CN113061534A - 一种中国被毛孢的菌株保藏方法 - Google Patents
一种中国被毛孢的菌株保藏方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113061534A CN113061534A CN202110197504.7A CN202110197504A CN113061534A CN 113061534 A CN113061534 A CN 113061534A CN 202110197504 A CN202110197504 A CN 202110197504A CN 113061534 A CN113061534 A CN 113061534A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preservation
- strain
- hirsutella sinensis
- colony
- preserving
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241001248610 Ophiocordyceps sinensis Species 0.000 title claims abstract description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 71
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 15
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 16
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 8
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 8
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 8
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 8
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 8
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 claims description 7
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 claims description 6
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims description 6
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 6
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 abstract description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- 241000382353 Pupa Species 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种中国被毛孢的菌株保藏方法。将中国被毛孢(Hirsutella sinensis)接种到保藏培养基上，培养使其长出菌丝体，然后于4‑18℃保藏。本发明以中国被毛孢长在保藏培养基上的菌丝体为材料，“原位”置于合适的低温条件下，满足一年期的保藏。其优点在于，所用的材料易得、无需消耗液氮、操作简便、低温条件容易实现、保藏期较长、保藏后菌株活力无明显减退。
Description
技术领域：
本发明属于食用菌栽培技术领域，具体涉及一种中国被毛孢的菌株保藏方法。
背景技术：
中国被毛孢(Hirsutellasinensis)被证实是我国传统名贵药用真菌冬虫夏草(Ophiocordycepssinensis)的无性体之一。中国被毛孢的菌丝体可作与其孢子一起，增加对蝙蝠蛾幼虫的感染力，促进僵虫形成，是目前实验室规模人工栽培冬虫夏草的辅助手段。另外，中国被毛孢含有与冬虫夏草相似的化学物质，名列我国《可用于保健食品的真菌菌种》中，可作为保健食品开发之用。在菌种使用过程中，菌种保藏是保证优良菌种可长期使用的重要手段。
菌种保藏的形式主要有低温、干燥、降低氧分压等形式，其中低温是最为常用的手段。虽然低温条件(不含液氮保藏)容易实现，但应用于食药用菌菌种储藏技术，还有以下问题需要解决：要针对不同菌种或菌株生理特性；要选取合适的组织或细胞；要设置合适的温度范围；要设置合适的保藏时长。其具体是指：食药用菌具有不同的温度耐受性，如不适当的低温对高温型食药用菌是一种冻害，甚至会杀死菌种或菌株。食药用菌菌丝体和孢子都可作为保藏材料，但它们有不同的低温适应能力，需具体实验验证。保藏所指的低温是个泛指温度范围，需因应不同的菌种菌株，还有其所选材料，验证合适的温度范围。最后还要确定保藏的时长，在保持菌种菌株活力的前体下，保藏时间越长则其技术越优。
