CN113197868B - 一种增效复方氟苯尼考颗粒 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及兽药技术领域,具体涉及一种增效复方氟苯尼考颗粒,包括氟苯尼考、藁本提取物、载体,本发明将氟苯尼考与藁本联用,与单用氟苯尼考灌服相比,药动学参数结果发生明显变化,Tmax减少、Cmax增加,氟苯尼考的吸收速度和吸收程度均增加,t1/2z增加、CLz减少,氟苯尼考在鸡体内的代谢减缓,提高了氟苯尼考在体内的生物利用度,且本发明与传统兽药氟苯尼考比较,具有疗效显著、无效率低、有效率及显效率高的特点。
Description
技术领域
本发明涉及兽药技术领域,具体涉及一种增效复方氟苯尼考颗粒。
背景技术
氟苯尼考是畜禽专用的新型广谱抗菌药,在畜禽和水产动物的细菌性疾病防治中应用广泛,但是由于氟苯尼考的水溶性很差,动物服食后在机体内的吸收效果差,导致生物利用度低,治疗效果不佳,限制了其在制剂和临床上的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种增效复方氟苯尼考颗粒,通过调节机体药物代谢酶以及转运体表达量及活性,提高氟苯尼考的生物利用度、从而提高其临床治疗效果。
本发明通过下述技术方案实现:包括如下各组分:氟苯尼考、藁本提取物、载体。
优选地,包括如下以重量计的各组分:氟苯尼考5%~20%、藁本提取物5%~10%、载体70%~90%。
优选地,所述载体由葡萄糖和可溶性淀粉组成。
优选地,包括如下以重量计的各组分:氟苯尼考5%~20%、藁本提取物5%~10%、葡萄糖35%~45%、可溶性淀粉35%~45%。
优选地,包括如下以重量计的各组分:氟苯尼考5%、藁本提取物10%,葡萄糖40%,可溶性淀粉45%。
优选地,包括如下以重量计的各组分:氟苯尼考20%、藁本提取物5%,葡萄糖40%,可溶性淀粉35%。
优选地,采用以下步骤制备:
S1:藁本提取物备用;
S2:按照配比称取S1中的藁本提取物、氟苯尼考、葡萄糖、可溶性淀粉,翻动混匀,整粒、总混、分装。
优选地,采用以下具体步骤制备:
S1:取藁本饮片干燥粉碎,加入相当于藁本8倍重量的乙醇溶液,60℃下提取2小时,重复提取过程2次,过滤,合并滤液,减压干燥得藁本提取物,备用;
S2:按照配比,称取重量为5%~10%的藁本提取物、5%~20%氟苯尼考、35%~45%葡萄糖、35%~45%可溶性淀粉,并依次加入到制粒机中,翻动搅拌均匀,整粒、总混、分装
本发明中,藁本在鸡体内抑制了空肠上药物外排转运体的表达量及活性,减少了氟苯尼考在空肠段的外排,从而增加了氟苯尼考的吸收,另外藁本可以抑制肝脏药物代谢酶细胞色素P4503A37(CYP3A37)、鸡外源性核受体(CXR),和P-糖蛋白(P-gp)的表达含量及其活性,降低了氟苯尼考的代谢速率,从而增加了氟苯尼考血药浓度。
本发明与现有技术相比,具有如下的优点和有益效果:
本发明将氟苯尼考与藁本联用,与单用氟苯尼考灌服相比,药动学参数结果发生明显变化,Tmax减少、Cmax增加,氟苯尼考的吸收速度和吸收程度均增加,t1/2z增加、CLz减少,氟苯尼考在鸡体内的代谢减缓,提高了氟苯尼考在体内的生物利用度,且本发明的复方氟苯尼考颗粒能与传统兽药氟苯尼考比较,具有疗效显著、无效率低、有效率及显效率高的特点。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本发明实施例的进一步理解,构成本申请的一部分,并不构成对本发明实施例的限定。在附图中:
