CN110859788B - 一种塔纳卡组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于植物提取技术领域，尤其涉及一种塔纳卡组合物及其制备方法和应用。本发明中，塔纳卡组合物包括塔纳卡、甘草和银耳，实验结果表明，本发明塔纳卡组合物中的塔纳卡、甘草和银耳能够协同作用，在酪氨酸酶体外抑制测试中能够有效抑制酪氨酸酶的活性，降低黑色素的产生，从而达到美容美白的效果；在DPPH抗氧化测试和ABTS自由基清除能力测定中表现出了高效的自由基清除活性，从而达到抗衰老的效果；在UVB吸收能力测试中表现出了高效的防晒效果。本发明通过将塔纳卡与甘草和银耳组合使用，得到了具有美白、抗衰和防晒三重功效的塔纳卡组合物，有利于推广塔纳卡在化妆品中的应用，促进塔纳卡类产品的开发。

Description

一种塔纳卡组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于植物提取技术领域，尤其涉及一种塔纳卡组合物及其制备方法和应用。
背景技术
塔纳卡(Thanakhha)是芸香科柑果子属植物黄香楝(Hesperethusa crenulata(Roxb.)Roem)的别名，在缅甸主要生长于中部与北部海拔1000米左右干旱、贫瘠的坡地林中，其树皮含有多酚、黄烷酮、生物碱、香豆素、木酚素、甾醇类和三萜类等化合物，具抗炎、杀菌、防蚊、防紫外损伤等作用，叶药用于治疗癫痫病，根作泻药，果可食用。在缅甸及其周边国家的一些地区，其树皮被磨粉后与清水调和成糊状，外敷于皮肤上，作为防晒、美容的护肤品使用。
传统的使用方法中，将塔纳卡磨粉直接与清水调和使用，有效成分难以全部溶出，实际效果大打折扣，并且未加工的粉末影响美观，使用范围窄，需要更有效的成分提取手段以更好地应用于现代化妆品中。塔纳卡最原始的产品形式即为集市大量售卖的单个或成捆的原木截段，后来出现了纸质包装的皂块状磨粉成品以及各类盒装、瓶装的粉末或糊剂成品。
目前，市面上的塔纳卡类产品开发阶段尚在初期，具有较为简单、单一的缺点，大部分还处于直接出售原料或简单调和的阶段，而塔纳卡单一使用使得其功效难以高效发挥。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种塔纳卡组合物及其制备方法和应用，用于解决目前塔纳卡类产品较为单一的问题。
本发明的具体技术方案如下：
一种塔纳卡组合物，以质量份计，由以下组分制成：塔纳卡10～90份、甘草5～50份和银耳5～50份。
本发明还提供了一种塔纳卡组合物的制备方法，包括以下步骤：
a)将塔纳卡、甘草和银耳以质量比(10～90)：(5～50)：(5～50)混合，得到混合物；
b)将所述混合物在100℃以下进行提取，得到塔纳卡组合物。
优选的，所述提取为微射流提取。
优选的，所述微射流提取的提取溶剂为水和/或低级醇；
所述提取溶剂与所述混合物的质量比为10～40：1；
所述微射流提取的进料速度为5～30L/min；
所述微射流提取的冷媒温度为0～30℃。
优选的，所述微射流提取之后，所述得到塔纳卡组合物之前，还包括：
依次进行固液分离、除杂和浓缩。
优选的，所述固液分离具体为采用离心进行固液分离；
所述除杂具体为采用膜除去杂质；
所述浓缩具体为减压浓缩。
优选的，所述离心的离心速度为2000～20000rpm，所述离心的离心时间为10～90min；
所述膜的孔径为0.1～1μm；
所述减压浓缩的压力为0.085～0.098Mpa。
优选的，所述微射流提取为采用微射流提取器进行提取；
微射流提取器包括：微射流提取单元；
所述微射流提取单元包括：壳体、内齿环、内外齿环和微射流环；
所述壳体为具有中空结构的圆柱体；
所述内齿环和所述微射流环径向贴附于所述壳体的内壁；
所述内齿环无间隙地设置于所述微射流环的工作前端；
所述内齿环的内齿为不规则齿；
所述内外齿环的内齿和外齿为不规则齿；
所述内外齿环设置于所述内齿环内并与所述内齿环同轴，所述内外齿环固定于所述微射流环的工作前端；
所述微射流环将所述壳体隔成微射流提取腔室；
所述微射流环开有微射流孔。
本发明还提供了上述技术方案所述塔纳卡组合物和/或上述技术方案所述制备方法制得的塔纳卡组合物在化妆品中的应用。
