CN113087749B - 唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 - Google Patents
唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113087749B CN113087749B CN202110250449.3A CN202110250449A CN113087749B CN 113087749 B CN113087749 B CN 113087749B CN 202110250449 A CN202110250449 A CN 202110250449A CN 113087749 B CN113087749 B CN 113087749B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- free radical
- radical inhibitor
- column
- saxifrage
- mobile phase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 82
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 50
- 241001647091 Saxifraga granulata Species 0.000 title claims abstract description 47
- DYHOLQACRGJEHX-CYBMUJFWSA-N (-)-Farrerol Natural products C1([C@@H]2OC3=C(C)C(O)=C(C(=C3C(=O)C2)O)C)=CC=C(O)C=C1 DYHOLQACRGJEHX-CYBMUJFWSA-N 0.000 title claims abstract description 39
- DZTRDRPCROOSOG-UHFFFAOYSA-N Matteucinol Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C1OC2=C(C)C(O)=C(C)C(O)=C2C(=O)C1 DZTRDRPCROOSOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 39
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title claims abstract description 32
- -1 farrerol glycoside free radical Chemical class 0.000 title claims abstract description 21
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 title claims description 20
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 102
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 claims abstract description 33
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 25
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 25
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims abstract description 24
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 54
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 45
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 44
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 40
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 37
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 37
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 25
- DYHOLQACRGJEHX-ZDUSSCGKSA-N farrerol Chemical compound C1([C@H]2OC3=C(C)C(O)=C(C(=C3C(=O)C2)O)C)=CC=C(O)C=C1 DYHOLQACRGJEHX-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims description 24
- 241000468460 Thalictrum aquilegiifolium Species 0.000 claims description 22
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 19
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 16
- 241000208422 Rhododendron Species 0.000 claims description 15
- 241001596270 Aizoon Species 0.000 claims description 14
- 241000205578 Thalictrum Species 0.000 claims description 14
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical group CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 10
- HQVFCQRVQFYGRJ-UHFFFAOYSA-N formic acid;hydrate Chemical compound O.OC=O HQVFCQRVQFYGRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 claims description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 6
- 241000219269 Thalictrum foeniculaceum Species 0.000 claims description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 claims 3
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 abstract description 5
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 abstract description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002386 leaching Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 abstract 1
- 241000284928 Saxifraga tangutica Species 0.000 description 10