图1为实施例4中血浆中氟苯尼考浓度标准曲线图。
图2为实施例4中经步骤1.2处理得到的空白血浆样品的液相色谱图。
图3为实施例4中经步骤1.2处理得到的含氟苯尼考的血浆样品的液相色谱图,其中色谱峰1代表氟苯尼考,色谱峰2代表内标物。
图4为实验组与对照组鸡服用氟苯尼考不同时间后,两组鸡体内氟苯尼考的药时曲线图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白,下面结合实施例和附图,对本发明作进一步的详细说明,本发明的示意性实施方式及其说明仅用于解释本发明,并不作为对本发明的限定。
一种增效复方氟苯尼考颗粒,包括氟苯尼考、藁本提取物、载体,载体由葡萄糖和可溶性淀粉组成,各组分以重量计为:氟苯尼考5%~20%、藁本提取物5%~10%、葡萄糖35%~45%、可溶性淀粉35%~45%,其中葡萄糖为液体状,可溶性淀粉为粉剂,氟苯尼考为粉剂。
制备过程为:
(1)取藁本饮片干燥粉碎,加入乙醇溶液,提取,重复多次,过滤,合并滤液,减压干燥得藁本提取物,备用;
(2)按照配比,称取占配制量5%~10%的藁本提取物、5%~20%氟苯尼考、35%~45%葡萄糖、35%~45%可溶性淀粉,并依次加入到一步制粒机中,翻动搅拌时均匀,整粒、总混、分装。
以下以具体的实施例进行详细说明:
实施例1:
1、处方组成:氟苯尼考0.5kg、藁本提取物1kg,葡萄糖4kg,可溶性淀粉4.5kg。
2、制备方法:
(1)取藁本饮片干燥粉碎,加入质量分数为50%的乙醇溶液适量,60℃下提取2小时,重复提取过程2次,过滤,合并滤液,减压干燥得藁本提取物,备用;
(2)称取步骤(1)中制备的藁本提取物1kg、氟苯尼考0.5kg、葡萄糖4kg、可溶性淀粉4.5kg,并依次加入到一步制粒机中,翻动搅拌均匀,整粒、总混、分装,得到复方氟苯尼考颗粒。
3、服用方法:1日2次,疗程为3天。
实施例2:
1、处方组成:氟苯尼考2kg、藁本提取物0.5kg,葡萄糖4kg,可溶性淀粉3.5kg。
2、制备方法:
(1)取藁本饮片干燥粉碎,加入质量分数为50%的乙醇溶液适量,60℃下提取2小时,重复提取过程2次,过滤,合并滤液,减压干燥得藁本提取物,备用;
(2)称取步骤(1)中制备的藁本提取物0.5kg、氟苯尼考2kg、葡萄糖4kg、可溶性淀粉3.5kg,并依次加入到一步制粒机中,翻动搅拌均匀,整粒、总混、分装,得到复方氟苯尼考颗粒。
使用方法同上。
实施例3:
1、处方组成:氟苯尼考1kg、藁本提取物1kg,葡萄糖4kg,可溶性淀粉4kg。
2、制备方法:
(1)取藁本饮片干燥粉碎,加入质量分数为50%的乙醇溶液适量,60℃下提取2小时,重复提取过程2次,过滤,合并滤液,减压干燥得藁本提取物,备用;
(2)称取步骤(1)中制备的藁本提取物1kg、氟苯尼考1kg、葡萄糖4kg、可溶性淀粉4kg,并依次加入到制粒机中,翻动搅拌均匀,整粒、总混、分装,得到复方氟苯尼考颗粒。
使用方法同上。
实施例4:本发明制备的复方氟苯尼考颗粒在肉鸡体内的药动学研究
1、研究方法
1.1试验分组:将20只健康鸡随机分为2组,每组10只,分为试验组和对照组。
试验组灌服本发明的复方氟苯尼考颗粒,此颗粒中含重量为10%的氟苯尼考,此颗粒的灌服剂量为0.3g/kg,以氟苯尼考计灌服剂量为30mg/kg,此颗粒剂量为0.3g/kg,以氟苯尼考计单剂量为30mg/kg;对照组则给予含有相同含量的氟苯尼考单方颗粒,在灌服给药0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、10、12、24h后,对每只鸡服药不同时间后进行翅下静脉采集血液,于各个采血管中均加入EDTA抗凝,4000r/min,离心5min,分离血浆置于EP管中,置-20℃的冰箱中保存待用。
