CN116077408A - 一种具有防晒修复功能的天然植物组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及A61K8/00技术领域，具体为一种具有防晒修复功能的天然植物组合物及其制备方法，含有如下原料药：松口蘑、小米草、白及、丹皮、白月季花、白芍、膜荚黄芪根、银杏叶、积雪草、黄岑根、雪莲花、黑莓中的至少三种，通过松口蘑、白及、白芍、雪莲花、银杏叶按质量比组合后能够产生优异的协同防晒、抗氧化、美白作用，同时热稳定性良好，可用于皮肤护理，特别是用于辅助防晒剂使用、晒后修复、提亮肤色。

Description

一种具有防晒修复功能的天然植物组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及A61K8/00技术领域，具体为一种具有防晒修复功能的天然植物组合物及其制备方法。
背景技术
随着消费者对皮肤抗衰老问题的重视，各种抗衰老相关的产品层出不穷。其中影响衰老的因素很多，其中最主要的可以分为自然老化和光老化，自然老化发生在身体的所有组织，包括遗传、新陈代谢和时间流逝等多种因素，是一个不可避免的现象。长期受紫外线辐射所导致的光老化是外源性老化的主要类型，约80％以上的暴露部位美容问题由皮肤光老化引起，且与临床多种皮肤病以及皮肤肿瘤的发生都息息相关。
但是，现有技术中通过引入物理防晒剂二氧化碳和氧化锌等，通过遮盖的作用来抵挡紫外线的伤害，如中国专利申请(授权公告号为CN109512684B)公开了一种高含量二氧化钛或氧化锌的防晒剂及其制备方法，但是质地稍厚，容易堵塞毛孔，同时微粒可能会释放自由基，增加氧化压力；而化学防晒剂如二苯酮-3，易被皮肤大量吸收，可能干扰内分泌或者引起接触性过敏，引发光敏感，存在类雌激素作用，属于高风险成分；4-甲基苄亚基樟脑属于UVB防晒剂，4-MBC可能对甲状腺有毒性，干扰人体激素；甲氧基肉桂酸乙基己酯(OMC)油溶性防晒剂，刺激相对较低，易被皮肤吸收，全世界范围使用十分广泛，安全性有一定争议，有干扰内分泌、遗传毒性等负面效应；对氨基苯甲酸可能引发光敏感、接触性皮炎和过敏性湿疹；水杨酸辛酯属于水杨酸类衍生物，可能存在导致胎儿畸形、流产风险加大等风险；奥克立林ORC只要吸收UVB，就会释放自由基，造成皮肤的一系列氧化应激反应，胡莫柳酯对人体激素有微弱影响，会产生一定的有毒代谢产物。
因此，为了解决现有物理防晒剂、化学防晒剂中存在的问题，开发一种具有防晒修复功能的天然植物组合物，以通过吸收紫外线、抗氧化和皮肤表面屏障等途径起到抗紫外线辐射的作用的同时通过抗炎作用对辐射损伤部位起到修复作用。
发明内容
本发明一方面提供了一种具有防晒修复功能的天然植物组合物，含有如下原料药：松口蘑、小米草、白及、丹皮、白月季花、白芍、膜荚黄芪根、银杏叶、积雪草、黄岑根、雪莲花、黑莓中的至少三种。
作为一种优选的技术方案，所述组合物至少含有如下原料药：松口蘑(Tricholomamatsutake)、白及(Bletilla striata)、白芍(Paeonia lactiflora)、雪莲花(Saussureainvolucrata)、银杏叶(Ginkgo biloba)。
作为一种优选的技术方案，所述组合物至少含有如下重量百分比的原料药：松口蘑10-30％、白及20-40％、白芍5％-20％、雪莲花10％-30％、银杏叶10％-30％。
为了解决有物理防晒剂、化学防晒剂中存在的问题，发明人对植物提取物进行了大量的提取及后续应用探究试验，结果表明，松口蘑、白及、白芍、雪莲花、银杏叶按上述质量比组合后能够产生优异的协同防晒、抗氧化、美白作用，同时热稳定性良好，可用于皮肤护理，特别是用于辅助防晒剂使用、晒后修复、提亮肤色。
本发明另一方面提供了一种具有防晒修复功能的天然植物组合物的制备方法，至少包括以下步骤：
(1)称取原料药并粉碎过筛得到原料混合物；
(2)对原料混合物进行溶剂提取后进行微射流提取后得到组合物提取物；
(3)将组合物提取物进行高速离心后分离上清液；
(4)将上清液进行过滤、浓缩后即得。
