CN117243870B - 一种积雪草提取物及其制备和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种积雪草提取物及其制备和应用。首先将干燥、粉碎的积雪草在真空、20~50℃的条件下醇提30~90 min,醇提得到的积雪草粗提液离心后,于60~120 Mpa的压力下进行高压微射流处理,即得到所述积雪草提取物。本发明将低温真空萃取与高压微射流这两种特定技术按特定顺序有机结合,深度提取积雪草中的活性成分,尤其是抗衰活性成分,显著提升了积雪草苷、积雪草苷B、羟基积雪草苷和总黄酮等的提取率,使得到的积雪草提取物具有极佳的稳定性与抗衰功效,十分适用于制备中老年人的抗衰产品。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域。更具体地,涉及一种积雪草提取物及其制备和应用。
背景技术
随着年龄的增长,中老年人(45岁以上)的皮肤会逐渐失去弹性和光泽,出现皱纹和松弛等现象。因此,大部分中老年人会越来越青睐于抗衰效果较佳的化妆品。
中老年人皮肤松弛、有皱纹,皮下脂肪减少、皮肤干燥、防御功能下降,与青年人在皮肤的衰老生理变化、护理的侧重点和化妆美容的心理追求等方面均存在很大的差异,两个年龄段人群的抗衰产品并不能简单转用。然而,目前消费市场上很少有专攻于中老年人的抗衰产品,主要还是针对具有抗初老需求的青年人(25~35岁),如质地清爽的抗衰产品——A醇类、高浓度酸类等,但这类产品往往存在滋润性较差、刺激性较强等缺陷,不适合角质层更薄、皮肤更敏感的中老年人使用。
积雪草中含有多种具有抗衰活性的成分,且积雪草提取物滋润性好,对敏感、角质层薄的肌肤友好,无刺激性。因此,如何从积雪草提取出更多的抗衰活性成分成为中老年人抗衰产品相关研究的热点之一,如现有技术通过两步回流萃取结合水醇临界萃取工艺制备的积雪草提取物中,总黄酮等成分含量较高,但目前关于提升积雪草提取物中抗衰活性成分提取率的相关研究仍较少。
发明内容
本发明针对现有技术的不足,旨在提供一种积雪草提取物的制备方法,以提升积雪草中抗衰活性成分的提取率,显著提升积雪草提取物的抗衰活性,为滋润性好、对皮肤友好的适用于中老年人的抗衰产品提供一种新的优质选择。
本发明的第一目的是提供一种积雪草提取物的制备方法。
本发明的第二目的是提供上述方法制备得到的积雪草提取物。
本发明的第三目的是提供上述积雪草提取物在制备化妆品中的应用。
本发明的第四目的是提供一种化妆品。
本发明上述目的通过以下技术方案实现:
本发明提供了一种积雪草提取物的制备方法,包括如下步骤:
S1. 将干燥、粉碎的积雪草在真空、20~50 ℃的条件下醇提30~90 min,得到积雪草粗提液;
S2. 将S1所得积雪草粗提液离心后,于60~120 Mpa的压力下进行高压微射流处理,即得到所述积雪草提取物。
本发明对积雪草这一植物进行了针对性研究,将低温真空萃取与高压微射流这两种特定技术按特定顺序有机结合,通过在低温、真空条件下将积雪草中活性成分高效萃取出来后,再通过高压微射流处理将溶液中与大分子紧密结合的活性成分进一步分离开来,不仅实现了积雪草中活性成分的深度提取,尤其是抗衰活性成分,显著提升了积雪草苷、积雪草苷B、羟基积雪草苷和总黄酮等的提取率,还使活性成分因与大分子分离而能更好地发挥活性,并且,此时的高压微射流处理还有利于活性成分与溶液形成稳定的范德华力,显著提升了积雪草提取物的稳定性,使得到的积雪草提取物不仅滋润性好,对肌肤友好,即使是对敏感、角质层薄的中老年人皮肤也不会有刺激性,还具有极佳的抗衰功效,十分适用于制备中老年人的抗衰产品,且稳定性高,货架期长。
优选地,所述粉碎为粉碎至30~50目,最优选为40目。
优选地,所述真空的真空度为0.1~5 Pa,最优选为0.3 Pa。
优选地,所述醇提的温度为35 ℃。
优选地,所述醇提的时间为60 min。
优选地,所述醇提所使用的试剂为多元醇溶液。