优选的，所述塔纳卡组合物在所述化妆品中的含量为1wt％～50wt％。
综上所述，本发明提供了一种塔纳卡组合物，以质量份计，由以下组分制成：塔纳卡10～90份、甘草5～50份和银耳5～50份。本发明中，塔纳卡组合物包括塔纳卡、甘草和银耳，实验结果表明，本发明塔纳卡组合物中的塔纳卡、甘草和银耳能够协同作用，在酪氨酸酶体外抑制测试中能够有效抑制酪氨酸酶的活性，降低黑色素的产生，从而达到美容美白的效果；在DPPH抗氧化测试和ABTS自由基清除能力测定中表现出了高效的自由基清除活性，从而达到抗衰老的效果；在UVB吸收能力测试中表现出了高效的防晒效果。本发明通过将塔纳卡与甘草和银耳组合使用，得到了具有美白、抗衰和防晒三重功效的塔纳卡组合物，有利于推广塔纳卡在化妆品中的应用，促进塔纳卡类产品的开发。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为晒伤者涂抹本发明实施例6塔纳卡晒伤褪红膏前后皮肤含水量变化图；
图2为1号～4号受试者涂抹本发明实施例6塔纳卡晒伤褪红膏前后的皮肤状态图，其中，左上、右上、左下、右下按顺序依次为1号、2号、3号、4号受试者涂抹塔纳卡晒伤褪红膏前后的皮肤状态；
图3为涂抹本发明实施例6塔纳卡晒伤褪红膏对晒伤后红痒疼感的改善效果图。
具体实施方式
本发明提供了一种塔纳卡组合物及其制备方法和应用，用于解决目前塔纳卡类产品较为单一的问题。
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种塔纳卡组合物，以质量份计，由以下组分制成：塔纳卡10～90份、甘草5～50份和银耳5～50份。
甘草是一种历史悠久的中药材，含有甘草酸、甘草苷和大量甘草黄酮类物质，具有广泛的抗炎、抗菌和抗氧化功效。银耳是一种中国传统的滋补佳品，富含银耳多糖，是重要的生物活性物质，具有改善集体免疫功能、提高抵抗力的好处，同时多糖类物质也对皮肤的保湿和修复有一定的作用。
本发明将塔纳卡与甘草和银耳复配，强化了这三种植物自身的天然功效，在协助抵御紫外线的同时提高了抗氧化、抗自由基功能，同时具有了一定的抗炎杀菌作用，不仅可以在暴晒时保护皮肤，也可以在暴晒后皮肤遭到伤害时，对皮肤进行滋润和修复。塔纳卡与甘草、银耳协同作用，使它们的抗紫外线、防蚊、抗炎、杀菌、保湿、改善免疫等多重功效相互结合，全方位抵御紫外线伤害，防护与修复同时进行，协同增效。
实验结果表明，本发明塔纳卡组合物中的塔纳卡、甘草和银耳能够协同作用，在酪氨酸酶体外抑制测试中能够有效抑制酪氨酸酶的活性，降低黑色素的产生，从而达到美容美白的效果；在DPPH抗氧化测试和ABTS自由基清除能力测定中表现出了高效的自由基清除活性，从而达到抗衰老的效果；在UVB吸收能力测试中表现出了高效的防晒效果。本发明通过将塔纳卡与甘草和银耳组合使用，得到了具有美白、抗衰和防晒三重功效的塔纳卡组合物，有利于推广塔纳卡在化妆品中的应用，促进塔纳卡类产品的开发。
进一步的，塔纳卡、甘草和银耳的质量比优选为7:2:1、8:1:1、6:3.5:0.5或6:0.5:3.5。
本发明还提供了一种塔纳卡组合物的制备方法，包括以下步骤：
a)将塔纳卡、甘草和银耳以质量比(10～90)：(5～50)：(5～50)混合，得到混合物；
b)将混合物在100℃以下进行提取，得到塔纳卡组合物。
本发明中，在100℃以下对塔纳卡、甘草和银耳进行提取，保留了植物中的活性成分，能有效减少热敏感活性成分的分解损失。
本发明中，可在步骤a)混合之前，将塔纳卡、甘草和银耳分别进行粉碎，或在步骤a)混合后，进行粉碎。步骤a)混合物中至少90％可过八百目筛网。
进一步的，提取为微射流提取。
通过微射流提取破壁塔纳卡植物细胞，充分破碎细胞以使活性成分完全提取出来，使塔纳卡天然的抗炎防紫外成分得以运用，在提取塔纳卡中的有效防晒修复成分的同时，也提取了甘草和银耳含有的抗炎抗菌、抗氧化、保湿和免疫功效物质，最大限度保留了植物中的活性成分，能有效减少热敏感活性成分的分解损失，节能环保，使其复配后能充分发挥天然植物的优势，得到的塔纳卡组合物在美白、抗衰老和防晒效果上具有显著的效果，塔纳卡组合物具备显著广谱紫外线吸收效果，可清除多种自由基，同时具有高效抑制酪氨酸酶的活性，能够解决现有化妆品领域中塔纳卡应用单一，使得其功效难以高效发挥的问题，该塔纳卡组合物在各类化妆品中具有很好的应用前景。