发明内容：
本发明提供了一种适用于多个中国被毛孢菌株的、无需消耗液氮的、保藏时间长的中国被毛孢的菌株保藏方法。
本发明的中国被毛孢的菌株保藏方法，包括以下步骤：
将中国被毛孢(Hirsutella sinensis)接种到保藏培养基上，培养使其长出菌丝体，然后于4-18℃保藏。
优选，所述的保藏培养基，每升培养基包括：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g、蚕蛹粉10-20g、酵母浸出粉10-20g、琼脂20g，余量为水，pH 6.00-7.00；
将保藏培养基制成斜面，将中国被毛孢接种到保藏培养基斜面上，培养使其长出菌丝体，然后于4-18℃保藏。
优选，所述的将中国被毛孢接种到保藏培养基斜面上，培养使其长出菌丝体，是将中国被毛孢接种到保藏培养基斜面上，于18℃下避光培养约30d长出菌丝体，观察菌落形态，判断菌种是否有污染、菌落特征是否符合中国被毛孢形态，排除菌落畸形、生长缓慢的菌株，得保藏前菌株，将保藏前菌株于4-18℃保藏。
优选，所述的斜面是试管斜面。
进一步优选，将中国被毛孢接种到试管斜面上，于18℃下避光培养约30d长出菌丝体，观察菌落形态，判断菌种是否有污染、菌落特征是否符合中国被毛孢形态，排除菌落畸形、生长缓慢的菌株，得保藏前菌株，用封口膜将试管塞封好，装包装袋中，于4-18℃保藏。
优选，所述的包装袋是密封袋。
本发明的第二个目的是提供一种中国被毛孢的保藏培养基，每升培养基包括：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g、蚕蛹粉10-20g、酵母浸出粉10-20g、琼脂20g，余量为水，pH 6.00-7.00。
本发明以中国被毛孢长在保藏培养基上的菌丝体为材料，“原位”置于合适的低温条件下，满足一年期的保藏。其优点在于，所用的材料易得、无需消耗液氮、操作简便、低温条件容易实现、保藏期较长、保藏后菌株活力无明显减退。
附图说明：
图1是在4℃保藏前后各菌株的菌落外观(A：菌株Z4保藏前；B：菌株XG保藏前；C：菌株I15保藏前；D：菌株Z4保藏后；E：菌株XG保藏后；F：菌株I15保藏后)；
图2是在4℃保藏后各菌株继代的生长情况(A、D、G：菌株Z4；B、E、F：菌株XG；C、F、I：菌株I15)；
图3是在18℃保藏前后菌落外观(A：菌株Z4保藏前；B：菌株XG保藏前；C：菌株I15保藏前；D：菌株Z4保藏后；E：菌株XG保藏后；F：菌株I15保藏后)；
图4是在18℃保藏后各菌株继代的生长情况(A、D、G：菌株Z4；B、E、F：菌株XG；C、F、I：菌株I15)。
具体实施方式：
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1：
1、低温保藏温度4℃。
2、保藏培养基配方：马铃薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，蚕蛹粉15g，酵母浸出粉15g，琼脂20g，水1000mL，以1mol·L-1氢氧化钠溶液调节pH 6.50。具体配置方法是称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，在滤液中加入葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，蚕蛹粉15g，酵母浸出粉15g，琼脂20g，然后用水补足1000ml，混匀，以1mol·L-1氢氧化钠溶液调节pH 6.50。
3、保藏培养基斜面制作。采用试管，保藏培养基装量为试管高度1/4，灭菌，冷却后得保藏培养基斜面。
4、取三个不同来源的中国被毛孢菌株，菌株号为Z4、I15和XG，分别接种于灭菌的保藏培养基斜面上，于18℃下避光培养约30d，观察菌落形态，判断菌种是否有污染、菌落特征是否符合中国被毛孢形态，排除菌落畸形、生长缓慢的菌株，得保藏前菌株。
5、取保藏前菌株，使用封口膜将试管塞封好，取密封袋等干净干燥包装袋装入待保藏的试管菌株，然后置于4℃低温环境中保藏。保藏时间为365d。
6、从低温环境中取出保藏菌株，在25℃以下室温中进行正常继代操作，共继代三个培养皿，每个培养皿上接种三点，计算菌落形成比例。
7、保藏结果
从图1可见，4℃保藏365d后，各菌株菌落形态正常。从图2可见，经转接后，各菌株所有接种点都能重新形成菌落，菌落形成比例100％，表明保藏菌株保存了活力。
实施例2：
1、低温保藏温度18℃
2、保藏培养基配方：马铃薯200g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，蚕蛹粉15g，酵母浸出粉15g，琼脂20g，水1000mL，以1mol L-1氢氧化钠溶液调节pH 6.50。具体配置方法是称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，在滤液中加入葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，蚕蛹粉15g，酵母浸出粉15g，琼脂20g，然后用水补足1000ml，混匀，以1mol·L-1氢氧化钠溶液调节pH 6.50。
