CN112998171A - 复方多肽养生饮及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种复方多肽养生饮及其制备方法，制备方法包括：S1、利用鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液；S2、利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液；S3、利用熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加工形成中药组合物水提液；S4、将胶原活性肽溶液、美藤果活性肽溶液、中药组合物水提液和蜂蜜加入纯净水中形成混合液；S5、将混合液胶磨、灌装、灭菌后制得复方多肽养生饮。根据本发明实施例的复方多肽养生饮的制备方法，通过动物肽和植物肽的复配，增强了营养特性和功能特性，具有提升人体的抵抗力和延缓人体衰老的优点。此外，复方多肽养生饮中辅以蜂蜜及其它中药提取物，增强了其功能特性，并改善了动物肽原有的不良风味。

Description

复方多肽养生饮及其制备方法
技术领域
本发明涉及食用品技术领域，尤其是涉及一种复方多肽养生饮及其制备方法。
背景技术
随着现代经济的飞速发展，人们生活压力的增加和饮食起居的不规律导致了越来越多人处于亚健康状态，从而引起免疫力下降等一系列问题。而现代医学研究表明，人类免疫力的下降，是与人类衰老过程相伴而生的。因此，通过提高免疫力来延缓衰老是人们不懈追求的研究内容。
发明内容
本发明提出了一种复方多肽养生饮的制备方法，利用所述制备方法制得的复方多肽养生饮具有可以提升人体的抵抗力和延缓衰老的优点。
本发明还提出了一种复方多肽养生饮，所述复方多肽养生饮根据上述制备方法加工而成。
根据本发明实施例的复方多肽养生饮的制备方法，包括：S1、利用鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液；S2、利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液；S3、利用熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加工形成中药组合物水提液；S4、将所述胶原活性肽溶液、所述美藤果活性肽溶液、所述中药组合物水提液和蜂蜜加入纯净水中形成混合液；S5、将所述混合液胶磨、灌装、灭菌后制得复方多肽养生饮。
根据本发明实施例的复方多肽养生饮的制备方法，利用鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液富含鳘鱼胶和黄鱼胶，二者均为动物肽，氨基酸组成更为丰富，也更易吸收，且鳘鱼胶和黄鱼胶具有提高免疫功能和抗氧化、抗衰老的作用，而利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液富含美藤果肽，美藤果肽针对抗衰老、增加免疫力的功效显著，而且美藤果肽为植物肽，在本发明实施例中通过动物肽和植物肽的复配，增强了营养特性和功能特性，具有提升人体的抵抗力和延缓人体衰老的优点。此外，复方多肽养生饮中辅以蜂蜜及其它中药提取物，增强了其功能特性，并改善了动物肽原有的不良风味。
在本发明的一些实施例中，所述S1包括：将鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔洗净、晒干后，放入粉碎机粉碎，并过筛至40目；取等量黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔粉末并加入5倍量纯净水，在60℃温度下磁力搅拌处理48h，重复2-3次后制得鳘鱼和黄鱼胶原蛋白溶液，冷却至常温；按照2000-3000U/g和6000-9000U/g分别向所述胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，常温下搅拌酶解6h，以形成胶原蛋白酶解液，然后将所述胶原蛋白酶解液在85℃的水浴环境中灭酶15min，以制得第一溶液；将所述第一溶液放置于4℃冰箱静置2h后过滤、离心取上清液，以制得第二溶液；利用葡聚糖凝胶柱收集所述第二溶液中的分子量小于1000Da的组分，以制得所述胶原活性肽溶液。
在本发明的一些实施例中，所述S2制备过程包括：将美藤果粕粉碎后过筛至40目，加入5倍体积的异丙醇进行脱脂处理，抽滤并低温烘干滤渣即得脱脂美藤果粕粉末；将所述脱脂美藤果粕粉末与纯净水按照1:10的料液比，在50℃下超声处理20-30min，按照5％的添加量加入酶活为3000-7000U/g的胰蛋白酶，调节pH至9，在50℃下酶解4h后，在85℃的水浴环境中灭酶15min以制得美藤果多肽溶液；将所述美藤果多肽溶液冷却、过滤、离心取上清液，以制得第三溶液；将所述第三溶液超滤分离，收集分子量小于3000Da的组分，以制得第四溶液；利用葡聚糖凝胶柱分离收集所述第四溶液中分子量小于1000Da的组分，以制得所述美藤果多肽溶液。
在本发明的一些实施例中，所述S3包括：选择经过炮制的熟地黄和红参切成薄片，将洗净晒干的黄芪切成0.5cm小段，挑选饱满的红枣洗净去核，选择枸杞洗净晾干；将所述熟地黄、所述红参、所述黄芪、所述红枣和所述枸杞加入5倍体积的纯净水，加热回流浸提1h，过滤得到浸提液和中药渣；将中药渣加入3倍体积的纯净水，减压回流提取浸提液2-3次，将所有的浸提液汇总后旋蒸浓缩至原体积的1/5，以制得所述中药组合物水提液。
在本发明的一些实施例中，所述S4包括：所述胶原活性肽溶液与所述混合液的体积比为0.1-0.2，所述美藤果活性肽溶液与所述混合液的体积比为0.15-0.25，所述中药组合物水提液与所述混合液的体积比为0.05-0.15，所述蜂蜜的质量与所述混合液的体积比值范围为0.01g/L-0.05g/L。
在本发明的一些实施例中，所述S5包括：均匀搅拌所述混合液并用胶体磨胶磨2-3次，在121℃的温度下湿热灭菌15min后制成所述复方多肽养生饮。
根据本发明实施例的复方多肽养生饮，所述复方多肽养生饮为上述复方多肽养生饮的制备方法加工而成。
根据本发明实施例的复方多肽养生饮，利用鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液富含鳘鱼胶和黄鱼胶，二者均为动物肽，氨基酸组成更为丰富，也更易吸收，且鳘鱼胶和黄鱼胶具有提高免疫功能和抗氧化、抗衰老的作用，而利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液富含美藤果肽，美藤果肽针对抗衰老、增加免疫力的功效显著，而且美藤果肽为植物肽，在本发明实施例中通过动物肽和植物肽的复配，增强了营养特性和功能特性，具有提升人体的抵抗力和延缓人体衰老的优点。此外，复方多肽养生饮中辅以蜂蜜及其它中药提取物，增强了其功能特性，并改善了动物肽原有的不良风味。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
图1是根据本发明实施例的复方多肽养生饮的制备方法的流程图；
图2是根据本发明实施例制备的复方多肽养生饮和对照例复方多肽养生饮对秀丽隐杆线虫寿命的影响；
图3是根据本发明实施例制备的复方多肽养生饮和对照例复方多肽养生饮对秀丽隐杆线虫运动能力的影响；
图4是根据本发明实施例制备的复方多肽养生饮和对照例复方多肽养生饮对秀丽隐杆线虫ROS积累量的影响；
图5是根据本发明实施例制备的复方多肽养生饮和对照例复方多肽养生饮对秀丽隐杆线虫体内SOD酶活力的影响；
图6是根据本发明实施例制备的复方多肽养生饮和对照例复方多肽养生饮对秀丽隐杆线虫体内CAT酶活力的影响。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
下文的公开提供了许多不同的实施例或例子用来实现本发明的不同结构。为了简化本发明的公开，下文中对特定例子的部件和设置进行描述。当然，它们仅仅为示例，并且目的不在于限制本发明。此外，本发明可以在不同例子中重复参考数字和/或字母。这种重复是为了简化和清楚的目的，其本身不指示所讨论各种实施例和/或设置之间的关系。此外，本发明提供了的各种特定的工艺和材料的例子，但是本领域普通技术人员可以意识到其他工艺的可应用于性和/或其他材料的使用。
下面参考附图描述根据本发明实施例的复方多肽养生饮的制备方法。
如图1所示，根据本发明实施例的复方多肽养生饮的制备方法，包括：步骤S1、步骤S2、步骤S3、步骤S4和步骤S5。
具体地，步骤S1为：利用鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液。可以理解的是，鳘鱼胶来源于海洋鱼类鳘鱼，而黄鱼胶来源于黄花鱼。二者营养成分种类几乎相似。研究表明，衰老伴随着记忆力、免疫力的下降和骨骼功能的减退。鳘鱼胶中胶原蛋白含量较高，对抗皮肤衰老、增强记忆力和人体抗病能力的效果特别出色，而黄鱼胶中富含丰富的微量元素，活血益气，补钙壮骨效果极佳。利用黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔加工而成的胶原活性肽溶液富含黄鱼胶和鳘鱼胶，氨基酸组成丰富，小分子量组分更易吸收。特别地，黄鱼胶微量元素丰富，而鳘鱼胶胶原蛋白含量丰富，二者均可提高人体免疫功能，抗氧化及延缓皮肤衰老。
步骤S2为：利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液。利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液富含美藤果肽，美藤果肽针对抗衰老、增加免疫力的功效显著，而且美藤果肽为植物肽，在本发明实施例中通过动物肽和植物肽的复配，增强了营养特性和功能特性，具有提升人体的抵抗力和延缓人体衰老的优点。
需要说明的是，美藤果(Plukenetia volubilis Linneo)又称为印加果、南美油藤、星油藤等，为大戟科藤本植物、多年生油料作物。原产于南美洲秘鲁亚马逊河流域雨林，2006年，由中国科学院西双版纳热带植物园从秘鲁引种成功。2013年美藤果油正式被批准为新资源食品。此外，美藤果的蛋白含量仅次于大豆，营养丰富。研究表明植物多肽具有显著的抗疲劳、抗氧化、抗高血压等作用，但豆类和花生因存在一定的过敏性，推广受限。而美藤果肽因其较好的免疫活性及其它生物学活性有望成为优选的植物多肽替代源。
步骤S3为：利用熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加工形成中药组合物水提液。熟地黄，性甘微温，入肝、肾经。滋阴补血，大补血虚不足，通血脉，益气力。现代研究表明，熟地黄能够延缓小鼠衰老、具有补血作用及改善甲亢性阴虚。而红参、黄芪、红枣和枸杞也具补气益血的功效。同时又属于药食同源的食品原料，安全性和生物学活性俱佳。
步骤S4为：将胶原活性肽溶液、美藤果活性肽溶液、中药组合物水提液和蜂蜜加入纯净水中形成混合液。复方多肽养生饮中辅以蜂蜜及其它中药提取物，增强了其功能特性，并改善了动物肽原有的不良风味。蜂蜜可调节甜味，且含有多种营养成分，由于主要是葡萄糖和果糖成分而更易被吸收，与枸杞搭配更是增强延缓衰老的效果，因此可用作天然甜味剂，用于改善复方多肽养生饮的风味。
步骤S5为：将混合液胶磨、灌装、灭菌后制得复方多肽养生饮。可以理解的是，经过灭菌处理后可以提升食用的安全性。在本发明的一个示例中，在本发明的一些实施例中，步骤S5包括：均匀搅拌混合液并用胶体磨胶磨2-3次，在121℃的温度下湿热灭菌15min后制成复方多肽养生饮。
具体地，在本发明的一个具体的示例中，复方多肽养生饮的制备方法包括：
步骤一：利用鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液；
步骤二：利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液
步骤三：利用熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加工形成中药组合物水提液
步骤四：将胶原活性肽溶液、美藤果活性肽溶液、中药组合物水提液和蜂蜜加入纯净水中形成混合液
步骤五：均匀搅拌混合液并用胶体磨胶磨2-3次，在121℃的温度下湿热灭菌15min后制成复方多肽养生饮。
根据本发明实施例的复方多肽养生饮的制备方法，利用黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔加工而成的胶原活性肽溶液富含黄鱼胶和鳘鱼胶，氨基酸组成丰富，小分子量组分更易吸收。特别地，黄鱼胶微量元素丰富，而鳘鱼胶胶原蛋白含量丰富，二者均可提高人体免疫功能，抗氧化及延缓皮肤衰老。而利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液富含美藤果肽，美藤果肽针对抗衰老、增加免疫力的功效显著，而且美藤果肽为植物肽，在本发明实施例中通过动物肽和植物肽的复配，增强了营养特性和功能特性，具有提升人体的抵抗力和延缓人体衰老的优点。此外，复方多肽养生饮中辅以蜂蜜及其它中药提取物，增强了其功能特性，并改善了动物肽原有的不良风味。
在本发明的一些实施例中，如图1所示，S1包括：将鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔洗净、晒干后，放入粉碎机粉碎，并过筛至40目；取等量黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔粉末并加入5倍量纯净水，在60℃温度下磁力搅拌处理48h，重复2-3次后制得鳘鱼和黄鱼胶原蛋白溶液，冷却至常温；按照2000-3000U/g和6000-9000U/g分别向胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，常温下搅拌酶解6h，以形成胶原蛋白酶解液，然后将胶原蛋白酶解液在85℃的水浴环境中灭酶15min，以制得第一溶液；将第一溶液放置于4℃冰箱静置2h后过滤、离心取上清液，以制得第二溶液；利用葡聚糖凝胶柱收集第二溶液中的分子量小于1000Da的组分，以制得胶原活性肽溶液。
可以理解的是，鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔胶原蛋白含量丰富，60℃长时间磁力搅拌，有利于水溶性胶原蛋白的充分溶出，而胶原蛋白属于高分子生物活性物质，高分子生物活性物质进一步通过中性蛋白酶和碱性蛋白酶可以制造出易于被人体吸收的小分子肽，从而进一步提升复方多肽养生饮的增加免疫力的功效。其中，取等量鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔粉末并加入5倍量纯净水，可以理解为，纯净水的体积为鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔体积的5倍。
其中，“按照2000-3000U/g和6000-9000U/g分别向胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶”。可以理解的是，可以向胶原蛋白溶液中添加酶活为2000-3000U/g的中性蛋白酶，以及向胶原蛋白溶液中添加酶活为6000-9000U/g的碱性蛋白酶。具体地，在本发明的一些实施例中，中性蛋白酶的酶活可以为2000U/g、2200U/g、2400U/g、2600U/g、2800U/g或3000U/g。碱性蛋白酶的酶活可以为6000U/g、6500U/g、7000U/g、7500U/g、8000U/g、8500U/g或9000U/g
例如，在本发明的示例一中，S1的加工过程包括：
a1：将鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔洗净、晒干；
a2：放入粉碎机粉碎，并过筛至40目；
a3：取等量的黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔粉末并加入5倍量纯净水，在60℃温度下磁力搅拌处理48h，重复2-3次后制得鳘鱼和黄鱼胶原蛋白溶液，冷却至常温；
a4：按照2000U/g和6000U/g分别向胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，常温下搅拌酶解6h，以形成胶原蛋白酶解液，然后将胶原蛋白酶解液在85℃的水浴环境中灭酶15min，以制得第一溶液；
a5：将第一溶液放置于4℃冰箱静置2h后过滤、离心取上清液，以制得第二溶液；
a6：利用葡聚糖凝胶柱G15收集第二溶液中的分子量小于1000Da的组分，以制得胶原活性肽溶液。
在本发明的实施例2中，本实施例与实施例1的步骤大致相同，不同点仅在于步骤a4，在发明的实施例2中，步骤a4为：按照2500U/g和7500U/g分别向胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，常温下搅拌酶解6h，以形成胶原蛋白酶解液，然后将胶原蛋白酶解液在85℃的水浴环境中灭酶15min，以制得第一溶液。
在本发明的实施例3中，本实施例与实施例1的步骤大致相同，不同点仅在于步骤a4，在发明的实施例2中，步骤a4为：按照3000U/g和9000U/g分别向胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，常温下搅拌酶解6h，以形成胶原蛋白酶解液，然后将胶原蛋白酶解液在85℃的水浴环境中灭酶15min，以制得第一溶液。
在本发明的一些实施例中，如图1所示，S2制备过程包括：将美藤果粕粉碎后过筛至40目，加入5倍体积的异丙醇进行脱脂处理，抽滤并低温烘干滤渣即得脱脂美藤果粕粉末；将脱脂美藤果粕粉末与纯净水按照1:10的料液比，在50℃下超声处理20-30min，按照5％的添加量加入酶活为3000-7000U/g的胰蛋白酶，调节pH至9，在50℃下酶解4h后，在85℃的水浴环境中灭酶15min以制得美藤果多肽溶液；将美藤果多肽溶液冷却、过滤、离心取上清液，以制得第三溶液；将第三溶液超滤分离，收集分子量小于3000Da的组分，以制得第四溶液；利用葡聚糖凝胶柱分离收集第四溶液中分子量小于1000Da的组分，以制得美藤果多肽溶液。
其中，按照5％的添加量加入酶活为3000-7000U/g的胰蛋白酶。可以理解的是，胰蛋白酶的添加量与脱脂美藤果粕粉末和纯净水的混合液的体积比为5％。具体地，胰蛋白酶的酶活可以为3000U/g、4000U/g、5000U/g、6000U/g或7000U/g。
例如，在本发明的示例一中，S2的加工过程包括：
b1：将美藤果粕粉碎后过筛至40目，加入5倍体积的异丙醇进行脱脂处理，抽滤并低温烘干滤渣即得脱脂美藤果粕粉末；
b2：将脱脂美藤果粕粉末与纯净水按照1:10的料液比，在50℃下超声处理20-30min，按照5％的添加量加入酶活为3000U/g的胰蛋白酶，调节pH至9，在50℃下酶解4h后，在85℃的水浴环境中灭酶15min以制得美藤果多肽溶液；
b3：将美藤果多肽溶液冷却、过滤、离心取上清液，以制得第三溶液；
b4：将第三溶液超滤分离，收集分子量小于3000Da的组分，以制得第四溶液；
b5：利用葡聚糖凝胶柱分离收集第四溶液中分子量小于1000Da的组分，以制得美藤果多肽溶液。
在本发明的实施例2中，本实施例与实施例1的步骤大致相同，不同点仅在于步骤b2，在发明的实施例2中，步骤b2为：将脱脂美藤果粕粉末与纯净水按照1:10的料液比，在50℃下超声处理20-30min，按照5％的添加量加入酶活为5000U/g的胰蛋白酶，调节pH至9，在50℃下酶解4h后，在85℃的水浴环境中灭酶15min以制得美藤果多肽溶液。
在本发明的实施例3中，本实施例与实施例1的步骤大致相同，不同点仅在于步骤b2，在发明的实施例2中，步骤b2为：将脱脂美藤果粕粉末与纯净水按照1:10的料液比，在50℃下超声处理20-30min，按照5％的添加量加入酶活为7000U/g的胰蛋白酶，调节pH至9，在50℃下酶解4h后，在85℃的水浴环境中灭酶15min以制得美藤果多肽溶液。
在本发明的一些实施例中，如图1所示，S3包括：选择经过炮制的熟地黄和红参切成薄片，将洗净晒干的黄芪切成0.5cm小段，挑选饱满的红枣洗净去核，选择枸杞洗净晾干；将熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加入5倍体积的纯净水，加热回流浸提1h，过滤得到浸提液和中药渣；将中药渣加入3倍体积的纯净水，减压回流提取浸提液2-3次，将所有的浸提液汇总后旋蒸浓缩至原体积的1/5，以制得中药组合物水提液。
例如，在本发明的示例中，S3的加工过程包括：
c1：选择经过炮制的熟地黄和红参切成薄片，将洗净晒干的黄芪切成0.5cm小段，挑选饱满的红枣洗净去核，选择枸杞洗净晾干；
c2：将熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加入5倍体积的纯净水，加热回流浸提1h，过滤得到浸提液和中药渣；
c3：将中药渣加入3倍体积的纯净水，减压回流提取浸提液2-3次，每次提取1h，然后将所有的浸提液汇总后旋蒸浓缩至原体积的1/5，以制得中药组合物水提液。
在本发明的一些实施例中，S4包括：胶原活性肽溶液与混合液的体积比为0.1-0.2，美藤果活性肽溶液与混合液的体积比为0.15-0.25，中药组合物水提液与混合液的体积比为0.05-0.15，蜂蜜的质量与混合液的体积比值范围为0.01g/L-0.05g/L。
具体地，胶原活性肽溶液与混合液的体积比可以为0.1、0.12、0.14、0.16、0.18或0.2。美藤果活性肽溶液与混合液的体积比可以为0.15、0.17、0.19、0.21、0.23或0.25。中药组合物水提液与混合液的体积比可以为0.05、0.07、0.09、0.11、0.13或0.15。蜂蜜的质量与混合液的体积比值范围为0.01g/L、0.02g/L、0.03g/L、0.04g/L或0.05g/L。
例如，在本发明的实施例1中，加工成的混合液的体积为1L，其中，胶原活性肽溶液的体积为200mL，美藤果活性肽溶液的体积为150mL，中药组合物水提液的体积为100mL，蜂蜜的质量为40g。
在本发明的实施例2中，加工成的混合液的体积为1L，其中，胶原活性肽溶液的体积为150mL，美藤果活性肽溶液的体积为200mL，中药组合物水提液的体积为150mL，蜂蜜的质量为30g。
在本发明的实施例3中，加工成的混合液的体积为1L，其中，胶原活性肽溶液的体积为100mL，美藤果活性肽溶液的体积为250mL，中药组合物水提液的体积为50mL，蜂蜜的质量为50g。
下面描述根据本发明实施例的复方多肽养生饮。
根据本发明实施例的复方多肽养生饮，复方多肽养生饮为上述复方多肽养生饮的制备方法加工而成。
具体地，在本发明的实施例1中，复方多肽养生饮的制备方法为：
步骤一：利用黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液，具体包括：
a1：将鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔洗净、晒干；
a2：放入粉碎机粉碎，并过筛至40目；
a3：取等量的黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔粉末并加入5倍量纯净水，在60℃温度下磁力搅拌处理48h，重复2-3次后制得鳘鱼和黄鱼胶原蛋白溶液，冷却至常温；
a4：按照2000U/g和6000U/g分别向胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，常温下搅拌酶解6h，以形成胶原蛋白酶解液，然后将胶原蛋白酶解液在85℃的水浴环境中灭酶15min，以制得第一溶液；
a5：将第一溶液放置于4℃冰箱静置2h后过滤、离心取上清液，以制得第二溶液；
a6：利用葡聚糖凝胶柱G15收集第二溶液中的分子量小于1000Da的组分，以制得胶原活性肽溶液。
步骤二：利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液，具体包括：
b1：将美藤果粕粉碎后过筛至40目，加入5倍体积的异丙醇进行脱脂处理，抽滤并低温烘干滤渣即得脱脂美藤果粕粉末；
b2：将脱脂美藤果粕粉末与纯净水按照1:10的料液比，在50℃下超声处理20-30min，按照5％的添加量加入酶活为3000U/g的胰蛋白酶，调节pH至9，在50℃下酶解4h后，在85℃的水浴环境中灭酶15min以制得美藤果多肽溶液；
b3：将美藤果多肽溶液冷却、过滤、离心取上清液，以制得第三溶液；
b4：将第三溶液超滤分离，收集分子量小于3000Da的组分，以制得第四溶液；
b5：利用葡聚糖凝胶柱分离收集第四溶液中分子量小于1000Da的组分，以制得美藤果多肽溶液。
步骤三：利用熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加工形成中药组合物水提液，具体包括：
c1：选择经过炮制的熟地黄和红参切成薄片，将洗净晒干的黄芪切成0.5cm小段，挑选饱满的红枣洗净去核，选择枸杞洗净晾干；
c2：将熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加入5倍体积的纯净水，加热回流浸提1h，过滤得到浸提液和中药渣；
c3：将中药渣加入3倍体积的纯净水，减压回流提取浸提液2-3次，每次提取1h，然后将所有的浸提液汇总后旋蒸浓缩至原体积的1/5，以制得中药组合物水提液；
步骤四：取200mL胶原活性肽溶液、150mL美藤果活性肽溶液、100mL中药组合物水提液、40g蜂蜜加入纯净水中形成1L混合液；
步骤五：均匀搅拌混合液并用胶体磨胶磨2-3次，在121℃的温度下湿热灭菌15min后制成复方多肽养生饮。
在本发明的实施例2中，复方多肽养生饮的制备方法为：
步骤一：利用黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液，具体包括：
a1：将鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔洗净、晒干；
a2：放入粉碎机粉碎，并过筛至40目；
a3：取等量的黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔粉末并加入5倍量纯净水，在60℃温度下磁力搅拌处理48h，重复2-3次后制得鳘鱼和黄鱼胶原蛋白溶液，冷却至常温；
a4：按照2500U/g和7500U/g分别向胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，常温下搅拌酶解6h，以形成胶原蛋白酶解液，然后将胶原蛋白酶解液在85℃的水浴环境中灭酶15min，以制得第一溶液；
a5：将第一溶液放置于4℃冰箱静置2h后过滤、离心取上清液，以制得第二溶液；
a6：利用葡聚糖凝胶柱G15收集第二溶液中的分子量小于1000Da的组分，以制得胶原活性肽溶液。
步骤二：利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液，具体包括：
b1：将美藤果粕粉碎后过筛至40目，加入5倍体积的异丙醇进行脱脂处理，抽滤并低温烘干滤渣即得脱脂美藤果粕粉末；
b2：将脱脂美藤果粕粉末与纯净水按照1:10的料液比，在50℃下超声处理20-30min，按照5％的添加量加入酶活为5000U/g的胰蛋白酶，调节pH至9，在50℃下酶解4h后，在85℃的水浴环境中灭酶15min以制得美藤果多肽溶液；
b3：将美藤果多肽溶液冷却、过滤、离心取上清液，以制得第三溶液；
b4：将第三溶液超滤分离，收集分子量小于3000Da的组分，以制得第四溶液；
b5：利用葡聚糖凝胶柱分离收集第四溶液中分子量小于1000Da的组分，以制得美藤果多肽溶液。
步骤三：利用熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加工形成中药组合物水提液，具体包括：
c1：选择经过炮制的熟地黄和红参切成薄片，将洗净晒干的黄芪切成0.5cm小段，挑选饱满的红枣洗净去核，选择枸杞洗净晾干；
c2：将熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加入5倍体积的纯净水，加热回流浸提1h，过滤得到浸提液和中药渣；
c3：将中药渣加入3倍体积的纯净水，减压回流提取浸提液2-3次，每次提取1h，然后将所有的浸提液汇总后旋蒸浓缩至原体积的1/5，以制得中药组合物水提液；
步骤四：取150mL胶原活性肽溶液、200mL美藤果活性肽溶液、150mL中药组合物水提液、30g蜂蜜加入纯净水中形成1L混合液；
步骤五：均匀搅拌混合液并用胶体磨胶磨2-3次，在121℃的温度下湿热灭菌15min后制成复方多肽养生饮。
在本发明的实施例3中，复方多肽养生饮的制备方法为：
步骤一：利用黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液，具体包括：
a1：将鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔洗净、晒干；
a2：放入粉碎机粉碎，并过筛至40目；
a3：取等量的黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔粉末并加入5倍量纯净水，在60℃温度下磁力搅拌处理48h，重复2-3次后制得鳘鱼和黄鱼胶原蛋白溶液，冷却至常温；
a4：按照3000U/g和9000U/g分别向胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，常温下搅拌酶解6h，以形成胶原蛋白酶解液，然后将胶原蛋白酶解液在85℃的水浴环境中灭酶15min，以制得第一溶液；
a5：将第一溶液放置于4℃冰箱静置2h后过滤、离心取上清液，以制得第二溶液；
a6：利用葡聚糖凝胶柱G15收集第二溶液中的分子量小于1000Da的组分，以制得胶原活性肽溶液。
步骤二：利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液，具体包括：
b1：将美藤果粕粉碎后过筛至40目，加入5倍体积的异丙醇进行脱脂处理，抽滤并低温烘干滤渣即得脱脂美藤果粕粉末；
b2：将脱脂美藤果粕粉末与纯净水按照1:10的料液比，在50℃下超声处理20-30min，按照5％的添加量加入酶活为7000U/g的胰蛋白酶，调节pH至9，在50℃下酶解4h后，在85℃的水浴环境中灭酶15min以制得美藤果多肽溶液；
b3：将美藤果多肽溶液冷却、过滤、离心取上清液，以制得第三溶液；
b4：将第三溶液超滤分离，收集分子量小于3000Da的组分，以制得第四溶液；
b5：利用葡聚糖凝胶柱分离收集第四溶液中分子量小于1000Da的组分，以制得美藤果多肽溶液。
步骤三：利用熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加工形成中药组合物水提液，具体包括：
c1：选择经过炮制的熟地黄和红参切成薄片，将洗净晒干的黄芪切成0.5cm小段，挑选饱满的红枣洗净去核，选择枸杞洗净晾干；
c2：将熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加入5倍体积的纯净水，加热回流浸提1h，过滤得到浸提液和中药渣；
c3：将中药渣加入3倍体积的纯净水，减压回流提取浸提液2-3次，每次提取1h，然后将所有的浸提液汇总后旋蒸浓缩至原体积的1/5，以制得中药组合物水提液；
步骤四：取100mL胶原活性肽溶液、250mL美藤果活性肽溶液、50mL中药组合物水提液、50g蜂蜜加入纯净水中形成1L混合液；
步骤五：均匀搅拌混合液并用胶体磨胶磨2-3次，在121℃的温度下湿热灭菌15min后制成复方多肽养生饮。
具体地，根据上述实施例1、实施例2、实施例3制得的复方多肽养生饮进行了多组实验，为了对比参照，制备了三组不同的对照例，分别为对比例1、对比例2和对比例3。其中，对比例1除了不包含美藤果活性肽溶液外，其余与实施例3相同；对比例2除了不包含中药组合物水提液外，其余与实施例3相同；对比例3除了不包含胶原活性肽溶液外，其余与实施例3相同。
实验一：感官评价，具体结果如下表1。
表1
Figure BDA0003018347280000131
综上，实施例3的制备方法得到的多肽养生饮感官评价最佳(95分)。
实验二
针对复方多肽养生饮对秀丽隐杆线虫衰老活性进行了研究。
其中，秀丽隐杆线虫的同步化和准备包括：采用漂白法进行秀丽隐杆线虫的同期化。选取大多数处于产卵期线虫的NGM培养皿，用M9缓冲液将其冲到EP管中，加入次氯酸钠和氢氧化钠配制的裂解液，获得同期化的虫卵。将虫卵转移到空白的NGM培养皿大约12h后，卵孵化成幼虫，即可得到同步化后的L1期幼虫。随即转移到含有op50的NGM培养板中，置于20℃培养箱中培养48h得到L4期线虫。
实验分组情况如表2：
表2
组别 具体试验样品
空白对照 op50(尿嘧啶缺陷型大肠杆菌)
实施例1 含有25mg/ml实施例1复方多肽养生饮的op50
实施例2 含有25mg/ml实施例2复方多肽养生饮的op50
实施例3 含有25mg/ml实施例3复方多肽养生饮的op50
对比例1 含有25mg/ml对比例1复方多肽养生饮的op50
对比例2 含有25mg/ml对比例2复方多肽养生饮的op50
对比例3 含有25mg/ml对比例3复方多肽养生饮的op50
阳性对照 含有64uM虾青素的op50
秀丽隐杆线虫寿命实验包括：准备含op50的培养板和含有op50和不同组样品的培养板，分别转移20只同步化的L4期线虫到含12.5ug/ml的5-Fu的各组NGM培养板中，每组80-120条线虫，将其放入20℃培养箱中培养。每天观察并记录存活、死亡和意外死亡的线虫数，观察记录线虫状态，直到最后一只线虫死亡。判断死亡的标准是：秀丽线虫对强光或敲击平板没有反应，高倍镜下咽部肌肉没有运动，最后用挑虫针敲击线虫的头部，若依然没有反应即可判断为死亡。同时，在实验开始后，每四天对存活的秀丽线虫的运动行为能力进行评级，行动力分为三个等级，A、B、C，判断标准如下：线虫能够自主爬行定义为A，线虫仅在挑针触碰头部后开始挪动定义为C，介于两者状态之间的定义为B。采用Kaplan-Meier进行寿命统计分析。结果(附图2和附图3)显示，实施例和对比例复方多肽养生饮显著延长了秀丽隐杆线虫的健康寿命，并提高了运动能力。实施例的秀丽隐杆线虫寿命和运动能力评级相比对比例显著提高。其中，实施例3和阳性对照虾青素标准品延长秀丽隐杆线虫寿命和提高运动能力的效果最好。
需要解释的是，图2中的横坐标为天数，纵坐标为现存的存活量，其中，空白对照在图2中的标记为M0，实施例1在图2中的标记为M1，实施例2在图2中的标记为M2，实施例3在图2中的标记为M3，对比例1在图2中的标记为M4，对比例2在图2中的标记为M5，对比例3在图2中的标记为M6，阳性对照在图2中的标记为M7。
另外，针对秀丽隐杆线虫体内ROS(活性氧，reactive oxygen species)积累量进行了研究。
秀丽线虫的ROS积累实验包括：将同期化线虫置于不含5-FU的NGM培养板上进行培养，取连续给药第4天的秀丽隐杆线虫，把线虫转移到NGM板上以去除大肠杆菌。转移三次后，把80条线虫转移到放有50μL M9缓冲溶液的96孔板中。同时，将50μL现配的100μM H2-DCF-DA溶液加入96孔板中(最终浓度为50μM)。用没有含线虫的H2-DCF-DA溶液作对照。立即将96孔板放置到酶标仪中(Bio-Tek)测定荧光强度，仪器由KC4软件控制。反应温度为25℃，发射波长为528nm，激发波长为485nm。每隔10分钟测一次，反应2小时。
结果如图4所示，实施例和对比例复方多肽养生饮显著降低了秀丽隐杆线虫体内的ROS相对含量。特别是实施例复方多肽养生饮的ROS相对积累量显著低于对比例，说明本发明实施例的复方多肽养生饮可以显著降低体内ROS水平，且美藤果肽，鳘鱼胶和黄鱼胶、中药组合物协同增效，复配显著提高了功效。
需要解释的是，图4中的纵坐标为相对活性氧水平(单位为U/mgprot)，横坐标为时间(单位为分钟)，其中，空白对照在图4中的标记为M0，实施例1在图4中的标记为M1，实施例2在图4中的标记为M2，实施例3在图4中的标记为M3，对比例1在图4中的标记为M4，对比例2在图4中的标记为M5，对比例3在图4中的标记为M6，阳性对照在图4中的标记为M7。
另外，针对秀丽隐杆线虫体内SOD(超氧化物歧化酶，Superoxide dismutase)水平进行了研究。
秀丽线虫的SOD活力实验包括：将同期化线虫置于不含5-FU的NGM培养板上进行培养，取连续给药第4天的秀丽隐杆线虫，用珠磨仪制成匀浆，10000r离心5min后取上清液，参考南京建成SOD试剂盒方法进行SOD的测定。
结果如图5所示，与空白对照组相比，实施例复方多肽养生饮显著提高了秀丽隐杆线虫体内的SOD活力。而对比例中只有对比例2显著提高了秀丽隐杆线虫体内的SOD活力，复方多肽养生饮中单一成分(对比例1、2、3)的抗氧化效果明显低于复配的实施例1、2、3。需要解释的是，图5的纵坐标为SOD活性，单位为U/mgprot。
另外，针对秀丽隐杆线虫体内CAT(过氧化氢酶，Catalase from micrococcuslysodeikticus)活力进行了研究。
秀丽隐杆线虫的CAT活力实验：将同期化线虫置于不含5-FU的NGM培养板上进行培养，取连续给药第4天的秀丽隐杆线虫，用珠磨仪制成匀浆，10000r离心5min后取上清液，参考南京建成CAT试剂盒方法进行CAT的测定。
结果如图6示，实施例和对比例复方多肽养生饮均显著提高了秀丽隐杆线虫体内的CAT活力，且实施例的CAT活力明显高于对比例，尤其是实施例1和实施例3的CAT活力最高。需要解释的是，图6的纵坐标为CAT活性，单位为U/mgprot。
综上，对比例1、对比例2和对比例3分别缺少美藤果活性肽溶液、中药组合物水提液、胶原活性肽溶液，其延缓衰老效果显著低于其它实施例组。此外，综合评价结果显示实施例3的感官评价和延缓衰老效果最佳。由此可见，本发明提供的延缓衰老的复方多肽养生饮具有显著的抗衰老和抗氧化效果，各组分之间协同发挥作用，实现良好的延缓衰老的疗效。
根据本发明实施例的复方多肽养生饮，利用黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔加工而成的胶原活性肽溶液富含黄鱼胶和鳘鱼胶，氨基酸组成丰富，小分子量组分更易吸收。特别地，黄鱼胶微量元素丰富，而鳘鱼胶胶原蛋白含量丰富，二者均可提高人体免疫功能，抗氧化及延缓皮肤衰老。而利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液富含美藤果肽，美藤果肽针对抗衰老、增加免疫力的功效显著，而且美藤果肽为植物肽，在本发明实施例中通过动物肽和植物肽的复配，增强了营养特性和功能特性，具有提升人体的抵抗力和延缓人体衰老的优点。此外，复方多肽养生饮中辅以蜂蜜及其它中药提取物，增强了其功能特性，并改善了动物肽原有的不良风味。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，本领域的普通技术人员可以理解：在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由权利要求及其等同物限定。

Claims (7)

1.一种复方多肽养生饮的制备方法，其特征在于，包括：
S1、利用鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔加工形成胶原活性肽溶液；
S2、利用美藤果粕加工形成美藤果活性肽溶液；
S3、利用熟地黄、红参、黄芪、红枣和枸杞加工形成中药组合物水提液；
S4、将所述胶原活性肽溶液、所述美藤果活性肽溶液、所述中药组合物水提液和蜂蜜加入纯净水中形成混合液；
S5、将所述混合液胶磨、灌装、灭菌后制得复方多肽养生饮。
2.根据权利要求1所述的复方多肽养生饮的制备方法，其特征在于，所述S1包括：
将鳘鱼鱼鳔和黄鱼鱼鳔洗净、晒干放入粉碎机粉碎，并过筛至40目；
取等量黄鱼鱼鳔和鳘鱼鱼鳔粉末并加入5倍量纯净水，在60℃温度下磁力搅拌处理48h，重复2-3次后制得鳘鱼和黄鱼胶原蛋白溶液，冷却至常温；
按照2000-3000U/g和6000-9000U/g分别向所述胶原蛋白溶液中添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，常温下搅拌酶解6h，以形成胶原蛋白酶解液，然后将所述胶原蛋白酶解液在85℃的水浴环境中灭酶15min，以制得第一溶液；
将所述第一溶液放置于4℃冰箱静置2h后过滤、离心取上清液，以制得第二溶液；
利用葡聚糖凝胶柱收集所述第二溶液中的分子量小于1000Da的组分，以制得所述胶原活性肽溶液。
3.根据权利要求1所述的复方多肽养生饮的制备方法，其特征在于，所述S2制备过程包括：
将美藤果粕粉碎后过筛至40目，加入5倍体积的异丙醇进行脱脂处理，抽滤并低温烘干滤渣即得脱脂美藤果粕粉末；
将所述脱脂美藤果粕粉末与纯净水按照1:10的料液比，在50℃下超声处理20-30min，按照5％的添加量加入酶活为3000-7000U/g的胰蛋白酶，调节pH至9，在50℃下酶解4h后，在85℃的水浴环境中灭酶15min以制得美藤果多肽溶液；
将所述美藤果多肽溶液冷却、过滤、离心取上清液，以制得第三溶液；
将所述第三溶液超滤分离，收集分子量小于3000Da的组分，以制得第四溶液；
利用葡聚糖凝胶柱分离收集所述第四溶液中分子量小于1000Da的组分，以制得所述美藤果多肽溶液。
4.根据权利要求1所述的复方多肽养生饮的制备方法，其特征在于，所述S3包括：
选择经过炮制的熟地黄和红参切成薄片，将洗净晒干的黄芪切成0.5cm小段，挑选饱满的红枣洗净去核，选择枸杞洗净晾干；
将所述熟地黄、所述红参、所述黄芪、所述红枣和所述枸杞加入5倍体积的纯净水，加热回流浸提1h，过滤得到浸提液和中药渣；
将中药渣加入3倍体积的纯净水，减压回流提取浸提液2-3次，将所有的浸提液汇总后旋蒸浓缩至原体积的1/5，以制得所述中药组合物水提液。
5.根据权利要求1所述的复方多肽养生饮的制备方法，其特征在于，所述S4包括：所述胶原活性肽溶液与所述混合液的体积比为0.1-0.2，所述美藤果活性肽溶液与所述混合液的体积比为0.15-0.25，所述中药组合物水提液与所述混合液的体积比为0.05-0.15，所述蜂蜜的质量与所述混合液的体积比值范围为0.01g/L-0.05g/L。
6.根据权利要求1所述的复方多肽养生饮的制备方法，其特征在于，所述S5包括：均匀搅拌所述混合液并用胶体磨胶磨2-3次，在121℃的温度下湿热灭菌15min后制成所述复方多肽养生饮。
7.一种复方多肽养生饮，其特征在于，所述复方多肽养生饮为根据权利要求1-6中任一项所述复方多肽养生饮的制备方法加工而成。
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