CN104288238B - 一种治疗肠易激综合症的药物及其制备方法与检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于中药、天然药物领域，具体涉及一种治疗肠易激综合症的药物及其制备方法与检测方法，发明名称为一种治疗肠易激综合症的药物及其制备方法与检测方法。该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：草苁蓉1～2份、狮子七1～2份、珠子参1～2份、桂丁1～2份。该药物组合物采用药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。本发明还提供了该药物的质量检测方法。

Description

一种治疗肠易激综合症的药物及其制备方法与检测方法
技术领域：
本发明属于中药、天然药物领域，涉及一种由草苁蓉、狮子七、珠子参、桂丁组成的具有治疗肠易激综合症作用的药物组合物。
技术背景：
肠易激综合征（irritablebowelsyndrome,IBS）指的是一组包括腹痛、腹胀、排便习惯改变和大便性状异常、粘液便等表现的临床综合征，持续存在或反复发作，经检查排除可以引起这些症状的器质性疾病。本病是最常见的一种功能性肠道疾病。
肠易激综合征的一般病因是机体应激反应与心理因素相互作用的结果，不同的个体都可能涉及遗传、环境、心理、社会和胃肠感染等因素，导致胃肠动力改变、内脏高敏感、脑一肠轴相互作用的紊乱、自主神经和激素的变化等，伴有精神障碍（如恐慌、焦虑、创伤后应激紊乱等）、睡眠障碍和心理应对障碍的患者，应激性生活事件常可导致症状的加重。研究发现有1/3的IBS患者有胃肠道感染史，国内外都强调精神心理因素对IBS发病的影响，更加重视神经肽类和相关受体功能在IBS发病机制中的作用；近些年人们加强了IBS与炎症性肠病（IBD）之间的联系研究，少数学者甚至认为IBS为IBD的前期表现。
症状:
1、腹泻与便秘型。腹泻型者粪便呈糊状或稀便，并有大量粘液，一日数次，常在早晨或后夜发生(俗称黎明泻或五更泻)，腹泻时无腹痛。便秘型者可数日无大便，排便时有痉挛性腹痛，可排出坚硬如石卵或羊粪球样粪便。这两种类型的排便形式常交替出现。
2、肠易激综合征常见的症状类型还有腹痛型。多为胀痛或不适，也可有短暂剧痛，排便或排气后缓解。
3、餐后腹痛型。腹痛发生在进食后，不能为排便或排气所缓解。
中外的学者统计该病全球人群中有10%～20%的成人和青少年具有符合IBS的症状，女性一般多于男性。症状常反复发生，约2/3的患者经常与其他FGID有症状重叠，IBS可严重影响患者的生活质量，导致大量的医疗费用，是FGID中最典型的心身疾病。
本发明提供了一种治疗肠易激综合症的药物组合物，实验研究表明该药物对肠易激综合症具有较好的治疗作用。
发明内容：
本发明的目的是提供一种具有治疗肠易激综合症的药物组合物。
本发明的另一目的是提供该药物组合物的制备方法。
本发明还提供该药物组合物的检测方法。
本发明的还提供该药物组合物在制备治疗肠炎药物中的应用。
本发明的目的是通过以下方式实现的：
一种具有治疗肠易激综合症作用的药物组合物，该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：草苁蓉1～2份、狮子七1～2份、珠子参1～2份、桂丁1～2份。
其中，优选该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：草苁蓉1份、狮子七2份、珠子参1份、桂丁2份。
优选该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：草苁蓉2份、狮子七1份、珠子参2份、桂丁1份。
优选该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：草苁蓉1份，狮子七1份、珠子参1份、桂丁1份。
该药物组合物采用药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。
该药物组合物优选采用如下方法制备：取草苁蓉、狮子七、珠子参、桂丁，混合，加入5～15倍量的水煎煮2～4次，每次0.5～2小时，提取液过滤，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，装入硬胶囊，即得。
该药物组合物更为优选采用如下方法制备：取草苁蓉、狮子七、珠子参、桂丁，混合，加8倍量的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水8倍量，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.17～1.18的清膏，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，装入硬胶囊，即得。
该药物组合物检测方法为：照高效液相色谱法测定：
（1）色谱条件：C18色谱柱；流动相：乙腈-水比例为25～30:70～75；流速：0.5～1.5ml/min；检测波长260～280nm；柱温20～30℃；进样量5～20μl；