本发明中，微射流提取提取效率高，对塔纳卡组合物含有的黄酮类化合物破坏少，该方法提取的塔纳卡组合物总黄酮含量高，有助于塔纳卡组合物作用的发挥。
本发明中，微射流提取的塔纳卡组合物含有丰富的黄酮类及多酚类物质，具有广谱紫外线吸收、抗自由基和抑制酪氨酸酶的效果。本发明中塔纳卡组合物的制备方法工艺简单，易于操作，可高效率制得有效成分富集的塔纳卡组合物，提取得到的活性物质丰富，非常适用于规模化生产。
进一步的，微射流提取的提取溶剂为水和/或低级醇；
提取溶剂与混合物的质量比为10～40：1；
微射流提取的进料速度为5～30L/min；
微射流提取的冷媒温度为0～30℃；
微射流提取的时间为30～180min。
本发明中，低级醇为丙二醇或丁二醇；
丙二醇为质量分数为20-70％的丙二醇；
丙二醇为1，2-丙二醇和/或1，3-丙二醇；
丁二醇为1，2-丁二醇、1，3-丁二醇和/或1，4-丁二醇；
更优选为，丙二醇为1，2-丙二醇，丁二醇是1，3-丁二醇。
本发明中，微射流提取之后，得到塔纳卡组合物之前，还包括：
依次进行固液分离、除杂和浓缩。
本发明中，固液分离具体为采用离心进行固液分离；
除杂具体为采用膜除去杂质；
浓缩具体为减压浓缩。
本发明中，离心的离心速度为2000～20000rpm，离心的离心时间为10～90min；
膜的孔径为0.1～1μm；
减压浓缩的压力为0.085～0.098Mpa。
本发明中，微射流提取为采用微射流提取器进行提取；
微射流提取器包括：微射流提取单元；
微射流提取单元包括：壳体、内齿环、内外齿环和微射流环；
壳体为具有中空结构的圆柱体；
内齿环和微射流环径向贴附于壳体的内壁；
内齿环无间隙地设置于微射流环的工作前端；
内齿环的内齿为不规则齿；
内外齿环的内齿和外齿为不规则齿；
内外齿环设置于内齿环内并与内齿环同轴，内外齿环固定于微射流环的工作前端；
微射流环将壳体隔成微射流提取腔室；
微射流环开有微射流孔。
本发明还提供了上述技术方案塔纳卡组合物和/或上述技术方案制备方法制得的塔纳卡组合物在化妆品中的应用。
进一步的，塔纳卡组合物在化妆品中的含量为1wt％～50wt％。
本发明中，添加有塔纳卡组合物的化妆品具有防晒和/或晒后修复作用，化妆品的剂型选自霜剂、水剂、凝胶剂、粉剂、乳剂或面膜，塔纳卡组合物在化妆品中的应用有助于晒后修复损伤和美白晒黑皮肤类化妆品的开发。
为了进一步理解本发明，下面结合具体实施例对本发明进行详细阐述。
塔纳卡具体为塔纳卡树皮，学名黄香楝Hesperethusa crenulata(Roxb.)Roem，产自缅甸；甘草根具体为甘草根茎，学名Glycyrrhiza uralensis Fisch，产自内蒙古；银耳具体为银耳子实体，学名Tremella fuciformis Berk，产自福建。
实施例1
将7kg塔纳卡、2kg甘草根和1kg银耳切片粉碎，过800目筛网，得平均目数为800目的混合物。向混合物中添加200kg的60％1,3-丁二醇溶液，搅拌均匀后投入微射流提取器中，在冷媒温度20℃、进料速度20L/min的条件下微射流提取1h，得到塔纳卡组合物粗提液。
将上述塔纳卡组合物粗提液泵入离心机，以10000rpm的离心速度进行固液分离操作，收集分离液。随后将分离液泵入膜处理系统，使用0.2μm膜进行除杂，最后浓缩至1:5(药材质量：浓缩液质量)，即得到塔纳卡组合物。
实施例2
将8kg塔纳卡、1kg甘草根和1kg银耳切片粉碎，过400目筛网，得平均目数为400目的混合物。向混合物中添加400kg的55％丙三醇溶液，搅拌均匀后投入微射流提取器中，在冷媒温度10℃、进料速度15L/min的条件下微射流提取1.5h，得到塔纳卡组合物粗提液。
将上述塔纳卡组合物粗提液泵入离心机，以15000rpm的离心速度进行固液分离操作，收集分离液。随后将分离液泵入膜处理系统，使用0.1μm膜进行除杂，最后浓缩至1:6(药材质量：浓缩液质量)，即得到塔纳卡组合物。
实施例3
