CN113171321A - 一种积雪草提取物及其在制备抗炎症化妆品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种积雪草提取物及其在制备抗炎症化妆品中的应用,包括以下步骤:S1、取积雪草药材清洗,干燥,粉碎至50~100目,得到积雪草粉末;S2、用有机溶剂对积雪草粉末进行脱脂,得到脱脂积雪草粉末;S3、将脱脂积雪草粉末加入到60~80%乙醇溶液中,在65~80℃下超声提取,重复操作2~3次,合并提取液,离心,过滤取上清液;S4、将上清液经过活性炭脱色,离心,过滤,得到脱色液;S5、将脱色液经过壳聚糖絮凝除杂,离心,过滤,减压浓缩,过滤,干燥,即得积雪草提取物。本发明所制备得到的积雪草提取物具有良好的抗炎修复作用,主要成分为积雪草总苷、羟基积雪草苷。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域,具体涉及一种积雪草提取物及其在制备抗炎症化妆品中的应用。
背景技术
积雪草,伞形科植物积雪草Centella asiatica (L.) Urban.的全草,多年生匍匐草本。别名:马蹄草、雷公根、蚶壳草、铜钱草、老虎草、落得打等。积雪草生于路旁、田坎、沟边湿润而肥沃的土地上。分布于长江以南各地。全世界各热带及亚热带地区广布。积雪草喜生于湿润的河岸、沼泽、草地中。积雪草属于中医药材之一,它不仅具有药用价值,还在美容方面拥有超强的功效,积雪草可以增加皮肤表皮的抵抗力,具有抗发炎、镇静、解毒、消肿的效果,赋予肌肤弹性,强化肌肤的柔软度,可以延缓老化。
积雪草含活性成分三萜皂苷,最主要有积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草酸、积雪草糖、参枯尼苷碱等成分,目前在化妆品应用较多的积雪草提取物为积雪草总苷、羟基积雪草苷,但由于提取纯化复杂,市面上大多积雪草提取物纯度差异较大,杂质成分多,这在化妆品配方应用上,导致实际添加的有效成分含量偏低,功效表现相对较弱;本发明对工艺进行研究优化,使得积雪草的有效成分积雪草总苷、羟基积雪草苷能更加充分提取出,纯度提高很多,提高化妆品产品对皮肤的抗炎修复能力。
发明内容
本发明提供一种积雪草提取物及其在制备抗炎症化妆品中的应用,所制备得到的积雪草提取物具有良好的抗炎修复作用。
本发明解决其技术问题采用以下技术方案:
一种积雪草提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1、取积雪草药材清洗,干燥,粉碎至50~100目,得到积雪草粉末;
S2、用有机溶剂对积雪草粉末进行脱脂,得到脱脂积雪草粉末;
S3、将脱脂积雪草粉末加入到60~80%乙醇溶液中,在65~80℃下超声提取,重复操作2~3次,合并提取液,离心,过滤取上清液;
S4、将上清液经过活性炭脱色,离心,过滤,得到脱色液;
S5、将脱色液经过壳聚糖絮凝除杂,离心,过滤,减压浓缩,过滤,干燥,即得积雪草提取物。
作为一种优选方案,所述S2中具体为采用石油醚浸泡积雪草粉末进行脱脂,浸泡时间为40~80min。
作为一种优选方案,所述S3中脱脂积雪草粉末与乙醇溶液料液比为1g:8~12ml。
作为一种优选方案,S3中超声处理功率为300~500W,超声处理时间为25~40min;所述S3中离心速率为3500~5000rpm,离心时间为18~25min。
作为一种优选方案,所述S4中活性炭与上清液重量比为0.2~0.5:100,所述脱色在45~60℃水浴下进行脱色,脱色时间为25~40min。
作为一种优选方案,所述S5中壳聚糖与脱色液重量比为0.2~0.5:100,所述絮凝除杂在45~60℃水浴下进行絮凝除杂,絮凝除杂时间为25~40min。
作为一种优选方案,所述S5中离心速率为3500~5000rpm,离心时间为18~25min;所述减压浓缩至20~30%体积。