进一步优选地,所述多元醇溶液中,多元醇的体积浓度为10%~40%,最优选为30%。
进一步优选地,所述多元醇为丁二醇、丙二醇、双丙甘醇、甘油中的一种或几种,最优选为丁二醇。
进一步优选地,所述积雪草与多元醇溶液的用量比为1 g:10~30 mL,最优选为1g:20 mL。
优选地,所述醇提的次数为1~3次,最优选为2次。
优选地,所述离心为在1000~4000 r/min下离心5~15 min,最优选为在2500 r/min下离心10 min。
优选地,所述离心后还进行过滤。
优选地,所述过滤为通过0.2~0.8 μm的膜进行过滤,最优选为0.45 μm。
优选地,所述高压微射流处理的压力为90 Mpa。
优选地,所述高压微射流处理的次数为2~5次,最优选为3次。
上述方法制备得到的积雪草提取物不仅滋润性好,对肌肤友好,即使是对敏感、角质层薄的中老年人皮肤也不会有刺激性,还具有极佳的抗衰功效,十分适用于制备中老年人的抗衰产品。因此,上述方法制备得到的积雪草提取物、上述积雪草提取物在制备化妆品中的应用,以及含有上述积雪草提取物的化妆品均应在本发明的保护范围之内。
优选地,所述化妆品还含有化妆品上可接受的辅料。
优选地,所述化妆品包括但不限于精华液、乳霜。
作为一种优选的可实施方案,当所述化妆品为精华液时,所述化妆品包含以下质量百分数的各组分:保湿剂5%~10%、增稠剂0.1%~0.5%、防腐剂0.5%~1.0%、上述积雪草提取物1%~5%,余量为水。
所述精华液的制备方法包括如下步骤:
S1. 将配方量的保湿剂、增稠剂加入到75wt%~85wt%的水(最优选为80wt%)中,混匀,于80~90 ℃下保温25~35 min(最优选为30 min);
S2. 待S1所得产物降温至55~65 ℃(最优选为60 ℃)时,加入防腐剂,混匀;
S3. 待S1所得产物降温至40~50 ℃(最优选为45 ℃)时,加入上述积雪草提取物混匀,并加入剩余的水,即得到所述精华液。
本发明具有以下有益效果:
本发明将低温真空萃取与高压微射流这两种特定技术按特定顺序有机结合,深度提取积雪草中的活性成分,尤其是抗衰活性成分,显著提升了积雪草苷、积雪草苷B、羟基积雪草苷和总黄酮等的提取率,使得到的积雪草提取物具有极佳的稳定性与抗衰功效,十分适用于制备中老年人的抗衰产品。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步说明本发明,但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明,本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明,以下实施例所用试剂和材料均为市购。
实施例1 积雪草提取物的制备
S1. 将干燥、粉碎至40目的100 g积雪草加入到体积浓度30%的2000 mL丁二醇溶液中,在真空度0.3 Pa、温度35 ℃的条件下醇提60 min,重复醇提2次,得到积雪草粗提液;
S2. 将S1所得积雪草粗提液在2500 r/min下离心10 min后,过0.45 μm膜得上清液,再于90 Mpa的压力下进行高压微射流处理3次,即得到所述积雪草提取物。
实施例2 积雪草提取物的制备
S1. 将干燥、粉碎至30目的100 g积雪草加入到体积浓度40%的1000 mL甘油溶液中,在真空度0.1 Pa、温度20 ℃的条件下醇提90 min,得到积雪草粗提液;
S2. 将S1所得积雪草粗提液在1000 r/min下离心15 min后,过0.2 μm膜得上清液,再于60 Mpa的压力下进行高压微射流处理5次,即得到所述积雪草提取物。
实施例3 积雪草提取物的制备
S1. 将干燥、粉碎至50目的100 g积雪草加入到体积浓度10%的3000 mL双丙甘醇溶液中,在真空度5 Pa、温度50 ℃的条件下醇提30 min,重复醇提3次,得到积雪草粗提液;
S2. 将S1所得积雪草粗提液在4000 r/min下离心5 min后,过0.8 μm膜得上清液,再于120 Mpa的压力下进行高压微射流处理2次,即得到所述积雪草提取物。