将6kg塔纳卡、3.5kg甘草根和0.5kg银耳切片粉碎，过800目筛网，得平均目数为800目的混合物。向混合物中添加150kg的70％1,3-丙二醇溶液，搅拌均匀后投入微射流提取器中，在冷媒温度15℃、进料速度5L/min的条件下微射流提取2.5h，得到塔纳卡组合物粗提液。
将上述塔纳卡组合物粗提液泵入离心机，以8000rpm的离心速度进行固液分离操作，收集分离液。随后将分离液泵入膜处理系统，使用0.3μm膜进行除杂，最后浓缩至1:4(药材质量：浓缩液质量)，即得到塔纳卡组合物。
实施例4
将6kg塔纳卡、0.5kg甘草根和3.5kg银耳切片粉碎，过400目筛网，得平均目数为400目的混合物。向混合粉末中添加150kg的60％1,3-丁二醇溶液，搅拌均匀后投入微射流提取器中，在冷媒温度25℃、进料速度15L/min的条件下微射流提取1.5h，得到塔纳卡组合物粗提液。
将上述塔纳卡组合物粗提液泵入离心机，以12000rpm的离心速度进行固液分离操作，收集分离液。随后将分离液泵入膜处理系统，使用0.2μm膜进行除杂，最后浓缩至1:7(药材质量：浓缩液质量)，即得到塔纳卡组合物。
对比例1
将7kg塔纳卡和3kg银耳切片粉碎，过800目筛网，得平均目数为800目的混合物。向混合物中添加200kg的60％1,3-丁二醇溶液，搅拌均匀后投入微射流提取器中，在冷媒温度20℃、进料速度20L/min的条件下进行微射流提取1h，得到塔纳卡组合物粗提液。
将上述塔纳卡组合物粗提液泵入离心机，以10000rpm的离心速度进行固液分离操作，收集分离液。随后将分离液泵入膜处理系统，使用0.2μm膜进行除杂，最后浓缩至1:5(药材质量：浓缩液质量)，即得到塔纳卡组合物。
对比例2
将7kg塔纳卡和3kg甘草根切片粉碎，过800目筛网，得平均目数为800目的混合物。向混合物中添加200kg的60％1,3-丁二醇溶液，搅拌均匀后投入微射流提取器中，在冷媒温度20℃、进料速度20L/min的条件下微射流提取1h，得到塔纳卡组合物粗提液。
将上述塔纳卡组合物粗提液泵入离心机，以10000rpm的离心速度进行固液分离操作，收集分离液。随后将分离液泵入膜处理系统，使用0.2μm膜进行除杂，最后浓缩至1:5(药材质量：浓缩液质量)，即得到塔纳卡组合物。
对比例3
将10kg塔纳卡粉碎，过800目筛网，得平均目数为800目的塔纳卡粉末。向塔纳卡粉末中添加200kg的60％1,3-丁二醇溶液，搅拌均匀后投入微射流提取器中，在冷媒温度20℃、进料速度20L/min的条件下进行微射流提取1h，得到塔纳卡粗提液。
将上述塔纳卡粗提液泵入离心机，以10000rpm的离心速度进行固液分离操作，收集分离液。随后将分离液泵入膜处理系统，使用0.2μm膜进行除杂，最后浓缩至1:5(药材质量：浓缩液质量)，即得到塔纳卡提取液。
实施例5功效测试实验
本实施例对实施例1～4塔纳卡组合物和对比例1～2塔纳卡组合物及对比例3塔纳卡提取液进行酪氨酸酶体外抑制测试、DPPH自由基清除实验和ABTS自由基清除能力测定。
酪氨酸酶体外抑制测试
1)测定原理
酪氨酸酶是黑色素生产过程中的主要限速酶，其活性与黑色素的合成量成正相关。皮肤颜色的深浅主要取决于皮肤黑素细胞的量和合成黑色素的能力。酪氨酸酶作为黑色素合成的关键酶，催化L-酪氨酸羟基化转变成L-多巴，同时氧化L-多巴形成多巴醌，多巴醌再经过一系列反应，最后形成黑色素。酪氨酸酶是一种含铜的金属氧化还原酶，能催化空气中的氧对酪氨酸的氧化反应。催化过程可以通过酪氨酸转换反应过程的颜色变化来监测，在490nm处测定吸光度，根据公式，计算酪氨酸酶抑制率。
2)试剂配制
a.PBS(pH＝6.8)的制备
精密称取6.80g磷酸二氢钾，溶于250mL的纯水，得0.2mol/L磷酸二氢钾溶液；精密称取0.94g氢氧化钠溶于118mL的纯水，得0.2mol/L氢氧化钠溶液。取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250mL，取0.2mol/L氢氧化钠溶液118mL，用水稀释至1000mL，即得PBS(pH＝6.8)。
b.L-酪氨酸溶液的制备
用PBS配制1.5mM的L-酪氨酸溶液：用少许0.1M HCl溶解L-酪氨酸，然后再用PBS(pH＝6.8)稀释至pH＝7，即得。