3、保藏培养基斜面制作。采用试管，保藏培养基装量为试管高度1/4，灭菌，冷却后得保藏培养基斜面。
4、取三个不同来源的中国被毛孢菌株，菌株号为Z4、I15和XG，分别接种于灭菌的保藏培养基斜面上，于18℃下避光培养约30d，观察菌落形态，判断菌种是否有污染、菌落特征是否符合中国被毛孢形态，排除菌落畸形、生长缓慢的菌株，得保藏前菌株。
5、取保藏前菌株，使用封口膜将试管塞封好，取密封袋等干净干燥包装袋装入待保藏的试管菌株，然后置于18℃范围内的低温环境中保藏。保藏时间为365d。
6、从低温环境中取出保藏菌株，在25℃以下室温中进行正常继代操作，共继代三个培养皿，每个培养皿上接种三点，计算菌落形成比例。
7、保藏结果
从图3可见，18℃保藏365d后，各菌落形态正常。由于18℃是中国被毛孢的生长适应温度，可见菌落直径还有一定程度扩大。从图4可见，经转接后，各菌株所有接种点都能重新形成菌落，菌落形成比例100％，表明保藏菌株保存了活力。
Claims (7)
1.一种中国被毛孢的菌株保藏方法，其特征在于，包括以下步骤：
将中国被毛孢(Hirsutella sinensis)接种到保藏培养基上，培养使其长出菌丝体，然后于4-18℃保藏。
2.根据权利要求1所述的菌株保藏方法，其特征在于，所述的保藏培养基，每升培养基包括：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g、蚕蛹粉10-20g、酵母浸出粉10-20g、琼脂20g，余量为水，pH 6.00-7.00；
将保藏培养基制成斜面，将中国被毛孢接种到保藏培养基斜面上，培养使其长出菌丝体，然后于4-18℃保藏。
3.根据权利要求2所述的菌株保藏方法，其特征在于，所述的将中国被毛孢接种到保藏培养基斜面上，培养使其长出菌丝体，是将中国被毛孢接种到保藏培养基斜面上，于18℃下避光培养30d长出菌丝体，观察菌落形态，判断菌种是否有污染、菌落特征是否符合中国被毛孢形态，排除菌落畸形、生长缓慢的菌株，得保藏前菌株，将保藏前菌株于4-18℃保藏。
4.根据权利要求2所述的菌株保藏方法，其特征在于，所述的斜面是试管斜面。
5.根据权利要求4所述的菌株保藏方法，其特征在于，将中国被毛孢接种到试管斜面上，于18℃下避光培养约30d长出菌丝体，观察菌落形态，判断菌种是否有污染、菌落特征是否符合中国被毛孢形态，排除菌落畸形、生长缓慢的菌株，得保藏前菌株，用封口膜将试管塞封好，装入包装袋中，于4-18℃保藏。
6.根据权利要求5所述的菌株保藏方法，其特征在于，所述的包装袋是密封袋。
7.一种中国被毛孢的保藏培养基，其特征在于，每升培养基包括：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g、蚕蛹粉10-20g、酵母浸出粉10-20g、琼脂20g，余量为水，pH6.00-7.00。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110197504.7A CN113061534A (zh) | 2021-02-22 | 2021-02-22 | 一种中国被毛孢的菌株保藏方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110197504.7A CN113061534A (zh) | 2021-02-22 | 2021-02-22 | 一种中国被毛孢的菌株保藏方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113061534A true CN113061534A (zh) | 2021-07-02 |
Family
ID=76558832
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110197504.7A Pending CN113061534A (zh) | 2021-02-22 | 2021-02-22 | 一种中国被毛孢的菌株保藏方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113061534A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103483038A (zh) * | 2013-09-05 | 2014-01-01 | 东方中科生命科学有限责任公司 | 一种冬虫夏草培养基的制备、培养方法及应用 |
| CN103881912A (zh) * | 2013-12-20 | 2014-06-25 | 云南大学 | 一种中国被毛孢的长期保藏方法 |
| CN106010978A (zh) * | 2016-05-25 | 2016-10-12 | 浙江农林大学 | 冬虫夏草无性型中国被毛孢纯菌种的培养方法 |
| CN108865904A (zh) * | 2018-08-30 | 2018-11-23 | 云南大学 | 一种中国被毛孢扩大培养基及其培养的中国被毛孢和培养方法 |
| CN109880747A (zh) * | 2019-02-01 | 2019-06-14 | 安徽农业大学 | 一种成分与天然冬虫夏草一致的中国被毛孢人工培养物的制备方法 |
