CN113109574A - 检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒以及检测方法 - Google Patents
检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒以及检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113109574A CN113109574A CN202110407182.4A CN202110407182A CN113109574A CN 113109574 A CN113109574 A CN 113109574A CN 202110407182 A CN202110407182 A CN 202110407182A CN 113109574 A CN113109574 A CN 113109574A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- labeled
- antibody
- kit
- tris
- proclin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102000013127 Vimentin Human genes 0.000 title claims abstract description 39
- 108010065472 Vimentin Proteins 0.000 title claims abstract description 39
- 210000005048 vimentin Anatomy 0.000 title claims abstract description 39
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 230000002072 anti-mutant effect Effects 0.000 title claims abstract description 20
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims abstract description 34
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 claims abstract description 28
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims abstract description 18
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 18
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 24
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 24
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 claims description 13
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 claims description 13
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 12
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N phenyl 10-methylacridin-10-ium-9-carboxylate Chemical compound C12=CC=CC=C2[N+](C)=C2C=CC=CC2=C1C(=O)OC1=CC=CC=C1 RXNXLAHQOVLMIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 12
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 claims description 12
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 claims description 12
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 claims description 12
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 claims description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 10
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 9
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims description 6
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 claims description 6
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 6
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 6
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 claims description 4
- XYIPYISRNJUPBA-UHFFFAOYSA-N [3-(3'-methoxyspiro[adamantane-2,4'-dioxetane]-3'-yl)phenyl] dihydrogen phosphate Chemical group O1OC2(C3CC4CC(C3)CC2C4)C1(OC)C1=CC=CC(OP(O)(O)=O)=C1 XYIPYISRNJUPBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 244000309466 calf Species 0.000 claims description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- 150000002978 peroxides Chemical group 0.000 claims description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 15
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 14
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 8
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 8
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 8
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 8
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 4
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 4
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- -1 phenylmethanesulfonyl Chemical group 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- RPCBRIVIADRRGK-UHFFFAOYSA-N adamantane;dioxetane Chemical group C1COO1.C1C(C2)CC3CC1CC2C3 RPCBRIVIADRRGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N benzoquinolinylidene Natural products C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 2
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 2
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- YIFWXQBNRQNUON-UHFFFAOYSA-M dodecyl(trimethyl)azanium;iodide Chemical compound [I-].CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C YIFWXQBNRQNUON-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 239000006148 magnetic separator Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 2
- VTOUAJKEIKJNQK-UFLZEWODSA-N 5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoic acid;n,n-dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O.N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 VTOUAJKEIKJNQK-UFLZEWODSA-N 0.000 description 1
- 108010058207 Anistreplase Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004195 Isomerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000769 Isomerases Proteins 0.000 description 1
- 206010023203 Joint destruction Diseases 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010036030 Polyarthritis Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003456 anti-perinuclear Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YGWPJZQQKHBXOR-UHFFFAOYSA-N benzene-1,4-dicarbonyl isothiocyanate Chemical compound S=C=NC(=O)C1=CC=C(C(=O)N=C=S)C=C1 YGWPJZQQKHBXOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OMWQUXGVXQELIX-UHFFFAOYSA-N bitoscanate Chemical compound S=C=NC1=CC=C(N=C=S)C=C1 OMWQUXGVXQELIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 239000012470 diluted sample Substances 0.000 description 1
