的制备

分别取步骤1.1中的空白血浆180μL于8个EP管中，各自加入20μL的氟苯尼考系列标准溶液，配制成50、20、10、5.0、2.5、0.5、0.1、0.05μg/mL系列标准血浆样品，按以上步骤1.2中试验组、对照组的方法处理样品，以氟苯尼考与氯霉素峰面积的比值s对相应氟苯尼考浓度c作线性回归，求回归方程和相关系数，得出氟苯尼考在质量浓度为0.05～50μg/mL的范围内线性关系良好，回归方程为c＝0.0.0565x+0.0218，相关系数R²＝0.9997，标准曲线见附图1。

1.4色谱条件

色谱柱：安捷伦Agilen HC–C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为乙腈–水(27:73，V/V)；流速1.0mL/min；检测波长223nm；柱温40℃；进样量20μL。

1.5分析方法质量控制

以步骤1.3中的0.1μg/mL、2.5μg/mL、20μg/mL三个系列标准血浆样品，考察该研究方法的提取回收率和精密度，每个样品做5个重复，测得该研究方法回收率分别为(83.2±1.6)％、(84.1±2.3)％和(83.5±2.2)％，测得日内相对标准偏差RSD分别为4.6％、2.3％和6.1％，测定日间相对标准偏差RSD分别为4.5％、2.1％和6.2％；按信噪比S/N＝3计算，最低检测限为0.02μg/mL。

采用以上1.4的色谱条件，利用高效液相色谱仪，测定经步骤1.2处理的空白血浆样品、及步骤1.2中含有氟苯尼考的血浆样品，得到如附图2、附图3的液相色谱图，测得氟苯尼考的保留时间为12.8min，内标氯霉素的保留时间为17.2min，氟苯尼考与内标分离良好，且在步骤1.2的样品处理过程中，未引入干扰性杂质，内源性成分不干扰药物的分离测定，说明本研究方法具有较高的特异性，能准确测定血浆中的氟苯尼考的浓度，重现性好。

2、药动学参数测定

步骤1.1中的试验组、对照组鸡分别灌服复方氟苯尼考颗粒、氟苯尼考单方颗粒后(灌服氟苯尼考剂量均为30mg/kg)，取经步骤1.2处理的、对应服药后不同时间点得到的样品，进行氟苯尼考血药浓度检测，其血药浓度-时间曲线见图4所示，药动学参数见下表1，氟苯尼考的血药浓度-时间曲线按照步骤1.3-1.5的研究方法得到。

结果表明，试验组的药时曲线下面积AUC_(0-∞)为72.91±15.71mg/L·h，与对照组47.729±11.601mg/L·h相比显著增加(P<0.05)，半衰期t_1/2z为3.58±0.31h，与对照组2.52±0.255h相比显著增加(P<0.05)，达峰时间T_max为0.60±0.09h，与对照组1.25±0.141h相比显著降低(P<0.05)，清除率CL_Z为0.44±0.05L/h·kg，与对照组0.657±0.148L/h·kg相比显著降低(P<0.05)，对于表观分布容积Vz、达峰浓度C_max、平均驻留时间MRT_(0-∞)，试验组和对照组之间差异不显著。

表1试验组、对照组鸡体内的氟苯尼考药动学参数(

n＝10)

其中：*表示差异显著(P<0.05)。

从图4与表1中可以看出，与对照组相比，试验组鸡体内氟苯尼考的达峰时间T_max较对照组显著降低，降低达52％(P<0.05)，达峰浓度C_max较对照组提高71.03％(P<0.05)，提高显著，表明联用藁本后，氟苯尼考的吸收速度显著加快，吸收程度显著提高；试验组的半衰期t_1/2z较对照组提高42.06％(P<0.05)，清除率CLz降低33.03％(P<0.05)，表明联用藁本后，氟苯尼考在鸡体内代谢显著减缓；另外，试验组的药时曲线下面积AUC_0-∞较对照组增加52.76％(P<0.05)，表明氟苯尼考的生物利用度显著提高。

实施例5：本发明的复方氟苯尼考颗粒的临床治疗情况研究。

研究方法如下：

(1)准备药品

氟苯尼考颗粒，藁本提取物颗粒，本发明制得的复方氟苯尼考颗粒。

(2)试验动物

确诊被鸡白痢感染的、14日龄的青脚麻肉鸡458只，雌雄各半，所有试验动物均由专人饲养，并保持环境条件一致。

(3)试验动物分组

将以上确诊被鸡白痢感染的458只肉鸡，以鸡场分栏为单位分为4组，每组不低于100只，雌雄各半，为确保各组纳入病鸡的日龄、病情程度无显著性差异，对各组部分病鸡进行互换调整，每组试验鸡只以脚环的形式进行编号。

(4)给药

根据该药物推荐的临床给药剂量和兽药研究技术指导原则汇编，将以上为4个组定义为A、B、C、D组，A组为空白对照组，108只鸡，且不用药；B组为服用氟苯尼考颗粒组，114只鸡；C组为服用藁本提取物颗粒组，110只鸡；D组为服用本发明复方氟苯尼考颗粒组，126只鸡。