另外随机选一只健康鸡,对该健康鸡翅下静脉采集血液,于采血管中均加入EDTA抗凝,4000r/min,离心5min,分离血浆置于EP管中,得到空白血浆,置-20℃的冰箱中保存待用。
1.2样品的处理
分别取步骤1.1中得到的各鸡只血浆0.2mL于1.5mLEP管,作如下处理:每个EP管中加入10μL的500μg/mL的氯霉素内标液500μg/mL和800μL的乙酸乙酯溶液,涡动混合2min,4000r/min离心10min,吸取上层液,然后再加入乙酸乙酯800μL重复提取1次,合并两次的上层液,在40℃水浴中用氮气吹干仪氮气吹干,吹干后得到的残渣加入400μL流动相溶解,涡动混合2min,12000r/min离心10min,将上清液转移至进样瓶,取20μL进样,检测氟苯尼考的血药浓度。
同样取空白血浆0.2mL,于EP管中,除了不加入氯霉素内标液外,其余与试验组、对照组进行相同的处理。
1.3标准曲线的制备
分别取步骤1.1中的空白血浆180μL于8个EP管中,各自加入20μL的氟苯尼考系列标准溶液,配制成50、20、10、5.0、2.5、0.5、0.1、0.05μg/mL系列标准血浆样品,按以上步骤1.2中试验组、对照组的方法处理样品,以氟苯尼考与氯霉素峰面积的比值s对相应氟苯尼考浓度c作线性回归,求回归方程和相关系数,得出氟苯尼考在质量浓度为0.05~50μg/mL的范围内线性关系良好,回归方程为c=0.0.0565x+0.0218,相关系数R2=0.9997,标准曲线见附图1。
1.4色谱条件
色谱柱:安捷伦Agilen HC–C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈–水(27:73,V/V);流速1.0mL/min;检测波长223nm;柱温40℃;进样量20μL。
1.5分析方法质量控制
以步骤1.3中的0.1μg/mL、2.5μg/mL、20μg/mL三个系列标准血浆样品,考察该研究方法的提取回收率和精密度,每个样品做5个重复,测得该研究方法回收率分别为(83.2±1.6)%、(84.1±2.3)%和(83.5±2.2)%,测得日内相对标准偏差RSD分别为4.6%、2.3%和6.1%,测定日间相对标准偏差RSD分别为4.5%、2.1%和6.2%;按信噪比S/N=3计算,最低检测限为0.02μg/mL。
采用以上1.4的色谱条件,利用高效液相色谱仪,测定经步骤1.2处理的空白血浆样品、及步骤1.2中含有氟苯尼考的血浆样品,得到如附图2、附图3的液相色谱图,测得氟苯尼考的保留时间为12.8min,内标氯霉素的保留时间为17.2min,氟苯尼考与内标分离良好,且在步骤1.2的样品处理过程中,未引入干扰性杂质,内源性成分不干扰药物的分离测定,说明本研究方法具有较高的特异性,能准确测定血浆中的氟苯尼考的浓度,重现性好。
2、药动学参数测定
步骤1.1中的试验组、对照组鸡分别灌服复方氟苯尼考颗粒、氟苯尼考单方颗粒后(灌服氟苯尼考剂量均为30mg/kg),取经步骤1.2处理的、对应服药后不同时间点得到的样品,进行氟苯尼考血药浓度检测,其血药浓度-时间曲线见图4所示,药动学参数见下表1,氟苯尼考的血药浓度-时间曲线按照步骤1.3-1.5的研究方法得到。