作为一种优选的技术方案，所述粉碎的粒度为20-100目。
作为一种优选的技术方案，所述溶剂提取中溶剂为质量分数为5-50％的低级醇水溶液；优选的，所述低级醇水溶液中溶质为丙三醇、1,2-丙二醇、1,3-丙二醇、1,2-丁二醇、1,3-丁二醇、1,4-丁二醇中的至少一种。优选的，所述低级醇水溶液中溶质为1,3-丁二醇或1,3-丙二醇。
优选的，所述溶剂提取的条件为：提取倍数为10-50倍，提取温度为20-60℃，提取次数1-3次，每次提取时间为20-90min；
作为一种优选的技术方案，所述微射流提取具体为：采用微射流提取器提取10-60min。所述微射流提取器来源于广州市络捷生物科技有限公司。
本发明中通过先将原料药粉碎后得到粒度为20-100目的原料混合物，之后控制提取条件采用质量分数为5-40％的低级醇水溶液进行溶剂提取，并采用微射流提取器进行后续提取10-60min，将各原料药中的有效成分进行充分提取，保证后续应用时功效的稳定发挥。
作为一种优选的技术方案，所述高速离心的转速为10000rpm-20000rpm。
作为一种优选的技术方案，所述过滤具体为：将上清液依次进行微滤、超滤后得到澄清滤液。
优选的，所述微滤具体采用500-1000nm孔径陶瓷膜进行。优选的，所述超滤具体采用5-20nm孔径陶瓷膜进行。
作为一种优选的技术方案，所述浓缩具体为：将过滤后得到的澄清滤液通过反渗透浓缩至相对密度1.100-1.250。
基于本发明提供的提取工艺，制备得到的天然植物组合物辅助防晒剂添加使用，有效提高抗氧化能力，淬灭化学类防晒剂(例如奥克立林、胡莫柳酯等)释放的自由基；提高防晒能力，包括对UVB波段紫外线吸收，减少防晒剂的使用，防晒的同时有效抑制酪氨酸酶活力，达到美白作用；此外，能够在高温环境下保持对UVB波段紫外线的吸收能力。
有益效果
1、本发明提供了一种具有防晒修复功能的天然植物组合物，通过松口蘑、白及、白芍、雪莲花、银杏叶按质量比组合后能够产生优异的协同防晒、抗氧化、美白作用，同时热稳定性良好，可用于皮肤护理，特别是用于辅助防晒剂使用、晒后修复、提亮肤色。
2、本发明中通过先将原料药粉碎后得到粒度为20-100目的原料混合物，之后控制提取条件采用质量分数为5-40％的低级醇水溶液进行溶剂提取，并采用微射流提取器进行后续提取10-60min，将各原料药中的有效成分进行充分提取，保证后续应用时功效的稳定发挥。
3、基于本发明提供的提取工艺，制备得到的天然植物组合物辅助防晒剂添加使用，有效提高抗氧化能力，淬灭化学类防晒剂(例如奥克立林、胡莫柳酯等)释放的自由基；提高防晒能力，包括对UVB波段紫外线吸收，减少防晒剂的使用，防晒的同时有效抑制酪氨酸酶活力，达到美白作用；此外，能够在高温环境下保持对UVB波段紫外线的吸收能力。
附图说明
图1为本发明志愿者应用实施例1及其空白对照进行SPF值测试处的皮肤拍摄记录图，图中(a)为应用实施例1空白对照；(b)为应用实施例1。
图2为实施例1及部分防晒剂的200-600nm的波长扫描图。
图3为实施例1在不同环境下的耐热稳定性测试结果图。
具体实施方式
实施例1
本发明的实施例1一方面提供了一种具有防晒修复功能的天然植物组合物，含有如下重量百分比的原料药：松口蘑20％、白及20％、白芍20％、雪莲花20％、银杏叶20％。
本发明的实施例另一方面提供了一种具有防晒修复功能的天然植物组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)称取原料药并粉碎过筛得到原料混合物；
(2)对原料混合物(3.0kg)进行溶剂提取后进行微射流提取后得到组合物提取物；
(3)将组合物提取物进行高速离心后分离上清液；
(4)将上清液进行过滤、浓缩后即得。
所述粉碎的粒度为60目。
所述溶剂提取中溶剂为质量分数为30％的低级醇水溶液；所述低级醇水溶液中溶质为1,3-丁二醇。
所述溶剂提取的条件为：提取倍数为100/3倍，提取温度为25℃，提取次数1次，提取时间为60min；
所述微射流提取具体为：采用微射流提取器提取30min。所述微射流提取器来源于广州市络捷生物科技有限公司。