- QKIUAMUSENSFQQ-UHFFFAOYSA-N dimethylazanide Chemical compound C[N-]C QKIUAMUSENSFQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012520 frozen sample Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000007885 magnetic separation Methods 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/581—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with enzyme label (including co-enzymes, co-factors, enzyme inhibitors or substrates)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/583—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with non-fluorescent dye label
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/10—Musculoskeletal or connective tissue disorders
- G01N2800/101—Diffuse connective tissue disease, e.g. Sjögren, Wegener's granulomatosis
- G01N2800/102—Arthritis; Rheumatoid arthritis, i.e. inflammation of peripheral joints
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明公开了一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒以及检测方法，涉及免疫分析技术领域。本发明公开的试剂盒包括链霉亲和素标记的磁微粒、生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白、可检测标记物标记的标记抗体、以及与所述可检测标记物相适用的底物。该试剂盒具有灵敏度高、特异性好以及线性范围宽等特点，能够快速准确的检测血液样本中的抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体。
Description
技术领域
本发明涉及免疫分析技术领域，具体而言，涉及检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒以及检测方法。
背景技术
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种致残性的慢性多关节炎疾病。其特点是滑膜关节的慢性炎症导致身体残疾，发病还受到遗传和环境等因素的影响，发病率有逐年上升的趋势。部分RA患者在发病2年即可出现不可逆转的骨关节破坏而致关节畸形，进而丧失运动能力，研究发现，越早对RA进行干预治疗，就越能有效的控制病情的恶化，减少对身体的损害程度，因此早期的诊断治疗显得至关重要。
RA最常见的标记物有：抗环瓜氨酸肽(CCP)，类风湿因子(RF)，抗核周因子(APF)，RA33，抗Sa以及6-磷酸葡萄糖异构酶等。近年来，抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinatedpeptide，CCP)抗体和类风湿因子在早期RA诊断中，二者高滴度的阳性占比确诊评分的一半权重大大提高了RA早期诊断的可能性。但抗CCP抗体和类风湿因子阴性的RA早期诊断仍然困难，最新研究发现，抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体(抗MCV抗体)与APF、AKA、AFA、CCP抗体以及抗 Sa抗体在化学结构上具有相关性，而且抗MCV抗体经由肽酰精氨酸、亚胺酶等瓜氨酸蛋白结构发生改变，增加了潜在的蛋白决定簇即瓜氨酸簇，与抗角蛋白抗体相比较，抗MCV抗体具有较高的特异性和敏感性。
目前市场上常用于检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的有酶联免疫分析法，胶体金法，磁微粒化学发光法以及免疫荧光层析法等。虽然酶联免疫分析法能准确地检测样品中的抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体浓度，但实际操作中实验耗时较长，操作过程比较复杂。胶体金法和免疫荧光层析法可以快速检测，但只能进行定性或者半定量的检测，准确度偏低，无法为临床判断提供可靠的依据。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒以及检测方法。本发明提供的试剂盒具有灵敏度高、特异性好以及线性范围宽等特点，能够快速准确的检测血液样本中的抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体。
本发明是这样实现的：
一方面，本发明提供一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒，其包括：链霉亲和素标记的磁微粒、生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白、可检测标记物标记的二抗、以及与所述可检测标记物相适用的底物；所述标记抗体可特异性结合所述抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体。