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 4
- 241000220156 Saxifraga Species 0.000 description 4
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 4
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 241000220151 Saxifragaceae Species 0.000 description 2
- 241000014078 Thomsonia Species 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- XILIYVSXLSWUAI-UHFFFAOYSA-N 2-(diethylamino)ethyl n'-phenylcarbamimidothioate;dihydrobromide Chemical compound Br.Br.CCN(CC)CCSC(N)=NC1=CC=CC=C1 XILIYVSXLSWUAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000218631 Coniferophyta Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 229940123457 Free radical scavenger Drugs 0.000 description 1
- 241000336847 Luda Species 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 201000001352 cholecystitis Diseases 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 238000003919 heteronuclear multiple bond coherence Methods 0.000 description 1
- 238000005570 heteronuclear single quantum coherence Methods 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004262 preparative liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000013441 quality evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
- C07H1/08—Separation; Purification from natural products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Mycology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
本发明公开了唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。具体制备工艺为：提取、微孔树脂柱粗分、在线自由基抑制剂组分筛选、反相中压色谱柱分离、在线自由基抑制剂筛选及亲水高压制备柱制备六个步骤。上述方法制得的自由基抑制剂可在制备自由基抑制药物中应用，具体作为有效成分按药学上可接受的任何载体制成各类药用制剂。本发明制备工艺中的提取溶剂、微孔树脂柱、反相中压色谱柱、亲水制备柱分离溶剂及分离材料均可回收利用；原料来源广泛，甲醇室温冷浸提取、纯化中使用的亲水制备液相色谱等工艺步骤均可实现规模化操作，且高压制备色谱分离可以保证产品的纯度大于95%。
Description
技术领域
本发明涉及唐古特虎耳草中新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂分离技术领域，具体涉及唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。
背景技术
唐古特虎耳草（Saxifraga tangutica Engl.），别名甘青虎耳草，是虎耳草科（Saxifragaceae）虎耳草属（Saxifraga）的一年生常绿草本植物，藏药名：“松吉蒂”，中药中称之为“迭达”，主要分布在青海、甘肃、西藏、四川以及及不丹与克什米尔地区海拔2900~4900米的针叶林灌丛下。唐古特虎耳草为常用藏药，可全草入药，《中药辞海》记载：其性味微苦、辛、寒。主要功效：清肝利胆，补脾健胃。主治：肝炎，胆囊炎，流行性感冒。现代药理学研究证明酚类是主要活性成分。文献报道，酚类化合物具有良好的清除自由基活性。但目前，仅有本课题发表的8个抗氧化的酚类化合物从唐古特虎耳草中被分离并鉴定（JunDang, Yanduo Tao, Yun Shao, et al. Antioxidative extracts and phenolsisolated from Qinghai-Tibet Plateau medicinal plant Saxifraga tangutica Engl.Industrial Crops and Products, 2015, 78: 13-18）。为了进一步加快唐古特虎耳草的质量评价、生产销售及相关新药的研发步伐，有必要从中挖掘更多的结构新颖的活性成分。
目前，仅有一项本课题组申请的国家发明专利（申请号：202010041021.3）描述了唐古特虎耳草中六种结构已知的没食子酰基类天然自由基清除剂的分离制备工艺及其应用。并未有新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的文献或专利报道。因此，亟需建立一种工艺简单、规模化从唐古特虎耳草中分离制备自由基抑制剂的方法。
发明内容
基于上述技术问题，本发明的目的是提供唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。
本发明保护唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂，其中，该杜鹃素糖苷类自由基抑制剂呈白色粉末状，其名称为杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂，其分子式为C22H34O12，其化学结构式为：
本发明还保护唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的分离制备工艺，具体包括如下步骤：
步骤1，提取：将唐古特虎耳草全草阴干，粗碎后按料液比1g：5~100mL的甲醇提取，在室温下提取2~4次，每次2~4 h，过滤、合并滤液，即滤液A，该滤液A按聚酰胺的量：唐古特虎耳草药材的量=1:5拌样并减压干燥，即得唐古特虎耳草提取物拌样样品；
步骤2，微孔树脂柱粗分：唐古特虎耳草提取物拌样样品，该样品经装有微孔树脂的中压色谱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个（Fr3）主要的色谱峰馏分，该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3，其中，所述微孔树脂柱的粗分离工作参数为：色谱柱柱长460 mm、直径49 mm，微孔树脂柱固定相为CHP20P，流动相A为水，B为乙醇，色谱条件为0~120min，0~100%B，120~150min，100%B，进样量为40g，流速为30 mL/min；