作为一种优选方案,将积雪草提取物利用蒸馏水溶解,而后进行大孔吸附树脂层析,先用蒸馏水进行洗脱,蒸馏水洗脱至流出液澄清,再用10~30%乙醇溶液进行洗脱,洗脱至流出液无色,再用60~80%乙醇溶液进行洗脱,收集洗脱液,干燥,即得一次纯化的积雪草提取物。
本发明的发明人在大量的积雪草提取物制备中发现,通过将上述的积雪草提取物进行上大孔吸附树脂层析,可将其他不具有抗炎功效的成分洗脱掉,再溶剂从树脂中解析出来,极大的提高了产物的纯度。
作为一种优选方案,将一次纯化的积雪草提取物用甲醇复溶,滴加丙酮进行重结晶,滴加至不再析出白色晶体时,收集白色晶体,得到二次纯化的积雪草提取物。
本发明的发明人在大量的积雪草提取物制备中发现,通过甲醇复溶、滴加丙酮重结晶,可以进一步提高积雪草提取物的纯度,进一步提高积雪草苷、羟基积雪草苷含量。
本发明还提供了一种积雪草提取物在制备抗炎症化妆品中的应用。
本发明的有益效果:本发明所制备得到的积雪草提取物具有良好的抗炎修复作用,主要成分为积雪草总苷、羟基积雪草苷,通过先利用石油醚对原料进行脱脂,避免了油溶性杂质给后续分离纯化带来影响,利用超声辅助加热提取,利用超声波的空腔作用、产生微射流,加速了目标成分从细胞壁渗出,极大的提高了效率,也避免了长时间高温提取对有效物的破坏,采用高浓度乙醇进行提取,避免了水溶性的淀粉等糖类、蛋白质大量溶出到提取液中,给后续的纯化加大处理难度;经活性碳、壳聚糖脱色絮凝,使产物颜色更加浅、杂质更少。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种积雪草提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1、取积雪草药材清洗,干燥,粉碎至80目,得到积雪草粉末;
S2、将积雪草粉末用石油醚浸泡60min,减压去除石油醚,得到
脱脂积雪草粉末;
S3、将脱脂积雪草粉末加入到80%乙醇溶液中,在75℃下用400W超声提取30min,重复操作2次,合并提取液,以4000rpm转速离心20min,过滤取上清液;所述脱脂积雪草粉末与乙醇溶液料液比为1g:10ml;
S4、将活性炭加入到上清液中,在50℃水浴下脱色30min,以4000rpm转速离心20min,过滤,得到脱色液;活性炭与上清液重量比为0.3:100;
S5、将壳聚糖加入到脱色液中,在50℃水浴下絮凝除杂30min,以4000rpm转速离心20min,过滤,减压浓缩至25%体积,干燥,即得积雪草提取物,所述壳聚糖脱色液重量比为0.4:100。
S5、将脱色液经过壳聚糖絮凝除杂,离心,过滤,减压浓缩,过滤,干燥,即得积雪草提取物。
实施例2
一种积雪草提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1、取积雪草药材清洗,干燥,粉碎至60目,得到积雪草粉末;
S2、将积雪草粉末用石油醚浸泡70min,减压去除石油醚,得到
脱脂积雪草粉末;
S3、将脱脂积雪草粉末加入到70%乙醇溶液中,在70℃下用400W超声提取30min,重复操作2次,合并提取液,以4000rpm转速离心20min,过滤取上清液;所述脱脂积雪草粉末与乙醇溶液料液比为1g:12ml;
S4、将活性炭加入到上清液中,在55℃水浴下脱色30min,以4000rpm转速离心20min,过滤,得到脱色液;活性炭与上清液重量比为0.4:100;
S5、将壳聚糖加入到脱色液中,在50℃水浴下絮凝除杂30min,以4000rpm转速离心20min,过滤,减压浓缩至24%体积,干燥,即得积雪草提取物,所述壳聚糖脱色液重量比为0.3:100。
S5、将脱色液经过壳聚糖絮凝除杂,离心,过滤,减压浓缩,过滤,干燥,即得积雪草提取物。
实施例3
一种积雪草提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1、取积雪草药材清洗,干燥,粉碎至80目,得到积雪草粉末;