（2）对照品溶液的制备：精密称取红景天苷对照品，置容量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液，置容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品内容物粉末，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇，称重，超声处理，放冷，用稀乙醇不足减失的重量，摇匀；精密吸取上清液，置水浴蒸至近干，残渣加水使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至量瓶中，摇匀，即得；
（4）测定：取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪测定。
该药物组合物优选的检测方法为：照高效液相色谱法测定：
（1）色谱条件：DiamonsilC18色谱柱；流动相：乙腈-水比例为28:72；流速：1.0ml/min；检测波长270nm；柱温25℃；进样量10μl。
（2）对照品溶液的制备精密称取红景天苷对照品8.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
（3）供试品溶液的制备：取本品内容物粉末约2.0g，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称重，超声处理20min，放冷，用稀乙醇不足减失的重量，摇匀；精密吸取上清液25ml，置水浴蒸至近干，残渣加水25ml使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，摇匀，即得；
（4）测定：取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪测定。
所述药物组合物还可用于制备治疗肠炎的药物。
本发明所述的药物组合物中的草苁蓉为列当科草苁蓉属植物草苁蓉Boschniakiarossica（Cham.etSchlecht.）Fedtsch.[OrobancherossicaCham.etSchlecht.;B.glabraC.A.Mey.]的全草；狮子七为景天科红景天属植物狭叶红景天Rhodiolakirilowii(Regel)Maxim[SedumkirilowiiRegel]的根及根茎；珠子参为桔梗科党参属植物珠子参CodonopsisconvolvulaceaKurzvar.forrestii(Diels)Tsoong的块根；桂丁为樟科樟属植物肉桂CinnamomumcassiaPresl的幼嫩果实。
实验一：本发明药物组合物治疗腹泻型肠易激综合征（IBS）的实验研究
中医学无肠易激综合征之病名，根据本病的临床表现与特征，属“泄泻”和“腹痛”范畴，导致慢性泄泻症状发病的主要原因是脾、肝、肾三脏功能失调。
为印证本发明药物的效果，选择内脏高敏感大鼠模型造模进行实验，其研究结果如下。
1材料
1.1试验动物
新生SD大鼠（合格证号：SCXK2014-007），SPF级乳鼠每组8只与母鼠一起饲养，发育至24d后，将母鼠与幼鼠分离。实验动物由烟台大学实验动物中心提供。
1.2药物及制备
对比药物A：取干燥的草苁蓉333g、狮子七333g、珠子参333g，混合，加800mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水800mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩成每毫升含生药1g的药液，即得对比药物A；置冰箱内4℃保存。
对比药物B：取干燥的狮子七333g、珠子参333g、桂丁333g，混合，加800mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水800mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩成每毫升含生药1g的药液，即得对比药物B；置冰箱内4℃保存。
对比药物C：取干燥的珠子参333g、桂丁333g、草苁蓉333g，混合，加800mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水800mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩成每毫升含生药1g的药液，即得对比药物C；置冰箱内4℃保存。
对比药物D：取干燥的桂丁333g、草苁蓉333g、狮子七333g，混合，加800mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水800mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩成每毫升含生药1g的药液，即得对比药物D；置冰箱内4℃保存。
本发明药物：取干燥的草苁蓉250g、狮子七250、珠子参250、桂丁250，混合，加800mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水800mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，浓缩成每毫升含生药1g的药液，即得本发明药物；置冰箱内4℃保存。
对照药物：匹维溴铵片（苏威制药有限公司)。
1.3试剂与仪器