步骤3，在线自由基抑制剂组分筛选：在所述唐古特虎耳草目标组分Fr3中加入体积浓度为15~30%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为70.0~100.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液，即滤液B，取1mL滤液B，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统，筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3中自由基抑制剂；其中，所述在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用耐纯水C18反相色谱柱250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；
步骤4，反相中压色谱柱分离：唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液经装有反相填料的中压色谱塔分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个（Fr3-3）主要的色谱峰馏分，该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3-3；其中，所述反相中压色谱柱分离的工作参数为：色谱柱柱长500mm、直径50mm，反相中压色谱柱固定相为50μm的Spherical C18，流动相A为水，B为甲醇，色谱条件为0~120min，10~75%B，进样量为10mL，流速为70mL/min；
步骤5，在线自由基抑制剂筛选：在唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中加入体积浓度为15~30%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为40.0~60.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3-3的溶液，即滤液C，取1mL滤液C，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中自由基抑制剂；其中，所述在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用亲水色谱柱XION 250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；
步骤6，亲水高压制备柱制备：所述滤液C经亲水制备柱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中对应的色谱峰馏分Fr3-3-1，色谱峰馏分Fr3-3-1经减压干燥即得纯度大于95%的新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂；其中，亲水高压制备柱制备的工作参数为：制备柱柱长250 mm、直径20 mm，亲水色谱柱固定相为5μm XION填料，流动相A为水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B洗脱，进样体积为4 mL，流速为19 mL/min。
进一步的，所述步骤3中，第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，5~28%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15 m。
进一步的，所述步骤5中，第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15 m。
进一步的，所述步骤1、步骤2、步骤4和步骤6中，减压干燥的条件均为：真空度50~250 mbar，温度40~60℃。
进一步的，步骤3所述的耐纯水C18反相色谱柱为耐纯水Reprosil C18反相色谱柱或耐纯水Megres C18反相色谱柱。
本发明还保护上述唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的应用，其中，该杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂可在制备自由基抑制药物中应用，具体作为有效成分按药学上可接受的任何载体制成各类药用制剂。
相比于现有的技术，本发明具有如下有益效果：
（1）本发明成本低廉、产品纯度高
提取使用的溶剂，微孔树脂柱、反相中压色谱柱亲水制备柱分离所使用的溶剂均可以回收利用；使用的分离材料均可以重复利用，回收利用的溶剂和重复利用的分离材料保证了较低廉的分离平均成本，高压制备色谱分离可以保证产品的纯度大于95%。
（2）本发明的制备方法可实现规模化生产需要
原料要求不高、成本低廉，一般野生的或市售的唐古特虎耳草均可，易于批量备料；甲醇室温冷浸提取，易于操作；采用微孔树脂柱粗分和反相中压色谱柱分离，这两种分离材料可以装于中压柱层析系统中，易于实现规模化；纯化中使用的亲水制备液相色谱，也非常适宜规模生产。
附图说明
图1为本发明唐古特虎耳草甲醇提取物微孔树脂分离色谱图；
图2为本发明唐古特虎耳草目标组分Fr3在线HPLC-DPPH筛选色谱图；
图3为本发明唐古特虎耳草目标组分Fr3反相中压色谱柱分离图；
图4为本发明唐古特虎耳草目标组分Fr3-3在线HPLC-DPPH筛选色谱图；
图5为本发明唐古特虎耳草目标组分Fr3-3亲水制备柱制备色谱图；
图6为本发明唐古特虎耳草一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside（Fr3-3-1）的纯度及活性验证色谱图；
图7为本发明唐古特虎耳草一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的质谱图；
图8为本发明唐古特虎耳草一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的1H NMR核磁图；
图9为本发明唐古特虎耳草一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside 自由基抑制剂的13C NMR核磁图；
图10为本发明唐古特虎耳草一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside 自由基抑制剂的DEPT核磁图；
图11为本发明唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside 自由基抑制剂的HSQC二维核磁图；
图12为本发明唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside 自由基抑制剂的HMBC二维核磁图；
图13为本发明唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的 H-HCOSY的二维核磁图；
图14为本发明唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的红外光谱图；
图15为本发明唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的紫外光谱图；
图16为本发明唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的旋光测试图；
图17为本发明唐古特虎耳草一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的结构图。
实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例
唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的分离制备工艺，具体包括如下步骤：
步骤1，提取：将500g唐古特虎耳草全草阴干，粗碎后按料液比1g：5mL的甲醇提取，在室温下提取4次，每次2 h，过滤、合并滤液，即滤液A，该滤液A按聚酰胺的量：唐古特虎耳草药材的量=1:5拌样并减压干燥，其中减压干燥的条件为：真空度50 mbar，温度40℃，即得唐古特虎耳草提取物拌样样品160.2g；
步骤2，微孔树脂柱粗分：唐古特虎耳草提取物拌样样品，该样品经装有微孔树脂的中压色谱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个（Fr3）主要的色谱峰馏分（详见附图1），该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3，其中减压干燥的条件为：真空度50 mbar，温度40℃，得唐古特虎耳草目标组分Fr3样品2.66g；微孔树脂柱的粗分离工作参数为：色谱柱柱长460 mm、直径49 mm，微孔树脂柱固定相为CHP20P，流动相A为水，B为乙醇，色谱条件为0~120min，0~100%B，120~150min，100%B，进样量为40g，流速为30mL/min；
步骤3，在线自由基抑制剂组分筛选：在所述唐古特虎耳草目标组分Fr3中加入体积浓度为15%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为70.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液，即滤液B，取1mL滤液B，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3中自由基抑制剂（详见附图2）；其中，所述在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用耐纯水ReproSil C18反相色谱柱250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，5~28%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15 m；
步骤4，反相中压色谱柱分离：唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液经装有反相填料的中压色谱塔分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个（Fr3-3）主要的色谱峰馏分，该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3-3（详见附图3）；其中减压干燥的条件为：真空度50 mbar，温度40℃，即得唐古特虎耳草目标组分Fr3-3样品325.7mg；反相中压色谱柱分离的工作参数为：色谱柱柱长500mm、直径50mm，反相中压色谱柱固定相为50μm的Spherical C18，流动相A为水，B为甲醇，色谱条件为0~120min，10~75%B，进样量为10mL，流速为70mL/min；
步骤5，在线自由基抑制剂筛选：在唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中加入体积浓度为15%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为40.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3-3的溶液，即滤液C，取1mL滤液C，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中自由基抑制剂（详见附图4）；其中，在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用亲水色谱柱XION 250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15 m；
步骤6，亲水高压制备柱制备：所述滤液C经亲水制备柱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中对应的色谱峰馏分Fr3-3-1（详见附图5），色谱峰馏分Fr3-3-1经减压干燥即得纯度大于95%的新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂；其中减压干燥的条件为：真空度50 mbar，温度40℃，即得唐古特虎耳草目标组分Fr3-3-1样品25.5 mg；亲水高压制备柱制备的工作参数为：制备柱柱长250mm、直径20 mm，亲水色谱柱固定相为5μm XION填料，流动相A为水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B洗脱，进样体积为4 mL，流速为19 mL/min。
上述唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的应用，其中，该杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂可在制备自由基抑制药物中应用，具体作为有效成分按药学上可接受的任何载体制成各类药用制剂。
实施例
唐古特虎耳草中新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的分离制备工艺，具体包括如下步骤：
步骤1，提取：将1000g唐古特虎耳草全草阴干，粗碎后按料液比1g：100mL的甲醇提取，在室温下提取2次，每次4 h，过滤、合并滤液，即滤液A，该滤液A按聚酰胺的量：唐古特虎耳草药材的量=1:5拌样并减压干燥，其中减压干燥的条件为：真空度250 mbar，温度60℃，即得唐古特虎耳草提取物拌样样品319.3g；
步骤2，微孔树脂柱粗分：唐古特虎耳草提取物拌样样品，该样品经装有微孔树脂的中压色谱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个（Fr3）主要的色谱峰馏分，该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3，其中减压干燥的条件为：真空度250 mbar，温度60℃，得唐古特虎耳草目标组分Fr3样品5.21g；微孔树脂柱的粗分离工作参数为：色谱柱柱长460 mm、直径49 mm，微孔树脂柱固定相为CHP20P，流动相A为水，B为乙醇，色谱条件为0~120min，0~100%B，120~150min，100%B，进样量为40g，流速为30 mL/min；
步骤3，在线自由基抑制剂组分筛选：在所述唐古特虎耳草目标组分Fr3中加入体积浓度为30%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为100.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液，即滤液B，取1mL滤液B，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3中自由基抑制剂；其中，所述在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用耐纯水Megres C18反相色谱柱250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，5~28%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15 m；