c.酪氨酸酶溶液的制备
用PBS配制200U/mL的酪氨酸酶溶液：酪氨酸酶用PBS(pH＝6.8)溶解分装于PE管，置于-20℃冰箱中保存，使用时取出置于4℃冰箱中解冻即可。
d.标准品溶液的制备
精确称取0.1g熊果苷粉末，溶于20mL的纯水中，得到5mg/mL的母液，再对半稀释到2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL、0.3125mg/mL。
3)酪氨酸酶活性检测方法
精密量取样品溶液0mL、PBS 2.0mL、酪氨酸酶溶液1.0mL混匀，记为A；精密量取样品溶液0mL、PBS 3.0mL、酪氨酸酶溶液0mL混匀，记为B；精密量取样品溶液1.0mL、PBS1.0mL、酪氨酸酶溶液1.0mL混匀，记为C；精密量取样品溶液1.0mL、PBS 2.0mL、酪氨酸酶溶液0mL混匀，记为D；混匀后在37℃水浴中恒温10min，然后各加入1.0mL的酪氨酸溶液，反应15min后于490nm处测定吸光度。以B为参比读取A，以D为参比读取C。
计算公式：
Figure BDA0002317367300000101
其中，A为未加样品的加酶混合液所测得的吸光度；B为未加样品亦未加酶的混合液所测得的吸光度；C为加样品和酶的混合液所测得的吸光度；D为加样品而未加酶的混合液所测得的吸光度。
4)测试结果
测试结果如表1所示，测试样品选取本发明实施例1～4塔纳卡组合物和对比例1～2塔纳卡组合物及对比例3塔纳卡提取液，按照一定梯度用PBS稀释后测试。结果表明，实施例1～4塔纳卡组合物添加量高于0.01g/mL时，便具有与5mg/mL熊果苷相当的酪氨酸酶抑制效果，从而呈现出很好的美白功效，在实际应用中，有助于快速修复晒后晒黑的皮肤。而对比例1～2塔纳卡组合物采用了与实施例1完全相同的提取方法，仅仅改变了原料植物的组合(去掉一味)，最后检测出的酪氨酸酶抑制率便大幅下降，与对比例3塔纳卡提取液相比，实施例1～4塔纳卡组合物的酪氨酸酶体外抑制率提高了约10％，表明本发明塔纳卡组合物在美白功效上各组分具有协同作用。
表1实施例1～4塔纳卡组合物和对比例1～2塔纳卡组合物及对比例3塔纳卡提取液的酪氨酸酶体外抑制实验结果
Figure BDA0002317367300000102
Figure BDA0002317367300000111
Figure BDA0002317367300000121
DPPH自由基清除实验
1)测定原理
DPPH在有机溶剂中是一种稳定的自由基，其醇溶液呈紫色，且须低温避光储藏，故能接受一个电子或氢离子，在波长为517nm下具有最大吸收。有自由基清除剂存在时，DPPH的单电子被捕捉而使其颜色变浅，在最大光吸收波长处的吸光值下降，且下降程度呈线性关系，吸光度水平的降低表面抗氧化性的增加，从而评价试验样品的抗氧化能力。抗氧化能力用抑制率来表示，抑制率越大，抗氧化性越强。
2)DPPH试剂的配制
精密称取DPPH粉末(分子量约394)0.0600g，置于250mL容量瓶，用适量95％乙醇溶解定容至250mL，得浓度为0.06mmol/L的DPPH试剂。需要说明的是，如测试中样品出现不溶物析出的情况，可适当降低乙醇酒精度。
3)供试品的制备
取实施例1～4塔纳卡组合物和对比例1～2塔纳卡组合物及对比例3塔纳卡提取液分别加95％乙醇溶液定容，配制成0.01g/mL试液，并以同样方法配制1mg/mL维生素E对照液。
4)抗氧化能力测定
a.在10mL试管中依次加入4.0mL DPPH溶液和1.0mL 95％乙醇，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为A0。
b.在10mL试管中依次加入4.0mL DPPH溶液和1.0mL待测试样溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517处测吸光值，记为Ar。
c.在10mL试管中依次加入4.0mL 95％乙醇溶液和1.0mL待测试样溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517处测吸光值，记为As。
d.计算公式：样品对DPPH自由基的清除率：