移液器：规格50μL，500μL，德国eppendorf公司。电热恒温水浴箱：深圳市瑞泰尔科技有限公司。精密天平：日本岛津。流式细胞仪：贝克曼库特实验系统苏州有限公司。台式大容量离心机：湖南湘仪实验室仪器开发有限公司。微型摇床：北京安必升科技发展有限公司。自动脱水机：湖北慧达仪器有限公司。石蜡包埋机：湖北泰康医疗器械有限公司。生物显微镜：宁波永新光学有限公司。透射电镜：日本日立。
2方法
2.1试验分组
实验动物随机被分成8组，每组8只。分别为正常组，模型组，对照药物组，对比药物A组、对比药物B组、对比药物C组、对比药物D组、本发明药物组。
2.2造模方法
每天给予直肠内醋酸刺激，进行内脏高敏感大鼠模型造模，正常组每天给予直肠内灌注生理盐水。经大鼠排便统计及肠道敏感性等指标评估腹泻型IBS模型复制情况。
2.3给药方法
造模同时即开始给药。对比药物A组、对比药物B组、对比药物C组、对比药物D组、本发明药物组分别灌服对比药物A、对比药物B、对比药物C、对比药物D、本发明药物，相当于含生药50g·kg-1·d-1。对照药物组灌服等容积的匹维溴铵混悬液；正常组和模型组灌以等容积生理盐水。各组均按0.25mL/10g·d灌胃。1次/d，连续14d。
2.4取材方法
将末次给药后的大鼠乙醚麻醉，眶静脉采血0.5～1mL，置乙二胺四乙酸二钠（EDTA）抗凝管中备用，将眶静脉采血后的大鼠脱颈椎处死，取其距肛门10cm处的降结肠2段，每段约2cm，其中一段进行免疫组化染色：采用体积分数10%福尔马林固定，常规包埋，脱蜡、水化组织切片，切片经纯二甲苯脱蜡2次，每次6～8min，梯度酒精脱二甲苯各2min，自来水冲洗、PBS漂洗各3次，2min/次。体积分数3%的H2O2阻断内源性过氧化物，PBS冲洗后，滴加5-HT抗体孵育30～60min，PBS冲洗3次，2min/次。滴加辣根酶标记羊抗兔多聚体，室温孵育20min，PBS冲洗3次，2min/次。用二氨基联苯胺（DAB）溶液显色，蒸馏水冲洗、复染、脱水、封片。随后在光镜下观察，随机选择连续的肠腺腔300个细胞，并计算其中免疫阳性反应细胞个数，统计数量，以每100个细胞中所含阳性细胞数表示结果。并对每张切片染色强度进行评估：0度：无染色信号；1度：染色信号呈细颗粒状，棕黄色，阳性细胞占总细胞数50%以下；2度：染色信号呈细颗粒状，棕黄色，阳性细胞占总细胞数50%以上，或染色信号呈粗颗粒状、块状，棕黑色，阳性细胞占总细胞数50%以下；3度：染色信号呈粗颗粒状或块状，棕黑色，阳性细胞占总细胞数50%以上。
2.5统计学处理
采用SPSS17.0统计软件进行统计，测得指标均用均数±标准差（±s）表示，多组比较用方差分析，组间比较用q检验。
3结果
对肠组织的5-HT免疫染色病理切片观察结果：
模型组、对比药物A组、对比药物B组、对比药物C组、对比药物D组的免疫组化染色阳性细胞体积较大，大多为锥形或圆形，染色强度较强；正常组、匹维溴铵组、本发明药物组免疫组化染色阳性细胞体积较小，多为圆形，染色强度较弱。与正常组比较，模型组的5-HT阳性细胞数显著增多，免疫组化染色强度显著增强（P<0.05）；本发明药物组及对照药物组的阳性细胞数和染色强度与正常组比较，差异无显著性意义（P>0.05），与模型组比较，本发明药物组及对照药物组5-HT阳性细胞数显著减少，免疫组化染色强度显著降低（P<0.05）；与模型组比较，对比药物A组、对比药物B组、对比药物C组、对比药物D组5-HT阳性细胞数减少不显著，免疫组化染色强度降低不显著（P>0.05）。结果见表1。
表1各组5-HT阳性细胞数与免疫组化染色强度比较
组别 n 阳性细胞数（个） 染色
正常对照组 8 1.76±0.52 1.69±0.434 -->
模型组 8 3.81±0.76* 2.66±0.51*
匹维溴铵组 8 1.78±0.42# 1.76±0.52#
对比药物A 8 3.34±0.46 2.11±0.13
对比药物B 8 3.12±0.65 2.31±0.23
对比药物C 8 3.41±0.82 2.14±0.65
对比药物D 8 3.26±0.52 2.43±0.34
本发明药物组 8 1.55±0.28# 1.59±0.30#
注：与正常对照组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05。
4讨论与结论
目前已建立的与IBS相关的动物模型较多，但大多是根据体外单因素建立的符合IBS某一方面的病理生理机制的动物模型。情志因素与IBS症状的发作和加重有关，且情志所伤多引起肝郁。本实验选用的模型虽然是由化学炎症刺激引起，但由于刺激处在乳鼠期，属于早期生活事件引起的动物模型，因此，这类刺激对乳鼠也是一种情志因素刺激。其症状发生的直接机理是基于肠道高敏感性和高反应性基础上的肠道运动功能异常，肠道敏感性显著升高。5-HT是一种广泛存在于神经系统和胃肠道的神经递质，参与了心理和神经功能的调节。研究表明IBS患者血浆和结肠组织5-HT含量升高；5-HT的异常升高会导致肠道动力异常和内脏感觉过敏，也是引起腹泻的重要物质，提示肠道5-HT和IBS患病关系密切。
本实验结果显示，模型组动物结肠组织分泌的5-HT免疫组化染色阳性细胞明显多于正常组，5-HT染色明显加深；本发明药物组均能不同程度地减少5-HT免疫组化染色阳性细胞的数量，且5-HT染色变浅。表明本发明药物能降低IBS模型大鼠分泌增多的5-HT，改善因5-HT的异常升高而导致的肠道动力异常和内脏感觉过敏，改善腹泻症状，并且优于对比药物A、对比药物B、对比药物C、对比药物D，说明本发明药物中各药味之间的组合产生了协同增效作用。