| CN110819545A (zh) * | 2019-12-19 | 2020-02-21 | 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） | 一种中国被毛孢的液体培养基及其制作方法 |
-
2021
- 2021-02-22 CN CN202110197504.7A patent/CN113061534A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103483038A (zh) * | 2013-09-05 | 2014-01-01 | 东方中科生命科学有限责任公司 | 一种冬虫夏草培养基的制备、培养方法及应用 |
| CN103881912A (zh) * | 2013-12-20 | 2014-06-25 | 云南大学 | 一种中国被毛孢的长期保藏方法 |
| CN106010978A (zh) * | 2016-05-25 | 2016-10-12 | 浙江农林大学 | 冬虫夏草无性型中国被毛孢纯菌种的培养方法 |
| CN108865904A (zh) * | 2018-08-30 | 2018-11-23 | 云南大学 | 一种中国被毛孢扩大培养基及其培养的中国被毛孢和培养方法 |
| CN109880747A (zh) * | 2019-02-01 | 2019-06-14 | 安徽农业大学 | 一种成分与天然冬虫夏草一致的中国被毛孢人工培养物的制备方法 |
| CN110819545A (zh) * | 2019-12-19 | 2020-02-21 | 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） | 一种中国被毛孢的液体培养基及其制作方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 何淑玲: "《高寒药用植物栽培学》", 31 May 2013 * |
| 刘晓龙 等: "《平菇与滑菇栽培400问》", 31 March 2010 * |
| 杨曙湘 等: "《食用菌栽培技术》", 31 May 1997 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106472104A (zh) | 一种桑黄栽培的制作方法 | |
| CN101816256A (zh) | 桑黄的菌种培养及桑黄的栽培方法 | |
| WO2015180520A1 (zh) | 一种高产虫草酸蛹虫草的培养方法 | |
| TW200835791A (en) | Method for artificially propagating fruit body stroma of Antrodia Camphorate | |
| CN103918472B (zh) | 牛樟芝的椴木栽培法 | |
| CN104686196B (zh) | 一种通过阴干子实体保存和分离羊肚菌菌种的方法 | |
| CN112210501B (zh) | 一株红汁乳菇(Lactarius hatsudake)JH5及其应用 | |
| CN102845225A (zh) | 海鲜菇液体菌种发酵工艺方法 | |
| CN103843583A (zh) | 绿色北虫草产业化生产方法 | |
| CN112021068B (zh) | 一种金耳子实体菌种的复壮方法 | |
| CN107858292A (zh) | 一种牛樟芝菌株及其保藏方法 | |
| CN102845218A (zh) | 一种冬虫夏草菌中国被毛孢的原生态分离法 | |
| CN110301293A (zh) | 一种海鲜菇的培养料及培养方法 | |
| CN102318545B (zh) | 一种猴头菇水培方法 | |
| CN107916237B (zh) | 一株发光杆菌Hb1029及其应用 | |
| CN106635829B (zh) | 一种桑黄颗粒菌种的制备方法 | |
| CN102523927A (zh) | 自然环境中培养蛹虫草的方法 | |
| CN113061534A (zh) | 一种中国被毛孢的菌株保藏方法 | |
| CN103843580A (zh) | 一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体及其制备方法 | |
| JPH0947149A (ja) | 冬虫夏草の子実体人工栽培方法 | |
| CN108713449A (zh) | 一种茯苓的栽培方法 | |
| CN107267424B (zh) | 一种微生物杀虫剂的制备方法 | |
| Komala et al. | Shelf life studies of different formulations of Trichoderma harzianum | |
| CN105219651A (zh) | 一种提高水稻抗干旱、盐害胁迫能力的内生烟曲霉及其应用 | |
| CN115380764B (zh) | 一株脆木耳菌及其脆木耳的驯化栽培方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210702 |