Figure BDA0002317367300000122
5)测试结果
测试结果如表2所示，测试样品选取实施例1～4塔纳卡组合物和对比例1～2塔纳卡组合物及对比例3塔纳卡提取液，按照一定梯度用95％乙醇稀释后测试。结果表明，实施例1～4塔纳卡组合物添加量高于0.01g/mL时，便具有与1mg/mL维生素E相当的抗自由基效果，呈现出较强的抗氧化能力，实际应用时可有效清除对皮肤有负面影响的自由基，减轻紫外线照射引起的皮肤损伤、衰老。而对比例1～2塔纳卡组合物采用了与实施例1完全相同的提取方法，仅仅改变了原料植物的组合(去掉一味)，最后检测出的DPPH自由基清除率与实施例1～4塔纳卡组合物相比明显降低，与对比例3塔纳卡提取液相比，实施例1～4塔纳卡组合物的DPPH自由基清除率比对比例3平均提高了约11％，进一步表明本发明塔纳卡组合物在抗氧化功效上各组分具有协同作用。
表2实施例1～4塔纳卡组合物和对比例1～2塔纳卡组合物及对比例3塔纳卡提取液的DPPH自由基清除效果
Figure BDA0002317367300000131
Figure BDA0002317367300000141
ABTS自由基清除能力测定
1)测定原理
以ABTS(2,2’-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfinic acid)diammonium salt)水溶性的自由基引发剂为显色剂，ABTS经活性氧氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTS+·，再向其中加入被测物质，如果该物质中存在抗氧化成分，则该物质会与ABTS+·发生反应而使反应体系褪色，6min后在734nm下检测吸光值(A734)的变化。
2)试剂配制
a.PBS溶液(pH＝7.2)：取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50mL与0.2mol/L氢氧化钠溶液35mL，加新沸过的冷水稀释至200mL，摇匀，即得。
b.2.45mM过硫酸钾：称取0.0662g过硫酸钾溶于水并定容至100mL。
c.7mM ABTS+·储备液：称取0.0384g ABTS，用2.45mol/L过硫酸钾溶解，定容至10mL，溶液呈墨绿色，在室温、避光条件下静置12～16h，该储备液可稳定保存3～4d。
d.ABTS+·工作液：将ABTS+·储备液以PBS稀释，使其吸光度在734波长处达到0.700±0.020。
3)测定方法
a.取4mL的ABTS+·工作液与1mL样品混合10s后25℃避光静置6min，在734nm处测定吸光值。以4mLPBS+1mL样品作为参比，记A样品。
b.取4mL的ABTS+·工作液与1mLPBS混合10s后25℃避光静置6min，在734nm测定吸光值。以PBS作为参比，记A0。
Figure BDA0002317367300000151
4)测试结果
测试结果如表3所示，测试样品选取实施例1～4塔纳卡组合物和对比例1～2塔纳卡组合物及对比例3塔纳卡提取液，按照一定梯度用PBS稀释后测试。结果表明，实施例1～4塔纳卡组合物添加量高于0.01g/mL时，具有与5mg/mL维生素C相当的体外总抗自由基效果，呈现出很强的抗氧化性，实际应用中可有效降低对皮肤有负面影响的自由基活性，协助修复晒后的皮肤损伤。而对比例1～2塔纳卡组合物采用了与实施例1完全相同的提取方法，仅仅改变了原料植物的组合(去掉一味)，最后检测出的ABTS+体外总抗自由基能力与实施例1～4塔纳卡组合物相比明显降低，与对比例3塔纳卡提取液相比，实施例1～4塔纳卡组合物的体外总抗自由基能力比对比例3平均提高了约7％，进一步表明本发明塔纳卡组合物在抗氧化功效上各组分具有协同作用。
表3实施例1～4塔纳卡组合物和对比例1～2塔纳卡组合物及对比例3塔纳卡提取液的ABTS+·体外总抗自由基效果
Figure BDA0002317367300000161
Figure BDA0002317367300000171
实施例6
本实施例提供一种包含实施例1塔纳卡组合物的塔纳卡晒伤褪红膏，作用为晒伤后褪红修复，以重量百分比计，塔纳卡晒伤褪红膏的配方如表4所示，本实施例塔纳卡晒伤褪红膏的制备方法如下：