实验二：本发明中药组合物提取工艺参数优化研究
1仪器与试药
1.1仪器
Waters高效液相色谱仪；BS210S型电子天平(北京塞多利斯天平有限公司)
1.2试药
甲醇(分析纯)、乙腈(色谱纯，上海星可公司)、纯净水(自制)，红景天苷对照品(标号：1107152-201402中国药品生物制品检验所)。
2提取工艺研究
2.1药材的鉴定与前处理：处方中四味中药饮片（净药材），检验合格后方可用于试验，从而保证制剂的质量。
2.2提取工艺路线的设计
提取工艺路线初步定为：“本发明药物中四味药材，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.17~1.18（75℃）的清膏，加入乙醇，使含醇量达75%，充分搅拌，静置24小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇至无醇味。
2.3提取工艺技术条件的研究
本发明药物处方中四味药材共同加水提取工艺。影响提取效果的因素大致有药材浸泡时间、提取溶媒用量、提取次数、提取时间等。选择主要因素浸泡时间、溶媒用量、提取时间设计L9(34)正交试验，以提出的红景天苷总量作为考察标准，优选合理的工艺技术条件。
2.3.1试验设计：取草苁蓉25g、狮子七25g、珠子参25g、桂丁25g，按正交表中各试验条件提取两次，滤过，合并滤液，浓缩至25ml（相对密度为1.10～1.20），加95%乙醇55ml（含醇量为70%～80%），充分搅拌，静置24小时，滤过，合并滤液，浓缩并定溶至20ml。因素水平见表2。
表2提取试验因素水平
2.3.2红景天苷含量测定：照高效液相色谱法（附录VID）测定。
色谱条件与系统适用性试验DiamonsilC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-水（28:72）；流速：1.0ml/min；检测波长270nm；柱温25℃；进样量10μl。理论板数按红景天苷峰计算应不低于1500。
对照品溶液的制备：精密称取红景天苷对照品8mg，置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
供试品溶液的制备：取本品内容物粉末约2.0g，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称重，超声处理20min，放冷，用稀乙醇不足减失的重量，摇匀。精密吸取上清液25ml，置水浴蒸至近干，残渣加水25ml使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，计算浓缩液中红景天苷含量。
正交试验结果见表3，方差分析见表4。
表3L9(34)正交试验
表4方差分析表
方差来源 A B C D 误差E 总和T
离差平方和 167.94 6418.58 3726.51 1771.95 1771.95 12084.99
自由度 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 8.00
均方（MS) 83.97 3209.29 1863.26 885.98 885.98
F值 0.09 3.62 2.10 1.00
F临界值 F0.01(1,2)＝ 99 F0.05(1,2)= 19
上述正交试验及方差分析结果表明：各因素对提取效果的影响程度依次为因素B（加水量）>因素C（煎煮时间）>因素A（浸泡时间），最佳浸渍工艺应为A2B1C2，即：净药材投料，加8倍量的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水8倍量，煎煮1小时，滤过，合并滤液，即得。
3．工艺验证试验
取四味净药材三批投料，分别加8倍量的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水8倍量，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.17～1.18（75℃）的清膏，按优选工艺条件平行操作，分别计算红景天苷的提取率，验证结果与正交试验结果一致。
实验三：本发明药物组合物质量检测方法的研究
1仪器与试药
1.1仪器
SCL-10A岛津高效液相色谱仪，SPD-10A紫外检测器，N2000色谱工作站；
HWS26型水浴锅（上海一恒科技有限公司）；BP211D电子天平（赛多利斯有限公司）；KQ-300DB型数控超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
1.2药品与试剂
红景天苷对照品（批号0734-201408）购于中国药品生物制品检定所；本发明药物胶囊（批号20140501，20140502，20140503自制）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2含量测定方法与结果
2.1色谱条件DiamonsilC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-水（28:72）；流速：1.0ml/min；检测波长270nm；柱温25℃；进样量10μl。
2.2对照品溶液的制备：精密称取红景天苷对照品8.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液（每1ml含红景天苷65.6μg）。