结果表明,试验组的药时曲线下面积AUC(0-∞)为72.91±15.71mg/L·h,与对照组47.729±11.601mg/L·h相比显著增加(P<0.05),半衰期t1/2z为3.58±0.31h,与对照组2.52±0.255h相比显著增加(P<0.05),达峰时间Tmax为0.60±0.09h,与对照组1.25±0.141h相比显著降低(P<0.05),清除率CLZ为0.44±0.05L/h·kg,与对照组0.657±0.148L/h·kg相比显著降低(P<0.05),对于表观分布容积Vz、达峰浓度Cmax、平均驻留时间MRT(0-∞),试验组和对照组之间差异不显著。
其中:*表示差异显著(P<0.05)。
从图4与表1中可以看出,与对照组相比,试验组鸡体内氟苯尼考的达峰时间Tmax较对照组显著降低,降低达52%(P<0.05),达峰浓度Cmax较对照组提高71.03%(P<0.05),提高显著,表明联用藁本后,氟苯尼考的吸收速度显著加快,吸收程度显著提高;试验组的半衰期t1/2z较对照组提高42.06%(P<0.05),清除率CLz降低33.03%(P<0.05),表明联用藁本后,氟苯尼考在鸡体内代谢显著减缓;另外,试验组的药时曲线下面积AUC0-∞较对照组增加52.76%(P<0.05),表明氟苯尼考的生物利用度显著提高。
实施例5:本发明的复方氟苯尼考颗粒的临床治疗情况研究。
研究方法如下:
(1)准备药品
氟苯尼考颗粒,藁本提取物颗粒,本发明制得的复方氟苯尼考颗粒。
(2)试验动物
确诊被鸡白痢感染的、14日龄的青脚麻肉鸡458只,雌雄各半,所有试验动物均由专人饲养,并保持环境条件一致。
(3)试验动物分组
将以上确诊被鸡白痢感染的458只肉鸡,以鸡场分栏为单位分为4组,每组不低于100只,雌雄各半,为确保各组纳入病鸡的日龄、病情程度无显著性差异,对各组部分病鸡进行互换调整,每组试验鸡只以脚环的形式进行编号。
(4)给药
根据该药物推荐的临床给药剂量和兽药研究技术指导原则汇编,将以上为4个组定义为A、B、C、D组,A组为空白对照组,108只鸡,且不用药;B组为服用氟苯尼考颗粒组,114只鸡;C组为服用藁本提取物颗粒组,110只鸡;D组为服用本发明复方氟苯尼考颗粒组,126只鸡。
B组和D组分别按照每千克肉鸡体重给药0.25g,内服氟苯尼考颗粒和复方氟苯尼考颗粒,1日2次,连用3天;C组按照每只鸡5g的剂量,内服藁本提取物颗粒,1日2次,连用3天。
(5)临床症状赋分评价
根据各发病鸡临床症状,每日观察鸡群症状1次,连续观察14天,试验期末记录各组存活数;观察期间,主要进行腹泻情况观察、咳喘情况观察和神态与食欲观察;腹泻情况主要观察腹泻的方式和程度;咳嗽情况主要观察咳嗽的频率和程度;精神状态和食欲主要观察鸡是否喜欢活动,运动性如何以及进食情况,表2为临床症状赋分标准,表3为治疗前各组病鸡临床赋分,表4为治疗结束各组病鸡临床赋分。
表2临床症状赋分标准
其中:*表示差异显著(P<0.05)。
由表3可知,各组试验鸡个体治疗前均有腹泻、精神状态欠佳等临床症状,通过精神状态、采食情况、腹泻情况等临床症状评分统计分析表明,各组在治疗前临床症状分值均无显著差异(P>0.05)。
由表4可知,各组经治疗后,临床症状分值统计分析结果表明,各组试验鸡的精神状态、采食情况及腹泻情况较治疗前均有一定的改善,但空白对照组的临床症状改善情况不及氟苯尼考颗粒组、藁本提取物颗粒组、复方氟苯尼考颗粒组,各项评分均未达到4分。
复方氟苯尼考颗粒组临床症状各项评分均在4分以上,且分值均明显高于空白对照组、藁本提取物颗粒组、氟苯尼考颗粒组的分值,且与空白对照组比较,复方氟苯尼考颗粒组的各项评分统计学差异显著(P<0.05)。