对比例1
同实施例1,区别在于,先进行高压微射流处理,再进行低温真空萃取。具体如下:
S1. 将干燥、粉碎至40目的100 g积雪草加入到体积浓度30%的2000 mL丁二醇溶液中,在90 Mpa的压力下进行高压微射流处理3次;
S2. 将S1所得产物在2500 r/min下离心10 min后,过0.45 μm膜得上清液,再在真空度0.3 Pa、温度35 ℃的条件下醇提60 min,重复醇提2次,即得到所述积雪草提取物。
对比例2
同实施例1,区别在于,将S1的低温真空萃取替换为常规低温回流提取。
即本对比例的S1具体如下:
S1. 将干燥、粉碎至40目的100 g积雪草加入到体积浓度30%的2000 mL丁二醇溶液中,在60 ℃的条件下回流醇提60 min,重复醇提2次,得到积雪草粗提液。
对比例3
同实施例1,区别在于,将S1的低温真空萃取替换为微波萃取。
即本对比例的S1具体如下:
S1. 将干燥、粉碎至40目的100 g积雪草加入到体积浓度30%的2000 mL丁二醇溶液中,在500 W的功率下进行微波萃取15 min,重复萃取2次,得到积雪草粗提液。
对比例4
同实施例1,区别在于,将S2的高压微射流处理替换为微波萃取。
即本对比例的S2具体如下:
S2. 将S1所得积雪草粗提液在2500 r/min下离心10 min后,过0.45 μm膜得上清液,再于500 W的功率下进行微波萃取15 min,重复萃取3次,即得到所述积雪草提取物。
对比例5
同实施例1,区别在于,将S1的低温真空萃取替换为超声萃取。
即本对比例的S1具体如下:
S1. 将干燥、粉碎至40目的100 g积雪草加入到体积浓度30%的2000 mL丁二醇溶液中,在500 W的功率下进行超声萃取60 min,重复萃取2次,得到积雪草粗提液。
对比例6
同实施例1,区别在于,将S2的高压微射流处理替换为超声萃取。
即本对比例的S2具体如下:
S2. 将S1所得积雪草粗提液在2500 r/min下离心10 min后,过0.45 μm膜得上清液,再于500 W的功率下进行超声萃取60 min,重复萃取3次,即得到所述积雪草提取物。
对比例7
同实施例1,区别在于,将S1的丁二醇溶液替换为等体积纯水。
测试例1 积雪草提取物中抗衰活性成分的含量测定
一、积雪草提取物中积雪草苷、积雪草苷B和羟基积雪草苷含量的测定方法
分别称取0.500 g实施例1~3与对比例1~7所得积雪草提取物,并将浑浊的样品经0.1 μm膜过滤(澄清的样品不进行过滤)后,得到待测样品。
精密称取标准品(积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B),按质量比1:1:1的用量混匀,再用甲醇将混合物的终浓度调整至1 mg/mL,制成混合标准品,经0.25 μm滤膜过滤待测。
将待测样品与标准品分别进行液相色谱分析,条件均为:色谱柱:Waters HSS T3-C18柱(250×4.6 mm,5 μm);流速:1.0 mL/min;流动相A:2 mmol/L β-环糊精水溶液,B:乙腈;流动相梯度:0→5 min,75% A;5→15 min,75%→30% A;15→15.01 min,30%→75% A;15.01→20 min,75% A;柱温:30 ℃;检测波长205 nm;进样量20 μL。
二、积雪草提取物中总黄酮含量的测定方法
分别称取0.500 g实施例1~3与对比例1~7所得积雪草提取物,并将浑浊的样品经0.1 μm膜过滤(澄清的样品不进行过滤)后,以芦丁为对照品,通过NaNO2-Al(NO3)3比色法测定积雪草提取物中总黄酮的含量。
三、积雪草提取物中抗衰活性成分含量的测定结果
含量测定结果如表1所示。
表1 抗衰活性成分含量的测定结果(单位:g/100 g积雪草提取物)