不同于现有技术中将捕获抗原通过偶联剂直接标记到磁珠表面的方法，本发明提供的检测试剂盒利用链霉亲和素与生物素的结合特点，在包被突变型瓜氨酸化波形蛋白即抗原时，用生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白连接到链霉亲和素标记的磁微粒上；检测时，吸附在磁微粒上的突变型瓜氨酸化波形蛋白捕捉待测样本中的抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体，可检测标记物标记的二抗与待测样本中的抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体结合，形成抗原-抗体-二抗复合物，在底物存在的条件下实现检测；由于链霉亲和素与生物素的结合比例为1:4，因此通过链霉亲和素与生物素系统可以提高捕获抗原的包被量，从而使其捕获抗体的成功率也会得到提升，最终提升了试剂的检测灵敏度；该试剂盒能快速准确的检测样本中抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的含量，具有灵敏度高、特异性好以及线性范围宽等特点。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述磁微粒的粒径为 0.1μm-5μm。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述链霉亲和素标记的磁微粒存在于第一溶液中，所述第一溶液含有：三羟甲基氨基甲烷(Tris)、氯化钠、氯化钾、氯化锌、BSA、鱼皮凝胶和Proclin-300。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述第一溶液含有：0.1-0.5 mol/L三羟甲基氨基甲烷、0.1-0.15mol/L氯化钠、30-50mmol/L氯化钾、30-50mmol/L氯化锌、0.5-2.0wt％BSA、5-10wt％鱼皮凝胶和0.1-0.5wt％Proclin-300。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述第一溶液含有：0.1mol/L 三羟甲基氨基甲烷、0.15mol/L氯化钠、50mmol/L氯化钾、50mmol/L 氯化锌、1.0wt％BSA、5wt％鱼皮凝胶和0.2wt％Proclin-300。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白存在于PBS缓冲液中。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述可检测标记物为发光标记物或显色标记物。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述发光标记物为吖啶酯、辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶(ALP)。
可选地，本发明的一些实施方案中，当所述发光标记物为吖啶酯、辣根过氧化物酶时，所述底物为过氧化物；碱性环境中加入过氧化物(例如H2O2等)后吖啶酯自身发光，通过仪器检测溶液的发光值(RLU)实现检测。
可选地，本发明的一些实施方案中，当所述发光标记物为吖啶酯时，所述底物包括各自独立的激发液A和激发液B，其中，激发液A含有： 0.07mol/L HCl和0.65wt％的H2O2，pH1.2；激发液B含有：0.6mmol/L NaOH 和0.65wt％十二烷基三甲基碘化铵，pH 13.2。
当所述发光标记物为碱性磷酸酶时，所述底物为(金刚烷)-1,2-二氧环乙烷(AMPPD)；碱性磷酸酶催化脱去磷酸根基团，形成一个不稳定的中间体，该中间体随即自行分解(二氧四节环断裂)，同时发射光子，通过仪器检测溶液的发光值(RLU)实现检测。
可选地，本发明的一些实施方案中，当所述发光标记物为吖啶酯时，所述标记抗体存在于第二溶液中，所述第二溶液含有：三羟甲基氨基甲烷、BSA以及Proclin-300；当所述发光标记物为碱性磷酸酶时，所述标记抗体存在于第三溶液中，所述第三溶液含有：三羟甲基氨基甲烷、BSA、氯化锌、氯化镁以及Proclin-300。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述第二溶液含有： 0.1-0.5mol/L三羟甲基氨基甲烷，0.5-2.0wt％BSA和0.1-0.5wt％ Proclin-300。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述第二溶液含有：0.1mol/L 三羟甲基氨基甲烷，1.0wt％BSA和0.2wt％Proclin-300。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述第三溶液含有： 0.1-0.5mol/L三羟甲基氨基甲烷，0.5-2.0wt％BSA、30-50mmol/L氯化锌、30-50mmol/L氯化镁和0.1-0.5wt％Proclin-300。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述第三溶液含有：0.1mol/L 三羟甲基氨基甲烷，1.0wt％BSA、50mmol/L氯化锌、50mmol/L氯化镁和0.2wt％Proclin-300。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述标记抗体为兔抗人抗体、羊抗人抗体或鼠抗人抗体。
上述标记抗体为兔、羊和鼠等抗人二抗，再标记可检测标记物后得到。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述试剂盒还含有校准品和质控品。
可选地，本发明的一些实施方案中，所述试剂盒还包括校准品和质控品中的至少一种；
所述校准品和所述质控品均含有：0.1mol/L NaCl、0.5wt％BSA、 3.0wt％小牛血清、0.2wt％Proclin-300、0.55wt％马血清、以及 50mmol/L三羟甲基氨基甲烷。
另一方面，本发明提供制备如上所述试剂盒的方法，其包括：将所述链霉亲和素标记的磁微粒、所述生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白、所述可检测标记物标记的标记抗体、以及与所述可检测标记物相适用的所述底物进行组装。
另一方面，本发明提供一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的方法，其包括：使用如上所述试剂盒进行检测。
可选地，本发明的一些实施方案中，上述检测方法包括：往待测样本中依次加入链霉亲和素标记的磁微粒、生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白以及可检测标记物标记的标记抗体，孵育洗涤后加入底物检测。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1：表3中的链霉亲和素标记的磁微粒法发光值拟合曲线。