1)将A相原料依次加入油相锅，水浴加热到85℃，加热搅拌至完全溶解均匀，85℃保温，得到A相；
2)将B相原料依次加入水相，水浴加热到85℃，加热搅拌至完全溶解均匀，85℃保温，得到B相；
3)将A相全部倒入B相锅中，高速均质直至二相完全乳化，形成均匀膏体；
4)待膏体降温至约45℃，将C相加入，再均质约5min，混匀，初步检验合格后出料，得到塔纳卡晒伤褪红膏。
表4实施例6塔纳卡晒伤褪红膏的配方
Figure BDA0002317367300000172
Figure BDA0002317367300000181
Figure BDA0002317367300000191
实施例7
本实施例对实施例6塔纳卡晒伤褪红膏进行晒后修复、舒缓保湿作用的评价实验测试。测试包括采用皮肤状态拍照对比、受试者主观感受评价及相关仪器测试。
1)测试样品：
实施例6中所制得的塔纳卡晒伤褪红膏。
2)测试对象：
26名年龄18～40岁皮肤晒伤的受试者，性别随机；症状为晒伤处皮肤发红干裂、轻微刺痛。
3)测试仪器：
FaceCare数字皮肤水分检测仪
CBS皮肤检测仪
4)测试环境：
温度：20±2℃；相对湿度(RH)：50±5％
5)测试过程：
26位轻微晒伤的受测者，暴露皮肤均出现泛红、干燥、轻微刺痛且伴随瘙痒的晒伤症状。检测前记录下受试区皮肤的状态(水分、干裂程度、刺痛及瘙痒程度)。
取等量实施例6中所制得的塔纳卡晒伤褪红膏分别给每一位受试者的晒伤处涂抹均匀，25～30min后观察并记录该处皮肤的状态(水分、干裂程度、刺痛及瘙痒程度)。
6)测试结果
1.皮肤水分状态：
使用FaceCare数字皮肤水分检测仪检测涂抹塔纳卡晒伤褪红膏前后受试区皮肤水分含量的变化，结果请参阅图1，为晒伤者涂抹本发明实施例6塔纳卡晒伤褪红膏前后皮肤含水量变化图。
图1表明，受试者皮肤晒伤后水分流失严重，含水量降至15％以下；涂抹塔纳卡褪红膏后，塔纳卡组合物中的银耳多糖成分联合透明质酸钠将水分牢牢锁住阻止进一步流失，同时给缺水的皮肤补充流失的水分，使皮肤回复到相对健康饱满的含水量(35％～50％)，给肌肤修复晒伤打下基础。
2.皮肤干裂程度：
采用CBS皮肤检测仪微距拍摄受试区皮肤图片直观观察皮肤状态，结果请参阅图2，为1号～4号受试者涂抹本发明实施例6塔纳卡晒伤褪红膏前后的皮肤状态图，其中，左上、右上、左下、右下按顺序依次为1号、2号、3号、4号受试者涂抹塔纳卡晒伤褪红膏前后的皮肤状态。
图2表明，受试者涂抹塔纳卡晒伤褪红膏后皮肤状态有非常明显的改善，晒伤的受试者在涂抹前皮肤呈现缺水干裂、肤色泛红发黑并有明显干裂纹的状态，而涂抹后的皮肤失水产生的干裂纹被抹平，肤色减淡，可见晒伤症状已明显舒缓，恢复到较为健康的肌肤状态。
3.主观感受的改善：
在受试者涂抹塔纳卡晒伤褪红膏前后以既定标准询问受试者主观感受，对比以评价功效。
效果判定标准：
优秀：客观体征(晒红)完全消退、感觉舒适、肌肤弹性恢复、柔软细嫩；
良好：客观体征(晒红)消退三分之二以上、感觉一般、肌肤弹性适中、皮肤较为柔软；
差：客观体征(晒红)未见改善、有刺痛感、皮肤干裂无弹性。
结果请参阅图3，为涂抹本发明实施例6塔纳卡晒伤褪红膏对晒伤后红痒疼感的改善效果图。图3表明，试验结果为26例受试中，有24例判定效果为优秀，2例判定效果为良好，无差评价，有效率可评为100％。
实施例8
本实施例提供了分别包含实施例1～4塔纳卡组合物和对比例1～2塔纳卡组合物及对比例3塔纳卡提取液的防晒BB霜，以重量百分比计，防晒BB霜的配方如表5所示，本实施例防晒BB霜的制备方法如下：
1)将A相中的液态油原料倒入油相锅中，与膨润土混合，充分搅拌、均质均匀后，加入三种色粉均质至质地细腻，最后加入乳化剂和其他固态原料混合，置于85℃水浴中高速搅拌，溶解均匀后再次均质细腻；
2)将B相原料倒入水相锅，置于85℃水浴中加热搅拌，充分溶解；
3)A相、B相均置于85℃水浴中保温，用滴管取B相液体，缓慢滴加进A相锅中，过程保持约1300rpm高速搅拌，使两相充分乳化。滴加完毕后，再保持高速搅拌约5min后，均质细腻；