步骤4，反相中压色谱柱分离：唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液经装有反相填料的中压色谱塔分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个（Fr3-3）主要的色谱峰馏分，该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3-3；其中减压干燥的条件为：真空度250 mbar，温度60℃，即得唐古特虎耳草目标组分Fr3-3样品640.2 mg；反相中压色谱柱分离的工作参数为：色谱柱柱长500mm、直径50mm，反相中压色谱柱固定相为50μm的Spherical C18，流动相A为水，B为甲醇，色谱条件为0~120min，10~75%B，进样量为10mL，流速为70mL/min；
步骤5，在线自由基抑制剂筛选：在唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中加入体积浓度为30%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为60.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3-3的溶液，即滤液C，取1mL滤液C，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中自由基抑制剂；其中，在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用亲水色谱柱XION 250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15 m；
步骤6，亲水高压制备柱制备：所述滤液C经亲水制备柱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中对应的色谱峰馏分Fr3-3-1，色谱峰馏分Fr3-3-1经减压干燥即得纯度大于95%的新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂；其中减压干燥的条件为：真空度250 mbar，温度60℃，即得唐古特虎耳草目标组分Fr3-3-1样品47.6 mg；亲水高压制备柱制备的工作参数为：制备柱柱长250 mm、直径20mm，亲水色谱柱固定相为5μm XION填料，流动相A为水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B洗脱，进样体积为4 mL，流速为19 mL/min。
上述唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的应用，其中，该杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂可在制备自由基抑制药物中应用，具体作为有效成分按药学上可接受的任何载体制成各类药用制剂。
实施例
唐古特虎耳草中新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的分离制备工艺，具体包括如下步骤：
步骤1，提取：将1200g唐古特虎耳草全草阴干，粗碎后按料液比1g：50mL的甲醇提取，在室温下提取3次，每次3 h，过滤、合并滤液，即滤液A，该滤液A按聚酰胺的量：唐古特虎耳草药材的量=1:5拌样并减压干燥，其中减压干燥的条件为：真空度150 mbar，温度50℃，即得唐古特虎耳草提取物拌样样品363.7g；
步骤2，微孔树脂柱粗分：唐古特虎耳草提取物拌样样品，该样品经装有微孔树脂的中压色谱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个（Fr3）主要的色谱峰馏分，该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3，其中减压干燥的条件为：真空度150 mbar，温度50℃，得唐古特虎耳草目标组分Fr3样品6.27g；微孔树脂柱的粗分离工作参数为：色谱柱柱长460 mm、直径49 mm，微孔树脂柱固定相为CHP20P，流动相A为水，B为乙醇，色谱条件为0~120min，0~100%B，120~150min，100%B，进样量为40g，流速为30 mL/min；
步骤3，在线自由基抑制剂组分筛选：在所述唐古特虎耳草目标组分Fr3中加入体积浓度为20%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为80.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液，即滤液B，取1mL滤液B，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3中自由基抑制剂；其中，所述在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用耐纯水Megres C18反相色谱柱250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，5~28%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15 m；
步骤4，反相中压色谱柱分离：唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液经装有反相填料的中压色谱塔分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个（Fr3-3）主要的色谱峰馏分，该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3-3；其中减压干燥的条件为：真空度150 mbar，温度50℃，即得唐古特虎耳草目标组分Fr3-3样品764.0 mg；反相中压色谱柱分离的工作参数为：色谱柱柱长500mm、直径50mm，反相中压色谱柱固定相为50μm的Spherical C18，流动相A为水，B为甲醇，色谱条件为0~120min，10~75%B，进样量为10mL，流速为70mL/min；
步骤5，在线自由基抑制剂筛选：在唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中加入体积浓度为25%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为50.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3-3的溶液，即滤液C，取1mL滤液C，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中自由基抑制剂；其中，在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用亲水色谱柱XION 250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15 m；
步骤6，亲水高压制备柱制备：所述滤液C经亲水制备柱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中对应的色谱峰馏分Fr3-3-1，色谱峰馏分Fr3-3-1经减压干燥即得纯度大于95%的新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂；其中减压干燥的条件为：真空度250 mbar，温度60℃，即得唐古特虎耳草目标组分Fr3-3-1样品57.2 mg；亲水高压制备柱制备的工作参数为：制备柱柱长250 mm、直径20mm，亲水色谱柱固定相为5μm XION填料，流动相A为水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B洗脱，进样体积为4 mL，流速为19 mL/min。