可见,实施例1~3所得积雪草提取物中积雪草苷、积雪草苷B、羟基积雪草苷和总黄酮等活性成分的含量均显著高于对比例1~7,表明本发明将低温真空萃取与高压微射流这两种特定技术按特定顺序有机结合,深度提取积雪草中的活性成分,尤其是抗衰活性成分,显著提升了积雪草苷、积雪草苷B、羟基积雪草苷和总黄酮等的提取率,使得到的积雪草提取物具有极佳的抗衰功效,十分适用于制备中老年人的抗衰产品。
测试例2 积雪草提取物的稳定性测试
将实施例1~3与对比例1~7所得积雪草提取物分别置于-18 ℃、4 ℃、常温(25℃)、45 ℃、50 ℃的环境中,进行为期3个月的外观稳定性考察,对稳定性测试前后的样品外观变化程度进行打分,打分采用10分制,测试前后颜色无差异为10分,完全变色为0分,中间依次类推,并对是否产生沉淀的情况进行记录。实验结果如表2所示。
表2 稳定性测试前后的样品外观变化程度打分结果
可见,无论是在最适合产品储存的4 ℃下,还是在不适合储存的-18 ℃、常温、45℃、50 ℃的环境中,实施例1~3所得积雪草提取物的外观变化程度均显著小于对比例1~7,表明本发明将低温真空萃取与高压微射流这两种特定技术按特定顺序有机结合,对积雪草进行提取,相比其它方法、其它顺序提取得到的积雪草提取物具有明显更佳的稳定性;并且,即使是在条件较为严苛的环境(-18 ℃、常温、45 ℃、50 ℃)中储存,实施例1~3所得积雪草提取物的测试分数仍能在8分以上,表明出优异的稳定性。
测试例3 积雪草提取物的抗衰活性
一、线虫的培养、同步化
采用限时产卵法,即挑取L4期的秀丽隐杆线虫野生型N2于NGM培养基(首先将NaCl1.5 g、琼脂粉8.5 g、胰蛋白胨1.25 g加入到12.5 mL 1 mol/L磷酸缓冲液中,再用蒸馏水定容至500 mL,然后121 ℃、0.1 Mpa高压灭菌20 min,在恒温水浴锅中冷却至55 ℃,再在超净工作台中加入0.5 mL 1 mol/L CaCl2、0.5mL 1 mol/L MgSO4、0.5 mL 5 mg/mL胆固醇乙醇溶液混匀,倒板即得)内,在20 ℃条件下培养2 h后将成虫挑出,得到同期化的虫卵,继续培养48 h后得到同步化的秀丽隐杆线虫。
二、半数致死浓度(LC50)的测定
量取200 μL实施例1~3与对比例1~7所得积雪草提取物,分别加入到96孔板中,并以200 μL的K-medium溶液(1.18 g KCI,1.5 g NaCl,蒸馏水定容至500 mL,121 ℃、0.1Mpa高压灭菌20 min)为空白对照,每组设置8个平行孔。然后在每孔中分别挑入50条同步化的秀丽隐杆线虫,20 ℃暗培养24 h后,在体视显微镜下判断线虫死亡存活情况(用铂丝针轻触秀丽隐杆线虫,有反应即视为存活,无反应为死亡,3次生物学重复),并计算实施例1~3与对比例1~7所得积雪草提取物对秀丽隐杆线虫的24 h LC50。
再采用含有5%吐温80的K-medium溶液将实施例1~3与对比例1~7所得积雪草提取物配制成终浓度分别为24 h LC50的1/10、1/100、1/1000的待测样品,分别对应高、中、低剂量。
三、秀丽隐杆线虫寿命的测定
S1. 将0.5 mL高、中、低剂量的实施例1~3与对比例1~7所得积雪草提取物、K-medium溶液(0.5 mL,作为空白对照)以及二甲双胍(0.5 mL,20 mg/L,作为阳性对照)分别溶于10 mL的NGM液体培养基中,再分装至24孔板,每孔200 μL。
S2. 前述同步化的秀丽隐杆线虫野生型N2继续在NGM培养基中,于20 ℃条件下培养3 d且发育为成虫后,挑入S1的24孔板中,每孔20条。
S3. 每天剔除死亡秀丽隐杆线虫,并计数死亡、丢失和存活秀丽隐杆线虫的条数,记录秀丽隐杆线虫的寿命长短,直至秀丽隐杆线虫全部死亡。
四、积雪草提取物对秀丽隐杆线虫寿命的影响
根据前述记录的秀丽隐杆线虫寿命长短,统计得出平均寿命及最大寿命,结果如表3所示。
表3 积雪草提取物对秀丽隐杆线虫寿命的影响情况
可见:
(1)与对比例1~7相比,实施例1~3所得积雪草提取物更能延长秀丽隐杆线虫的寿命,即实施例1~3所得积雪草提取物的抗衰性能最佳,表明本发明将低温真空萃取与高压微射流这两种特定技术按特定顺序有机结合,相比其它方法、其它顺序提取得到的积雪草提取物具有明显更佳的抗衰功效。
(2)实施例1~3中,中剂量的积雪草提取物抗衰性能最佳,略高于阳性对照,而高剂量的积雪草提取物抗衰性能略有下降,但仍高于空白对照,表明虽然剂量过高会对抗衰性能产生一定的抑制作用,但其抗衰性能仍较佳。
(3)对比例1~7中,低剂量、高剂量的积雪草提取物的抗衰性能基本都比空白对照组差,且有部分中剂量积雪草提取物的抗衰性能也略差于空白对照组,可见,替换掉低温真空萃取、或是替换掉高压微射流处理、或是更换两者的顺序、或是将低温真空萃取的醇提替换为水提,均可能会导致对抗衰性能的抑制,甚至可能会导致衰老轻微加快,而正是本发明将低温真空萃取与高压微射流这两种特定技术按特定顺序有机结合,才能具有最佳的抗衰功效。
测试例4 含积雪草提取物的精华液的抗衰活性
一、含积雪草提取物的抗衰精华液1~10的制备
将3wt%甘油、4wt%丁二醇、0.2wt%黄原胶和80wt%去离子水混合均匀后,加热至85℃,保温30 min后,搅拌降温至60 ℃,加入0.5wt%对羟基苯乙酮和0.5wt% 1,2-己二醇搅拌溶解,再降温至45℃,加入3wt%实施例1~3与对比例1~7所得积雪草提取物搅拌均匀,最后加入去离子水补足100wt%,搅拌均匀,得到抗衰精华液1~10(其中,抗衰精华液1~3为含实施例1~3所得积雪草提取物的抗衰精华液,抗衰精华液4~10为含对比例1~7所得积雪草提取物的抗衰精华液)。
二、精华的抗衰活性测试方法
招募55岁以上的人群100位,符合《皮肤老化图谱》分级图谱中眼角皱纹为5~7级的女性志愿者,10人一组,每天早晚洁面后分别涂抹抗衰精华液1~10各1次,连续使用28天。利用Cutometer MPA580测试第0天、14天与28天时面部弹性R2与R5值,在第14天与28天时统计志愿者的皮肤过敏人数,并在第0天与28天时由经培训的专业评估人员评估志愿者的眼角皱纹等级。
三、精华的抗衰活性测试结果
以第0天数据为基础,计算第14天、第28天R2、R5值的改善率,以及第28天时志愿者的眼角皱纹等级提升数(结果取平均值,四舍五入取整),并记录第14天与28天时志愿者的皮肤过敏人数。结果如表4所示。
表4 精华的抗衰活性测试结果
可见,与对比例1~7相比,实施例1~3所得积雪草提取物更能改善志愿者的面部弹性与眼角皱纹情况,并且不存在皮肤过敏的情况,即实施例1~3所得积雪草提取物的抗衰性能与皮肤友好性最佳,表明本发明将低温真空萃取与高压微射流这两种特定技术按特定顺序有机结合,相比其它方法、其它顺序提取得到的积雪草提取物具有明显更佳的抗衰功效和更低的刺激性。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种积雪草提取物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1. 将干燥、粉碎的积雪草在真空、20~50 ℃的条件下醇提30~90 min,得到积雪草粗提液;
S2. 将S1所得积雪草粗提液离心后,于60~120 Mpa的压力下进行高压微射流处理,即得到所述积雪草提取物;
其中,所述真空的真空度为0.1~5 Pa;所述醇提所使用的试剂为体积浓度10%~40%的多元醇溶液;所述多元醇为丁二醇、丙二醇、双丙甘醇、甘油中的一种或几种;所述积雪草与多元醇溶液的用量比为1 g:10~30 mL;所述高压微射流处理的次数为2~5次。
2.权利要求1所述方法制备得到的积雪草提取物。
3.权利要求2所述积雪草提取物在制备化妆品中的应用。
4.一种化妆品,其特征在于,含有权利要求2所述积雪草提取物。
5.根据权利要求4所述化妆品,其特征在于,还含有化妆品上可接受的辅料。
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