所述高速离心的转速为20000rpm。
所述过滤具体为：将上清液依次进行微滤、超滤后得到澄清滤液。
所述微滤具体采用800nm孔径陶瓷膜进行。所述超滤具体采用10nm孔径陶瓷膜进行。
所述浓缩具体为：将过滤后得到的澄清滤液通过反渗透浓缩至相对密度1.150。
实施例2
本发明的实施例2提供了一种具有防晒修复功能的天然植物组合物及其制备方法，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，所述溶剂提取的条件为：提取倍数为50/3倍，提取温度为25℃，提取次数1次，提取时间为60min。
实施例3
本发明的实施例3提供了一种具有防晒修复功能的天然植物组合物及其制备方法，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，所述溶剂提取的条件为：提取倍数为100/3倍，提取温度为60℃，提取次数1次，提取时间为60min。
实施例4
本发明的实施例4提供了一种具有防晒修复功能的天然植物组合物及其制备方法，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，所述低级醇水溶液中溶质为1,3-丙二醇；所述溶剂提取的条件为：提取倍数为100/3倍，提取温度为25℃，提取次数2次，每次提取时间为30min。
实施例5
本发明的实施例5提供了一种具有防晒修复功能的天然植物组合物及其制备方法，其具体实施方式同实施例1，不同之处在于，所述溶剂提取中溶剂为质量分数为5％的低级醇水溶液。
应用实施例1
本发明的应用实施例1提供了一种具有胡莫柳酯的膏霜，包含本发明实施例1制备的具有防晒修复功能的天然植物组合物5.00％(重量百分比，下同)，具体制备原料参见下表1。
表1、
Figure BDA0004015040450000051
Figure BDA0004015040450000061
所述具有胡莫柳酯的膏霜的制备方法为：将A相和B相分别加热至80℃，分别搅拌至全部溶解，在搅拌下将A相加入至B相中，保温乳化20分钟后降温，至室温时(25℃)停止搅拌，出料灌装即得。
应用实施例1空白对照为不含有本发明实施例1制备的具有防晒修复功能的天然植物组合物的具有胡莫柳酯的膏霜，具体制备原料参见下表2，制备方法同应用实施例1。
表2、
A相： 重量百分比
胡莫柳酯 8.00％
羊毛脂 5.00％
硬脂酸 4.00％
白凡士林 2.50％
羟苯丙酯 0.05％
B相： 重量百分比
水 加至100.00％
丙二醇 5.00％
三乙醇胺 1.00％
羟苯甲酯 0.10％
EDTA二钠 0.05％
性能测试方法
1.DPPH自由基消除实验：
试剂配制：
DPPH试剂的配制：精密称取DPPH粉末(分子量394)0.0100g，置于250mL容量瓶中，用95％乙醇溶解定容至250mL，得浓度为0.1mmol/L的DPPH试剂。
抗氧化能力的测定：
在10ml试管中依次加入4.0ml配好的DPPH溶液和1.0ml 95％乙醇，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为A0。在10ml试管中依次加入4.0ml配好的DPPH溶液和1.0ml待测试样溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为Ar。在10ml试管中依次加入4.0ml 95％乙醇溶液和1.0ml待测试样溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为As。
结果分析：
计算公式：样品对DPPH自由基的清除率
Figure BDA0004015040450000071
式中：Ar-----加测试液反应后DPPH溶液的吸光度；
As-----不加DPPH，只加测试液和95％乙醇的溶液的吸光度；
A0-----不加测试液，只加DPPH及95％乙醇的溶液的吸光度。
数据分析：1％(重量百分比，下同)的实施例1-5与0.1mg/mL异抗坏血酸钠消除自由基的能力相差无异，而3％(重量百分比，下同)的实施例1则达到93.6％，说明组方植物组合物有显著的抗氧化功效。
表3、实施例1-5的DPPH自由基消除实验
样品稀释液 DPPH消除率％
1％实施例1 71.5％
1％实施例2 72.6％
1％实施例3 76.0％
1％实施例4 69.0％
1％实施例5 74.0％
0.1mg/mL异抗坏血酸钠 85.7％
表4、实施例1的浓度梯度DPPH自由基消除实验
Figure BDA0004015040450000072
Figure BDA0004015040450000081
2、羟自由基消除实验：
试剂配制：
甲基紫：1.03*10-5mol/L，加纯水配制；
硫酸亚铁：1*10-3mol/L，加纯水配制；
Tris-HCl缓冲溶液，pH＝3.5(0.05mol/L)：tris先纯水溶解配成25mL的0.1mol/L浓度，加0.1mol/L的HCl，再纯水定容至50ml；
1.6mol/L过氧化氢溶液：用30％过氧化氢加纯水配制。
实验过程：
Figure BDA0004015040450000082
在10mL带塞比色管中先加入硫酸亚铁、甲基紫、测试液摇匀，加入Tris-HCl调节pH至3.5，再加入过氧化氢，纯水加至10mL搅匀，室温(25℃)放置30min后，紫外分光光度计578nm测吸光值A。
计算公式：
羟自由基消除率％＝{(A2-A0)/(A1-A0)}*100，所得结果用百分数表示。
数据分析：4％(重量百分比，下同)实施例1-5的消除羟自由基能力均比0.1mg/mL异抗坏血酸钠强，且5％(重量百分比，下同)实施例1达到86.7％，结合DPPH自由基消除实验的数据看，植物组合物可淬灭化学类防晒剂(例如奥克立林、胡莫柳酯等)产生的自由基，降低其对皮肤氧化应激损伤，更好地保护皮肤不受紫外线的刺激。
表5、实施例1-5的羟自由基消除实验
Figure BDA0004015040450000083
Figure BDA0004015040450000091
表6实施例1的浓度梯度羟自由基消除实验
Figure BDA0004015040450000092
3、酪氨酸酶抑制实验：
试剂配制：
a.PBS(pH＝6.8)的制备：精密称取6.80g磷酸二氢钾，溶于250mL的纯水，得0.2mol/L磷酸二氢钾溶液；精密称取0.94g氢氧化钠，溶于118mL的纯水,得0.2mol/L氢氧化钠溶液。取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250mL和0.2mol/L氢氧化钠溶液118mL混合，纯水稀释定容至1000mL，即得PBS(pH＝6.8)。
b.L-酪氨酸溶液的配制：用PBS配制成1.5mmol/L的L-酪氨酸溶液，具体为用少许0.1mol/L HCl溶液溶解L-酪氨酸，然后再用PBS(pH＝6.8)稀释到pH＝7，即得。
c.酪氨酸酶溶液的配制：用适量的PBS溶解并配制成200U/mL的酪氨酸酶溶液，酪氨酸酶用PBS(pH＝6.8)溶解分装于PE管，置于-20℃冰箱中保存，用时取出放于4℃冰箱解冻。
供试品的制备：
取实施例1～4和对比例1～3黑松露提取物加纯水定容，分别配制成10.0mg/mL试液。并同样方法配制5.0mg/mL熊果苷对照液。
测定方法：
精密量取样品溶液0mL、PBS 2.0mL、酪氨酸酶溶液1.0mL混匀，记为A；精密量取样品溶液0mL、PBS 3.0mL、酪氨酸酶溶液0mL混匀，记为B；精密量取样品溶液1.0mL、PBS1.0mL、酪氨酸酶溶液1.0mL混匀，记为C；精密量取样品溶液1.0mL、PBS 2.0mL、酪氨酸酶溶液0mL混匀，记为D；混匀后在37℃水浴中恒温10min，然后各加入1.0mL的酪氨酸溶液，反应15min后于490nm处测定吸光度。以B作为参比读取A，以D作为参比读取C。
计算公式：
Figure BDA0004015040450000101
A为未加样品的加酶混合液所测的吸光度；
B为未加样品亦未加酶的混合液所测的吸光度；