4)待双相乳剂搅拌降温至约45℃，再在高速搅拌下将C相加入，混合均匀后，均质细腻，经初步检验合格后出料，得到防晒BB霜。
表5实施例8防晒BB霜的配方
Figure BDA0002317367300000211
Figure BDA0002317367300000221
实施例9功效测试实验
本实施例对实施例8制备得到的七种防晒BB霜进行UVB吸收能力测试，采用体外仪器法检测SPF值，检测塔纳卡组合物或塔纳卡提取物对防晒产品的影响。
1)测试样品
四种添加了实施例1～4塔纳卡组合物的防晒BB霜、两种添加了对比例1～2塔纳卡组合物的防晒BB霜、一种添加了对比例3塔纳卡提取物的防晒BB霜以及不添加塔纳卡组合物/塔纳卡提取物的空白防晒霜作为空白对照，塔纳卡组合物/塔纳卡提取物添加量按重量百分比计，均为10％。
2)测试仪器
防晒系数SPF测量系统SPF-290S
3)测试载体
3M-Transpore透明膜
4)测试环境
温度：22±2℃；相对湿度(RH)：50±5％
结果如表6所示，结果表明，与空白防晒霜对比，添加了实施例1～4塔纳卡组合物的防晒BB霜的SPF值提高了约一倍，且当添加浓度为10％时，SPF值的增加效果可达8～14；而添加了对比例1～2塔纳卡组合物的防晒BB霜与空白防晒霜的体外SPF值对比，虽比空白防晒霜SPF测试值高，但明显低于添加了实施例1～4塔纳卡组合物的防晒BB霜，对SPF值的增幅仅有4左右；添加了对比例3塔纳卡提取液的防晒霜相比于空白防晒霜，对SPF值的增加达到了7.3，但仍比添加了实施例1～4的塔纳卡组合物的防晒霜SPF值低了约8个值，表明本发明塔纳卡组合物各组分在相互配合时更能充分发挥出各自的特性，协同作用达到了更高的防晒效果。
表6不同防晒霜的体外SPF值测试结果
测试品名称 SPF测试值
A0(空白防晒霜) 14.3
A1(实施例1) 30.4
A2(实施例2) 28.3
A3(实施例3) 28.7
A4(实施例4) 29.1
A5(对比例1) 18.8
A6(对比例2) 18.3
A7(对比例3) 21.6
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种塔纳卡组合物，其特征在于，以质量份计，由以下组分制成：塔纳卡10~90份、甘草5~50份和银耳5~50份；
所述塔纳卡组合物的制备方法，包括以下步骤：
a）将塔纳卡、甘草和银耳以质量比（10~90）：（5~50）：（5~50）混合，得到混合物；
b）将所述混合物进行微射流提取，得到塔纳卡组合物；
所述微射流提取的提取溶剂为低级醇；
所述提取溶剂与所述混合物的质量比为10~40：1；
所述微射流提取的进料速度为5~30L/min；
所述微射流提取的冷媒温度为0~30℃；
所述微射流提取为采用微射流提取器进行提取；
所述微射流提取器包括：微射流提取单元；
所述微射流提取单元包括：壳体、内齿环、内外齿环和微射流环；
所述壳体为具有中空结构的圆柱体；
所述内齿环和所述微射流环径向贴附于所述壳体的内壁；
所述内齿环无间隙地设置于所述微射流环的工作前端；
所述内齿环的内齿为不规则齿；
所述内外齿环的内齿和外齿为不规则齿；
所述内外齿环设置于所述内齿环内并与所述内齿环同轴，所述内外齿环固定于所述微射流环的工作前端；
所述微射流环将所述壳体隔成微射流提取腔室；
所述微射流环开有微射流孔。
2.根据权利要求1所述的塔纳卡组合物，其特征在于，所述微射流提取之后，所述得到塔纳卡组合物之前，还包括：
依次进行固液分离、除杂和浓缩；
所述固液分离具体为采用离心进行固液分离；
所述除杂具体为采用膜除去杂质；
所述浓缩具体为减压浓缩。
3.根据权利要求2所述的塔纳卡组合物，其特征在于，所述离心的离心速度为2000～20000rpm，所述离心的离心时间为10～90min；
所述膜的孔径为0.1～1μm；
所述减压浓缩的压力为0.085～0.098Mpa。
4.权利要求1至3任意一项所述塔纳卡组合物在化妆品中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述塔纳卡组合物在所述化妆品中的含量为1 wt%~50 wt%。
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