图2：表3中的捕获抗原直接包被磁微粒法发光值拟合曲线。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种检测抗MCV抗体的试剂盒，其包括：链霉亲和素标记的磁微粒溶液、生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白溶液、吖啶酯标记的鼠抗人抗体溶液、与吖啶酯相适用的底物、校准品、质控品以及样本稀释液。
其中，底物包括激发液A和激发液B，激发液A含有：0.07mol/L HCl 和0.65wt％的H2O2，pH 1.2；激发液B含有：0.6mmol/L NaOH和0.65wt％十二烷基三甲基碘化铵，pH 13.2。
上述链霉亲和素标记的磁微粒溶液由如下方法制备：
(1)取氨基修饰的磁微粒(粒径0.1-5μm)，进行末端修饰活化：取50mg氨基磁微粒置于烧杯中，加入等体积丙酮以及甲醇2ml，清洗3遍，经磁分离，去上清液，然后加入2ml、0.2％的对苯二异硫氰酸酯(PDITC)溶液，溶于N,N-二甲基甲酰胺中，室温震荡，反应10h后，依次用丙酮和超纯水各清洗3遍，保存于超纯水中备用。
(2)取上述活化后的磁微粒2mg，加入400ug链霉亲和素，室温震荡，反应20min，用磁微粒缓冲液清洗3遍，然后稀释至1mg/ml，得到链霉亲和素标记的磁微粒溶液，备用；
其中，所用磁微粒缓冲液含有：0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷、 0.15mol/L氯化钠、50mmol/L氯化钾、50mmol/L氯化锌、1.0w％ BSA、5wt％鱼皮凝胶和0.2wt％Proclin-300，pH7.6。
需要说明的是，在其他的实施例中也可以使用其他基团修饰的磁微粒，例如羧基(-COOH)、苯甲磺酰基等，无论使用何种基团修饰的磁微粒只要能将链霉亲和素偶联标记上即可。
上述生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白溶液由如下方法制备：
取2mg突变型瓜氨酸化波形蛋白于离心管中，加入PBS缓冲液 (pH9.0)溶解，充分混匀后，将溶液使用50kDa超滤管对突变型瓜氨酸化波形蛋白进行纯化处理，同时取0.56mg的生物素用无水N,N- 二甲基甲酰胺溶解至10mM，取13.3μl上述生物素-N,N-二甲基甲酰胺溶液加入上述离心管中，37℃恒温避光温育2h，将温育好的溶液轻轻吹打混匀，4℃，12000×g，离心10min，上清液即为生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白溶液，放入2～8℃储藏备用。
上述吖啶酯标记的鼠抗人抗体由如下方法制备：
将吖啶酯用N,N-二甲基酰胺溶解至2mg/ml，再将吖啶酯溶液与鼠抗人抗体(上海领航科技有限公司，L1I00301)，按质量比1:10进行混合，控制体积在50μl以内，补加碳酸盐缓冲溶液(0.2mol/L,pH 9.0) 将体积补足至100μl，37℃条件下孵育2h，反应完后将溶液使用50kDa 超滤管超滤换液3次。所得抗体浓缩液收集在含有三羟甲基氨基甲烷 (0.1mol/L、pH 7.4)、1.0wt％BSA和0.2wt％Proclin-300的溶液中。
上述校准品由如下方法制备：
将已知浓度的抗MCV抗体加入到基质液中配制成下列浓度的校准品：0U/ml，15U/ml，35U/ml，150U/ml，450U/ml，1000U/ml。基质液含有：0.1mol/L的NaCl、0.5wt％的BSA、3.0wt％的小牛血清、 0.2wt％的Proclin-300、0.55wt％马血清、以及50mmol/L三羟甲基氨基甲烷，pH 7.60。
上述质控品由如下方法制备：
将已知浓度的抗MCV抗体加入到基质液中配制成下列浓度的质控品：30U/ml和400U/ml。基质液含有：0.1mol/L的NaCl、0.5wt％的BSA、3.0wt％的小牛血清、0.2wt％的Proclin-300、0.55wt％马血清、以及50mmol/L三羟甲基氨基甲烷，pH 7.60。
上述样本稀释液由如下方法制备：
称三羟甲基氨基甲烷6.05g加入干净烧杯中，用HCl调整pH至 7.4，依次加入NaCl11.4g，BSA10g以及Proclin-300 2ml，用纯化水定重至1L。
实施例2
本实施例提供采用实施例1的试剂盒检测抗MCV抗体的方法，其包括如下步骤：
(1)检测样本为采集的血清或血浆时(处理样本避免污染，冻存样本必须完全解冻，然后充分混匀)，吸取10μl样本用样本稀释液稀释 10倍，混匀备用；
(2)吸取稀释后的样本50μl，依次加入链霉亲和素标记的磁微粒溶液50μl，生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白溶液50μl、吖啶酯标记的鼠抗人抗体溶液50μl，37℃温育18min。
(3)温育结束后用洗涤液清洗3遍，洗涤液为含有2mol/L的氯化钠，2wt％的吐温-20和0.1mol/L-1mol/L的磷酸盐缓冲液，缓冲液 pH为7.8。
(4)洗涤后先加入预激发液A100μl，然后再加入激发液B 100μl 进行检测。
实施例3
本实施例提供的检测抗MCV抗体的试剂盒的组成与实施例1基本相同，不同点在于，本实施例采用碱性磷酸酶标记的鼠抗人抗体作为标记抗体，对应使用的化学发光底物为(金刚烷)-1,2-二氧环乙烷 (AMPPD)；该底物以溶液形式存在，该溶液含有：0.5wt％AMPPD，三羟甲基氨基甲烷(0.05mol/L，pH范围为7.00-9.50)，0.2mol/L硫酸钠，0.1mol/L的氯化钠，0.2wt％的Proclin-300以及2wt％的发光增强剂。
上述碱性磷酸酶标记的鼠抗人抗体的制备方法如下：
称取25mg的碱性磷酸酶于戊二醛溶液中，充分混匀后，放置于室温过夜，将反应后的溶液经层析柱用碳酸钠溶液(0.2mol/L,pH 9.0) 洗脱，收集流出液体，将12.5mg待标鼠抗人抗体溶于碳酸钠溶液 (0.2mol/L,pH 9.0)中，搅拌至完全溶解后，逐滴加入碱性磷酸酶溶液中，再依次加入赖氨酸(0.2mol/L)和硫酸铵，室温反应3h，经离心和透析后，即上清液为碱性磷酸酶标记的鼠抗人抗体，然后用酶稀释液稀释至0.1ug/ml。所述的酶稀释液含有：三羟甲基氨基甲烷 (0.1mol/L、pH 7.6)、1.0wt％BSA、50mmol/L氯化锌、50mmol/L氯化镁以及0.2wt％Proclin-300。