B组和D组分别按照每千克肉鸡体重给药0.25g，内服氟苯尼考颗粒和复方氟苯尼考颗粒，1日2次，连用3天；C组按照每只鸡5g的剂量，内服藁本提取物颗粒，1日2次，连用3天。

(5)临床症状赋分评价

根据各发病鸡临床症状，每日观察鸡群症状1次，连续观察14天，试验期末记录各组存活数；观察期间，主要进行腹泻情况观察、咳喘情况观察和神态与食欲观察；腹泻情况主要观察腹泻的方式和程度；咳嗽情况主要观察咳嗽的频率和程度；精神状态和食欲主要观察鸡是否喜欢活动，运动性如何以及进食情况，表2为临床症状赋分标准，表3为治疗前各组病鸡临床赋分，表4为治疗结束各组病鸡临床赋分。

表2临床症状赋分标准

表3治疗前各组病鸡临床赋分

表4治疗结束各组病鸡临床赋分

其中：*表示差异显著(P<0.05)。

由表3可知，各组试验鸡个体治疗前均有腹泻、精神状态欠佳等临床症状，通过精神状态、采食情况、腹泻情况等临床症状评分统计分析表明，各组在治疗前临床症状分值均无显著差异(P>0.05)。

由表4可知，各组经治疗后，临床症状分值统计分析结果表明，各组试验鸡的精神状态、采食情况及腹泻情况较治疗前均有一定的改善，但空白对照组的临床症状改善情况不及氟苯尼考颗粒组、藁本提取物颗粒组、复方氟苯尼考颗粒组，各项评分均未达到4分。

复方氟苯尼考颗粒组临床症状各项评分均在4分以上，且分值均明显高于空白对照组、藁本提取物颗粒组、氟苯尼考颗粒组的分值，且与空白对照组比较，复方氟苯尼考颗粒组的各项评分统计学差异显著(P<0.05)。

(6)治疗效果评价

参照农业部《临床试验技术规范(试行)》相关规定，观察记录本临床试验期间及结束时各组试验鸡个体比较，其疗效评价主要分为临床症状、防治效果，综合评价为显效、有效、无效，具体为：

显效：试验结束时，试验鸡只精神状态恢复正常，食欲状态恢复正常，无腹泻(临床症状各项评分赋分≥4分)，且临床症状各项评分显著高于空白对照组。

显效率＝(显效数/发病数)×100％

有效：试验结束时，试验鸡只经治疗后精神状态，食欲状态及腹泻状态均有一定恢复，各项指标优于空白对照组。

有效率＝(有效数/发病数)×100％

无效：用药后，试验鸡只精神状态、食欲情况、腹泻情况等与空白对照组相比较，均无提高或低于空白对照组。

无效率＝(无效数/发病数)×100％

表5为治疗结束后，各试验组的疗效评价结果：

表5治疗结束后疗效评价结果

根据表5治疗结束后的疗效评价结果可知，复方氟苯尼考颗粒组显效率达到85.71％，明显高于氟苯尼考颗粒组的显效率47.37％，也明显高于藁本提取物颗粒组的显效率54.55％；另外，复方氟苯尼考颗粒组无效率为4.76％，远远低于氟苯尼考颗粒组的无效率50.00％、藁本提取物颗粒组的无效率41.82％。

综合以上结果，在按照0.3g/kg体重、1日2次，连用3天内服复方氟苯尼考颗粒后，对鸡白痢具有较好的治疗效果，与传统兽药氟苯尼考相比，疗效显著，无效率低、有效率及显效率高。

以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方式而已，并不用于限定本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种增效复方氟苯尼考颗粒，其特征在于包括如下各组分：氟苯尼考、藁本提取物、载体。

2.如权利要求1所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒，其特征在于：包括如下以重量计的各组分：氟苯尼考5％～20％、藁本提取物5％～10％、载体70％～90％。

3.如权利要求1所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒，其特征在于：所述载体由葡萄糖和可溶性淀粉组成。

4.如权利要求2所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒，其特征在于：包括如下以重量计的各组分：氟苯尼考5％～20％、藁本提取物5％～10％、葡萄糖35％～45％、可溶性淀粉35％～45％。

5.如权利要求2所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒，其特征在于：包括如下以重量计的各组分：氟苯尼考5％、藁本提取物10％，葡萄糖40％，可溶性淀粉45％。

6.如权利要求2所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒，其特征在于：包括如下以重量计的各组分：氟苯尼考20％、藁本提取物5％，葡萄糖40％，可溶性淀粉35％。

7.如权利要求1-6任一所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒，其特征在于：采用以下步骤制备：

S1：藁本提取物备用；

8.如权利要求7所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒，其特征在于：采用以下具体步骤制备：

S2：按照配比，称取重量为5％～10％的藁本提取物、5％～20％氟苯尼考、35％～45％葡萄糖、35％～45％可溶性淀粉，并依次加入到制粒机中，翻动搅拌均匀，整粒、总混、分装。