S2、将积雪草粉末用石油醚浸泡60min,减压去除石油醚,得到
脱脂积雪草粉末;
S3、将脱脂积雪草粉末加入到80%乙醇溶液中,在75℃下用400W超声提取30min,重复操作2次,合并提取液,以4000rpm转速离心20min,过滤取上清液;所述脱脂积雪草粉末与乙醇溶液料液比为1g:10ml;
S4、将活性炭加入到上清液中,在50℃水浴下脱色30min,以4000rpm转速离心20min,过滤,得到脱色液;活性炭与上清液重量比为0.3:100;
S5、将壳聚糖加入到脱色液中,在50℃水浴下絮凝除杂30min,以4000rpm转速离心20min,过滤,减压浓缩至25%体积,干燥,即得积雪草提取物,所述壳聚糖脱色液重量比为0.4:100。
S5、将脱色液经过壳聚糖絮凝除杂,离心,过滤,减压浓缩,过滤,干燥,即得积雪草提取物;
S6、将积雪草提取物利用蒸馏水溶解,而后进行AB-8大孔吸附树脂层析,先用蒸馏水进行洗脱,水溶性杂质被洗脱出,蒸馏水洗脱至流出液澄清,再用20%乙醇溶液进行洗脱,流出液为黄色透明,洗脱至流出液无色,再用70%乙醇溶液进行洗脱,收集洗脱液,干燥,即得一次纯化的积雪草提取物;所述积雪草提取物与蒸馏水料液比为1g:5ml。
实施例4
一种积雪草提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1、取积雪草药材清洗,干燥,粉碎至80目,得到积雪草粉末;
S2、将积雪草粉末用石油醚浸泡60min,减压去除石油醚,得到
脱脂积雪草粉末;
S3、将脱脂积雪草粉末加入到80%乙醇溶液中,在75℃下用400W超声提取30min,重复操作2次,合并提取液,以4000rpm转速离心20min,过滤取上清液;所述脱脂积雪草粉末与乙醇溶液料液比为1g:10ml;
S4、将活性炭加入到上清液中,在50℃水浴下脱色30min,以4000rpm转速离心20min,过滤,得到脱色液;活性炭与上清液重量比为0.3:100;
S5、将壳聚糖加入到脱色液中,在50℃水浴下絮凝除杂30min,以4000rpm转速离心20min,过滤,减压浓缩至25%体积,干燥,即得积雪草提取物,所述壳聚糖脱色液重量比为0.4:100。
S5、将脱色液经过壳聚糖絮凝除杂,离心,过滤,减压浓缩,过滤,干燥,即得积雪草提取物;
S6、将积雪草提取物利用蒸馏水溶解,而后进行AB-8大孔吸附树脂层析,先用蒸馏水进行洗脱,水溶性杂质被洗脱出,蒸馏水洗脱至流出液澄清,再用20%乙醇溶液进行洗脱,流出液为黄色透明,洗脱至流出液无色,再用70%乙醇溶液进行洗脱,收集洗脱液,干燥,即得一次纯化的积雪草提取物;所述积雪草提取物与蒸馏水料液比为1g:5ml;
S7、将一次纯化的积雪草提取物用甲醇复溶,滴加丙酮进行重结晶,滴加至不再析出白色晶体时,收集白色晶体,得到二次纯化的积雪草提取物;所述一次纯化的积雪草提取物与甲醇料液比为1g:5ml。
对比例1
对比例1与实施例1不同之处在于,积雪草提取物的制备方法不同,在本对比例中,没有进行活性炭脱色、壳聚糖絮凝除杂,其他都相同。
一种积雪草提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1、取积雪草药材清洗,干燥,粉碎至80目,得到积雪草粉末;
S2、将积雪草粉末用石油醚浸泡60min,减压去除石油醚,得到
脱脂积雪草粉末;
S3、将脱脂积雪草粉末加入到80%乙醇溶液中,在75℃下用400W超声提取30min,重复操作2次,合并提取液,以4000rpm转速离心20min,过滤取上清液干燥,即得积雪草提取物;所述脱脂积雪草粉末与乙醇溶液料液比为1g:10ml。
为了进一步证明本发明的效果,提供了以下测试方法:
1.抗炎实验
取小鼠为试验对象,雌雄过半,随机分成7组,每组5只,选取蒸馏水作为空白对照组、浓度为0 .06mg/ml的布洛芬作为对照组,对各小组小鼠进行灌胃给药连续3d,给药量均为0.4ml/100g大鼠体重,末次给药30min后,于小鼠左耳均匀涂抹二甲苯50μl/只,致炎作用30min后处死小鼠,剪下双耳耳廓,用直径8mm的打孔器在双耳同一位置打下耳片,并称其质量。计算肿胀抑制率,测量结果见表1。