2.3供试品溶液的制备：取本品内容物粉末约2.0g，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称重，超声处理20min，放冷，用稀乙醇不足减失的重量，摇匀。精密吸取上清液25ml，置水浴蒸至近干，残渣加水25ml使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，摇匀，即得。
2.4阴性样品溶液的制备按处方比例及其制备工艺制成缺淫羊藿的阴性样品，按2.2.3项下的方法制备阴性对照液。
2.5专属性的考察精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照液各10μl，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定。结果，阴性样品对红景天苷的测定无干扰，且供试品中红景天苷与其他组分可达到基线分离。
2.6标准曲线的建立精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10、20μl分别注入液相色谱仪，记录红景天苷峰面积积分值。以进样量C（μg）为横坐标，峰面积A为纵坐标进行线性回归，得回归方程为：A=2.03×105C+0.06×104（r=0.9998），线性范围0.1312～1.312μg。
2.7精密度试验精密吸取对照品溶液10μL，连续进样6次，记录峰面积积分值，计算RSD为0.89%（n=6），结果表明仪器精密度良好。
2.8稳定性试验精密吸取同一批供试品溶液各10μL，分别于0、2、4、6、8、24h注入液相色谱仪，记录峰面积积分值，计算RSD为0.82%（n=6）。结果表明供试品溶液24h内稳定。
2.9重复性试验取同一批样品，精密称取6份，按照上述方法测定含量，结果均值为0.6536mg/g，RSD为0.68%（n=6）。
2.10加样回收率试验取已知含量（0.6536mg/g）的同批样品6份，研细，每份1.0g，精密称定，分别精密加入红景天苷对照品，照上述方法测定含量，结果见表5。
表5本发明药物胶囊红景天苷的加样回收率试验
2.2.11样品测定取3批样品，按上述方法测定，结果含量分别为0.6672mg/g、0.6598mg/g和0.6546mg/g。
3讨论
3.1狮子七是方中的主药，且红景天苷为判断狮子七质量优劣的重要指标，因此建立其在该制剂中的含量测定方法能有效控制制剂质量。
3.2在含量测定研究中，曾以不同比例的甲醇-水、乙腈-水为流动相进行测定，经反复试验，最终将流动相确定为乙腈-水（28:72），能使样品中的红景天苷与杂质得到较好的分离。
具体实施方式：
实施例1：
处方：草苁蓉250g，狮子七250g、珠子参250g、桂丁250g。
制法：取干燥的草苁蓉250g，狮子七250g、珠子参250g、桂丁250g，混合，加8000mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水8000mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.17～1.18的清膏，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，装入硬胶囊，制成1000粒。
检测方法：照高效液相色谱法测定：
（1）色谱条件:DiamonsilC18色谱柱；流动相：乙腈-水比例为28:72；流速：1.0ml/min；检测波长270nm；柱温25℃；进样量10μl；
（2）对照品溶液的制备精密称取红景天苷对照品8.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品内容物粉末约2.0g，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称重，超声处理20min，放冷，用稀乙醇不足减失的重量，摇匀。精密吸取上清液25ml，置水浴蒸至近干，残渣加水25ml使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，摇匀，即得；
（4）测定：取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪测定；
（5）测定结果：每克本发明药物含红景天苷0.6634mg。
实施例2：
处方：草苁蓉167g，狮子七333g、珠子参167g、桂丁333g。
制法：取干燥的草苁蓉167g，狮子七333g、珠子参167g、桂丁333g，混合，加8000mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水8000mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.17～1.18的清膏，加入适量淀粉、硬脂酸镁，混匀，制成颗粒，干燥，压制成片，包衣，制成1000片。
检测方法：照高效液相色谱法测定：
（1）色谱条件:DiamonsilC18色谱柱；流动相：乙腈-水比例为28:72；流速：1.0ml/min；检测波长270nm；柱温25℃；进样量10μl；