该试剂盒的使用方法与实施例2基本相同。
实验例1
实施例1的试剂盒的性能验证
(1)线性范围
将高值1000U/ml校准品稀释为5个梯度点，低值无限接近下限，参考实施例2的方法，使用超灵敏管式发光仪(型号LB9508仪器)检测，每个梯度点测试2次，求平均值，测量结果见表1，以稀释浓度为自变量，以检测结果均值为因变量求出线性回归方程:Log(Y)＝4.1276+0.9019Log(X)，计算求得线性相关系数r＝0.9992, 大于0.95，线性范围：0-1000U/ml。
表1
(2)精密性
如表2所示，同时检测2份不同浓度样本测试的变异系数(n＝10) 为6.9％，3.9％，CV均小于10％，说明实施例1所提供的试剂盒精密性良好。
表2
| 测量次数 | 稀释浓度15U/ml | 稀释浓度150U/ml |
| 1 | 15.1 | 150.7 |
| 2 | 16.2 | 152.3 |
| 3 | 17.1 | 154.4 |
| 4 | 14.2 | 146.1 |
| 5 | 15.7 | 143.3 |
| 6 | 13.9 | 157.2 |
| 7 | 14.6 | 144.3 |
| 8 | 16.0 | 155.9 |
| 9 | 14.4 | 141.9 |
| 10 | 16.3 | 143.8 |
| 平均值 | 15.35 | 148.99 |
| 标准偏差 | 1.06 | 5.76 |
| CV％ | 6.9 | 3.9 |
(3)稳定性
将试剂盒放置于37℃下加速稳定性考察9天，试剂盒无明显变化，稳定性高。
实验例2
比较实施例1的试剂盒与对照试剂盒的性能。对照试剂盒的组成与实施例1试剂盒基本相同，不同的是，对照试剂盒的突变型瓜氨酸化波形蛋白抗原直接包被磁微粒，方法如下：取一定量的磁微粒，混匀后，用磁分离器进行分离，用0.2mol/L的MES缓冲液清洗3次，加入碳二亚胺活化，充分混匀后，加入突变型瓜氨酸化波形蛋白，室温水平混匀15h，加入封闭液，混匀2h，磁分离器进行分离，用磁微粒缓冲液清洗3遍，然后稀释至1mg/ml。
将1000U/ml校准品稀释为5个梯度点，每个梯度点检测3个水平，参照实施例2的方法，使用实施例1的试剂盒和对照试剂盒进行检测，结果见表3。
表3
根据表3数据，求平均值，以稀释浓度为自变量，以检测结果均值为因变量，链霉亲和素包被的磁微粒线性回归方程:Log(Y)＝4.2057+0.8686Log(X)，计算求得线性相关系数r＝0.9993。抗原直接包被磁微粒线性回归方程:Log(Y)＝4.0351+0.9096Log(X)，计算求得线性相关系数r＝0.9988，由表3检测数据和图1，图2曲线可知实施例1提供试剂盒线性和灵敏度优于直接包被磁微粒法试剂盒。
综上，不同于捕获抗原通过偶联剂直接标记到磁珠表面的方法，本发明实施例试剂盒利用链霉亲和素与生物素的结合技术，提升了包被效率，捕获抗原包被效率提升后，捕获样本中抗体的效率也会随即提升，因此提高了检测灵敏度。
本发明实施例试剂盒所提供的校准品和质控品基质液由动物血清和BSA按一定比例配制而成，与市面其他校准品和质控品相比，重复性好，稳定性高，变异系数更小。
总之，本发明实施例试剂盒特异性高，准确度高，线性范围宽，操作简单，反应时间短，自动化程度高，适合于各大型医院，能快速准确的检测样本中抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的含量，为后续治疗提供依据。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒，其特征在于，其包括：链霉亲和素标记的磁微粒、生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白、可检测标记物标记的标记抗体、以及与所述可检测标记物相适用的底物；所述标记抗体可特异性结合所述抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述磁微粒的粒径为0.1μm-5μm；
优选地，所述链霉亲和素标记的磁微粒存在于第一溶液中，所述第一溶液含有：三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、氯化钾、氯化锌、BSA、鱼皮凝胶和Proclin-300；
优选地，所述第一溶液含有：0.1-0.5mol/L三羟甲基氨基甲烷、0.1-0.15mol/L氯化钠、30-50mmol/L氯化钾、30-50mmol/L氯化锌、0.5-2.0wt％BSA、5-10wt％鱼皮凝胶和0.1-0.5wt％Proclin-300。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白存在于PBS缓冲液中。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述可检测标记物为发光标记物或显色标记物。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述发光标记物为吖啶酯、辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，当所述发光标记物为吖啶酯、辣根过氧化物酶时，所述底物为过氧化物；当所述发光标记物为碱性磷酸酶时，所述底物为AMPPD。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，当所述发光标记物为吖啶酯时，所述标记抗体存在于第二溶液中，所述第二溶液含有：三羟甲基氨基甲烷、BSA以及Proclin-300；当所述发光标记物为碱性磷酸酶时，所述标记抗体存在于第三溶液中，所述第三溶液含有：三羟甲基氨基甲烷、BSA、氯化锌、氯化镁以及Proclin-300；
优选地，所述第二溶液含有：0.1-0.5mol/L三羟甲基氨基甲烷，0.5-2.0wt％BSA和0.1-0.5wt％Proclin-300；
优选地，所述第三溶液含有：0.1-0.5mol/L三羟甲基氨基甲烷，0.5-2.0wt％BSA、30-50mmol/L氯化锌、30-50mmol/L氯化镁和0.1-0.5wt％Proclin-300；
优选地，所述标记抗体为兔抗人抗体、羊抗人抗体或鼠抗人抗体。
8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括校准品和质控品中的至少一种；