(6)治疗效果评价
参照农业部《临床试验技术规范(试行)》相关规定,观察记录本临床试验期间及结束时各组试验鸡个体比较,其疗效评价主要分为临床症状、防治效果,综合评价为显效、有效、无效,具体为:
显效:试验结束时,试验鸡只精神状态恢复正常,食欲状态恢复正常,无腹泻(临床症状各项评分赋分≥4分),且临床症状各项评分显著高于空白对照组。
显效率=(显效数/发病数)×100%
有效:试验结束时,试验鸡只经治疗后精神状态,食欲状态及腹泻状态均有一定恢复,各项指标优于空白对照组。
有效率=(有效数/发病数)×100%
无效:用药后,试验鸡只精神状态、食欲情况、腹泻情况等与空白对照组相比较,均无提高或低于空白对照组。
无效率=(无效数/发病数)×100%
表5为治疗结束后,各试验组的疗效评价结果:
表5治疗结束后疗效评价结果
根据表5治疗结束后的疗效评价结果可知,复方氟苯尼考颗粒组显效率达到85.71%,明显高于氟苯尼考颗粒组的显效率47.37%,也明显高于藁本提取物颗粒组的显效率54.55%;另外,复方氟苯尼考颗粒组无效率为4.76%,远远低于氟苯尼考颗粒组的无效率50.00%、藁本提取物颗粒组的无效率41.82%。
综合以上结果,在按照0.3g/kg体重、1日2次,连用3天内服复方氟苯尼考颗粒后,对鸡白痢具有较好的治疗效果,与传统兽药氟苯尼考相比,疗效显著,无效率低、有效率及显效率高。
以上所述的具体实施方式,对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明,所应理解的是,以上所述仅为本发明的具体实施方式而已,并不用于限定本发明的保护范围,凡在本发明的精神和原则之内,所做的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种增效复方氟苯尼考颗粒,其特征在于包括如下各组分:氟苯尼考、藁本提取物、载体;
所述载体由葡萄糖和可溶性淀粉组成;
各组分以重量计为:氟苯尼考5%~20%、藁本提取物5%~10%、葡萄糖40%、可溶性淀粉35%~45%;
制备过程为:(1)取藁本饮片干燥粉碎,加入乙醇溶液,提取,重复多次,过滤,合并滤液,减压干燥得藁本提取物,备用;
(2)按照配比,称取占配制量5%~10%的藁本提取物、5%~20%氟苯尼考、40%葡萄糖、35%~45%可溶性淀粉,并依次加入到一步制粒机中,翻动搅拌时均匀,整粒、总混、分装。
2.如权利要求1所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒,其特征在于:包括如下以重量计的各组分:氟苯尼考5%、藁本提取物10%,葡萄糖40%,可溶性淀粉45%。
3.如权利要求1所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒,其特征在于:包括如下以重量计的各组分:氟苯尼考20%、藁本提取物5%,葡萄糖40%,可溶性淀粉35%。
4.如权利要求1-3任一所述的一种增效复方氟苯尼考颗粒,其特征在于:
采用以下具体步骤制备:
S1:取藁本饮片干燥粉碎,加入相当于藁本8倍重量的乙醇溶液,60℃下提取2小时,重复提取过程2次,过滤,合并滤液,减压干燥得藁本提取物,备用;
S2:按照配比,称取重量为5%~10%的藁本提取物、5%~20%氟苯尼考、40%葡萄糖、35%~45%可溶性淀粉,并依次加入到制粒机中,翻动搅拌均匀,整粒、总混、分装。
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