（2）对照品溶液的制备精密称取红景天苷对照品8.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品内容物粉末约2.0g，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称重，超声处理20min，放冷，用稀乙醇不足减失的重量，摇匀。精密吸取上清液25ml，置水浴蒸至近干，残渣加水25ml使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，摇匀，即得；
（4）测定：取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪测定；
（5）测定结果：每克本发明药物含红景天苷0.6587mg。
实施例3：
处方：草苁蓉333g，狮子七167g、珠子参333g、桂丁167g。
制法：取干燥的草苁蓉333g，狮子七167g、珠子参333g、桂丁167g，混合，加8000mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水8000mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.17～1.18的清膏，加入适量糊精，混匀，制成颗粒，装入胶囊，制成硬胶囊剂1000粒。
检测方法：照高效液相色谱法测定：
（1）色谱条件:DiamonsilC18色谱柱；流动相：乙腈-水比例为28:72；流速：1.0ml/min；检测波长270nm；柱温25℃；进样量10μl；
（2）对照品溶液的制备精密称取红景天苷对照品8.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品内容物粉末约2.0g，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称重，超声处理20min，放冷，用稀乙醇不足减失的重量，摇匀。精密吸取上清液25ml，置水浴蒸至近干，残渣加水25ml使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，摇匀，即得；
（4）测定：取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪测定；
（5）测定结果：每克本发明药物含红景天苷0.6612mg。
实施例4：
处方：草苁蓉333g，狮子七167g、珠子参333g、桂丁167g，节节虫2g，枸杞1g。
制法：取干燥的草苁蓉333g，狮子七167g、珠子参333g、桂丁167g，节节虫2g，枸杞1g，混合，加8000mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水8000mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.17～1.18的清膏，加入适量糊精，混匀，制成颗粒，装入胶囊，制成硬胶囊剂1000粒。
检测方法：照高效液相色谱法测定：
（1）色谱条件:DiamonsilC18色谱柱；流动相：乙腈-水比例为28:72；流速：1.0ml/min；检测波长270nm；柱温25℃；进样量10μl；
（2）对照品溶液的制备精密称取红景天苷对照品8.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品内容物粉末约2.0g，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称重，超声处理20min，放冷，用稀乙醇不足减失的重量，摇匀。精密吸取上清液25ml，置水浴蒸至近干，残渣加水25ml使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，摇匀，即得；
（4）测定：取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪测定；
（5）测定结果：每克本发明药物含红景天苷0.6722mg。
实施例5：
处方：草苁蓉333g，狮子七167g、珠子参333g、桂丁167g，蝎子13g，虾皮2g。
制法：取干燥的草苁蓉333g，狮子七167g、珠子参333g、桂丁167g，蝎子13g，虾皮2g，混合，加8000mL的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水8000mL，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.17～1.18的清膏，加入适量糊精，混匀，制成颗粒，装入胶囊，制成硬胶囊剂1000粒。
检测方法：照高效液相色谱法测定：
（1）色谱条件:DiamonsilC18色谱柱；流动相：乙腈-水比例为28:72；流速：1.0ml/min；检测波长270nm；柱温25℃；进样量10μl；
（2）对照品溶液的制备精密称取红景天苷对照品8.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品内容物粉末约2.0g，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称重，超声处理20min，放冷，用稀乙醇不足减失的重量，摇匀。精密吸取上清液25ml，置水浴蒸至近干，残渣加水25ml使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，摇匀，即得；