C为加样品和酶的混合液所测的吸光度；
D为加样品而未加酶的混合液所测的吸光度。所得结果用百分数表示。
结果分析：4％(重量百分比，下同)实施例1-5均明显抑制酪氨酸酶活力，比1.25mg/mL的β-熊果苷要高，这显示植物组合物有很好的美白功效，填补了部分化学及物理防晒剂不能抑制酪氨酸酶的空白，见下表。
表7、实施例1-5的酪氨酸酶抑制实验
Figure BDA0004015040450000102
表8实施例1的浓度梯度酪氨酸酶抑制实验
Figure BDA0004015040450000103
Figure BDA0004015040450000111
4、应用实施例1(防晒类化妆品)SPF值测定：
实验过程参考“化妆品安全技术规范2015版中的第八章人体功效评价检验方法第二条--防晒化妆品防晒指数(SPF值)测定方法”。
表9、防晒化妆品人体功效实验
Figure BDA0004015040450000112
表9防晒化妆品人体功效实验
结果分析：见表9，加入5％实施例1制备得到的天然植物组合物后，应用实施例1提高了防晒霜SPF值，以及见图1，应用实施例1涂抹30min后明显使经UV照射后志愿者皮肤上的红斑褪去，而应用实施例1空白对照则无变化，说明植物组合物有协同防晒，去红斑的功效。
5、波长扫描：
将图2中试剂稀释后进行紫外波长扫描，结果分析：实施例1在UVB波段的有明显吸收，与奥克立林等部分防晒剂有相似的吸收波段，这表明植物组合物具有减弱UVB辐射人体皮肤的损伤的能力。
6、耐热稳定性测试：将实施例1分装至透明60mLPE瓶中密封，然后放置4℃冰箱(低温)、18-25℃(室温)、45℃和60℃鼓风烘箱，以及户外日光下环境条件下，14天后进行波长扫描，见图3，结果分析：各个环境条件下实施例1的吸收波长均无差异，表明植物组合物具有良好的耐热稳定性，能更广泛地应用不同防晒场景。

Claims (10)

1.一种具有防晒修复功能的天然植物组合物，其特征在于，含有如下原料药：松口蘑、小米草、白及、丹皮、白月季花、白芍、膜荚黄芪、银杏叶、积雪草、黄岑根、雪莲花、黑莓中的至少三种。
2.根据权利要求1所述的一种具有防晒修复功能的天然植物组合物，其特征在于，所述组合物至少含有如下原料药：松口蘑、白及、白芍、雪莲花、银杏叶。
3.根据权利要求2所述的一种具有防晒修复功能的天然植物组合物，其特征在于，所述组合物至少含有如下重量百分比的原料药：松口蘑10-30％、白及20-40％、白芍5％-20％、雪莲花10％-30％、银杏叶10％-30％。
4.一种根据权利要求1-3任一项所述的一种具有防晒修复功能的天然植物组合物的制备方法，其特征在于，至少包括以下步骤：
(1)称取原料药并粉碎过筛得到原料混合物；
(2)对原料混合物进行溶剂提取后进行微射流提取后得到组合物提取物；
(3)将组合物提取物进行高速离心后分离上清液；
(4)将上清液进行过滤、浓缩后即得。
5.根据权利要求4所述的一种具有防晒修复功能的天然植物组合物的制备方法，其特征在于，所述粉碎的粒度为20-100目。
6.根据权利要求4所述的一种具有防晒修复功能的天然植物组合物的制备方法，其特征在于，所述溶剂提取中溶剂为质量分数为5-50％的低级醇水溶液。
7.根据权利要求6所述的一种具有防晒修复功能的天然植物组合物的制备方法，其特征在于，所述溶剂提取的条件为：提取倍数为10-50倍，提取温度为20-60℃，提取次数1-3次，每次提取时间为20-90min。
8.根据权利要求4所述的一种具有防晒修复功能的天然植物组合物的制备方法，其特征在于，所述微射流提取具体为：采用微射流提取器提取10-60min。
9.根据权利要求4所述的具有防晒修复功能的天然植物组合物的制备方法，其特征在于，所述高速离心的转速为10000rpm-20000rpm。
10.根据权利要求4所述的具有防晒修复功能的天然植物组合物的制备方法，其特征在于，所述过滤具体为：将上清液依次进行微滤、超滤后得到澄清滤液。
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