肿胀抑制率%=(空白对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/空白对照组平均肿胀度*100%。
表1 测量结果
从表1中可看出,本发明所述的积雪草提取物具有良好的抗炎作用。
对比实施例1、3可知,通过经大孔吸附树脂层析提纯后,不具有抗炎的成分物质被洗掉,抗炎成分的物质得到保留,从而具有更好的抗炎效果。
对比实施例1、3、4可知,经过大孔吸附树脂层析后,在经过重结晶,得到了具有更好抗炎效果的积雪草提取物。
对比实施例1与对比例1可知,经过活性炭脱色、壳聚糖絮凝除杂,可以有效的提高纯度,去除杂质,从而具有更好的抗炎效果。
以上述依据本发明的理想实施例为启示,通过上述的说明内容,相关工作人员完全可以在不偏离本发明技术思想的范围内,进行多样的变更以及修改。本发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容,必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。
Claims (10)
1.一种积雪草提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、取积雪草药材清洗,干燥,粉碎至50~100目,得到积雪草粉末;
S2、用有机溶剂对积雪草粉末进行脱脂,得到脱脂积雪草粉末;
S3、将脱脂积雪草粉末加入到60~80%乙醇溶液中,在65~80℃下超声提取,重复操作2~3次,合并提取液,离心,过滤取上清液;
S4、将上清液经过活性炭脱色,离心,过滤,得到脱色液;
S5、将脱色液经过壳聚糖絮凝除杂,离心,过滤,减压浓缩,过滤,干燥,即得积雪草提取物。
2.根据权利要求1所述的积雪草提取物的制备方法,其特征在于,所述S2中具体为采用石油醚浸泡积雪草粉末进行脱脂,浸泡时间为40~80min。
3.根据权利要求1所述的积雪草提取物的制备方法,其特征在于,所述S3中脱脂积雪草粉末与乙醇溶液料液比为1g:8~12ml。
4.根据权利要求1所述的积雪草提取物的制备方法,其特征在于,S3中超声处理功率为300~500W,超声处理时间为25~40min;所述S3中离心速率为3500~5000rpm,离心时间为18~25min。
5.根据权利要求1所述的积雪草提取物的制备方法,其特征在于,所述S4中活性炭与上清液重量比为0.2~0.5:100,所述脱色在45~60℃水浴下进行脱色,脱色时间为25~40min。
6.根据权利要求1所述的积雪草提取物的制备方法,其特征在于,所述S5中壳聚糖与脱色液重量比为0.2~0.5:100,所述絮凝除杂在45~60℃水浴下进行絮凝除杂,絮凝除杂时间为25~40min。
7.根据权利要求1所述的积雪草提取物的制备方法,其特征在于,所述S5中离心速率为3500~5000rpm,离心时间为18~25min;所述减压浓缩至20~30%体积。
8.根据权利要求1所述的积雪草提取物的制备方法,其特征在于,将积雪草提取物利用蒸馏水溶解,而后进行大孔吸附树脂层析,先用蒸馏水进行洗脱,蒸馏水洗脱至流出液澄清,再用10~30%乙醇溶液进行洗脱,洗脱至流出液无色,再用60~80%乙醇溶液进行洗脱,收集洗脱液,干燥,即得一次纯化的积雪草提取物。
9.根据权利要求8所述的积雪草提取物的制备方法,其特征在于,将一次纯化的积雪草提取物用甲醇复溶,滴加丙酮进行重结晶,滴加至不再析出白色晶体时,收集白色晶体,得到二次纯化的积雪草提取物。
10.权利要求1~9任一制备得到的积雪草提取物在制备抗炎症化妆品中的应用。
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