（4）测定：取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪测定；
（5）测定结果：每克本发明药物含红景天苷0.6813mg。

Claims (10)

1.一种具有治疗肠易激综合症作用的药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：草苁蓉1～2份、狮子七1～2份、珠子参1～2份、桂丁1～2份。
2.如权利要求1药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：草苁蓉1份、狮子七2份、珠子参1份、桂丁2份。
3.如权利要求1药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：草苁蓉2份、狮子七1份、珠子参2份、桂丁1份。
4.如权利要求1药物组合物，其特征在于，该药物组合物是由以下重量份的原料制成的：草苁蓉1份，狮子七1份、珠子参1份、桂丁1份。
5.如权利要求1～4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物采用药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂、口服液。
6.如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物采用如下方法制备：取草苁蓉、狮子七、珠子参、桂丁，混合，加入5～15倍量的水煎煮2～4次，每次0.5～2小时，提取液过滤，浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，装入硬胶囊，即得。
7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物采用如下方法制备：取草苁蓉、狮子七、珠子参、桂丁，混合，加8倍量的冷水浸泡30分钟，煎煮2小时，滤过，收集滤液；药渣加水8倍量，煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.17～1.18的清膏，干燥，粉碎成细粉，加入辅料，混匀，装入硬胶囊，即得。
8.如权利要求1～4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物的检测方法为：照高效液相色谱法测定：
（1）色谱条件：C18色谱柱；流动相：乙腈-水比例为25～30:70～75；流速：0.5～1.5ml/min；检测波长260～280nm；柱温20～30℃；进样量5～20μl；
（2）对照品溶液的制备：精密称取红景天苷对照品，置容量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液，置容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品内容物粉末，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇，称重，超声处理，放冷，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀；精密吸取上清液，置水浴蒸至近干，残渣加水使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至量瓶中，摇匀，即得；
（4）测定：取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪测定。
9.如权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物检测方法为：照高效液相色谱法测定：
（1）色谱条件:DiamonsilC18色谱柱；流动相：乙腈-水比例为28:72；流速：1.0ml/min；检测波长270nm；柱温25℃；进样量10μl；
（2）对照品溶液的制备：精密称取红景天苷对照品8.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液2ml，置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品内容物粉末2.0g，置锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称重，超声处理20min，放冷，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀。精密吸取上清液25ml，置水浴蒸至近干，残渣加水25ml使溶解转至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，摇匀，即得；
（4）测定：取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪测定。
10.如权利要求1～4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物在制备治疗肠炎药物中的应用。
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