所述校准品和所述质控品均含有：0.1-0.5mol/L NaCl、0.5-2.0wt％BSA、3.0-10wt％小牛血清、0.1-0.5wt％Proclin-300、0.55-1wt％马血清、0.01-0.5mol/L三羟甲基氨基甲烷。
9.制备如权利要求1-8任一项所述的试剂盒的方法，其特征在于，其包括：将所述链霉亲和素标记的磁微粒、所述生物素标记的突变型瓜氨酸化波形蛋白、所述可检测标记物标记的标记抗体、以及与所述可检测标记物相适用的所述底物进行组装。
10.一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的方法，其特征在于，其包括：使用权利要求1-8任一项所述的试剂盒进行检测。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110407182.4A CN113109574A (zh) | 2021-04-15 | 2021-04-15 | 检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒以及检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110407182.4A CN113109574A (zh) | 2021-04-15 | 2021-04-15 | 检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒以及检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113109574A true CN113109574A (zh) | 2021-07-13 |
Family
ID=76717311
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110407182.4A Pending CN113109574A (zh) | 2021-04-15 | 2021-04-15 | 检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒以及检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113109574A (zh) |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090325884A1 (en) * | 2005-08-11 | 2009-12-31 | Procollagen Oy | Method for Detecting Autoantibodies Formed in Rheumatoid Arthritis |
| CN102321743A (zh) * | 2011-08-04 | 2012-01-18 | 盛司潼 | 一种用于表面固定的固相载体及其制备和应用 |
| CN102519912A (zh) * | 2011-12-06 | 2012-06-27 | 深圳市检验检疫科学研究院 | 一种用表面等离子共振生物传感器检测待测物的方法 |
| US20130171659A1 (en) * | 2011-12-28 | 2013-07-04 | Abbott Japan Co., Ltd. | Methods of prognosis and diagnosis of rheumatoid arthritis |
| CN103575899A (zh) * | 2012-07-23 | 2014-02-12 | 苏州长光华医生物试剂有限公司 | 一种检测npm蛋白的试剂盒及其制备方法 |
| CN103575897A (zh) * | 2012-07-23 | 2014-02-12 | 苏州长光华医生物试剂有限公司 | 一种检测akt2蛋白的试剂盒及其制备方法 |
| US20150080245A1 (en) * | 2012-01-13 | 2015-03-19 | Catholic University Industry-Academic Cooperation Foundation | Rheumatoid arthritis diagnosis kit |
| CN106645738A (zh) * | 2016-06-30 | 2017-05-10 | 深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司 | 抗环瓜氨酸多肽抗体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法 |
| CN109270272A (zh) * | 2018-10-18 | 2019-01-25 | 郑州安图生物工程股份有限公司 | 一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒及其制备方法 |
| CN110702906A (zh) * | 2019-10-11 | 2020-01-17 | 郑州安图生物工程股份有限公司 | 一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒 |
-
2021
- 2021-04-15 CN CN202110407182.4A patent/CN113109574A/zh active Pending
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20090325884A1 (en) * | 2005-08-11 | 2009-12-31 | Procollagen Oy | Method for Detecting Autoantibodies Formed in Rheumatoid Arthritis |
| CN102321743A (zh) * | 2011-08-04 | 2012-01-18 | 盛司潼 | 一种用于表面固定的固相载体及其制备和应用 |
| CN102519912A (zh) * | 2011-12-06 | 2012-06-27 | 深圳市检验检疫科学研究院 | 一种用表面等离子共振生物传感器检测待测物的方法 |
| US20130171659A1 (en) * | 2011-12-28 | 2013-07-04 | Abbott Japan Co., Ltd. | Methods of prognosis and diagnosis of rheumatoid arthritis |
| US20150080245A1 (en) * | 2012-01-13 | 2015-03-19 | Catholic University Industry-Academic Cooperation Foundation | Rheumatoid arthritis diagnosis kit |
| CN103575899A (zh) * | 2012-07-23 | 2014-02-12 | 苏州长光华医生物试剂有限公司 | 一种检测npm蛋白的试剂盒及其制备方法 |
| CN103575897A (zh) * | 2012-07-23 | 2014-02-12 | 苏州长光华医生物试剂有限公司 | 一种检测akt2蛋白的试剂盒及其制备方法 |
| CN106645738A (zh) * | 2016-06-30 | 2017-05-10 | 深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司 | 抗环瓜氨酸多肽抗体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法 |
| CN109270272A (zh) * | 2018-10-18 | 2019-01-25 | 郑州安图生物工程股份有限公司 | 一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒及其制备方法 |
| CN110702906A (zh) * | 2019-10-11 | 2020-01-17 | 郑州安图生物工程股份有限公司 | 一种检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7759074B2 (en) | Immunological latex turbidimetry method and reagent therefor | |
| US7955792B2 (en) | Diluent for norovirus or sapovirus specimen and method for detecting virus | |
| CN108444988B (zh) | 甲状腺球蛋白化学发光检测试剂盒 | |
| CN111307789B (zh) | 一种叶酸检测试剂盒及检测方法 | |
| CN111175491A (zh) | 一种sBCMA磁微粒化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法和应用 | |
| CN102901810A (zh) | 包被有前列腺特异性抗原抗体的胶乳颗粒的制备方法及psa胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒 | |
| CN108519487A (zh) | 一种白介素-6的定量检测方法及检测试剂盒 | |
| CN108872616B (zh) | 基于单粒径胶乳颗粒的检测ngal的免疫胶乳比浊法试剂盒 | |
| CN110806487A (zh) | 一种用于人肝素结合蛋白检测的试剂盒及其制备方法 | |
| CN111007266A (zh) | 一种检测血浆中b型利钠肽的化学发光定量检测试剂盒 | |
| CN113640511A (zh) | 一种磁微粒电化学发光试剂盒 | |
| CN117434274A (zh) | 一种单人份白介素6磁微粒化学发光试剂盒及其测定方法 | |
| EP3480601B1 (en) | Inhibin b chemiluminescent immunoassay kit and preparation method therefor | |
| CN113109574A (zh) | 检测抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体的试剂盒以及检测方法 | |
| CN116466078A (zh) | 抗mda5抗体的检测试剂盒及其制备方法 | |
| CA2047742A1 (en) | Method and diagnostic test kit for detection of anti-cardiolipin | |
| CN115436632A (zh) | 一种胃蛋白酶原ii检测试剂盒及其应用 | |
| EP0217583B1 (en) | Simultaneous extraction of a ligand from a sample and capture by anti-ligand therefor in ligand/anti-ligand assays | |
| Sasamoto et al. | Highly sensitive immunological assays for human chorionic gonadotrophin and prostatic acid phosphatase using phenacyl phosphate as a chemiluminescent label | |
| CN110632290B (zh) | 一种抗双链dna抗体检测试剂 | |
| CN113686841B (zh) | 定量检测甲状腺素结合力试剂盒及其制备方法、检测方法 | |
| CN115754279A (zh) | 一种白介素-10检测试剂、制备方法及其检测方法 | |
| CN117929731A (zh) | 一种基质金属蛋白酶3化学发光检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN115586331A (zh) | 一种白介素-2r检测试剂、制备方法及其检测方法 | |
| CN112540172A (zh) | 一种EB病毒衣壳抗原IgG抗体检测试剂盒及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210713 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |