CN103483038A - 一种冬虫夏草培养基的制备、培养方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种冬虫夏草固体培养基及其培养方法,解决冬虫夏草固体培养长势慢、周期长的问题。固体培养基成分主要由玉米粉、马铃薯、胰蛋白胨、酵母浸出粉、蚕蛹粉、氯化钠、硫酸镁,磷酸二氢钾、维生素、琼脂粉、水分组成。本发明提供的冬虫夏草固体培养基及其培养方法,能够促进冬虫夏草固体培养的菌丝生长、缩短培养时间,可应用于发酵工厂中冬虫夏草菌种的保存、母种制备、菌种活化、菌种复壮等步骤。
Description
技术领域
本发明属于一种冬虫夏草培养基的制备方法、培养方法及应用。
背景技术
冬虫夏草在我国传统中医药中用于补肺益肾、化痰止咳,在《本草从新》和《中华人民共和国药典》中都有记录。据报道冬虫夏草具有抗肿瘤、抗疲劳、抗氧化、提高免疫力、增强肾功能等功效,已经成为当前中药研究和开发的一大热点。
冬虫夏草固体培养是冬虫夏草人工培养和发酵的基础,可以用于冬虫夏草菌种的分离、保存等步骤,也可以用于冬虫夏草液体深层发酵工业生产中的母种制备、菌种复壮等步骤。目前科研工作者发表了一些相关专利和论文,公开了一些冬虫夏草固体培养基和培养方法,但是普遍存在培养时间长、菌丝长势慢等问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种冬虫夏草培养基的制备方法,菌丝体长势好,培养时间短,可应用于发酵工厂中冬虫夏草的母种制备、菌种保存、菌种活化、菌种复壮等步骤。
本发明提供的一种冬虫夏草培养基的制备方法,其步骤如下:
1、将1cm见方的马铃薯丁用水煎煮,铃薯丁与水的重量比为1:5;时间为水沸后30分钟,呈粘稠状的马铃薯汤;
2、取重量比例700-800马铃薯汤,然后按重量比例加入下列原料:
10.0-25.0玉米粉、50.0-100.0马铃薯、2.0-5.0胰蛋白胨、2.0-5.0酵母浸出粉、5.0-15.0蚕蛹粉、0.1-0.5氯化钠、0.2-0.6硫酸镁、0.2-0.6磷酸二氢钾、0.5-1.0维生素B1;
在容器中加热至100℃,使物料溶解、混匀;加水至总重量比例为1000;121℃下0.15MPa压力下灭菌30-50分钟,冷却使温度降至室温即成冬虫夏草液体培养基。
在上述培养基的原料中加入重量比例为10.0-20.0的琼脂粉,在容器中加热至100℃,使物料溶解、混匀;加水至总重量比例为1000;121℃下0.15MPa压力下灭菌30-50分钟,冷却使温度降至室温即凝固成冬虫夏草固体培养基。
本发明提供的利用上述冬虫夏草培养基培养方法为:取冬虫夏草组织或者菌丝,接入上述冬虫夏草培养基中,放入光照培养箱中,光照设置为12小时光照加12小时黑暗间隔培养,模拟天然光照环境,培养温度10-20℃。
本发明提供的冬虫夏草培养基培养方法应用,可应用于发酵工厂中冬虫夏草的母种制备、菌种保存、菌种活化、菌种复壮。
本发明与传统的培养基和培养方法相比,菌丝体长势好,培养时间短,能应用于发酵工厂中冬虫夏草的母种制备、菌种保存、菌种活化、菌种复壮等步骤。
具体实施方式
一、制备冬虫夏草液体培养基,其步骤如下:
1、将1cm见方的马铃薯丁用水煎煮,马铃薯丁与水的重量比为1:5;时间为水沸后30分钟,呈粘稠状的马铃薯汤;
2、取700-800g马铃薯汤,然后加入下列原料:
20.0g玉米粉、3.0g胰蛋白胨、3.0g酵母浸出粉、10.0g蚕蛹粉、0.3g氯化钠、0.4g硫酸镁,0.3g磷酸二氢钾、0.8g维生素B1。
在容器中加热至100℃,使物料溶解、混匀;加水至1000克;121℃下0.15MPa压力下灭菌30-50分钟,冷却使温度降至室温即成冬虫夏草液体培养基。
二、、制备冬虫夏草固体培养基,其步骤如下:
1、将1cm见方的马铃薯丁用水煎煮,铃薯丁与水的重量比为1:5;时间为水沸后30分钟,呈粘稠状的马铃薯汤;
2、取700-800g马铃薯汤,然后加入下列原料:
20.0g玉米粉、3.0g胰蛋白胨、3.0g酵母浸出粉、10.0g蚕蛹粉、0.3g氯化钠、0.4g硫酸镁,0.3g磷酸二氢钾、0.8g维生素B1、10.0g琼脂粉;
在容器中加热至100℃,使物料溶解、混匀;加水至1000克;121℃下0.15MPa压力下灭菌30-50分钟,冷却使温度降至室温即凝固成冬虫夏草固体培养基。
实施例1. 应用于冬虫夏草发酵工厂中的母种制备
从冬虫夏草产地采收新鲜冬虫夏草(拉丁学名是Cordyceps sinensis,也写作Ophiocordyceps sinensis),将冬虫夏草虫子的致密组织接入到本发明的固体培养基中,放入光照培养箱中,根据冬虫夏草在天然生长条件下的实际光照情况,设置为持续光照12小时后持续黑暗12小时,如此反复,培养温度10-20℃。培养30天,冬虫夏草菌种的直径可以达到4-6厘米。
实施例2. 应用于冬虫夏草发酵工厂中的菌种保存
在冬虫夏草发酵工厂中,本发明所述的冬虫夏草固体培养基可应用于冬虫夏草菌种保存,用接种针将冬虫夏草菌种转接到本发明的固体培养基中,根据需要,在完全黑暗环境下培养,培养40天时,冬虫夏草菌种的直径可以达到3-5厘米,培养基仍然具有很强的保水性,可继续保存或转接。
实施例3. 应用于冬虫夏草发酵工厂中的菌种复壮
在冬虫夏草发酵工厂中,菌种退化是个严重的问题,菌种复壮是克服这个问题的有效手段。本发明所述的冬虫夏草固体培养基及培养方法,可用于菌种复壮,培养方法同实施例1,转接3-5世代后,即可实现冬虫夏草长势很好,复壮效果显著。
Claims (3)
1.一种冬虫夏草培养基的制备方法,其特征是步骤如下:
(1)、将1cm见方的马铃薯丁用水煎煮,铃薯丁与水的重量比例为1:5;时间为水沸后30分钟,呈粘稠状的马铃薯汤;
(2)、取重量比例700-800马铃薯汤,然后按重量比例加入下列原料:
10.0-25.0玉米粉、2.0-5.0胰蛋白胨、2.0-5.0酵母浸出粉、5.0-15.0蚕蛹粉、0.1-0.5氯化钠、0.2-0.6硫酸镁、0.2-0.6磷酸二氢钾、0.5-1.0维生素B1;
在容器中加热至100℃,使物料溶解、混匀;加水至总重量比例为1000;121℃下0.15MPa压力下灭菌30-50分钟,冷却使温度降至室温即成冬虫夏草液体培养基。
2.根据权利要求1所述的冬虫夏草培养基的制备方法,其特征是在上述培养基的原料中加入重量比例为10.0-20.0的琼脂粉,在容器中加热至100℃,使物料溶解、混匀;加水至总重量比例为1000;121℃下0.15MPa压力下灭菌30-50分钟,冷却使温度降至室温即凝固成冬虫夏草固体培养基。
3.一种如权利要求1所述的冬虫夏草培养基制备方法进行冬虫夏草的培养方法,其特征是:取冬虫夏草组织或者菌丝,接入上述冬虫夏草培养基中,放入光照培养箱中,光照设置为12小时光照加12小时黑暗间隔培养,模拟天然光照环境,培养温度10-20℃。
4.一种如权利要求1所述的冬虫夏草培养基培养方法应用,其特征是:可应用于发酵工厂中冬虫夏草的母种制备、菌种保存、菌种活化、菌种复壮。
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