上述唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的应用，其中，该杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂可在制备自由基抑制药物中应用，具体作为有效成分按药学上可接受的任何载体制成各类药用制剂。
实施例
本发明唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的活性验证：
在分离得到的唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂中加入色谱甲醇进行溶解，配制样品浓度为0.3 mg/mL，经0.45μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂样品溶液，取1mL样品，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统验证唐古特虎耳草中新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的活性；
其中，在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用耐纯水ReprosilC18反相色谱柱250×4.6mm，5μm，第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，5~28%B，流动相流速为1.0mL/min，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15m，检测波长为517nm，活性验证色谱图（详见附图6）。一种新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂的质谱图、核磁图、红外光谱图、紫外光谱图、旋光测试图（详见附图7-16），新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside化合物的结构图（详见附图17）。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (7)
1.唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂，其特征在于，该杜鹃素糖苷类自由基抑制剂呈白色粉末状，其名称为杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂，其分子式为C22H34O12，其化学结构式为：
2.根据权利要求1所述的唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的分离制备工艺，其特征在于，具体包括如下步骤：
步骤1，提取：将唐古特虎耳草全草阴干，粗碎后按料液比1g：5~100mL的甲醇提取，在室温下提取2~4次，每次2~4 h，过滤、合并滤液，即滤液A，该滤液A按聚酰胺的量：唐古特虎耳草药材的量=1:5拌样并减压干燥，即得唐古特虎耳草提取物拌样样品；
步骤2，微孔树脂柱粗分：唐古特虎耳草提取物拌样样品，该样品经装有微孔树脂的中压色谱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个主要的色谱峰馏分，该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3，其中，所述微孔树脂柱的粗分离工作参数为：色谱柱柱长460 mm、直径49 mm，微孔树脂柱固定相为CHP20P，流动相A为水，B为乙醇，色谱条件为0~120min，0~100%B，120~150min，100%B，进样量为40g，流速为30 mL/min；
步骤3，在线自由基抑制剂组分筛选：在所述唐古特虎耳草目标组分Fr3中加入体积浓度为15~30%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为70.0~100.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液，即滤液B，取1mL滤液B，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统，筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3中自由基抑制剂；其中，所述在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用耐纯水C18反相色谱柱250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；
步骤4，反相中压色谱柱分离：唐古特虎耳草目标组分Fr3样品溶液经装有反相填料的中压色谱塔分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中第三个主要的色谱峰馏分，该馏分经减压干燥即得目标组分Fr3-3；其中，所述反相中压色谱柱分离的工作参数为：色谱柱柱长500mm、直径50mm，反相中压色谱柱固定相为50μm的SphericalC18，流动相A为水，B为甲醇，色谱条件为0~120min，10~75%B，进样量为10mL，流速为70mL/min；
步骤5，在线自由基抑制剂筛选：在唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中加入体积浓度为15~30%的甲醇进行溶解，配制样品浓度为40.0~60.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到唐古特虎耳草目标组分Fr3-3的溶液，即滤液C，取1mL滤液C，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统筛选唐古特虎耳草目标组分Fr3-3中自由基抑制剂；其中，所述在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用亲水色谱柱XION 250×4.6mm，5μm，检测波长为254nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；
步骤6，亲水高压制备柱制备：所述滤液C经亲水制备柱分离，经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中对应的色谱峰馏分Fr3-3-1，色谱峰馏分Fr3-3-1经减压干燥即得纯度大于95%的新的杜鹃素糖苷类-(-)-rhododendrin-4'-β-D-glucoside自由基抑制剂；其中，亲水高压制备柱制备的工作参数为：制备柱柱长250 mm、直径20 mm，亲水色谱柱固定相为5μm XION填料，流动相A为水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B洗脱，进样体积为4 mL，流速为19 mL/min。
3.根据权利要求2所述的唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的分离制备工艺，其特征在于，所述步骤3中，第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，5~28%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15m。
4.根据权利要求2所述的唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的分离制备工艺，其特征在于，所述步骤5中，第一台高效液相色谱仪采用的流动相A为0.2%甲酸-水溶液，流动相B为乙腈溶液，按照0~60min，100~75%B，流动相流速为1.0mL/min；第二台高效液相色谱仪所使用的DPPH溶液浓度为50μg/mL，流动相流速为0.5mL/min；反应环长度为15 m。
5.根据权利要求2所述的唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的分离制备工艺，其特征在于，所述步骤1、步骤2、步骤4和步骤6中，减压干燥的条件均为：真空度50~250 mbar，温度40~60℃。
6.根据权利要求2所述的唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂的分离制备工艺，其特征在于，步骤3所述的耐纯水C18反相色谱柱为耐纯水Reprosil C18反相色谱柱或耐纯水Megres C18反相色谱柱。
7.根据权利要求1所述的唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂在制备自由基抑制药物中的应用，其特征在于，其作为有效成分按药学上可接受的任何载体制成各类药用制剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110250449.3A CN113087749B (zh) | 2021-03-08 | 2021-03-08 | 唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110250449.3A CN113087749B (zh) | 2021-03-08 | 2021-03-08 | 唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113087749A CN113087749A (zh) | 2021-07-09 |
| CN113087749B true CN113087749B (zh) | 2023-03-10 |
Family
ID=76666776
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110250449.3A Active CN113087749B (zh) | 2021-03-08 | 2021-03-08 | 唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113087749B (zh) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111187159A (zh) * | 2020-01-15 | 2020-05-22 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 唐古特虎耳草中天然自由基清除剂的分离工艺及其应用 |
-
2021
- 2021-03-08 CN CN202110250449.3A patent/CN113087749B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111187159A (zh) * | 2020-01-15 | 2020-05-22 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 唐古特虎耳草中天然自由基清除剂的分离工艺及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Antioxidant Phenolic Glycosides from Moricandia arvensis;Hatem Braham et al.;《Journal of Natural Products》;第68卷(第4期);第517-522页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113087749A (zh) | 2021-07-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111187159B (zh) | 唐古特虎耳草中天然自由基清除剂的分离工艺及其应用 | |
| EP3896050B1 (en) | Method for preparing cannabidiol by means of high-speed countercurrent chromatography separation and purification | |
| CN102976909B (zh) | 一种从生姜中提取纯化6-姜酚的方法 | |
| CN111171042B (zh) | 黑虎耳草中天然自由基清除剂的分离制备工艺及其应用 | |
| CN101274953B (zh) | 从植物中提制科罗索酸的方法 | |
| CN105566414B (zh) | 从杨梅果肉中分离纯化四种黄酮糖苷的方法 | |
| CN110590882B (zh) | 一种从金花葵花中同时分离纯化6种黄酮化合物的方法 | |
| CN110526952B (zh) | 一种粗糙凤尾蕨中提取黄酮苷的制备方法 | |
| CN106496292A (zh) | 一种从栀子中同时制备6个环烯醚萜苷类成分的方法 | |
| CN113087749B (zh) | 唐古特虎耳草中一种新的杜鹃素糖苷类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 | |
| CN111675741A (zh) | 用制备液相法同时获得四种淫羊藿稀有黄酮的分离方法 | |
| CN108440619B (zh) | 山茱萸提取物制备马钱子苷的方法 | |
| CN113105514B (zh) | 唐古特虎耳草中一种新的没食子酰基类自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 | |
| CN113440547B (zh) | 采用大孔树脂串联动态轴向压缩柱分离纯化大蓟总苷的方法 | |
| CN111187244B (zh) | 一种从芹菜中提取芹菜素的新方法 | |
| CN113087607A (zh) | 山地虎耳草中新的二芳基壬烷类ⅰ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 | |
| CN111170945B (zh) | 黄蘑菇中天然抗氧化氨基酸衍生物的分离工艺及其应用 | |
| CN113105317A (zh) | 山地虎耳草中新的二芳基壬烷类ⅱ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 | |
| CN113072603B (zh) | 唐古特虎耳草中二芳基壬烷类ⅱ和ⅰ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 | |
| CN113087606B (zh) | 唐古特虎耳草中新的二芳基壬烷类ⅳ和ⅲ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 | |
| CN113087608B (zh) | 唐古特虎耳草中新的二芳基壬烷类ⅴ，ⅵ和ⅶ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用 | |
| CN113698442B (zh) | 一种瞿麦中tunicoside B的分离制备方法 | |
| CN111848357A (zh) | 一种超高液相色谱法制备高纯度大麻二酚的方法 | |
| CN114573539B (zh) | 一种从桑黄药材中制备化合物Phellibaumin D的方法 | |
| CN108383884B (zh) | 一种不稳定西红花苷的分离纯化方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |